Orientador : Regina Celia Spadari / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-17T08:42:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Linardi_Marcio_M.pdf: 2161273 bytes, checksum: d6a2a16d3c6893996dfbc4bb0de81e4c (MD5) Previous issue date: 1992 / Resumo: O ¿stress¿ se reflete em estímulo nervoso e humoral, através da ativação do sistema nervoso simpático e do eixo hipotálamo-adrenal, que resulta em aumento dos níveis plasmáticos de catecolamina e de glicocorticóides. O exercício físico, por constituir um trabalho biológico, encontra-se intimamente relacionado ao fenômeno de ¿stress¿, determinando alterações anatômicas e fisiológicas na maioria dos sistemas do organismo. Entre estas, destacam-se a hipertrofia cardíaca, a bradicardia de repouso e as diminuições de sensibilidade aos efeitos cronotrópico e inotrópico as catecolaminas. Neste trabalho nós analisamos as variações de freqüência de batimentos espontâneos dos átrios direitos , a tensão desenvolvida pelos átrios esquerdos , as respostas cronotrópica e inotrópica ao ISSO e à NA de átrios direitos e esquerdos e a capacidade de reação ao ¿stress¿ do tecido cardíaco isolado de ratos submetidos a treinamento físico por natação. Os animais foram sacrificados após 10, 20, 30, 34, 35 , 40 ou 70 sessões diárias de natação, cinco dias por semana, num total de 14 semanas. Os ratos treinados apresentaram aumento da razão entre o peso do coração e o peso corporal, da ordem de 18,1 +/- 2% em relação aos grupos controles. O fenômeno da bradicardia de repouso não foi observado em nossos experimentos / Abstract: Not informed. / Mestrado / Fisiologia / Mestre em Ciências Biológicas

Orientador: Elenice Deffune / Banca: Sérgio Luis Felisbino / Banca: João Tadeu Ribeiro Paes / Resumo: Levando-se em consideração avanços tecnológicos na área médica e o impacto dos programas de saúde que determinaram curvas de longevidade cada vez maiores e taxas de natalidade cada vez menores, o novo desafio do gestor público são as conseqüências: o envelhecimento e a vida como uma "doença crônica". Entre os principais desafios está a abordagem das doenças crônico-degenerativas que determinam o aumento de lesões cartilaginosas articulares. A débil capacidade de regeneração e as limitações das alternativas de tratamento fazem as técnicas derivadas da biotecnologia, como o transplante autólogo de condrócitos (TAC) e o uso de células-tronco, o foco das investigações. O TAC requer coleta de material cartilaginoso de área sadia, podendo causar nova lesão; no entanto, pode-se evitar este perigo com o uso de células-tronco. As células-tronco mesenquimais, adultas, podem se diferenciar em condrócitos mediante o uso de meio de cultura específico em consonância a um arcabouço 3D, mas muitos problemas como evitar a calcificação e estimular a condrogênese em meio favorável constituem o desafio para os pesquisadores na atualidade. 1) produzir anticorpo monoclonal específico a CTMs de coelho para monitorá-las, 2) determinar o volume ideal de coleta de medula óssea para microencapsulação e condrogênese, 3) realizar a microencapsulação das CTMs em novos arcabouços: BIOGEL3D e BACTCELL3D, comparando seu desempenho com o modelo clássico em alginato. Foram utilizados 25 coelhos Nova Zelândia sendo divididos em diferentes grupos em função do volume de MO coletado: G1 = 6mL, G2 = 9mL, G3 = 12mL, G4 = 15mL e G5 = volume ideal de coleta determinado pelos indicadores dos outros grupos. O material coletado foi diluído 1:2 em RPMI 1640 com 3.000U de heparina sódica. Após a contagem celular, as amostras foram submetidas a separação em gradiente... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Technological advances in the medical area combined with the impact of health programs that enhance longevity, together with lower natality rates created new challenges to the public manager such as aging and life as a "chronic disease". Among the major problems are the chronic degenerative diseases that increase articular lesions. The limited regeneration capabilities and the limitations of actual treatment alternatives made biotechnology derived techniques the focus of investigations. The autologous chondrocyte transplantation (ACT) requires a small biopsy of health cartilage, which can lead to a new lesion. However, the use of stem cells can avoid this possibility. Mesenchymal stem cells (MSCs) can differentiate into chondrocytes by using a specific culture medium together with a 3D scaffold, but some questions such as the risks of calcification remain as key factors to researchers. 1) to produce a monoclonal antibody that recognizes MSCs in order to characterize them, 2) to determine the optimal bone marrow collection volume for cell microencapsulation and chondrogenesis and 3) to microencapsulate MSCs in two novel scaffolds: BIOGEL3D and BACTCELL3D, comparing them with sodium alginate. 