Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-graduação em Bioquímica, Florianópolis, 2016 / Made available in DSpace on 2016-09-20T04:53:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 340546.pdf: 2685651 bytes, checksum: b739bdab07963ec5496ca06a57141988 (MD5) Previous issue date: 2016 / O presente trabalho teve como objetivo caracterizar o efeito de extratos e frações das plantas Salacia impressifolia e Croton heterodoxus, bem como um novo triterpeno derivativo, o fern-9(11)-ene-2a,3ß-diol, na homeostase da glicose usando modelos experimentais in vivo e in vitro. Plantas e triterpenos foram avaliados quanto às atividades anti-hiperglicêmica e/ou hipoglicemiante na curva de tolerância à glicose, em modelo experimental de hiperglicemia induzida por sobrecarga de glicose (4g/kg), assim como efeito na secreção de insulina, na atividade das enzimas a-glicosidases in vivo e na propriedade anti-glicação in vitro. Além disso, foi estudado a translocação de vesículas contendo insulina no pâncreas e o mecanismo de ação do triterpeno derivativo na captação de glicose e influxo de cálcio em ilhotas pancreáticas e intestino (cólon), e também a secreção in vivo do peptídeo semelhante ao glucagon 1 e a atividade da enzima dipeptidilpeptidase IV in vitro. Para experimentos in vivo, foram utilizados ratos machos Wistar com 50-55 dias de idade. Para determinação da glicemia e concentração do peptídeo semelhante ao glucagon 1, amostras de sangue foram coletadas nos tempos zero, 15, 30, 60 e 180 min na curva de tolerância à glicose; para insulina sérica, nos tempos zero, 15, 30 e 60. A captação de glicose e influxo de cálcio foram estudados depois da incubação das ilhotas pancreáticas e cólon intestinal com triterpeno derivativo, na presença ou não de diferentes inibidores/ativadores e de 14C-glicose ou de cálcio (45Ca2+). A translocação de vesículas foi avaliada por microscopia eletrônica de transmissão. O extrato bruto, fração clorofórmio e resíduo insolúvel da Salacia impressifolia mostraram potencial atividade anti-hiperglicêmica em ratos hiperglicêmicos, reduziram a atividade da maltase e sacarase e demonstraram efeito anti-glicação. O extrato bruto da Croton heterodoxus e derivativo demonstraram potencial atividade anti-hiperglicêmica. Os resultados mostram que o triterpeno derivativo reduziu a glicose sanguínea em comparação com o triterpeno isolado; e reduziu a atividade da maltase. Além disso, o triterpeno derivativo estimulou a translocação das vesículas de insulina no pâncreas e aumentou a captação de glicose e o influxo de cálcio em ilhotas pancreáticas isoladas e cólon intestinal. Adicionalmente, o triterpeno derivativo estimulou a secreção de insulina e do peptídeo semelhante ao glucagon 1. Neste sentido, estas descobertas destacam a Salacia impressifolia e o triterpeno derivativo como um potencial candidato para utilização em terapias para a diabetes melito.<br> / Abstract: The aim of this study was to characterize the effect of extracts and fractions of Salacia impressifolia and Croton heterodoxus, as well as the triterpene derivative, in glucose homeostasis using in vivo and in vitro experimental models. The anti-hyperglycemic activity in the glucose tolerance curve, the inhibition of the enzymes a-glucosidases and the anti-glycation property were investigated. In addition, it was also studied the mechanism of action of triterpene derivative in glucose and calcium uptake in pancreatic islet and intestinal colon, and also the in vivo glucagon-like peptide-1 secretion and in vitro dipeptidyl peptidase-IV activity. Vesicles translocation was available by transmission electronic microscopy. For the in vivo experiments, Wistar male rats at 50-55 day-old were used. To glycaemia and serum glucagon-like peptide-1 determination blood samples were collected at zero, 15, 30, 60 and 180 min at the glucose tolerance curve; to insulin, 0, 15, 30 and 60 min. The activity of intestinal disaccharidases was also evaluated in vivo. The involvement of dipeptidyl peptidase-IV and the anti-glycation property were evaluated in vitro. The glucose and calcium uptake was studied after incubation of the pancreatic islet and intestinal colon with triterpene and of 14C-glucose or calcium (45Ca2+) in the presence or not of different inhibitors. The pancreatic islets were isolated and incubated with 45Ca2+ and triterpene in the presence or absence of various inhibitors or activators. The crude extracts, chloroform and insoluble residue of Salacia impressifolia showed potential anti-hyperglycemic activity in hyperglycemic rats, reduced the activity of maltase and sucrose and prevented glycation. The crude extracts of Croton heterodoxus and triterpene derivative demonstrated potential anti-hyperglycemic activity. The results show that the triterpene derivative powered the serum glucose lowering compared with triterpene isolated; and reduced the activity of maltase. Also, triterpene stimulated insulin vesicles translocation in pancreas; and glucose and calcium uptake in isolated pancreatic islet and colon. Additionally, triterpene derivative stimulated glucagon-like peptide-1 and insulin secretion in vivo. In this sense, these findings highlight Salacia impressifolia and triterpene derivative as a potential candidate for use in therapies for diabetes.

Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-08-25T15:48:47Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Pablo Elleres.pdf: 5489693 bytes, checksum: b9a04e1146c232be81cf39a48ae1634d (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-09-21T15:54:39Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Pablo Elleres.pdf: 5489693 bytes, checksum: b9a04e1146c232be81cf39a48ae1634d (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-21T15:54:39Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Pablo Elleres.pdf: 5489693 bytes, checksum: b9a04e1146c232be81cf39a48ae1634d (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2016-05-30 / FAPEAM - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas / Maytenus guianensis Klotzsch ex Reissek is a Brazilian Amazonian plant widely used in folk medicine against diseases such as malaria, leishmaniasis, and cancer. It is believed that this pharmacological action may be related to terpenoids present in species belonging to the Maytenus genus. Due to the increase in the number of microorganisms resistant to antimicrobial substances already known, various herbal extracts have been tested in order to find new compounds with recognized antimicrobial activity. Thus, this research aimed to carry out a phytochemical study and evaluate the antimicrobial potential effect of isolated compounds from the bark of M. guianensis on bacteria and fungi. The barks were collected in the Adolpho Ducke Forest Reserve, in Manaus, the state capital of Amazonas, Brazil. Subsequently, they were properly dried and ground, and subjected to extraction in Soxhlet apparatus with different solvents according to the degree of polarity. The isolation and purification of the chemical constituents of the extract from the barks were performed through column chromatography, using silica gel as fixed phase. The development of the chromatographed substances in Thin Layer Chromatography was made by exposing the cromatoplates to ultraviolet light (250 nm) and by pulverization using a universal indicator, followed by heating in an oven at 100 °C. The structural identification of the isolated chemical constituents of M. guianensis was performed using spectroscopic methods of nuclear magnetic resonance Hydrogen-1 (1H-NMR) and Carbon-13 (13C-NMR), one- and two-dimensional, mass spectroscopy, and spectroscopy in the infrared region. To evaluate the antimicrobial potential effect on ATCC bacteria, pathogenic bacteria, and fungi, it was applied the agar well diffusion technique using specific protocols for the experiments. The design was completely randomized with three replicates per treatment. The test evaluation consisted of measuring the growth of bacteria and fungi colonies, 24 hours after the beginning of the experiment. The results obtained from this phytochemical study, until now, allowed the isolation of four substances: two friedelin and friedelanol triterpenes (triterpene 3-oxo-29-hydroxyfriedelane and triterpene 3-oxo-16β-hydroxyfriedelane) and quinonamethide triterpenes (tingenine B and tingenone). Phytochemicals results of this work in conjunction with the data described in literature clearly show that M. guianensis is a rich source of triterpenes classes of fridelanos and quinonamethide, they are restricted to Celastraceae family. In addition, extracts and compounds isolated from the bark of M. guianensis presented inhibitory effect against at least four of the five tested bacteria and fungi ATCC, noting satisfactory inhibition halos being novel antimicrobial testing. However, negative results were found for pathogenic bacteria. Thus, M. guianensis plant is a promising for the development of new antimicrobial herbal, and further studies must be made on the chemical composition and understanding of activity on virulence factors of multiresistant bacteria. The results indicate the antimicrobial potential of this plant, which may be promising for drug development studies. / Maytenus guianensis Klotzsch ex Reissek é uma planta da Amazônia Brasileira muito utilizada na medicina popular contra enfermidades como malária, leishmaniose e câncer. Acredita-se que essa ação farmacológica pode estar relacionada à presença de terpenoides presentes no gênero Maytenus. Com o aumento dos micro-organismos resistentes às substâncias antimicrobianas já conhecidas, vários extratos de plantas medicinais estão sendo testados com a finalidade de procurar novos compostos com atividade antimicrobiana. Assim, este trabalho visou realizar um estudo fitoquímico e avaliar o potencial antimicrobiano dos extratos e das substâncias isoladas das cascas de M. guianensis sobre bactérias e fungos. As cascas foram coletadas na Reserva Florestal Adolpho Ducke em Manaus-AM, devidamente secas e trituradas, sendo submetidas à extração em aparelho de Soxhlet com diferentes solventes de acordo com o aumento do grau de polaridade. O isolamento e purificação dos constituintes químicos do extrato das cascas foram realizados por meio de cromatografia em coluna utilizando-se como fase fixa sílica gel. As revelações das substâncias cromatografadas de camada delgada se deram por exposição das cromatoplacas à luz ultravioleta (250 nm) e por pulverização com revelador universal seguido de aquecimento em estufa a 100ºC. A identificação estrutural dos constituintes químicos isolados das cascas de M. guianensis foi realizada por meio de métodos espectroscópicos de Ressonância Magnética Nuclear de Hidrogênio-1 (RMN-1H) e Carbono-13 (RMN-13C), uni e bidimensional, espectroscopia de massa e espectroscopia na região do infravermelho. Para avaliar o potencial antimicrobiano sobre as bactérias ATCC e patogênicas e fungos, utilizou-se a técnica de difusão em ágar utilizando protocolos específicos para os experimentos. O delineamento foi o inteiramente casualizado, com três repetições por tratamento. A avaliação do teste consistiu em medir o crescimento das colônias das bactérias e fungos, após 24 horas do início do experimento. Os resultados obtidos do estudo fitoquímico até o presente momento permitiram isolar quatro substâncias, sendo dois triterpenos friedelina e friedelanol (triterpeno 29-hidroxifriedelan-3-ona, triterpeno 16β-hidroxifrielan-3-ona) e triterpenos quinonametídeos (tingenina B e tingenona). Os resultados fitoquímicos deste trabalho em conjunto com os dados descritos na literatura, mostram nitidamente que M. guianensis é uma rica fonte de triterpenos das classes dos fridelanos e quinonametídeos, que estes são restritos a família Celastraceae. Além disso, os extratos e as substâncias isoladas das cascas de M. guianensis apresentaram efeito inibitório contra pelo menos quatro das cinco bactérias ATCC testadas e fungos, notando-se halos de inibição satisfatórios sendo inéditos os testes antimicrobianos demonstrando que M. guianensis é uma promissora planta para o desenvolvimento de um novo fitoterápico antimicrobiano, e mais estudos devem ser realizados quanto à composição química e entendimento da atividade sobre fatores de virulência das bactérias multirresistentes. Porém, resultados negativos foram encontrados para bactérias patogênicas. Os resultados sinalizam o potencial antimicrobiano dessa planta, podendo esta ser promissora para os estudos de desenvolvimento de novos fármacos.

Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-11-22T14:32:54Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-11-22T14:33:09Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-11-22T14:33:09Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) Previous issue date: 2017-04-17 / Five Amazonian Byrsonima species, B. crispa, B. duckeana, B. garcibarrigae, B. incarnata and B. japurensis, were selected to investigate the anti-inflammatory and antimicrobial properties of its extracts and semi-synthetic substances. The ability of aqueous extracts from the stem bark to act synergistically through inhibition of cyclooxygenase-2 (COX-2), lipoxygenase (LOX), inducible nitric oxide synthase (iNOS) and / or antioxidant activity was investigated by in vitro, in silico and in vivo models. In turn, the hexane extracts were rich in α and β-amyrin triterpenes, which were obtained in high quantity and high purity by a simple and cheap method developed in this work. These triterpenes were used in the semisynthesis of 24 derivatives, of which 18 were evaluated for their antimicrobial properties. The aqueous extracts contained phenolic compounds and flavonoids, resulting in a high antioxidant capacity in the DPPH•, ABTS●+ and superoxide tests and in the bacterial lipopolysaccharide activated macrophage assay, i.e. an in vitro model of inflammatory response. They also showed good enzymatic inhibition capacity and their phenolic components showed a good affinity for COX-2, LOX and iNOS in the in-silico evaluation, suggesting an interesting synergistic effect. B. japurensis, only species used in folk medicine, showed more potent anti-inflammatory and analgesic activities in in vivo models, possibly by the specific combination of some phenolic compounds that are well absorbed by the oral route. Of the 18 derivatives developed with the triterpenes α and β-amirin, five showed activity against Trypanosoma cruzi, T. brucei, Leishmania infantum, Candida albicans, Staphylococcus aureus and Escherichia coli, with different degrees of potency and specificity. Possibly, they act by interaction with lipid components of the cell membrane and also by inhibition of 14α-demethylase (CYP51), for which all the compounds presented different degrees of affinity in the in-silico evaluation. The method developed to obtain the inclusion complexes with sulfobutyl ether-β-cyclodextrin can be further optimized and used in modulating the selectivity and toxicity of these active substances, which is a strategy already reported in the literature for different drugs. In conclusion, this study was able to demonstrate that the five species of Byrsonima may be promising sources of new medicines. In particular, B. japurensis would serve as a promising model for a new multitarget medicine to treat inflammation. The hexane extracts provided interesting chemical skeletons that can be converted into very promising substances for the antimicrobial arsenal, in a simple, inexpensive and highly reproducible way. / Cinco do gênero Byrsonima da Amazônia Brasileira, B. crispa, B. duckeana, B. garcibarrigae, B. incarnata e B. japurensis foram selecionadas para uma investigação das propriedades anti-inflamatórias e antimicrobianas de seus extratos e substâncias semissintéticas. A capacidade de dos extratos aquosos da casca do caule inibirem sinergicamente a ciclo-oxigenase-2 (COX-2), a lipoxigenase (LOX), e a sintase do óxido nítrico indutível (iNOS) e/ou apresentarem atividade antioxidante foram avaliadas em diferentes modelos químicos, in silico, in vitro e in vivo. Por sua vez, os extratos hexânicos mostraram-se ricos nos triterpenos α e β-amirinas, os quais foram obtidos em grande quantidade e alto grau de pureza por um método simples e barato desenvolvido neste trabalho, e foram usados na semissíntese de 24 derivados, dos quais 18 foram avaliados quanto as suas propriedades antimicrobianas. Os extratos aquosos mostraram expressiva quantidade de compostos fenólicos e flavonoides que explicam sua ampla capacidade antioxidante demonstrada nos testes do DPPH•, ABTS●+ e Superóxido e no ensaio do macrófago ativado por lipopolissacarídeo bacteriano, o qual é também considerado um modelo de atividade anti-inflamatória in vitro. Eles também apresentaram boa capacidade de inibição enzimática e seus componentes fenólicos apresentaram boa afinidade pela COX-2, LOX e iNOS na avaliação in silico, sugerindo um efeito sinérgico interessante para novos anti-inflamatórios. B. japurensis, única planta medicinal dentre as estudadas, foi a espécie mais ativa in vivo, possivelmente pela combinação específica de compostos fenólicos normalmente bem absorvidos pela via oral. Dos 18 derivados desenvolvidos com os triterpenos α e β-amirina e testados quanto a atividade antimicrobiana, cinco derivados apresentaram atividade contra Trypanosoma cruzi, T. brucei, Leishmania infantum, Candida albicans, Staphylococcus aureus e Escherichia coli, com diferentes graus de potência e especificidade. Possivelmente, eles atuam por interação com componentes lipídicos da membrana plasmática e também por inibição da 14α-demetilase (CYP51), para o qual a todos os compostos apresentaram variados graus de afinidade na avaliação in silico. O método desenvolvido para a obtenção dos complexos de inclusão entre sulfobutiléter-β-ciclodextrina e os derivados mais lipofílicos, pode ainda ser otimizado e utilizado na modulação da seletividade e toxicidade dessas substâncias ativas, estratégia já relatada na literatura para diferentes fármacos. Sendo assim, este estudo conseguiu demonstrar que as cinco espécies de Byrsonima analisadas podem ser promissoras fontes de medicamentos. Em especial, a espécie B. japurensis serviria de um promissor modelo de novo polifármaco multialvo para o tratamento da inflamação. Os extratos hexânicos forneceram interessantes esqueletos químicos que podem ser convertidos em substâncias bastante promissoras para o arsenal antimicrobiano, de modo simples, barato e altamente reprodutível.

El interés en triterpenos bioactivos condujo al diseño de una serie de cuarenta y tres derivados de lupeol (1) y calenduladiol (5), aislados a partir de la especie vegetal Chuquiraga erinaceae. El triterpeno natural 5 presentó un segundo grupo hidroxilo en C-16, además del hidroxilo en C-3 y del grupo isopropenilo en el anillo E, característico de este tipo de alcoholes triterpénicos, ofreciendo una estructura novedosa para ser modificada sintéticamente. En primer lugar, se llevó a cabo la optimización de la técnica de extracción y purificación reportada anteriormente para el aislamiento de 5. La sulfatación de los alcoholes 9-12, obtenidos por modificación química del grupo isopropenilo de 5, dio lugar a los derivados sulfatados 14-17. En cambio, el análogo 18 fue preparado por epoxidación del grupo isopropenilo de calenduladiol disulfatado (8). Los triterpenos 5, 10 y 11 fueron tratados con anhídrido acético rindiendo los ésteres 19-23; el tratamiento de 5 con los correspondientes cloruros de ácido dio lugar a los ésteres 24-27. Los derivados carbonílicos 10, 30-39 fueron obtenidos por oxidación alílica y/o con el reactivo de Jones de 1 y 5. Las cetonas 30 y 33, así como el aldehído 36 fueron tratados con cloruro de hidroxilamina a fin de obtener las oximas correspondientes (40-44). Por otro lado, teniendo en cuenta que la inversión de la configuración del C-3 incrementa la actividad antituberculosa y citotóxica en los alcoholes 3a-triterpénicos, se llevó a cabo la síntesis de estos alcoholes desde sus epímeros 3B más disponibles. Se estudiaron distintos sistemas catalíticos para la reducción quimio- y estereoselectiva de la cetona 30. El sistema bimetálico PtSn0,8/SiO2 resultó ser quimioselectivo dando lugar a 45 con una estereoselectividad interesante. Finalmente, la reducción de la oxima 40 rindió una mezcla de aminas isómeras (49 y 50) la cual pudo ser separada por cromatografía. Todos los derivados obtenidos fueron evaluados frente a las enzimas acetil- y butirilcolinesterasa (ACE y BuCE). El compuesto 14, con dos grupos sulfato y un grupo isopropilo unido a C-19, mostró la inhibición más potente frente a ACE. El estudio cinético enzimático y el modelado molecular revelaron que 14 se une reversiblemente al complejo enzima-sustrato, produciendo un complejo inactivo. Por otro lado, los derivados 35 y 36 mostraron la mayor actividad y selectividad frente a BuCE, sugiriendo que la presencia de un grupo carbonilo en C-16 es fundamental para esta actividad. El estudio cinético enzimático y el modelado molecular revelaron que estos inhibidores presentan afinidad por el sitio activo de la enzima y, por lo tanto, compiten con el sustrato por el acceso al mismo. Por último, se determinó la actividad citotóxica frente a las líneas celulares de cáncer de próstata (PC-3 y LNCaP) de derivados de 1 y 5, resultando el lupeol sulfatado (13), el inhibidor más potente. / The interest in bioactive triterpenes prompted to synthesize a set of forty-three derivatives from lupeol (1) and calenduladiol (5), isolated from Chuquiraga erinaceae. Natural triterpene 5 presented a second hydroxyl group at C-16, in addition to the hydroxyl at C-3 and isopropenyl moiety in the ring E, characteristic of this type of triterpene alcohols, providing a novel structure to be modified synthetically. Optimization of the extraction and purification technique previously reported for the isolation of 5. Sulfation of alcohols 9-12, obtained by chemical modification of the isopropenyl moiety of 5, afforded sulfated derivatives 14-17. However, derivative 18 was prepared by epoxidation of the isopropenyl moiety of disulfate calenduladiol (8). Triterpenes 5, 10 and 11 were treated with acetic anhydride yielding the esters 19-23; the treatment of 5 with the corresponding acyl chlorides afforded the esters 24-27. Carbonilyc derivatives 10, 30-39 were obtained by allylic oxidation and/or with Jones reagent of 1 and 5. Ketones 30 and 33, and aldehyde 36 were treated with hydroxylamine chloride in order to obtain the corresponding oximes (40-44). Taking into account that conversion of the stereochemistry of C-3 increases the antitubercular and cytotoxic activity in the 3a-triterpenic alcohols, the synthesis of these alcohols from the most available epimers 3B was carried out. In this work different catalytic systems have been studied for the chemo- and stereoselective reduction of ketone 30. The PtSn0,8/SiO2 bimetallic system proved to be chemoselective leading 45 with an interesting stereoselectivity. Finally, the reduction of the oxime 40 yielded a mixture of isomeric amines (49 and 50), which could be separated by chromatography. All the derivatives obtained were tested for their inhibitory activity against acetylcholinesterase (AChE) and butyrylcholinesterase (BChE). Compound 14, with two sulfate groups and an isopropyl group attached to C-19, showed the most potent inhibition for AChE. Enzyme kinetic study and molecular modeling revealed that 14 was able to bind to the complex enzyme-substrate producing an inactive complex. On the other hand, derivatives 35 and 36, showed the highest activity and selectivity against BChE, suggesting that the presence of a carbonyl group at C-16 is essential for this activity. Enzyme kinetic study and molecular modelling revealed that these inhibitors have an affinity for the active site of the enzyme and, therefore, compete with the substrate for access to it. Finally, the cytotoxic activity was determined against cancer cell lines prostate (PC-3 and LNCaP) of derivatives 1 and 5, being sulfated lupeol (13), the most potent inhibitor.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Diabetes and dyslipidemia prevalence has been increasing globally configured as an epidemic resultant mainly from overweight, physical inactivity and genetic susceptibility. There are reports of many natural products that have hypoglycemic and hypolipidemic activity. Among them we mention the terpenes, which are the largest group of secondary products of plants metabolism. The terpene studied in this work was betulinic acid (BA), a pentacyclic triterpene lupano type that presents a variety of biological and pharmacological activities. The objective of this study was to evaluate BA hypoglycemic and hypolipidemic effects in experimental protocols of dyslipidemia and diabetes induced pharmacologically as well as studying their toxic potential in vivo. The BA-treated groups received doses of 5 (BA5), 10 (BA10) and 20 (BA20) mg/kg. The evaluation of the BA hypoglycemic action was carried out through diabetes induced by alloxan protocol and oral glucose tolerance test (OGTT). To check their activity on lipid metabolism, it was carried out dyslipidemia protocol induced by Triton WR 1339 intraperitoneal injection. In addition, it was performed the protocol modified diet-induced hypercholesterolemia. Toxicity was assessed by the study repeated doses for 28 days treating daily with BA doses via gavage. After the protocol of alloxan-induced diabetes, there was a blood glucose reduction in groups BA10 and BA20. Triglycerides and total cholesterol decreased significantly at all doses studied. BA10 treatment, also reduced the blood glucose peak caused by glucose overload (2g/Kg) in the OGTT. After 24 hours of dyslipidemia induced by triton, there was a significant triglycerides reduction in groups treated with BA at doses of 10 and 20mg/Kg. After 48h, triglycerides levels remained reduced in group treated with BA10. In hypercholesterolemia induced by diet modified protocol BA at doses of 10 and 20mg/kg, promoted a significant decrease in total cholesterol levels. There were no significant changes in the parameters evaluated after repeated dose oral toxicity protocol. Results demonstrate the therapeutic potential and safety of betulinic acid in the treatment of dyslipidemia and diabetes, although others pre-clinical and clinical studies are necessary for its use by population. / A prevalÃncia da diabetes e das dislipidemias vem crescendo mundialmente configurando-se como uma epidemia resultante,principalmente, do excesso de peso, da inatividade fÃsica e da suscetibilidade genÃtica. Existem relatos de muitos produtos de origem natural que possuem atividade hipoglicÃmica e hipolipidÃmica. Dentre eles, podemos citar os terpenos, que constituem o maior grupo de produtos do metabolismo secundÃrio de plantas. O terpeno estudado no presente trabalho à o Ãcido betulÃnico (AB), um triterpeno pentacÃclico do tipo lupano que apresenta uma variedade de atividades biolÃgicas e farmacolÃgicas. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar o efeito hipolipidÃmico e hipoglicÃmico do AB em protocolos experimentais de dislipidemias e diabetes induzidas farmacologicamente bem como estudar seu potencial tÃxico in vivo. O grupos tratados com AB receberam as doses de 5(AB5), 10(AB10) e 20(AB20)mg/Kg. A avaliaÃÃo da aÃÃo do hipoglicÃmica do AB foi atravÃs do protocolo de diabetes induzida por aloxano e o teste oral de tolerÃncia a glicose (TOTG). Para verificar sua atividade sobre o metabolismo lipÃdico, foi realizado o protocolo de induÃÃo da dislipidemia atravÃs da injeÃÃo intraperitoneal de triton WR 1339. AlÃm disso, foi realizado o protocolo de hipercolesterolemia induzida por dieta modificada. A toxicidade foi avaliada pela realizaÃÃo do estudo toxicolÃgico de doses repetidas durante 28 dias mediante administraÃÃo Ãnica diÃria por via oral de AB. Depois do protocolo de diabetes induzida por aloxano, observou-se uma reduÃÃo da glicemia nos animais dos grupos AB10 e AB20. Os triglicerÃdeos e o colesterol total reduziram significativamente em todas as doses estudas. O tratamento com AB10, reduziu ainda o pico glicÃmico causado pela sobrecarga de glicose (2g/Kg) no TOTG. ApÃs 24h da induÃÃo com triton, verificou-se a reduÃÃo significativa dos triglicerÃdeos nos grupos tratados com AB nas doses de 10 e 20mg/Kg. Depois de 48h, os animais do grupo AB10 manteve tal reduÃÃo. No protocolo de hipercolesterolemia induzida por dieta modificada o AB nas doses de 10 e 20mg/Kg, promoveu uma diminuiÃÃo significativa do colesterol total plasmÃtico. NÃo foram encontradas alteraÃÃes significativa nos parÃmetros avaliados apÃs protocolo de toxicidade oral em doses repetidas. Os resultados obtidos demonstram o potencial terapÃutico e a seguranÃa do Ãcido betulÃnico no tratamento das dislipidemias e diabetes, apesar de serem necessÃrios novos estudos prÃ-clÃnicos e clÃnicos para sua utilizaÃÃo no mercado.

nÃo hà / PrÃpolis, palavra de origem grega e significa a defesa da cidade. Usado na colmÃia para fechar frestas, garantindo a proteÃÃo contra microorganismos. Diversas propriedades foram relatadas terapeuticamente como: bactericida, fungicida, antivÃrus, antiinflamatÃria. As amostras de prÃpolis brasileiras podem ser classificados em 13 grupos, baseados nas caracterÃsticas fÃsico-quÃmicas e classificadas da seguinte maneira: cinco no Sul do Brasil (grupo 3), um no Sudeste (grupo 12) e seis no Nordeste (grupo 7). O trabalho teve como objetivo a investigaÃÃo fitoquÃmica de duas amostras de prÃpolis: uma de Alto Santo - Ceara e outra de Minas Gerais â Brasil, alÃm da determinaÃÃo da atividade biolÃgica e antioxidante. Da amostra de prÃpolis do CearÃ, foram identificados: triterpenos (lupeol, Ãcido canÃrico, lupenona e germanicona); flavonoides (quercetina, canferol, acacetina, 3-(4-metoxifenila) acrilato de 2(E)-2-metoxifenila-5-(5-hidroxi-3,7-dimetoxi-4-oxo-4H-cromen-2-ila). Da prÃpolis de Minas Gerais popularmente chamada de prÃpolis verde, obteve-se: Ãcido p-cumaric, Ãcido (E)-3-(3,4-dihidroxifenila) propenÃico e uma mistura dos Ãcidos: Ãcido (E)-3-(4-hidroxifenila) propenÃico, Ãcido 3-phenilpropanÃico e Ãcido 3-(4-hidroxifenila) propanÃico. Do lupeol obteve-se uma sÃrie de derivados, entre eles: o produto oxidado e os Ãsteres no carbono-3. Os compostos e os derivatives puros do lupeol foram identificados por mÃtodos espectroscÃpicos tais como IR, o RMN 1H e 13C CG/EM. Extrato de prÃpolis e compostos puros isolados foram avaliados para a atividade antioxidante usando o mÃtodo de captura de radical DPPH (2,2-difenila-1-picril-hidrazila) e os resultados mostraram a atividade muito boa para extratos e para os flavonÃides, os triterpenos mostraram uma atividade pequena. Do Ãleo essencial da prÃpolis de Minas Gerais, identificaram-se os constituintes classificados como monoterpenos oxigenados (0,3%), hidrocarbonetos sesquiterpenos (65,18%), sesquiterpenos oxigenados (23,64%), e derivados do Ãcido cinÃmico (6,17%). Foram identificados 24 constituintes, representando 97,7% do Ãleo, e os compostos principais definidos como: E-nelolidol (17,14%), E-cariofileno (13,38%) e selin-3,7(11)-dieno (10,35%) foram os mais abundantes. O Ãleo foi caracterizado com alta percentagem de hidrocarbonetos sesquiterpenos e sesquiterpenos oxigenados. A partir da prÃpolis de Minas Gerais, material de partida para a produÃÃo de pà liofilizado, produziu-se prÃpolis solÃvel em Ãgua, obtida de uma mistura com soluÃÃo de L-lisina e PVP. O liofilizado terà destino para testes biolÃgicos. / Propolis, word has the Greek origin, and means city defense. Used in the beehive to forbid openings, guaranteeing protection against microorganisms. Several therapeutically properties were reported such as: bactericidal, fungicidal, antivirus, anti-inflammatory. Brazilian propolis can be classified in 13 groups, based on the physical-chemistry characteristics classified as: five in the South of Brazil (group 3), one in Southeast (group 12) and six in the Northeast (group 7). The present work has a goal the phytochemical investigation of two samples of propolis: one from Alto Santo - Cearà and other from Minas Gerais - Brasil and determination of biological activity. From a sample of propolis of CearÃ, were identified: triterpenes (lupeol, acid canaric, lupenone and germanicone); flavonoids (kercetin, kanferol, acacetine, 3-(4-methoxyphenyl) acrilate of 2-(E)-2-methoxyphenil-5-(5-hydroxy-3,7-dimethoxy-4-oxo-4H-cromene-2-il). For the sample propolis of Minas Gerais popularly called âgreen propolisâ were identified p-cumaric acid, (E)-3-(3,4-dihidroxyphenyl) propenoic acid and a mixture of acid ones: (E)-3-(4-hydroxyphenyl) propenoic acid, 3-phenylpropanoic acid and 3-(4-hydroxiphenil) propanoic acid. From lupeol a serie of derivative were obtained including oxidation and esters at carbon-3. Pure compounds and lupeol derivatives were identified by spectroscopic methods such as IR, 1H and 13C NMR and MS. Propolis extracts and pure compounds were evaluated for scavenger activity using DPPH (2,2-diphenyl,1-picril-hidrazil) bioassay and results showed very good activity for extracts and for flavonoids where as triterpens showed a week activity. The essential oil of the propolis from Minas Gerais obtained by hydrodestillation process was analyzed by CG-MS techniques and composition was defined as: oxygenated monoterpenes (0,30%), hydrocarbons sesquiterpenes (65,18%), sesquiterpenes oxigenated (23,64%), and derivatives of the cinamic acid (6,17%). Twenty constituent were identified representing 97.7% and major compound defined as: E-nelolidol (17,14%), E-cariofilene (13,38%) and selin-3,7(11)-dien (10,35%). The oil was characterized with high percentage of hydrocarbons sesquiterpenes and oxygenated sesquiterpenes. The green propolis of Minas Gerais was used as material for the lyophilized drug production. From the propolis water soluble together with L-lysine and a polymer PVP was obtained a power and it is using for biological tests as anticancer agent.

Submitted by Ana Hilda Fonseca (anahilda@ufba.br) on 2013-04-04T12:51:40Z No. of bitstreams: 1 Tese - Caline Gomes Ferraz.pdf: 17842899 bytes, checksum: 461e8d2ed5b07ba0d75417b8abbfe63b (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Hilda Fonseca(anahilda@ufba.br) on 2013-04-29T14:58:51Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese - Caline Gomes Ferraz.pdf: 17842899 bytes, checksum: 461e8d2ed5b07ba0d75417b8abbfe63b (MD5) / Made available in DSpace on 2013-04-29T14:58:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese - Caline Gomes Ferraz.pdf: 17842899 bytes, checksum: 461e8d2ed5b07ba0d75417b8abbfe63b (MD5) Previous issue date: 2011 / CAPES / O presente trabalho relata o estudo fitoquímico do caule da espécie Clusia burlemarxii (Clusiaceae), coletada nas proximidades da Cachoeira do Fraga no município de Rio de Contas e Mucugê na Chapada Diamantina-BA, Do estudo deste extrato permitiu o isolamento, identificação e determinação de seis metabólitos inéditos denominados: isopropolona A, burlemarxionas A, B, C, D e E e dezesseis substâncias conhecidas: as benzofenonas polipreniladas, propolona A, sampsoniona B, sampsoniona N, obdeltifoliona C; os triterpenos, friedelina, friedelinol, ácido betulínico, betulinaldeído, lupeol, eufol e butirospermol; os esteróides, sitosterol, estigmasterol e sitostenona; uma bifenila a 2,2-dimetil-5-hidroxi-7-fenilcromeno e uma xantona a brasilixantona B. A determinação estrutural dos metabólitos secundários isolados foi realizada através de técnicas espectrométricas como: Infravermelho, EM e Ressonância Magnética Nuclear de Hidrogênio-1 e Carbono-13, DEPT, HMBC, HMQC juntamente com comparação dos dados descritos na literatura. As substâncias propolona A, sampsoniona N e burlemarxiona A, tiveram sua citotoxicidade contra Células de Glioblastoma Humano GL-15 avaliada. / Salvador

SOUSA, Leôncio Mesquita de. Estudo Químico e Avaliação Biológica de Phanera glabra (Jacq.) Vaz & Bauhinia ungulata L. (FABACEAE). 2016. 263 f. Tese (Doutorado em Química)-Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2016. / Submitted by Aline Mendes (alinemendes.ufc@gmail.com) on 2017-01-24T21:20:20Z No. of bitstreams: 1 2016_tese_lmsousa.pdf: 24821219 bytes, checksum: e022dc323cde53950dcc209fb460ecf4 (MD5) / Approved for entry into archive by Jairo Viana (jairo@ufc.br) on 2017-01-26T20:20:52Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_tese_lmsousa.pdf: 24821219 bytes, checksum: e022dc323cde53950dcc209fb460ecf4 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-26T20:20:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_tese_lmsousa.pdf: 24821219 bytes, checksum: e022dc323cde53950dcc209fb460ecf4 (MD5) Previous issue date: 2016 / This paper describes the chemical and biological study of species Phanera glabra (Jacq.) Vaz and Bauhinia ungulata L. The chemical composition of essential oil from leaves of B. ungulata, obtained by hydrodistillation, was analysed by gas chromatography-mass spectroscopy (GC-MS) and gas chromatography-flame ionization detector. Twenty-two constituents were identified representing 85.90% of the total composition: Caryophyllene oxide (22.99%), (E)-caryophyllene (14.53%) and α-copaene (7.17%) were the major constituents. Larval bioassay against Aedes aegypti of B. ungulata essential oil showed LC50 value of 75.12 ± 2.82 g/mL. The cytotoxic effect against four human tumor cell lines HL-60, MCF-7, NCI-H292 and HEP-2 was evaluated, showing IC50 values of 10.57; 22.25; 23.11 and 26.56 g/ mL, respectively. The study of the non-volatile constituents was initiated with the preparation of the hexane and ethanol extracts from stems of P. glabra. The chromatographic fractionation of these extracts allowed the isolation of lupenone (PG–1), the mixture of sitosterol and stigmasterol (PG–2), 4'-hydroxy-7-methoxyflavone (PG–3), 3',7-dimethoxy-4'-hydroxyflavone (PG–4) and 5,5'-dihydroxy-2',3,7-trimethoxyflavone (PG–5). Taraxerol (BU–1), betulinic acid (BU–2), taraxerone (BU–3), glutinol (BU–4), the mixture of sitosterol and stigmasterol (BU–5), pacharin (BU–6), naringenin (BU–7) and eriodictyol (BU–8), liquiritigenin (BU–9), guibourtinidol (BU–10) and fisetinidol (BU–11) were obtained from the extracts from stems of B. ungulata; while 3,5-dimethoxy-4-methyl-2’-hydroxybibenzyl (BU–12) and 3,5-dimethoxy-2’-hydroxybibenzyl (BU–13) were isolated from the ethanol extract of the roots. The structures of the compounds were elucidated by spectroscopic methods as IR, MS, 1D and 2D NMR, and by comparison with previously reported data in the literature. It's worth noting that BU–12 is unprecedented in the literature and the 13C NMR data of BU–13 are reported for the first time in this work. The cytotoxicity of BU–12 has been evaluated against four human cancer cell lines, showing IC50 values of 4.3 and 6.5 g/mL against pro-myelocytic leukemia (HL-60) and cervical adenocarcinoma (HEP-2) cell lines, respectively. / O presente trabalho relata o estudo químico e biológico das espécies Phanera glabra (Jacq.) Vaz e Bauhinia ungulata L. A composição química do óleo essencial das folhas de B. ungulata, obtido por hidrodestilação, foi determinada e quantificada por cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas (CG-EM) e detector de ionização por chama (CG-DIC), sendo, portanto, identificado 85,90% dos seus constituintes: Óxido de cariofileno (22,99%), (E)-cariofileno (14,53%) e α-copaeno (7,17%) foram os constituintes majoritários. O óleo essencial teve sua atividade larvicida avaliada sobre Aedes aegypti, sendo obtido um valor de CL50 igual a 75,12 μg/mL. A atividade citotóxica do OEBU foi realizada sobre quatro linhagens tumorais humanas HL-60, MCF-7, NCI-H292 e HEP-2, através do método do MTT. O estudo dos componentes não voláteis foi iniciado com a preparação dos extratos hexânico e etanólico dos caules de P. glabra. O fracionamento cromatográfico destes extratos permitiu o isolamento de lupenona (PG–1), mistura de sitosterol e estigmasterol (PG–2), 4’-hidroxi-7-metoxiflavana (PG–3), 3’,7-dimetoxi-4’-hidroxiflavana (PG–4) e 5,5'-dihidroxi-2',3,7-trimetoxiflavona (PG–5). Taraxerol (BU–1), ácido betulínico (BU–2), taraxerona (BU–3), glutinol (BU–4), mistura de sitosterol e estigmasterol (BU–5), pacharina (BU–6), naringenina (BU–7), eriodictiol (BU–8), liquiritigenina (BU–9), guibourtinidol (BU–10) e fisetinidol (BU–11) foram isolados a partir dos extratos dos caules de B. ungulata; enquanto do extrato etanólico das raízes de B. ungulata foram isolados 3,5-dimetoxi-4-metil-2’-hidroxibibenzil (BU–12), substância inédita na literatura, e 3,5-dimetoxi-2’-hidroxibibenzil (BU–13) cujos dados de RMN 13C são descritos pela primeira vez neste trabalho. As estruturas dos compostos foram elucidadas através de técnicas espectroscópicas tais como IV, EM, RMN 1D e 2D, e por comparação com dados descritos na literatura. O bibenzil 3,5-dimetoxi-4-metil-2’-hidroxibibenzil mostrou atividade citotóxica significativa contra as linhagens celulares humanas HL-60 e HEP-2 com valores de IC50 de 4,3 e 6,5 μg/mL, respectivamente.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Bioquímica, Florianópolis, 2015. / Made available in DSpace on 2015-09-29T04:08:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 334525.pdf: 7690982 bytes, checksum: a566cb5bfdf076e3559a98ca79c5fc74 (MD5) Previous issue date: 2015 / A hiperglicemia crônica proveniente da diminuição da produção insulínica e do aumento da resistência tecidual à insulina é a principal causa de danos teciduais associados à diabetes e insulinoresistência, e pode ser desencadeada por fatores como menor disponibilidade de GLUT4. Compostos insulinoestimulantes e que regulam de forma rápida a homeostase da glicose e a translocação de GLUT4 para a membrana plasmática são de grande importância na terapêutica da diabetes, e nesse âmbito se encontram os triterpenos pentacíclicos (TPs) e a 1,25 (OH)2 vitamina D3 (1,25-D3). Os TPs são metabólitos vegetais amplamente disponíveis na dieta humana e sua potencial ação nutracêutica desperta atenção devido ao efeito antidiabético frequentemente relatado, porém, cientificamente pouco comprovado. Ainda, estudos sugerem que a deficiência em 1,25-D3 prejudica a secreção de insulina em ratos, podendo levar a diabetes melito tipo 2, enquanto o tratamento com esse hormônio aumentou a sensibilidade à insulina por estimular a expressão do receptor de insulina e o transporte de glicose. Contudo, os mecanismos de ação da 1,25-D3 neste aspecto ainda são pouco elucidados. Neste trabalho foi estudado o efeito antihiperglicêmico e o mecanismo de ação da 1,25-D3 e de triterpenos naturais na secreção insulínica e absorção tecidual de glicose. Para análise de curva tempo e dose resposta dos triterpenos, ratos Wistar machos após jejum (16 h) foram pré-tratados com os TPs (ácido betulínico (AB), ácido ursólico (AU), trihidroxioleanano (THO), 3ß-hidroxihopeno (BHH) ou fernenodiol) e após 30 min foi induzida a hiperglicemia para análise da tolerância à glicose. Do soro foram determinadas a glicemia, insulina, lactato desidrogenase, GLP-1 e a concentração de cálcio. Ainda nestes animais, o músculo sóleo e o fígado foram utilizados para dosagem de conteúdo total de glicogênio. Para estudos in vitro de mecanismo de ação, foram investigados os processos de captação de 14C-deoxiglicose, incorporação de 14C-timidina ao DNA, de 14C-leucina em proteínas em presença ou não de inibidores farmacológicos e expressão, síntese e translocação de transportadores GLUT4 no músculo e tecido adiposo. Em ilhotas pancreáticas isoladas de ratos foram estudados os efeitos desses compostos na secreção de vesículas contendo insulina, no influxo de 45Ca2+ e captação de 14C-deoxiglicose. Os triterpenos estudados reduziram fortemente a glicemia dos animais hiperglicêmicos, bem como aumentaram a insulina, o GLP-1 séricos e o conteúdo de glicogênio muscular e hepático, sem aumentar a atividade da lactato desidrogenase (LDH) e a concentração sérica de cálcio. Os ácidos betulínico, ursólico e trihidroxioleanano agiram estimulando a captação de glicose por uma via dependente de PI3K, contudo, diferentemente do ácido ursólico, o AB e THO não estimularam prioritariamente as vias de ação nuclear, mas estimularam a translocação de GLUT4 no período estudado. Estudos com a 1,25-D3 mostraram que esse hormônio age por mecanismo independente de PI3K, estimulou o aumento na incorporação de timidina ao DNA e o conteúdo total de GLUT4. Estudos com ilhotas pancreáticas isoladas incubadas em presença de ácido ursólico e 3ß-hidroxihopeno mostraram que estes tratamentosestimulam a secreção de insulina pelas células ß-pancreáticas. Os triterpenos 3ß-hidroxihopeno, fernenodiol e AB estimularam o influxo de 45Ca2+ em ilhotas pancreáticas por mecanismo dependente de canais de cálcio do tipo L e de potássio sensíveis a ATP e em especial, o AB agiu também através de mecanismo mediado por canais de cloreto. Estes resultados juntos mostram que todos os triterpenos testados apresentaram forte ação nas vias de sinalização voltadas para a homeostasia da glicose, estimulando à secreção de insulina em ilhotas pancreáticas, bem como o aumentaram no influxo de cálcio e/ou ativaram a captação de glicose no músculo esquelético e tecido adiposo assim como a 1,25-D3 estimulou a captação de glicose em músculo esquelético por meio de aumento de síntese e/ou translocação do GLUT4.<br> / Abstract : Chronic hyperglycemia resulting from decreased insulin production and increased tissue insulin resistance is the major cause of tissue damage associated with diabetes and insulin resistance, and can be triggered by factors such as low availability of GLUT4. Insulinogenic compounds that quickly regulates glucose homeostasis and translocation of GLUT4 to the plasma membrane are of great importance in diabetes therapy, like the pentacyclic triterpenes (TPs) and 1,25 (OH)2 vitamin D3 (1,25-D3). The TPs are plant metabolites widely available in the human diet and its potential nutraceutical action arouses attention due to the often reported antidiabetic effect, however, scientifically need proves. Also, studies suggest that 1,25-D3 deficiency impairs insulin secretion in rats, leading to type 2 diabetes, while the treatment with this hormone increased insulin sensitivity by stimulating insulin receptor expression and glucose transport. However, the mechanisms of action of 1,25-D3 in this regard are still poorly understood. In this work, was studed the antihyperglycemic effect and the mechanism of action of 1,25-D3 and natural triterpenes in insulin secretion and tissue uptake of glucose. For analysis of time and dose-response curve of the triterpenes, male Wistar rats after fasting (16 hours) were pretreated with the TPs (betulinic acid (BA), ursolic acid (UA), trihydroxyoleanane (THO), 3ß-hydroxyhopene (BHH) or fernenediol) and after 30 min was induced hyperglycemia for analysis of glucose tolerance. Were determined from serum glucose, insulin, lactate dehydrogenase, GLP-1 and calcium concentration. Also of these animals, the liver and soleus muscle were used for determination of the total glycogen content. In vitro mechanism of action studies of 14C-deoxyglucose uptake, 14C-thymidine incorporation into the DNA and 14C-leucine into protein in the presence or absence of pharmacological inhibitors and expression were investigated. Also, synthesis and translocation of GLUT4 transporters in muscle and adipose tissue were analysed. In isolated pancreatic islets of rats were studied the effects of these compounds in secretory vesicles containing insulin, in 45Ca2+ influx and uptake of 14C-deoxyglucose. The triterpenes studied reduced the blood glucose of hyperglycemic animals and stimulates the insulin increase, serum GLP-1 and the contents of muscle and liver glycogen, without increasing the activity of lactate dehydrogenase (LDH) and serum calcium concentration. The betulinic acid, ursolic and trihydroxyoleanane acted stimulating glucose uptake by a PI3K-dependent pathway, however, unlike the ursolic acid, AB and THO not primarily stimulated nuclear courses of action, but stimulated GLUT4 translocation of the study period. The 1,25-D3 showed a PI3K-independent mechanism, but stimulated the increase in thymidine incorporation to DNA and the total content of GLUT4. Studies using isolated pancreatic islets incubated in the presence of ursolic acid and 3ß-hydroxyhopene showed that these treatments stimulate insulin secretion from pancreatic ß-cells. The 3ß-hydroxyhopene, fernenediol and AB-stimulated 45Ca2+ influx in pancreatic islets was by a mechanism dependent of L-type calcium and ATP-sensitive potassium channels, andespecially, the AB act also through mechanisms mediated by chloride channels. These results together show that all triterpenes tested showed strong action in signaling pathways focused on glucose homeostasis by stimulating the secretion of insulin in pancreatic islets, as well as the increased calcium influx and/ or glucose uptake in skeletal muscle and adipose tissue as well as the 1,25-D3 stimulated glucose uptake in skeletal muscle by increasing the synthesis and GLUT4 translocation.

Submitted by Rauldenis Santos (rauldenis_fonseca@yahoo.com.br) on 2014-02-14T22:18:58Z No. of bitstreams: 1 Dissertação Rauldenis.pdf: 5443941 bytes, checksum: 95fd3fe07e6e0f8dfd0551d4f1fedf9a (MD5) / Made available in DSpace on 2014-02-14T22:18:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação Rauldenis.pdf: 5443941 bytes, checksum: 95fd3fe07e6e0f8dfd0551d4f1fedf9a (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado da Bahia-FAPESB / O presente trabalho descreve a obtenção de derivados esterificados a partir do β-sitosterol e dos ácidos ursólico, betulínico, oleanólico, além do lupeol, bem como alguns testes bioquímicos densenvolvidos com os derivados. Os triterpenos foram isolados das partes aéreas de Eriope blanchetti (Lamiaceae), fornecendo os ácidos ursólico (2), betulínico (3) e oleanólico (4). Em seguida, o β-sitosterol e os triterpenos foram submetidos à esterificação com anidrido acético, benzóico, propiônico, butírico e succcínico, além de cloreto de 3-clorobenzoíla e cloreto cinâmico, obtendo-se assim 16 derivados químicos, que tiveram suas estruturas elucidadas através de dados de RMN e IV. Os derivados foram submetidos a ensaios para avaliar suas atividades biológicas (frente às larvas de Artemia salina e inibição da enzima acetilcolinesterase). No teste de letalidade frente á larvas de Artemia salina, a maioria dos derivados, incluindo os reagentes, foram considerados inativos e, 3β-formestigmast-5-eno (1d) (LC50=221,3μg/mL), 3β-3-clorobenzoxestigmast-5-eno (1g)(LC50=889,7μg/mL), trans-cinamato de estigmast-5-eno (1h) (LC50=721,6μg/mL), ácido 3b-(3-clorobenzoil) oleanólico (4a) (LC50=477,2μg/mL) e 3b-(3-clorobenzoil) lupeol (5a)(LC50=797,8μg/mL), foram considerados moderadamente ativos. O composto mais citotóxico foi o ácido 3b-(3-clorobenzoil) betulínico (3a) (LC50=117,1μg/mL). No teste qualitativo de atividade anticolinesterásica, a substância 3β-clorobenzoxestigmast-5-eno (1g) mostrou atividade inibitória. É digno de nota que o ácido 3b-(3-clorobenzoil) ursólico (2e) e 3b-(3-clorobenzoil) lupeol (5a) estão sendo descritos neste trabalho pela primeira vez.