Camila Alencar Moreira. Atividade in vitro de agentes antimicrobianos contra biofilmes de Staphylococcus ssp. de otite canina. 2011. 103 f. Dissertação (Mestrado em Microbiologia Médica) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2011. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2013-06-17T14:04:10Z No. of bitstreams: 1 2011_dis_camoreira.pdf: 3719314 bytes, checksum: d72587f50967ba4b42036432a799459a (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes(erikaleitefernandes@gmail.com) on 2013-06-18T15:37:02Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_dis_camoreira.pdf: 3719314 bytes, checksum: d72587f50967ba4b42036432a799459a (MD5) / Made available in DSpace on 2013-06-18T15:37:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_dis_camoreira.pdf: 3719314 bytes, checksum: d72587f50967ba4b42036432a799459a (MD5) Previous issue date: 2011 / Historically, bacteria have been seen as isolated organisms; however, it is now clear that the vast majority of bacteria exist in complex communities known as biofilms. Bacteria in biofilms are adhered to various surfaces, both abiotic and biotic (teeth, bones, mucosa), often forming a highly dynamic ecosystem, which is structured and organized. An example of infection, which can involve the formation of biofilm is otitis - defined as an acute or chronic inflammation of the ear, which may extend from the external ear canal to the inner ear. Described as the most common disease of the external ear canal in dogs, it has a multifactorial etiology, including fungi and bacteria, especially of the genus Staphylococcus. Bacteria of this genus are commensal to skin and mucous membranes, but can act as opportunistic pathogens in favorable conditions and are often associated with a wide variety of infections in humans and animals with many reports of refractoriness to usual treatments. In biofilm, bacteria can be ten to a hundred times more resistant to antibiotics when compared to the same bacteria in planktonic growth. The struggle to fight infections involving bacterial biofilms is a major challenge of microbiology today, which, in turn, leads to the search for new therapeutic options. Thus, this study aimed to evaluate the in vitro inhibitory effect of six substances – three classic antimicrobial agents ciprofloxacin, chloramphenicol, gentamicin; and three non-classic antimicrobial agents thymol, carvacrol, hydrogen peroxide (H2O2) - against staphylococcal strains from canine otitis in planktonic growth and in biofilm. We analyzed 54 clinical strains isolated from purulent secretion of canine otitis, divided into five species: S. intermedius, S. simulans, S. haemolyticus, S.epidermidis and S. lugdunensis. The 16 strains classified as biofilm producers (11 S. intermedius and five S. simulans), according to result obtained by the Congo red agar test and confirmed by scanning electron microscopy (SEM), were used in broth microdilution assay for determination of minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum biofilm inhibitory concentration (MBIC). With regards to the biofilm-producing strains, the following results were observed: the values for ciprofloxacin were 0,12 ≤MIC≤0,5 mcg/mL (mean 0,28 mcg/mL) and 0,5≤MBIC≤8 mcg/mL (mean 1,79 mcg/mL); for chloramphenicol 2≤MIC≤16 mcg/mL (mean 7,41 mcg/mL) and 8≤MBIC≤32 mcg/mL (mean 20,71 mcg/mL); for gentamicin 0,5≤MIC≤4 mcg/mL (mean 2,09 mcg/mL) and 4≤MBIC≤64 mcg/mL (mean 24,24 mcg/mL); for thymol 32≤MIC≤512 mcg/mL (mean 137,41 mcg/mL) and 256≤MBIC≤2048 mcg/mL (mean 768 mcg/mL); carvacrol 32≤MIC≤512 mcg/mL (mean 128 mcg/mL) and 256≤MBIC≤4096 mcg/mL (mean 993,88 mcg/mL); and for H2O2 for 32≤MIC≤128 mcg/mL (mean 99,76 ppm) and 128≤MBIC≤4096 