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Geoprópolis de Melipona fasciculata SMITH : ações citotóxica, imunomoduladora, antibacteriana e antifúngica /

Araújo, Maria José Abigail Mendes. January 2013 (has links)
Orientador: José Maurício Sforcin / Banca: Rodrigo Tavanelli Hernandes / Banca: Rosane Nassar Meireles Guerra / Banca: Flávia Raquel Fernandes do Nascimento / Banca: Maria Teresa Teixeira Cruz Rosete / Resumo: Própolis é composta por substâncias resinosas, coletadas de várias plantas por abelhas africanizadas, adicionando pólen, cera e secreções glandulares, enquanto para a produção de geoprópolis (Geo) as abelhas sem ferrão utilizam materiais resinosos de plantas, cera, e ainda acrescentam terra ou barro. As atividades biológicas da própolis produzida por Apis mellifera têm sido extensivamente estudadas, mas ainda são escassos os trabalhos sobre as propriedades da geoprópolis. Assim, o presente trabalho se propôs a investigar as atividades citotóxica, imunomoduladora, antibacteriana e antifúngica do extrato hidroalcoólico de geoprópolis de Melipona fasciculata Smith. Foi realizada a caracterização química da Geo, verificando que o principal grupo de compostos encontrados foram triterpenos. No tocante às células do carcinoma da laringe humana (HEp-2), Geo apresentou ação inibitória em concentrações mais elevadas; entretanto, esta ação foi somente citostática. Geo apresentou ação imunomoduladora sobre monócitos humanos, estimulando a produção das citocinas estudadas (TNF-α e IL-10). Não foi observada ação antibacteriana contra S. aureus e E. coli, havendo inibição destas linhagens somente com altas concentrações do extrato. Contudo, a associação de Geo com antibióticos favoreceu a ação do cloranfenicol sobre S. aureus. A Geo exerceu ação inibitória sobre Pythium insidiosum, tanto para o isolado obtido de caso humano como de eqüinos. Os resultados sugerem que a Geo apresentou inúmeras propriedades biológicas; contudo, sua ação é menor em comparação à própolis produzida por abelhas africanizadas, talvez devido ao baixo rendimento do extrato e sua difícil solubilidade / Abstract: Propolis is composed of resinous substances collected from various plants by Africanized honeybees, adding polen, wax and bee secretions, while for geopropolis (Geo) production stingless bees use resinous materials from plants, wax, but also adding mud or clay. The biological activities of propolis produced by Apis mellifera have been extensively studied, but there are few studies on Geo properties. Thus, the present study investigated the cytotoxic, immunomodulatory, antibacterial and antifungal activities of hydroalcoholic extract of Geo produced by Melipona fasciculata Smith. The chemical characterization of Geo was performed, revealing that the main group of compounds was triterpenes. Geo exerted an inhibitory action on human larynx carcinoma cells (HEp-2) using high concentrations, however, it was only a cytostatic action. Geo exhibited immunomodulatory effects on human monocytes, stimulating cytokines production (TNF-α and IL-10). No antibacterial activity was seen against S. aureus and E. coli. However, the combination of Geo with chloramphenicol favored its effect against S. aureus. Geo exerted an inhibitory action against Pythium insidiosum, both for human or equine isolates. Data suggested that Geo presented several properties; however, its activity is lower compared to propolis produced by honeybees, perhaps due to the low yield of the extract and its difficult solubility / Doutor
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Aspectos biológicos de Orius insidiosus (Say, 1832) (Hemiptera: Anthocoridae) alimentado com larvas de Plutella xylostella (Linnaeus, 1758) (Lepidoptera: Plutellidae) criadas em brassicáceas /

Pedroso, Elizabeth do Carmo. January 2011 (has links)
Orientador: Sérgio Antonio de Bortoli / Banca: Geraldo Andrade de Carvalho / Banca: César Freire Carvalho / Banca: Antonio Carlos Busoli / Banca: Francisco Jorge Cividanes / Resumo: Orius insidiosus é uma espécie generalista, o que o torna apto à exploração do ecossistema. A traça-das-crucíferas, Plutella xylostella, é considerada a principal praga das brassicáceas podendo ocasionar destruição total. Este estudo visou obter informações sobre O. insidiosus para subsidiar o desenvolvimento de programas de controle biológico de P. xylostella em diferentes variedades de brassicáceas. Foram considerados os seguintes objetivos específicos: a) avaliar o desenvolvimento de O. insidiosus; b) confeccionar a tabela de vida de O. insidiosus alimentado com larvas de segundo ínstar de P. xylostella criadas em diferentes variedades de brassicáceas; c) obter a resposta funcional de O. insidiosus. As criações dos insetos (O. insidiosus e P. xylostella) e os experimentos foram desenvolvidos no Laboratório de Biologia e Criação de Insetos (LBCI) da FCAV/UNESP campus de Jaboticabal, sob temperatura de 25±1ºC, umidade relativa de 70±10% e fotofase de 12 horas. Foram mantidas criações de P. xylostella nas seguintes variedades: Brassica oleracea L. var. acephala (couve), var. itálica (brócolis), var. capitata (repolho) e var. botrytis (couve-flor). Oitenta ninfas de primeiro ínstar foram individualizadas em placas de Petri para o acompanhamento da fase ninfal. Os adultos foram separados por sexo, acasalados e mantidos em placas de Petri para a verificação das características reprodutivas e longevidade. Para os estudos de resposta funcional fêmeas foram deixadas sem alimentação por 12h e individualizadas em placas de Petri com larvas nas densidades de 2, 4, 8, 16 e 32 por placa, para cada variedade. A duração média da fase ninfal foi de 11,4; 13,9; 13,0 e 14,1 dias para brócolis, couve, couve-flor e repolho, respectivamente. A longevidade de O. insidiosus não diferiu entre as variedades. O período de pré-oviposição... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaix / Abstract: Orius insidiosus is a generalist specie, which makes it suitable to explore the ecosystem. The diamondback moth, Plutella xylostella, is a major pest of Brassicaceae and can cause total destruction to the culture. This study aimed at obtaining information about O. insidiosus for use to develop biological control programs of P. xylostella in different varieties of Brassicaceae. We considered the following specific objectives: a) evaluate the development of O. insidiosus; b) to prepare a life table O. insidiosus fed on second instar larvae of P. xylostella reared on different cultivars of Brassicaceae; c) obtain the functional response of O. insidiosus. The rearing of insects (O. insidiosus e P. xylostella) and the experiments were developed in the Laboratory of Insect Biology and Rearing (LBCI), FCAV / UNESP Jaboticabal, under temperature 25 ± 1 ° C, relative humidity of 70 ± 10% and photophase of 12 hours. It was maintained rearing of P. xylostella in the varieties B. oleracea var. acephala (kale), var. italic (broccoli), var. capitata (cabbage) and var. botrytis (cauliflower). Eighty nymphs of first instar were individually placed in Petri dishes to the accompaniment of the nymphal stage. The adults were sexed, mated and kept in Petri dishes for the verification of reproductive traits and longevity. To study the functional response of females were left without feed for 12 hours and individualized in Petri dishes with caterpillars in the densities of 2, 4, 8, 16 and 32 per plate for each variety. The production of females (R0), generation time (T), intrinsic rate of increase (rm) and longevity of females were similar. O. insidiosus is able to grow and reproduce preying larvae of the diamondback moth in different cultivars of Brassicaceae. The average of the nymphal stage were 11.4, 13.9, 13.0 and 14.1 days for broccoli, cabbage, cauliflower and kale... (Complete abstract click electronic access belo / Doutor
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Avaliação de genótipos de maracujazeiro e viabilidade econômica da cv. Roxinho do Kênia para exportação /

Ripardo, Ana Karolina da Silva, 1983. January 2014 (has links)
Orientador: Aloisio Costa Sampaio / Banca: Giuseppina Pace Pereira Lima / Banca: Terezinha de Fatima Fumis / Banca: Nobuyoshi Narita / Banca: Marco Antonio Tecchio / Resumo: Este trabalho teve como objetivo avaliar o desenvolvimento, a produtividade, o florescimento e a frutificação de setes genótipos de maracujazeiro cultivados em São Manuel, SP. O experimento foi conduzido na Fazenda Experimental São Manuel, da Faculdade de Ciências Agronômicas da UNESP, localizada no município de São Manuel - SP. O experimento foi avaliado ao longo dos anos de 2011 a 2013, o delineamento foi em blocos casualizados, com plantio de sete genótipos e quatro repetições, sendo a parcela útil constituída de duas plantas. Os genótipos avaliados foram: BRS Ouro Vermelho, BRS Sol do Cerrado, BRS Gigante Amarelo, FB 100, FB 200, Roxinho do Kênia e Seleção Afruvec. No primeiro ano avaliou-se o crescimento da haste principal dos genótipos de maracujazeiro. No segundo ano, foi avaliada a produção, a biologia reprodutiva. No terceiro ano, avaliou-se o segundo ano de produção, a biologia floral e a qualidade dos frutos, além disso, fez-se o teste de polinização. No segundo ano de cultivo das plantas ocorreu um aumento no número de frutos, na produção e na produtividade de todas as plantas, e esse aumento foi de 16,2kg pl-1. O BRS Sol do Cerrado produziu a maior quantidade de frutos por hectare, com 54,8 kg pl-1. O Roxinho do Kênia obteve o maior número de frutos estatisticamente superior aos demais. Verificou-se que a Roxinho do Kênia apresentou precocidade de floração em relação ao outros genótipos, com florescimento durante o ano todo, nas condições de São Manuel-SP / Abstract: This study aimed to evaluate the development, productivity, flowering and fruiting of the seven genotypes grown passionfruit in São Manuel, SP. The experiment was conducted at the Experimental Farm of São Manuel Faculty of Agricultural Sciences, UNESP, located in the municipality of São Manuel - SP. The experiment was evaluated over the years 2011 to 2013, the design was randomized blocks with planting seven genotypes and four replications, and the useful portion consisting of two plants. The genotypes were: BRS Ouro Vermelho, BRS Sol do Cerrado, BRS Gigante Amarelo, FB 100, FB200, Roxinho do Kênia and Seleção Afruvec. In the first year we assessed the growth of the main stem of the genotypes of passion. In the second year, we evaluated the production, reproductive biology. In the third year, we assessed the second year of production, floral biology and fruit quality, in addition, became the pollination test. In the second year of cultivation of the plants was an increase in the number of fruits, the production and productivity of all plants, and this increase was 16.2 kg pl-1. The BRS Sol do Cerrado produced higher number of fruits per hectare, with 54.8 kg pl-1. The Roxinho do Kênia had the highest number of fruits statistically superior to the other. It was found that the Roxinho do Kênia showed early flowering compared to other genotypes, with flowering throughout the year, under the conditions of São Manuel-SP. / Doutor
