Até o momento a literatura não determinou qual o melhor estadio de maturação (imaturo ou maduro) para que o oocito mantenha sua competência para o desenvolvimento reprodutivo após a criopreservação. O objetivo deste estudo foi determinar em qual estadio meiótico (imaturo -VG (vesícula germinativa) ou maduro- MII (metáfase II)) o oócito é menos susceptível ao dano na criopreservação, utilizando modelo experimental bovino. Foram utilizados ovários de vacas abatidas em matadouro, após a aspiração dos folículos, os oócitos imaturos (VG) foram selecionados para a maturação in vitro e vitrificação, e foram divididos em três grupos: 1) oócitos maturados in vitro e não submetidos à vitrificação (CONTROLE); 2) oócitos vitrificados imaturos (VG), descongelados e submetidos à maturação in vitro (CRIO-MIV); 3) oócitos maturados in vitro (MII), vitrificados e descongelados (MIV-CRIO). Os oócitos foram avaliados quanto a: a)maturação nuclear pela técnica de orceína acética; b) integridade da zona pelúcida (ZP) através de microscopia de polarização; c) viabilidade oocitária pela técnica de DEAD-LIVE; d) desenvolvimento embrionário (taxa de clivagem, produção e eclosão de blastocistos) através da fertilização in vitro (FIV) e ativação partenogenética (AT). Não houve diferença na capacidade de maturação nuclear entre os oócitos frescos e descongelados no grupo CRIO-MIV (p=0,23). Em relação à zona pelúcida a totalidade dos oócitos (100%) nos três grupos apresentou leitura de zona pelúcida positiva, não havendo correlação com evolução embrionária posterior. Na análise de viabilidade celular pelo DEAD-LIVE verificou-se que houve redução da viabilidade do grupo MIV-CRIO (27%) quando comparado com controle (84%) (p<0,0001). Na análise do potencial de desenvolvimento embrionário o grupo controle apresentou melhores taxas de clivagem após FIV (80%) e AT (58%), do que os grupos CRIO-MIV (28%; p<0,0001; 28%; p=0,0002, respectivamente) e MIV-CRIO (26%; p<0,0001; 22%, p<0,0001,respectivamente). As taxas de formação de blastocisto e eclosão após FIV nos grupos CRIO-MIV, MIV-CRIO e após AT no grupo MIV-CRIO foram nulas. Houve a produção e eclosão de apenas um blastocisto no grupo CRIO-MIV após AT. No modelo experimental utilizado, o procedimento de vitrificação comprometeu parcialmente a viabilidade dos oócitos medida pela técnica de DEAD- LIVE e completamente o desenvolvimento embrionário subseqüente, independente do estadio de maturação meiótica (VG ou MII) durante a criopreservação. No entanto, oócitos vitrificados em estadio de VG e submetidos à MIV foram meioticamente competentes e progrediram até o estadio de MII, sugerindo que o dano não compromete a capacidade de maturação nuclear do oócito. Este estudo não conseguiu determinar qual o melhor estadio meiótico oocitário para criopreservação, já que os dois estadios meióticos (VG e MII) se mostraram igualmente prejudicados pela criopreservação em relação à capacidade reprodutiva. / Until the present literature has not achieved a consensus regarding the best maturation stage for oocyte to maintain their reproductive capacity after cryopreservation. The aim of this study was to determine, using an experimental bovine model, in which stage of development (VG stage, immature, or MII stage, post-maturation in vitro) the oocyte is less susceptible to damage during cryopreservation. Immature oocytes (VG) from the ovaries of slaughtered cows were selected for in vitro maturation or vitrification and divided into three groups. The first group (CONTROL) consisted of immature oocytes, matured in vitro without vitrification; the second group (CRYO-IVM) consisted of vitrified immature oocytes thawed and submitted to in vitro maturation; and the third group (IVM-CRYO) consisted of matured in vitro oocytes submitted to vitrification and thawing. The oocytes were evaluated for: nuclear maturation by acetic orcein staining; integrity of the zona pellucida using a polarized microscope; cell viability by the Dead-Live technique; and embryo development (cleavage, production and hatching rate) by in vitro fertilization and parthenogenetic activation. There was no difference in capacity of nuclear maturation between fresh and thawed oocytes (p=0.23). Regarding the zona pellucida (ZP), all oocytes (100%) of all three groups (control, CRYO-IVM and IVMCRYO) presented a positive ZP reading, with no correlation with later embryo evolution. DEAD-LIVE analysis of cell viability revealed reduction of viability in the IVM-CRYO group (27%) compared to control (84%) (p<0.0001) and to the CRYO-IVM group (56%) (p=0.017), with no difference between the last two groups (p=0.055). Analysis of the potential for embryo development by means of in vitro fertilization showed that the control group presented better cleavage and blastocyst formation rates than the CRYO-IVM (p<0.0001 and p<0.0001, respectively) and the IVM-CRYO (p<0.0001 and p=0.0004, respectively) groups. Analyzing the potential for embryo development the control group presented better cleavage by means of in vitro fertilization (80%) and parthenogenetic activation (58%) than the CRYOIVM (28%; p<0,0001; 28%; p=0,0002, respectively) and the IVM-CRYO groups (26%; p<0,0001; 22%, p<0,0001,respectively) Analysis of blastocyst formation rates and hatching after FIV and AT in CRYO-IVM and IVM-CRYO groups were null. Vitrification of bovine oocytes causes great impairment of their reproductive capacity regardless of the stage of maturation at the time of freezing. However the vitrified immature oocytes submitted to IVM maintained their capacity of nuclear maturation, as they achieved MII stage. This study was not able to determine which stage was better in reducing crio damage, as both stages (VG and MII) presented equally impaired by the process.

A flotação por ar dissolvido (FAD) é reconhecida atualmente como técnica eficiente para a etapa de clarificação em sistemas de tratamento de água para abastecimento. Diversos estudos vêm sendo realizados para aprimoramento dessa técnica e das características físicas das unidades FAD. Seguindo essa tendência, o presente trabalho teve como objetivo estudar os efeitos da velocidade na entrada da zona de contato (\'V IND.EZC\') na eficiência de clarificação de unidades retangulares FAD. Para o presente estudo foi utilizada água sintética preparada através da adição de 1,0 mg/L de ácido húmico e 8,5 mg/L de caulinita, a qual foi coagulada com sulfato de alumínio. A pesquisa foi dividida em duas fases: FASE I - com o emprego do Flotateste foram determinadas as dosagens adequadas de coagulante, o pH adequado de coagulação com a medição do potencial zeta das partículas (PZ), o gradiente médio de velocidade para floculação e o tempo médio para floculação para o tratamento da água sintética em estudo; FASE II - utilizando unidade FAD em escala piloto foram realizados ensaios para diferentes variações na altura da entrada da zona de contato (he) da câmara de flotação de forma a se obter diferentes valores de \'V IND.EZC\'. Nesta fase foram investigadas duas diferentes condições de coagulação as quais forneceram bons resultados por flotação: 1ª condição, aplicação de 42,5 mg/L de \'AL IND.2\'(\'SO IND.4\')IND.3\' e pH de 6,35 \'+ OU -\' 0,05 na qual resultou em PZ positivo em torno de +10 mV e para 2ª condição, aplicação de 22,5 mg/L de \'AL IND.2\'(\'SO IND.4\')IND.3\' e pH de 6,40 \'+ OU -\' 0,05 na qual resultou em PZ próximo de 0 mV. Os ensaios foram monitorados e comparados entre si os valores residuais de turbidez e cor aparente. Em todos os ensaios as taxas de aplicação superficial foram mantidas em faixas estreitas de verificando-se que os melhores resultados residuais dos parâmetros monitorados foram obtidos para a 1ª condição de estudo com valores de 0,66 NTU de turbidez e cor aparente igual a 2 uC (eficiências de 90,5 e 93,9% respectivamente). Os resultados demonstraram que para a faixa de valores de \'V IND.EZC\' entre 62,2 e 12.432,4 m/h pouca influência desse parâmetro foi observada na eficiência do processo de clarificação por flotação para ambas as condições de coagulação investigadas. Entretanto, a faixa de valores de \'V IND.EZC\' entre 124,3 e 180,2 m/h forneceram as melhores condições de flotação. Portanto, sugere-se tal faixa de valores como subsídio ao projeto de sistemas de flotação constituído pelas características apresentadas nesta pesquisa. / Dissolved air flotation (DAF) is currently recognized as an efficient technique for water clarification in water treatment systems. Several studies have been conducted to improve this technique and the physical characteristics of DAF units in order to constantly improve their performance. Following this trend, the aim of this research was to evaluate the effects of the velocity in the contact zone entrance on the clarification efficiency of rectangular DAF units. A DAF pilot plant fed with synthetic water prepared by adding 1.0 mg/L of humic acid and 8.5 mg/L of kaolin, and coagulated with aluminum sulfate was used. The research was divided into two phases: I) by using a laboratory scale DAF unit (Flotatest) the optimal coagulation, flocculation, and flotation conditions for the synthetic water previously described were investigated; and II) by using a DAF pilot unit tests were performed for different variations in the height of the contact zone entrance (he) of the flotation chamber to obtain different values of velocity in the contact zone entrance. In this phase two different conditions of coagulation were investigated yielding good results: 1st condition: application of 42.5 mg/L of \'AL IND.2\'(\'SO IND.4\')IND.3\' and pH 6.35 \'+ OR -\' 0.05, which resulted in zeta potential of positive particles around +10 mV, and 2nd condition: application of 22.5 mg/L \'AL IND.2\'(\'SO IND.4\')IND.3\' and pH 6.40 \'+ OR -\' 0.05, which resulted in zeta potential of particles near zero. The tests were monitored and the residual values of turbidity and apparent color were compared. In all experiments, the hydraulic surface loadings were kept in narrow bands of values (in the contact zone equal to 180 \'+ OR -\' 4 m/h and in the clarification zone, equal to 184 \'+ OR -\' 4 m/d). It was verified that the best residual results of the parameters monitored were obtained for the 1st condition with 0.66 NTU turbidity and apparent color equal to 2 uC (efficiencies of 90.5 and 93.9%, respectively). The results showed that for the range of values of velocity in the contact zone entrance between 62.2 and 12432.4 m/h little influence of this parameter was observed on the clarification efficiency process by flotation for both coagulation conditions investigated. However, as the range of values between 124.3 and 180.2 m/h provided the best flotation conditions, such a range should be adopted for the designs of rectangular DAF units.

Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2016-09-05T14:03:56Z No. of bitstreams: 1 lincolngoncalvesrodrigues.pdf: 12113094 bytes, checksum: a71d6a8eee9ef3abff577b9c9b802780 (MD5) / Approved for entry into archive by Diamantino Mayra (mayra.diamantino@ufjf.edu.br) on 2016-09-06T14:25:41Z (GMT) No. of bitstreams: 1 lincolngoncalvesrodrigues.pdf: 12113094 bytes, checksum: a71d6a8eee9ef3abff577b9c9b802780 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-06T14:25:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 lincolngoncalvesrodrigues.pdf: 12113094 bytes, checksum: a71d6a8eee9ef3abff577b9c9b802780 (MD5) Previous issue date: 2012-07-31 / Esta dissertação tem por finalidade analisar o desenvolvimento da agroindústria da cana-de-açúcar na sub-região central da zona da Mata mineira, entre os anos de 1822 e 1907. As distinções inerentes a este tipo de produção são evidenciadas de forma comparativa. A partir disso, relacionam-se as transformações econômicas ocorridas na produção açucareira na referida região ao crescimento do mercado interno; bem como à modernização dos setores de transportes e aos incentivos estatais à atividade açucareira. Tais mudanças, analisadas ao longo de quase um século, permitem destacar a presença de um grande número de pequenos engenhos na região, no início do séc. XIX e o crescimento da atividade açucareira, no decorrer dos anos, além da sua relação com a construção da Companhia Engenho Central Rio Branco, no final do séc. XIX. Investigar a história do açúcar na zona da Mata mineira, numa perspectiva comparativa, nos faculta entender com mais clareza as razões pelas quais a região se tornou uma das maiores produtoras de açúcar, no Estado de Minas Gerais, nas primeiras décadas do século XX. / The purpose of this dissertation is analyzing the development of the sugarcane agro industry in the Central sub-regions of the zona da Mata, in the state of Minas Gerais, between the years 1822 and 1907. Inherent distinctions to this kind of production are evidenced in a comparative way. From that, we can conclude there is a link in the economic transformation occurred in the sugar production, in that above mentioned region and growth of the internal market as well as the modernization of the transport sectors, state aids, tax incentives to this business. Such changes, analyzed for a long period of almost a century, allow us to point out the presence of a great number of small sugar-mill in the region, at the beginning of the XIX century and the growth of this activity over the subsequent years, besides its relation with the construction of the Companhia Engenho Central Rio Branco (Rio Branco Central Sugar-mill Company) at the end of the XIX century. Investigating the sugar history in Zona da Mata, in Minas Gerais, in a comparative perspective, allow us to understand clearly the reasons this region became one of the major sugarcane producers in the state of Minas Gerais in the first decades of the XX century.

Submitted by isabela.moljf@hotmail.com (isabela.moljf@hotmail.com) on 2017-05-04T10:32:21Z No. of bitstreams: 1 thiagofirminodesouza.pdf: 3089008 bytes, checksum: 15b29f3521bd0577c2d0bd80193c0e12 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2017-05-12T15:53:11Z (GMT) No. of bitstreams: 1 thiagofirminodesouza.pdf: 3089008 bytes, checksum: 15b29f3521bd0577c2d0bd80193c0e12 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-12T15:53:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 thiagofirminodesouza.pdf: 3089008 bytes, checksum: 15b29f3521bd0577c2d0bd80193c0e12 (MD5) Previous issue date: 2016-09-09 / Essa pesquisa tem como tema a formação da cafeicultura em Minas Gerais. Utilizamos principalmente a Lista Nominativa de Habitantes de 1831, os inventários post-mortem e o Registro Paroquial de Terras relativos a Mar de Espanha. Por meio desta documentação, pudemos realizar uma análise sócio-demográfica da população mardespanhense, bem como investigar a propriedade escrava e a propriedade agrária na localidade. Nos concentramos na primeira metade do século XIX, período de montagem da cafeicultura na Zona da Mata mineira, antes da consolidação do sistema agroexportador na região. / This research’s theme is the formation of coffee growing in Minas Gerais. We primarily use the List of Inhabitants of 1831, post-mortem inventories and the Parish Register of Lands of Mar de Espanha. Through this documentation, we conduct a socio-demographic analysis of Mar de Espanha’s population and investigate the slaveholdings and land ownership in the area. We focus on the first half of the nineteenth century, known as the coffee production assembly period in Minas Gerais’ Zona da Mata, before the consolidation of the coffee agroexport system in the area.

Orientador: Silvia Hunold Lara / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Filosofia e Ciências Humanas / Made available in DSpace on 2018-08-25T17:28:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Santos_MariaEmiliaVasconcelosdos_D.pdf: 2963653 bytes, checksum: fcafd4c3687c44519ea182ea519fc016 (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: Esta tese tem por objetivo investigar as experiências sociais dos trabalhadores dos engenhos no contexto emancipacionista da década de 1880 e do imediato pós-abolição. Nosso estudo aborda as quebras e as linhas de continuidade entre a escravidão e a liberdade vivenciadas pelos senhores de engenho e os trabalhadores da cana-de-açúcar, entre eles, a população pobre e livre, principalmente, a negra e os escravos na Zona da Mata Sul de Pernambuco, notadamente, entre os anos de 1884 e 1893. Para atingir tal fim, lançamos mão de um corpus documental composto por fontes históricas diversas, como os ofícios policiais, processos judiciais, jornais, censos populacionais, memórias e cartas. No cruzamento destas fontes buscamos vislumbrar os diversos significados da Abolição, da liberdade e do trabalho para os personagens presentes nesta tese. A pesquisa evidenciou que, ao longo dos anos de 1884 a 1893, a Mata Sul pernambucana passou por transformações promovidas pelo processo das lutas pelo fim da escravidão e pela Abolição, que alterou as relações sociais e políticas na região. Neste momento de reordenação das relações sociais e de trabalho, a população negra procurou conquistar maior autonomia e dignidade expressa pelo movimento entre cidades e engenhos, impondo limites à opressão social; já os proprietários, por sua vez, viveram momentos de descontentamento com a perda das antigas prerrogativas senhoriais e criaram estratégias para controlar a mão-de-obra de ex-escravos e livres pobres. Assim, objetivamos, sobretudo, demonstrar como as experiências da escravidão e da Abolição vivenciadas pelos trabalhadores do açúcar, de variadas maneiras, influenciaram nas complexas relações de trabalho, nas alianças e negociações estabelecidas no cotidiano e nos modos de reivindicar direitos no pós-abolição / Abstract: This thesis aims to investigate the social experiences of the mills' workers in the emancipationist context of the 1880s and the immediate post-abolition. Our study discusses the breaks and lines of continuity between slavery and freedom experienced by the Lord of sugar mill and the workers of sugar cane. Among them, the poor and free population, mainly the black people and the slaves at the South Zona da Mata of the State of Pernambuco, especially between the years 1884 and 1893. To achieve this end, we make use a corpus consisting of several historical sources, such as police letter, lawsuits, newspapers, population census, memoirs and letters. At the intersection of these sources we intend to see the different meanings of Abolition, freedom and work for the characters presented in this thesis. The research showed that, throughout the years 1884-1893, the South Zona da Mata has undergone transformations promoted by the struggle to end slavery and Abolition, which changed the social and political relations in the region. At this time, of reordering of the social and labor relations, the black population sought to conquer greater autonomy and dignity, expressed by movement between towns and mills, imposing limits to the social oppression. Already the sugar mill owners, in turn, lived moments of discontentment with the loss of the old lordly prerogatives, and created strategies to control the manpower of former slaves and poor free. So, we aimed, above all, demonstrate how the experiences of slavery and abolition lived by the sugar workers influenced in complex working relationships, alliances and negotiations established on everyday and modes of claiming rights in post-abolition / Doutorado / Historia Social / Doutora em História

O objetivo do presente trabalho é o de promover a comparação de dois contextos arqueológicos no tocante à ocupação por ceramistas Tupiguarani. Trata-se da Zona da Mata mineira, particularmente os sítios pesquisados pela equipe do MAEA-UFJF e o Complexo Lagunar de Araruama, no litoral do Rio de Janeiro, estudado por pesquisadores do Museu Nacional/UFRJ. Por um lado, as áreas apresentam sítios com uma cultura material aparentemente congruente em relação a pinturas e acabamentos plásticos de superfície, inseridos no mesmo período cronológico de ocupação. Por outro, algumas referências etno-históricas revelam a existência de possíveis conexões entre grupos locais Tupinambá situados no litoral e no interior, nos anos iniciais dos contatos com os colonizadores, especificamente, na área de influência do recorte territorial delimitado. Para todos os efeitos, o quadro esboçado configurou um cenário adequado para o teste de hipóteses referentes a processos de transmissão cultural, balizadas pelas conceituações de estilo e função oferecidas por Dunnell (1978). Na prática, isso fomentou a realização de uma diversidade de testes, focados especificamente nos tipos pasta, borda, acabamentos plásticos de superfície e pintura. Ao fim, foi possível demonstrar os vínculos entre os sítios analisados no tempo e no espaço, além de oferecer explicações diacrônicas para a variabilidade e semelhanças detectadas, gestadas no bojo da Arqueologia Evolutiva. / The aim of this work is to promote the comparison on two archaeological contexts regarding the occupation by Tupiguarani potters. It is the Zona da Mata mineira region, particularly the sites researched by MAEA-UFJF team; and the Complexo Lagunar de Araruama, on the coast of Rio de Janeiro, studied by researchers at the Museu Nacional/ UFRJ. On the one hand, these areas have sites with seemingly similar material culture compared to paints and plastics surface finishes, inserted in the same chronological period of settlement. On the other, some ethno-historical references reveal the existence of possible connections between local groups Tupinambá located on the coast and inland in the early years of contacts with the colonizers, specifically in the area of influence of the delimited territorial part. For all intents, the picture outlined above sets up an appropriate scenario for the testing of hypotheses relating to cultural transmission processes, related style and function concepts offered by Dunnell (1978). In practice, it fomented the performing a variety of tests focused specifically on the types of the clay paste, rim and finishing plastic surface and painting. In the end, it was possible to demonstrate the links between the sites analyzed in time and space, besides offering diachronic explanations for the variability and similarities detected, which were gestated in the Evolutionary Archaeology scope.

O foco da análise desta tese são as relações econômicas e políticas do empresário local com a Zona Franca de Manaus. O empresário local é entendido como o proprietário dos meios de produção que tem na cidade seu centro decisório, o que o diferencia de empresários nacionais e de executivos de empresas transnacionais. As relações econômicas são analisadas segundo as modalidades de localização desse empresário na economia da zona franca, compreendidas em termos das oportunidades diretas e indiretas de lucratividade criadas pelos incentivos fiscais característicos desse mecanismo de dinamização da economia. As relações políticas são consideradas a partir das posições coletivas que adota, particularmente no que diz respeito ao período pós-liberalização da economia nacional. A pesquisa se baseou em entrevistas realizadas com empresários tradicionais e modernos, com lideranças empresariais locais, consultores econômicos e técnicos governamentais, e em análise documental. As conclusões mostram que os empresários locais são economicamente dependentes da Zona Franca de Manaus e que essa dependência se traduz em termos da defesa do modelo. Isso se deve ao fato de que a manutenção da zona franca, a despeito dos impasses e ameaças postos para sua existência, assegura-lhes condições de lucratividade. Nesse sentido é que se pode dizer que o empresário local se subordina economicamente e acomoda politicamente à zona franca, e que isso lhe permite reproduzir-se socialmente. / The focus of the analysis of this thesis are the economic and political relations of the local entrepreneur with the free zone of Manaus. By local entrepreneur I understand the owner of the means of production whose center of decision is located in the city, definition that allows me to set a difference among him and the national entrepreneur and the executives of transnational enterprises. The economic relations are analyzed through the modalities of localization of this entrepreneur in the free zone economy, understood in terms of the direct and indirect profit opportunities generated by the fiscal incentives characteristic of this mechanism of economic dinamization. The political relations selected are the collective positions of this entrepreneur regarding, mainly, the context of national economic liberalization. The research is based on interviews with local entrepreneur leaders, economic consultants and governmental technicians, as well as on documental analysis. The conclusions show that the local entrepreneur is dependent fo the free trade zone and that this dependence is translated in terms of the political defende of the economic model. It is explained by the fact that the maintenance of the free zone, no matter the impasses and menaces put to its existence, ensure for them favorable profit conditions. In this sense, It is possible to affirm that the local entrepreneur is economically subordinated and politically accommodated to the free zone, and does not portrays any political alternative of regional development. / El foco de la análisis intentadas en esta tesis son las relaciones económicas y políticas del empresario local con la Zona Franca de Manaus. Entiendo al empresario local como el propietario de los medios de producción que tiene a la ciudad como centro de decisiones de sus empresas, lo que establece su diferencia con los empresarios nacionales y con los executivos de empresas transnacionales. Las relaciones económicas son analizadas por medio de las modalidades de localización de ese empresario en la economía de la zona franca, la cual es comprendida en términos de las oportunidades directas e indirectas de lucro generadas por los incentivos fiscales característicos de ese mecanismo de dinamización económica. Las relaciones políticas son consideradas a partir de las posiciones colectivas que asume, particularmente en lo que toca la liberalización de la economía nacional. La investigación se ha basado en entrevistas con líderes empresariales locales, consultores económicos y técnicos gubernamentales, así como en análisis documentales. Las conclusiones muestran que los empresarios locales son económicamente dependientes de la zona franca e que esa dependiencia es traducida en términos de la defensa del modelo. Esto se debe al hecho de que la manutención de la zona franca, no obstante los impases y amenazas colocados a su existencia, les garantiza condiciones favorables de ganancia. En ese sentido es que se puede decir que el empresario local subordinase económicamente y acomodase políticamente a la zona franca, sin proponer un proyecto alternativo de desarrollo para la región.

The adrenal cortex is a crucial endocrine gland in the mammalian stress response. In chronic inflammatory stress, cortisol is elevated whereas adrenal androgens are decreased. Furthermore, ACTH levels have poor correlation with the plasma cortisol in these conditions, thus suggesting that other factors are driving the stress response during chronic inflammatory stress. Interleukin-6 (IL-6), a cytokine which is released during chronic inflammatory stress, is assumed to be one such factor. Thus the biochemical pathways by which IL-6 increases cortisol release from the zona fasciculata (ZF), and decreases adrenal androgen release from the zona reticularis (ZR) were investigated. Since IL-6 activates AMP-activated kinase (AMPK) in skeletal muscle, AMPK was investigated for IL-6- induced effects in ZF and ZR tissue. The effects of AMPK activation and IL-6 exposure on the expression of the steroidogenic proteins, steroidogenic acute regulatory protein (StAR) and cholesterol side chain cleavage enzyme (P450scc), and on the steroidogenic nuclear factors steroidogenic factor-1 (SF-1) and adrenal hypoplasia congenita, critical region on the X chromosome, gene-1 (DAX-1) were investigated. AMPK activation and IL-6 exposure increased the expression of StAR, P450scc, and SF-1, and decreased DAX-1 in the ZF. Meanwhile, AMPK activation and IL-6 exposure decreased the expression of StAR, P450scc, and SF-1, and increased DAX-1 in the ZR. AMPK inhibition blocked the effects of AMPK activation and IL-6 on the ZF and ZR. Activator Protein-1 (AP-1) was the second biochemical intermediate studied since in other tissues AMPK activation increases the expression and phosphorylation of AP-1 subunits. IL-6 stimulation and AMPK activation increased the expression of the AP-1 subunits cFOS, cJUN, JUN B, and JUN D, while increasing the phosphorylation of cJUN in both the ZF and the ZR. These effects were blocked by AMPK inhibition. Inhibition of AP-1 leads to decreased StAR, P450scc, and SF-1, and increased DAX-1 in the ZF. Meanwhile, AP-1 inhibition leads to increased StAR, P450scc, SF-1, and decreased DAX-1 in the ZR. Therefore the AP-1 complex functions as a biochemical intermediate in the IL-6 and AMPK regulation of steroidogenic enzymes in the ZF and ZR. Overall, the results suggest that IL-6 activates AMPK, which increases the expression and phosphorylation of AP-1 subunits in the ZF and the ZR. However, increased AP-1 activation leads to increased StAR and P450scc in the ZF, but decreased StAR and P450scc in the ZR.

Thesis (PhD)--Stellenbosch University, 2002. / ENGLISH ABSTRACT: In this study the author presents new data that will shed light on the fairly nebulous knowledge of intracellular pathways involved in the physiologically induced acrosome reaction and the subsequent events leading to fertilization. The zona pellucidainduced acrosome reaction, sperm-zona interaction as well as various sperm motion characteristics were investigated. The first part of the study focussed on the role of extracellular signal regulated kinase (ERK), a member of the family of mitogen activated protein kinases, during the zona pellucida-induced acrosome reaction and sperm-oocyte interaction. It was shown that the inhibition of ERK significantly reduced the zona pellucida-induced acrosome reaction as measured by fluorescent microscopy. This suggests that ERKs are directly or indirectly involved in the signal transduction pathway through which the human sperm acrosome reaction is induced by the zona pellucida. In an attempt to provide further proof that ERK was involved in human acrosome signalling hemizona assays were employed to test sperm-oocyte binding. From these sperm-oocytebinding experiments it was clear that the inhibition of ERK leads to increased binding. These results support the idea that the zona pellucida-induced acrosome reaction, and therefore the physiologically relevant exocytotic event, is regulated by an ERKmediated signal transduction process. In the second part of the study the significance of phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K) in the process of human sperm motility, acrosome reaction and sperm-oocyte binding, was investigated by employing the specific PI3K, LY294002. PI3K inhibition increased the percentage motility and percentage progressive motility in asthenozoospermia patients. Under the present laboratory conditions PI3K inhibition furthermore did not influence the acrosome reaction, whilst it enhanced sperm-oocyte binding. These results therefore imply that PI3K negatively affect sperm motility and zona-binding. In the last part of the study the possible effects of intracellular cGMP accumulation via acute in vivo sildenafil citrate (ViagraTM) administration was investigated on seminal parameters, induction of the acrosome reaction, sperm-oocyte binding and sperm motility. As was expected no changes in the macro- and microscopically seminal parameters were caused by sildenafil citrate when compared to placebo. Furthermore the acrosome reaction was also not initiated or potentiated by sildenafil citrate at concentrations of 50mg orally. Sperm-oocyte binding, smooth path velocity, straight line velocity and the percentage rapid cells all increased after sildenafil citrate treatment. From these results it appear that there are various role players in the zona pellucidainduced acrosome reaction intracellular signalling system. A thorough understanding of such signal transduction systems and the crosstalk in-between will ultimately yield information regarding the nature of receptors to which these signal transduction pathways are coupled in human spermatozoa as well as the intracellular effectors that ultimately regulate sperm function. Moreover, an understanding of these regulatory pathways will be essential for the future development of clinical approaches designed to enhance or preclude fertilization. / AFRIKAANSE OPSOMMING: Die outeur lê in hierdie studie nuwe data voor ten einde meer lig te werp op die relatief vae veld van intrasellulêre seintransduksie paaie betrokke by die fisiologiesgeïnduseerde akrosoomreaksie en die daaropvolgende gebeure wat aanleiding gee tot bevrugting. Die zona pellucida-geïnduseerde akrosoomreaksie, sperm-zona interaksie sowel as spermmotiliteitseienskappe is ondersoek. Die eerste gedeelte van die studie fokus op die rol van ekstrasellulêreseingereguleerde- kinase (ERK), 'n lid van die familie van mitogeen-geaktiveerde proteïenkinases, tydens die zona pellucida-geïnduseerde akrosoomreaksie en sperm-oosiet interaksie. Daar word aangetoon dat die inhibisie van ERK die zona pellucida geïnduseerde akrosoomreaksie, soos gemeet met behulp van fluorosensie mikroskopie, betekenisvol verminder. Dit suggereer dat ERK direk of indirek betrokke is by die seintransduksie paaie waardeur die akrosoomreaksie van die menslike sperm deur die zona pellucida geïnduseer word. In 'n poging om onomwonde te bewys dat ERK betrokke is by menslike akrosoom-seintransduksie, is hemizona essais gebruik om sperm-oesiet binding te bepaal. Van hierdie sperm-oosiet bindingeksperimente is dit duidelik dat die inhibisie van ERK aanleiding gee tot verhoogde binding. Hierdie resultate ondersteun dus die idee dat die zona pellucidageïnduseerde akrosoomreaksie en dus die fisiologies relevante eksositotiese gebeurtenis gereguleer word deur 'n ERK-gemediëerde seintransduksie proses. In die tweede gedeelte van die studie is die belang van fosfatidielinositol 3-kinase (PI3K) in die proses van menslike spermmotiliteit, akrosoomreaksie en sperm-oesiet binding ondersoek deur van die spesifieke PI3K inhibitor LY294002, gebruik te maak. Pl3K-inhibisie het die persentasie motiliteit en progressiewe motiliteit by astenozoospermiese pasiënte verhoog. Onder hierdie laboratoriumtoestande het Pl3K-inhibisie nie die akrosoomreaksie beïnvloed nie, terwyl sperm-oosiet binding verhoog is. Hierdie resultate beteken dus dat PI3K spermmotiliteit en zona-binding negatief beïnvloed. In die laaste gedeelte van die studie is die effekte van intrasllulêre cGMP akkumulasie deur akute in vivo sildenafil sitraat (ViagraTM) toediening op seminale parameters, induksie van die akrosoomreaksie, sperm-oesiet binding en spermmotiliteit ondersoek. Soos verwag is geen veranderinge in die makro- en mikroskopiese seminale parameters deur sildenafil sitraat in vergelyking met plasebo veroorsaak nie. Verder is die akrosoomreaksies ook nie deur 50mg orale sildenafil sitraat geïnisieer of potensieer nie. Sperm-oosiet binding, geplaneerde snelheid, reguitlyn snelheid en persentasie vinnigbewegende selle was almal vehoog na sildenafil sitraat behandeling. Uit hierdie resultate blyk dit dat daar verskeie rolspelers in die zona pellucidageïnduseerde akrosoomreaksie is. 'n Deeglike insig van al hierdie seintransduksiepaaie en die onderlinge kruiskontak tussen mekaar sal uiteindelik die nodige inligting rakende die reseptore waaraan hierdie seintransduksie paaie gekoppel is, verskaf sowel as die intrasellulêre effektore wat uiteindelik spermfunksie beheer. Nog te meer sal die begrip van hierdie regulatoriese paaie verder noodsaaklik wees vir die toekomstige ontwikkeling van kliniese benaderings om bevrugting te bevorder of te voorkom.

Geóloga / Los centros eruptivos Cerro Volcán, Cerro La Quebrada, Volcán Tatio y Cerro La Torta, presentan litologías correspondientes a andesitas de anfíbola, andesitas de piroxeno y riolítas de anfíbola y biotita, calcoalcalinas de alto K, y se edifican por sobre los 4000 m.s.n.m. al sureste del campo geotermal del Tatio, en la Zona Volcánica Central (ZVC), Andes. La evolución de ellos toma lugar en el Pleistoceno Inferior-Superior, con una actividad predominantemente efusiva y litología caracterizada por: (1) gran proporción de fenocristales (20-45%); (2) rango composicional amplio (58-70%SiO2); y (3) variadas texturas de desequilibrio. La actividad eruptiva comienza a los ca. 2,12 Ma con la emisión del domo riotítico que hoy constituye el Cerro La Torta. Posteriormente, a los ca, 1,33 Ma, se dio la erupción de flujos andesíticos que constituyen los centros Volcán Tatio, Cerros Del Tatio y Cerro La Quebrada, en una cadena orientada NE-SW. Finalmente, la emisión de flujos andesíticos a los ca. 0,47 Ma edifica lo que corresponde a Cerro Volcán. En los pies del flanco oeste de este centro, es donde hoy se desarrolla la actividad geotermal de los Géiseres del Tatio. El volcanismo en la zona de estudio se caracteriza, en este periodo, por su migración hacia el norte. Los diferentes lineamientos en los centros, NE-SW y NS, sugieren un fuerte control estructural, lo que favorece el ascenso de magma a través de debilidades preexistentes en la corteza superior. La actividad de las erupciones es efusiva, debido a la falta de depósitos piroclásticos y escarpes de colapso asociados, aunque no se descarta la posibilidad de eventos de baja explosividad con depósitos piroclásticos cubiertos por sucesivas erupciones efusivas, o depósitos erosionados por acción glaciar. Los magmas que originaron las rocas de los centros estudiados ocurren a partir de una fuente con presencia de plagioclasa, anfíbola y ± clinopiroxeno, en lo que se cree una fuente somera con respecto a lo observado por otros autores en rocas volcánicas recientes de la ZVC, en donde se infiere una fuente profunda de alta presión con granate residual presente. Esto difiere con la implicancia general de que los magmas generados en un arco continental con una corteza engrosada debieran poseer una fuerte signatura de granate. Se sugieren reservorios someros para Cerro La Torta y Cerro Volcán, en donde se dio la cristalización de anfíbolas a temperatura, presión, % de H2O y fO2 de 835°C, 135MPa, 4,6%H2O y -11,7logfO2; y, 840°C, 130MPa, 4,6%H2O, y -11,7logfO2, respectivamente. Además se plantea un reservorio más profundo con respecto a los anteriores para el Volcán Tatio, en donde se dio la cristalización de piroxenos (a temperaturas de 1006-1013°C). Se presume una evolución de los centros eruptivos caracterizada por la perturbación de inyecciones de magmas con mayor temperatura respecto a los reservorios someros que explican la composición mineralógica y texturas de desequilibrio observadas. Sin embargo, no se descartan procesos de cristalización fraccionada y asimilación cortical, que son característicos en la evolución de los magmas en la ZVC.