Mémoire numérisé par la Direction des bibliothèques de l'Université de Montréal.

Contexte : Les carcinomes rénaux à cellules claires (ccRCC) sont des tumeurs particulièrement agressives et de mauvais pronostic lorsqu’elles sont métastatiques. L’apport des traitements anti-angiogéniques et notamment des inhibiteurs de tyrosine kinases (TKI), a permis une amélioration nette en terme de survie de ces patients, mais parfois au prix d’effets secondaires tels que l’HTA. L'angiotensine-II stimule la croissance des cellules cancéreuses et la sécrétion de VEGF via le récepteur de type 1. Dans différents types de cancers, les antagonistes des récepteurs de type 1 de l'angiotensine-II (ARA-2) utilisés à visée anti-hypertensive ont pu démontrer une diminution de la prolifération cellulaire et une inhibition de la néo-angiogénèse tumorale. Objectif : Mettre au point différents modèles animaux de ccRCC et tester l’effet de l’association des traitements par sunitinib (TKI) et telmisartan (ARA-2). Matériels & Méthodes : Des souris Nude ont été injectées avec des cellules tumorales 786-O, permettant d’obtenir une tumeur sous-cutanée. Les souris ont été réparties en 4 groupes gavées quotidiennement pendant 4 semaines : avec le vecteur (DMSO), du Telmisartan, du Sunitinib ou une association Telmisartan + Sunitinib à doses thérapeutiques, puis euthanasiées pour analyse de la tumeur. Dans un 2ème temps, un autre modèle animal a été mis au point avec des cellules tumorales issues d’une lignée primaire. Résultats : L’association des traitements (TKI + ARA-2) dans le 1er modèle montrait une augmentation de la nécrose tumorale par diminution de la densité microvasculaire et de la sécrétion de VEGF circulant. Dans le modèle issu d’une lignée primaire, on notait une réduction du volume tumoral mais sans augmentation de la nécrose. Conclusion : Ce travail a permis de mettre au point 2 modèles de ccRCC. L’association d’un ARA-2 au sunitinib semble potentialiser l’effet anti-tumoral dans ces modèles expérimentaux. De plus amples études sont nécessaires pour comprendre les mécanismes impliqués. / Background: Clear cell renal cell carcinoma (ccRCC) are agressive tumors, with a bad prognosis when metastatic. Antiangiogenic treatments and especially tyrosine kinase inhibitors (TKI) have increasingly improve patients’ survival, but those drugs often present side effects like hypertension. Angiotensin-II stimulates tumor cell development and VEGF secretion via the type-1 receptor. In different types of cancer, angiotensin-II type 1 receptor antagonists (ARA-2) used as antihypertensive drugs can reduce tumor cell proliferation and inhibit neoangiogenesis. Objective: Develop different xenograft animal models of ccRCC, and test the efficacy of sunitinib (TKI) combined with telmisartan (ARA-2).Material & Methods: Nude mice have been injected sub-cutaneously with 786-O cells. Mice have been divied into 4 groups and received orally every day during 4 weeks: DMSO, telmisartan , sunitinib or the combination of sunitinib and telmisartan. Then animals were sacrified and their tumor was analyzed. In a second part using primary cell lines, a new mouse model was developed and tested.Results: In the first model, combined treatments (TKI+ARA-2) increased tumor necrosis, reduced microvascular density and circulant VEGF secretion. In the model developed with primary cell lines, there was a reduction in tumor growth but without increasing tumor necrosis. Conclusion: In this work, 2 different animal models of ccRCC have been developed. Sunitinib combined with telmisartan seems to potentiate anti-tumoral effects in these animal models. Further analyses are warranted to understand the different mechanisms implicated.

Mémoire numérisé par la Direction des bibliothèques de l'Université de Montréal.

Reproduction de : Thèse d'exercice : Médecine vétérinaire : Toulouse 3 : 2007. / Titre provenant de l'écran titre. Bibliogr. p. 156-182.

Le récepteur d’angiotensine II du type 1 (AT?) est un récepteur couplé aux protéines G faisant partie de la famille des rhodopsines-like. Il participe à la régulation de plusieurs fonctions biologiques dont le contrôle de la pression artérielle, la contraction vasculaire ainsi que l’homéostasie hydro-sodée. Le récepteur h AT? est couplé de façon préférentielle à la protéine G?q/11 mais il est également connu pour induire une signalisation intracellulaire via le recrutement des ß-arrestines 1 et 2. Cet ouvrage repose alors sur la caractérisation d’une série d’analogues de l’angiotensine II dans le but d’identifier des ligands biaisés. Dans un premier temps, des études de liaison ont été réalisées afin de caractériser l’affinité de ces analogues pour le récepteur h AT?. En second lieu, la puissance signalétique de ces analogues pour l’activation de la voie de signalisation classique a été déterminée à l’aide d'un immuno-essai frT basé sur la production de l’inositol-mono phosphate (IP?), une étape de la cascade d’inositol phosphate. Aussi, un essai cellulaire de BRET a été utilisé afin d’étudier le recrutement de la ß-arrestine 2 au récepteur h AT? permettant de déterminer la puissance signalétique des différents analogues à recruter cette protéine. Cette étude a révélé que la majorité des analogues à l’étude présentaient une certaine sélectivité fonctionnelle. Plus particulièrement, elle a permis d’identifier deux analogues présentant une sélectivité fonctionnelle orthogonale; l’une stimulant seulement la voie de G?q et l’autre adressant uniquement la voie de la ß-arrestine 2. Finalement, cette étude a ouvert des pistes pour une meilleure compréhension des relations structure-activité dans un cadre de sélectivité fonctionnelle.[symboles non conformes]

