Orientador: Márcio Garcia Ribeiro / Banca:: Liliane de Oliveira Dantas / Banca: Paulo Francisco Domingues / Resumo: Trueperella pyogenes são bactérias oportunistas caracterizadas por infecções piogênicas em animais, em geral refratárias aos tratamentos com antimicrobianos convencionais. Recentemente, os genes que codificam a exotoxina piolisina (plo), e fatores relacionados à adesão de T. pyogenes às células do animal susceptível, como fímbrias (fimA, fimC, fimE, fimG), neuraminidases (nanH, nanP), e proteína ligada ao colágeno (cbpA) têm sido associados a virulência do patógeno. O presente estudo investigou a ocorrência de multirresistência dos isolados aos antimicrobianos e a presença dos genes plo, fimA, fimC, fimE, fimG, nanH, nanP e cbpA em 41 linhagens de T. pyogenes isoladas de diferentes afecções em bovinos, caprinos, ovinos, equino e cão. T. pyogenes foi identificado predominantemente em casos de mastite (46,3%), abscessos (19,5%), pneumonia (9,8%), metritie (9,8%), linfadenite (7,3%), seguidos em menor frequência por encefalite (4,9%) e orquite (2,4%). A maior sensibilidade dos isolados foi observada para florfenicol (97,6%), azitromicina (97,6%), tetraciclina (95,2%), ceftiofur (92,7%), penicilina (92,7%), ampicilina (92,7%), gentamicina (90,3%) e eritromicina (87,8%). Em contraste, alta frequência de resistência dos isolados foi observada para bacitracina (46,3%), neomicina (31,7%), lincomicina (31,7%) e sulfametoxazole/trimetoprim (24,3%). O índice de resistência múltipla aos antimicrobianos - IRMA (>0,3) foi encontrado em 13 (31.7%) isolados, particularmente nos casos de mastite bovina. Dentre os isolados multirresistentes a três ou mais grupos de antimicrobianos, 12 (92,3%) foram identificados na espécie bovina, notadamente em infecções mamárias. Os genes mais frequentes detectados nos isolados foram: plo (40/41=97,6%), fimA (36/41=87,9%), nanP (34/41=82,9%), fimE (32/41=78,0%), nanH (28/41=62,3%), fimC (23/41=56,0%) e cbpA (5/41=12,2%). As principais associações de genes nos isolados foram observadas entre... / Abstract: Trueperella pyogenes are opportunistic bacterium characterized by suppurative infections in domestic animals, commonly refractory to conventional therapy. Recently, genes which encode exotoxin pyolysin (plo), and factors that promote adhesion of T. pyogenes to host cells, such as fimbriae (fimA, fimC, fimE, fimG), neuraminidases (nanH, nanP), and collagen-binding protein (cbpA) have been associated to virulence of pathogen. The aim of present study was investigate occurrence of multi-drug resistance of isolates, as well the presence of genes plo, fimA, fimC, fimE, fimG, nanH, nanP, and cbpA in 41 T. pyogenes strains obtaned from bovine, goats, sheep, horses, and dog isolated among different clinical manifestations. T. pyogenes was identified predominantly in mastitis (46.3%), abscesses (19.5%), pneumonia (9.8%), metritis (9.8%), lymphadenitis (7.3%), followed by encephalitis (4.9%) and orchitis (2.4%). The strains showed major in vitro sensitivity to florfenicol (97.6%), azithromicin (97.6%), tetracycline (95.2%), ceftiofur (92.7%), penicillin (92.7%), ampicillin (92.7%), gentamicin (90.3%), and erythromycin (87.8%). In contrast, highest frequency of resistance among isolates was observed to bacitracin (46.3%), neomycin (31.7%), lincomycin (31.7%), and trimethropim/sulfamethoxazole (24.3%). Antimicrobial multiple resistance index - AMRI (>0.3) was found in 13 (31.7%) isolates, particularly in bovine mastitis cases. Among multi-drug resistant isolates to 3 or more group of antimicrobials, 12 (92.3%) were identified in bovine, predominantly in mammary infections. The most common genes detected among isolates were: plo (40/41=97.6%), fimA (36/41=87.9%), nanP (34/41=82.9%), fimE (32/41=78.0%), nanH (28/41=62.3%), fimC (23/41=56.0%), and cbpA (5/41=12.2%). The major associations between genes of isolates were plo, fimA, fimE, nanH, and nanP (10/41=24.4%), and plo, fimA, fimE, fimC, nanH, and nanP (8/41=19.5%), mainly in bovine mastitis. To ... / Mestre

No presente estudo, a proposta foi avaliar a ação antimicrobiana sobre o biofilme de Candida albicans (SC 5314) e determinar a mínima concentração inibitória (MCI) de cinco fármacos utilizados no tratamento de estomatite protética (nistatina, miconazol, cetoconazol, itraconazol e diacetato de clorexidina), quando incorporados em reembasadores resilientes temporários à base de resina acrílica (Trusoft e Softone) bem como o efeito dessa modificação sobre as propriedades de dureza Shore A e rugosidade superficial dos materiais. Para determinação das MCIs, o biofilme fúngico foi formado sobre corpos de prova circulares (10 mm x 1 mm) dos materiais (n = 6) modificados (experimentais) ou não (controle) pela adição dos fármacos. Diferentes concentrações dos antimicrobianos foram testadas e a viabilidade celular determinada espectrofotometricamente pelo ensaio de redução de sais de tetrazólio- XTT, nos períodos de 24 h, 48 h, 7 e 14 dias. As medidas espectrofotométricas foram convertidas em porcentagens de redução fúngica