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Detecção e estudo sobre o efeito da metanfetamina e do ecstasy no desenvolvimento de imaturos de três espécies de Chrysomya (Diptera: Calliphoridae) de importância forense /

Lima, Carolina Gonçalves Palanch de. January 2009 (has links)
Orientador: Patrícia Jacqueline Thyssen / Banca: Wesley Augusto Conde Godoy / Banca: Carolina Reigada / Resumo: A Entomologia Forense utiliza dados de desenvolvimento e aspectos ecológicos de insetos que se alimentam de corpos em decomposição com o objetivo de auxiliar a resolução de casos na área forense. Uma das principais aplicações, entre outras, é a estimativa do intervalo pós-morte (IPM) que pode ser baseada no ciclo biológico de uma dada espécie. Porém, a falta de informação ou conhecimento sobre as variáveis que interferem de forma direta ou indireta sobre a taxa de desenvolvimento de diferentes espécies pode gerar dados imprecisos em relação à idade do inseto e, consequentemente, ao IPM. Recentemente, devido ao aumento no número de óbitos relacionados ao abuso de drogas, análises toxicológicas têm sido direcionadas a insetos necrófagos, visando complementar informações acerca da causa da morte, assim como garantir maior acurácia ao cálculo do IPM, uma vez que certas substâncias ingeridas antes do óbito podem alterar a taxa de desenvolvimento de algumas espécies que se alimentam dos tecidos de cadáveres. Esse ramo mais recente da entomologia forense é conhecido como Entomotoxicologia. No presente estudo objetivou-se observar o efeito de diferentes concentrações de metanfetamina e ecstasy, derivados anfetamínicos que tiveram seu consumo aumentado nas últimas décadas no Brasil, na taxa de desenvolvimento de imaturos dos califorídeos Chrysomya albiceps (Wiedemann), Chrysomya megacephala (Fabricius) e Chrysomya putoria (Wiedemann), quando acrescidos em dieta artificial apropriada. A anfetamina, metabólito da metanfetamina, não afetou de forma significativa o desenvolvimento larval de C. megacephala, no entanto, aumentou o tempo de desenvolvimento de imaturos de C. putoria, em especial a fase de pupa. O MDMA, principal componente do ecstasy, não alterou a taxa de desenvolvimento larval de C. albiceps e C. putoria, mas acelerou consideravelmente... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Forensic Entomology uses data about development and ecology of insects that feed on corpses aiming to assist to solve forensic cases. One of its main aplication, among others, is to estimate the pos-mortem interval (PMI) that can be based on the life cycle of a specific species. However, the lack of information or knowledge about the variables that can change directly or indirectly the development rate of different species can lead to inaccurate data about the age of the insect and, consequently, the PMI. Recently, due to the increasing number of death related to drug abuse, toxicological analyses have been directed to necrophagous insects intending to provide complementary information about the cause of death, as well as to asure a more acurate estimate of PMI, once some substances ingested before death can modify the development rate of some species that feed on cadaver tissues. This new branch of Forensic Entomology is known as Entomotoxicology. The aim of the present study was to observe the effect of different concentrations of methamphetamine and ecstasy, two amphetamine-like drugs which abuse rose among Brazilians in the last decades, on the development rate of immature of Calliphoridae Chrysomya albiceps (Wiedemann), Chrysomya megacephala (Fabricius) and Chrysomya putoria (Wiedemann), when added to artificial diet proper for them to complete their development. Amphetamine, methamphetamine's metabolite, did not affect significantly the larval development of C. megacephala, although it increased the time of development of C. putoria maggots, specially the pupa stage. MDMA, the main compound of ecstasy, did not alter the larval development rate of C. albiceps nor C. putoria but it accelerated, considerably, the development rate of C. megacephala. Through immunohistochemical analyses it was tried to detect amphetamine in larvae of C. megacephala and C. putoria, but the results were... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre
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Dinâmica populacional de Zaprionus indianus Gupta 1970 (Diptera: Drosophilidae) e caracterização de alguns aspectos biológicos /

Matavelli, Cristiane. January 2014 (has links)