Plusieurs problèmes de santé peuvent être associés à un déséquilibre de l'homéostasie énergétique tels l'obésité, le diabète, les cancers et les maladies cardiovasculaires. Il est bien établi que l'angiotensine II (Ang II) joue un rôle dans le développement de ces pathologies. La plupart des effets néfastes de l'Ang II sont attribués au récepteur de type I (R-AT1) alors que l'activation du récepteur de type 2 (R-AT2) génère des effets qui s'opposent souvent à ceux du R-AT1. Des travaux suggèrent un rôle de l'Ang II dans la physiologie de l'adipocyte. Afin d'étudier l'implication du R-AT2 lors de l'adipogenèse dans des conditions normales et de perturbations de l'homéostasie, les cellules 3T3-L1 ont été choisies. Elles sont un modèle de différenciation adipocytaire utilisé depuis longtemps puisqu'elles possèdent les mêmes caractéristiques principales que les adipocytes et plusieurs résultats obtenus avec ce modèle ont été validés dans des modèles in vivo. Nos expériences de RT-PCR et d'études de liaison hormone-récepteur montrent que le R-AT2 n'est pas présent dans les préadipocytes, mais que son expression augmente au cours de la différenciation des cellules 3T3-L1. Nous avons utilisé un nouvel agoniste non-peptidique sélectif du R-AT2, le M24, afin d'éclaircir les rôles de ce récepteur lors de l'adipogenèse. L'activation du R-AT2 par le M24, en condition normale de différenciation, ne modifie pas l'expression des R-AT1 et R-AT2 ainsi que celle des marqueurs de la différenciation fonctionnelle tels aP2 et PPAR?. De plus, l'activation du R-AT2 n'affecte pas l'accumulation lipidique. Nous avons utilisé des traitements avec les acides gras, oléate et palmitate, afin de perturber l'homéostasie des cellules. Ces traitements n'ont pas modifié de manière significative les différents paramètres étudiés. Par conséquent, les effets bénéfiques potentiels de l'activation du R-AT2 par le M24, notamment sur la différenciation adipocytaire, n'ont pu être observés. D'autres études seront donc nécessaires afin d'éclaircir l'implication du R-AT2 lors de la différenciation adipocytaire des cellules 3T3-L1 et son effet bénéfique potentiel en condition de désordres métaboliques. Les causes possibles de cette absence d'effet sont discutées.

L'hypertension est une maladie qui, avec le vieillissement de la population, touche de plus en plus de gens. L'hypertension artérielle est généralement bien contrôlée par l'administration d'antihypertenseurs tels que les antagonistes des récepteurs AT[indice inférieur 1] .Ceux-ci sont très utilisés en clinique, puisqu'ils sont généralement très efficaces et présentent moins d'effets secondaires que les autres classes. Mais il y a parfois des patients pour qui les antagonistes (comme le Cozaar ou le Diovan) des récepteurs AT[indice inférieur 1] se montrent inefficaces ou présentent une efficacité réduite. Ces patients nécessitent alors une médication alternative ou une combinaison de médicaments, ce qui augmente alors les effets indésirables. Lors de précédentes études, il a été démontré que le récepteur AT[indice inférieur 1] du furet avait une affinité réduite pour le Losartan et que c'est la différence dans la position 163 du récepteur (Ala chez l'homme, Thr chez le furet) qui en était responsable. Récemment l'occurrence d'un SNP A163T hAT[indice inférieur 1] a été répertorié chez l'humain et afin de déterminer l'importance physiologique de la mutation d'une alanine pour une thréonine en position 163 du récepteur humain AT[indice inférieur 1] , des essais de liaison et de production de second messager ont été effectués. Cela a permis de démontrer que le récepteur humain muté, tout comme le récepteur du furet, présente une affinité réduite pour le Losartan et son métabolite actif. Notre hypothèse de travail était donc qu'un échec ou une efficacité réduite d'un traitement anti-hypertenseur avec Losartan ou un autre antagoniste de l'AT[indice inférieur 1] pourrait être dû à un changement pharmacodynamique s'ils portent le SNP (A163T hAT[indice inférieur 1] ). Un protocole de recherche clinique a été élaboré afin de vérifier si des patients hypertendus n'ayant pas répondu à une monothérapie à l'aide d'un antihypertenseur de la classe des antagonistes des récepteurs AT[indice inférieur 1] présentent une mutation dans la séquence de leur récepteur AT[indice inférieur 1] . Une dizaine de patients caucasiens du CHUS correspondant à ce profil ont été sélectionnés. Des patients contrôles ont aussi été choisis au hasard. En tout, l'analyse de la séquence AT[indice inférieur 1] de 26 patients du Centre Hospitalier de l'Université de Sherbrooke et de 14 patients Afro-Américains de l'hôpital Sacré-Coeur a été effectuée. Malheureusement la mutation recherchée n'a été retrouvée chez aucun des sujets de l'étude. Nous n'avons donc pu confirmer ou refuter notre hypothèse.

München, Techn. Univ., Diss., 2005.

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