Resumo: Este estudo teve como objetivo avaliar o efeito da suplementação alimentar com ácidos graxos essenciais sobre o desempenho produtivo, variáveis hematológicas, acúmulo de macrófagos e formação de gigantócitos em lamínulas de vidro implantadas no tecido subcutâneo de tilápias. Foram distribuídos 300 peixes (69,86 ± 5,01 g) em 20 caixas (15 peixes/caixa), com capacidade para 310 L, abastecidas com água corrente, vazão de um litro/minuto e aeração suplementar. Os peixes foram submetidos a cinco dietas contendo 28% PD e 3200 Kcal ED/kg. Foram utilizadas duas fontes de ácidos graxos essenciais: óleo de soja (OS) e óleo de linhaça (OL) nas proporções de 100% OS, 75% OS + 25% OL, 50% OS + 50% OL, 25% OS + 75% OL e 100% OL, com quatro repetições por tratamento. Após 15 dias de aclimatação, os peixes receberam as dietas experimentais durante quatro meses, duas vezes ao dia, correspondente a 3,0% da biomassa. Mensalmente foi realizada biometria dos peixes para avaliar o desempenho produtivo. Após 120 dias, os animais foram submetidos ao implante das lamínulas no tecido subcutâneo para avaliação da resposta inflamatória e das variáveis hematológicas (número de eritrócitos, porcentagem de hematócrito, taxa de hemoglobina e volume globular médio) dois, quatro, seis e oito dias após o implante. Não foi observada diferença significativa (P>0,05) entre os tratamentos para os parâmetros de desempenho produtivo e hematológico. Quanto à cinética dos macrófagos e formação de gigantócitos por corpo estranho foi observado crescente acúmulo em função do tempo de implante entre os tratamentos, precocidade na formação de gigantócitos tipo Langhans para os peixes alimentados com 100% de óleo de linhaça ao sexto dia (P<O,OOO 1) enquanto que no oitavo dia houve a formação acentuada de gigantócitos tipo Langhans (P<O,OOO I) nas lamínulas implantadas nos peixes...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The aim of this research was to evaluate the effect of the alimentary supplementation with essentials fattys acids on the productive performance, variables hematologicals, accumulation of macrophages and formation of giant cells in coverslips of glass implanted in the subcutaneous connective tissue of tilapias. 300 fish were distributed (69,86±5.01 g) in 20 aquariums (15 fishes/aquarium), with capacity for 310 L, supplied with current water, f10w of one liter/minute and supplemental aeration. The fish was submitted the five diets contend 28% PD and 3200 Kcal ED/kg. Two acid sources of essentials fattys acids were used: soybean oil (OS) and linseed oil (OL) in the ratios of 100%, 75% + 25% OL, 50% + 50% OL, 25% + 75% OL and 100% OL, with four repetitions for treatment. After 15 days of acclimatization, the fish was received the experimental diets during four months, two times/day, correspondent 3.0% of the biomass. Monthly biometry of the fish was carried through to evaluate the productive performance. After 120 days, the animals were submitted to the imp1antation of coverslips in the subcutaneous connective tissue for eva1uation of the inf1ammatory response and hematologicals variables (number of erythrocytes, percentage of haematocrit, tax of hemoglobin and average corpuscular volume) two, four, six and eight days after the implantation. Significant difference was not observed (P>O,O5) between the treatments for the parameters of productive and hematological performance. All that to kinetic of the macrophages and the formation of giants cells for strange body increasing accumulation in function of the time of implantation between the treatments was observed, premature in the formation of giants cells Langhans type for fish fed with 100% of linseed oil to sixth day (P<O,OOO 1), while that in the eighth day it had the accented formation of giant cell Langhans type (P<O,OOO 1) in coverslips ...(Complete abstract, click electronic access below) / Orientador: Flávio Ruas de Moraes / Coorientadora: Fabiana Pilarski / Banca: Margarida Maria Barros / Banca: Ana Lúcia Salaro / Mestre