25 New Zealand rabbits were divided into 5 groups related to bone marrow collection volume: G1 = 6mL, G2 = 9mL, G3 = 12mL, G4 = 15mL and G5 = optimal volume determined by the study. The collected material was diluted in RPMI1640 medium 1:2, with 3000U sodium heparin. After cell count and viability assessment the samples were submitted to density gradient centrifugation in order to isolate the lymphomononuclear (LMN) fraction. These cells were seeded to obtain and expand the MSCs in DMEM Knockout® (InvitrogenTM) supplemented with antibiotic/antimycotic, Lglutamine, essential aminoacids, non essential aminoacids and fetal bovine serum (all from InvitrogenTM). The cells were cultivated in 5% CO2 ...(Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Made available in DSpace on 2015-04-09T12:28:08Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-02-28Bitstream added on 2015-04-09T12:48:09Z : No. of bitstreams: 1 000814741_20160228.pdf: 112944 bytes, checksum: 9be232e5b0d5e262a61f2c56745d55ce (MD5) Bitstreams deleted on 2016-02-29T12:16:17Z: 000814741_20160228.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-02-29T12:17:20Z : No. of bitstreams: 1 000814741.pdf: 3226410 bytes, checksum: 8f37ec63c6f15fbaf65bc5404c0c68b3 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Apesar de ter sido introduzida no Brasil em 1999, estudos envolvendo aspectos biológicos bem como a dinâmica populacional de Zaprionus indianus ainda são muito escassos. Este drosofilídeo, considerado praga em monoculturas de figo-roxo, possui uma grande capacidade de dispersão e de estabelecimento em diferentes ambientes. Este fato contribuiu de forma expressiva para sua rápida expansão em todas as regiões do país, atacando tanto frutos de ambientes naturais, quanto os presentes nestas monoculturas. Esses ataques têm causado grandes prejuízos à comercialização desta fruta, tanto no mercado nacional quanto de exportação, fazendo com que alguns produtores abandonem suas plantações. Diante desta problemática, os objetivos desse estudo foram: analisar a dinâmica populacional de Z. indianus em plantações de figo-roxo e caracterizar alguns aspectos biológicos que influenciam sua flutuação populacional. Para isso, foram realizadas coletas mensais de set/2010 a ago/2011 em plantações de figo-roxo localizadas na região de Valinhos (SP). Ademais, experimentos voltados à caracterização dos estágios imaturos de Z. indianus, como número de instares, processo de pupação e caracterização morfológica destes estágios foram conduzidos no laboratório de Entomologia I e no laboratório de Microscopia Eletrônica da UNESP/RC. Outros, voltados à caracterização de aspectos como sobrevivência, tempo de desenvolvimento, tamanho corporal do adulto, parâmetros nutricionais ótimos para desempenho larval e escolha da fêmea quanto a locais para oviposição foram realizados, via geometria nutricional, no laboratório “Development, Evolution and the Environment” – IGC/Portugal. A nutrição é um fator diretamente relacionado às características de vida dos drosofilídeos, podendo ser usada para se compreender a história de vida destes animais. No método utilizado, a condição nutricional de um animal é representada... / Despite having been introduced in Brazil in 1999, studies involving biological aspects and population dynamics of Zaprionus indianus are still very scarce. This drosophilid, considered as a pest in fig-purple crops, has a great capacity of dispersal and establishment in different environments. This fact contributed significantly to its rapid expansion in all regions of the country, attacking fruits of natural environments and in monocultures. These attacks have caused major damage to both national and export markets, causing the fact that some producers have abandoned their plantations. Considering this problem, the objectives of this study were to analyze the population dynamics of Z. indianus in fig-purple crops and characterize some biological aspects that influence its population fluctuations. For this, the drosophilids were monthly collected from Sep/2010 until Aug/2011 in fig-purple crops in the region of Valinhos (SP). Furthermore, others experiments aimed at characterize the immature stages of Z. indianus were conducted, like number of instars, pupation process and morphological characterization of these stages by scanning electron microscopy. Others, involving the characterization of aspects such as survival, viability, development time, adult body size, nutritional parameters for optimal larval performance and female oviposition site choice were performed by nutritional geometry. The nutrition is a factor directly related to the life history of drosophilids. In this methodology, the nutritional status of an animal is represented as a point within a nutritional space with “n” dimensions. Depending on the intake of calories and macronutrients, the regulatory systems of this animal are able to alter its metabolism in order to achieve a balance, and the consequences of these adjustments can be viewed by changes in its biological characteristics, these being analyzed here. As in field work, the species Drosophila simulans revealed...

