O estradiol (E2) exerce papel fundamental no desencadeamento da luteólise nos ruminantes. A redução das concentrações de E2 que se segue a ablação dos folículos retarda a luteólise enquanto que aplicações de E2 no final da fase luteínica estimulam a secreção de prostaglandina-F2α (PGF2α), induzindo a luteólise. O E2 pode preparar bioquimicamente o endométrio de forma que a progesterona (P4) possa estimular a secreção de PGF2α. Para esse trabalho foi utilizado um antagonista de P4 (RU486) no intuito de se estudar efeitos da P4 em associação com o E2 na produção de PGF2α. Foram conduzidos 2 experimentos com vacas holandesas em final da fase luteínica. No primeiro experimento, 2 grupos (n=4) receberam respectivamente RU486 (3mg/kg)+E2 (3mg) e placebo+E2. O uso do RU486 não inibiu a produção de PGFM (metabólito da PGF2α) e sim aumentou-a. O E2 estimulou a produção de PGFM. Verificou-se também que o etanol (ETOH) utilizado como solvente para o RU486 provocou forte pico de liberação de PGFM. No experimento 2 fez-se necessário checar a efetividade da ação do ETOH nos resultados obtidos. Animais foram divididos em 3 grupos (n=3) que receberam 0,00; 0,03 e 0,06mL de ETOH/kg de peso vivo. Uma hora após a aplicação do ETOH todos receberam E2 (3mg). O ETOH e o E2 voltaram a estimular a produção de PGFM. A baixa especificidade do RU486, a possível ativação de receptores de P4 pelo próprio RU486 e/ou ação do LH associado ao E2 podem ter estimulado a liberação de PGFM. Porém pouco pôde-se concluir sobre o pico de PGFM ocasionado pelo ETOH. / Estradiol (E2) is essential for triggering luteolysis in ruminants. The low E2 concentrations after follicular ablation prolongs luteolysis instead of E2 injections in late luteal phase stimulate prostaglandin F2α (PGF2α) and luteolysis. The E2 could act in endometrium avoiding progesterone (P4 ) to stimulate PGF 2α secretion. A P4 antagonist (RU486) was used for it. Holstein cows in late luteal phase where used for those 2 experiments. First experiment, 2 groups (n=4) received respectively RU486 (3mg/kg)+E2 (3mg) and placebo+E2 Ru486 increased PGFM (PGF2α metabolite). E2 stimulated PGFM production. Ethanol (ETOH) used as a RU486 vehicle strongly stimulated PGFM. In experiment 2 the effectivity of ETOH was studied. Animals were share into 3 groups (n=3) receiving 0,00; 0,03 e 0,06mL of ETOH/kg. All animals received E2 (3mg) 1hour after ETOH injection. Once more, both ETOH and E2 stimulated PGFM releasing. The low RU486 specificity, the possible P4 receptor activation by the RU486 itself and/or the LH/E2 association could be able to stimulate PGFM release. The PGFM stimulus by the ETOH injection is not well understood.

Esta tese está fundamentada em dois experimentos que visam colaborar na elucidação dos efeitos das afecções de casco sobre o desempenho reprodutivo de vacas leiteiras no Brasil. No experimento 1, um total de 57 vacas Holandesas no início da lactação foi utilizado para avaliar os efeitos das afecções de casco sobre o comportamento no estro. Os animais foram classificados de acordo com o escore dos cascos e o escore da locomoção, identificando-se assim animais com os cascos sadios e animais que apresentam lesões nos cascos. Todos os animais foram sincronizados com prostaglandina (Cloprostenol sódico). O comportamento destas vacas durante o estro foi monitorado por um aparelho de radiotelemetria (HeatWatchâ). Os dados relativos ao casco (variáveis independentes) foram associados com os seguintes dados relativos ao estro: número de montas, soma da duração das montas, duração média das montas, intensidade das montas e duração do estro (variáveis dependentes). Os resultados evidenciaram significância estatística apenas na relação funcional entre a variável dependente Duração do estro e a variável independente Escore de locomoção (P=0,0237; R²=0,0921). Quando foram considerados dois grupos, em função da presença do acometimento do casco, foi possível, utilizando a análise de variância, demonstrar diferença significativa com as variáveis Número de montas (P=0,0363); Soma da duração das montas (P=0,0280) e Duração do estro (P=0,0071). No experimento 2, 1447 vacas Holandesas foram utilizadas para avaliar a associação entre a incidência de claudicação e o desempenho reprodutivo. As vacas foram monitoradas desde o parto até a concepção, avaliando-se a relação entre a incidência de claudicação e os índices reprodutivos, compreendendo: intervalo do parto ao primeiro cio, ao primeiro serviço e à concepção; percentual de vacas com e sem claudicação que conceberam no primeiro serviço; número de doses por concepção e percentual de vacas com e sem claudicação vazias com mais de 210 dias de lactação. Os resultados