A leishmaniose, doença parasitária vetoriada causada por protozoários do gênero Leishmania, é uma das principais doenças tropicais negligenciadas do mundo. Os medicamentos atualmente disponíveis para o tratamento das leishmanioses são insatisfatórios, principalmente devido à baixa efetividade dos mesmos, surgimento de resistência do parasito ou reações adversas graves apresentadas pelos pacientes. Nas últimas décadas, tem havido um interesse renovado em produtos naturais derivados de micro-organismos como fonte para a concepção de novas drogas. As bactérias entomopatogênicas Xenorhabdus nematophila e Photorhabdus luminescens produzem grande número de metabólitos secundários, muitos deles têm efeitos tóxicos específicos sobre as células eucarióticas. O objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade leishmanicida de sobrenadantes de culturas destas bactérias. Os testes in vitro foram realizados sobre formas promastigotas e amastigotas de Leishmania amazonensis e incluíram o efeito citotóxico dos sobrenadantes sobre macrófagos. Ambos os sobrenadantes de culturas de P. luminescens e X. nematophila mostraram atividade leishmanicida significativa contra as formas promastigotas de L. amazonensis (valores de CI50 de 7,5 % e 0,63 % (v/v), respectivamente). O sobrenadante de cultura de X. nematophila foi o mais efetivo e o mais estável ao calor. Além disso, ambos os sobrenadantes de culturas continham pequenas moléculas que estimularam a atividade leishmanicida de macrófagos por um mecanismo independente de óxido nítrico. Estes resultados revelaram que estas bactérias entomopatogênicas são fontes potenciais para a concepção de novos medicamentos contra a leishmaniose. / Leishmaniasis, a vector-borne parasitic disease caused by protozoa of the genus Leishmania, is one of the main neglected tropical diseases in the world. The drugs currently available for the treatment are unsatisfactory, mainly due to their low effectiveness, parasite resistance emergence or serious adverse reactions presented by the patients. In recent decades, there has been a renewed interest in natural products derived from microorganisms as a source for the design of new drugs. The Entomopathogenic bacteria Xenorhabdus nematophila and Photorhabdus luminescens produce a large number of secondary metabolites, many of them have specific toxic effects on eukaryotic cells. The objective of this study was to evaluate the leishmanicidal activity of these bacteria culture supernatants. In vitro tests were performed on promastigote and amastigote forms of L. amazonensis and included the cytotoxic effect of the supernatants on macrophages. Both supernatants from P. luminescens and X. nematophila cultures showed significant leishmanicidal activity against promastigotes forms of L. amazonensis (IC50 values of 7.5% and 0.63 % (v/v), respectively). The supernatant from X. nematophila was the most effective and more heat-stable. Furthermore, both culture supernatants contained small molecules that stimulated the leishmanicidal activity of macrophages by a mechanism independent of nitric oxide. These results revealed that these entomopathogenic bacteria are potential sources for the development of new drugs against leishmaniasis.