ppm (mean 1874,82 ppm). The presented data indicates the therapeutic potential of the six antibiotics studied in the treatment of staphylococcal infections associated with biofilm, which warrants further studies to investigate the mechanisms of action of these drugs on biofilms and the design of in vivo experiments to confirm the significance of these findings. / Historicamente, as bactérias foram vistas como organismos que vivem isolados, no entanto, é claro, agora, que a grande maioria de bactérias existe em comunidades complexas, conhecidas como biofilmes. As bactérias em biofilmes se encontram aderidas a superfícies diversas, tanto abióticas como bióticas (dente, osso, mucosa), compondo um ecossistema altamente estruturado, dinâmico e organizado. Um exemplo de infecção que pode envolver a presença formação de biofilme é a otite - definida como inflamação aguda ou crônica da orelha, podendo se estender desde o epitélio do conduto auditivo externo até a orelha interna. Descrita como a doença mais comum do canal auditivo externo em cães, possui uma etiologia multifatorial, que inclui fungos e bactérias, principalmente do gênero Staphylococcus. Bactérias desse gênero são comensais de pele e mucosas, mas podem atuar como patógenos oportunistas em condições propícias e são frequentemente associadas a uma ampla variedade de infecções em seres humanos e animais com vários relatos de refratariedade aos tratamentos usuais. Em um biofilme, as bactérias podem ser dezenas de vezes mais resistentes aos antibióticos, quando comparadas às mesmas bactérias em crescimento planctônico. O combate a infecções envolvendo bactérias em biofilme é um grande desafio da microbiologia mundial, que leva à busca de novas opções terapêuticas. Com efeito, este estudo teve como objetivo avaliar o efeito inibitório in vitro de seis substâncias – três agentes antimicrobianos clássicos, ciprofloxacina, cloranfenicol, gentamicina; e três agentes antimicrobianos não-clássicos timol, carvacrol, peróxido de hidrogênio (H2O2) – contra cepas estafilocócicas de otite canina em crescimento planctônico e em biofilme. Foram avaliadas 54 cepas clínicas isoladas de secreção purulenta de cães com otite, divididas entre cinco espécies: S. intermedius, S. simulans, S. haemolyticus, S. epidermidis e S. lugdunensis. As 16 cepas classificadas como produtoras de biofilme (11 de S. intermedius e cinco de S. simulans), segundo resultado obtido pelo teste do ágar vermelho Congo e confirmação por microscopia eletrônica de varredura (MEV), foram usadas em ensaios de microdiluição em caldo para determinação de concentração inibitória mínima (CIM) e concentração inibitória mínima em biofilme (CIMB). Com relação às cepas produtoras de biofilme, foram observados os seguintes resultados: os valores para ciprofloxacina foram 0,12 ≤CIM≤0,5 mcg/mL (média 0,28 mcg/mL) e 0,5≤CIMB≤8 mcg/mL (média 1,79 mcg/mL); para cloranfenicol 2≤CIM≤16 mcg/mL (média 7,41 mcg/mL) e 8≤CIMB≤32 mcg/mL (média 20,71 mcg/mL); para gentamicina 0,5≤CIM≤4 mcg/mL (média 2,09 mcg/mL) e 4≤CIMB≤64 mcg/mL (média 24,24 mcg/mL); para timol 32≤CIM≤512 mcg/mL (média 137,41 mcg/mL) e 256≤CIMB≤2048 mcg/mL (média 768 mcg/mL); carvacrol 32≤CIM≤512 mcg/mL (média 128 mcg/mL) e 256≤CIMB≤4096 mcg/mL (média 993,88 mcg/mL); e para H2O2 32≤CIM≤128 ppm (média 99,76 ppm) e 128≤CIMB≤4096 ppm (média 1874,82 ppm). Os dados obtidos apontam para o potencial terapêutico dos seis antibióticos estudados no tratamento de infecções estafilocócicas associadas a biofilme, sendo necessários novos estudos para investigar os mecanismos de ação dessas drogas sobre o biofilme, bem como o delineamento de experimentos in vivo para confirmar a significância desses achados.