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:46Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-12-20Bitstream added on 2014-06-13T18:42:54Z : No. of bitstreams: 1 pedroso_ec_dr_jabo.pdf: 304491 bytes, checksum: bfd448beba5d92c9c2eaf24d085e6a78 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Orius insidiosus é uma espécie generalista, o que o torna apto à exploração do ecossistema. A traça-das-crucíferas, Plutella xylostella, é considerada a principal praga das brassicáceas podendo ocasionar destruição total. Este estudo visou obter informações sobre O. insidiosus para subsidiar o desenvolvimento de programas de controle biológico de P. xylostella em diferentes variedades de brassicáceas. Foram considerados os seguintes objetivos específicos: a) avaliar o desenvolvimento de O. insidiosus; b) confeccionar a tabela de vida de O. insidiosus alimentado com larvas de segundo ínstar de P. xylostella criadas em diferentes variedades de brassicáceas; c) obter a resposta funcional de O. insidiosus. As criações dos insetos (O. insidiosus e P. xylostella) e os experimentos foram desenvolvidos no Laboratório de Biologia e Criação de Insetos (LBCI) da FCAV/UNESP campus de Jaboticabal, sob temperatura de 25±1ºC, umidade relativa de 70±10% e fotofase de 12 horas. Foram mantidas criações de P. xylostella nas seguintes variedades: Brassica oleracea L. var. acephala (couve), var. itálica (brócolis), var. capitata (repolho) e var. botrytis (couve-flor). Oitenta ninfas de primeiro ínstar foram individualizadas em placas de Petri para o acompanhamento da fase ninfal. Os adultos foram separados por sexo, acasalados e mantidos em placas de Petri para a verificação das características reprodutivas e longevidade. Para os estudos de resposta funcional fêmeas foram deixadas sem alimentação por 12h e individualizadas em placas de Petri com larvas nas densidades de 2, 4, 8, 16 e 32 por placa, para cada variedade. A duração média da fase ninfal foi de 11,4; 13,9; 13,0 e 14,1 dias para brócolis, couve, couve-flor e repolho, respectivamente. A longevidade de O. insidiosus não diferiu entre as variedades. O período de pré-oviposição... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaix / Orius insidiosus is a generalist specie, which makes it suitable to explore the ecosystem. The diamondback moth, Plutella xylostella, is a major pest of Brassicaceae and can cause total destruction to the culture. This study aimed at obtaining information about O. insidiosus for use to develop biological control programs of P. xylostella in different varieties of Brassicaceae. We considered the following specific objectives: a) evaluate the development of O. insidiosus; b) to prepare a life table O. insidiosus fed on second instar larvae of P. xylostella reared on different cultivars of Brassicaceae; c) obtain the functional response of O. insidiosus. The rearing of insects (O. insidiosus e P. xylostella) and the experiments were developed in the Laboratory of Insect Biology and Rearing (LBCI), FCAV / UNESP Jaboticabal, under temperature 25 ± 1 ° C, relative humidity of 70 ± 10% and photophase of 12 hours. It was maintained rearing of P. xylostella in the varieties B. oleracea var. acephala (kale), var. italic (broccoli), var. capitata (cabbage) and var. botrytis (cauliflower). Eighty nymphs of first instar were individually placed in Petri dishes to the accompaniment of the nymphal stage. The adults were sexed, mated and kept in Petri dishes for the verification of reproductive traits and longevity. To study the functional response of females were left without feed for 12 hours and individualized in Petri dishes with caterpillars in the densities of 2, 4, 8, 16 and 32 per plate for each variety. The production of females (R0), generation time (T), intrinsic rate of increase (rm) and longevity of females were similar. O. insidiosus is able to grow and reproduce preying larvae of the diamondback moth in different cultivars of Brassicaceae. The average of the nymphal stage were 11.4, 13.9, 13.0 and 14.1 days for broccoli, cabbage, cauliflower and kale... (Complete abstract click electronic access belo

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:24Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-02-25Bitstream added on 2014-06-13T18:45:04Z : No. of bitstreams: 1 araujo_mjam_dr_botfm.pdf: 543081 bytes, checksum: 9a4eb9b648c8708962a81d32a5de52a3 (MD5) / Própolis é composta por substâncias resinosas, coletadas de várias plantas por abelhas africanizadas, adicionando pólen, cera e secreções glandulares, enquanto para a produção de geoprópolis (Geo) as abelhas sem ferrão utilizam materiais resinosos de plantas, cera, e ainda acrescentam terra ou barro. As atividades biológicas da própolis produzida por Apis mellifera têm sido extensivamente estudadas, mas ainda são escassos os trabalhos sobre as propriedades da geoprópolis. Assim, o presente trabalho se propôs a investigar as atividades citotóxica, imunomoduladora, antibacteriana e antifúngica do extrato hidroalcoólico de geoprópolis de Melipona fasciculata Smith. Foi realizada a caracterização química da Geo, verificando que o principal grupo de compostos encontrados foram triterpenos. No tocante às células do carcinoma da laringe humana (HEp-2), Geo apresentou ação inibitória em concentrações mais elevadas; entretanto, esta ação foi somente citostática. Geo apresentou ação imunomoduladora sobre monócitos humanos, estimulando a produção das citocinas estudadas (TNF-α e IL-10). Não foi observada ação antibacteriana contra S. aureus e E. coli, havendo inibição destas linhagens somente com altas concentrações do extrato. Contudo, a associação de Geo com antibióticos favoreceu a ação do cloranfenicol sobre S. aureus. A Geo exerceu ação inibitória sobre Pythium insidiosum, tanto para o isolado obtido de caso humano como de eqüinos. Os resultados sugerem que a Geo apresentou inúmeras propriedades biológicas; contudo, sua ação é menor em comparação à própolis produzida por abelhas africanizadas, talvez devido ao baixo rendimento do extrato e sua difícil solubilidade / Propolis is composed of resinous substances collected from various plants by Africanized honeybees, adding polen, wax and bee secretions, while for geopropolis (Geo) production stingless bees use resinous materials from plants, wax, but also adding mud or clay. The biological activities of propolis produced by Apis mellifera have been extensively studied, but there are few studies on Geo properties. Thus, the present study investigated the cytotoxic, immunomodulatory, antibacterial and antifungal activities of hydroalcoholic extract of Geo produced by Melipona fasciculata Smith. The chemical characterization of Geo was performed, revealing that the main group of compounds was triterpenes. Geo exerted an inhibitory action on human larynx carcinoma cells (HEp-2) using high concentrations, however, it was only a cytostatic action. Geo exhibited immunomodulatory effects on human monocytes, stimulating cytokines production (TNF-α and IL-10). No antibacterial activity was seen against S. aureus and E. coli. However, the combination of Geo with chloramphenicol favored its effect against S. aureus. Geo exerted an inhibitory action against Pythium insidiosum, both for human or equine isolates. Data suggested that Geo presented several properties; however, its activity is lower compared to propolis produced by honeybees, perhaps due to the low yield of the extract and its difficult solubility

Made available in DSpace on 2015-01-26T13:21:27Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-09-15Bitstream added on 2015-01-26T13:30:25Z : No. of bitstreams: 1 000806727.pdf: 1202485 bytes, checksum: c86fd7a64118fbbeacd18fbaa53e517f (MD5) / Este trabalho teve como objetivo avaliar o desenvolvimento, a produtividade, o florescimento e a frutificação de setes genótipos de maracujazeiro cultivados em São Manuel, SP. O experimento foi conduzido na Fazenda Experimental São Manuel, da Faculdade de Ciências Agronômicas da UNESP, localizada no município de São Manuel – SP. O experimento foi avaliado ao longo dos anos de 2011 a 2013, o delineamento foi em blocos casualizados, com plantio de sete genótipos e quatro repetições, sendo a parcela útil constituída de duas plantas. Os genótipos avaliados foram: BRS Ouro Vermelho, BRS Sol do Cerrado, BRS Gigante Amarelo, FB 100, FB 200, Roxinho do Kênia e Seleção Afruvec. No primeiro ano avaliou-se o crescimento da haste principal dos genótipos de maracujazeiro. No segundo ano, foi avaliada a produção, a biologia reprodutiva. No terceiro ano, avaliou-se o segundo ano de produção, a biologia floral e a qualidade dos frutos, além disso, fez-se o teste de polinização. No segundo ano de cultivo das plantas ocorreu um aumento no número de frutos, na produção e na produtividade de todas as plantas, e esse aumento foi de 16,2kg pl-1. O BRS Sol do Cerrado produziu a maior quantidade de frutos por hectare, com 54,8 kg pl-1. O Roxinho do Kênia obteve o maior número de frutos estatisticamente superior aos demais. Verificou-se que a Roxinho do Kênia apresentou precocidade de floração em relação ao outros genótipos, com florescimento durante o ano todo, nas condições de São Manuel-SP / This study aimed to evaluate the development, productivity, flowering and fruiting of the seven genotypes grown passionfruit in São Manuel, SP. The experiment was conducted at the Experimental Farm of São Manuel Faculty of Agricultural Sciences, UNESP, located in the municipality of São Manuel - SP. The experiment was evaluated over the years 2011 to 2013, the design was randomized blocks with planting seven genotypes and four replications, and the useful portion consisting of two plants. The genotypes were: BRS Ouro Vermelho, BRS Sol do Cerrado, BRS Gigante Amarelo, FB 100, FB200, Roxinho do Kênia and Seleção Afruvec. In the first year we assessed the growth of the main stem of the genotypes of passion. In the second year, we evaluated the production, reproductive biology. In the third year, we assessed the second year of production, floral biology and fruit quality, in addition, became the pollination test. In the second year of cultivation of the plants was an increase in the number of fruits, the production and productivity of all plants, and this increase was 16.2 kg pl-1. The BRS Sol do Cerrado produced higher number of fruits per hectare, with 54.8 kg pl-1. The Roxinho do Kênia had the highest number of fruits statistically superior to the other. It was found that the Roxinho do Kênia showed early flowering compared to other genotypes, with flowering throughout the year, under the conditions of São Manuel-SP.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:01Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-02-17Bitstream added on 2014-06-13T18:09:08Z : No. of bitstreams: 1 marconsini_f_me_botib.pdf: 330276 bytes, checksum: 4c8ef01035f29c6c208a8791410d1d6c (MD5) / Experiências adversas na infância estão associadas ao abuso de álcool e de outras drogas na adolescência e na vida adulta. Crianças e adolescentes maltratados manifestam distúrbios do sistema biológico de resposta ao estresse. A exposição crônica a fatores estressantes aumenta a atividade do eixo hipotálamo-hipófise-adrenal (HHA) e, concomitantemente, reduz a atividade do eixo hipotálamo-hipófise-gônada (HHG). Assim, sabe-se que estresses sociais e ambientais produzem os efeitos deletérios na função reprodutiva. No entanto, a maior parte dos trabalhos relacionando os efeitos deletérios do estresse sobre as funções reprodutivas masculinas está direcionada para a investigação de hormônios, raros são os relatos sobre aos efeitos do estresse sobre a vesícula seminal e glândula de coagulação. Pouco é conhecido sobre a complexa relação entre o estresse, o alcoolismo e as alterações dos genitais masculinos. Considerando as linhagens de ratos UCh, o conhecimento da alteração do eixo hipotálamo-hipófise-testículo e estresse durante a seleção das linhagens UCh, despertou-se interesse na investigação do estresse neonatal sobre a vesícula seminal e glândula de coagulação destas linhagens, já que as alterações morfofisiológicas sobre os sistemas genitais masculino e feminino foram confirmadas. Além do que, muitos fatores observados no alcoólico podem ser frutos do estresse vivido precocemente, os quais podem estar potencializados ou não no homem adulto. Dessa forma, o presente trabalho propõe investigar e avaliar se há interação entre a separação materna e o alcoolismo sobre a estrutura da vesícula seminal e glândula de coagulação de ratos machos UCh. Metodologia: avaliação hormonal das concentrações plasmáticas de testosterona e corticosterona, análise estrutural, morfométrica, da proliferação celular da vesícula seminal... / In childhood, traumatic experiences are associated with alcohol and other drugs dependence in adolescence and adult life. Maltreated children and teenagers display biological disturb related in response to stress. Chronic exposure to stressfull factors increases the activity of the hypothalamic-hypophyseal-adrenal (HHA) axis and also reduces the activity of the hypothalamic-hypophyseal-gonaldal (HHG) axis. Thus, it is know that social and environmental stressing factors produce impairing effects on reprodutive functions. However, the most part of studies related to the harmful effects of stress on the seminal vesicle and coagulating gland are quite rare. Little is known about the complex association among stress, alcoholism and male genital alterations. Considering the UCh rat lineage, the knowledge on its hypothalamic-hypophyseal-testicular axis alterations and the stress during UCh strain selections, there was an interest in investigating the effects of neonatal stress on the seminal vesicle and coagulating gland of this lineage, since morphophysiological alterations in both male and female genital tracts have already been reported. Futhermore, many of the factors seen in alcoholism may be a result of early stress, which can be potentialized or not in the adult man. Therefore, the present work has the purpose to investigate and evaluate whether maternal separation and the alcoholism interposes on the seminal vesicle and coagulanting gland of the UCh rats. Methods: plasmatic testosterone and corticosterone levels evaluation, morphometric analysis of the cell proliferation, p63 protein and androgen receptor immunohistochemistry. Concluded that there is an interaction between the maternal separation and ethanol consumption on the seminal vesicle and coagulating gland, acting on the HHG and HHA axis, which might it be leading to large response of the reproduction

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:01Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-02-18Bitstream added on 2014-06-13T18:50:10Z : No. of bitstreams: 1 levada_pm_me_botfm.pdf: 689725 bytes, checksum: c63e816ca9e037b70a0ce24e2abf22a3 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Empresa Privada / Secretaria do Estado da Saúde de São Paulo / A identificação dos diferentes genótipos e subtipos do VHC tem sido útil para o entendimento da evolução da doença e da epidemiologia do vírus em relação a fatores de risco. Atualmente, os métodos de genotipagem assim como a região do genoma viral a ser utilizada constituem temas de discussão. O presente trabalho teve por objetivo comparar a metodologia de hibridização reversa (kit comercial INNO-LiPAÒ v1.0) ao seqüenciamento direto das regiões 5´UTR, NS5B e core do genoma do VHC. Foram utilizadas 92 amostras de plasma de pacientes do Ambulatório de Hepatites da Disciplina de Gastroenterologia Clínica da Faculdade de Medicina de Botucatu (UNESP). Dentre as 92 amostras constituintes deste trabalho, 64 foram selecionadas aleatoriamente e 28 foram escolhidas segundo a genotipagem prévia realizada com o kit INNO-LiPAÒ v.1.0. Dentre estas 28 amostras escolhidas, 10 foram genotipadas como 1a/1b, 2 como 2, 2 como 5, 7 apenas como 1 e 7 foram inconclusivas para a genotipagem com o kit comercial. A genotipagem por seqüenciamento direto foi efetuada seguindo as etapas de: extração do RNA viral, transcrição reversa, amplificação das regiões 5´UTR, NS5B e 5´UTR-core por Nested-PCR, reação de marcação fluorescente e eletroforese em aparelho automático ABI 377 (Applied Biosystems). Todas as amostras puderam ser amplificadas para a região 5´UTR e 62 para NS5B. Para as 30 amostras que não puderam ser amplificadas para NS5B foi realizada a amplificação da região 5’UTR-core que se mostrou eficiente na amplificação de 28 (93%) das amostras. A análise de seqüência permitiu uma maior precisão na classificação viral. O seqüenciamento direto foi eficaz na solução de 100% dos resultados inconclusivos pela metodologia de hibridização reversa. Assim como já reportado na literatura o kit comercial INNO-LiPAÒ v.1.0 produziu resultados errôneos com... / The HCV genotypes and subtypes identification has been useful to understand the disease evolution and viral epidemiological regarding risk factors. Recently, the genotyping methods and viral genomic region used in viral typing have been very discussed in scientific community. The goal of this study was to compare the reverse hybridization methodology and sequencing of the HCV genomic regions 5´UTR, NS5B and core. Ninety-two plasma sample with viral RNA detected from patients assisted in the Department of Internal Medicine – Gastroenterology Division, Botucatu Medical School, University of São Paulo State - UNESP were used in this study. From these 92 samples, 64 were randomly selected and 28 choose according genotyping result by reverse hybridization. The genotyping by reverse hybridization were performed with INNO-LiPAÒ v.1.0, according manufacturer's instructions. To genotyping by sequencing viral RNA isolated from plasma samples was used as a source for RT-PCR amplification and automatic sequencing in ABI 377 sequencer (Applied Biosystems). All samples were amplified to 5’UTR genomic region and 62 to NS5B. From 30 samples that showed insucess in NS5B amplification, 28 (93%) were amplified to 5’UTR-core region with efficiency. The genotyping by sequencing allowed more precision in viral classification. The sequencing showed efficient in the resolution of the 100% of cases inconclusive by reverse hybridization. The genotyping by INNOLiPA Ò v.1.0 showed wrong results in relation of viral subtyping, corroborating previous results of the scientific literature. The sequencing also demonstrated at least a change of viral genotype when compared with INNO-LiPAÒ v.1.0, result that could influence the therapeutic decision, turning questionable the INNO-LiPAÒ v.1.0 efficiency to determine the viral genotypes, too.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:24:45Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-02-19Bitstream added on 2014-06-13T20:52:31Z : No. of bitstreams: 1 moroz_a_me_botfm.pdf: 608341 bytes, checksum: 715f3ed5332daf7487462c8fa4111838 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Levando-se em consideração avanços tecnológicos na área médica e o impacto dos programas de saúde que determinaram curvas de longevidade cada vez maiores e taxas de natalidade cada vez menores, o novo desafio do gestor público são as conseqüências: o envelhecimento e a vida como uma “doença crônica”. Entre os principais desafios está a abordagem das doenças crônico-degenerativas que determinam o aumento de lesões cartilaginosas articulares. A débil capacidade de regeneração e as limitações das alternativas de tratamento fazem as técnicas derivadas da biotecnologia, como o transplante autólogo de condrócitos (TAC) e o uso de células-tronco, o foco das investigações. O TAC requer coleta de material cartilaginoso de área sadia, podendo causar nova lesão; no entanto, pode-se evitar este perigo com o uso de células-tronco. As células-tronco mesenquimais, adultas, podem se diferenciar em condrócitos mediante o uso de meio de cultura específico em consonância a um arcabouço 3D, mas muitos problemas como evitar a calcificação e estimular a condrogênese em meio favorável constituem o desafio para os pesquisadores na atualidade. 1) produzir anticorpo monoclonal específico a CTMs de coelho para monitorá-las, 2) determinar o volume ideal de coleta de medula óssea para microencapsulação e condrogênese, 3) realizar a microencapsulação das CTMs em novos arcabouços: BIOGEL3D e BACTCELL3D, comparando seu desempenho com o modelo clássico em alginato. Foram utilizados 25 coelhos Nova Zelândia sendo divididos em diferentes grupos em função do volume de MO coletado: G1 = 6mL, G2 = 9mL, G3 = 12mL, G4 = 15mL e G5 = volume ideal de coleta determinado pelos indicadores dos outros grupos. O material coletado foi diluído 1:2 em RPMI 1640 com 3.000U de heparina sódica. Após a contagem celular, as amostras foram submetidas a separação em gradiente... / Technological advances in the medical area combined with the impact of health programs that enhance longevity, together with lower natality rates created new challenges to the public manager such as aging and life as a “chronic disease”. Among the major problems are the chronic degenerative diseases that increase articular lesions. The limited regeneration capabilities and the limitations of actual treatment alternatives made biotechnology derived techniques the focus of investigations. The autologous chondrocyte transplantation (ACT) requires a small biopsy of health cartilage, which can lead to a new lesion. However, the use of stem cells can avoid this possibility. Mesenchymal stem cells (MSCs) can differentiate into chondrocytes by using a specific culture medium together with a 3D scaffold, but some questions such as the risks of calcification remain as key factors to researchers. 1) to produce a monoclonal antibody that recognizes MSCs in order to characterize them, 2) to determine the optimal bone marrow collection volume for cell microencapsulation and chondrogenesis and 3) to microencapsulate MSCs in two novel scaffolds: BIOGEL3D and BACTCELL3D, comparing them with sodium alginate. 25 New Zealand rabbits were divided into 5 groups related to bone marrow collection volume: G1 = 6mL, G2 = 9mL, G3 = 12mL, G4 = 15mL and G5 = optimal volume determined by the study. The collected material was diluted in RPMI1640 medium 1:2, with 3000U sodium heparin. After cell count and viability assessment the samples were submitted to density gradient centrifugation in order to isolate the lymphomononuclear (LMN) fraction. These cells were seeded to obtain and expand the MSCs in DMEM Knockout® (InvitrogenTM) supplemented with antibiotic/antimycotic, Lglutamine, essential aminoacids, non essential aminoacids and fetal bovine serum (all from InvitrogenTM). The cells were cultivated in 5% CO2 ...(Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2015-12-18T01:04:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000476732-Texto+Completo-0.pdf: 4491937 bytes, checksum: 66c81650cd846fce81680ee4557d5e93 (MD5) Previous issue date: 2015 / The growth of elder population is a global occurrence and is followed by an increased prevalence and incidence of dementia, especially Alzheimer disease (AD). As the disease progresses, there is a larger demand for special care, task mainly performed by their family, who mostly are also elderly spouses of the patients. These caregivers are being constantly afflicted by chronic stress, which in turn can become harmful to their health in a number of disorders, such as cognitive impairment. Current literature highlights: (I) Relation between