Introdução: O emprego de técnicas de interpretação imunológica de agentes infecciosos, de uma maneira geral, confere maior sensibilidade e especificidade ao exame histopatológico; o anticorpo policlonal anti-BCG tem sido testado como uma coloração imunoistoquímica de triagem para espécimes de biópsias cutâneas, com suspeita de origem infecciosa; em casos de infecções fúngicas e bacterianas, os resultados mostraram-se claramente superiores aos conseguidos pelas técnicas histoquímicas convencionais. Objetivos: Verificar a positividade da reação imunoistoquímica com o anti-BCG em granulomas imunológicos cutâneos, que não puderam ter o seu diagnóstico etiológico definido pelos métodos histoquímicos usuais de coloração para agentes infecciosos (Grocott e Ziehl-Neelsen) e também descrever a sensibilidade e especificidade deste anticorpo, através da comparação com os exames culturais para fungos e micobactérias. Metodologia: Procedeu-se à técnica imunoistoquímica com o anti-BCG em 33 biópsias cutâneas com granulomas imunológicos, com colorações de Grocott e Ziehl-Neelsen negativas. Também foram selecionados 13 casos de hanseníase virchowiana e 11 de granulomas por degeneração do colágeno, para que servissem de controles positivos e negativos, respectivamente. A leitura das lâminas foi realizada por dermatopatologista do HCPA que não tinha conhecimento dos dados clínicos dos pacientes. Não foi realizada a quantificação do antígeno nos cortes. Resultados: Dos 33 casos estudados, 13 (39,4%) apresentaram imunoistoquímica positiva com o anti-BCG, os diagnósticos finais foram: 4 casos (12,12%) de tuberculose, 4 casos de esporotricose, 1 caso (3.03%) de cromomicose, 1 caso de hanseníase tuberculóide e 3 casos (9.09%) que não puderam ter o diagnóstico conhecido, pois perderam o acompanhamento médico. A sensibilidade do anti-BCG quando comparado com a cultura para fungos foi de 57,1% e a especificidade de 66,7%; na comparação com a cultura para micobactérias a sensibilidade foi de 100%, porém só haviam 2 exames positivos, e a especificidade foi de 67,7%. Nos casos de hanseníase virchowiana, a sensibilidade e a especificidade foi de 100%. Conclusão: A técnica imunoistoquímica com o anticorpo anti-BCG é relativamente fácil, rápida e de baixo custo e mostrou ser útil na identificação de microorganismos que não foram prontamente visualizados com as colorações de Grocott e Ziehl-Neelsen. Entretanto, o pequeno número de controles pode ter influenciado no desempenho do método.

Submitted by Fernanda Rodrigues de Lima (fernanda.rlima@ufpe.br) on 2018-08-31T22:28:55Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Sandro do Nascimento Silva.pdf: 1571649 bytes, checksum: 6af5597f0802b07298537ce02399f8c4 (MD5) / Approved for entry into archive by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-09-12T19:15:36Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Sandro do Nascimento Silva.pdf: 1571649 bytes, checksum: 6af5597f0802b07298537ce02399f8c4 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-09-12T19:15:37Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Sandro do Nascimento Silva.pdf: 1571649 bytes, checksum: 6af5597f0802b07298537ce02399f8c4 (MD5) Previous issue date: 2013-09-30 / Lectinas são proteínas de origem não imunológica que se ligam de forma específica e reversível a carboidratos. Alpinia zerumbet é uma planta ornamental utilizada na medicina popular de modo muito abrangente para tratamento de enfermidades como inflamações, febre e gripe. Neste trabalho lectinas foram extraídas e purificadas a partir de folhas (AzeLL, do inglês A. zerumbet leaf lectin) e flores (AzeFL, do inglês A. zerumbet flower lectin) de A. zerumbet e avaliadas quanto à atividade antibacteriana contra Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Klebsiella pneumoniae e Shigella sonnei através da determinação de concentrações mínima inibitória (CMI) e mínima bactericida (CMB), bem como a atividade termiticida contra operários e soldados da espécie Nasutitermes corniger. Extratos em solução salina e tampões com diferentes valores de pH foram preparados. Os extratos em citrato-fosfato 0,1 M pH 7,0 mostraram maior atividade hemaglutinante específica e foram chamados então de extrato de folha (LE, do inglês leaf extract) e extrato de flor (FE, do inglês flower extract). As atividades hemaglutinantes de LE e FE foram inibidas por N-acetilglicosamina. Fracionamento salino utilizando sulfato de amônio não resultou em