Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / O cÃncer à uma complexa doenÃa de origem genÃtica, resultante de mutaÃÃes em proto-oncogenes e/ou genes supressores tumorais. à considerada uma das principais causas de morte por doenÃa no mundo. Estudos preliminares com o extrato acetÃnico e compostos isolados da espÃcie Annona muricata evidenciaram o seu potencial antitumoral. Annona muricata L. (Annonaceae) à popularmente conhecida como gravioleira; possui ampla distribuiÃÃo, principalmente em regiÃes tropicais. No Brasil, a espÃcie à utilizada como analgÃsico, hipoglicemiante, anti-inflamatÃrio, antitÃrmico, hepatoprotetor, antinevrÃlgico, antiparasitÃrio e antirreumÃtico. O presente trabalho descreve o isolamento de uma acetogenina, denominada anonacina, com anel mono-tetrahidrofurano, fÃrmula molecular C35H64O7 e massa de 596 u.m.a à partir do extrato acetÃnico das folhas da referida espÃcie, atravÃs de prospecÃÃo quÃmica bioguiada pela citotoxicidade usando o ensaio do MTT. Todas as fraÃÃes obtidas e a acetogenina isolada na prospecÃÃo apresentaram potencial citotÃxico nas linhagens tumorais testadas. Os valores de concentraÃÃo inibitÃria mÃdia dessa acetogenina, apresentaram-se na ordem de nano-molar. O ensaio de citotoxicidade mostrou que esse composto apresenta atividade antiproliferativa frente à todas as linhagens tumorais testadas, com CI50 variando de 3.280 nM a 1,56 nM em HL-60 e HCT-116, respectivamente apÃs 72 horas de incubaÃÃo, onde a substÃncia foi mais ativa frente Ãs linhagens HCT-116, OVCAR-8, SF-295 e PC-3M. Essa acetogenina nÃo foi capaz de inibir a proliferaÃÃo de cÃlulas mononucleares do sangue perifÃrico, embora tenha apresentado efeito hemolÃtico em eritrÃcitos de camundongos. A acetogenina AMFA-4, em linhagem de cÃlula de cÃncer colorretal, apresentou efeito citotÃxico dependente da dose e do tempo de incubaÃÃo, sendo capaz de alterar o nÃmero de cÃlulas viÃveis e nÃo-viÃveis apÃs 48 e 72 h de exposiÃÃo. Nesses dois tempos de incubaÃÃo, essa molÃcula foi capaz de alterar a morfologia das cÃlulas HCT-116, onde a mesma teve aumento do nÃcleo e citoplasma e aspecto fusiforme. O presente trabalho mostrou que o extrato acetÃnico das folhas de A. muricata à uma fonte promissora para obtenÃÃo de compostos pertencentes a classe das acetogeninas com atividade citotÃxica relevante em cÃlulas tumorais de origem humana. / Cancer is a complex disease of genetic origin, resulting from mutations in proto-oncogenes and / or tumor suppressor genes. It is considered one of the major causes of death in the world. Preliminary studies with the acetone extract and isolated compounds from the Annona muricata species demonstrated their antitumor potential. Annona muricata L. (Annonaceae), popularly known as soursop, has wide distribution, mainly in the tropical regions. In Brazil, the species is widely used as analgesic, hypoglycemic, anti-inflammatory, antipyretic, hepatoprotective, anti-neuralgic, anti-parasitic and anti-rheumatic. This study reports the isolation of an acetogenin, called Annonacin, with a mono-tetrahydrofuran ring, the molecular formula: C35H64O7 and a mass of 596 u.m.a from the acetone extract of Annona muricata leaves through a bioguided chemical prospecting by cytotoxicity using the MTT assay. All the obtained fractions and the isolated acetogenin showed a cytotoxic potential in the tested tumor cell lines. The values of the mean inhibitory concentration of this acetogenin, had an order of nano-molar. The cytotoxicity assay demonstrated that the compound has anti-proliferative activity against all the tested tumor cell lines, with an IC50 ranging from 3.280 nM to 1.56 nM in HL-60 and HCT-116, respectively, after 72 hours of incubation, where the substance was most active against the following tumor cell lines: HCT-116, OVCAR-8, SF-295 and PC-3M. This acetogenin was not able to inhibit the proliferation of normal peripheral blood cells, although it showed a hemolytic effect on mice erythrocytes. The Annonacin, in a colorectal cancer cell line, showed a cytotoxic effect strongly related to the dose and incubation time, being able to change the number of viable and non-viable cells after 48 and 72 h of exposure. In both incubation times, this molecule was able to modify the HCT-116 cell morphology, where it had an increase on the cytoplasm and nucleus size, besides a fusiform appearance. This study showed that the acetone extract from the A. muricata leaves is a promising source for obtaining compounds belonging to the acetogenins class with significant cytotoxic activity on tumor cells of human origin.

BARRETO, Francisco Stefânio. Estudo da atividade citotóxica de compostos obtidos do extrato acetônico das folhas de Annona muricata L. por fracionamento bioguiado. 89 f. 2014. Dissertação (Mestrado em Farmacologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2014. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2014-06-30T12:16:59Z No. of bitstreams: 1 2014_dis_fsbarreto.pdf: 2117438 bytes, checksum: db53fc399991c1dcddb3b5a9a16c79a3 (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2014-06-30T12:17:33Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_dis_fsbarreto.pdf: 2117438 bytes, checksum: db53fc399991c1dcddb3b5a9a16c79a3 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-06-30T12:17:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_dis_fsbarreto.pdf: 2117438 bytes, checksum: db53fc399991c1dcddb3b5a9a16c79a3 (MD5) Previous issue date: 2014 / Cancer is a complex disease of genetic origin, resulting from mutations in proto-oncogenes and / or tumor suppressor genes. It is considered one of the major causes of death in the world. Preliminary studies with the acetone extract and isolated compounds from the Annona muricata species demonstrated their antitumor potential. Annona muricata L. (Annonaceae), popularly known as soursop, has wide distribution, mainly in the tropical regions. In Brazil, the species is widely used as analgesic, hypoglycemic, anti-inflammatory, antipyretic, hepatoprotective, anti-neuralgic, anti-parasitic and anti-rheumatic. This study reports the isolation of an acetogenin, called Annonacin, with a mono-tetrahydrofuran ring, the molecular formula: C35H64O7 and a mass of 596 u.m.a from the acetone extract of Annona muricata leaves through a bioguided chemical prospecting by cytotoxicity using the MTT assay. All the obtained fractions and the isolated acetogenin showed a cytotoxic potential in the tested tumor cell lines. The values of the mean inhibitory concentration of this acetogenin, had an order of nano-molar. The cytotoxicity assay demonstrated that the compound has anti-proliferative activity against all the tested tumor cell lines, with an IC50 ranging from 3.280 nM to 1.56 nM in HL-60 and HCT-116, respectively, after 72 hours of incubation, where the substance was most active against the following tumor cell lines: HCT-116, OVCAR-8, SF-295 and PC-3M. This acetogenin was not able to inhibit the proliferation of normal peripheral blood cells, although it showed a hemolytic effect on mice erythrocytes. The Annonacin, in a colorectal cancer cell line, showed a cytotoxic effect strongly related to the dose and incubation time, being able to change the number of viable and non-viable cells after 48 and 72 h of exposure. In both incubation times, this molecule was able to modify the HCT-116 cell morphology, where it had an increase on the cytoplasm and nucleus size, besides a fusiform appearance. This study showed that the acetone extract from the A. muricata leaves is a promising source for obtaining compounds belonging to the acetogenins class with significant cytotoxic activity on tumor cells of human origin. / O câncer é uma complexa doença de origem genética, resultante de mutações em proto-oncogenes e/ou genes supressores tumorais. É considerada uma das principais causas de morte por doença no mundo. Estudos preliminares com o extrato acetônico e compostos isolados da espécie Annona muricata evidenciaram o seu potencial antitumoral. Annona muricata L. (Annonaceae) é popularmente conhecida como gravioleira; possui ampla distribuição, principalmente em regiões tropicais. No Brasil, a espécie é utilizada como analgésico, hipoglicemiante, anti-inflamatório, antitérmico, hepatoprotetor, antinevrálgico, antiparasitário e antirreumático. O presente trabalho descreve o isolamento de uma acetogenina, denominada anonacina, com anel mono-tetrahidrofurano, fórmula molecular C35H64O7 e massa de 596 u.m.a à partir do extrato acetônico das folhas da referida espécie, através de prospecção química bioguiada pela citotoxicidade usando o ensaio do MTT. Todas as frações obtidas e a acetogenina isolada na prospecção apresentaram potencial citotóxico nas linhagens tumorais testadas. Os valores de concentração inibitória média dessa acetogenina, apresentaram-se na ordem de nano-molar. O ensaio de citotoxicidade mostrou que esse composto apresenta atividade antiproliferativa frente à todas as linhagens tumorais testadas, com CI50 variando de 3.280 nM a 1,56 nM em HL-60 e HCT-116, respectivamente após 72 horas de incubação, onde a substância foi mais ativa frente às linhagens HCT-116, OVCAR-8, SF-295 e PC-3M. Essa acetogenina não foi capaz de inibir a proliferação de células mononucleares do sangue periférico, embora tenha apresentado efeito hemolítico em eritrócitos de camundongos. A acetogenina AMFA-4, em linhagem de célula de câncer colorretal, apresentou efeito citotóxico dependente da dose e do tempo de incubação, sendo capaz de alterar o número de células viáveis e não-viáveis após 48 e 72 h de exposição. Nesses dois tempos de incubação, essa molécula foi capaz de alterar a morfologia das células HCT-116, onde a mesma teve aumento do núcleo e citoplasma e aspecto fusiforme. O presente trabalho mostrou que o extrato acetônico das folhas de A. muricata é uma fonte promissora para obtenção de compostos pertencentes a classe das acetogeninas com atividade citotóxica relevante em células tumorais de origem humana.