Orientador:'Claudio José Von Zuben / Banca: Daniela Rodrigues / Banca: Wesley Augusto Conde Godoy / Banca: Rosana Tidon / Banca: César Pagotto Stein / Resumo: Apesar de ter sido introduzida no Brasil em 1999, estudos envolvendo aspectos biológicos bem como a dinâmica populacional de Zaprionus indianus ainda são muito escassos. Este drosofilídeo, considerado praga em monoculturas de figo-roxo, possui uma grande capacidade de dispersão e de estabelecimento em diferentes ambientes. Este fato contribuiu de forma expressiva para sua rápida expansão em todas as regiões do país, atacando tanto frutos de ambientes naturais, quanto os presentes nestas monoculturas. Esses ataques têm causado grandes prejuízos à comercialização desta fruta, tanto no mercado nacional quanto de exportação, fazendo com que alguns produtores abandonem suas plantações. Diante desta problemática, os objetivos desse estudo foram: analisar a dinâmica populacional de Z. indianus em plantações de figo-roxo e caracterizar alguns aspectos biológicos que influenciam sua flutuação populacional. Para isso, foram realizadas coletas mensais de set/2010 a ago/2011 em plantações de figo-roxo localizadas na região de Valinhos (SP). Ademais, experimentos voltados à caracterização dos estágios imaturos de Z. indianus, como número de instares, processo de pupação e caracterização morfológica destes estágios foram conduzidos no laboratório de Entomologia I e no laboratório de Microscopia Eletrônica da UNESP/RC. Outros, voltados à caracterização de aspectos como sobrevivência, tempo de desenvolvimento, tamanho corporal do adulto, parâmetros nutricionais ótimos para desempenho larval e escolha da fêmea quanto a locais para oviposição foram realizados, via geometria nutricional, no laboratório "Development, Evolution and the Environment" - IGC/Portugal. A nutrição é um fator diretamente relacionado às características de vida dos drosofilídeos, podendo ser usada para se compreender a história de vida destes animais. No método utilizado, a condição nutricional de um animal é representada... / Abstract: Despite having been introduced in Brazil in 1999, studies involving biological aspects and population dynamics of Zaprionus indianus are still very scarce. This drosophilid, considered as a pest in fig-purple crops, has a great capacity of dispersal and establishment in different environments. This fact contributed significantly to its rapid expansion in all regions of the country, attacking fruits of natural environments and in monocultures. These attacks have caused major damage to both national and export markets, causing the fact that some producers have abandoned their plantations. Considering this problem, the objectives of this study were to analyze the population dynamics of Z. indianus in fig-purple crops and characterize some biological aspects that influence its population fluctuations. For this, the drosophilids were monthly collected from Sep/2010 until Aug/2011 in fig-purple crops in the region of Valinhos (SP). Furthermore, others experiments aimed at characterize the immature stages of Z. indianus were conducted, like number of instars, pupation process and morphological characterization of these stages by scanning electron microscopy. Others, involving the characterization of aspects such as survival, viability, development time, adult body size, nutritional parameters for optimal larval performance and female oviposition site choice were performed by nutritional geometry. The nutrition is a factor directly related to the life history of drosophilids. In this methodology, the nutritional status of an animal is represented as a point within a nutritional space with "n" dimensions. Depending on the intake of calories and macronutrients, the regulatory systems of this animal are able to alter its metabolism in order to achieve a balance, and the consequences of these adjustments can be viewed by changes in its biological characteristics, these being analyzed here. As in field work, the species Drosophila simulans revealed... / Doutor
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Análise de parâmetros psiconeuroimunológicos em longevos saudáveis

Oliveira, Ágatha Schommer de January 2014 (has links)
Made available in DSpace on 2014-08-01T02:01:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000460008-Texto+Completo-0.pdf: 656276 bytes, checksum: f353cd5be78400bf9c6ccd1015321021 (MD5) Previous issue date: 2014 / Healthy aging is characterized by the ability of the immune system in preserve some of their functions intact, avoiding the appearance of some age-related diseases and thus contributing to reaching longevity. Furthermore, healthy aging is associated to a better stress coping. Studies have demonstrated immunological changes occurred in old individuals, as well as the consequences of stress on aging. However, few studies have addressed such changes in very old subjects. Here, we analyzed emotional factors and the changes in the lymphocytes subpopulations involved on aging, and the role of these changes to reach longevity healthily. A group of twenty healthy very old subjects together with a group of healthy old individuals and a groups of healthy young adults were recruited in this study. Stress levels were assessed by Perceived Stress Scale (PSS), while depression levels were investigated by Beck Depression Inventories – II (BDI-II). Lymphocytes were isolated and assessed by flow cytometry. We observed some age-related changes in lymphocyte subpopulations. In particular, it was evidenced a similar CD4/CD8 ratio between very old subjects and young adults, with this rate being increased in old subjects. A significant increase in the percentage of Natural Killer cells (CD56+CD16+) was observed in the very old subjects, showing that the activity of these cells is well preserved in this group of subjects. Also, we noticed that very old subjects are less stressed, when compared to the other groups. Our data suggests that the combination between increasing and decreasing specific immune functions may generate a balance in the immune system, contributing to reach longevity healthily. / O envelhecimento bem sucedido é caracterizado pela habilidade do sistema imune em manter algumas de suas funções intactas, evitando, assim, o aparecimento de doenças relacionadas à idade, e, portanto, contribuindo para o alcance da longevidade. Além disso, o envelhecimento bem sucedido também está relacionado a uma melhor maneira de lidar com o estresse. Diversos estudos vêm demonstrando as alterações imunológicas ocorridas em indivíduos idosos, assim como as consequências do estresse para o envelhecimento. No entanto, poucos são os estudos que visam observar essas alterações em indivíduos longevos. Neste estudo, analisamos fatores psíquicos e alterações nos subtipos linfocitários envolvidos no envelhecimento e o papel destas alterações para o alcance da longevidade de maneira saudável. Vinte longevos (86-99 anos), 15 idosos (60-80 anos) e 13 jovens adultos saudáveis (20-50 anos) foram recrutados neste estudo. Os níveis de estresse foram avaliados pela Escala de Estresse Percebido (PSS), enquanto que os níveis de depressão foram investigados através do Inventário de Depressão Beck – II (BDI-II). As células mononucleares de sangue periférico foram isoladas e os subtipos linfocitários avaliados por citometria de fluxo. Dentre as populações avaliadas estão as células T CD4+, T CD8+, B CD19+ e células NK CD56+. Observamos diversas alterações idade dependente nos subtipos linfocitários. Em particular, foi evidenciada uma razão CD4/CD8 similar entre longevos e jovens, com um aumento desta razão ocorrendo em indivíduos idosos. Um aumento significativo na percentagem das células Natural Killers (CD56+CD16+) foi observado nos longevos, sugerindo que a atividade destas células está bem preservada nestes indivíduos. Além disso, foi visto que os longevos são menos estressados, quando comparados aos outros grupos. Concluindo, nossos resultados sugerem que a combinação entre o aumento e o decréscimo de funções imunes específicas pode gerar um balanço no sistema imune, contribuindo para que se alcance a longevidade de forma saudável.
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Análise comparativa das metodologias de hibridização reversa e sequenciamento direto para a genotipagem do vírus da hepatite C /

Levada, Patrícia Martinez. January 2009 (has links)
Orientador: Maria Inês M. C. Pardini / Banca: Giovanni Faria Silva / Banca: Isabel Maria Vicente Guedes de Carvalho Mello / Resumo: A identificação dos diferentes genótipos e subtipos do VHC tem sido útil para o entendimento da evolução da doença e da epidemiologia do vírus em relação a fatores de risco. Atualmente, os métodos de genotipagem assim como a região do genoma viral a ser utilizada constituem temas de discussão. O presente trabalho teve por objetivo comparar a metodologia de hibridização reversa (kit comercial INNO-LiPAÒ v1.0) ao seqüenciamento direto das regiões 5'UTR, NS5B e core do genoma do VHC. Foram utilizadas 92 amostras de plasma de pacientes do Ambulatório de Hepatites da Disciplina de Gastroenterologia Clínica da Faculdade de Medicina de Botucatu (UNESP). Dentre as 92 amostras constituintes deste trabalho, 64 foram selecionadas aleatoriamente e 28 foram escolhidas segundo a genotipagem prévia realizada com o kit INNO-LiPAÒ v.1.0. Dentre estas 28 amostras escolhidas, 10 foram genotipadas como 1a/1b, 2 como 2, 2 como 5, 7 apenas como 1 e 7 foram inconclusivas para a genotipagem com o kit comercial. A genotipagem por seqüenciamento direto foi efetuada seguindo as etapas de: extração do RNA viral, transcrição reversa, amplificação das regiões 5'UTR, NS5B e 5'UTR-core por Nested-PCR, reação de marcação fluorescente e eletroforese em aparelho automático ABI 377 (Applied Biosystems). Todas as amostras puderam ser amplificadas para a região 5'UTR e 62 para NS5B. Para as 30 amostras que não puderam ser amplificadas para NS5B foi realizada a amplificação da região 5'UTR-core que se mostrou eficiente na amplificação de 28 (93%) das amostras. A análise de seqüência permitiu uma maior precisão na classificação viral. O seqüenciamento direto foi eficaz na solução de 100% dos resultados inconclusivos pela metodologia de hibridização reversa. Assim como já reportado na literatura o kit comercial INNO-LiPAÒ v.1.0 produziu resultados errôneos com... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The HCV genotypes and subtypes identification has been useful to understand the disease evolution and viral epidemiological regarding risk factors. Recently, the genotyping methods and viral genomic region used in viral typing have been very discussed in scientific community. The goal of this study was to compare the reverse hybridization methodology and sequencing of the HCV genomic regions 5'UTR, NS5B and core. Ninety-two plasma sample with viral RNA detected from patients assisted in the Department of Internal Medicine - Gastroenterology Division, Botucatu Medical School, University of São Paulo State - UNESP were used in this study. From these 92 samples, 64 were randomly selected and 28 choose according genotyping result by reverse hybridization. The genotyping by reverse hybridization were performed with INNO-LiPAÒ v.1.0, according manufacturer's instructions. To genotyping by sequencing viral RNA isolated from plasma samples was used as a source for RT-PCR amplification and automatic sequencing in ABI 377 sequencer (Applied Biosystems). All samples were amplified to 5'UTR genomic region and 62 to NS5B. From 30 samples that showed insucess in NS5B amplification, 28 (93%) were amplified to 5'UTR-core region with efficiency. The genotyping by sequencing allowed more precision in viral classification. The sequencing showed efficient in the resolution of the 100% of cases inconclusive by reverse hybridization. The genotyping by INNOLiPA Ò v.1.0 showed wrong results in relation of viral subtyping, corroborating previous results of the scientific literature. The sequencing also demonstrated at least a change of viral genotype when compared with INNO-LiPAÒ v.1.0, result that could influence the therapeutic decision, turning questionable the INNO-LiPAÒ v.1.0 efficiency to determine the viral genotypes, too. / Mestre
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Efeitos da separação materna e do alcoolismo sobre a vesícula seminal e a galândula de coagulação de ratos UCh (bebedores voluntários de etanol a 10%) /

Marconsini, Fabiana. January 2009 (has links)
Resumo: Experiências adversas na infância estão associadas ao abuso de álcool e de outras drogas na adolescência e na vida adulta. Crianças e adolescentes maltratados manifestam distúrbios do sistema biológico de resposta ao estresse. A exposição crônica a fatores estressantes aumenta a atividade do eixo hipotálamo-hipófise-adrenal (HHA) e, concomitantemente, reduz a atividade do eixo hipotálamo-hipófise-gônada (HHG). Assim, sabe-se que estresses sociais e ambientais produzem os efeitos deletérios na função reprodutiva. No entanto, a maior parte dos trabalhos relacionando os efeitos deletérios do estresse sobre as funções reprodutivas masculinas está direcionada para a investigação de hormônios, raros são os relatos sobre aos efeitos do estresse sobre a vesícula seminal e glândula de coagulação. Pouco é conhecido sobre a complexa relação entre o estresse, o alcoolismo e as alterações dos genitais masculinos. Considerando as linhagens de ratos UCh, o conhecimento da alteração do eixo hipotálamo-hipófise-testículo e estresse durante a seleção das linhagens UCh, despertou-se interesse na investigação do estresse neonatal sobre a vesícula seminal e glândula de coagulação destas linhagens, já que as alterações morfofisiológicas sobre os sistemas genitais masculino e feminino foram confirmadas. Além do que, muitos fatores observados no alcoólico podem ser frutos do estresse vivido precocemente, os quais podem estar potencializados ou não no homem adulto. Dessa forma, o presente trabalho propõe investigar e avaliar se há interação entre a separação materna e o alcoolismo sobre a estrutura da vesícula seminal e glândula de coagulação de ratos machos UCh. Metodologia: avaliação hormonal das concentrações plasmáticas de testosterona e corticosterona, análise estrutural, morfométrica, da proliferação celular da vesícula seminal... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: In childhood, traumatic experiences are associated with alcohol and other drugs dependence in adolescence and adult life. Maltreated children and teenagers display biological disturb related in response to stress. Chronic exposure to stressfull factors increases the activity of the hypothalamic-hypophyseal-adrenal (HHA) axis and also reduces the activity of the hypothalamic-hypophyseal-gonaldal (HHG) axis. Thus, it is know that social and environmental stressing factors produce impairing effects on reprodutive functions. However, the most part of studies related to the harmful effects of stress on the seminal vesicle and coagulating gland are quite rare. Little is known about the complex association among stress, alcoholism and male genital alterations. Considering the UCh rat lineage, the knowledge on its hypothalamic-hypophyseal-testicular axis alterations and the stress during UCh strain selections, there was an interest in investigating the effects of neonatal stress on the seminal vesicle and coagulating gland of this lineage, since morphophysiological alterations in both male and female genital tracts have already been reported. Futhermore, many of the factors seen in alcoholism may be a result of early stress, which can be potentialized or not in the adult man. Therefore, the present work has the purpose to investigate and evaluate whether maternal separation and the alcoholism interposes on the seminal vesicle and coagulanting gland of the UCh rats. Methods: plasmatic testosterone and corticosterone levels evaluation, morphometric analysis of the cell proliferation, p63 protein and androgen receptor immunohistochemistry. Concluded that there is an interaction between the maternal separation and ethanol consumption on the seminal vesicle and coagulating gland, acting on the HHG and HHA axis, which might it be leading to large response of the reproduction / Orientador: Francisco Eduardo Martinez / Coorientador: Patrícia Fernanda Felipe Pinheiro / Banca: Célia Leme Bew / Banca: Wellerson Rodrigo Scarano / Mestre
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Caracterização molecular e biológica do Lettuce big-vein associated vírus e Mirafiori lettuce big-vein vírus e estudo da ocorrência em relação à época e sintoma em plantas de alface no Estado de São Paulo

Sanches, Márcio Martinello [UNESP] 31 January 2006 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:36Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-01-31Bitstream added on 2014-06-13T20:58:38Z : No. of bitstreams: 1 sanches_mm_me_botfca.pdf: 690574 bytes, checksum: 4794d7c23f85fb7d5e54fb4b30c47365 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Empresa Privada / Recentemente sintomas da doença conhecida como engrossamento das nervuras, ou big-vein, foram observados no Estado de São Paulo, principalmente no período de inverno. A doença foi historicamente associada ao Lettuce big-vein associated virus (LBVaV), porém a presença dos sintomas característicos foi atribuída ao Mirafiori lettuce big-vein virus (MLBVV). Tradicionamente ambos vírus vem sendo diagnosticados pelo teste de ELISA, de modo que resultados discrepantes quanto ao agente causal dos sintomas da doença foram obtidos na Europa, possivelmente devido à falta de sensibilidade do teste. Deste modo, o presente trabalho teve como finalidade utilizar a técnica de RT-PCR na detecção segura e específica do MLBVV e LBVaV. Foram coletadas 366 plantas sintomáticas nas regiões produtoras de Bauru, Campinas e Mogi das Cruzes no Estado de São Paulo nos meses de junho e setembro de 2004 e abril e julho de 2005, e 18 plantas assintomáticas na região de Mogi das Cruzes no mês de dezembro de 2004. Os oligonucleotídeos específicos foram altamente eficientes na detecção de ambos os vírus, sendo que a banda viral foi clonada e sequenciada para alguns dos isolados, comprovando a identidade viral de cada um dos vírus. Foi observado que 76,2% das plantas sintomáticas apresentaram infecção mista do LBVaV e MLBVV, em 11,5% somente o MLBVV e em 6,6% somente o LBVaV. Nas plantas assintomáticas foi detectada a presença de infecção mista por MLBVV e LBVaV em quatro amostras, infecção apenas por MLBVV em cinco amostras e apenas por LBVaV em três amostras, indicando que o desenvolvimento de sintomas depende de fatores abióticos, além da presenca dos vírus. A análise das sequencias de aminoácidos da região codificadora da proteína capsidial, revelou que os isolados de LBVaV possuem baixa variabilidade genética e mesma origem evolutiva entre isolados de diferentes partes do mundo... / Lettuce plants with big-vein symptons have been observed in the São Paulo State during the winter. The disease has been historically associated to Lettuce big-vein associated virus (LBVaV), however recently the development of symptoms was atributted to Mirafiori lettuce big-vein virus (MLBVV). Tradicionally both viruses were routinely detected by ELISA, but discrepants results about the main disease agent were obtained in the Europe possible by the low sensibility of the assay. The objective of this study was to detect MLBVV and LBVaV by RT-PCR, using specifics primers. A total of 366 samples from symptomatic plants of Bauru, Campinas and Mogi das Cruzes regions, from São Paulo State, were collected during june and september of 2004 and april and july of 2005, and 18 symptomless plants from the Mogi das Cruzes region during December 2004. The primers were highly efficient in the 4 detection of both viruses, and the fragment of some isolates were cloned and sequenced to confirm the RT-PCR. Mixed infection of LBVaV and MLBVV was observed on 76,2% symptomatic plants. MLBVV on 11,5% and LBVaV on 6,6%. In a total of 18 symptomless plants, four were infected with both viruses, five only with MLBVV and three plants with LBVaV. These results indicates that not only the presence of the viruses, but also abiotic factors are necessary for the occurrence of big-vein symptoms. Amino acid sequence identities of part of the coat protein gene of LBVaV isolates was high indicating a possible same evolutive origin. Genetic diversity among MLBVV isolates was higher when compared to LBVaV isolates. MLBVV brazilian isolates belongs to subgroup A, with one RsaI restriction site on the coat protein sequence. One plant with MLBVV and LBVaV (mixed infection) was sap inoculated on a host range (temperature and luminosity controled), indicating that MLBVV can be transmitted to Nicotiana tabacum TNN, N. rustica... (Complete abstract, click electronic address below).
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Caracterização molecular e biológica do Lettuce big-vein associated vírus e Mirafiori lettuce big-vein vírus e estudo da ocorrência em relação à época e sintoma em plantas de alface no Estado de São Paulo /

Sanches, Márcio Martinello, 1980- January 2006 (has links)
Orientador: Renate Krause Satake / Banca: Marcelo Agenor Pavan / Banca: Romulo Fujito Kobori / Resumo: Recentemente sintomas da doença conhecida como engrossamento das nervuras, ou big-vein, foram observados no Estado de São Paulo, principalmente no período de inverno. A doença foi historicamente associada ao Lettuce big-vein associated virus (LBVaV), porém a presença dos sintomas característicos foi atribuída ao Mirafiori lettuce big-vein virus (MLBVV). Tradicionamente ambos vírus vem sendo diagnosticados pelo teste de ELISA, de modo que resultados discrepantes quanto ao agente causal dos sintomas da doença foram obtidos na Europa, possivelmente devido à falta de sensibilidade do teste. Deste modo, o presente trabalho teve como finalidade utilizar a técnica de RT-PCR na detecção segura e específica do MLBVV e LBVaV. Foram coletadas 366 plantas sintomáticas nas regiões produtoras de Bauru, Campinas e Mogi das Cruzes no Estado de São Paulo nos meses de junho e setembro de 2004 e abril e julho de 2005, e 18 plantas assintomáticas na região de Mogi das Cruzes no mês de dezembro de 2004. Os oligonucleotídeos específicos foram altamente eficientes na detecção de ambos os vírus, sendo que a banda viral foi clonada e sequenciada para alguns dos isolados, comprovando a identidade viral de cada um dos vírus. Foi observado que 76,2% das plantas sintomáticas apresentaram infecção mista do LBVaV e MLBVV, em 11,5% somente o MLBVV e em 6,6% somente o LBVaV. Nas plantas assintomáticas foi detectada a presença de infecção mista por MLBVV e LBVaV em quatro amostras, infecção apenas por MLBVV em cinco amostras e apenas por LBVaV em três amostras, indicando que o desenvolvimento de sintomas depende de fatores abióticos, além da presenca dos vírus. A análise das sequencias de aminoácidos da região codificadora da proteína capsidial, revelou que os isolados de LBVaV possuem baixa variabilidade genética e mesma origem evolutiva entre isolados de diferentes partes do mundo... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Lettuce plants with big-vein symptons have been observed in the São Paulo State during the winter. The disease has been historically associated to Lettuce big-vein associated virus (LBVaV), however recently the development of symptoms was atributted to Mirafiori lettuce big-vein virus (MLBVV). Tradicionally both viruses were routinely detected by ELISA, but discrepants results about the main disease agent were obtained in the Europe possible by the low sensibility of the assay. The objective of this study was to detect MLBVV and LBVaV by RT-PCR, using specifics primers. A total of 366 samples from symptomatic plants of Bauru, Campinas and Mogi das Cruzes regions, from São Paulo State, were collected during june and september of 2004 and april and july of 2005, and 18 symptomless plants from the Mogi das Cruzes region during December 2004. The primers were highly efficient in the 4 detection of both viruses, and the fragment of some isolates were cloned and sequenced to confirm the RT-PCR. Mixed infection of LBVaV and MLBVV was observed on 76,2% symptomatic plants. MLBVV on 11,5% and LBVaV on 6,6%. In a total of 18 symptomless plants, four were infected with both viruses, five only with MLBVV and three plants with LBVaV. These results indicates that not only the presence of the viruses, but also abiotic factors are necessary for the occurrence of big-vein symptoms. Amino acid sequence identities of part of the coat protein gene of LBVaV isolates was high indicating a possible same evolutive origin. Genetic diversity among MLBVV isolates was higher when compared to LBVaV isolates. MLBVV brazilian isolates belongs to subgroup A, with one RsaI restriction site on the coat protein sequence. One plant with MLBVV and LBVaV (mixed infection) was sap inoculated on a host range (temperature and luminosity controled), indicating that MLBVV can be transmitted to Nicotiana tabacum TNN, N. rustica... (Complete abstract, click electronic address below). / Mestre

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