SILVA, G. C. Bioatividade de extratos de algas frente à bactérias com fatores de virulência, resistentes a antimicrobianos. 2012. 61 f. Dissertação (mestrado em Ciências Marinhas Tropicais) - Instituto de Ciências do Mar, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2012. / Submitted by Nadsa Cid (nadsa@ufc.br) on 2015-04-20T19:31:37Z No. of bitstreams: 1 2012_dis_gcsilva.pdf: 1478354 bytes, checksum: 59498a440456387052763c8870f84f49 (MD5) / Approved for entry into archive by Nadsa Cid(nadsa@ufc.br) on 2015-04-20T19:31:51Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_dis_gcsilva.pdf: 1478354 bytes, checksum: 59498a440456387052763c8870f84f49 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-04-20T19:31:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_dis_gcsilva.pdf: 1478354 bytes, checksum: 59498a440456387052763c8870f84f49 (MD5) Previous issue date: 2012 / Infection of aquatic organisms by Vibrios can lead to serious economic losses for farmers and expose consumers to serious health risks. Some Vibrio species carry factors of virulence making them potentially pathogenic to humans. The consequent widepread use of antibiotics by farmers has led to the selection of resistant strains in the environment. Due to the increasing incidence of bacteria resistant to antibiotics, much effort is currently invested in identifying natural products with bioactive potential. Macroalgae have been studied for their ample spectrum of biological, antioxidant, antifungal and agglutinating activities. The purpose of this study was to evaluate the antibacterial activity of hexane, methanol, acetone and ethanol-based extracts of Chlorophyta, Phaeophyta and Rhodophyta macroalgae against virulent víbrio strains resistant to antibiotics. The microorganisms used in the study included víbrio strains isolated from wild oysters purchased at a fish market, strains from shrimp hemolymph and the standard strains ATCC and IOC. The strains were challenged with extracts using the disk diffusion method. Ethanol was the most efficient solvent. Padina gymnospora inhibited the largest number of Vibrio species (57%) and produced the largest inhibition halos, followed by Ulva fasciata (40%) and Hypnea musciformes (30%). The smallest minimum inhibitory concentration was observed for ethanolic extracts of Padina gymnospora (512 μg/mL against Vibrio alginolyticus). The results suggest extracts of marine macroalgae may represent a potential source of natural biologically active products for use in the industry. / Bactérias do gênero Vibrio acometem a saúde de organismos aquáticos causando sérios prejuízos econômicos a aquicultores e problemas na saúde dos consumidores. Determinadas espécies são consideradas potencialmente patogênicas por possuírem fatores de virulência. Em virtude dos problemas causados por vibrioses, o uso de antimicrobianos em cultivo aquático tornou-se constante, e determinante na seleção de cepas resistentes. Com o aparecimento cada vez maior de bactérias resistentes a antimicrobianos, surgiu o interesse pela busca de produtos naturais com potencial bioativo. As algas tornaram-se alvo de pesquisas por serem responsáveis por um amplo espectro de atividades biológicas, antioxidantes, antifúngicos, aglutinantes, além de antibacterianos. Deste modo, este trabalho objetivou investigar a atividade antibacteriana de extratos hexânicos, metanólicos, acetônicos e etanólicos de macroalgas das classes Chlorophyta, Phaeophyta e Rhodophyta frente a víbrios com fatores de virulência, resistentes a antimicrobianos. Esses víbrios foram isolados de ostras selvagens comercializadas em uma feira de pescado, e de hemolinfa de camarão, além de cepas padrões ATCC e IOC e foram testados através de antibiograma pelo método de difusão em disco. Concluiu-se que: o álcool etílico foi o solvente mais eficaz na extração do composto ativo capaz de inibir o crescimento bacteriano; a Padina gymnospora foi a macroalga que apresentou a maior capacidade inibitória das espécies de Vibrio (57%) e as maiores zonas de inibição, seguida pela Ulva fasciata (40%) e por último a Hypnea musciformes (30%); O menor valor de CIM encontrado foi com o extrato etanólico da Padina gymnospora com 512 μg/ mL contra V. alginolyticus.Os resultados apresentados neste trabalho sugerem que os extratos de macroalgas marinhas poderiam servir como uma fonte potencial de produtos naturais biologicamente ativos para aplicação na indústria.