OLIVEIRA, B. R. C. Efeito dos extratos hexânico e etanólico das folhas da gravioleira (Annona muricata L.) sobre a resposta imunológica de camundongos imunizados com ovalbumina. 2011. 95 f. Dissertação (Mestrado em Bioquímica) - Centro de Ciências, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2011. / Submitted by Francisco Lacerda (lacerda@ufc.br) on 2014-10-20T20:33:32Z No. of bitstreams: 1 2011_dis_brcoliveira.pdf: 1633150 bytes, checksum: db2169e402ea6234205dc67904ddf9e5 (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa(jairo@ufc.br) on 2014-10-21T16:28:28Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_dis_brcoliveira.pdf: 1633150 bytes, checksum: db2169e402ea6234205dc67904ddf9e5 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-10-21T16:28:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_dis_brcoliveira.pdf: 1633150 bytes, checksum: db2169e402ea6234205dc67904ddf9e5 (MD5) Previous issue date: 2011 / O objetivo do presente trabalho foi avaliar o perfil fitoquímico, o potencial antioxidante in vitro, o efeito toxicológico e a atividade imunomoduladora in vivo dos extratos etanólico e hexânico de folhas da gravioleira (Annona muricata L.). Para tanto, foram utilizadas folhas de A. muricata L. colhidas no mês de agosto de 2009, no município de Trairi, Ceará. A identificação botânica da folha foi realizada no Herbário Prisco Bezerra da Universidade Federal do Ceará - UFC (voucher nº 49002). Para os testes in vivo, foram utilizados camundongos Swiss e ratos albinos Wistar, todos oriundos de colônias do Biotério Central/UFC. O protocolo experimental foi submetido e aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa com Animal da UFC (Nº 16/10). Os extratos etanólico (EE) e hexânico (EH) foram avaliados quanto a composição fitoquímica e suas atividades antioxidantes in vitro. O EE apresentou taninos, catequinas, saponinas e esteróides, enquanto o EH apresentou apenas esteróides. Quanto à capacidade antioxidante, o EE apresentou maior índice de varredura do radical DPPH que o EH. Para avaliação do efeito toxicológico, os EE e EH foram administrados por via oral em camundongos, diariamente nas concentrações de 10, 100 e 1000 mg kg-1 durante 30 dias consecutivos e parâmetros clínicos e comportamentais foram observados. Os extratos não provocaram sintomas tóxicos, nem alteraram os parâmetros bioquímicos nem o peso relativo dos órgãos. Para o estudo da atividade imunomoduladora, os animais foram imunizados com ovalbumina (OVA; 10 µg; via s.c.) nos dias 0, 14 e 28 dias antes dos tratamentos com ou sem adjuvante de Freund e tratados ou não por via oral com Levamisol® (10 mg kg-1) e os EE e EH (10 e 100 mg kg-1) por 42 dias consecutivos. Os títulos de anticorpos totais e IgE específicos anti-OVA foram quantificados por ELISA e PCA respectivamente. EE e EH revelaram uma cinética de síntese de anticorpos anti-OVA distinta. EE e EH estimularam a produção de anticorpos totais anti-OVA, contudo não modularam a síntese de IgE anti-OVA. Neste sentido, os extratos da folha da gravioleira são imunoestimulantes e não induziram toxicidade.