Orientador: Flávio Ruas de Moraes / Banca: Margaria Maria Barros / Banca: Júlio Hermann Leonhardt / Banca: Maria José Tavares Ranzani de Paiva / Banca: Newton Castagnolli / Resumo: O presente trabalho teve por objetivos avaliar a inter-relação entre a suplementação alimentar com 0,3% de parede celular de levedura e vacinação com extrato oleoso de Streptococcus agalactiae sobre o desempenho produtivo, parâmetros fisiopatológicos e componente celular inflamatório em tilápia do Nilo. Oitenta e quatro tilápia com peso médio inicial de 125,0 + 1,5g foram distribuídas em 12 caixas de fibra, seguindo o esquema fatorial 2x2x3, correspondente a dois níveis de parede celular de levedura (0,0 e 0,3% parede celular), dois tratamentos (solução salina e vacina) e três coletas após o desafio com a bactéria viva (seis, 24 e 48h) com sete repetições. Os peixes foram alimentados durante 77 dias. A vacinação foi realizada 60 dias após o início da alimentação, por meio da inoculação intraperitoneal de 0,5 mL da vacina contendo 108 UFC/mL. Após 15 dias da vacinação, todos os peixes foram submetidos ao desafio com Streptococcus agalactiae vivo, por meio da inoculação intraperitoneal de 108 UFC/mL, veiculadas em 0,5 mL de solução salina (0,85%). As análises do desempenho produtivo mostraram que a suplementação dietética com parede celular de levedura associada à vacinação não influenciou o desempenho produtivo da tilápia do Nilo e o melhor desempenho ocorreu na utilização da parede celular de levedura. Os parâmetros hematológicos mostraram que a suplementação com 0,3% de parede celular de levedura associada à vacinação contra Streptococcus agalactiae em tilápia do Nilo foi essencial para incrementar a hematopoiese. A suplementação alimentar com 0,3% de parede celular de levedura associada à vacinação melhorou a resposta de defesa dos peixes, no que se refere à inflamação aguda e destaca a importância da vacinação. / Abstract: The work evaluates the interrelation between supplementation diets with 0,3% of cellular wall of yeast and vaccination with oily extract of Streptococcus agalactiae in the growth performance, phisiopathological parameters and inflamatory cellular component of Nile tilapia (Oreochromis niloticus). Eighty four tilapia with initial average weight of 125,0 ± 1,5g were distributed in 12 fiber aquaria, following the factorial design 2x2x3, corresponding to two levels of cellular wall of yeast (0,0 and 0,3% cellular wall), two treatments (saline solution and vaccine) and three collections, after challenge with bacteria (six, 24 and 48h) with seven repetitions. Fish were fed during 77 days. The vaccination was accomplished 60 days after the beginning of the feeding, through inoculation intraperitoneal of 0,5 mL of the vaccine containing 108 UFC/mL. After 15 days of the vaccination, all fishes were challenged with Streptococcus agalactiae, through inoculation intraperitoneal of 108 UFC/ml, diluted in 0,5 mL of saline solution (0,85%). The analyses of the pattern performance showed that supplementation diets with cellular wall of yeast associated to vaccination did not influence the growth performance of Nile tilapia and the best growth performance was obtained using cellular wall of yeast. The phisiopathological parameters showed supplementation diets with 0,3% of cellular wall of yeast associated to the vaccination against Streptococcus agalactiae in Nile tilapia were essential to increase the hematopoiesis. The supplementation diets with 0,3% of cellular wall of yeast associated to the vaccination improved the immune response of fish, in relation to the sharp inflammation and it detaches the importance of the vaccination. / Doutor

Resumo: O efeito da vitamina A sobre os parâmetros de desempenho da tilápia do Nilo foi avaliado em um experimento com duração de 130 dias. Trezentos e vinte alevinos de tilápia do Nilo (7,43 ± 0,19g) foram aleatoriamente distribuídos em 40 aquários de fibra de vidro com volume total de 250L e alimentados com dieta prática contendo níveis crescentes de vitamina A (0, 200, 400, 800, 1.600, 3.200, 6.400, 12.800 UI de vit. A/kg da dieta). A fonte de vitamina utilizada foi o acetato de retinol (Rovimix A 1000). Ao final do período experimental os peixes foram pesados e a ração quantificada para a avaliação do ganho de peso médio, conversão alimentar aparente (CAA), consumo diário de ração, porcentagem de sobrevivência, taxa de crescimento específico (TCE), taxa de eficiência protéica (TEP) e taxa de retenção protéica (TRP). Foi observado efeito quadrático (P<0,01) para todas as variáveis com o aumento do nível de vitamina A nas dietas com exceção da CAA e TEP. Os peixes alimentados com as dietas não suplementadas apresentaram reduzida TEP e piores índices de CAA. Sinais de deficiência de vitamina A observados neste estudo foram: apatia, natação errática, exoftalmia, petéquias hemorrágicas localizadas na base da nadadeira caudal e superfície corporal, e presença de ascite na cavidade abdominal. A presença de níveis adequados de vitamina A é essencial para o adequado crescimento da tilápia do Nilo e a exigência com base no ganho de peso e taxa de retenção protéica foi de 4.704 e 5.300 UI de vit. A/ kg da dieta, respectivamente. / Abstract: A 130-day feeding trial was undertaken to evaluate the effect of vitamin A on growth performance of sex reversed Nile tilapia (Oreochromis niloticus). 320 Nile tilapia fingerlings with 7.49 ± 0.19g weight (mean±SD) were randomly stocked into 40 250Laquaria and fed practical diets containing graded levels of vitamin A (0; 200; 400; 800; 1,600; 3,200; 6,400; 12,800 IU vit. A/kg diet). Vitamin A source was retinol acetate (Rovimix A 1000). At the end of the experimental period fish and diets were weighed to evaluate weight gain (WG), feed conversion ratio (FCR), survival (SUR), specific growth rate (SGR), protein efficiency ratio (PER) and protein retention (PR). All gowth parameters showed quadratic effect (P<0.01) according to vitamin A level regardless the FCR and PER. Fish fed the non-supplemented diet showed reduced PER and higher FCR. Clinical signs of vitamin A deficiency observed in this study were resting and abnormal swimming behavior, exophthalmia, hemorrhages at the base of fins and on skin and serous fluids in abdominal cavity. Adequate vitamin A levels are necessary for normal Nile tilapia growth and vitamin A requirement based on WG and PR is 4,704 and 5,300 IU vit. A/kg diet, respectively. / Orientador: Margarida Maria Barros / Coorientador: Ricardo de Oliveira Orsi / Banca: Fabiana Pilarski / Banca: José Fernando Machado Menten / Banca: Maria José Tavares Ranzani de Paiva / Banca: Dirlei Antonio Berto / Doutor

Orientador: Luiz Edivaldo Pezzato / Banca: Dirlei Antonio Berto / Banca: Wilson Massamitu Furuya / Abstract: Instead Nile tilapia is one of the most cultured fish species in the world, amino acid availability values of feed ingredients are scarce for this specie. Thus, apparent amino acid availability coefficients and protein digestibility of four animal products (fish meal, meat and bone meal, poultry by-product and feather meal) and four plant protein-rich products (soybean meal, cottonseed meal 28, cottonseed meal 38 and corn gluten meal) were determined for Nile tilapia (Oreochromis niloticus). Ingredients were incorporated to a practical reference diet at a 7:3 ratio (70% of reference diet and 30% of test ingredient). Chromic oxide was used as external digestibility marker. Among animal products poultry by-product meal (89.73%) and fish meal (88.60%) presented the highest apparent protein digestibility (APD) while meat and bone meal (78.44%) and feather meal (78.52%) presented the lowest APD. Among plant protein-rich products corn gluten meal (91.39%) and soybean meal (92.44%) presented the highest APD values while cottonseed meal 28 presented the lowest APD (78.59%). Average apparent amino acid availability of feed ingredients were similar to protein digestibility with 92.33%, 89.56%, 73.45%, 80.71%, 88.89%, 84.44%, 91.24% e 79.71% values for soybean meal, corn gluten meal, cottonseed meal 28 and 38, fish meal, meat and bone meal, poultry by-product meal and feather meal, respectively. / Resumo: São escassos os valores de digestibilidade de aminoácidos dos alimentos para a tilápia do Nilo, apesar de ser uma das espécies mais cultivadas mundialmente. Desta forma, determinou-se, com a tilápia do Nilo, os coeficientes de digestibilidade aparente dos aminoácidos e da proteína de oito alimentos protéicos: farinha de peixe, farinha de carne e ossos, farinha de vísceras de aves e, farinha de penas, farelo de soja, farelo de algodão-28, farelo de algodão-38 e, glúten de milho-60. Os alimentos foram incorporados a uma dieta prática referência na relação 7:3 (70,0% de dieta referência e 30,0% do alimento teste). Entre os alimentos de origem animal, a farinha de vísceras (89,73%) e a farinha de peixe (88,60%) apresentaram os maiores valores de digestibilidade aparente da proteína (DaP), enquanto a farinha de carne e ossos (78,44%) e a farinha de penas (78,52%) apresentaram os menores valores de DAP. Entre os alimentos de origem vegetal, o glúten de milho-60 (91,39%) e o farelo de soja (92,44%) apresentaram os maiores valores de DAP, enquanto o farelo de algodão-28, o menor valor (78,59%). A digestibilidade média aparente dos aminoácidos do farelo de soja, glúten de milho, farelo de algodão-28, farelo de algodão-38, farinha de peixe, farinha de carne e ossos, farinha de vísceras e farinha de penas, foi respectivamente, 92,33; 89,56; 73,45; 80,71; 88,89; 84,44; 91,24 e 79,71%, o qual se mostrou similar ao valor obtido para a digestibilidade da proteína. / Mestre

Resumo: Este trabalho objetivou avaliar a influência da vitamina E pela suplementação por meio da dieta, em peixes submetidos a dois métodos de abate (imersão em água gelada e sangria), nos atributos de qualidade de filés congelados de tilápia (Oreochromis spp.). Peixes, com peso médio inicial de 340 g, foram alimentados por um período de nove semanas com três dietas isocalóricas (3264,09 kcal ED/kg) e isoprotéicas (24,8% PD), diferindo na adição de 100 mg/kg de ração de α-tocoferol (grupo TO), 100 mg de princípio ativo/kg de ração de acetato de α- tocoferil (grupo AC), e sem adição de vitamina E (grupo controle - CO). Ao final do período de alimentação, os peixes foram abatidos pelos métodos citados anteriormente. Utilizou-se delineamento inteiramente casualizado, em esquema fatorial 3x2x5, caracterizado por três dietas, dois métodos de abate e cinco tempos de análises dos filés. Foram realizadas análises de desempenho e corporais, e de composição centesimal, oxidação lipídica pela formação de substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (SRATB), e sensorial pelo método do Índice de Qualidade (MIQ) nos filés, nos tempos zero (antes do congelamento), 45, 90, 120 e 150 dias de estocagem. A suplementação da vitamina E não afetou os parâmetros de desempenho, entretanto influenciou na composição centesimal e na oxidação lipídica, protegendo os filés ao longo do período de estocagem. Foi elaborada tabela de avaliação dos filés congelados, pelo MIQ, instrumento útil para a análise de atributos de qualidade. / Abstract: The aim of this investigation was to evaluate the influence of vitamin E dietary supplementation, and fish slaughtering methods (immersion in ice-water and exsanguination), on the fillets quality of tilapia, during frozen storage. Fish of 340 g mean initial body weight were fed for nine weeks with three isoenergetic (containing 3264,09 kcal DE/kg) and isonitrogenous (24,8% DP) diets. Two diets were supplemented with 100 mg/kg diet of α-tocopherol (TO group) and 100 mg of active source/kg diet of α-tocopheryl acetate (AC group), plus a nonsupplemented diet (control group - CO). At the termination of the 9-week feeding trial, fish were slaughtered by the summoned methods.A completely randomized design was used, in a 3x2x5 factorial scheme, characterized by the 3 vitamin E supplementation diets, 2 slaughter methods and 5 fillets analysis. The growth performance parameters, hepatosomatic and fat viscerosomatic index, centesimal composition, lipid oxidation determined by the thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) and sensorial by Quality Index Method (QIM) analysis were analyzed in five times: before frozen storage, 45, 90, 120 and 150 days storage. The vitamin E supplementation did not influence the growth performance parameters, but centesimal composition were influenced, and vitamin E protected fillets from lipid oxidation in frozen storage. Fillets quality availability table were organized, by QIM, for to help in sensorial analysis. / Orientadora: Léa Silvia Sant'Ana / Coorientador: João Batista Kochenborger Fernandes / Banca: Cristiane Rodrigues Pinheiro Neiva / Banca: Cláudio Angelo Agostinho / Mestre

Orientadora: Léa Silvia Sant'Ana / Banca: Judite Lapa Guimarães / Banca: Rose Meire Vidotti / Banca: Maria Regina Barbieri de Carvalho / Banca: Dalton José Carneiro / Resumo: O surimi é uma carne de pescado, submetida a lavagens sucessivas, onde se eliminam gordura, sangue, substâncias odoríferas e proteínas solúveis em água, resultando em uma pasta branca, sem odor e sabor característicos de peixe, permitindo melhor aproveitamento do pescado e dos resíduos gerados pelo processamento dos peixes. O estudo teve o propósito de caracterizar o surimi de tilápia nilótica, determinando suas características morfológicas, físicas, químicas e sensoriais. A partir de ensaios prévios foi delineado um planejamento experimental baseado na metodologia da superfície de resposta, composto por duas variáveis independentes: número de lavagens da carne mecanicamente separada - CMS (uma, três ou cinco) e porcentagem de adição de amido de mandioca (zero, 10 ou 20%). As variáveis respostas foram: força de cisalhamento (FC) e umidade (U %), pois estão diretamente correlacionadas com a qualidade fmal do surimi. Os resultados mostraram efeito linear da adição de amido e do número de lavagens na umidade do surimi, sendo que o tratamento com 10% de amido de mandioca e três lavagens da CMS apresentou os melhores valores. A FC apresentou diferença entre os tratamentos, não sendo possível definir um tratamento com melhor textura segundo os parâmetros avaliados. Os parâmetros físicos e químicos: pH, atividade de água, degradação lipídica e proteica, composição centesimal, cor, e o rendimento foram determinados para o surimi elaborado com: I) uma lavagem da CMS, 2) cinco lavagens da CMS, 3) uma lavagem e 20% de amido de mandioca, 4) cinco lavagens e 20% de amido de mandioca e 5) três lavagens e 10% de amido de mandioca, segundo a metodologia da superfície de resposta. O rendimento do surimi foi alto devido à capacidade de retenção de água do produto durante o processamento. As análises de pH e Aa não... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Surimi is a fish protein concentrate, submitted to successive washings, for removing fat, blood, odorous substance and water soluble protein, resulting in a white paste, without fish characteristic (odor and flavor), allowing better exploitation for fishes and their industrials residues. The objective of this study was tilapia surimi characterization, through the morphology, sensorial and physicochemical properties determination. From previous works, a central composite designs was modelled, with two independent variables: numbers of washings (1, 3 or 5) and cassava starch addition (zero, 10 or 20%), baseaded on the response surface methodology. The response variables were: moisture (%) and breaking force (FC) directIy correlated with the good quality of surimi. The results showed a linear effect of cassava starch addition and minced washing cycles. The treatment with 10% of cassava starch and three minced washings showed the better response variables. The FC showed differences between treatments, but wasn't possible to define a better treatment for texture analysis. The physic and chemical parameters: pH, Wa, lipid and protein oxidation, centesimal composition, color and surimi yield were determinated for surimi treatments: 1) one minced washing cycle, 2) tive minced washing cycles, 3) one washing cycle and 20% of cassava starch addition, 4) tive washing cycle and 20% of cassava starch addition and 5) three washing cycle and 10% of cassava starch addition. The surimi yield was higher due to the high water retention capacity of surimi during the washing processing. The pH and water activity analysis showed no differences between the treatments. The chemical composition was different for tilapia minced and surimi, the minced showed lower protein and lipid levels caused by washing of the minced. Treatments with 20% of cassava starch showed lower protein and lipid concentration... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Margarida Maria Barros / Banca: José Roberto Sartori / Banca: Luiz Edivaldo Pezzato / Resumo: A levedura e o zinco são conhecidos por melhorarem o desempenho produtivo, a saÚde e beneficiar o sistema de defesa imune dos peixes. O presente experimento avaliou o efeito da suplementação da levedura autolisada e zinco nas dietas no desempenho produtivo, respostas metabólicas, parâmetros hematológicos e a resistência à baixa temperatura da tilápia do Nilo. O experimento foi constituído por nove tratamentos e três repetições. As rações formuladas de forma a conter 32,0% PD e 3240 kcal ED/kg, mantendoas isoprotéicas, isoaminoacídicas, isocnergéticas e igual relação Ca/!> .. Foram distribuídos aleatoriamente 135 alevinos machos de tilápia do Nilo em 27 aquários de SOL com sistema de filtro biológico e aquecimento (26,0 l ] ,O°C). O arraçoamento dos peixes foi ad libilllm, quatro vezes ao dia 8hOO, IlhOO, 14hOO e 17hOO. O experimento foi conduzido por 128 dias para avaliar a inclusão de levedura autolisada e zinco nas dietas sobre o ganho médio de pesd, consumo diário aparente, conversão alimentar aparente, eficiência protéica, porcentagem de sobrevivência; concentrações de amônia e atividade da fosfatase alcalina no plasma e no fígado, de lipídeos totais e uréia no plasma e; de minerais no plasma, no figado e nos óssos dos peixes. Após as avaliações do desempenho produtivo, 81 peixes (nove/tratamento) foram transferidos a sala experimental de desafio pelo frio e distribuídos aleatoriamente em 27 aquários de 40L (três/aquário) e submetidos à baixa temperatura (13,0°C) por sete dias. Foram avaliados os parâmetros hematológicos: nÚmero de eritrócitos, porcentagem de hematócrito, taxa de hemoglobina, volume corpuscular médio, concentração de hemoglobina corpuscular média, proteína plasmática total, leucócitos totais, porcentagem de linfócitos, neutrófilos e monócitos antes e após o desafio pelo frio... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Yeast and zinc are known to improve growth performance and health mainly fish immune system. This trial evaluated the effect of autolised yeast and zinc supplementation on growth performance, metabolic response, hematologic parameters and cold stress resistence for Nile tilapia. The experiment were constituted by nine treatments and three replicates. Diets were formulated to contain 32% DP and 3240 kcal DE/kg and they presented isonitrogen, isoenergetic and the same amino acid and pattem an C:P ratio. 135 ali male Nile tilapia fingerlings were randomly assigned to 27 50L-aquarium with a bioJogic filtcr and temperature controlcd (26.0 l I,O°C). Feeding of tish was ad libitum four times/day (llhOO. II hOO, 14hOO and 17hOO). A I 28-days trial was conducted to evaluute the effect of autolised yeast and zinc inclusion on mean weight gain, daily feed intake, feed conversion ratio, protein efficiency ratio, survival percentage; ammonia concentration and alkaline, phosphatase activity in plasma and liver and total urea and lipid in plasma and; mineral in plasma, liver and bones of fish. After growth performance evaluation 81 fish (nine/treatment) were transfered to 27 40L-aquarium in room experimental the cold stress and randomly assigned (three/aquarium) and submited to cold stress (13°C) during seven days. Hematologic parameters evalueted were: erythrocytes number, hematocrit, hemoglobin, corpuscular volume, mean corpuscular volume, total plasmatic protein, total leucocytes, Iymphocytes, neutrophils and monocytes percentage before and after cold stress. The results shown that: the inclusion until 6.0% autolised yeast and 600 mg zinc/kg diet doesn't worsed growth performance in Nile tilapia; 2,0% autolised yeast in diet without zinc inclusion showed better growth performance of fish; supplementation levels high than 6.0% autolised yeast and 600 mg zinc/kg diet worsed the metabolism and growth of fish... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Cesar Martins / Banca: Francis de Moraes Franco Nunes / Banca: Patrícia Pintor dos Reis / Banca: Danilo Pinhal / Banca: Rafael Henrique Nóbrega / Resumo: A Tilápia do Nilo é uma espécie de grande relevância na aqüicultura mundial. Espécimes do sexo masculino têm maior crescimento quando comparado as fêmeas, uma característica importante em sistemas de produção de peixe. Infelizmente, os mecanismos envolvidos no desenvolvimento que levam à diferenciação sexual em peixes ainda são pouco compreendidos. Vários genes e miRNAs tem sido propostos como influênciadores desses processos, porém seu efetivo papel, permanece desconhecido. Considerando a importância biológica do desenvolvimento embrionário e determinação do sexo, microRNomas de tilápia do Nilo, expressos durante o desenvolvimento e em indivíduos machos e fêmeas adultos, foram analisados. Bibliotecas de pequenos RNAs foram geradas a partir de embriões de 3 e 5 dias pós fertilização (dpf), e cérebro e gônadas de indivíduos adultos de ambos os sexos, e seqüenciados via plataforma Illumina. Foram identificados 194 miRNAs já conhecidos com base em bancos de dados referência de zebrafish, sendo que destes 120 apresentaram expressão diferencial entre macho e fêmea de O. niloticus. Foram identificados ainda 74 novos miRNAs não presentes no banco de dados referência. Vinte e dois miRNAs foram testados por qPCR e cinco tiveram seus genes-alvo candidatos testados pelo ensaio de gene repórter da luciferase. Os resultados de qPCR mostraram que a expressão da família do miR-10 foi alta durante os períodos de 3 e 5dpf. Softwares de predição sugerem que essa família de miRNAs regula a expressão de membros dos genes Hox. Sendo assim, foram testados por qPCR e pelo ensaio do gene réporter da luciferase três genes dessa família: HoxA3a, HoxB3a e HoxD10a. Os resultados mostraram que miR-10b tem como alvos Hoxb3a e HoxD10a. Já na diferenciação do sexo, os resultados de qPCR apontaram uma alta expressão do miR-145-5p durante o desenvolvimento de embriões de fêmea, enquanto seu possível alvo, Sox9a, teve... / Abstract: The Nile tilapia is a species of great importance in world aquaculture. Male specimens have increased growth compared with females, an important feature in fish production systems. Unfortunately, the mechanisms involved in the development and sexual differentiation in fish are still poorly understood. Several genes and miRNAs have been reported as influencing these processes, but its effective role remains