Neste trabalho, foram desenvolvidos e validados métodos analítico e microbiológico, bem como estudo preliminar de estabilidade, cinética de degradação e citotoxicidade da Ceftarolina Fosamila em pó para solução injetável, um antibiótico da classe das cefalosporinas de quinta geração, indicado para pneumonias adquiridas na comunidade e infecções graves, de pele e tecidos moles. A validação do ensaio microbiológico pelo método de difusão em ágar cilindros em placa, delineamento 3x3, apresentou resultados satisfatórios, como especificidade, linearidade na faixa de 2,0 - 8,0 μg/mL, precisão (109,42 %), exatidão (102,3 %) e robustez. Soluções de Cefatarolina Fosamila do produto acabado expostas à radiação UVC (254 nm) e à degradação térmica a 60 °C foram utilizadas para avaliar a especificidade do bioensaio. A robustez foi avaliada através da alteração da concentração do meio inoculado (0,8 e 1,2 %). O desenvolvimento e validação de método por CLAE foi avaliado através da especificidade, linearidade, precisão, exatidão e robustez. No método cromatográfico foi utilizado cromatógrafo à liquido de alta eficiência SHIMADZU com coluna Agilent® C18, fase móvel (água com trietilamina 1,0% pH 5,0:acetonitrila 87:13 v/v). O método apresentou-se específico, linear, no intervalo de 5,0 - 60,0 μg/mL, preciso (110,0 %), exato (100,68 %) e robusto. Os métodos microbiológico e cromatográfico validados foram comparados estatisticamente e verificou-se não haver diferença significativa entre eles quando comparados através do teste “t” de Student. No estudo preliminar de estabilidade constatou-se ser estável em hidrólise ácida (0,1 M) e luz UVA no período avaliado, e instável frente à degradação térmica (40 e 60 °C), oxidativa com peróxido de hidrogênio, básica em NaOH (0,1 M e 0,01 M) e luz UVC. As cinéticas de degradação frente à luz UVC e degradação térmica 60 °C mostraram que as amostras possuem cinética de degradação de ordem zero e de segunda ordem, respectivamente. O ensaio de citotoxicidade demonstrou não haver diferença entre a condição normal e a amostra submetida à degradação forçada, sugerindo que os possíveis produtos de degradação formados não alteraram o resultado. / In this work, analytical and microbiological methods were developed and validated, as well as a preliminary study of the stability, degradation kinetics and cytotoxicity to Ceftaroline Fosamil powder for injectable solution, this is a fifth generation cephalosporin antibiotic indicated for community-acquired pneumonia and severe infections of the skin and soft tissues. The validation of the microbial assay by diffusion method in 3x3 cylinder agar delineated showed satisfactory results in specificity, linearity in the range of 2.0 - 8.0 μg / mL, precision (109.42 %), accuracy (102.3 %) and robustness. The development and validation of the method by HPLC was evaluated through specificity, linearity, precision, accuracy and robustness. In the chromatographic method was used high performance liquid chromatograph from SHIMADZU with Agilent® C18 column, mobile phase (water with triethylamine 1.0 % pH 5.0: acetonitrile 87:13 v/v). The method was linear, specific in the range of 5.0 - 60.0 μg/mL, accurate (110.0 %), exact (100.68 %) and robust. The validated microbiological and chromatographic methods were compared statistically and there was no significant difference between them when compared through Student's t-test. In the preliminary stability study, it was found stable in acid hydrolysis (0.1M) and UVA light in the period evaluated, and instable against thermal degradation (40 and 60 °C), oxidative with hydrogen peroxide, basic in NaOH (0.1 M and 0.0 1M) and UVC light. Samples exposed in UVC light an thermal degradation at 60°C showed degradation kinetics following zero order and second order, respectively. The cytotoxicity assay showed no difference between the normal condition and the sample submitted to forced degradation, suggesting that the possible degradation products formed did not change the result.

INTRODUÇÃO: Encefalopatia hepática (EH) é uma síndrome neuropsiquiátrica representada por diminuição reversível da função neurológica, causada pela insuficiência hepática. É caracterizada por alterações súbitas – e por vezes intermitentes – na memória, personalidade, concentração, nível de consciência e coordenação motora, podendo evoluir para o estado de coma e morte. A abordagem clássica para a EH inclui suporte clínico, identificação e correção das causas precipitantes e o uso de dissacarídeos não-absorvíveis, como a lactulose e o lactitol, e/ou antibióticos. Enquanto o uso dos dissacarídeos são amplamente difundidos, não há consenso quanto ao uso de antibióticos como agentes terapêuticos na EH. O presente estudo tem por objetivo avaliar os benefícios e os riscos da utilização de antibióticos no tratamento da EH, comparando-os com as demais terapias disponíveis. MÉTODOS: Revisão sistemática e metanálise de ensaios clínicos randomizados avaliando o efeito dos antibióticos no tratamento da EH. Os desfechos principais são a ausência de melhora na EH e a mortalidade total, a serem comparados com as demais alternativas para o tratamento desta síndrome. RESULTADOS: Vinte e oito estudos foram incluídos, em sua maioria com fraco rigor metodológico e com pequeno tamanho amostral. Doze compararam antibióticos a dissacarídeos não-absorvíveis e dez compararam diferentes regimes antibióticos. Não houve achados significativos relacionados à mortalidade total. Em relação à melhora clínica, os antibióticos apresentaram superioridade quando comparados aos dissacarídeos 8 (RR 0,82, IC95% 0,68 a 1,00 para ausência de melhora na EH), além de tendência para resolução dos sintomas (RR 0,78, IC95% 0,58 a 1,05 para ausência de recuperação). Para ausência de melhora, na análise de sensibilidade, os estudos avaliando pacientes com EH crônica e os estudos com a co-administração de agentes catárticos apresentaram benefício mais evidente dos antibióticos frente aos dissacarídeos (RR 0,50, IC95% 0,28 a 0,89 na EH crônica; RR 0,82, IC 95% 0,67 a 0,99 com a co-administração de catárticos). Para ausência de recuperação, a rifaximina foi superior a neomicina quando comparada aos dissacarídeos (RR 0,68; IC95% 0,51 a 0,91 vs. RR 0,96, IC95% 0,84 a 1,11; P = 0,04). Adicionalmente, a rifaximina apresentou tendência a superioridade quando comparada aos demais antibióticos (RR 0,61, IC95% 0,34 a 1,09 para ausência de melhora). Não houve relato de eventos adversos sérios relacionados aos tratamentos avaliados. Os eventos mais comuns foram aqueles associados ao trato gastrointestinal, principalmente nos pacientes em uso de dissacarídeos. Por sua vez, não foi incomum a alteração da função renal em vigência do uso de neomicina. CONCLUSÃO: Atualmente as evidências são insuficientes para determinar o real benefício dos antibióticos no tratamento da EH. Encontramos superioridade dos antibióticos comparando-os aos dissacarídeos não-absorvíveis, entretanto esses dados apresentam significância limítrofe e possíveis modificadores de efeito. Não dispomos de comprovação sobre qual regime antibiótico é o mais efetivo manejo da EH, sendo necessário mais estudos para este propósito. Da mesma forma, as evidências sobre a adjuvância do uso de antibióticos em associação a dissacarídeos não nos permitem conclusões adicionais. / BACKGROUND: Hepatic encephalopathy (HE) is a neuropsychiatric syndrome characterized by a reversible decrease in neurological function, caused by hepatic insufficiency. It is characterized by sudden - and sometimes intermittent - changes in memory, personality, concentration, level of consciousness and motor coordination, and can progress to coma and death. The classic approach to HE includes clinical support, identification and correction of precipitating causes, and the use of non-absorbable disaccharides, such as lactulose and lactitol, and / or antibiotics. While the use of disaccharides is widespread, there is no consensus on the use of antibiotics as therapeutic agents in HE. The present study aims to evaluate the benefits and risks of the use of antibiotics for the treatment of HE. METHODS: Systematic review and meta-analysis of randomized clinical trials evaluating the effect of antibiotics on the treatment of HE, in comparison to alternatives for the treatment of this syndrome. The main outcomes are lack of improvement of HE and mortality. RESULTS: Twenty-eight studies were included, mostly with poor methodological rigor and small sample size. Twelve compared antibiotics to nonabsorbable disaccharides and ten studies compared different antibiotic regimens. There were no significant difference observed on mortality. Antibiotics, compared to disaccharides, were more effective on clinical improvement of HE symptoms (RR 0.82, 95% CI 0.68 to 1.00 for lack of improvement; RR 0.78, 95% CI 0.58 to 1.05 for lack of recovery). In the sensitivity 10 analysis, we observed a larger benefit for antibiotics, compared to disaccharides, in studies evaluating patients with chronic HE (RR 0.50, 95% CI 0.28 to 0.89 for lack of improvement) and in studies with co-administration of cathartic agents (RR 0.82, 95% CI 0.67 to 0.99 for lack of improvement). For lack recovery, rifaximin was superior to neomycin when compared to disaccharides (RR 0.68, 95% CI 0.51 to 0.91 vs. RR 0.96, 95% CI 0.84 to 1.11, P = 0.04). In addition, rifaximin showed better results, although non-significant, when compared to other antibiotics (RR 0.61, 95% CI 0.34 to 1.09 for lack of improvement). There were no report of serious adverse events related to the evaluated interventions. CONCLUSION: Currently, the evidence is insufficient to determine the real benefit of antibiotics in the treatment of HE. In this systematic review, antibiotics were superior to nonabsorbable disaccharides, however, borderline statistical significance and possible effect modifiers were observed. In addition, is unclear which antibiotic regimen is the most effective for HE treatment, with need of further studies for this purpose. Likewise, the evidence available for the use of antibiotics in combination with disaccharides does not allow additional conclusions.