e as MCIs determinadas como aquelas suficientes para inibir 90% ou mais do crescimento de C. albicans. Para os ensaios de dureza e rugosidade, corpos de prova retangulares (36 mm x 7 mm x 6 mm) dos materiais resilientes (n= 8) foram confeccionados sem (controle) ou com incorporação dos fármacos nas MCIs previamente definidas. Após armazenamento em água destilada a 37°C por 24 h, 7 e 14 dias, foram realizados os testes de dureza em durômetro Shore A (Woltest, GSD-709A) e de rugosidade superficial em rugosímetro (Surftest SJ-301). Os resultados foram analisados estatisticamente por ANOVA 3 fatores, seguida pelo teste de Tukey (=0,05). De acordo com os resultados, as MCIs determinadas para fármacos incorporados aos materiais resilientes foram: 0,032, 0,256, 0,128, 0,256 e 0,064 g/mL para nistatina, miconazol, cetoconazol, itraconazol e clorexidina, respectivamente. A adição dos antimicrobianos em ambos os materiais não alterou os valores de dureza, ou resultou na sua diminuição em relação ao controle, exceto para a incorporação de miconazol ao Softone, que demonstrou maiores médias após 14 dias (P=0,0035). A incorporação de nistatina aos dois materiais, de clorexidina ao Trusoft e de cetoconazol ao Softone não alterou os valores de rugosidade em relação ao controle após 7 e 14 dias (P>0,05). Nesses períodos, o itraconazol aumentou a rugosidade dos materiais (P<0,0001). Em relação às 24 h iniciais, o período de 14 dias mostrou que a rugosidade com a adição de nistatina, miconazol e cetoconazol foi reduzida para o Trusoft (P<0,05) e não apresentou alteração para o Softone (P>0,05). Foi possível concluir que a incorporação dos antimicrobianos testados inibiu o crescimento de C. albicans nos materiais ao longo de 14 dias de avaliação. A adição de todos os fármacos testados, exceto o miconazol no Softone, não causou alterações deletérias à dureza dos materiais resilientes no período avaliado. No período final, a adição de nistatina, miconazol e cetoconazol em ambos os reembasadores e de clorexidina no Trusoft não resultou em efeitos adversos na rugosidade. / The purpose of this study was to evaluate the antimicrobial action on Candida albicans biofilm (SC5314) and determine the minimum inhibitory concentration (MIC) of five drugs for denture stomatitis\' treatment (nystatin, miconazole, ketoconazole, itraconazole, and chlorhexidine diacetate) incorporated into temporary denture relines (Trusoft e Softone) as well the effect of this addition on the Shore A hardness and surface roughness of the materials. For MIC determination, the fungal biofilm was formed on disc specimens (10mm x 1 mm) of the materials (n= 6) modified (experimental) or not (control) by the addition of drugs. Different dosages of the antimicrobials were tested and cellular viability was determined by spectrophotometric tetrazolium salt XTT reduction assay at 24 h, 48 h, 7 and 14 days of incubation. The spectrophotometric measurements were converted to percentage reduction in candidal growth and the MICs were determined as the concentrations necessary to inhibit 90% or more of fungal viability. For hardness and surface tests, rectangular specimens (36 mm X 7 mm X 6 mm) of the resilient materials (n= 8) were made without (control) or with incorporation of the MIC drugs. After storage in distilled water at 37°C for 24h, 7 and 14 days, the hardness tests were performed using a Shore A hardness tester (Woltest, GSD-709A) and the roughness assay was conducted in a surface roughness tester (Surftest SJ-301). Data were statistically analyzed by 3-way ANOVA followed by Tukeys test (=.05). According to the results, MICs of the drugs incorporated into the material were: 0.032, 0.256, 0.128, 0.256 e 0.064 g/mL for nystatin, miconazole, ketoconazole, itraconazole and chlorhexidine, respectively. The addition of the tested antimicrobial agents in both materials demonstrated no evident hardness change or resulted in its decrease compared to the control, except for miconazole incorporation into Softone, which increased the hardness values after 14 days (P = .0035). The addition of nystatin into the two materials, chlorhexidine into Trusoft and ketoconazole into Softone resulted in no significant changes of roughness values compared to the control after 7 and 14 days (P>.05). In these periods, itraconazole promoted increase of the roughness for both materials (P<.0001). Compare to the 24- h period, the roughness at 14- day time with the addition of nystatin, miconazole and ketoconazole was reduced for Trusoft (P<.05) and remained unaffected for Softone (P> .05). It can be concluded that the incorporation of antimicrobial agents inhibited the C. albicans growth on the materials up to 14 days. The addition of all tested drugs, except for the miconazole into Softone, resulted in no deleterious effects on hardness of the resilient materials over the evaluation time. At the end period, the incorporation of nystatin, miconazole and ketoconazole into both denture relines and chlorhexidine into Trusoft resulted in no detrimental changes on the roughness.