chronic stress, aging and cognitive impairment; (II) Relation between chronic stress and changes on hormone levels, such as cortisol and dehydroepiandrosterone (DHEA), and neurotrophic factors, i. e. Brain-Derived Neurotrophic Factor (BDNF); (III) BDNF, DHEA and cortisol potentially modulate cognitive-related mechanisms. In the present study, the evidences were assessed conjointly to better characterize physiological and pathological mechanisms involved in the association between chronic stress, aging and cognitive deficits. Chronic stress effects on frontal and temporal lobes-dependent cognitive functions were investigated in familial caregivers of AD patients (n=17; 32 to 84 years old). The impact of chronic stress on cortisol, DHEA and BDNF levels was also assessed, and the relation of these physiological features on cognitive performance. Initial findings point that chronic stress is capable of impairing attention, executive functions and declarative memory, also increasing cortisol/DHEA ratio and reducing serum BDNF levels. Then, we assessed age effects on the relation of chronic stress, cognition; cortisol, DHEA, and BDNF, as older caregivers are, theoretically, more prone to chronic stress effects than its younger counterparts are. Our results supports this hypothesis, indicating that hormone and cognitive changes are of greater importance on older caregivers when compared with young caregivers. However, middle-aged caregivers also presented a significant cognitive impairment and more suceptibility to chronic stress effects on BDNF levels than older caregivers. The results presented in this thesis highlights that chronic stress-related cognitive alterations are resulting from, at least partly, cortisol, DHEA and BDNF level changes. However, the rate in which these cognitive features are affected, and its relation with the assessed hormones and neurotrophin are dependent on the caregivers’ age. / O crescimento da população idosa é um fenômeno mundial e vem acompanhado do aumento da incidência e prevalência de demências, principalmente a Doença de Alzheimer (DA). À medida que a DA progride cresce a demanda por cuidados especiais, tarefa desempenhada em grande parte por cuidadores familiares, os quais muitas vezes são os cônjuges dos pacientes, ou seja, também são idosos. Estes cuidadores sofrem constantemente de estresse crônico, o qual é capaz de promover prejuízos à saúde num amplo espectro de disfunções, entre as quais as alterações cognitivas. A literatura evidencia: (I) relações entre estresse crônico, envelhecimento e alterações cognitivas; (II) relações entre estresse crônico e alteração dos níveis de hormônios, como o cortisol e a dehidroepiandrosterona (DHEA), e neurotrofinas, como o fator neurotrófico derivado de cérebro (BDNF); (III) o potencial do cortisol, DHEA e BDNF modularem mecanismos subjacentes a processos cognitivos. No presente trabalho estas evidências foram avaliadas de forma conjunta, de maneira a auxiliar na caracterização dos mecanismos fisiopatológicos envolvidos na associação entre estresse crônico, envelhecimento e déficits cognitivos. Os efeitos do estresse crônico sobre as funções cognitivas dependentes dos lobos frontais e temporais foram investigadas em cuidadores familiares de pacientes com DA (n= 17; 32 a 84 anos de idade). Foi analisado também o impacto do estresse crônico nos níveis de Cortisol, DHEA e BDNF, bem como a relação destes parâmetros fisiológicos com o desempenho em testes neuropsicológicos. Os achados iniciais indicaram que o estresse crônico é capaz de prejudicar o desempenho em tarefas que avaliam atenção, funções executivas e a memória declarativa bem como elevar a razão cortisol/DHEA e diminuir os níveis séricos de BDNF. Em um segundo momento, analisamos o efeito da idade sobre a relação entre estresse crônico, cognição e níveis de cortisol, DHEA e BDNF, uma vez que cuidadores idosos teoricamente seriam mais suscetíveis aos efeitos do estresse crônico que cuidadores de meia idade. Os resultados obtidos comprovaram esta hipótese, indicando alterações hormonais e cognitivas mais importantes nos cuidadores idosos do que nos mais jovens. Todavia, os cuidadores de meia-idade também apresentaram um prejuízo cognitivo importante e mostraram-se mais sensíveis aos efeitos do estresse crônico sobre os níveis de BDNF do que os cuidadores idosos. Os resultados apresentados nesta tese indicam que as alterações cognitivas relacionadas ao estresse crônico são resultantes, pelo menos parcialmente, de alterações nos níveis de cortisol, DHEA e BDNF. Entretanto, o grau em que os aspectos cognitivos são afetados e sua relação com os hormônios e a neurotrofina avaliados dependem da faixa etária do cuidador.