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia e Biociências, Florianópolis, 2015 / Made available in DSpace on 2016-04-19T04:01:47Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015Bitstream added on 2016-05-24T17:34:50Z : No. of bitstreams: 1 337988.pdf: 1078258 bytes, checksum: 1deebfb19ce1d7e97d60c8c8afe53a49 (MD5) / A grande diversidade de metabólitos secundários produzidos por basidiomicetos, especialmente aqueles cultivados in vitro, tem ampliado o campo da biotecnologia visando à produção de compostos antimicrobianos. O objetivo desse estudo foi analisar os extratos de isolados do fungo Pisolithus microcarpus (Cooke e Massee) G. Cunn. coletados em duas áreas distintas (degradada pela exploração de carvão e não degradada) quanto a sua capacidade de inibir o crescimento de bactérias potencialmente patogênicas. Inicialmente os fungos foram cultivados em meio Merlin Norkrans Modificado (MNM) durante o período de 30 dias. Após verificado crescimento, foi feita a extração metanólica do micélio e do meio de cultura. O solvente foi evaporado utilizando evaporador rotatório e o extrato resultante foi particionado com acetato de etila e butanol. Os ensaios de difusão em disco foram feitos utilizando os extratos metanólicos e as frações frente a seis estirpes bacterianas: Staphylococcus aureus (ATCC 25923 e ATCC 6538P), Escherichia coli (ATCC 25922 e ATCC 8739), Pseudomonas aeruginosa (ATCC 27853) e Enterococcus faecalis (ATCC 29212). As placas foram incubadas a 37 ºC por 24 h e a atividade antibacteriana determinada pela formação de halos de inibição no entorno dos discos. Um dos isolados coletado na região carbonífera de Santa Catarina demonstrou atividade antibacteriana frente à S. aureus, pela formação de halos de 18 mm de diâmetro e frente à P. aeruginosa, com halos de 17 mm de diâmetro. Para a separação dos compostos presentes nas frações ativas foi realizada cromatografia em camada delgada, utilizando diversos sistemas de solventes. A análise qualitativa de alcaloides, flavonoides e esteroides indicaram a presença de flavonoides nos extratos, enquanto a análise quantitativa de fenólicos, flavonoides, DPPH e potencial redutor demonstrou a baixa capacidade antioxidante do fungo. Os espectros de ressonância magnética nuclear e de infravermelho demostraram que a fração acetato de etila contém hidrocarbonetos aromáticos, aldeídos e hidrogênios ligados a carbonos e oxigênios, características indicadoras de triterpenos. Os resultados indicam que novos estudos devem ser realizados a fim de identificar esses compostos visando potenciais aplicações biotecnológicas.<br> / Abstract : The great diversity of secondary metabolites produced by basidiomycetes, especially those cultivated in vitro, has opened a broad biotechnological field aiming at the production of antimicrobial compounds. The aim of this study was to analyze the extracts from isolates of the fungus Pisolithus microcarpus (Cooke e Massee) G. Cunn. collected from two distinct areas (coal-mined degrades and non-degraded), for their ability to reduce the growth of potentially pathogenic bacteria. The fungi were initially grown in modified Merlin Norkrans Medium (MNM) during 30 days. After significant growth, a methanolic extraction of the mycelium was performed. The solvent was evaporated using a rotatory evaporator and the resulting extract partitioned using ethyl-acetate and butanol. A disk diffusion assay was performed against six bacterial isolates using the methanolic extracts and fractions: Staphylococcus aureus (ATCC 25923 and ATCC 6538P), Escherichia coli (ATCC 25922 and ATCC 8739), Pseudomonas aeruginosa (ATCC 27853) and Enterococcus faecalis (ATCC 29212). Assay plates were incubated at 37 ºC during 24 h. The antibacterial activity was determined through the formation of inhibition zones around the discs. One isolate collected from the coalfields of Santa Catarina showeed antibacterial activity by forming inhibition zones (18 mm) for S. aureus, and (17 mm) for P. aeruginosa. Thin-layer chromatography was performed with different solvents in order to separate compounds present in the active fractions. Qualitative analysis of alkaloids, flavonoids and steroids indicated the presence of flavonoids in the extracts. Qualitative analyses of phenolics, flavonoids, DPPH and reducing potential showed a low antioxidant activity for the fungus. Nuclear magnetic resonance spectra and infrared spectroscopy showed that the ethyl acetate fraction contains aromatic hydrocarbons, aldehydes and hydrogens attached to carbons and oxygens, an indicator feature of triterpenes. The results indicate that further studies should be conducted to identify these compounds, targeting at future biotechnological applications.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina. Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia. / Made available in DSpace on 2013-07-15T23:03:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 221467.pdf: 1817418 bytes, checksum: 4df6dfea9849545662d15122be228145 (MD5) / O aumento crescente de bactérias resistentes devido a múltiplos fatores incentiva à pesquisa de novas substâncias antibacterianas. Os fungos basidiomicetos do gênero Polyporus são fonte de metabólitos secundários de interesse medicinal entre os quais estão os compostos

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias. / Made available in DSpace on 2012-10-18T12:26:38Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Extraiu-se uma substância antimicrobiana de uma cultura 18-24 h de Bacillus amyloliquefaciens em Caldo Triptona de Soja suplementado com Extrato de Levedura a 0,6% (TSB-YE - OXOID) por precipitação com 20% de saturação de sulfato de amônio, ressuspensão em tampão fosfato pH 7,2, diálise em membrana 3,5kD (Spectra/Por) e esterilização por filtração (membrana 0,22mm - Millipore). Esta substância foi caracterizada segundo sua sensibilidade a temperatura (50, 75 e 100°C) e pH (2,0 a 9,0). Para determinação de sua natureza química empregaram-se as enzimas (Sigma) protease de S. griseus (P6911), protease de A. saitoi (P2143), a-quimotripsina (C4129) e pepsina (P6887) a 50mg/mL e a a-amilase Termamyl 120 L (Novo Nordisk) a 1% v/v. Para verificação da manutenção da atividade após tais ensaios, o extrato foi aplicado em poços preparados em placas de Ágar Triptona de Soja suplementado com Extrato de Levedura a 0,6% (TSA-YE - OXOID) pré-semeadas com 0,1 mL de uma cultura 105 UFC/mL de Listeria monocytogenes. Determinou-se sua concentração mínima inibitória (CMI) sobre uma cultura 104 UFC/mL de L. monocytogenes e seu peso molecular por eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE). Como resultado dos testes de caracterização, a substância apresentou-se estável a 50°C, perdendo sua atividade gradualmente a 75°C e rapidamente a 100°C. Também foi estável em valores de pH de 2,0 a 9,0. Perdeu parcialmente sua atividade quando tratada com as enzimas protease de S.griseus, protease de A. saitoi e a-amilase, indicando uma estrutura glicoproteica. A CMI foi 25% v/v e a substância agiu de forma bacteriostática. A eletroforese indicou um peso molecular inferior a 6.500 Daltons.

Made available in DSpace on 2015-01-26T13:21:24Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-05-20Bitstream added on 2015-01-26T13:30:33Z : No. of bitstreams: 1 000802293.pdf: 2259138 bytes, checksum: 29dc545448ea7b06e965e799eb83bf4c (MD5) / Avaliou-se a atividade antibacteriana de diferentes concentrações de nanopartículas de óxido de zinco incorporadas a um cimento de ionômero de vidro (CIV) quimicamente ativado e outro modificado por resina fotopolimerizável sobre o biofilme de Streptococcus mutans em diferentes tempos de maturação. As concentrações de nanopartícula foram 0%, 1% e 2%, os CIVs utilizados foram o Fuji II (GC América) e Fuji II LC (GC América) e os tempos de maturação foram 24 horas e 7 dias. Confeccionou-se corpos de prova (N=108) circulares (4mm x 2mm). A atividade antibacteriana foi avaliada pela contagem das Unidades Formadoras de Colônia por Mililitro (UFC/ml). Analisou-se a morfologia celular em Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV). Os dados obtidos para cada material atenderam os pressupostos de normalidade e homocedasticidade. Procedeu-se a Análise de Variância a dois fatores (tempo de maturação do biofilme e concentração de nanopartículas) ( =5%). Para o CIV quimicamente ativado encontrou-se diferença não significativa na atividade antibacteriana segundo o tempo de maturação do biofilme (p=0,744), concentração de nanopartículas (p=0,966) e a interação entre eles (p=0,800). Para o CIV modificado por resina, observou-se que a média de UFC/ml do biofilme com 7 dias foi significativamente superior à do biofilme de 24 horas (p=0,034). A concentração de nanopartículas (p=0,570) e a interação entre os dois fatores (p=0,756) não foi significativa. Na análise em MEV não foi observada mudança na morfologia celular do Streptococcus mutans. Conclui-se que a inclusão de nanopartículas de óxido de zinco à 1% e 2% aos CIVs avaliados não alterou sua atividade antibacteriana. / This study evaluated the antibacterial activity of different concentrations of zinc oxide nanoparticles incorporated into a self-cured glass ionomer cement (GIC) and a light-cured resin-reinforced glass ionomer cement on Streptococcus mutans biofilm at different maturation times. Nanoparticles concentrations were 0%, 1% e 2%, the GICs were Fuji II (GC America) and Fuji II LC (GC America) and the maturation times were 24 hours and 7 days. Were prepared circular (4mm x 2mm) specimens (N= 108). The antibacterial activity was evaluated by the number of Colony Forming Unit per militers (CFU/ml). Morphological analysis of biofilm was taken by scanning electron microscopy (SEM). The data obtained for each material attended the assumptions of normality and homoscedasticity and a two-way ANOVA ( =5%). No significant difference was observed according to the time of biofilm maturation (p=0.744), concentration of nanoparticles (p=0.966) and their interaction (p=0.800). Resin-reinforced GIC showed significantly higher CFU/ml mean for 7-day biofilms compared to 24h-biofilms (p=0.034). The concentration of nanoparticles (p=0.570) and the interaction (p=0.756) between the two factors was not significant. SEM analysis showed no change in cell morphology of S. mutans according to the type of GIC, maturation time and nanoparticles concentration. We conclude that the inclusion of zinc oxide nanoparticles at concentrations of 1% and 2% into the glass ionomer cement evaluated did not promote antimicrobial activity against Streptococcus mutans.