A resina acrílica para base de próteses removíveis é capaz de aderir Candida spp. sobre sua superfície, possibilitando o aparecimento das estomatites protéticas. Um fator importante para essa aderência é a hidrofobicidade do polímero. Assim, a adição de radicais hidrofílicos à resina acrílica tem potencial de torná-la menos suscetível à formação de biofilmes, e merece ser investigado. O objetivo deste projeto foi avaliar os efeitos da copolimerização do ácido metacrílico sobre aderência microbiana e propriedades físicas em um material à base de polimetil metacrilato para base de próteses removíveis. Para os ensaios com a resina acrílica, espécimes de diferentes formatos foram divididos em grupos, conforme a concentração do ácido metacrílico, em volume, na porção líquida da resina (A: 0%; B: 10%; C: 20%, D:50%). A aderência de Candida albicans foi avaliada por meio da contagem de unidades formadoras de colônia (UFC) aderidas sobre os espécimes mantidos em caldo de cultura. Também foi estudadas a dureza Vickers, a resistência flexural, a rugosidade e a estabilidade de cor. Os grupos foram descritos por média ± desvios padrão e comparados, dentro de cada variável, por meio de ANOVA, com &alpha; = 0,05. No caso da aderência de C. albicans, transformação em log10 foi realizada antes da análise. Como resultado desse estudo, não foi possível observar diferenças na aderência de C. albicans com a adição do ácido metacrílico à resina acrílica (A: 5,0 ± 0.4, B: 5,0 ± 0.4, C: 5.2 ± 0.6 e D: 5.2 ± 0.3 log10(UFC)). Redução significante foi encontrada para os valores de dureza, onde os valores (em VHN) foram A: 19,0 ± 1,4A, B: 19,6 ± 1,3A, C: 19,6 ± 0,9A e D: 14,2 ± 0,6B. Não houve diferença significante para o teste de resistência flexural (A: 96,32 ± 8,25, B: 97,65 ± 6,11, C: 102,43 ± 8,61 e D: 106,34 ± 13,69 MPa); no entanto foi observada redução na rugosidade superficial com o aumento da concentração do ácido (A: 0,26 ± 0,05A, B: 0,17 ± 0,01B, C: 0,18 ± 0,03B e D: 0,13 ± 0,03C &micro;m). Conclui-se que a copolimerização do ácido metacrílico em resina para base protética proporcionou mudanças nas propriedades físicas do material, com melhora na rugosidade, porém menor dureza. A aderência de C. albicans não sofreu interferência; futuros testes com outras espécies e na presença de proteínas salivares devem ser realizados a fim de determinar se a adição do ácido realmente possui potencial clínico. / Acrylic resins for denture base play an important role as reservoirs of micro-organisms, by increasing the risk of Candida ssp. colonization which is implicated in the pathogenesis of associated stomatitis. An important factor for this adherence is the polymer hydrophobicity. Thus, incorporation of polar radicals in the polymer could increase its hydrophylia, reducing this adherence. The main purpose of the present study was to investigate the antifungal activity of a denture base resin incorporating the methacrylic acid (MA) against Candida albicans by the counting of adherent cells and its effect on hardness, roughness and flexural strength of the material. 32 circular (14x4mm), 40 rectangular (65x10x3.3mm) and 40 square-shaped (10x10x3mm) specimens were divided into four groups, according to the concentration of MA substituted into the monomer component of a heat-polymerized acrylic resin (Lucitone 550), as follows: 0% (Control), 10%, 20% and 50% (v/v). Hardness was assessed by a hardness tester equipped with a Vickers diamond penetrator. A surface roughness tester was used to measure the surface roughness of the specimens, and a flexural strength testing was carried out on a universal testing machine. Variables were analyzed by ANOVA/Tukey\'s test (&alpha;=.05). Colonies were counted for each plated specimen and the colony-forming units per milliliter (CFU/mL) were then calculated. CFU/mL values for each concentration were compared by means of ANOVA/Tukey test after logarithmic (log 10) transformation (&alpha;=.05). A significant difference was found for hardness values (19.0±1.4A, 19.6±1.3A, 19.6±0.9A, 14.2±0.6B) VHN. Surface roughness values decreased with MA concentration increase (0.26±0.05A, 0.17±0.01AB, 0.18±0.03AB, 0.13±0.03B &micro;m). No significant difference was found for flexural strengh (96.3±8.3A, 97.7±6.1A, 102.4±8.6A, 106.3±13.7A MPa) and among the four groups for the adherence assay (A: 5,0 ± 0.4, B: 5,0 ± 0.4, C: 5.2 ± 0.6 e D: 5.2 ± 0.3 log10 (CFU). For the tested acrylic resin, the addition of MA in the concentration of 50% reduced its hardness. Thus, the presence of MA around this concentration inside the monomer may compromise the tested material structure. Although MA didnt lower the flexural strength, regardless of the concentration, the values for surface roughness reduced as MA concentration increased, suggesting that MA addition may improve the acrylic resin texture, leading to less biofilm accumulation. The adherence of C. albicans was not influenced by the presence of MA. Future tests with other microorganisms and salivary proteins should be carried out to determine if this incorporation has a clinical potencial to be used.

