Les résultats des études cliniques récentes évaluant l'impact de l'augmentation du HDL-C sur la survenue des maladies cardiovasculaires n'ont pas permis de démontrer une efficacité significative de cette stratégie thérapeutique ciblée sur le HDL-C. L'évaluation de la fonctionnalité des particules HDL dans sa capacité à assurer le retour du cholestérol des tissus périphériques au foie s'avère plus importante que la simple mesure du HDL-C. L'objectif de mes travaux de recherche a été d'évaluer la fonctionnalité des particules HDL en fonction du contexte métabolique, inflammatoire et génétique de chaque individu. Mes travaux de recherche ont démontré que la niacine réduit l'athérogénicité des lipoprotéines durant la période postprandiale modulant par conséquent la fonctionnalité des particules HDL dans la voie du transport inverse de cholestérol. J'ai également montré que certaines pathologies infectieuses associées à des taux bas de HDL-C, entrainent une baisse de la capacité des particules HDL à stimuler l'efflux de cholestérol à travers le macrophage humain. En revanche, j'ai montré que des variations génétiques entrainant des taux élevés de HDL-C ne sont pas associées à une dysfonction des particules HDL dans la voie du transport inverse de cholestérol. Mes travaux soulignent l'importance de considérer que la fonctionnalité des particules HDL est modulée in vivo par des contraintes métaboliques inflammatoires et génétiques d'où il est nécessaire que les thérapies en cours de développement visant à augmenter la fonction des HDL soient résistantes aux modifications métaboliques et inflammatoires afin d'assurer une athéroprotection efficace. / HDL cholesterol as a therapeutic target has been the focus over the past 20 years mainly because its plasma concentrations are inversely correlated with the risk of coronary events. However, recent clinical trials involved the addition of niacin or CETP inhibitors to a statin in patients with CHD who had well controlled LDL-C levels have failed to show evidence of a significant reduction in cardiovascular events. Studies on the capacity of HDL to promote reverse cholesterol transport pathway have suggested that this is a better predictor of prevalent atherosclerotic disease than HDL-C itself. The main purpose of my project was to evaluate the impact of metabolic context, inflammation and genetics on modulation of HDL functionality. I have shown that extended release niacin/laropiprant treatment reduces atherogenic postprandial lipoproteins in patients with metabolic disorders stabilized by statins, having consequences on reverse cholesterol transport pathway and HDL functionality. Moreover, I have shown that infectious diseases such as HIV, induce an alteration in the capacity of HDL particles to stimulate cholesterol efflux from human macrophages. I have also shown that mutations causing high levels of HDL-C, are characterized by the presence of functional HDL in their capacity to stimulate reverse cholesterol pathway. However such patients are not systematically protected against cardiovascular disease highlighting the complex relationship between cholesterol efflux and the prediction of cardiovascular events. Those results point out the relevance of developing therapeutic approaches targeting HDL function and reverse cholesterol transport pathway.

Cette thèse comprend trois essais empiriques portant sur certains aspects des modèles de décision des ménages, qui font l'objet de recherches intensives. Le premier essai de cette thèse porte sur l'identification jointe de la règle de partage des ressources entre les époux et leurs courbes d'Engel individuelles de certains biens assignables et non assignables. Nous avons récupéré les courbes d'Engel individuelles relatives aux dépenses alimentaires en utilisant la demande des ménages d'une part et la part des aliments consommés individuellement d'autre part. Les résultats empiriques indiquent que les femmes sont plus susceptibles que les hommes d'accroître leur demande de nourriture pour le ménage, suite à une augmentation de leur part de revenu. Toutefois la consommation alimentaire propre aux femmes s'accroît moindrement par rapport à la hausse de leur part de revenu que dans le cas des hommes. Quant aux enfants, leur consommation alimentaire réagit plus à une hausse de la part budgétaire des femmes qu'elle ne réagit à celle des hommes. Ce résultat suggère que non seulement les femmes ont tendance à dépenser plus sur les enfants mais aussi qu'elles le font au détriment de leur propre consommation. La contribution de cet essai découle de la mise en évidence de cette observation qui n'est possible que grâce au fait que nous disposons d'informations sur les consommations individuelles. De plus, nous utilisons un mécanisme résultant des travaux de Bourguignon et al. (2009) qui permet de récupérer les courbes d'Engel individuelles à partir de la demande des ménages. Le deuxième essai de cette thèse porte sur l'estimation empirique d'une forme réduite de la part des dépenses consacrées aux besoins de chaque enfant au sein des ménages. Cette identification nous a permis d'effectuer des analyses de pauvreté au niveau individuel et au niveau des ménages. Bien qu'il soit connu qu'assimiler la pauvreté des enfants à celle de leur ménage d'appartenance peut déboucher sur des erreurs d'appréciation, le manque d'information sur l'affectation précise des biens dans le ménage quant à lui, rend difficile une analyse de la pauvreté au niveau des enfants. Dans cet essai nous avons surmonté partiellement ce problème grâce à une enquête novatrice qui a recueilli des renseignements sur la distribution d'une fraction importante des dépenses des ménages. Les résultats empiriques indiquent que la contribution respective des femmes et des enfants au revenu du ménage, le niveau d'éducation relative de l'enfant par rapport à celui du chef de ménage et l'âge de l'enfant, affectent de manière significative la part des dépenses du ménage consacrées aux besoins de l'enfant. Nous avons ensuite utilisé les dépenses prédites de chaque enfant pour calculer les indicateurs de pauvreté et les comparer aux mêmes indicateurs calculés avec les données des ménages. Les résultats de cette analyse indiquent que, lorsqu'elle est évaluée au niveau individuel, la pauvreté semble toucher plus d'enfants que lorsqu'elle est évaluée au niveau des ménages. Le troisième essai de cette thèse vise à comprendre l'impact potentiel du risque de VIH/SIDA sur les interactions entre les conjoints. L'analyse empirique est basée sur l'effet du test de dépistage du VIH avant le mariage sur la propension des hommes à commettre la violence physique ou sexuelle envers leurs conjointes. Nous pensons que les conseils qui précèdent ou suivent le dépistage, rendent les hommes plus conscients d'une part du risque d'infection et d'autre part, de la rareté des femmes en bonne santé. Cette conscientisation va pousser les hommes à éviter les comportements à risque tels que les relations extraconjugales mais également à prendre soin de leurs femmes. Les violences domestiques vont donc baisser du fait de l'élimination des causes potentielles de conflits que sont les relations extraconjugales mais aussi du fait de l'attitude conciliatoire et protective des hommes envers leurs femmes. Nos résultats empiriques basés sur des données du Rwanda révèlent l'existence d'effets causaux significatifs et négatifs des dépistages prénuptiaux sur les deux formes de violence domestique considérées. Ces résultats suggèrent que la promotion des tests de dépistage avant le mariage peut être utilisée comme un moyen de lutte contre la violence domestique.

Les hépatites B (VHB) et C (VHC) constituent un problème de santé publique, particulièrement dans les pays à faible ou moyen revenu. Au Mali, Afrique de l'Ouest, peu de données existent sur la prévalence de la co-infection par ces hépatites et le Virus de l'Immunodéficience Humaine (VIH) chez les groupes vulnérables comme les travailleuses du sexe (TS). Cette étude transversale conduite à Bamako (ville principale du Mali), chez 400 TS (200 VIH+ et 200 VIH-) avait pour but de déterminer la prévalence et les facteurs associés à l'antigène HBs d'une part et aux anticorps anti-VHC d'autre part. Un questionnaire a été administré, des prélèvements sanguins et un auto-prélèvement vaginal ont été effectués. Les prévalences ont été présentées selon le statut par rapport au VIH avec un intervalle de confiance (IC) à 95% et la régression logistique multivariée a été utilisée pour les mesures d'association. La prévalence de l'antigène HBs et des anticorps anti-VHC étaient, respectivement, de 6,5% et 4,5 % chez les VIH+ et 8,5 % et 6,0 % chez les VIH-. En analyses multivariées, l'âge au premier rapport sexuel payant (moins de 18 ans) et la présence d'anti-VHC étaient fortement associés au VHB (Rapport de Cote ajusté [RCa]; Intervalle de Confiance à 95% [IC95%] : 3,3; 1,24, 8,63) et 3,7; 1,21, 11,54, respectivement). Seul, l'antigène HBs était associé aux anticorps anti-VHC (RCa; IC95% : 4,1; 1,29, 12,56). La fréquence relativement élevée des hépatites virales B et C chez les TS vivant ou non avec le VIH au Mali nécessiterait un programme de prévention mieux adapté à leur condition de vie et de travail. / Hepatitis B (HBV) and C (HCV) are a public health problem, particularly in low- and middle-income countries. In Mali, West Africa, few data exist on the prevalence of co-infection with these hepatitis and Human Immunodeficiency Virus (HIV) among vulnerable groups such as female sex workers (FSWs). This cross-sectional study conducted in Bamako (main city of Mali), among 400 FSWs (200 HIV+ and 200 HIV-) aimed to determine the prevalence and factors associated with HBs antigen on one hand and HCV antibodies on the other. A questionnaire was administered, blood samples were taken and a vaginal self-sample was collected. Prevalences are presented according to HIV status with 95% Confidence Intervals (CI) and multivariate logistic regression was used for measures of association. The prevalence of HBsAg and HCV antibodies were 6.5% and 4.5% in HIV+ and 8.5% and 6.0% in HIV- women, respectively. In multivariate analyses, age at first sexual intercourse (less than 18 years) and presence of anti-HCV were strongly associated with HBV (adjusted Odds Ratio [aOR]; 95%[CI]: 3.3; 1.24, 8.63 and 3.7; 1.21, 11.54, respectively). Only HBsAg was associated with HCV antibodies (aOR; 95%CI: 4.1; 1.29, 12.56). The relatively high frequency of viral hepatitis B and C among FSWs living with or without HIV in Mali would require a targeted prevention programme.

Titre de l'écran-titre (visionné le 7 août 2023) / L'infection à virus de l'immunodéficience humaine (VIH) demeure un problème de santé publique mondiale. La majorité des nouvelles infections concernent les populations clés dont les hommes ayant des relations sexuelles avec d'autres hommes (HARSAH). L'usage de la prophylaxie préexposition (PrEP) orale, moyen de prévention de l'infection à VIH sûr et efficace, trouve son intérêt au sein de cette population. Dans le cadre d'un projet visant à démontrer la faisabilité de la PrEP orale chez les HARSAH du Bénin, nous avons analysé les facteurs qui prédisaient l'intention de continuer à utiliser la PrEP à la fin du projet, après 12 mois de suivi. La PrEP orale était proposée en prise quotidienne ou à la demande (avant l'adoption d'un comportement à risque élevé pour le VIH). La préférence des HARSAH pour la PrEP orale ou la PrEP injectable (Cabotégravir injectable à longue durée d'action), si elle était disponible, a été également évaluée. La cohorte a été suivie d'août 2020 à décembre 2021. Les variables à l'étude faisaient partie d'un modèle intégrateur de prédiction du comportement comprenant la théorie de l'action raisonnée, la théorie du comportement planifié et la théorie des comportements interpersonnels. Une régression logistique multivariée a été utilisée pour déterminer les facteurs prédictifs de l'intention de continuer à prendre la PrEP orale. L'aire sous la courbe Receiver Operating Characteristic (ROC) a permis de déterminer la capacité prédictive du modèle. La préférence pour le Cabotégravir a été évaluée avec le test exact de Fisher. Les participants recrutés étaient 204 dont 84,8% ont participé à la visite finale. L'intention de continuer l'utilisation de la PrEP était forte selon l'échelle de Likert chez 54,9% de ces participants. La perception de contrôle, la norme identitaire, la norme morale (qui sont des construits du modèle intégrateur et l'inquiétude d'être infecté par le VIH sous PrEP prédisaient tous positivement une forte intention alors que le niveau d'étude était associé négativement avec la forte intention. La capacité prédictive du modèle était de 93,5% témoignant