Soursop (Annona muricata L.) is a species of exotic flavor that has awaked the interest of the fruit market in the whole tropical world. Its vegetative propagation has been studied for some time, but so far, no one came across with a satisfactory technique for mass cloning elite trees. Stem cuttings is considered a quick and simple method of vegetative propagation for several wood plants and once established can be executed by anyone. This study aimed to set the main parameters for rooting cuttings of soursop and so establish a protocol for the commercial production of high quality clonal seedlings. Therefore, experiments of rooting cuttings were carried out in a green house of the CECA/UFAL in Rio Largo, Alagoas (S09° 27 ' 57 ", W34 ° 50 ' 1", 127m altitude). The cuttings used in this work were obtained from vigorous branches of soursop cv. Giant of Alagoas with 8-years-old trees. In a first experiment, it was studied the position of the cuttings in the branches and concentrations of AIB. Then, a second experiment was set to establish the best size and leaf area of the cuttings. Finally, a third experiment tested the best position to spraying auxins on the cuttings. The results obtained in the whole study showed that IBA 2000 and 4000 mg. kg-1) sprayed on leaves or stem base of the cuttings with 6 or 12 cm with a pair of halved leaves is appropriated to massive clonal propagation of soursop elite trees. / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / A gravioleira (Annona muricata L.) é uma espécie de fruta tropical de sabor exótico tem despertado interesse em vários mercados do mundo. Sua propagação vegetativa vem sendo estudada a algum tempo, mas até o presente nenhum método foi apresentado como satisfatório para a clonagem massal de plantas de elite. A estaquia é considerada como um método simples e rápido de propagação vegetativa e que uma vez estabelecido torna-se de fácil execução por qualquer pessoa. Este trabalho objetivou estabelecer os principais parâmetros para o enraizamento de estacas de gravioleira para a produção comercial de mudas clonais de alta qualidade. Pata tanto, experimentos foram conduzidos em uma estufa de nebulização do CECA/UFAL em Rio largo-AL (S 09º 27‟ 57 , W 34º 50‟ 1 W e 127 m de altitude). As estacas utilizadas nesse trabalho foram obtidas de ramos jovens e vigorosos de gravioleiras da cv. Gigante das Alagoas com oito anos de idade. No primeiro experimento, estudou-se a posição da estaca no ramo e várias concentrações de AIB; Em seguida, e o segundo experimento foi realizado para estabelecer o melhor comprimento e a área foliar de cada estaca. Finalmente, no terceiro experimento testou a melhor posição para se pulverizar a auxina na estaca. Os resultados obtidos neste trabalho mostraram que o AIB na concentração de 2000 a 4000 mg. kg-1 aplicados na base das estacas; a pulverização nas folhas ou na base das estacas na concentração de 2000 mg. L-1 e comprimento de 6 ou 12 cm contendo um par de folhas cortadas ao meio é apropriado para propagar massivamente gravioleiras Gigante das Alagoas por estaquia.

published_or_final_version / abstract / Ecology and Biodiversity / Doctoral / Doctor of Philosophy

Members of the Annonaceae and Meliaceae, two plant families which are distributed throughout the world, have been studied during the course of this work. The research is an account of the compounds isolated from six members of the Meliaceae (Australian, Indian and South African) and one from the Annonaceae (South African). These families have attracted special attention of scientists world-wide because of the compounds these plants produce and their medicinal applications. Extracts from these species are known to be widely used in traditional medicine and previous studies have demonstrated their anticancer, anti-microbial and other pharmacological activities. Limonoids and protolimonoids were isolated from the Indian Meliaceae specIes, Aphanamixis polystacha and from the South African Meliaceae species Turraea obtusifolia. Extractives from the seeds of Aphanamixis polystacha yielded seven limonoids (2-A to 2-G) from the hexane extract, while the methanol extract only yielded sucrose (2-H). Three of the limonoids (2-B, 2-E and 2-F) were novel and the stereochemistry of polystachin, compound (2-A), was revised. Extractives from Turraea obtusifolia yielded two triterpenoids (3-A and 3-B) and a limonoid (3-C) from the hexane extract of the seed. Several triterpenoids and a benzofuran compound were isolated from the Australian Meliaceae species, Dysoxylum pettigrewianum, Dysoxylum muelleri and Aglaia sapindina. Extractives from Dysoxylum pettigrewianum, yielded three triterpenoids (4-A to 4-C) from the hexane extract of the bark. Two of these triterpenoids (4-Band 4-C) were novel. Extractives from Dysoxylum muelleri yielded two triterpenoids (4-D and 4E) from the methylene chloride extract of the wood. Extractives from Aglaia sapindina yielded a benzofuran compound (4-F) from the hexane extract of the wood. This resulted in the revision of the structure of ferrugin (4-56). A flavonoid (5-A) was isolated from the aqueous extract of the seed of the South African Meliaceae Trichilia dregeana. A polyoxygenated cyclohexane epoxide (6-A) was isolated from the root and leaves of the Annonaceae species, Monanthotaxis caffia. The research undertaken involved the collection, extraction, isolation, purification and structural elucidation of these compounds by infrared, mass and nuclear magnetic resonance spectroscopic techniques. / Thesis (Ph.D.)-University of Natal, 1997.

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2017-04-26T18:33:36Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 636419 bytes, checksum: 0c6ffc9d6431dddb948e57c60fb1eb76 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-26T18:33:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 636419 bytes, checksum: 0c6ffc9d6431dddb948e57c60fb1eb76 (MD5) Previous issue date: 2000-02-14 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Este trabalho teve por objetivo investigar os agentes polinizadores de A. muricata, bem como analisar a morfologia e biologia floral e o sistema reprodutivo dessa espécie. Os estudos foram realizados em pomares localizados em Visconde do Rio Branco (VRB), MG, e Una, BA. Os visitantes florais foram observados ao longo do dia e da noite, sendo anotados seu comportamento, e horário de visita, bem como o recurso utilizado. Os insetos foram capturados e etiquetados, sendo alguns deles depositados na coleção do Museu Regional de Entomologia da Universidade Federal de Viçosa (UFV) e outros enviados a especialistas. Flores em estádios diferentes de desenvolvimento foram analisadas à lupa e desenhadas. Outras flores foram observadas em dias consecutivos sendo anotados dados sobre o período e os eventos da antese. O odor das flores foi testado, assim como a viabilidade dos grãos de pólen. Os tratamentos realizados para estudar o sistema reprodutivo consistiram de polinização aberta, polinizações cruzadas (geitonogamia e xenogamia) e autopolinização espontânea. As flores apresentam características da cantarofilia (polinização por coleópteros), ou seja, são grandes, possuem cores pálidas (verde e amarelo-pálido), recurso floral (tecidos nutritivos) acessível e forte odor à noite. Outra característica importante ligada a essas flores é a "câmara de polinização", um espaço dentro da flor formado pelas pétalas internas envolvendo frouxamente o androceu e gineceu. Os grãos de pólen, organizados em tétrades, apresentaram, em média, 86% de viabilidade. As flores duraram quatro dias, sendo nos três primeiros dias funcionalmente femininas; no quarto dia, ao entardecer, ocorreu a deiscência das anteras, caracterizando a fase masculina. Os resultados das polinizações manuais indicaram que A. muricata é autocompatível, embora a dicogamia protogínica dificulte a autopolinização. Não houve diferença significativa entre os resultados obtidos dos testes de polinizações cruzadas. No pomar localizado em Una, BA, a taxa de frutificação da polinização aberta foi de 95,2% e, em VRB, MG, de 11,7%. A preservação da vegetação nativa (floresta atlântica) em Una e a sua localização próxima ao pomar parecem ser a razão dessa alta taxa de frutificação, pois favorecem a manutenção dos agentes polinizadores de A. muricata. Tais resultados evidenciaram que essa espécie é dependente de vetores de pólen para sua reprodução. As flores foram polinizadas por Cycocephala vestita Höhne, 1923 (Coleoptera: Scarabaeidae: Dynastinae), em Una, e por Cyclocephala hirsuta Höhne, 1923, em VRB. As visitas se iniciavam por volta das 18 h e 30 min, podendo prolongar-se, em dada flor, por dois ou três dias consecutivos. Nesse período, as flores apresentavam-se na fase feminina, e os besouros alimentavam-se de tecidos nutritivos, localizados nas pétalas internas. Por volta das 18 h do quarto dia, as anteras se abriam, e o corpo dos besouros ficava coberto de pólen. Logo após, as pétalas caíam, desabrigando esses insetos, que, provavelmente, foram atraídos por outras flores em fase feminina. / The objective of this work was to investigate pollinator agents of A. muricata, and to analyze the morphology and floral biology and the reproductive system of this species. The studies were carried out in orchards located in Visconde de Rio Branco (VRB), MG, and Una, BA. The floral visitors were observed during the day and the night, being recorded their behavior and time of visit, as well as the utilized mode. The insects were captured and tagged, being some of them placed in the collection of the Regional Museum of Entomology at the Federal University of Viçosa (UFV) and some sent to experts. Flowers in different stages of development were analyzed through magnifying glass and their pictures were drawn. Other flowers were observed in consecutive days, and data on period and events of anthesis were recorded. Flower smell was tested, as well as pollen viability. The treatments carried out to study the reproductive system consisted of open-pollination, cross-pollination (geitonogamy and xenogamy) and spontaneous self-pollination. The flowers present cantharophilic characteristics (pollination by coleopteran), that is, they are large in size, of pale colors (green and pale-yellow), floral recourse (nutrient tissues) accessible and strong smell by night. Another important characteristic linked to this flowers is the “pollination chamber”, a space within the flower that is formed by the internal petals loosely involving the stamens and gynoecium. The pollen grains, organized in tetrads, showed 86% of viability, in average. The flowers lasted four days, being functionally female in the three first days; in the fourth day, by the late afternoon, the anther dehiscence occurred, characterizing the male phase. The results of the by-hand pollinations indicated that A. muricata is self- compatible, although the protoginic dichogamy makes self-pollination difficult. There was no significant difference between the results obtained from the cross pollination tests. In the orchard localized in Una, BA, the fructification rate from the open-pollination was 95.2%, and in VRB, MG, 11.7%. The conservation of native forest (Atlantic Forest) in Una and its localization near the orchard seem to be the reason for this high fructification rate, as they favour the maintenance of pollinator agents of A. muricata. Such results made evident that this species is dependent on pollen vectors for its reproduction. Flowers were pollinated by Cycocephala vestita Höhne, 1923 (Coleoptera: Scarabaeidae: Dynastinae), in Una, and by Cyclocephala hirsuta Höhne, 1923, in VRB. Visits started around 18.30 hr, and could extend, in a given flower, for two or three consecutive days. During this time, the flowers were in the female phase and beetles fed on nutrient tissues from the internal petals. Around 18.00 hr in the fourth day, the anthers opened and the beetles were covered by pollen. Soon after, the petals fell, unsheltering those insects, which were probably attracted by other flowers in the female phase. / Não foi localizado o cpf do autor.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / O objetivo do presente trabalho foi avaliar o perfil fitoquÃmico, o potencial antioxidante in vitro, o efeito toxicolÃgico e a atividade imunomoduladora in vivo dos extratos etanÃlico e hexÃnico de folhas da gravioleira (Annona muricata L.). Para tanto, foram utilizadas folhas de A. muricata L. colhidas no mÃs de agosto de 2009, no municÃpio de Trairi, CearÃ. A identificaÃÃo botÃnica da folha foi realizada no HerbÃrio Prisco Bezerra da Universidade Federal do Cearà - UFC (voucher n 49002). Para os testes in vivo, foram utilizados camundongos Swiss e ratos albinos Wistar, todos oriundos de colÃnias do BiotÃrio Central/UFC. O protocolo experimental foi submetido e aprovado pelo Comità de Ãtica em Pesquisa com Animal da UFC (N 16/10). Os extratos etanÃlico (EE) e hexÃnico (EH) foram avaliados quanto a composiÃÃo fitoquÃmica e suas atividades antioxidantes in vitro. O EE apresentou taninos, catequinas, saponinas e esterÃides, enquanto o EH apresentou apenas esterÃides. Quanto à capacidade antioxidante, o EE apresentou maior Ãndice de varredura do radical DPPH que o EH. Para avaliaÃÃo do efeito toxicolÃgico, os EE e EH foram administrados por via oral em camundongos, diariamente nas concentraÃÃes de 10, 100 e 1000 mg kg-1 durante 30 dias consecutivos e parÃmetros clÃnicos e comportamentais foram observados. Os extratos nÃo provocaram sintomas tÃxicos, nem alteraram os parÃmetros bioquÃmicos nem o peso relativo dos ÃrgÃos. Para o estudo da atividade imunomoduladora, os animais foram imunizados com ovalbumina (OVA; 10 Âg; via s.c.) nos dias 0, 14 e 28 dias antes dos tratamentos com ou sem adjuvante de Freund e tratados ou nÃo por via oral com Levamisol (10 mg kg-1) e os EE e EH (10 e 100 mg kg-1) por 42 dias consecutivos. Os tÃtulos de anticorpos totais e IgE especÃficos anti-OVA foram quantificados por ELISA e PCA respectivamente. EE e EH revelaram uma cinÃtica de sÃntese de anticorpos anti-OVA distinta. EE e EH estimularam a produÃÃo de anticorpos totais anti-OVA, contudo nÃo modularam a sÃntese de IgE anti-OVA. Neste sentido, os extratos da folha da gravioleira sÃo imunoestimulantes e nÃo induziram toxicidade. / The aim of this work was to evaluate the phytochemical profile, the ant ioxidant potential in vitro , the toxicological effect and immunomodulatory activity in vivo from ethanolic and hexane soursop ( Annona muricata L.) leaves extracts . To this end, we used leaves of A . muricata L. harvested in August 2009 in the mu nicipality from Trairi, CearÃ. The botanical identification of the leaf was held in the Herbarium Prisco Bezerra of the Universidade Federal do Cearà - UFC (voucher number 49002). For in vivo tests were used Swiss mice and Wistar rats all from the Central Biotery of th e Federal University of Ceara - UFC . The experimental protocol was approved by the Animal Ethics Committee of UFC (No. 16/10). The ethanolic (EE) and hexane (HE) extract s were evaluated for their phytochemical composition and antioxidant activities in vitro . The EE presented tannins, catechins, sap onins and steroids, while the HE presented only steroids. As for antioxidant capacity, the EE h ad greater index scan free radical DPPH than the HE . To evaluate the toxicological effect, the EE and HE were administered orally to mice, daily concentrations of 10, 100 and 1000 mg kg - 1 for 30 consecutive days and clinical and behavioral parameters were observed. The extracts did not cause toxic symptoms, nor altered the biochemical parameters and organ w eights. To study the immunomodulatory activity, the animals were immunized with ovalbumin (OVA; 10 μg ; route s.c.) on days 0 , 14 and 28 days before the treatments with or without Freund's adjuvant and treated or not with oral levamisole (10 mg kg - 1) and EE and HE (10 and 100 mg kg - 1) for 42 consecutive days . The total antibody titers and specific IgE anti - OVA were quantified by ELISA and PCA respectively. EE and HE revealed different kinetics for antibodies anti - OVA synthesis . EE and HE stimulated the production of total antibodies anti - OVA, but didnât modulate the synthesis of anti - OVA IgE . In this sense, th e soursop leaves extracts are immunostimulants and didnât induce toxicity

A espécie endêmica G. elliptica R. E. Fries não apresentava estudos fitoquímicos e biológicos detalhados na literatura. Assim, o objetivo desse trabalho foi avaliar a composição química e as propriedades biológicas dos óleos essenciais, extratos brutos, alcaloides totais, tortas, frações das tortas, amostras isoladas dessa espécie. O material vegetal foi coletado em Paranapiacaba (Santo André, SP, Brasil). O óleo essencial extraído das folhas por destilação à vapor apresentou um rendimento de 0,2%. A análise histológica das folhas encontrou óleo em células oleíferas localizadas no parênquima esponjoso. A composição do óleo (CG-EM) indicou espatulenol e óxido de cariofileno como compostos majoritários. Os alcaloides totais foram obtidos dos extratos brutos das folhas e dos galhos e analisados por CG-EM, identificando quatro aporfinas (nornuciferina, estefarina, corituberina e asimilobina) e duas protoberberinas (discretamina e caseadina). Os alcaloides totais foram fracionados em coluna cromatográfica ou por Extração em Fase Sólida e purificados por cromatografia em camada preparativa, originando duas amostras (Amostra 9 e 10). Na Amostra 9, foram identificados dois alcaloides aporfinicos nornuciferina e asimilobina (CG-EM e RMN-1H). Na Amostra 10, foram identificados (LC-EM/EM) cinco alcaloides aporfínicos (desidronantenina, glaunidina, liriodenina, N-óxido de oliverina e telikovina) e um alcaloide protoberberínico (caseadina). Caseadina, glaunidina, N-óxido de oliverina e telikovina não foram previamente identificados em Guatteria. Os resíduos dos extratos brutos livres de alcaloides foram fracionados pelo método de partição com solventes de polaridade crescente. Os extratos brutos e as frações acetato de etila e butanólicas de folhas e galhos apresentaram flavonoides (NP-PEG). Nos ensaios biológicos, a melhor atividade antioxidante (sequestro do radical DPPH) foi encontrada para a fração clorofórmica dos galhos (EC50=24,25±1,14 &#181;g/mL) e a torta dos galhos (EC50=26,23±4,20 &#181;g/mL). No ensaio antimicrobiano pelo método turbidimétrico a atividade mais importante foi obtida contra Staphylococcus aureus (ATCC 6538) para os alcaloides totais dos galhos (CIM/CBM=0,12±0,01/0,26 mg/mL) e das folhas (CIM/CBM=0,21±0,01/0,28 mg/mL), e fração hexânica das folhas (CIM/CBM=0,24±0,02/>1 mg/mL). Uma alta atividade antitumoral foi observada frente a células humanas de mama (MCF-7) para Amostra 10 (IC50=2,28±0,18 &#181;g/mL), fração de acetato de etila das folhas (IC50=4,47±0,40 &#181;g/mL), óleo essencial (IC50=7,01±0,23 &#181;g/mL) e os alcaloides totais das folhas (IC50=9,32±0,36 &#181;g/mL). Para as células de próstata (PC-3), foi encontrada atividade para a Amostra 10 (IC50=1,37±0,36 &#181;g/mL) e o óleo essencial (IC50=5,32±0,35 &#181;g/mL). A futura aplicação dos extratos e frações de G. elliptica como um agente antitumoral parece ser segura, pois mantiveram uma viabilidade celular maior do que 90% no ensaio de citotoxicidade com culturas de fibroblasto murino (BALB/c 3T3, ATCC CCL-163) nas concentrações onde a atividade antitumoral