A resina acrílica para base de próteses removíveis é capaz de acumular biofilme e assim favorecer o aparecimento de diversos problemas na cavidade bucal dos usuários de próteses. A imobilização de um agente antisséptico na matriz polimérica tem potencial preventivo frente a esse acúmulo, mas necessita de maior investigação. O objetivo deste estudo foi avaliar as propriedades biológicas do brometo de metacriloiloxiundecilpiridínio (MUPB), um composto antisséptico capaz de copolimerizar-se com as resinas acrílicas. Foram determinadas as concentrações inibitória e fungicida/bactericida mínimas (CIM, CFM/CBM) do MUPB frente às espécies Candida albicans, Candida dubliniensis, Candida glabrata, Lactobacillus casei, Staphylococcus aureus e Streptococcus mutans, em comparação ao cloreto de cetilpiridínio (CCP). A seguir, investigou-se a citotoxicidade do MUPB em fibroblastos, comparando-o com o metil metacrilato (MMA). A avaliação da atividade antimicrobiana de diferentes concentrações do MUPB em massa (0, 0,3% e 0,6%) incorporado em uma resina acrílica termopolimerizável para base de próteses foi realizada por meio de testes de difusão em disco e quantificação de unidades formadoras de colônia (UFC) aderidas à resina após contato com suspensões de cada micro-organismo. A adesão microbiana também foi avaliada por microscopia eletrônica de varredura. Comparações entre o MUPB e as demais substâncias, bem como entre as concentrações incorporadas na resina, foram realizadas com &alpha;=0,05. O MUPB apresentou CIM inferior ao CCP para C. dublinienses e S. mutans (P=0,046 e 0,043, respectivamente). Para as demais espécies, as diferenças não foram significantes. Para a CFM/CBM, só foi encontrada diferença significante para C. albicans (P=0,046). O MUPB não polimerizado mostrou-se em torno de 20 vezes mais citotóxico que o MMA. Independente da concentração incorporada e da espécie, não houve formação de halo de inibição em torno dos espécimes. A incorporação do MUPB só influenciou na adesão de C. albicans (P=0,003), com menores contagens de UFC para o grupo com 0,6%. Conclui-se que o MUPB não polimerizado tem capacidade antimicrobiana próxima à do CCP, e alta citotoxicidade, se comparado ao MMA. A atividade antimicrobiana, após incorporação em uma resina acrílica para base de prótese, não depende de sua eluição, porém apresentou-se restrita à C. albicans. / Acrylic resins for removable denture base are capable of accumulating biofilm and thus favor the appearance of various problems in the edentulous oral cavity. An antiseptic agent immobilized within the polymeric matrix has a preventive potential against this accumulation, but requires further investigation. The aim of this study was to evaluate the biological properties of methacryloyloxyundecylpyridinium bromide (MUPB), an antiseptic monomer capable of copolymerizing with acrylic resins. The minimum inhibitory and fungicidal/bactericidal concentrations (MIC, MFC/MBC) of MUPB were determined against the species Candida albicans, Candida dubliniensis, Candida glabrata, Lactobacillus casei, Staphylococcus aureus and Streptococcus mutans, in comparison with cetylpyridinium chloride (CCP). After this, the cytotoxicity of MUPB was investigated in fibroblasts, compared with methyl methacrylate (MMA). The antimicrobial activity of different concentrations of MUPB (0, 0.3% and 0.6% w/w) incorporated into a heat polymerized denture base acrylic resin was evaluated by means of disk diffusion tests, and the CFUs adhered to the resin after contact with suspensions of each microorganism were quantified. Microbial adhesion was also evaluated by scanning electron microscopy. Comparisons were made between MUPB and the other substances, as well as between the concentrations incorporated into the resin (&alpha;=.05). MUPB presented a lower MIC than CCP for C. dubliniensis and S. mutans (P=.046 and .043, respectively). For the other species, the differences were not significant. For MFC or MBC, significant difference was found only for C. albicans (P=.046). Non polymerized MUPB was shown to be 20 times more cytotoxic than MMA. Irrespective of the concentration incorporated and the species, there was no growth of inhibition halo around the specimens. The incorporation of MUPB only influenced the adhesion of C. albicans (P=.003), with lower CFU counts for the group with the concentration of 0.6%. It was concluded that non polymerized MUPB has an antimicrobial capacity close to that of CCP, and high cytotoxicity when compared with MMA. The antimicrobial activity after incorporation within a denture base acrylic resin did not depend on its elution, but was shown to be restricted to C. albicans.

Neste trabalho, foi realizado um estudo crítico dos modelos metodológicos in vivo e in vitro sobre a avaliação microbiológica da clorexidina empregada como agente irrigante e medicação intracanal na terapia endodôntica. Para tanto, foi realizada uma busca sistemática nas bases de dados: Medline, Lilacs e BBO nos últimos dez anos sobre o assunto em questão. Foram selecionados os trabalhos que avaliaram a clorexidina de uma maneira não combinada com outras substâncias ou fármacos, abordando sua utilização tanto como irrigante endodôntico, e como medicação intracanal. Para uma melhor análise, os trabalhos foram agrupados de acordo com a forma de uso e metodologia com seus dados tabulados, respectivamente: Clorexidina como irrigante in vitro, Clorexidina como irrigante in vivo, Clorexidina como medicação intracanal in vitro e Clorexidina como medicação intracanal in vivo. Na análise, pode-se observar a efetividade antimicrobiana da clorexidina como irrigante nos ensaios laboratoriais e clínicos, sendo nas formas de gel e líquida com variação na concentração de 0.2 a 2%. Quanto o uso da clorexidina como medicação intracanal, pode ser constatada sua atividade antimicrobiana em ambos ambientes experimentais, embora com poucos trabalhos in vivo, seu desempenho foi observado apresentando largo espectro de ação quando utilizada a 2% em gel por um período de sete dias. / In this essay, it was realized a critical study of the methodological models, in vivo and in vitro, about the microbiological assessment of the chlorhexidine employed as root canal irrigants and dressing in the Endodontics. A systematic search was carried out on the databases: Medline, Lilacs and BBO from the last ten years concerning the respective subject. There were selected the papers which evaluated the chlorhexedine as an individual group, without joined to another substances or drugs, broaching its application as root canal irrigants as much as dressing. For improved analyzed, the investigations were divided according its way of use and methodology, with its data tabulated in the respective way: Chlorhexidine as irrigant in vitro, Chlorhexidine as irrigant in vivo, Chlorhexidine as intracanal dressing in vitro and Chlorhexidine as intracanal dressing in vivo. At the analysis, it can be observed the antimicrobial effectiveness of the chlorhexidine as irrigant in the clinical and laboratories tests, being the gel and liquid form with concentration changed from 0.2 to 2%. About the chlorhexidine as root canal dressing, it can be evidenced its antimicrobial activity in both experimental methods, although a few trials in vivo, its performance was observed showing a large spectral action when used in 2% gel for a period of seven days.

A resina acrílica para base de próteses removíveis é capaz de acumular biofilme e assim favorecer o aparecimento de diversos problemas na cavidade bucal dos usuários de próteses. A imobilização de um agente antisséptico na matriz polimérica tem potencial preventivo frente a esse acúmulo, mas necessita de maior investigação. O objetivo deste estudo foi avaliar as propriedades biológicas do brometo de metacriloiloxiundecilpiridínio (MUPB), um composto antisséptico capaz de copolimerizar-se com as resinas acrílicas. Foram determinadas as concentrações inibitória e fungicida/bactericida mínimas (CIM, CFM/CBM) do MUPB frente às espécies Candida albicans, Candida dubliniensis, Candida glabrata, Lactobacillus casei, Staphylococcus aureus e Streptococcus mutans, em comparação ao cloreto de cetilpiridínio (CCP). A seguir, investigou-se a citotoxicidade do MUPB em fibroblastos, comparando-o com o metil metacrilato (MMA). A avaliação da atividade antimicrobiana de diferentes concentrações do MUPB em massa (0, 0,3% e 0,6%) incorporado em uma resina acrílica termopolimerizável para base de próteses foi realizada por meio de testes de difusão em disco e quantificação de unidades formadoras de colônia (UFC) aderidas à resina após contato com suspensões de cada micro-organismo. A adesão microbiana também foi avaliada por microscopia eletrônica de varredura. Comparações entre o MUPB e as demais substâncias, bem como entre as concentrações incorporadas na resina, foram realizadas com &alpha;=0,05. O MUPB apresentou CIM inferior ao CCP para C. dublinienses e S. mutans (P=0,046 e 0,043, respectivamente). Para as demais espécies, as diferenças não foram significantes. Para a CFM/CBM, só foi encontrada diferença significante para C. albicans (P=0,046). O MUPB não polimerizado mostrou-se em torno de 20 vezes mais citotóxico que o MMA. Independente da concentração incorporada e da espécie, não houve formação de halo de inibição em torno dos espécimes. A incorporação do MUPB só influenciou na adesão de C. albicans (P=0,003), com menores contagens de UFC para o grupo com 0,6%. Conclui-se que o MUPB não polimerizado tem capacidade antimicrobiana próxima à do CCP, e alta citotoxicidade, se comparado ao MMA. A atividade antimicrobiana, após incorporação em uma resina acrílica para base de prótese, não depende de sua eluição, porém apresentou-se restrita à C. albicans. / Acrylic resins for removable denture base are capable of accumulating biofilm and thus favor the appearance of various problems in the edentulous oral cavity. An antiseptic agent immobilized within the polymeric matrix has a preventive potential against this accumulation, but requires further investigation. The aim of this study was to evaluate the biological properties of methacryloyloxyundecylpyridinium bromide (MUPB), an antiseptic monomer capable of copolymerizing with acrylic resins. The minimum inhibitory and fungicidal/bactericidal concentrations (MIC, MFC/MBC) of MUPB were determined against the species Candida albicans, Candida dubliniensis, Candida glabrata, Lactobacillus casei, Staphylococcus aureus and Streptococcus mutans, in comparison with cetylpyridinium chloride (CCP). After this, the cytotoxicity of MUPB was investigated in fibroblasts, compared with methyl methacrylate (MMA). The antimicrobial activity of different concentrations of MUPB (0, 0.3% and 0.6% w/w) incorporated into a heat polymerized denture base acrylic resin was evaluated by means of disk diffusion tests, and the CFUs adhered to the resin after contact with suspensions of each microorganism were quantified. Microbial adhesion was also evaluated by scanning electron microscopy. Comparisons were made between MUPB and the other substances, as well as between the concentrations incorporated into the resin (&alpha;=.05). MUPB presented a lower MIC than CCP for C. dubliniensis and S. mutans (P=.046 and .043, respectively). For the other species, the differences were not significant. For MFC or MBC, significant difference was found only for C. albicans (P=.046). Non polymerized MUPB was shown to be 20 times more cytotoxic than MMA. Irrespective of the concentration incorporated and the species, there was no growth of inhibition halo around the specimens. The incorporation of MUPB only influenced the adhesion of C. albicans (P=.003), with lower CFU counts for the group with the concentration of 0.6%. It was concluded that non polymerized MUPB has an antimicrobial capacity close to that of CCP, and high cytotoxicity when compared with MMA. The antimicrobial activity after incorporation within a denture base acrylic resin did not depend on its elution, but was shown to be restricted to C. albicans.

A resina acrílica para base de próteses removíveis é capaz de aderir Candida spp. sobre sua superfície, possibilitando o aparecimento das estomatites protéticas. Um fator importante para essa aderência é a hidrofobicidade do polímero. Assim, a adição de radicais hidrofílicos à resina acrílica tem potencial de torná-la menos suscetível à formação de biofilmes, e merece ser investigado. O objetivo deste projeto foi avaliar os efeitos da copolimerização do ácido metacrílico sobre aderência microbiana e propriedades físicas em um material à base de polimetil metacrilato para base de próteses removíveis. Para os ensaios com a resina acrílica, espécimes de diferentes formatos foram divididos em grupos, conforme a concentração do ácido metacrílico, em volume, na porção líquida da resina (A: 0%; B: 10%; C: 20%, D:50%). A aderência de Candida albicans foi avaliada por meio da contagem de unidades formadoras de colônia (UFC) aderidas sobre os espécimes mantidos em caldo de cultura. Também foi estudadas a dureza Vickers, a resistência flexural, a rugosidade e a estabilidade de cor. Os grupos foram descritos por média ± desvios padrão e comparados, dentro de cada variável, por meio de ANOVA, com &alpha; = 0,05. No caso da aderência de C. albicans, transformação em log10 foi realizada antes da análise. Como resultado desse estudo, não foi possível observar diferenças na aderência de C. albicans com a adição do ácido metacrílico à resina acrílica (A: 5,0 ± 0.4, B: 5,0 ± 0.4, C: 5.2 ± 0.6 e D: 5.2 ± 0.3 log10(UFC)). Redução significante foi encontrada para os valores de dureza, onde os valores (em VHN) foram A: 19,0 ± 1,4A, B: 19,6 ± 1,3A, C: 19,6 ± 0,9A e D: 14,2 ± 0,6B. Não houve diferença significante para o teste de resistência flexural (A: 96,32 ± 8,25, B: 97,65 ± 6,11, C: 102,43 ± 8,61 e D: 106,34 ± 13,69 MPa); no entanto foi observada redução na rugosidade superficial com o aumento da concentração do ácido (A: 0,26 ± 0,05A, B: 0,17 ± 0,01B, C: 0,18 ± 0,03B e D: 0,13 ± 0,03C &micro;m). Conclui-se que a copolimerização do ácido metacrílico em resina para base protética proporcionou mudanças nas propriedades físicas do material, com melhora na rugosidade, porém menor dureza. A aderência de C. albicans não sofreu interferência; futuros testes com outras espécies e na presença de proteínas salivares devem ser realizados a fim de determinar se a adição do ácido realmente possui potencial clínico. / Acrylic resins for denture base play an important role as reservoirs of micro-organisms, by increasing the risk of Candida ssp. colonization which is implicated in the pathogenesis of associated stomatitis. An important factor for this adherence is the polymer hydrophobicity. Thus, incorporation of polar radicals in the polymer could increase its hydrophylia, reducing this adherence. The main purpose of the present study was to investigate the antifungal activity of a denture base resin incorporating the methacrylic acid (MA) against Candida albicans by the counting of adherent cells and its effect on hardness, roughness and flexural strength of the material. 32 circular (14x4mm), 40 rectangular (65x10x3.3mm) and 40 square-shaped (10x10x3mm) specimens were divided into four groups, according to the concentration of MA substituted into the monomer component of a heat-polymerized acrylic resin (Lucitone 550), as follows: 0% (Control), 10%, 20% and 50% (v/v). Hardness was assessed by a hardness tester equipped with a Vickers diamond penetrator. A surface roughness tester was used to measure the surface roughness of the specimens, and a flexural strength testing was carried out on a universal testing machine. Variables were analyzed by ANOVA/Tukey\'s test (&alpha;=.05). Colonies were counted for each plated specimen and the colony-forming units per milliliter (CFU/mL) were then calculated. CFU/mL values for each concentration were compared by means of ANOVA/Tukey test after logarithmic (log 10) transformation (&alpha;=.05). A significant difference was found for hardness values (19.0±1.4A, 19.6±1.3A, 19.6±0.9A, 14.2±0.6B) VHN. Surface roughness values decreased with MA concentration increase (0.26±0.05A, 0.17±0.01AB, 0.18±0.03AB, 0.13±0.03B &micro;m). No significant difference was found for flexural strengh (96.3±8.3A, 97.7±6.1A, 102.4±8.6A, 106.3±13.7A MPa) and among the four groups for the adherence assay (A: 5,0 ± 0.4, B: 5,0 ± 0.4, C: 5.2 ± 0.6 e D: 5.2 ± 0.3 log10 (CFU). For the tested acrylic resin, the addition of MA in the concentration of 50% reduced its hardness. Thus, the presence of MA around this concentration inside the monomer may compromise the tested material structure. Although MA didnt lower the flexural strength, regardless of the concentration, the values for surface roughness reduced as MA concentration increased, suggesting that MA addition may improve the acrylic resin texture, leading to less biofilm accumulation. The adherence of C. albicans was not influenced by the presence of MA. Future tests with other microorganisms and salivary proteins should be carried out to determine if this incorporation has a clinical potencial to be used.

Neste trabalho, foi realizado um estudo crítico dos modelos metodológicos in vivo e in vitro sobre a avaliação microbiológica da clorexidina empregada como agente irrigante e medicação intracanal na terapia endodôntica. Para tanto, foi realizada uma busca sistemática nas bases de dados: Medline, Lilacs e BBO nos últimos dez anos sobre o assunto em questão. Foram selecionados os trabalhos que avaliaram a clorexidina de uma maneira não combinada com outras substâncias ou fármacos, abordando sua utilização tanto como irrigante endodôntico, e como medicação intracanal. Para uma melhor análise, os trabalhos foram agrupados de acordo com a forma de uso e metodologia com seus dados tabulados, respectivamente: Clorexidina como irrigante in vitro, Clorexidina como irrigante in vivo, Clorexidina como medicação intracanal in vitro e Clorexidina como medicação intracanal in vivo. Na análise, pode-se observar a efetividade antimicrobiana da clorexidina como irrigante nos ensaios laboratoriais e clínicos, sendo nas formas de gel e líquida com variação na concentração de 0.2 a 2%. Quanto o uso da clorexidina como medicação intracanal, pode ser constatada sua atividade antimicrobiana em ambos ambientes experimentais, embora com poucos trabalhos in vivo, seu desempenho foi observado apresentando largo espectro de ação quando utilizada a 2% em gel por um período de sete dias. / In this essay, it was realized a critical study of the methodological models, in vivo and in vitro, about the microbiological assessment of the chlorhexidine employed as root canal irrigants and dressing in the Endodontics. A systematic search was carried out on the databases: Medline, Lilacs and BBO from the last ten years concerning the respective subject. There were selected the papers which evaluated the chlorhexedine as an individual group, without joined to another substances or drugs, broaching its application as root canal irrigants as much as dressing. For improved analyzed, the investigations were divided according its way of use and methodology, with its data tabulated in the respective way: Chlorhexidine as irrigant in vitro, Chlorhexidine as irrigant in vivo, Chlorhexidine as intracanal dressing in vitro and Chlorhexidine as intracanal dressing in vivo. At the analysis, it can be observed the antimicrobial effectiveness of the chlorhexidine as irrigant in the clinical and laboratories tests, being the gel and liquid form with concentration changed from 0.2 to 2%. About the chlorhexidine as root canal dressing, it can be evidenced its antimicrobial activity in both experimental methods, although a few trials in vivo, its performance was observed showing a large spectral action when used in 2% gel for a period of seven days.

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Fundação Araucária de Apoio ao Desenvolvimento Científico e Tecnológico do Paraná / O cará-moela (Dioscorea bulbifera) é uma hortaliça não convencional que armazena substâncias de reserva em um caule aéreo modificado, e por possuir potencial nutritivo vem sendo utilizado na culinária como substituto de tubérculos tradicionais que possuem importância social e econômica como a batata inglesa e a batata doce. Há relatos na literatura que apontam para a presença de compostos de interesse biotecnológico, como saponinas, flavonoides, terpenoides, compostos fenólicos, taninos, glicosídeos, alcaloides, oxalatos, ácidos orgânicos e principalmente polissacarídeos. Para suprir as necessidades de informações sobre as propriedades dos carboidratos e suas aplicações industriais, os polissacarídeos, presentes no tubérculo do cará-moela, em estado bruto e pré-purificado, foram caracterizados quimicamente por meio de diferentes técnicas instrumentais, bem como, tiveram sua capacidade antioxidante e antimicrobiana determinada. Por meio da Ressonância Magnética Nuclear (RMN) foi possível comprovar que as amostras analisadas são formadas por macromoléculas poliméricas. Os espectros de Infravermelho com transformada de Fourier (IV-TF) apresentaram uma banda de absorção bem definida para hidroxilas (OH), característica de polissacarídeos. A utilização da Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV) possibilitou conhecer a morfologia das amostras, as quais são compostas por películas ou "folhas". Além disso, por Difração de Raios X (DRX) foi observado que as amostras em sua maioria são compostas por material amorfo, apresentando picos de cristalinidade em aproximadamente 21,54º e 23,62º 2θ. A análise térmica detectou três regiões de perda de massa no polissacarídeo não dialisado (PND) e dialisado (PD), nas temperaturas de 100 e 150; 150 e 175; e 550 e 425 ºC, respectivamente; associadas principalmente a desidratação da amostra e à decomposição da matéria orgânica, restando uma certa quantidade de cinzas. Também foi possível determinar a matéria orgânica presente nas amostras que foi de aproximadamente 90,80 e 89,50%, na devida ordem. Interessante atividade antioxidante foi detectada por DPPH, ABTS, FRAP, remoção do radical OH, remoção do H2O2 e poder redutor, porém não apresentaram atividade antimicrobiana frente aos 20 microrganismos testados. Os resultados obtidos neste estudo permitiram caracterizar preliminarmente o polissacarídeo da D. bulbifera, dados estes não encontrados em todo o levantamento bibliográfico realizado. Além disso, tais resultados podem nortear trabalhos futuros com a aplicação deste material industrialmente, como filmes biodegradáveis, em excipientes farmacêuticos, e no encapsulamento de compostos nutracêuticos. / Dioscorea bulbifera is an unconventional vegetable that stores reserve substances in a modified aerial stem, and because it has nutritional potential, has been used in cooking as a substitute for traditional tubers that have social and economic importance such as potatoes and the sweet potato. There are reports in the literature that point to the presence of compounds of biotechnological interest, such as saponins, flavonoids, terpenoids, phenolic compounds, tannins, glycosides, alkaloids, oxalates, organic acids and mainly polysaccharides. To meet the needs of information on the properties of carbohydrates and their industrial applications, the polysaccharides, present in the raw and pre-purified carcass of the gizzard were characterized chemically by means of different instrumental techniques, as well as their antioxidant and antimicrobial capacity. By means of Nuclear Magnetic Resonance (NMR) it was possible to prove that the analyzed samples are formed by polymeric macromolecules. The Fourier Transform Infrared (IV-TF) spectra presented a well defined absorption band for hydroxyls (OH), characteristic of polysaccharides. The use of Scanning Electron Microscopy (SEM) made it possible to know the morphology of the samples, which are composed of films or "sheets". Moreover, by X-ray diffraction (XRD) it was observed that the samples are mostly composed of amorphous material, with peaks of crystallinity at approximately 21.54º and 23.62º 2θ. Thermal analysis detected three regions of mass loss in the non-dialysed polysaccharide (PND) and dialysate (PD) at temperatures of 100 and 150; 150 and 175; and 550 and 425 °C, respectively; associated mainly with sample dewatering and organic matter decomposition, leaving a certain amount of ash remaining. It was also possible to determine the organic matter present in the samples, which was approximately 90.80 and 89.50%, in due order. Interesting antioxidant activity was detected by DPPH, ABTS, FRAP, removal of the OH radical, removal of H2O2 and reducing power, but did not present antimicrobial activity against the 20 microorganisms tested. The results obtained in this study allowed preliminary characterization of the D. bulbifera polysaccharide, data not found in the entire bibliographic survey. Moreover, such results may guide future work with the application of this material industrially, as biodegradable films, in pharmaceutical excipients, and in the encapsulation of nutraceutical compounds.