Resumo não disponível.

Orientador: José Roberto Fioreto / Banca: Juang Horng Jyh / Banca: Martim Faddul Silva / Resumo: As infecções respiratórias agudas (IRAs) são responsáveis por alta morbidade e mortalidade na faixa etária pediátrica, principalmente em crianças abaixo de cinco anos de idade, sendo a pneumonia adquirida na comunidade (PAC) a causa mais grave de IRA. A cada ano, dois a três milhões de crianças morrem de pneumonia, predominantemente nos países em desenvolvimento que é atribuída ao quadro clínico mais grave, ao envolvimento de bactérias como agentes etiológicos e ao menor acesso aos serviços de saúde e a terapia adequada. O estudo teve como objetivos comparar a resposta clínica ao tratamento empírico inicial Oxacilina associada à Ceftriaxone com Amoxicilina associada a Ácido Clavulânico em crianças de dois meses a cinco anos de idade com diagnóstico de Pneumonia Adquirida na Comunidade classificada como grave, que necessitem de internação hospitalar, bem como, avaliar o tempo de melhora clínica (febre e taquipnéia) e a necessidade de ampliação de espectro antimicrobiano para determinar falha terapêutica dos esquemas propostos. Trata-se de estudo clínico prospectivo randomizado realizado em pacientes com diagnóstico de PAC que necessitaram de internação na Enfermaria de Pediatria do Hospital das Clinicas da Faculdade de Medicina de Botucatu-UNESP. Foram incluídas 104 crianças de 2 meses a 5 anos de idade, no período de abril 2005 a maio 2008. Os pacientes foram sistematicamente divididos aleatoriamente, à sorte, para comporem dois grupos: grupo Oxacilina associada à Ceftriaxone (GOC; n=48) e grupo Amoxicilina associada ao Ácido Clavulânico (GAA; n=56). Os desfechos analisados foram: tempo de melhora clínica (taquipnéia e febre); tempo de suporte de oxigenioterapia (cateter nasal ou máscara de O2); tempo de internação na Enfermaria; necessidade de mudança da antibioticoterapia inicial e evolução para derrame pleural/empiema. Os grupos estudados ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Acute respiratory infections (ARIs) are responsible for high morbidity and mortality in pediatric patients, particularly in children less than five years old. Community-acquired pneumonia (CAP) is the most serious cause of ARI. Each year, from two to three million children die of pneumonia, predominantly in developing countries, and this is attributed to more severe clinical conditions, the involvement of bacteria as etiological agents, and less access to health care services and adequate therapy. This study aimed to compare clinical response to initial empirical treatment of Oxacillin associated with Ceftriaxone to Amoxicillin associated with Clavulanic Acid in children aged from two months to five years, diagnosed with severe community-acquired Pneumonia, who require hospitalization. It also aimed to evaluate the time for clinical recovery (fever and tachypnea) and the need for extending the antimicrobial spectrum in order to determine therapeutic failure in the proposed schemes. It is a prospective randomized study on patients diagnosed with CAP who required hospitalization in the Pediatric Ward of the Botucatu School of Medicine University Hospital-UNESP. One hundred and four children aged from 2 months to 5 years were included from April 2005 to May 2008. The patients were systematically divided randomly, by chance, in order to compose two groups: Oxacillin associated with Ceftriaxone group (OCG; n=48) and Amoxicillin associated with Clavulanic Acid group (AAG; n=56). The outcomes analyzed were: time of clinical recovery (tachypnea and fever); time of oxygen therapy support (nasal catheter or O2 mask); time of hospitalization in the ward; need for change in the initial antibiotic therapy and development to pleural effusion/empyema. The studied groups were not statistically different relating to age, gender or duration of symptoms prior to hospitalization. Comorbidities were ... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre