Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2016-05-02T15:38:00Z No. of bitstreams: 1 renatadefreitasmendes.pdf: 1070020 bytes, checksum: 429a7ec44a9e4f2575f881684d3f64e0 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2016-06-03T13:00:10Z (GMT) No. of bitstreams: 1 renatadefreitasmendes.pdf: 1070020 bytes, checksum: 429a7ec44a9e4f2575f881684d3f64e0 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-03T13:00:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 renatadefreitasmendes.pdf: 1070020 bytes, checksum: 429a7ec44a9e4f2575f881684d3f64e0 (MD5) Previous issue date: 2014-07-28 / Xylopia sericea, Annonaceae, espécie nativa do Brasil, é conhecida popularmente como “embiriba”, “banana-de-macaco”, “pindaíba”, “pimenta-de-macaco”. Além do uso das sementes como condimento, a espécie é utilizada no paisagismo, na indústria caseira de cordoaria e para fins medicinais no tratamento da dor, inflamação e desordens gastrointestinais. Os objetivos desse trabalho foram contribuir com o estudo de alguns dos usos medicinais da espécie e ampliar o conhecimento acerca de seu potencial químico e biológico. Para isso, os frutos de X. sericea foram extraídos com metanol para obtenção do extrato metanólico (EBM), e também tiveram seu óleo essencial (OXS) extraído por hidrodestilação. A análise fitoquímica de EBM foi realizada para identificação das principais classes de metabólitos especiais e a determinação dos teores de fenóis totais e flavonoides. OXS foi caracterizado por CG-EM. In vitro, foram avaliadas para EBM e OXS as atividades: antioxidante frente aos métodos do sequestro de radicais livres (DPPH), sistema β-caroteno/ácido linoleico e fosfomolibdênio; antibacteriana pela determinação da CIM (concentração inibitória mínima) e CBM (concentração bactericida mínima) para 10 cepas de importância clínica; leishmanicida para formas promastigotas de L. amazonensis e L. chagasi; citotóxica para as linhagens de células tumorais Jurkat, HL-60, MCF-7, THP-1, MDA-231, HCT-116 e células não tumorais VERO. In vivo, foi avaliada a atividade anti-inflamatória pelo modelo do edema de orelha induzido por óleo de cróton, por via oral (EBM) e tópica (EBM e OXS). A toxicidade aguda de EBM, bem como sua dose letal média (DL50) foram determinadas. Fenóis, flavonoides, cumarinas, saponinas, taninos, alcaloides e terpenoides/esteroides foram identificados em EBM, sendo o teor de fenóis totais 358,2 ± 33,1 mg/g em equivalentes a ácido tânico e o teor de flavonoides 28,8 ± 8,2 mg/g em equivalentes a quercetina. Foi possível identificar, por CG-EM, 63 substâncias que corresponderam a 80 % dos constituintes de OXS. Dentre elas, espatulenol (16,42 %), guaiol (13,93 %) e D - germacreno (8,11 %) foram as majoritárias. Quanto à atividade antioxidante, EBM e OXS apresentaram pelo método do DPPH, CI50 de 16,37 e 49,16 μg/mL, respectivamente; CI50 de 49,16 e 6,92 μg/mL pelo método do β-caroteno/ácido linoleico; 0,75 mg/mg de EBM e 2,30 mg/mg de OXS equivalentes à ácido ascórbico pelo método do fosfomolibdênio. Quanto à atividade antibacteriana, as cepas mais sensíveis à EBM foram S. aureus, E. cloacae e B. cereus, com CIM de 7,8; 7,8 e 31,25 μg/mL, respectivamente, para OXS, S. aureus, E. cloacae, K. pneumoniae e B. cereus com CIM de 7,8; 7,8; 62,5 e 15,63 μg/mL, respectivamente. Além disso, pode-se verificar que EBM e OXS apresentaram atividade bactericida para E. faecalis (1000 μg/mL) e para B. cereus (31,25 μg/mL), respectivamente. Em relação à atividade leishmanicida, EBM apresentou CI50= 42,51 μg/mL para L. amazonensis, porém não apresentou atividade contra as formas promastigotas de L. chagasi. OXS foi avaliada apenas para L. amazonensis e não apresentou atividade. EBM foi capaz de inibir a proliferação celular em 56 % para HL-60, não apresentando toxidade significativa para as demais células tumorais, inclusive as células VERO. A aplicação de EBM por via tópica reduziu o edema de orelha nas doses de 1; 0,5 e 0,1 mg/orelha em 41,8 %, 99,1 % e 56,9 %. OXS foi capaz de reduzir o edema nas doses de 1 e 0,5 mg/orelha em 43,4 % e 54,2 %. Por via oral, EBM foi capaz de reduzir o edema nas doses de 300, 100 e 50 mg/kg em 36,3 %, 29,5 % e 32,0 %. Não foram observados sinais de toxicidade para EBM por via oral, sendo a DL50 > 2000 mg/kg. Os resultados apresentados são relevantes uma vez que EBM e OXS apresentaram atividades biológicas promissoras o que justifica a continuação do estudo. / Xylopia sericea, Annonaceae, is a species native from Brazil, popularly known as "embiriba", "banana-de-macaco", "pindaíba", "pimento-de-macaco". Besides being used as condiment, the species is used in landscaping, in home rope factory and for medicinal purposes in the treatment of pain, inflammation, and gastrointestinal disorders. The aims of this study was to corroborate some of X. sericea medicinal use and to expand the chemical and biological knowledge on this species. For this, the fruits of X. sericea were extracted with methanol to obtain the methanolic extract (EBM), and also had its essential oil (OXS) extracted by hydrodistillation. The phytochemical study of EBM was conducted to identify the main classes of special metabolites and to determine of the contents of total phenols and flavonoids. OXS was characterized by GC-MS. In vitro, EBM and OXS were evaluated for the following activities: antioxidant by DPPH scavenging, β-carotene bleaching, and phosphomolybdenum assays; antibacterial by determining the MIC (minimum inhibitory concentration) and MBC (minimum bactericidal concentration) for 10 strains of clinical importance; leishmanial for promastigote forms of L. amazonensis and L. chagasi; cytotoxic against the tumor cell lines Jurkat, HL-60, MCF-7, THP-1, MDA-231, HCT-116 and no tumor Vero cells. The in vivo anti-inflammatory activity was evaluated by the croton oil-induced ear edema method, orally (EBM) and topically (EBM and OXS). The acute toxicity of EBM and the median lethal dose (LD50) were determined. Phenols, flavonoids, coumarins, saponins, tannins, alkaloids and terpenoids/steroids were identified in EBM. The content of total phenols was 358.2 ± 33.1 mg/g expressed as equivalent to tannic acid and of flavonoids was 28.8 ± 8 2 mg/g expressed as equivalents to quercetin. Sixty three compounds were identified in OXS corresponding to 80 % of the oil constituents. Among them, spathulenol (16.42 %), guaiol (13.93 %) and germacrene D (8.11 %) were the major. Regarding the antioxidant activity, EBM and OXS presented by the DPPH method, IC50 of 16.37 and 49.16 μg/mL, respectively; IC50 of 49.16 and 6.92 μg/mL by β-caroten bleaching method; 0.75 mg/mg of EBM and 2.30 mg/mg of OXS equivalents to ascorbic acid by phosphomolybdenum method. Results for antibacterial activity showed that the most sensitive strains to EBM were S. aureus, E. cloacae and B. cereus with MIC of 7.8; 7.8 and 31.25 μg/mL, respectively. To OXS, S. aureus, E. cloacae, K. pneumoniae and B. cereus showed the highest sensitivity with MIC of 7.8; 7.8; 62.5 and 15.63 μg/mL, respectively. Furthermore, it was observed that EBM and OXS showed bactericidal activity for E. faecalis (1000 μg/mL) and B. cereus (31.25 μg/mL), respectively. Regarding leishmanicidal activity, EBM showed IC50 of 42.51 μg/mL for L. amazonensis, but showed no activity against L. chagasi. Moreover, OXS was evaluated only for L. amazonensis and showed no activity. EBM was able to inhibit cell proliferation by 56% for HL-60 and showed no significantive toxicity to the other tumor cells, and also Vero cells. Topical application of EBM reduced the ear edema caused by croton oil by 41.8 %, 99.1 % and 56.9 % at doses of 1; 0.5 and 0.1 mg/ear. OXS was able to reduce the edema at the doses of 1 and 0.5 mg/ear by 43.4 % and 54.2 %. Orally, EBM was able to reduce the edema at doses of 300, 100 and 50 mg/kg by 36.3 %, 29.5 % and 32.0 %. No signs of toxicity were observed for EBM, with an LD50 > 2000 mg/kg. The results are relevant since EBM and OXS showed promising biological activities which justifies the continuation of the study.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / Xylopia nitida and Xylopia sericea are commonly known as âembira-brancaâ and âpimenta do sertÃoâ, respectively, belonging to Annonaceae family. The chromatographic analysis of X. nitida roots allowed isolation of a trachlyobane diterpene, ent-trachlyoban-18,19-diol and its acetylated product, ent-18,19-diacetoxy-trachylobane, a kaurene diterpene, ent-kaur-16-en-18,19-diol, two aporphinic alkaloids, 5,6,6a,7-tetrahydro-1-methoxy-(6aS)-4H-benzo[de][1,3]benzodioxolo[5,6-g]quinoline e xylopine, and a glucoside, named 1-O-ethyl-β-D-glucopiranose. Also using chromatographic analysis of X. sericea fruits were obtained a kaurane diterpene, kauran-16β-ol and a diterpenes mixture, ent-kaur-16-en-19-oic acid and beyer-15-19-oic acid. The structures of these compounds were elucidated by spectroscopic studies (IR, MS and NMR). In the second part of this work, has been showed the diffusion-ordered spectroscopy (DOSY) as a powerful tool in natural product mixture analysis. The assignment of NMR signals to specific components in a mixture is a challenging task. DOSY has provided important progress in this area, allowing the signals originating from individual components of different molecular sizes to be distinguished. However, when the sizes of the compounds are similar and/or the spectra are overlapped, signal assignment can easily become intractable. The use of a co-solute in a matrix-assisted DOSY (MAD) experiment can be a useful solution, improving diffusional (and sometimes spectral) resolution by exploiting selective binding to the matrix. The challenge is to apply MAD to molecules with high structural similarity, for example in natural product mixtures. Various surfactants, including SDS, AOT and CTAB have previously been shown to be effective in MAD analysis. Here we present an important addition, the Brij family of nonionic surfactants. We demonstrate the use of Brij micelles and other systems in mixed solvents with a variety of mixtures relevant to natural products. / Xylopia nitida e X. sericea, conhecidas popularmente como embira-branca e pimenta do sertÃo, respectivamente, sÃo espÃcies pertencentes à famÃlia Annonaceae. A anÃlise cromatogrÃfica dos extratos hexÃnico e etanÃlico das raÃzes de X. nitida possibilitou o isolamento de um diterpeno de esqueleto traquilobano, ent-traquiloban-18,19-diol e seu derivado acetilado, ent-18,19-diacetÃxi-traquilobano, um diterpeno de esqueleto caureno, ent-caur-16-en-18,19-diol, dois alcalÃides aporfÃnicos, 5,6,6a,7-tetraidro-1-metoxi-(6aS)-4H-benzo[de][1,3]benzodioxolo[5,6-g]quinolina e xylopina e um glicosÃdeo, 1-O-etil-β-D-glicopiranose, todos de carÃter inÃdito na literatura, exceto os dois Ãltimos. AtravÃs da anÃlise cromatogrÃfica do extrato hexÃnico dos frutos de X. sericea foi possÃvel obter um diterpeno de esqueleto caurano denominado cauran-16β-ol e uma mistura de diterpenos, Ãcido ent-caur-16-en-19-Ãico e Ãcido beier-15-en-19-Ãico. O isolamento dos constituintes quÃmicos presentes nos extratos da raiz e frutos de X. nitida e X. sericea, respectivamente, foi realizada por mÃtodos cromatogrÃficos convencionais e a determinaÃÃo estrutural das substÃncias isoladas foi realizada a partir de mÃtodos espectromÃtricos como: IV, EM, RMN 1H, 13C e DEPT 135 incluindo tÃcnicas bidimensionais como, COSY, HSQC e HMBC. A primeira parte deste trabalho relata o estudo quÃmico das raÃzes de X. nitida e dos frutos de X. sericea. A espectroscopia ordenada por difusÃo ou DOSY (Diffusion Ordered Spectroscopy) provà um meio para uma âseparaÃÃo virtualâ de compostos, atravÃs de um mapa bidimensional onde em um eixo temos o deslocamento quÃmico e em outro observamos o coeficiente de difusÃo (D) das molÃculas na mistura. A separaÃÃo de sinais somente à possÃvel quando espÃcies difundem a diferentes velocidades. Na quÃmica de produtos naturais, frequentemente nos deparamos com misturas de compostos quimicamente semelhantes e de tamanhos muito similares, o que torna limitado o experimento DOSY tradicional. Entretanto, o coeficiente de difusÃo das substÃncias pode ser modificado pela adiÃÃo de co-solutos e/ou co-solventes, surgindo a partir daà a espectroscopia ordenada por difusÃo assistida por matriz (matrix-assisted DOSY ou MAD). VÃrios surfactantes, incluindo SDS, AOT e CTAB tÃm se mostrado efetivos em anÃlises por MAD. Neste trabalho, experimentos MAD foram realizados com algumas misturas de produtos naturais com similaridades estruturais utilizando o Ãcido perfluoro-octanÃico (PFOA), polivinilpirrolidona (PVP) e os surfactantes Brij 78 e 98, que por sua vez, ainda nÃo haviam sido utilizados para esse propÃsito. NÃs tambÃm demonstramos a formaÃÃo de micelas de Brij 78 e 98 em misturas dos solventes DMSO-d6 e D2O.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-12-01T12:21:44Z No. of bitstreams: 1 Wendel Jose Teles Pontes.pdf: 861006 bytes, checksum: 961fa7bfa809cad4e7404803afd41260 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-12-01T12:21:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Wendel Jose Teles Pontes.pdf: 861006 bytes, checksum: 961fa7bfa809cad4e7404803afd41260 (MD5) Previous issue date: 2006-02-01 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The present work has the objective to verify the chemical composition and the bio activity of essential oils form fruits and leaves of Protium heptaphyllum and of X. sericea, and the fresh and old oil resins of Protium bahianum, as well as the effect of plant extracts of Croton sellowii, C. micans, C. rhamnifolium, C. jacobinensis and Xylopia sericea, all native species of Pernambuco, on the mite T. urticae. Major constituent identified in the essential oil of fruits from P. heptaphyllum is α-terpene (47.57 %) whereas in the leaves are the sesquiterpenes 9-epi-cariofileno (21.35 %), trans-isolongyfolanone (10.70 %) and 14-hydroxy-9-epi-cariofilene (16.70 %). The fruit oil is more efficient against mites in comparison with the leaf oil. Both oils show a property of mortality and deterrence in oviposition in the highest concentration (10μL L-1 air) and only the essential oil of fruits induces repellence on T. urticae. The essentialoils of the two resins of Protium bahianum were analysed. The old resin shows a high percentage of oxygen containing sesquiterpenes (85.40 %) with high predominance of β-(Z)-santalol acetate (83.08 %). No sesquiterpene was found in the essential oil of the fresh resin, which comprises basically monoterpenes of hydrocarbons (42.37 %) and oxygenated monoterpenes (27.71 %), from which α-phellandrene (13.86 %) and 4-terpineol (7.44 %) arte the major components, respectively. The oils show toxicity against ants, but only the essentialoil of the fresh resin show repellence. Of the studied Croton extracts, the one of the leaves of C. sellowii is the most efficient, causing 69 % of mortality and only the leaf extract of C. jacobinensis is inactive. Mites’ fecundity was affected and all extract show repellence in the concentration of 1%. The major compounds in the essential oil of fruits of X. sericea are β-pinene and α-pinene. The leaf oil is comprised basically by cubenol followed by α-epi-muurolol. Hexane extracts of fruits and the essential oils of fruits and leaves show toxicity against mites. The xylopic acid even not provoking mortality reduces mites’ fecundity. / O presente trabalho tem por objetivo verificar a composição química e a bioatividade dos óleos essenciais de frutos e folhas de Protium heptaphyllum e de Xylopia sericea, e os óleos das resinas velha e fresca de Protium bahianum, bem como o efeito de extratos vegetais de Croton sellowii, C. micans, C. rhamnifolius, C. jacobinensis e X. sericea, todas estas espécies nativas de Pernambuco, sobre o ácaro rajado Tetranychus urticae. O constituinte majoritário identificado no óleo essencial dos frutos de P. heptaphyllum foi α-terpineno (47,57%), enquanto que nas folhas foram os sesquiterpenos 9-epi-cariofileno (21,35%), trans-isolongifolanona (10,70%) and 14-hidroxi-9-epi-cariofileno (16,70%). O óleo dos frutos foi mais eficiente contra o ácaro, comparado com o óleo das folhas. Ambos os óleos apresentaram mortalidade e efeitos sobre a oviposição na maior concentração (10μL / L de ar) e apenas o óleo essencial dos frutos provocou repelência à T. urticae. Os óleos essenciais dos dois exsudatos resinosos de P. bahianum foram analisados. A resina velha mostrou alta percentagem de sesquiterpenos, contendo oxigênio (85,40%) com alta predominância de β-(Z)-santalol acetato (83,08 %). Contudo, nenhum sesquiterpeno foi detectado no óleo essencial de resina fresca, sendo este constituído basicamente de monoterpenos hidrocarbonados (42,37%) e monoterpenos oxigenados (27,71%), dos quais α-phellandrene (13,86 %) e 4-terpineol (7,44 %) foram os componentes majoritários, respectivamente. Os óleos mostraram ação fumigante, mas somente o óleo essencial de resina fresca foi repelente. Dentre os extratos de Croton estudados, verificou-se que o extrato de folhas de C. sellowii apresentou melhor performance, causando 69% de mortalidade e apenas o extrato de folhas de C. jacobinensis foi inativo. A fecundidade dos ácaros também foi afetada e todos os extratos foram repelentes na concentração de 1%. Os compostos majoritários encontrados no óleo essencial dos frutos de X. sericea foram β-pineno e α-pineno. O óleo das folhas foi majoritariamente constituído por cubenol seguido por α-epi-muurolol. Os extratos hexânicos de frutos e os óleos essenciais de frutos e folhas foram tóxicos ao ácaro rajado. O ácido xylópico, apesar de não ter provocado mortalidade, reduziu a fecundidade do ácaro.