demonstraram que no intervalo do parto ao primeiro cio houve diferença significativa (P=0,0021) de 16 dias; (P=0,0150) de 21 dias; (P=0,0027) de 26 dias e (P=0,0279) de 29 dias na data do cio quando a claudicação ocorreu no segundo mês, no terceiro mês, no quarto mês e no sexto mês da lactação, respectivamente. No intervalo do parto ao primeiro serviço houve diferença significativa (P=0,0159) de 13 dias; (P=0,0021) de 15 dias e (P=0,0044) de 17 dias na data do primeiro serviço quando a claudicação ocorreu no segundo mês, no terceiro mês e no quarto mês da lactação, respectivamente. No intervalo do parto à concepção e no número de doses por concepção não houve diferença significativa (P>0,05) entre os animais que apresentaram e que não apresentaram claudicação. Do total de 1447 vacas, 21,9% conceberam no primeiro serviço, sendo que 17% apresentaram claudicação e 82,6% não apresentaram; e 26% do total de vacas permaneceram vazias por mais de 210 dias em lactação, sendo que 68% apresentaram claudicação e 31,9% não apresentaram / This study is based in two experiments which aim to evaluate the effects of lameness on the reproductive performance of dairy cows in Brazil. In experiment 1,57 Holsteins cows in the beginning of the lactation were divided according to the hoof and locomotion score, respectively, and the incidence of lameness or not (healthy cows). All cows did receive were syncronized by prostaglandine (cloprostenol sódico) and its behavior during the estrus was monitored by a radiotelemetria device (HeatWatchâ). Following to this, it was possible to monitor the possible association of the lameness and the following data to the estrus: number of mounts, total duration of the mounts, duration average of the mounts, intensity of the mounts and the duration of the estrus. The results were statistically significant between the dependent variable estrus duration and the independent variable locomotion score (P=0,0237; R²=0,0921). While considering two groups, due to lameness, it was possible via the variance analysis to show the significant difference with the variable number of mountains (P=0,0363); sum of mountain duration (P=0,0280) and estro duration (P=0,0071). In experiment 2, 1447 Holsteins cows from 5 different farms were monitored from the calving date till the conception, where it was evaluated the relationship between the lameness incidence and the reproductive records, understanding: calving interval till first heat, first service and until conception; percentage of cows with and without lameness that were pregnant in the first service; number of dosis per conception and percentage of open cows over 210 days in milk with and without lameness. The results demonstrated that from the calving date till the first heat a significant difference of 16 days more (P=0,0021), 21 days more (P=0,0150), 26 days more (P=0,0027) and 29 days more (P=0,0027) when the lameness did happen in the second, third, fourth and sixth month of lactation, respectively. About the interval from the calving until the first insemination, a significant difference occurred in 13 days more (P=0,0159), 15 days more (P=0,0021) and 17 days more (P=0,0044) when the lameness did happen in the second, third and fourth months, respectively. In relation to the interval from calving to conception and the number of dose per conception, it was not found significant difference (P>0,05) between the animals with and without lameness. >From the total 1447 cows, 21,9% did get pregnant in the first service and from this animals, 17% did have lameness and 82,6% did not. Also, 26% of the total cows were open for more than 210 days in milk, and from this 68% did have lameness and 31,9% did not have lameness

O objetivo deste trabalho foi avaliar as associações entre a ocorrência de estro após os protocolos de sincronização da ovulação e diâmetro folicular no momento da inseminação artificial em tempo fixo (IATF) nas respostas ovarianas e na taxa de concepção após IATF em fêmeas zebuínas de corte. Assim, avaliaram-se as possíveis implicações práticas do uso dessas informações para a melhoria dos programas de IATF em fêmeas zebuínas lactantes. Essa tese é dividida em três capítulos. No primeiro capítulo, estudou-se a associação entre o diâmetro folicular no momento da IATF com as respostas das fêmeas após sincronização da ovulação e IATF. Observou-se que o aumento do diâmetro folicular no momento da IATF aumenta tanto a taxa de ovulação, quanto a taxa de concepção após IATF. O segundo capítulo relata a realização de quatro estudos onde foram avaliadas as associações da ocorrência de estro no intervalo entre o final do protocolo de sincronização e o momento da IATF na resposta ovariana e a taxa de concepção após a IATF. Foi observado que a ocorrência de estro após o protocolo de sincronização está associada à melhores respostas ovarianas, melhor função luteínica no ciclo subsequente e melhor taxa de concepção após IATF. Por fim, o terceiro capítulo trata da utilização das informações supracitadas para a seleção de fêmeas com maior probabilidade de gestação após IATF para receberem sêmen sexado. Os resultados são indicativos de que é possível obter maiores taxas de concepção após uso de sêmen sexado ou convencional nas fêmeas selecionadas pela ocorrência de estro ou pela presença de folículo de maior diâmetro no momento da IATF. Portanto, estratégias para melhorar a ocorrência de estro e o diâmetro folicular no momento da IATF são importantes para o sucesso dos programas de sincronização da ovulação para IATF de fêmeas zebuínas, e tais critérios podem ser utilizados na seleção de fêmeas de melhor resposta para receberem sêmen sexado. / The objective of the present thesis was to evaluate the associations between the occurrence of estrus after synchronization of ovulation protocols and ovarian follicle diameter at the timed artificial insemination (TAI) on ovarian responses and conception rates after TAI in Zebu beef females. Finally, there were evaluated some practical tools using established information to select cows to receive great value semen during TAI program. This thesis was divided into three chapters. In the first chapter, it was evaluated the association between ovarian follicle diameter at the TAI moment on ovarian responses and pregnancy per TAI. It was observed that the increase in the ovarian follicle diameter at TAI increases both the ovulation and conception rates following the TAI synchronization protocol. In the second chapter, there were four studies in which was analyzed the effect of occurrence of estrus between the end of the synchronization protocol and the IATF. It was observed that the occurrence of estrus after synchronization protocol is associated with higher ovarian responses, greater luteal function on subsequent estrous cycle and higher pregnancy per TAI. Finally, the third chapter, the established information were used to select females with greater odds of pregnancy to receive sex-sorted sperm. It was possible to obtain higher conception rates following the selection of females through the occurrence of estrus or the presence of larger ovarian follicle at the time of TAI after the use either sex-sorted or non sex-sorted sperm. Therefore strategies to improve the occurrence of estrus and the ovarian follicle diameter at TAI moment are important to improve the reproductive outcomes following synchronization of ovulation protocols for TAI in lactating zebu cows. Besides, such selection criteria can be used to select females with greater odds of pregnancy to receive sex-sorted sperm.

Submitted by Jorge Silva (jorgelmsilva@ufrrj.br) on 2018-01-24T19:09:14Z No. of bitstreams: 1 2016 - Luciane Orbem Veronezi.pdf: 3213369 bytes, checksum: 660b54c56b80e667f1e30d110c395df3 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-01-24T19:09:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016 - Luciane Orbem Veronezi.pdf: 3213369 bytes, checksum: 660b54c56b80e667f1e30d110c395df3 (MD5) Previous issue date: 2016-07-27 / CAPES / In this study the epidemiology, clinical signs, macroscopic and microscopic lesions related to spontaneous and experimental intoxication by Vicia villosa and the evaluation of the possible toxicity of Vicia villosa in cattle were characterized. The systematic granulomatous disease (SGD associated with vetch) was verified in 7 localities distributed in Paran?, Santa Catarina and Rio Grande do Sul States, with main feed that includes oats and/or ryegrass in association and V. villosa and/or ryegrass associated with Vicia sativa, and in lower quantity. All cattle that developed the disease were cows, lactating and Dutch. The SGD associated with vetch was reproduced in six lactating Dutch cows, by supplying green V. villosa in the trough and V. villosa and ryegrass pasture. In the other experimental groups (group 3, V. villosa / V. sativa/cows, grazing; group 4, V. sativa/cows, grazing; group 5, V. villosa/V. sativa/heifers and group 6, V. villosa/heifers, grazing) do not verified clinical and pathological alterations related to the SGD associated with vetch. Six cows developed the SGD, one cow presented a leigh clinical condition (group 2/cow 6/V. villosa, pasture), four cows developed a moderated clinical condition (group 1, cows 1 and 2/V. villosa/trough and group 2, cows 4 and 5/V. villosa, grazing), and just one cow presented a severe clinical condition (group 2, cow 3/V. villosa/pasture. V. villosa was toxic to cattle and produced a chronic granulomatous disease when ingested in amounts greater than 38.2 g/kg/day for 71 days, or in direct grazing for a period of more than 28 days The main clinical signs consisted of alopecia and cutaneous crusts, pruritus, fever, conjunctivitis, diarrhea, reduction of milk production and weight loss. Macroscopically, multiple white-grayish nodules were observed, specifically in the lymph nodes, kidneys and heart, and histology revealed a granulomatous infiltrate composed of macrophages, lymphocytes, giant cells, epithelioid cells, plasma cells and eosinophils. When ingested by young cattle, the V. villosa pasture, for a period of 68 days, do not produce clinical modifications. When ingested by cows with high milk yield, the V. sativa pasture, for a period of 78 days, does not produce chronic granulomatous disease. Ingestion of V. villosa for a long time led to low production rates, such as low milk production, low reproduction rates and predisposition to infection diseases. In the bromatological analysis, the presence of phytate, in low levels, in the samples of Vicia used in experimental works, in different phases of the culture was determined. The biochemical blood and feces results showing lower amounts of serum sinc and loss of Ca and Zn feces in animals poisoned by V. villosa, that developed granulomatous disease in severe and moderate conditions, possibly indicated the presence of a metabolic disorder in the pathogen of the disease. / No presente estudo caracterizou-se a epidemiologia, os sinais cl?nicos, as les?es macrosc?picas e microsc?picas da intoxica??o espont?nea e experimental por Vicia villosa, bem como a avalia??o da poss?vel toxicidade de Vicia sativa em bovinos. A doen?a granulomatosa sist?mica (DGS ervilhaca-associada) foi verificada em 7 propriedades distribu?das nos Estados de Santa Catarina, Paran? e Rio Grande do Sul, onde a alimenta??o principal era aveia e/ou azev?m consorciados com V. villosa e/ou de azev?m consorciado com V. villosa e em menor quantidade V. sativa. Todos os bovinos que desenvolveram a doen?a eram vacas, em lacta??o e da ra?a Holand?s. A DGS ervilhaca-associada foi reproduzida em seis vacas holandesas em lacta??o, atrav?s do fornecimento de V. villosa verde no cocho e em pastagens de V. villosa e azev?m. Nos demais grupos experimentais (grupo 3, V. villosa/V. sativa/vacas, pastejo; grupo 4, V. sativa/vacas, pastejo; grupo 5, V. villosa/V. sativa/novilhas e grupo 6, V. villosa/novilhas, pastejo) n?o verificou-se altera??es cl?nicas e patol?gicas relacionadas a DGS ervilhaca-associada. Das seis vacas que desenvolveram a doen?a granulomatosa sist?mica, uma vaca apresentou quadro cl?nico leve (grupo 2/vaca 6/V.villosa, pastejo), quatro vacas desenvolveram o quadro moderado da doen?a (grupo 1, vacas 1 e 2/V. villosa/cocho e grupo 2, vacas 4 e 5/V.villosa/pastejo) e apenas em uma vaca verificou-se o quadro grave da doen?a (grupo 2, vaca 3/V.villosa/pastejo). V. villosa foi t?xica para bovinos, produzindo doen?a granulomatosa cr?nica quando ingerida em quantidades superiores a 38,2g/kg/dia, por um per?odo de 71 ou, em pastoreio direto por um per?odo superior a 28 dias. As principais manifesta??es cl?nicas consistiam em ?reas de alopecia e crostas na pele, coceira, febre, conjuntivite, diarreia, queda na produ??o de leite e perda de peso. Macroscopicamente verificaram-se m?ltiplos n?dulos branco-acinzentados principalmente em linfonodos, rins e cora??o, e na histologia estes caracterizavam um infiltrado granulomatoso composto por macr?fagos, linf?citos, c?lulas gigantes, c?lulas epitelioides, plasm?citos e eosin?filos. As pastagens de V. villosa quando ingerida por bovinos jovens, por um per?odo 68 dias n?o produziu altera??es cl?nicas. As pastagens de V. sativa quando ingerida por vacas de alta produ??o leiteira por um per?odo de 76 dias n?o produziu doen?a granulomatosa cr?nica. A ingest?o de V. villosa por per?odos prolongados conduziu a baixos ?ndices produtivos como: baixa produ??o leiteira, baixos ?ndices reprodutivos e pode predispor o surgimento de doen?as infeciosas. Na an?lise bromatol?gica determinou-se a presen?a de fitato, em pequenas quantidades, nas amostras de Vicia utilizadas na experimenta??o, em diferentes fases do seu crescimento. Os resultados das an?lises bioqu?micas de amostras de sangue e fezes evidenciaram baixas quantidades s?ricas de zinco e excessivas perdas fecais de Ca e Zn nos animais intoxicados por V. villosa que desenvolveram a doen?a granulomatosa na forma moderada e grave, indicando um poss?vel envolvimento de dist?rbios de ordem metab?lica na patogenia da doen?a.

O presente experimento foi realizado com o objetivo de avaliar o impacto da inseminação artificial em tempo fixo (IATF) na eficiência reprodutiva de vacas de leite de alta produção inseminadas no período pós-parto. Vacas Holandesas com média de 50 dias pós-parto foram distribuídas homogeneamente em um de dois grupos experimentais, levando em consideração a presença ou ausência de corpo lúteo (CL), o escore de condição corporal e a produção de leite. No grupo Controle (G-Controle; n = 490), as vacas foram submetidas à observação do comportamento de aceitação de monta (duas vezes ao dia por uma hora) e inseminadas 12 horas após a primeira detecção. No grupo IATF (G-IATF; n = 495), as vacas receberam um implante auricular de norgestomet, mantido por oito dias, e 2 mg de benzoato de estradiol IM no dia 0 (D0; dia aleatório do ciclo estral). No momento da retirada do implante (D8) foram administrados 150 µg de prostaglandina F2α, 400 UI de gonadotrofina coriônica eqüina e 1 mg de cipionato de estradiol. A IATF foi realizada de 54 a 56 h após a retirada do implante auricular, concomitante à administração de 100 µg de gonadorelina. Após a IATF, as vacas foram submetidas à observação de cio com subseqüente inseminação, seguindo os mesmos critérios descritos para o G-Controle. Amostras de sangue foram colhidas de um subgrupo de animais (G-Controle, n = 50; G-IATF, n = 58) 5 e 11 dias após a primeira inseminação artificial (IA) para dosagem de progesterona (P4) circulante. Todos os animais foram mantidos no experimento até a terceira IA ou 150 dias após o parto e os tratamentos foram realizados no inverno e no verão. O diagnóstico de gestação foi realizado aos 30 dias pós-IA por ultrassonografia e aos 60 dias pós-IA por palpação transretal. Os dados binomiais foram analisados por regressão logística utilizando o PROC GLIMMIX e as variáveis contínuas por ANOVA utilizando PROC GLM do SAS. Não se verificou interação entre estação do ano e tratamento na análise das taxas de concepção, perda gestacional, intervalo entre IAs, intervalo parto-concepção (IPC) e taxa de prenhez aos 150 dias pós-parto. Os resultados são indicativos de que não existem diferenças nas taxas de concepção entre os diferentes grupos após as IAs (primeira, segunda e terceira). A perda gestacional relativa à primeira IA foi maior nas vacas do G-IATF. Os intervalos parto-primeira IA, parto-segunda IA e parto-concepção foram inferiores para as vacas do G-IATF. Entretanto, o intervalo entre a primeira e a segunda IA foi maior para o G-IATF. Não houve diferença na taxa de prenhez aos 150 dias entre os grupos. Ainda, a taxa de serviço (TS) nos primeiros 21 dias após o período voluntário de espera (PVE) foi maior para o grupo IATF. Entretanto, a TS entre 21 e 42 dias após o PVE foi maior para o G-Controle. As concentrações circulantes de P4 não diferiram entre os grupos e as estações do ano. Concluiu-se que o emprego da IATF 60 dias pós-parto foi eficiente para diminuir o IPC. Contudo, a porcentagem de vacas prenhes aos 150 pós-parto foi semelhante entre os dois tratamentos (Controle e IATF) / The aim of the present study was evaluate the impact of fixed-time artificial insemination (FTAI) on reproductive efficiency of high-producing dairy cows inseminated during the postpartum period. Holstein cows with average 50 days in milk were allocated to one of two groups considering the presence or absence of corpus luteum (CL), body condition score and milk production. On Control group (Control-G; n = 490), the cows were submitted to estrus detection twice per day for one h and were inseminated 12 hours after the first detection. On FTAI group (FTAI-G; n = 495), the cows received a norgestomet ear implant (kept for eight days) plus administration of 2 mg of estradiol benzoate i.m. on Day 0 (random day of the estrous cycle). The implant was removed on Day 8 followed by FTAI 54 to 56 h later and the administration of 100 µg of gonadorelin. On Day 8, cows received 400 IU eCG, 150 &micro:g of prostaglandin F2α and 1 mg of estradiol cypionate. After FTAI, cows were submitted to estrus detection and artificial insemination (AI) 12 h after. Blood samples were collected from a subset of animals (Control-G, n = 50; FTAI-G, n = 58) on Day 5 and 11 after the first AI to investigate serum progesterone concentration (P4). All animals were maintained on the experiment until 150 days post-partum and the treatments were conducted during the winter and summer. Pregnancy diagnosis was performed by ultrasonography 30 days after AI (Day 30) and by rectal palpation 60 days after AI (Day 60). Binomial data were analyzed by logistic regression using the PROC GLIMMIX and continuous variables by ANOVA using PROC GLM of SAS. No interaction was found between season and treatment when conception rate, pregnancy loss, interval between inseminations, interval from calving to conception and pregnancy rate 150 post-partum were analysed. The results indicate no differences on conception rate among both experimental groups after AI (first, second and third). However, the interval from calving to first and second AI and interval from calving to conception were lower on FTAI-G. No difference on pregnancy rate 150 days post-partum was found among groups. Pregnancy loss after first AI was greater on FTAI-G. The interval from calving to first AI, from calving to second AI and the interval from calving to conception were shorter on FTAI-G. However, the interval between first and second AI was longer on FTAI-G. There was no difference on pregnancy rate 150 days post-partum among treatments. Also, the service rate (SR) 21 days after the voluntary waiting period (VWP) was greater on FTAI-G compared to Control-G. Conversely, the SR was lower between 21 and 42 days after the VWP on FTAI-G. No difference was found in serum concentration of P4 among treatment groups and season. Thus, the use of FTAI 60 days post-partum was efficient to anticipate the conception of high-producing dairy cattle by reducing the interval from calving to conception, but did not increase the pregnancy rate 150 days post-partum

Este estudo comparou o desempenho de quatro protocolos de extração de DNA a partir de homogeneizados de diferentes órgãos provenientes de vacas infectadas experimentalmente com a B. abortus 2308. Os protocolos de extração comparados foram o método de GT (lise com isotiocianato de guanidina), Boom (lise com GT e tratamento com suspensão carreadora Diatomaceous earth), PK (lise com proteinase K) e Santos (lise por fervura e congelamento com nitrogênio líquido). Foram constituídos os grupos padrão ouro positivo e negativo baseados na bacteriologia clássica e compostos por: 54 cotilédones (27 pos. e 27 neg.), 39 linfonodos supra mamários (12 pos. e 27 neg.), 44 pré-escapulares (17 pos. e 27 neg.), 33 fígados (6 pos. e 27 neg.), 37 baços (10 pos. e 27 neg.), e 34 úberes (7 pos. e 27 neg.). Todas as amostras foram submetidas aos quatro protocolos de extração e a um mesmo processo de amplificação com os primers B4 e B5. Nos resultados consolidados por órgãos, a proporção de positivos no cotilédone foi maior do que a encontrada no linfonodo supramamário (p=0,0001), linfonodo pré-escapular (p<0,0001), fígado (p=0,0006), baço (p<0,0001) ou úbere (p=0,0019). Os resultados acumulados para os métodos de extração mostraram que o protocolo de Santos teve maior sensibilidade relativa do que o método de Boom (p=0,003) e GT (p=0,0506), e foi igual ao PK (p=0,2969). As demais comparações de proporções não resultaram em diferenças estatisticamente significantes. No estudo verificou-se amostas positivas a PCR e negativas ao isolamento e viceversa. Assim, apesar das desvantagens do método bacteriológico clássico, a melhor estratégia para o diagnóstico direto da infecção de vacas por B. abortus em homogeneizado de órgãos é a utilização conjunta do isolamento e da PCR, examinando os cotilédones e utilizando os métodos de extração de DNA Santos ou PK. / This study compared the performance of four protocols of DNA extraction from suspensions of different tissues from experimentally infected cows with 2308 strain. The compared extraction protocols were GT protocol (lyse with guanidine isotiocianate), Boom (lyse with GT and treated with the carrying suspension Diatomaceous earth), PK (lise with proteinase K) and Santos (lyse by boiling and freezing with liquid nitrogen). Based on classical bacteriology, positive and negative gold standard groups were built and consisted of 54 cotyledons (27 pos. and 27 neg.), 39 supramammary lymph nodes (12 pos. and 27 neg.), 44 prescapulars (17 pos. and 27 neg.), 33 livers (6 pos. and 27 neg.), 37 spleens (10 pos. and 27 neg.), and 34 udders (7 pos. and 27 neg.). All the samples were submitted to the four DNA extraction protocols and the same amplification process using the primers B4 and B5. According to consolidated results by tissue, the proportion of positives in cotyledon was bigger than supramammary lymph node (p=0,0001), prescapular lymph node (p<0,0001), liver (p=0,0006), spleen (p<0,0001) and udder (p=0,0019). The consolidated results for the extraction methods show that Santos protocol had bigger relative sensitivity than Boom method (p=0,003) and GT (p=0,0506), and was equal than PK (p=0,2969). There were not significant statistical differences in the others comparisons of proportions. In the study, PCR-positive and isolation-negative samples and vice-versa were verified. However, the disadvantages of the classic bacteriological method, the best strategy for direct diagnosis of the infection of cows for B. abortus in homogenized of tissues is combined use of isolation and PCR, examining the cotyledons and using the methods of DNA extraction from Santos or PK.

O objetivo deste trabalho foi avaliar as associações entre a ocorrência de estro após os protocolos de sincronização da ovulação e diâmetro folicular no momento da inseminação artificial em tempo fixo (IATF) nas respostas ovarianas e na taxa de concepção após IATF em fêmeas zebuínas de corte. Assim, avaliaram-se as possíveis implicações práticas do uso dessas informações para a melhoria dos programas de IATF em fêmeas zebuínas lactantes. Essa tese é dividida em três capítulos. No primeiro capítulo, estudou-se a associação entre o diâmetro folicular no momento da IATF com as respostas das fêmeas após sincronização da ovulação e IATF. Observou-se que o aumento do diâmetro folicular no momento da IATF aumenta tanto a taxa de ovulação, quanto a taxa de concepção após IATF. O segundo capítulo relata a realização de quatro estudos onde foram avaliadas as associações da ocorrência de estro no intervalo entre o final do protocolo de sincronização e o momento da IATF na resposta ovariana e a taxa de concepção após a IATF. Foi observado que a ocorrência de estro após o protocolo de sincronização está associada à melhores respostas ovarianas, melhor função luteínica no ciclo subsequente e melhor taxa de concepção após IATF. Por fim, o terceiro capítulo trata da utilização das informações supracitadas para a seleção de fêmeas com maior probabilidade de gestação após IATF para receberem sêmen sexado. Os resultados são indicativos de que é possível obter maiores taxas de concepção após uso de sêmen sexado ou convencional nas fêmeas selecionadas pela ocorrência de estro ou pela presença de folículo de maior diâmetro no momento da IATF. Portanto, estratégias para melhorar a ocorrência de estro e o diâmetro folicular no momento da IATF são importantes para o sucesso dos programas de sincronização da ovulação para IATF de fêmeas zebuínas, e tais critérios podem ser utilizados na seleção de fêmeas de melhor resposta para receberem sêmen sexado. / The objective of the present thesis was to evaluate the associations between the occurrence of estrus after synchronization of ovulation protocols and ovarian follicle diameter at the timed artificial insemination (TAI) on ovarian responses and conception rates after TAI in Zebu beef females. Finally, there were evaluated some practical tools using established information to select cows to receive great value semen during TAI program. This thesis was divided into three chapters. In the first chapter, it was evaluated the association between ovarian follicle diameter at the TAI moment on ovarian responses and pregnancy per TAI. It was observed that the increase in the ovarian follicle diameter at TAI increases both the ovulation and conception rates following the TAI synchronization protocol. In the second chapter, there were four studies in which was analyzed the effect of occurrence of estrus between the end of the synchronization protocol and the IATF. It was observed that the occurrence of estrus after synchronization protocol is associated with higher ovarian responses, greater luteal function on subsequent estrous cycle and higher pregnancy per TAI. Finally, the third chapter, the established information were used to select females with greater odds of pregnancy to receive sex-sorted sperm. It was possible to obtain higher conception rates following the selection of females through the occurrence of estrus or the presence of larger ovarian follicle at the time of TAI after the use either sex-sorted or non sex-sorted sperm. Therefore strategies to improve the occurrence of estrus and the ovarian follicle diameter at TAI moment are important to improve the reproductive outcomes following synchronization of ovulation protocols for TAI in lactating zebu cows. Besides, such selection criteria can be used to select females with greater odds of pregnancy to receive sex-sorted sperm.

Beef cows classified as efficient utilize less resources to achieve the same output than inefficient animals in a sustainable environment. The objective of this study was to utilize a mathematical model to identify beef cows that use energy more efficiently to support maintenance requirements and calf growth based an energy efficiency index (EEI). The EEI was computed as the ratio of metabolizable energy requirements (MER) of the cow to weaning weight of the calf. Data were collected from one herd of 69 Angus crossbred cows over two consecutive years for a performance experiment. The EEI was used to rank the cows for efficiency, cows with low EEI are more efficient because they require less metabolizable energy for the same calf weaning weight. After the cows were ranked in year 1, low (n=8) and high (n=8) EEI cows were selected for an energy metabolism experiment during late lactation and late gestation in year 2. Relationships among performance and efficiency traits were computed with PROC CORR of SAS. Metabolism experiment data were analyzed as a randomized complete block design using PROC MIXED of SAS with side of barn as the random blocking factor. Correlation coefficients were considered different from zero and LSmeans were considered different at P &lt; 0.05. The EEI was strongly negatively correlated (P &lt; 0.05) with model predicted peak milk and calf weaning weight, and moderately, positively correlated (P &lt; 0.05) with cow body weight in both years such that more efficient cows weaned heavier calves and had lesser body weight. Energy efficiency index was moderately, positively correlated (P &lt; 0.05) among years indicating that those cows ranked as efficient in one year tend to be more efficient cows in subsequent years. Low EEI cows had lesser (P &lt; 0.05) dry matter digestibility during late lactation, but not during late gestation than high EEI cows. There were no differences in energy metabolism between low and high EEI cows during late lactation or late gestation. In conclusion, more efficient cows based on EEI wean heavier calves and require less energy but the mechanism by which low EEI cows are more efficient does not appear to be differences in the energy partitioning. / Vacas de corte classificadas como eficientes utilizam menos recursos para obter o mesmo resultados que animais ineficientes em um ambiente sustentável. O objetivo do presente estudo foi a utilização de um modelo matemático para identificar vacas de corte que utilizam energia de forma mais eficiente para suportar sua exigência de mantença e a exigência de crescimento do bezerro baseado no índice de eficiência energética (IEE). O Índice de eficiência energética foi computado como a relação entre a exigência de mantença da vaca e o peso do bezerro ao desmame. Foram utilizadas 69 vacas cruzadas da raça Angus durante dois anos consecutivos para um experimento de desempenho. As vacas foram ranqueadas pelo IEE, vacas com menor IEE são mais eficientes, pois necessitam de menos energia metabolizável para o mesmo peso ao desmame de bezerros. Após os animais serem ranqueadas por eficiência no ano 1, vacas com baixo (n=8) e alto (n=8) EEI foram selecionas para um experimento de metabolismo energético durante o fim da lactação e fim da gestação no segundo ano. Foi utilizado o PROC CORR do SAS para as análises de desempenho e eficiência. As interpretações dos resultados do experimento de metabolismo foram realizadas utilizando o PROC MIXED do SAS sendo o lado da baia como efeito aleatório do bloco. Os coeficientes de correlação foram considerados diferente de zero e a medias foram consideradas diferentes quando P&lt;0.05. O índice de eficiência energética foi negativamente correlacionado (P&lt;0.05) com o pico de leite predito pelo modelo e com o peso do bezerro ao desmame, e teve o correlação positiva moderada (P&lt;0.05) com o peso corporal das vacas nos dois anos de estudo, vacas mais eficientes desmamaram bezerros mais pesados e possuem menor peso corporal. Entre os anos, EEI apresentou uma correlação positiva moderada (P&lt;0.05) indicando que as vacas consideradas eficientes tendem a ser eficientes nos próximos anos. Vacas com baixo IEE apresentaram (P&lt;0.05) menor digestibilidade da matéria seca durante o fim da lactação em relação as vacas com alto IEE, porém, não apresentaram diferenças durante o fim da gestação. Vacas com baixo e alto IEE não apresentaram diferença estatística em relação ao metabolismo energético durante o fim da gestação e lactação. Como conclusão, vacas eficientes baseada no IEE desmamam bezerros mais pesados e necessitam de menor quantidade de energia, entretanto, o mecanismo pelo qual vacas com menor IEE se apresentam mais eficientes não se apresenta relacionado com as diferenças no particionamento de energia.

Esta tesis tuvo cinco objetivos principales: 1) conocer el grado de asociación entre los resultados del grado de inflamación subclínica obtenidos mediante la técnica de cytobrush (CB) y los cambios en la histología uterina mediante la evaluación de biopsias uterinas (BU); 2) estudiar las variaciones fisiológicas del porcentaje de polimorfo nucleares neutrófilos (PMN) en la citología endometrial durante el ciclo estral por medio de la técnica de CB; 3) validar la técnica de CB en nuestro país y determinar la prevalencia de ES y los niveles de corte del porcentaje PMN que se correspondan con una disminución de la eficiencia reproductiva; 4) determinar los agentes bacteriológicos involucrados en la ES; 5) demostrar que la histeroscopía (HI) puede ser usada para evaluar métodos de diagnóstico de EC y ES en vacas de tambo. Para cumplir con estos cinco objetivos se realizaron cinco experimentos. Los principales resultados obtenidos en esta tesis fueron que se validó por primera vez en nuestro país la técnica del CB para realizar el diagnostico de ES, y se determinaron los puntos de corte del porcentaje de PMN para diagnosticar a campo la prevalencia de ES. Durante el ciclo estral, el porcentaje de PMN nunca superó el 2% de PMN, mientras que con porcentajes de PMN superiores al 8%, 6%, 4% y 5% a los 21-33, 34 a 47, 48 a 62 y 21 a 62 dpp se comienza a observar una disminución de la eficiencia reproductiva. Este ha sido el primer trabajo en nuestro país en demostrar que las vacas con ES tuvieron 16,2% de reducción en la tasa de concepción al primer servicio, 16,8% de reducción en la cantidad de vacas preñadas a los 100 días de lactancia y 29 días de aumento de días abiertos comparado con vacas sin ES. Otro hallazgo importante de este trabajo fue que no existe relación entre ES y aislamiento bacteriano. Por último, se demostró que la HI es una técnica eficiente para el diagnóstico de EC pero ineficiente para el diagnóstico de ES.

Title from first page of PDF document. Includes bibliographical references (p. 48-52).