de sa bonne performance. Le désir de changement pour la PrEP injectable était plus marqué chez les HARSAH sous PrEP quotidienne que chez ceux sous PrEP à la demande (54,5% vs 36,1%, p = 0,0119). Les hommes sous PrEP quotidienne considéraient aussi la PrEP injectable comme étant la plus acceptable (55,4%, vs 34,4%, p < 0,001). Les variables du modèle intégrateur étaient de bons prédicteurs de l'intention. La PrEP injectable pourrait être une bonne alternative à la PrEP orale quotidienne. De plus, elle permettrait d'atténuer les problèmes d'observance liés à la PrEP orale quotidienne. / Human immunodeficiency virus (HIV) infection remains a global public health problem. Most new infections occur in key populations, including men who have sex with men (MSM). The use of oral pre-exposure prophylaxis (PrEP), a safe and effective means of preventing HIV infection, is of interest to this population. As part of a project aimed at demonstrating the feasibility of oral PrEP among MSM in Benin, we analyzed the factors that predicted intention to continue using PrEP at the end of the project, after 12 months of follow-up. Oral PrEP was offered on a daily or on-demand basis (prior to the adoption of high-risk HIV behavior). Men's preference for oral PrEP or injectable PrEP (long-acting injectable Cabotegravir), if available, was also analyzed. The cohort was followed from August 2020 to December 2021. The variables under study were part of an integrative behavior prediction model comprising the theory of reasoned action, the theory of planned behavior and the theory of interpersonal behavior. Multivariate logistic regression was used to determine factors that predict the intention to continue taking oral PrEP. The area under the Receiver Operating Characteristic (ROC) curve was used to determine the predictive power of the model. Preference for Cabotegravir was assessed using Fisher's exact test. A total of 204 participants were recruited, 84.8% of whom attended the final visit. Intention to continue PrEP use was strong according to the Likert scale in 54.9% of these participants. Perception of control, identity norm, moral norm (which are constructs of the integrative model) and concern about becoming HIV-infected while on PrEP were positively predicted strong intention. Education level was negatively associated with strong intention. The predictive capacity of the model was 93.5%, testifying to its good performance. The desire to switch to injectable PrEP was more pronounced among MSM on daily PrEP than among those on event-driven PrEP (54.5% vs. 36.1%, p = 0.0119). Also, men on daily PrEP considered injectable PrEP as the most acceptable option (55,4%, vs 34,4%, p < 0,001). The variables in the integrative model were good predictors of the intention. Injectable PrEP could be a good alternative to daily oral PrEP. It could also attenuate the compliance problems with daily PrEP.

Les microARN (miARN) sont des ARN endogènes d'environ 21 à 24 nucleotides (nt) produits lors du clivage d'une structure d'ARN en forme de tige-boucle par la ribonucléase Dicer III (ARNase III). Il a été rapporté que certains vims peuvent être ciblés par les composantes protéiques de la voie des miARN et représenter une source exogène de miARN. Les génomes d'ARN des vims de l'hépatite C (VHC) et de Timmunodéficience humaine de type 1 (VIH-1) possèdent des structures secondaires d'ARN en tige-boucle pouvant représenter des substrats potentiels pour Dicer. Les résultats rapportés ici suggèrent que la région fortement structurée en 5' du génome du VHC, nommée "Internai ribosome entry site" (1RES), est réfractaire au clivage par Dicer in vivo. Cependant, nous montrons que TARN "Transactivating response" (TAR) du VIH-1 qui est situé en 5' de tous les transcrits viraux, est clivé par Dicer in vivo et représente une source de deux miARN fonctionnels nommés miR-TAR-5p et miR-TAR-3p. La caractérisation de ces miARN a permis de constater qu'un clivage asymétrique de TARN TAR par Dicer permet le relarguage préférentiel de miR-TAR-3p, dont les effets régulatoires sur un ARN messager (ARNm) rapporteur sont plus prononcés. Enfin, la protéine B23/Nucléophosmine (NPM) a été identifiée par analyse protéomique et son ARN caractérisé pour être ciblé par les miARN viraux dans des cellules exprimant Télément TAR du VIH-1. Certaines données préliminaires concernant la fonction de B23/NPM dans la pathogenèse du VIH-1 sont discutées. Ces travaux portant sur l'identification de miARN dérivant de la région TAR du VIH-1 et d'un ARNm cible de la cellule hôte permettent une meilleure compréhension des mécanismes moléculaires associés à l'infection par le VIH-1 et mettent en lumière la complexité des interactions hôte-virus.

À l'heure actuelle, environ 40 millions de personnes vivent avec le VIH/SIDA et plus de 30 millions de décès ont été constatés depuis le début de cette épidémie, la plupart des victimes vivant dans les pays en développement. Depuis les premières manifestations du SIDA et la découverte du virus d'immunodéficience humaine, des progrès considérables ont été réalisés en ce qui concerne notre compréhension des interactions hôte/pathogène, du système immunitaire et des mesures préventives et sociales à adopter pour contrer la progression du VIH/SIDA. Cependant, malgré tous ces progrès, le nombre d'individus infectés par le virus d'immunodéficience humaine ne cesse de croître, ce qui suggère que les outils thérapeutiques actuels et les approches préventives et sociales déployées à ce jour ne sont pas suffisants. C'est donc dire que d'autres stratégies de traitement doivent être envisagées et développées pour freiner la dissémination du virus et permettre son éradication. À ce sujet, les thèmes de recherche concernant les interactions hôte/pathogène et le rôle de nombreux facteurs cellulaires dans le cycle réplicatif du VIH-1, pourraient mener à l'élaboration éventuelle de telles stratégies. Actuellement, plusieurs études démontrent que des molécules dérivées de la cellule hôte incorporées dans l'enveloppe virale peuvent modifier son cycle de vie en lui conférant les caractéristiques correspondant à leurs fonctions physiologiques normales. D'une façon générale, ces molécules permettent au virus d'échapper à la réponse immunitaire humorale, d'augmenter son attachement aux cellules cibles et d'amorcer des événements signalétiques dans les cellules avec lesquelles il entre en contact. Cette thèse décrit en première partie l'importance de deux de ces molécules, soient les molécules du complexe majeur d'histocompatibilité de classe II (CMH-II) et la molécule de costimulation CD86. Les résultats obtenus à l'aide de plusieurs approches complémentaires démontrent que l'incorporation de ces molécules permet au VIH-1 de présenter un antigène nominal à une cellule lymphocytaire T CD4+ reconnaissant de façon spécifique le peptide logé dans la niche peptidique du CMH-II incorporée dans l'enveloppe virale. Cette présentation antigénique induit des signaux de transduction menant à la translocation nucléaire des facteurs transcriptionnels NF-KB et NFAT, permettant ainsi l'activation de la transcription du génome viral dans les lymphocytes T CD4+. La deuxième partie de cette thèse est consacrée aux myeloid related proteins (MRP). Ces molécules, qui ne sont pas incorporées dans l'enveloppe virale, sont impliquées dans la réponse inflammatoire et on les retrouve en quantité augmentée suite à l'infection par le VIH-1. Nos résultats indiquent que les MRP activent la réplication du VIH-1 dans les cellules lymphocytaires T CD4+ par l'intermédiaire du facteur transcriptionnel NF-KB. Globalement, les travaux présentés dans cette thèse permettent d'approfondir notre compréhension du rôle joué par ces facteurs cellulaires dans la réplication du VIH-1. / At the moment, more than 40 millions individuals Worldwide are affected by the human immunodeficiency virus (HIV) and since the beginning of this pandemic, more than 30 millions deaths have occurred. The important developments regarding HIV pathogenesis, therapeutic strategies, immune System, and preventive measures have not been sufficient to stop or even to slow down the dissemination of HIV/AIDS around the world. Today, research topics regarding the role of cellular factors and host/pathogens interactions on the virus life cycle could eventually lead to the development of efficient strategies to fight the spread of this epidemic. The studies presented in this thesis describe how three types of molecules modulate its replicative cycle. These molecules include the major histocompatibility complex class II molecules and the CD86 costimulatory molecule, both of which are embedded into human immunodeficiency virus envelope, and MRPs, which are proteins involved in inflammatory responses that are not embedded in viral envelope. Using different strategies, we observed that the incorporation of CD86 costimulatory molecule and of the major histocompatibility complex class II molecules enable HIV-1 to present nominal antigens to CD4+ T lymphocytes, activate them through NF-KB and NFAT transcriptional factors, thereby activating viral replication. We also observed that MRPs activate HIV-1 replication in CD4+ T cells via NF-KB transcriptional factor. The work presented here deepens our understanding of how cellular factors can modulatevirus replication.

Les progrès thérapeutiques dans le domaine de l'infection par le Virus de l'Immunodéficience Humaine (VIH) ont transformé le pronostic de cette pathologie. Les personnes séropositives pour le VIH se heurtent aux mêmes difficultés rencontrées dans les autres types de pathologie chroniques : difficultés à suivre un traitement régulièrement, effets secondaires des traitements et perte d'efficacité des molécules. Afin d'améliorer la prise en charge de ces personnes, de nouvelles molécules comme, par exemple, les analogues non-nucléosidiques (ANN), ont été développées en substitution aux antiprotéases. Notre travail de recherche concerne l'évaluation prospective des facteurs prédictifs de l'échec virologique des ANN, hors essai thérapeutique. Concernant les complications à long terme, nous avons comparé les modifications lipidiques des deux principales molécules appartenant à la classe des ANN. Considérant qu'il n'allait pas de soi qu'une simplification de posologie de deux à une prise par jour pouvait significativement améliorer l'observance, nous avons réalisé un essai randomisé afin de comparer les deux posologies. Enfin, nous avons réalisé une revue de la littérature des essais de non infériorité dans le domaine des traitements du VIH. Nous avons ainsi mis en évidence l'impact des interruptions de traitement pendant plus de 48 heures sur le risque de résistance génotypique aux ANN et confirmé le rôle indépendant de la dépression dans le risque d'échappement virologique. Le remplacement de l'efavirenz par la névirapine réduisait le risque cardiovasculaire à 10 ans de 20%. Le passage à la névirapine en une prise par jour était bien toléré mais l'augmentation moyenne du taux d'observance mesuré par pilulier électronique était marginale. Enfin, les standards méthodologiques relatifs aux essais de non infériorité étaient rarement respectés, rendant l'interprétation de ces études difficile. Notre travail a ainsi contribué à améliorer les connaissances de la prise en charge à long terme des personnes infectées par le VIH en explorant les relations complexes entre les données virologiques, les propriétés pharmacologiques des molécules et les comportements humains

Après intégration dans le génome cellulaire de l’hôte, l’expression des rétrovirus dépend d’éléments agissant en cis localisés dans la longue répétition terminale 5’ (LTR5’) et la région leader, de facteurs de transcription cellulaires et viraux agissant en trans ainsi que de l’organisation chromatinienne du provirus intégré. Notre laboratoire a précédemment identifié dans le génome du rétrovirus HIV-1 (Human Immunodeficiency Virus type 1) une région intragénique importante (nt 4079-6026, où nt +1 est le début de U3 dans le LTR5’) composée du fragment 5103, du site hypersensible aux nucléases SH7 et du fragment 5105. Lors de ce travail, nous avons caractérisé physiquement et fonctionnellement différents sites de liaison pour des facteurs de transcription cellulaires localisés dans la région intragénique du virus HIV-1, dont trois sites de liaison pour le facteur inductible AP-1, dans des expériences de retard de migration sur gel et de transfection transitoire. Nous avons montré l’importance de ces trois sites AP-1 pour la réplication virale au niveau transcriptionnel dans des expériences d’infection et d’immunoprécipitation de la chromatine. De plus, nous avons caractérisé l’activité transcriptionnelle associée à la région intragénique du virus HIV-1. D’autre part, la structure nucléosomale du provirus intégré et les modifications épigénétiques associées jouent un rôle crucial pour l’expression des rétrovirus. La répression transcriptionnelle du rétrovirus oncogène BLV (Bovine Leukemia Virus) lui permet d’échapper au système immunitaire de son hôte bovin et favorise ainsi l’apparition de tumeurs. Dans ce contexte, nous avons montré que la méthylation de l’ADN au niveau du promoteur viral permet le maintient de la latence transcriptionnelle. En effet, la méthylation des dinucleotides CpGs localisés dans le LTR5‘ empêche le recrutement in vivo des facteurs de transcription activateurs CREB/CREM/ATF. Nous avons également montré que l’activation transcriptionnelle de l’expression du BLV par la combinaison PMA/ionomycine s’accompagne d’un remodelage chromatinien rapide mais transitoire au niveau du promoteur viral par des expériences de marquage indirect des extrémités et d’immunoprécipitation de chromatine. Nous avons ensuite démontré l’importance du site de liaison pour le facteur de transcription PU.1 et de la E-box 4 qui lie USF-1/-2, tous deux localisés dans la région dont l’accessibilité aux nucléases s’accroît après traitement des cellules, pour l’activation transcriptionnelle de l’expression virale par cette combinaison d’inducteurs. En conclusion, notre travail devrait permettre une meilleure compréhension des mécanismes transcriptionnels et épigénétiques régulant l’expression des rétrovirus HIV-1 et BLV. / Doctorat en Sciences / info:eu-repo/semantics/nonPublished

Les facteurs de transcription de la famille Rel/NF-κB régulent l’expression d’un grand nombre de gènes impliqués dans les réponses immunitaires et inflammatoires ainsi que dans la régulation de la prolifération et de la survie cellulaire. Le caractère transitoire de l’activation de NF-κB est donc crucial pour poterger les cellules de l’autoxicité due à une trop forte expression des gènes cibles de ce facteur de transcription. Dans le cadre de notre thèse de doctorat, nous avons étudié les mécanismes moléculaires régulant la cinétique d’activation de NF-κB, en accordant une attention toute particulière au complexe kinase IKK, qui semble être le regulateur clef de l’activation de NF-κB. Nos résultats suggèrent que p300 pourrait réguler la durée d’activation des IKKs d’une part par acétylation directe, et d’autre part, indépendamment de son activité HAT, en stabilisant les IKKs et donc en prolongeant leur demie-vie et par conséquent leur activation.<p>Certains virus utilisent la voie de signalisation NF-κB afin de promouvoir leur propre réplication. C’est le cas du virus HIV-1 (Human Immunodeficiency Virus type 1), qui contient dans son promoteur deux sites de liaison pour NF-κB. Notre laboratoire a précédemment montré que l’utilisation du TNFα en combinaison avec la TSA, active l’expression virale de manière synergique. L’administration combinée d’un activateur du facteur NF-κB et d’un inhibiteur de désacétylases pourrait, en présence d’une thérapie anti-HIV-1 efficace, être envisagée dans le but d’éliminer les cellules réservoirs infectées de manière latente. L’utilisation thérapeutique du TNFα ou de la TSA étant inenvisageable en raison de leur toxicité, nous avons étudié l’effet d’autres substances ayant un plus grand potentiel thérapeutique et nous avons apporté une preuve de principe du potentiel thérapeutique de la coadministration de plusieurs activateurs viraux (inhibiteurs de HDACs[HDACIs]+inducteurs de la voie NF-κB) pour réduire le pool des réservoirs cellulaires infectés de manière latente.<p> / Doctorat en Sciences / info:eu-repo/semantics/nonPublished

Malgré de nombreux progrès thérapeutiques, la seule réelle option thérapeutique des malades atteints d’une cirrhose terminale ou d’hépatite aiguë fulminante est la transplantation hépatique, cependant limitée par la pénurie d’organes. De même, la prise en charge des pathologies pancréatiques aigues et chroniques consiste essentiellement en traitements supportifs et des complications.<p>La réaction inflammatoire au cours des maladies hépatiques et pancréatiques joue un rôle majeur dans l’évolution de ces maladies car elle influence la sévérité de l’affection aiguë et se complique fréquemment de fibrose et de cirrhose. <p>Les chimiokines constituent une famille de peptides possédant des propriétés chimiotactiques et activatrices sur les leucocytes, et de ce fait jouent un rôle primordial dans la réaction inflammatoire en recrutant des cellules inflammatoires vers un site lésé. Les chimiokines exercent leurs activités en se liant à une famille de récepteurs à 7 hélices transmembranaires situés sur les leucocytes. <p>Le CCR5 est un récepteur pour les chimiokines CCL3 (MIP-1α), CCL4 (MIP-1β), CCL5 (RANTES) et CCL8 (MCP-2). Le CCR5 joue un rôle important de corécepteur dans l’infection par le virus de l’immunodéficience humaine. Chez l’humain, il existe une mutation relativement fréquente du CCR5, appelée CCR5Δ32, qui confère chez les patients homozygotes pour la mutation une protection presque complète contre l’infection par le virus de l’immunodéficience humaine. Plus récemment, la mutation CCR5Δ32 a été rapportée comme étant associée à certaines maladies hépatiques et des traitements expérimentaux chez l’homme par inhibiteurs du CCR5 ont entraînés des cas d’hépatotoxicité sévère. De même, il a été rapporté que l’expression pancréatique de CCR5 était augmentée chez les patients atteints de pancréatite chronique. Cependant, le rôle du récepteur CCR5 et de ses ligands dans la pathogénie des maladies hépatiques et pancréatiques n’est pas connu.<p>Dans un premier temps, nous avons démontré dans un modèle expérimental d’hépatite médiée par les lymphocytes T qu’il existe une production hépatique de CCL3, CCL4 et CCL5 au cours de la maladie et que le foie des souris malades est caractérisé par une infiltration accrue de cellules CCR5+. En utilisant des souris CCR5-déficientes, nous avons ensuite montré que l’absence de CCR5 est associée à une maladie plus sévère, à une production accrue de cytokines pro-inflammatoires et des chimiokines liant le CCR5 (CCL3, CCL4 et CCL5), ainsi que par un recrutement plus important de cellules inflammatoires, particulièrement des cellules CCR1+. Nous avons ensuite montré que la production accrue des ligands du CCR5 joue un rôle important dans l’exacerbation de la maladie observée chez les souris CCR5-déficientes, puisque leur neutralisation réduit fortement la sévérité de la maladie ainsi que le recrutement hépatique de cellules inflammatoires.<p>Dans un second temps, nous avons étudié l’expression et le rôle du CCR5 et de ses ligands dans un modèle murin de pancréatite aiguë sécrétagogue, induite par des injections répétées d’un analogue de la cholécystokinine. Précocément après l’induction de la maladie, nous avons observé une augmentation de l’expression de CCL2 (MCP-1), CCL3 et CCL4 alors que l’augmentation d’expression de CCL5 est observée plus tardivement au cours de la maladie. Nous avons ensuite montré que les souris CCR5-déficientes développent une pancréatite plus sévère, ainsi qu’une production accrue de CCL2, CCL3 et CCL4, et un infiltrat inflammatoire plus marqué que les souris ‘’wild-type’’. Nous avons également montré que la production accrue de ces chimiokines joue un rôle dans l’exacerbation de la pancréatite aiguë chez les souris CCR5-déficientes. En effet, la neutralisation simultanée de ces chimiokines par des anticorps monoclonaux réduit significativement la sévérité de la maladie pancréatique chez ces souris. De même, la neutralisation simultanée des ligands du CCR5 chez des souris wild-type réduit également la sévérité de la pancréatite aiguë, suggérant un rôle de ces molécules dans la pathogénie de la pancréatite aiguë.<p>En conclusion, nous avons montré que l’absence du récepteur CCR5 augmente la susceptibilité aux maladies inflammatoires hépatiques et pancréatiques expérimentales. Le développement d’inhibiteurs du CCR5 dans l’arsenal thérapeutique contre le virus de l’immunodéficience humaine devra tenir compte de ces données, d’autant plus que des cas d’hépatotoxicité sévère ont été récemment rapportés avec certains inhibiteurs en développement et que l’association du virus de l’immunodéficience humaine avec la présence de maladies hépatiques est fréquente. Enfin, ces travaux ouvrent de nouveaux champs d’investigation au niveau de l’étude d’association du CCR5Δ32 avec les maladies inflammatoires pancréatiques et hépatiques, et des perspectives thérapeutiques ciblant CCL3, CCL4 et CCL5. <p><p><p> / Doctorat en sciences médicales / info:eu-repo/semantics/nonPublished