preparações enriquecidas em lectina. Sendo assim, LE e FE foram cromatografados em colunas de quitina. Os picos proteicos adsorvidos e eluídos com ácido acético 1,0 M foram dialisados e denominados AzeLL e AzeFL, que apresentaram atividade hemaglutinante específica de 640 e 984,6, respectivamente. FE e AzeFL perderam completamente a atividade hemaglutinante após aquecimento a 70 °C por 30 min, enquanto o LE perdeu a sua atividade apenas após aquecimento a 100 °C e AzeLL após aquecimento a 80 °C. LE inibiu o crescimento de E. coli, P. aeruginosa e S. sonnei (CMI de 1235 μg/ml de proteínas para todas as bactérias) e FE inibiu P. aeruginosa e S. sonnei (CMI de 1135 μg/ml de proteínas para ambas). AzeLL só foi capaz de inibir o crescimento de K. pneumoniae (CMI: 970 μg/mL), enquanto AzeFL inibiu apenas S. sonnei (CMI: 820 μg/mL). Os extratos, AzeLL e AzeFL agiram apenas como agentes bacteriostáticos. No ensaio termiticida, a morte de todos os operários mantidos em contato com LE, FE, AzeLL e AzeFL ocorreu em cerca de 3-6 dias, mais cedo que no controle (taxa de mortalidade de 100% após 9 dias). No entanto, não houve diferenças significativas (p> 0,05) entre as curvas de sobrevivência dos operários estabelecidas para o controle e as amostras em todas as concentrações testadas. Por outro lado, LE (0,5 e 1,0 mg/mL de proteínas) FE , AzeLL e AzeFL (0,0625–1,0 mg/mL) induziram significativamente (p<0,05) a morte dos soldados de N. corniger. Em conclusão, AzeLL e AzeFL foram purificadas a partir de cromatografia em coluna de quitina, apresentaram relativa termoestabilidade, foram eficientes em inibir o crescimento das bactérias K. pneumoniae e S. sonnei, respectivamente, e são agentes termiticidas contra soldados de N. corniger. / Lectins are proteins from non-immune origin that bind specifically and reversibly to carbohydrates. Alpinia zerumbet is an ornamental plant used in folk medicine in a very comprehensive manner for treatment of infirmities such as inflammation, fever and flu. In this work, lectins were extracted and purified from leaves (AzeLL, A. zerumbet leaf lectin) and flowers (AzeFL, A. zerumbet flower lectin) of A. zerumbet and evaluated for antibacterial activity against Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Klebsiella pneumoniae and Shigella sonnei by determining the minimal inhibitory (MIC) and minimal bactericidal (MBC) concentrations as well as for termiticidal activity against Nasutitermes corniger workers and soldiers. Extracts in saline solution and buffers at different pH values were prepared. The extracts in 0.1 M citrate-phosphate pH 7.0 showed highest specific hemagglutinating activity and were called LE (leaf extract) and FE (flower extract). Hemagglutinating activities of LE and FE were inhibited by N-acetylglucosamine. Saline fractionation using ammonium sulphate did not result in preparations richer in lectin. Thus LE and FE were cromatographed on chitin columns. The adsorbed protein peaks eluted with 1.0 M acetic acid were dialysed and called AzeLL and AzeFL, which showed specific hemagglutinating activity of 640 and 984.6, respectively. FE and AzeFL completely lost the hemagglutinating activity after heating at 70 ºC for 30 min while LE lost its activity only after heating at 100 ºC and AzeLL after heating at 80 ºC. LE inhibited the growth of E. coli, P. aeruginosa and S. sonnei (MIC of 1235 μg/ml of protein for all bacteria) and FE inhibited P. aeruginosa and S. sonnei (MIC of 1135 μg/ml of protein for both). AzeLL was only able to inhibited the growth of K. pneumoniae (MIC: 970 μg/mL) while AzeFL only inhibited S. sonnei (MIC: 820 μg/mL). The extracts, AzeLL and AzeFL acted only as bacteriostatic drugs. In the termiticidal assay, the death of all workers maintained in contact with LE, FE, AzeLL and AzeFL occurred around 3-6 days, earlier than in control (100% of mortality rate after 9 days). However, there were no significant differences (p>0.05) between the survival curves established for control and the sampels at all tested concentrations. On the other hand, LE (0.5 and 1.0 mg/mL of protein), FE, AzeLL and AzeFL (0.0625–1.0 mg/mL) induced significantly (p<0.05) the death of N. corniger soldiers. In conclusion, AzeLL and AzeFL were purified by chitin chromatography, showed relative thermostability, were effective in inhibit growth of the bacteria K. pneumoniae and S. sonnei, respectively, and are both termiticidal agents against N. corniger soldiers.

Determina la susceptibilidad de Bacilos Negro Pigmentantes (BNP) frente a sustancias antibacterianas producidas por Lactobacillus reuteri. Los BNP son aislados de muestras tomadas de bolsas periodontales de pacientes con enfermedad periodontal atendidas en la Facultad de Odontología de la Universidad Nacional Mayor de San Marcos. Obtiene las cepas de Lactobacillus reuteri DSM17938 del producto comercial Lactobacillus reuteri Protectis (BioGaia). Cultiva BNP en agar Schaedler y luego en medio Tioglicolato + Hemina + Menadiona para la prueba de antagonismo. El Lactobacillus es cultivado en medio Man Rogosa Sharpe (MRS) e inoculado en placas Petri de agar MRS y se deja crecer en condiciones de microaerofilia. Utiliza una técnica de recubrimiento de agar líquido (1%) con BNP vertido sobre las placas de MRS de Lactobacillus. Después de una incubación en condiciones de anaerobiosis, se observa que los BNP crecieron a lo largo de la extensión de la placa Petri. Concluye que no existe susceptibilidad de BNP frente a las sustancias antibacterianas producidas por Lactobacillus reuteri. / Tesis

Orientador : Antonio Carlos Boschero / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-16T21:56:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pinheiro_ElianadeCassia_M.pdf: 3617602 bytes, checksum: 71e9afaaf788da08e091cb55bd3e0231 (MD5) Previous issue date: 1988 / Resumo: Ratos com grau moderado de diabetes não apresentaram alterações significativas na severidade do mesmo, avaliada por glicemia, evolução ponderal, ingestão de água, diurese de 24 horas, consumo de reação, pesos do rim direito da gordura epididimal e da gordura perirrenal, pelo tratamento diário com 10 mg de gentamicina/kg peso corporal/dia. Ratos com diabetes moderado tratados com 50 mg de gentamicina/kg peso corporal/dia não apresentaram alterações na glicemia, na evolução ponderal, na ingestão de água, no consumo de ração, nos pesos do rim direito, da gordura epididimal e da gordura perirrenal. Por outro lado, apresentaram aumento da diurese de 24 horas, da uréia sérica e tendência deu aumento da diurese de 24 horas, da uréia sérica e tendência e aumento da creatinina sérica. Esses dados avaliados em conjunto sugerem o desenvolvimento de alterações renais provocadas pela alta dose do antibiótico do que para o aumento da severidade do diabetes. Ratos com diabetes moderado tratados diariamente com 2 x 25 mg de gentamicina/Kg peso corporal apresenta diminuição da glicemia no período de tratamento, a qual se manteve no período de recuperação. Tal alteração poderia significar a ação hepática do antibiótico aumentando a captação de glicose e/ou diminuindo a ação do glucagom, também á nível hepático: aumento da sensibilidade periférica da insulina e/ou diminuindo a secreção de outros hormônios hiperglicemiantes / Mestrado / Fisiologia / Mestre em Ciências Biológicas

El presente trabajo constituye un estudio descriptivo prospectivo de corte transversal (prescripción-indicación) cuyo objetivo es determinar las características de uso de ceftriaxona y ceftazidima y evaluar la prescripción con la Guía de tratamiento antimicrobiano Sanford en la Sala de Pacientes Críticos del Servicio de Emergencia del Hospital Nacional Guillermo Almenara Irigoyen – EsSalud de Perú durante los meses de abril y mayo del 2005. Se evaluaron 293 historias clínicas, de los cuales 157 pacientes recibieron terapia antimicrobiana, de ellos 124 pacientes recibieron cefalosporinas de tercera generación como ceftriaxona y ceftazidima lo cual representa el 43.32%. De estos 124 casos, el 64.52% corresponde a ceftriaxona y el 35.48% corresponde a ceftazidima, lo cual demuestra un alto uso de de estos dos antimicrobianos coincidiendo con otros estudios de utilización de antimicrobianos. Según los resultados de este estudio se recomienda estandarizar el tratamiento de los pacientes con diagnóstico de infección mediante un protocolo farmacoterapéutico para las diferentes diagnósticos de infección y demás patologías con la finalidad de reducir la resistencia antimicrobiana y el coste de estos tratamientos. Las investigaciones en Emergencia son escasas por lo que es importante continuar y ampliar los estudios para así poder elaborar estrategias más específicas para nuestra realidad. / -- The present work is a prospective descriptive cross-sectional study (prescription- indication) with the aim of establishing characteristics of use of ceftriaxone and ceftazidime and assessing the prescription with the Sanford Guide to Antimicrobial Therapy in Room of Critical Patients in the Emergency Service of the Guillermo Almenara Irigoyen National Hospital – EsSalud in Lima (Perú) during the months of April and May 2005. It assessed 293 histories, of whom 157 patients received antimicrobial therapy, of whom 124 patients received ceftriaxone and ceftazidime which represents 43.32%. Of these 124 cases, the 64.52% corresponds to ceftriaxone and the 35.48% corresponds to ceftazidime, which shows a high use of these antimicrobial coinciding with other studies of the use of antimicrobials. According to the results of this study recommends standardize the treatment of patients with a diagnosis of infection through a pharmacotherapeutic protocol for the different diagnoses of infection and other pathologies with the aim of reducing antimicrobial resistance and the cost of these treatments. The investigations in Emergency are few and it is important to continue and expand the studies so it can develop more specific strategies for our reality.