foi promissora (<30 &#181;g/mL) contra MCF-7 e/ou PC-3. / The endemic species G. elliptica R. E. Fries had not yet been thouroughly investigated phytochemically and biologically. Therefore, the objective of this work was to evaluated the chemical and biological properties of the G. elliptica essential oils, crude extracts, alcaloid-free extracts, total alcaloids, fractions and isolated samples. The plant material was collected in Paranapiacaba (Santo Andre, SP, Brazil). The leaves essential oil, was obtained by hydrodestillation with a yield of 0.2%. In the leaves, the oil was found in secretory cells, located in the spongy parenchyma. The oil analysis (GC-MS) identified spathulenol and caryophyllene oxide as major compounds. The total alkaloids were extracted from the leaves and branches crude extracts and analysed by GC-MS, identifying four aporphines (nornuciferine, stepharine, corytuberine, assimilobine) and two protoberberines (discretamine and caseadine). Total alkaloids were fractionated by column chromatography or solid phase extraction and purified by preparative thin layer chromatography affording two samples (Sample 9 and 10). In Sample 9, two aporphin alkaloids were found and identified (GC-MS and 1H-NMR) as nornurciferine and assimilobine. In Sample 10, were identified (LC-MS/MS) five aporphin alkaloids (dehydronantenine, glaunidine, liriodenine, N-oliverine oxide and telikovine) and one protoberberine alkaloid (caseadine). Caseadine, glaunidine, oliverine N-oxide and telkovine were not previously reported for Guatteria. The alkaloids-free extracts were fractionated using the increasing polarity solvents. Concerning the biological activities, the highest antioxidant activity (DPPH scavenging) was reported for the branches chloroform fraction (EC50=24.25±1.14 &#181;g/mL) and (EC50=26.23±4.20 &#181;g/mL) alkaloid-free extract. In the turbimetric antimicrobial assay against, the most important activity was found against Staphylococcus aureus (ATCC 6538) for the total alkaloids from branches (MIC/MBC=0.12±0.01/0.26 mg/mL) and leaves (MIC/MBC=0.21±0.01/0.28 mg/mL) and for the leaves hexane fraction (MIC/MBC=0.24±0.02/>1 mg/mL). The highest antitumor activity against human breast cancer cell line (MCF-7) was observed for Sample 10 (IC50=2.28±0.18 &#181;g/mL), leaves ethyl acetate fraction (IC50=4.47±0.40 &#181;g/mL), essential oil (IC50=7.01±0.23 &#181;g/mL) and leaves total alkaloids (IC50=9.32±0.36 &#181;g/mL). For the prostate cancer cell line (PC-3), the most active samples were Sample 10 (IC50=1.37±0.36 &#181;g/mL) and the essential oil (IC50=5.32±0.35 &#181;g/mL). The future application of G. elliptica extracts and fractions as an antitumor agent appears to be safe, because cell viability remained higher than 90% in the cytotoxicity assay with murine fibroblast cultures (BALB/c 3T3, ATCC CCL-163), in the concentration range where the best antitumor activity (<30 &#181;g/mL) against MCF-7 and PC-3 was found.

As Annonaceae da Reserva Natural Vale, localizada em Linhares, Espírito Santo, estão distribuídas em 11 gêneros e 28 espécies. São apresentadas chaves de identificação para os gêneros e para as espécies, ilustrações dos caracteres diagnósticos e pranchas fotográficas das espécies. O gênero com maior número de espécies é Annona, com cinco, seguido por Guatteria com quatro. Duguetia, Honschuchia, Oxandra e Xylopia têm três espécies cada e Unonopsis, duas espécies. Anaxagorea, Cymbopetalum, Ephedranthus e Pseudoxandra são representados por apenas uma espécie cada. A identidade das espécies de Guatteria na reserva é controversa. Análise morfológica permitiu incluir espécimes atribuídos a G. tomentosa em G. villosissima. Flores masculinas de Pseudoxandra spiritus-sancti são descritas pela primeira vez, constituindo também o primeiro relato de androdioicia em Pseudoxandra / The Annonaceae from Natural Reserve Vale located in Linhares, Espírito Santo, include 11 genera and 28 species. Key to genera and species, illustrations to diagnostics features and photographic plates are presented. Annona is the most diverse genus, with five species, followed by Guatteria, with four. Duguetia, Honschuchia, Oxandra and Xylopia are represented by three species each, and Unonopsis by two. Anaxagorea, Cymbopetalum, Ephedranthus and Pseudoxandra are represented by only one species each. The identity of Guatteria species is controversial. Morphological analysis allowed to include specimens attributed to G. tomentosa in G. villosissima. Male flowers of Pseudoxandra spiritus-sancti are described for the first time, constituting the first report of androdioicy in Pseudoxandra