unknown. Given the biological importance of miRNAs to embryonic development and sex determination, microRNomes were analyzed during development and in adult male and female of O. niloticus. Small RNAs libraries were generated from 3 and 5 dpf embryos, and brain and gonads of adult specimens, and sequenced using Illumina platform. Out of 194 miRNAs identified based on zebrafish database, 120 showed differential expression between male and female of O. niloticus. Additionally, 74 new miRNAs not detected in zefrafish database were found. Twenty-two miRNAs were tested by qPCR and five had their target candidate genes tested by luciferase reporter gene assay. The qPCR results showed that miR-10 family expression was high during the periods of 3 and 5dpf. Prediction software suggested that this family of miRNAs regulate the Hox genes family members. Therefore, were tested by qPCR and luciferase gene reporter assay, three Hox genes: Hoxa3a, HoxB3a and HoxD10a. The results showed that miR-10b have Hoxb3a and HoxD10a as target. In sex differentiation, the results of qPCR showed a high expression of miR-145-5p during the development of female embryos, while its possible target, Sox9, decreased. Moreover, the miR-181a expression decreased and his target gene, Cyp191a increased. The luciferase gene reporter assay validated the Cyp19a1 as a direct target of miR-181a, and Sox9 as a target of miR-145-5p. Our data suggest that, as in other vertebrates, Hox genes are extremely important in the development of Nile tilapia and are regulated by miR-10 ... / Doutor

Orientador: Eduardo Alves de Almeida / Banca: Carlos Roberto Ceron / Banca: Lilian Castiglioni / Resumo: Dentre os contaminantes ambientais mais produzidos no mundo estão os derivados do petróleo, que atingem e contaminam os ambientes aquáticos. Sendo o petróleo uma forma de energia não renovável, alternativas renováveis e menos poluentes como o biodiesel vêm sendo pesquisadas. Entretanto, apesar de ser considerado menos poluente, mais biodegradável e produzir menos gases de efeito estufa durante a queima, pouco se sabe ainda sobre os potenciais efeitos tóxicos do biodiesel para a biota aquática. Estes efeitos podem ser avaliados por meio da análise de biomarcadores de contaminação, tais como alterações metabólicas na atividade de enzimas de biotransformação e em parâmetros de estresse. Neste trabalho foram analisados os efeitos de duas concentrações (0,1 e 0,01 mL/L, com manutenção do tratamento a cada 5 dias) do biodiesel puro (B100) e da mistura de 20% de biodiesel com diesel de petróleo (B20), em comparação com os efeitos do diesel de petróleo contendo 5% de biodiesel (B5) e animais não expostos a nenhum dos combustíveis, em fígado e brânquias de tilápias do Nilo (Oreochromis niloticus) expostas por 15 e 30 dias. Foram avaliadas as atividades das enzimas de biotransformação etóxiresorufina-O-deetilase (EROD) e glutationa S-transferase (GST), das enzimas antioxidantes superóxido dismutase (SOD), catalase (CAT) glutationa peroxidase (GPx) e níveis de peroxidação lipídica por meio da quantificação do produto malondialdeído. Testes de toxicidade foram também realizados para se estabelecer valores de LC50 para cada contaminante, de forma a melhor compararmos os efeitos dos contaminantes, os quais mostraram que o B5 foi o composto mais tóxico, seguido do B20 e em seguida o B100. Animais expostos ao B5 e ao B20 por 15 dias tiveram a atividade da EROD aumentada e suas enzimas... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Among the environmental contaminants most produced in the world are derived from petroleum, which reach and contaminate aquatic environments. Because oil is a form of non-renewable energy, renewable and less polluting alternatives such as biodiesel have been researched. However, despite being considered less polluting, more biodegradable and produce less greenhouse gases during the burning, little is known about the potential toxic effects of biodiesel on aquatic biota. These effects can be evaluated through the analysis of biomarkers of contamination, such as changes in metabolic activity of biotransformation enzymes and stress parameters. In this study, we analyzed the effects of two concentrations (0.1 and 0.01 mL / L, with maintenance treatment every 5 days) of pure biodiesel (B100) and the mixture of 20% biodiesel with petroleum diesel (B20), compared with the effects of diesel oil containing 5% biodiesel (B5) and animals not exposed to any fuel in liver and gills of tilapia (Oreochromis niloticus) exposed for 15 and 30 days. We evaluated the activities of biotransformation enzymes etóxiresorufina-O-deetilase-(EROD) and glutathione S-transferase (GST), of antioxidant enzymes superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT), glutathione peroxidase (GPx) and lipid peroxidation levels through quantifying the product malondialdehyde. Toxicity tests were also conducted to establish LC50 values for each contaminant in order to better compare the effects of contaminants, which showed that B5 was the most toxic compound, followed by B20 and then B100. Animals exposed to B5 and B20 for 15 days had increased EROD activity of and their antioxidant enzymes significantly inhibited, which was not observed in animals exposed to B100. Nevertheless, despite the inhibition observed in the antioxidant defenses, the... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: João Batista Kochenborger Fernandes / Banca: Silvana Martinez Baraldi Artoni / Banca: Rose Meire Vidotti / Resumo: O presente estudo foi conduzido com o objetivo de avaliar a eficiência da suplementação com o prebiótico Flavofeed® sobre o desempenho, composição corporal, parâmetros hematológicos e morfometria de duodeno de juvenis tilápias do Nilo (Oreochromis niloticus) em relação a uma dieta controle. Foram utilizados 240 juvenis (11,73±2,03 g) distribuídos em 24 aquários experimentais de polietileno de 100 litros equipados com sistema de aeração e aquecedores para manutenção da temperatura constante. Os peixes foram divididos em dois grupos e alimentados durante 84 dias com dietas isocalóricas (3149,86 kcal ED/ kg) e isoprotéicas (27,21% PD) contendo ou não Flavofeed®. Na dieta teste foi incluído 0,05% de Flavofeed®, quantidade recomendada pelo fabricante, e na dieta controle houve inclusão de material inerte (bagaço de cana) na mesma proporção. As dietas foram extrusadas na fabrica de ração da UNESP de Jaboticabal. O delineamento experimental foi em blocos casualizados, com três blocos (classes de peso) e quatro repetições por bloco, sendo que cada repetição era constituída por dez peixes. A análise estatística dos resultados foi realizada com a utilização do programa estatístico SAS 8.0. Os dados foram submetidos à análise de variância e as diferenças (P<0,05) entre as médias foram comparadas pelo teste de Tukey. A suplementação com prebiótico não afetou de forma significativa (P>0,05%) o desempenho dos juvenis de tilápia do Nilo. Entretanto, foi constatado efeito sobre o metabolismo de gordura, uma vez que o índice gorduroviscerossomático foi significativamente menor nos peixes alimentados com a ração contendo Flavofeed®. Não foram observadas alterações significativas (P>0,05) nos parâmetros hematológicos. O uso do produto elevou significativamente a altura das vilosidades... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The current study was conducted with the aim to evaluate the efficiency of the supplementation with the prebiotic Flavofeed® over the performance, corporal composition, hematological parameters and duodenal morphometry of Nile tilapia (Oreochromis niloticus) juveniles in relation to a control diet. The total of 240 juveniles (11,73±2,03 g) where distributed in 24 experimental tanks (100 liters) equipped with air and heater system. The fishes where shared in two groups that are feed during 84 days with isocaloric (3149,86 kcal ED/ kg) and isoproteic (27,21% PB) diets containing or not Flavofeed®. In the test diet 0,05% of Flavofeed was included by the manufacturer indication, and in the control diet was made the inclusion of an inert material (sugarcane bagasse) in the same proportion. The experimental design was in randomized blocks, with four repetitions per block and ten fish per repetition. Statistical analysis was conducted with the program SAS 8.0. All data were subjected to analysis of variance and the difference (P<0,05) between the means where compared by the Tukey's multiple range test. The prebiotic supplementation didn't affect (P>0,05) the performance of Nile tilapia juveniles. However, was found effect in the fat metabolism, once the vicerosomatic index was significantly (P<0,05) smaller in the fish feed with the diet containing Flavofeed®. Any significant (P>0,05) changes was found in the hematological parameter studied. The use of the prebiotic increased the duodenal villosity height in relation to the control diet, result that normally implicate in bigger absorption surface and better nutrients utilization. However studies in sanitary challenges condition are necessary to confirm these results. / Mestre