Publicación a texto completo no autorizada por el autor / Evalúa e identifica nuevos poliquétidos de la clase de compuestos de piranonaftoquinonas (PNQs), de las especies de Streptomyces, con potencial contra biopelículas de Staphylococcus aureus. Determina el potencial antimicrobiano de los compuestos contra las células planctónicas y biopelículas a través de la tinción de viabilidad con base de tinte redox. La eficacia anti-biopelícula es confirmada por el recuento de viabilidad (Logaritmo de reducción). La alnumicina D resulta ser el más potente poliquétido de PNQ anti-biopelícula dentro del grupo de las alnumicinas. Es importante resaltar que la alnumicina D es un compuesto derivado de la ruta biosintética de las PNQs y que el producto final, alnumicina A, no muestra actividad significativa anti-biopelícula; así también, se observa que la presencia de la poco frecuente unidad C-ribosil en la forma de piranosa es esencial para presentar elevado potencial en el grupo de las alnumicinas. Por otro lado, la medermicina, compuesto glicosilado con una unidad de aminoazúcar cargada y derivada de glucosa, no presenta elevada actividad anti-biopelícula en comparación con su unidad de aglicona kalafungina. La granaticina B exhibe similar potencial anti-biopelícula que la alnumicina D y además ambas comparten características estructurales como el de no poseer carga, ser glicosilados y mostrar similar patrón de oxigenación. En consecuencia, estos hallazgos resaltan la ruta biosintética de los antibióticos como potencial fuente de efectivos compuestos anti-biopelículas. / Tesis

Orientadora: Maria Lucia Gonsales da Costa Araujo / Banca: Kelly Johana Dussán Medina / Banca: Rosineide Gomes da Silva Cruz / Resumo: Streptomyces clavuligerus produz vários compostos bioativos importantes, como os beta-lactâmicos ácido clavulânico (AC), um inibidor de beta-lactamases utilizado em combinação com antibióticos beta-lactâmicos, e mais vinte clavamas (várias com atividade antifúngica), o antibiótico cefamicina (CefC), utilizado comercialmente para a produção de antibióticos semi-sintéticos, além de bioativos não beta-lactâmicos como tunicamicina e holomicina. Estudos têm mostrado que tanto a natureza como a concentração de fontes de nitrogênio influenciam a produção de bioativos em S. clavuligerus, pois muitos precursores destes biocompostos derivam de intermediários nitrogenados do metabolismo primário. Um aminoácido importante para o cultivo de S. clavuligerus é a lisina, que atua no metabolismo primário via cadaverina aminotransferase, e no metabolismo secundário via 1-piperideina-6-carboxilato, para a produção do raro aminoácido ácido alfa-aminoadípico, um precursor de CefC e de todos os demais antibióticos beta-lactâmicos. Outra fonte de nitrogênio de destaque é o glutamato de sódio, que apresenta efeitos positivos na produção de AC por fornecer átomos de carbono para a molécula deste biocomposto. Estudos têm relatado a produção de bioativos utilizando lisina ou glutamato de sódio nos meios de cultivo, mas não há relatos na literatura sobre a influência conjunta destes aminoácidos. Este trabalho trata da investigação de relações entre, a utilização conjunta de lisina e glutamato de sódio e... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Streptomyces clavuligerus produces several important bioactive compounds, such as beta-lactams, clavulanic acid (AC), a beta-lactamase inibitor which is used in combination with beta-lactam antibiotics, and twenty more clavams with antifungal activity, the antibiotic cephamycin (CefC), of great commercial interest for the production of semisynthetic antibiotic, and the non-lactamic bioactives tunicamycin and holomicyn. Studies have shown that both the nature and the concentration of nitrogen sources influence the production of bioactives metabolites in S. clavuligerus, because many precursors of these biocompounds derive from nitrogenous intermediates of the primary metabolism. Lysine is an important amino acid in S. clavuligerus, acting on the primary metabolism via cadaverine aminotransferase, and on the secondary metabolismo via 1-piperidine -6- carboxylate, for the production of the rare amino acid alpha-aminoadipic acid, a precursor of CefC as also of all other beta-lactams antibiotics. Another important source of nitrogen is sodium glutamate, which in S. clavuligerus culture media has positive effects on the production of AC. Studies have reported the production of bioactive compounds employing lysine or sodium glutamate in culture media, but there aren't reports in the literature on the joint infuence of these amino acids. In this sense, this project proposes to investigate relations between combinations of lysine and sodium glutamate and and the production of beta-lactam compounds AC and CefC by S. clavuligerus in submerged cultures employinh chemically defined media. Initially, batch fermentations were carried out in a rotating incubator at 28°C and 260 rpm, in order to select the best combination of lysine and glutamate concentrations to obtain higher final bioactives compounds yields. This combination was then validated in bioreactor. The set of results in shaken fla... / Mestre

Resumo: Neste trabalho foram desenvolvidos métodos analíticos com detecção espectrofotométrica na região visível para determinação de tetraciclina, doxiciclina, azitromicina, norfloxacina e ciprofloxacina em formulações farmacêuticas. As condições experimentais envolvidas em cada método foram cuidadosamente estudadas e otimizadas utilizando métodos multivariados (planejamentos fatoriais e metodologia de superfície de resposta), assim como método univariado. Para a determinação de tetraciclina e doxiciclina foi proposto método baseado na reação entre cloramina-T e os fármacos em meio alcalino de Na2CO3, produzindo compostos com coloração vermelha e absorbâncias em 535 e 525 nm para os produtos das reações da tetraciclina e doxiciclina, respectivamente. Posteriormente, este método foi automatizado utilizando sistema de análise por injeção em fluxo. Para a determinação de azitromicina foi proposto um método automatizado utilizando análise por injeção em fluxo com zonas coalescentes. O método é baseado na reação entre o fármaco e p-cloranil em meio metanólico na presença de H2O2 com formação de um complexo de transferência de carga de coloração roxa, o qual apresenta absorção em 540 nm. Para a determinação de norfloxacina e ciprofloxacina foi empregado um método utilizando análise por injeção sequencial. O referido método baseia-se na reação entre os fármacos e p-dimetilaminocinamaldeído em meio ácido (HCl) e micelar (sulfato de dodecil sódio). O produto formado apresentou coloração alaranjada com absorbância máxima em 495 nm. As substâncias comumente utilizadas como excipientes nas respectivas formulações farmacêuticas não interferiram nos métodos propostos. Todos os métodos propostos neste trabalho foram aplicados com sucesso na determinação destes fármacos em formulações farmacêuticas. Os resultados obtidos por estes... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: In this work were developed analytical methods with spectrophotometric detection in the visible region for tetracycline, doxycycline, azithromycin, norfloxacin and ciprofloxacin determination in pharmaceutical formulations. The experimental conditions involved in each method were carefully studied and optimized utilizing multivariate methods (design factorials and response surface methodology), as well as univariated method. For the tetracycline and doxycycline determination was proposed method based in the reaction between chloramine-T and the drugs in alkaline medium of Na2CO3 producing red color compounds with absorbance in 535 and 525 nm for the products of the reactions of tetracycline and doxycycline, respectively. Subsequently, this method was automated utilizing system of flow injection analysis. For the determination of azithromycin was proposed a method utilizing flow injection analysis with coalescent zones. The method is based in the reaction between the drug and p-chloranil in methanol medium in the presence of H2O2 with formation of a purple color charge-transfer complex, which presents absorption in 540 nm. For norfloxacin and ciprofloxacin determination was employed a method utilizing sequential injection analysis. The referred method based itself in the reaction between the drugs and p-dimethylaminocinnamaldehyde in acid (HCl) and micelar (sulphate of dodecil sodium) medium. The formed product presented orange color with maximum absorbance in 495 nm. The common excipients used as additives in the respective pharmaceutical formulations do not interfere in the proposed methods. All the proposed methods in this work were applied successfully to the determination of these drugs in pharmaceutical formulations. The analytical results obtained by applying the proposed methods compared very favorably with those obtained by the official or comparative methods, at 95% confidence level. / Orientador: Leonardo Pezza / Coorientador: Helena Redigolo Pezza / Banca: Clóvis Augusto Ribeiro / Banca: Matthieu Tubino / Banca: Ivo Milton Raimundo Junior / Banca: Carlos Roberto Bellato / Doutor

Orientador: Nilva Kazue Sakomura / Resumo: Doenças entéricas se apresentam como um dos maiores problemas da produção avícola. Historicamente, antibióticos promotores de crescimento (APC’s) têm sido usados para controlar essa situação. No entanto, as preocupações a respeito de resistência bacteriana a antibióticos têm levado a proibições regionais para reduzir o uso de APC’s. Alternativamente, microrganismos administrados diretamente na dieta como por exemplo os probióticos, podem impactar positivamente sobre a microbiota intestinal, prevenindo problemas entéricos que, inevitavelmente culminam em perdas no desempenho das aves. Outro ponto importante a ser considerado quando se fala em desafio sanitário é o consumo de ração dos animais. A utilização de modelos matemáticos que consideram o fator desafio para modelagem do consumo ainda é escasso. Nesse sentido, essa dissertação foi conduzida com dois principais propósitos: 1) investigar os efeitos de Bacillus amyloliquefaciens CECT 5940 como probiótico (DFM) sozinho ou em associação com bacitracina metileno disalicilato (BMD) em frangos de corte sobre desafio de patógeno entérico. 2) modelar o consumo relativo de animais sobre condição de desafio sanitário e integrar esse modelo dentro de um modelo mecanicista de simulação, o Broiler Growth Model (BGM). Assim, permitindo a modelagem do desempenho de animais sob condição de desafio sanitário. Para isso, um total de 1.530 frangos de corte machos Cobb500 com um dia de idade foram casualizados em cinco tratamentos, com nove r... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Enteric diseases appear one of the biggest problems of poultry production. Historically, antibiotics growth promoter (AGPs) have been used to control this framework. However, concerns about antibiotic resistance bacteria have led regional bans for reducing the use of AGPs. Alternatively, microorganisms directly supplemented in diets such as probiotics, may exhibit a positive impact on intestinal microbiota avoiding enteric problems that inevitably causes loss on broilers performance. Another important point to be considered when talking about sanitary challenge is the feed intake. The use of mathematical models that consider the challenge factor for modelling in this feed intake is still scarce. In this sense, this project was conducted with two main purposes: 1) to investigate the effects of Bacillus amyloliquefaciens CECT 5940 as a probiotic (DFM) alone or in combination with bacitracin methylene disalicylate (BMD) in broilers on enteric pathogen challenge. 2) Model the relative feed intake of animals under sanitary challenge condition and to integrate this model into the mechanistic simulation model, the Broiler Growth Model (BGM). Thus, allowing the modelling of performance of animals under sanitary challenge condition. For such, a total of 1,530-day-old male Cobb500 chicks, were randomly assigned to five treatments, with nine replicate pens with 34 birds each. Treatments included positive control (PC, basal diet without additives or challenge); negative control (NC, basa... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre