Indiana University-Purdue University Indianapolis (IUPUI) / Plasmodium vivax malaria is geographically widespread and remains a significant public health burden in the Americas, Southeast Asia, and the western Pacific. In order to achieve the end goal of malaria eradication, a highly effective vaccine targeting P. vivax is urgently needed. Unlike pre-erythrocytic vaccines that aim to confer sterile immunity that prevents malaria infection altogether, Plasmodium vivax blood-stage vaccines aim to confer clinical immunity that protects against malarial disease by controlling parasitemia and mitigating the symptomatic manifestations of malaria after infection. To design an effective P. vivax blood-stage vaccine, it is essential to understand the acquisition and longevity of natural humoral immune responses against promising P. vivax blood-stage vaccine candidate antigens. We hypothesize that acute vivax malaria induces differential humoral immune responses against P. vivax antigens that exhibit antigen-specific kinetic and compositional profiles, which can be used to identify vaccine candidates that elicit durable humoral responses. Therefore, we compared the kinetic profiles and half-lives of naturally acquired IgG antibodies reactive against nine promising P. vivax blood-stage vaccine candidate antigens up to 180 days post-infection in Brazilians with acute vivax malaria. Naturally acquired IgG antibodies against these antigens have previously been associated with a reduced risk of vivax malaria. Among the P. vivax antigens evaluated, the merozoite antigen Pv12 elicited the most durable IgG antibodies, whereas the DBP-FL elicited the most short-lived responses. Neither patient age nor prior malaria exposure significantly correlated with the magnitude and durability of IgG responses to any P. vivax antigen. Seropositivity, against Pv12, was generally maintained for at least 30 days after acute vivax malaria. These findings suggest that a blood-stage vaccine targeting Pv12 may benefit from boosting IgG antibodies against this antigen after natural vivax “breakthrough” infections. Further studies will be needed to determine the Pv12-specific memory B cell response as well as the functional role for naturally acquired Pv12-specific antibodies in reducing parasitemia and/or clinical disease. In summary, the current study has provided insight into the longevity of IgG antibody responses to important P. vivax antigens after an acute malaria episode.

Thesis (M.S.)--Case Western Reserve University, 2008. / [School of Medicine] Department of Pathology. Includes bibliographical references.

Plasmodium vivax is the most geographically widespread of the human malarias and is capable of causing severe debilitating disease. The parasite’s unique biology poses challenges to control of the disease and the understanding of its epidemiology. It is less researched and well understood than the more deadly P. falciparum. In this thesis, spatial relapse patterns and models of endemicity and clinical disease were applied to generate robust estimates of the P. vivax burden to address a key knowledge gap in malaria epidemiology. First, a review of the distribution of the parasite, its vectors and populations at risk found nearly one third of the global population living at risk, and more potential vectors than P. falciparum. In spite of low observed endemicity, the public health impact of P. vivax is likely to have been seriously underestimated in the past. To accurately define the burden of P. vivax it was necessary to improve understanding of one of the parasite’s most unique and challenging aspects, its ability to relapse. A meta-analysis of individual records of relapse showed that relapse periodicity varied systematically by geographic region and could be categorized by nine global regions. The nine regions were applied to a model to quantify the relationship between prevalence of infection and incidence of clinical disease. As relapse would have an influence on both measures, separate relationships were drawn for each relapse zone. The prevalence-incidence model was used to translate maps of predicted endemicity into measures of clinical burden. The evidence-base of P. vivax prevalence was poor in some regions and therefore a burden estimate based on surveillance reports was also derived. Reported cases must be adjusted for parameters such as under-reporting and treatment-seeking behaviours. A model used to fill gaps in treatment-seeking data available from national household surveys was developed to allow burden to be estimated using both cartographic modelling and surveillance reporting methods. To improve fidelity, the results of the two approaches were combined to enumerate P. vivax burden globally. The results and conclusions of these studies are discussed with recommendations for how these findings influence our understanding of P. vivax epidemiology and implications for future control and elimination efforts.

Submitted by Nuzia Santos (nuzia@cpqrr.fiocruz.br) on 2016-09-09T16:09:40Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao_DIP_AnaLuizadeOliveiraMelo.pdf: 1146825 bytes, checksum: f9548418adf5b24a482d3266c5926802 (MD5) / Approved for entry into archive by Nuzia Santos (nuzia@cpqrr.fiocruz.br) on 2016-09-09T17:55:26Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertacao_DIP_AnaLuizadeOliveiraMelo.pdf: 1146825 bytes, checksum: f9548418adf5b24a482d3266c5926802 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-09T17:55:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao_DIP_AnaLuizadeOliveiraMelo.pdf: 1146825 bytes, checksum: f9548418adf5b24a482d3266c5926802 (MD5) Previous issue date: 2016 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisa René Rachou. Belo Horizonte, MG, Brasil / A invasão dos eritrócitos pelos parasitos da malária garante o sucesso da infecção humana e, consequentemente, o desenvolvimento da doe nça clínica. Desse modo, existe grande interesse no desenvolvimento de vacina s que possam induzir anticorpos que bloqueiem o ciclo sanguíneo do parasito . No caso de Plasmodium vivax , o principal antígeno candidato à vacina é a Duffy binding protein II (DBPII), único ligante conhecido para a invasão dos eritrócit os humanos. Embora anticorpos naturalmente adquiridos contra a DBPII induzam proteçã o, faz-se necessário avaliar se esta resposta gera memória imunológica de longa dur ação. O trabalho aqui desenvolvido teve como objetivo principal avaliar s e a DBPII e outros antígenos candidatos à vacina contra P. vivax induzem resposta imune humoral (anticorpos e células B de memória, MBCs) de longa-duração. A popul ação de estudo foi constituída de indivíduos com história de exposição única a P. vivax , ocorrida em 2003, durante um surto de transmissão autóctone na região metropolitana de Belo Horizonte, Minas Gerais. Para tal, foram selecionado s indivíduos que se infectaram (casos, n=13) ou não (não-casos, n=12) durante o pe ríodo de transmissão. Como controle negativo, foram incluídos indivíduos nunca expostos à malária (BH, n=9). A resposta de anticorpos foi avaliada pela sorologia c onvencional (ELISA) utilizando como antígenos diferentes variantes da DBPII (Acre1 e Sa l1) bem como outros antígenos candidatos à vacina (MSP1 19 e EBP2). A resposta de células B de memória para os mesmos antígenos foi avaliada pelo e nsaio imunoenzimático que detecta MBCs diferenciadas em células secretoras de anticorpos IgG (ELISpot). Após padronizar o ensaio de ELISpot com sucesso, os n ossos resultados demonstram que: (1) MBCs antígeno-específicas de vida- longa (12 anos após exposição) foram detectadas em todos os indivíduos do grupo caso e em parte dos indivíduos não-casos (58%), o que sugere que infecções assintomáticas podem ter ocorrido na época do surto; (2) a resposta celular de DBPII foi variante-específica, sendo a variante Acre1 (frequente na Amazônia brasile ira) a mais imunogênica. Neste contexto, a cepa de referência Sal1 ou um antí geno sintético desta cepa (DEKnull) apresentaram pouca ou nenhuma imunogenicidad e; (3) a MSP1 19 , presente na superfície do parasito, foi o antígeno m ais imunogênico, seguido da EBP2, proteína recém-descrita em P. vivax ; (4) em relação a sorologia convencional, anticorpos IgG para os diferente antígenos testados n ão perduraram após 12 anos de exposição única a P. vivax . Em conjunto, os resultados aqui apresentados permitiram concluir que uma única e breve exposição a P. vivax é capaz de induzir MBCs antígeno-específicas de vida longa, reforçando a importância de se estudar estas células na avaliação da memória imunológica da malária, particularmente, aquela induzida por antígenos candidatos à vacina. / Erythrocyte invasion by malaria parasites is a key e vent in ensuring human infeccion and clinical development of the disease. Therefore, there is great interest in generating blocking antibodies through a blood-stage vac cine, preventing erythocyte invasion. Plasmodium vivax Duffy binding protein region II (DBPII) is the only kn own ligand for human reticulocyte invasion, hence being a n attractive vaccine candidate against asexual blood-stage P. vivax . Although there is evidence that naturally acquired anti-DBPII antibodies induce protection, it i s necessary to access if this response produces sustained long-lasting immunologica l memory. Thereafter, the present work aimed to evaluate whether DBPII and other P. vivax vaccine candidates induce long-lasting humoral immune response (antibod ies and memory B cells, MBCs). For this purpose, we studied a population with a single P. vivax exposure in 2003, during an autochthonous outbreak in Minas Gera is state, a non-endemic area of Brazil. We selected 25 individuals exposed to the outbreak being 13 with confirmed P. vivax infection (cases) and 12 who had not being diagnosed with malaria (non-cases). As negative control, were includ ed 9 individuals never exposed to malaria (residents in Belo Horizonte). Antibody re sponses to P. vivax blood antigens were evaluated by conventional serology (ELISA), focusing on two DBPII variants (Acre1 e Sal1) and other vaccine candidates (MSP1 19 e EBP2). B cell memory responses to the same antigens were evaluated through Enzyme-Linked ImmunoSpot (ELISpot) targeting IgG secreting cells. After stablishment of the ELISpot assay, our results showed that: (1) long-last ing antigen-specific MBCs were detected 12 years after exposure in all of the case s and in part of the non-cases (58%), wich suggests the occurrence of asymptomatic i nfections during the outbreak; (2) cellular response to DBPII was variant-specific, wi th greater immunogenicity of variant Acre1 (most frequent in the Amazon region). Re garding cellular response, the reference strain Sal1 and the synthetic construct ( DEKnull) showed low or absence of immunogenicity; (3) MSP1 19 , presente in the parasite’s surfasse, was highly immunogenic, followed by EBP2, P. vivax ’s new predicted protein; (4) regarding conventional serology, IgG antibody responses to the different antigens here tested did not last after 12 years of exposure to P. vivax . Altogether our results showed that a single brief exposure to P. vivax is able to induce antigen-specific long-lasting MBCs, reinforcing the importance of this cells in acc essing immunological memory in malaria, particularly, that induced by vaccine cand idates.

Made available in DSpace on 2018-08-01T21:35:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_11601_Ata Defesa Filomena Alencar.pdf: 367178 bytes, checksum: 98d9dbf57524895e8047d690e2c631b2 (MD5) Previous issue date: 2017-12-11 / O comportamento da malária residual na região extra-amazônica difere daquele da região Amazônica, não apenas pelo reduzido número de casos registrados, mas também pela dispersão dos casos em área geográfica dentro do bioma de Mata Atlântica. Compreender o papel do portador assintomático de DNA de Plasmodium na cadeia de transmissão nessas áreas é importante para o aperfeiçoamento das políticas de eliminação e controle da endemia. Duas coortes foram conduzidas na região montanhosa do Espírito Santo. Uma para avaliar a persistência de positividade de DNA de Plasmodium em indivíduos detectados em estudo anterior e outra para calcular a incidência de DNA de Plasmodium entre moradores na vizinhança de um caso detectado. Na primeira, dos 48 portadores detectados num estudo realizado entre 2001 e 2004, 37 foram localizados e reavaliados entre 2010 e 2011, em três coletas com intervalo de três meses entre elas. Apenas dois moradores tiveram resultados de PCR positivos, revelando Plasmodium malariae como no primeiro inquérito. Na segunda coorte, após a notificação do primeiro caso de malária em 2010, os habitantes vivendo em um raio de 2 km em torno de sua casa, convidados a participar de um estudo de acompanhamento, responderam um questionário e forneceram amostras de sangue para PCR e gotas espessas e esfregaços, inicialmente e a cada visita de seguimento, em intervalos de três meses, durante 21 meses. Noventa e duas pessoas foram incluídas para acompanhamento. Na primeira coleta, todos eles eram assintomáticos. Um indivíduo foi positivo para Plasmodium vivax, um para Plasmodium malariae e um para P. vivax e P. malariae, correspondendo a uma prevalência de 3,3% (2,2% para cada espécie). Durante o seguimento, foram registrados quatro novos casos positivos na PCR (dois para cada espécie), correspondendo a uma incidência de 2,5 infecções/100 pessoas-ano ou 1,25 infecções/100 pessoas-ano para cada espécie. A análise com um modelo matemático de transmissão, utilizando uma baixa frequência de portadores humanos e a densidade vetorial na região, calculada com base em estudos anteriores na mesma localidade, cujos resultados foram submetidos a uma regressão linear, sugere que a cadeia de transmissão provavelmente não se baseia unicamente em portadores humanos, independentemente de serem sintomáticos ou não. Os achados da primeira coorte sugerem que moradores não tratados desta região extra-Amazônica inicialmente positivos para DNA de Plasmodium podem tornar-se negativos sem desenvolver sintomas aparentes da doença. Embora a possibilidade de reinfecção não possa ser descartada, a positividade para P. malariae em dois indivíduos, na primeira e na segunda pesquisas, pode ser compatível com estado de portador desta espécie em longo prazo. Sendo a maioria dos casos sintomáticos de malária na área decorrente de infecção por P. vivax, o impacto epidemiológico desse carreamento de P.malariae seria limitado. A baixa incidência de casos e a baixa frequência de portadores de malária assintomáticos tornam improvável que a cadeia de transmissão na região seja baseada unicamente em hospedeiros humanos, pois os casos são isolados uns dos outros por centenas de quilômetros e frequentemente por longos períodos de tempo, reforçando a hipótese de transmissão zoonótica.

El objetivo del presente trabajo fue identificar antígenos relevantes de valor diagnóstico de aislados de P. vivax y P. falciparum provenientes del departamento de Loreto, mediante la técnica de inmunoblot. Se seleccionaron pacientes entre 3 y 64 años con diagnóstico de malaria, gota gruesa positiva, procedentes de centros de salud en el departamento de Loreto. Fueron analizadas 4 mezclas de antígenos, una de P. falciparum (PF1) y tres de P. vivax (PV1, PV4 y PV5), preparadas a partir de 36 muestras de pacientes con alta parasitemia por P. vivax (2 700 – 69 000 parásitos/μL) y P. falciparum (2 750 – 10 000 parásitos/μL). Las mezclas de antígenos fueron enfrentadas a 39 sueros (12 de P. falciparum y 27 de P. vivax) mediante ensayos de inmunoblot.

Orientador: Jayme Augusto de Souza Neto / Resumo: A malária é uma doença ocasionada por protozoários do gênero Plasmodium e transmitida ao homem por meio da picada de mosquitos do gênero Anopheles. No Brasil a maior parte dos casos da doença concentra-se na região Amazônica, onde grande parte das infecções é causada por Plasmodium vivax, e o A. darlingi é o principal vetor. Estudos recentes indicam que a microbiota e que o sistema imune dos mosquitos do gênero Anopheles, em particular, componentes do sistema complemento, possuem uma importante função na determinação da competência vetorial, podendo modular o desenvolvimento do parasita no mosquito. Apesar da importância epidemiológica de A. darlingi, pouco se sabe a cerca da composição de sua microbiota intestinal, e sobre as interações moleculares deste vetor com P. vivax. Neste cenário, temos como principais objetivos: 1) Avaliar o papel de LRIM1 (Leucine-rich repeat protein 1), um dos genes do complemento, na interface A. darlingi-P.vivax, e 2) Averiguar determinados aspectos da interação entre microbiota- A.darlingi- P.vivax. Quanto às análises de LRIM1, as topologias das árvores filogenéticas mostram maior relação filogenética entre A. darlingi e A. albimanus, apresentando-os como táxons irmãos. Para a realização dos ensaios funcionais, sintetizamos RNA dupla-fita com base na sequência codificadora de LRIM1 de A. darlingi e microinjetamos no tórax de fêmeas desta espécie, as quais foram posteriormente submetidas a uma infecção por P. vivax. Quanto aos ensaios funcionais... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Malaria is a disease caused by protozoa of the genus Plasmodium and transmitted to humans through the bite of mosquitoes of the genus Anopheles. In Brazil, most cases of the disease are concentrated in the Amazon region, where most of the infections are caused by Plasmodium vivax, and A. darlingi is the main vector. Recent studies indicate that the microbiota and the immune system of Anopheles mosquitoes, in particular components of the complement system, play an important role in the determination of vector competence and can modulate the development of the parasite in the mosquito. Despite the epidemiological importance of A. darlingi, little is known about the composition of its intestinal microbiota, and about the molecular interactions of this vector with P. vivax. In this scenario, we have as main objectives: 1) To evaluate the role of LRIM1 (Leucine-rich repeat protein 1), one of the complement genes, in the interface A. darlingi-P.vivax, And 2) To ascertain some aspects of the interaction between microbiota- A.darlingi- P. vivax. As for the LRIM1 analyzes, the topologies of the phylogenetic trees show a higher phylogenetic relationship between A. darlingi and A. albimanus, presenting them as sister taxa. To perform the functional assays, we synthesized double-stranded RNA based on the coding sequence of A. darlingi LRIM1 and microinjections in the thorax of females of this species, which were subsequently subjected to a P. vivax infection. Regarding the functional tes... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

“Plasmodium vivax” és el paràsit causant de malària humana amb més àmplia distribució i és responsable cada any de 100-300 milions de casos clinics, incloent algunes manifestacions severes i mort. P. vivax envaeix principalment reticulòcits I és àmpliament acceptat que els reticulòcits infectats no citoadhereixen en els capil•lars d'òrgans interns, tenint un pas obligat per la melsa. Es desconeix com P. vivax escapa del pas per la melsa, el nostre major òrgan limfoide, i evita així ser fagocitat. La nostra hipòtesi postula que aquest paràsit indueix la formació de cèl•lules de barrera a la melsa, on reticulòcits infectats citoadhereixen de manera específica per protegir-se de l’atac dels macròfags. Per avançar en aquesta hipòtesi, hem utilitzat el model murí de malària en ratolins Balb/c infectats amb una soca noletal que infecta principalment reticulòcits, P. yoelii 17X, semblant a P. vivax, i una soca letal amb tropisme per normòcits, P. yoelii 17XL, semblant a P. falciparum. Per investigar la funció i l’estructura de la melsa en la malària, així com les característiques dinàmiques dels processos impulsats pel paràsit, hem implementat la microscòpia intravital i la ressonància magnètica de la melsa del ratolí en infeccions experimentals. Notablement, hem observat major acumulació de paràsits, motilitat reduïda, pèrdua de direccionalitat, augment en el temps de residència i ressonància magnètica alterada només a la melsa dels ratolins infectats amb 17X. D'altra banda, aquestes diferències s’han associat amb la formació d'una barrera d'origen fibroblàstic induïda en la polpa vermella de les melses de ratolins infectats amb la soca no-letal, acompanyada d'evasió dels macròfags de la polpa vermella i adherència dels glòbuls vermells infectats a la barrera. A més, hem confirmat l'adhesió de reticulòcits infectats per P. vivax de pacients humans a crioseccions de melsa humana i explorat el paper de les proteïnes Vir en aquesta adhesió. Les nostres dades suggereixen que en la malària no-letal el pas per la melsa és diferent del que es coneix en altres espècies de Plasmodium i obren noves vies per a estudis funcionals i estructurals d'aquest òrgan limfoide en la malària. / Plasmodium vivax is the most widely distributed human malaria parasite and responsible each year for 100-300 million clinical cases including severe disease and death. P. vivax invades predominantly, if not exclusively, reticulocytes and it is amply accepted that it does not sequester in the deep capillaries of inner organs having an obligate passage through the spleen. Questions thus remain as how P. vivax escapes spleen-clearance and establishes chronic infections. We have advanced a hypothesis postulating that this parasite induces the formation of spleen barrier cells where infected reticulocytes specifically cytoadhere protecting themselves from spleen macrophage-clearance. To advance this hypothesis, we have used the rodent malaria model of Balb/c mice infected with the reticulocyteprone non-lethal P. yoelii 17X strain, resembling P. vivax, and the normocyte-prone lethal P. yoelii 17XL strain, resembling P. falciparum. To investigate the function and structure of the spleen in malaria, as well as the dynamic characteristics of parasitedriven processes, we implemented the intravital microscopy and magnetic resonance imaging of the mouse spleen in experimental infections. Noticeably, there was higher parasite accumulation, reduced motility, loss of directionality, increased residence time and altered magnetic resonance only in the spleens of mice infected with 17X. Moreover, these differences were associated with the formation of a strain-specific induced spleen tissue barrier of fibroblastic origin, with red pulp macrophage-clearance evasion and adherence of infected red blood cells to this barrier. We further reported adhesion of P. vivax-infected reticulocytes from human patients to cryosections of human spleens and explored the role of Vir proteins in such an adhesion. Our data suggest that in reticulocyte-prone non-lethal malaria, passage through the spleen is different from what is known in other Plasmodium species and open new avenues for functional/structural studies of this lymphoid organ in malaria.

Made available in DSpace on 2016-04-15T13:05:48Z (GMT). No. of bitstreams: 2 ana_ventura_ioc_dout_2010.pdf: 942500 bytes, checksum: 7eb3e9ecc5715ddb9201b782e0e2a30b (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2010 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / No Brasil, a malária é endêmica na Região Amazônica, onde ocorrem mais de 99% dos registros da doença, que é determinada pelo Plasmodium vivax em 84,4% dos casos. Segundo dados do Ministério da Saúde do Brasil, em 2008, quase a metade (47,8%) dos casos de malária notificados no país ocorreu em crianças e adolescentes salientando a importância do conhecimento das particularidades clínicas, laboratoriais e imunológicas da malária nessa faixa etária, particularmente sobre a anemia, um dos sinais cardinais da doença. Assim, foram avaliadas 81 crianças e adolescentes com malária vivax e 40 indivíduos do grupo controle, recrutados no Programa de Ensaios Clínicos em Malária do Instituto Evandro Chagas (Balem/Pará) e no Serviço de Diagnóstico de Malária, no município de Augusto Correa (Pará), no período de outubro de 2002 a agosto de 2005. hemograma e outros parâmetros hematológios, dosagem plasmática de citosinas e de anticorpos anti-P. vivax, anticardiolipina e antimembrana de eritrócitos (teste de antiglobulina direto e ELISA) foram realizados no primeiro dia de atendimento (D0), ao final do tratamento (D7) e no primeiro controle de cura (D30). Procedeu-se também ao rastreamento de doença falciforme e deficiência de Glicose 6 fosfato desidrogenase (G6PD), dosagem de ferritina sérica e exame parasitológico de fezes. A pesquisa do plasmódico em gota espessa foi realizada diariamente até que fossem obtidas duas lâminas negativas consecutivas. Autoctonia foi observada em 77,8% dos casos de malária. Houve distribuição semelhante entre os gêneros e predomínio em adolescentes. A maioria era eutrófica. Para 43,2% dos pacientes tratava-se do primeiro episódio da doença. A parasiemia média foi de 6.543 parasitas/mm³, tendo o clearance da parasitemia ocorrido no quarto dia de tratamento em 92,6% dos casos. Nos pacientes com primoinfecção, a parasitemia foi maior do que naqueles com passado de maçaria. Estes pacientes também apresentaram significativo retardo no clearance da parasitemia. Os pacientes apresentaram contagens menores de leucócitos, que estavam correlacionados positivamente com a parasitemia e com a presença de anticorpos IgG e IgM, no momento do diagnóstico. Houve também uma diminuição no número de plaquetas, que estiveram negativamente correlacionadas à parasitemia. Observou-se correlação, inversa, entre número de reticulócitos e taxa de hemoglobina, no inicio e fim do tratamento e, direta, entre os níveis de ferritina sérica (significativamente maiores nos pacientes primoinfectados) e parasitemia. De forma surpreendente e ao contrário do referido em outros estudos, foram observados níveis plasmáticos de fator de necrose tumoral (TNF) menores nos pacientes do que no grupo controle. Os níveis, baixos em D0, estavam, de forma curiosa, correlacionados positivamente com a hemoglobina e negativamente com o tempo de diagnóstico e se elevaram significativamente até D30. A Interleucina-10 (IL-10), inversamente elevada em D0, mostrou uma correlação positiva com a parasitemia e esteve associada à presença de anticorpos IgM (mas não IgG) anti-P. vivax, antes de diminuir e atingir valores normais em D30. Autoanticorpos antieritrocíticos avaliados por ELISA declinaram mais rapidamente do que os revelados pelo teste e antiglobulina direto e do que os anticardiolipina. Além de 2,7 vezes mais chances de apresentar anemia, os pacientes tiveram significativamente mais anemia moderada/grave. A anemia esteve associada ao retrato diagnóstico e à demora de desaparecimento da parasitemia, mas não se mostrou associada a presença de anticorpos anti-P. vivax, à presença de autoanticorpos antimembrana de eritrócitos e nem a fatores como deficiência de G6PD, traço falciforme, desnutrição e parasitose intestinal. A anemia também esteve associada a maiores concentrações de IL-10 e à presença de anticorpos anticardiolipina, neste caso, somente para anemia moderada/grave. A associação com o TNF foi inversa, sendo os níveis supreendentemente menores no grupo de anêmicos, particularmente naqueles com anemia moderada/grave. Á luz das variáveis estudadas, que compuseram o quadro clínico epidemiológico, imunológico e laboratorial, em particular os eventos relacionados à anemia nestes pacientes commalária vivax, enfatiza-se a necessidade de pesquisas complementares na Amazônia Brasileira envolvendo maior número de crianças e adolescentes com malária, visando a confirmação dos resultados obtidos / In Brazil, malaria is endemic in the Amazon Region, being responsible for more than 99% of the registered cases of the disease, where P. vivax accounts for 84.4% of the cases. According to Ministery of Health of Brazil, in 2008, almost h alf (47.8%) of malaria registered in the country committed children and adolescents, what em phasizes how important is the knowledge of the clinical, immunological and labora torial characteristics of malaria in this age group, particularly related to anemia, one of t he paramount signal of the disease. On this purpose, it was evaluated 81 children and adolescen ts with vivax malaria and 40 control individuals, enrolled at Program of Clinical Essays in Malaria at Evandro Chagas Institute (Belém/Pará) and at Facility Malaria Diagnosis in A ugusto Correa Municipality (Pará), from October 2002 to August 2005. Hemogram and other hem atological parameters, plasmatic cytokine and P.vivax antibod y levels, anticardiolipin antibodies and anti-erythr ocyte membrane antibodies (direct antiglobulin test and E LISA) levels were performed in the first day of attendance (D0), in the last day of treatmen t (D7) and in the first control day of cure (D30). Screening for sickle cell disease and G6PD d eficiency, ferritin serum levels and parasitological fecal exam were also performed. Pla smodium thick blood film was ruled day by day until two negative consecutive blood films w ere obtained. Autochthony was observed in 77.8% of the malarial cases. Malaria had similar distribution among gender and a predominance of cases in adolescents. The majority of patients were eutrophic. To 43.2% patients, it was the first malarial episode. The me an parasitemia was 6.543 parasites/mm3; clearance of parasitemia occurred in the 4 th day of treatment in 92.6% of cases. Primo infected patients had higher parasitemia than patients with previous malaria episodes, as well as significance delay on parasitemia clearance. Patien ts had low values of leukocytes which were positive correlated with parasitemia and with the presence of IgG and IgM antibodies, at the diagnosis. Also, it was observed low values of platelets, and they had a negative correlation with parasitemia. It was observed an in verse correlation between retyculocytes and hemoglobin rate, in the beginning and in the en d of treatment, and a direct correlation between ferritin serum levels (significance increas ed in primo infected patients) and parasitemia. Unexpectedly and in the opposition of what has been referred in other studies, it was observed low plasmatic TNF levels in patients c ompared to control group. Curiously, TNF levels, low in D0, were positive correlated wit h hemoglobin and negative correlated with time to onset the diagnosis, and they had a signifi cance increase up to D30. IL-10 levels, inversely increased in D0, had a positive correlati on with parasitemia and was associated to the presence of P. vivax IgM antibodies (not to IgG), before decreasing to normal values in D30. Autoantierythrocytes antibodies evaluated thr ough ELISA had a faster decline than those evaluated through direct antiglobulin test an d than the anticardiolipin antibodies. Besides 2.7 more chance of anemia, patients had sig nificance moderate/severe anemia. The anemia was associated to delay on the diagnosis and to delay on achieving the clearance of parasitemia, but it was not associated to the prese nce of anti- P. vivax antibodies, neither to the presence of anti-erythrocyte membrane autoantibodie s, nor to G6PD deficiency, sickle cell trait, malnutrition and intestinal parasitosis. Als o, the anemia was associated with high IL-10 levels and to the presence of anticardiolipin antib odies, in this case, only to moderate/severe anemia. The association with TNF was inverse, with low levels in the group of anemic patients, particularly those with moderate/severe a nemia. Based on the studies of the variables that composed the clinical, epidemiological and lab oratorial features of vivax malaria in these patients, particularly the events related to anemia , it is highlighted the necessity of complementary research enrolling more children and adolescents with malaria in order to consolidate these data.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina. Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia. / Made available in DSpace on 2013-07-15T23:40:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 213571.pdf: 3165886 bytes, checksum: 023dbff8900bec900d8d6b2eea6e15b6 (MD5) / O Trypanosoma vivax é um hemoparasita causador de tripanosomose em