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Precursores funcionalizantes de poros à base de alginato para obtenção de cerâmicas bioativas / Functionalizing precursors of pores based on alginate to obtain bioactive ceramicsVivian Cesarino 04 April 2016 (has links)
A complexidade de desenvolver novas tecnologias para aplicações em reconstituição óssea se deve à necessidade de combinar várias propriedades químicas e físicas para que o material proporcione o desempenho almejado. Particularmente, em aplicações que visam osteogênese, os enxertos sintéticos devem ser bioativos, possuir porosidade com volume, geometria e interconectividade de poros controlados, além de ter boas propriedades mecânicas, dentro de limites relativamente rígidos. Por essa razão, o recobrimento de materiais bioinertes com cerâmicas bioativas se tornou o foco da presente pesquisa. O objetivo desse estudo foi desenvolver um novo método de produção de enxertos cerâmicos com macroporosidade funcionalizada, onde a formação e o revestimento dos poros são realizados em uma única etapa. Foi realizado o estudo de recobrimento com vidro bioativo e fosfato de cálcio. Para isso, agentes porogênicos na forma de grânulos (de 600 μm a 2 mm de diâmetro) foram sintetizados pelo método da gelificação de uma solução aquosa de alginato de sódio gotejada em solução de nitrato de cálcio (0,5 M), com incorporação de outros elementos para a formação de biovidro ou fosfato de cálcio. Esses grânulos foram conglomerados a um vidro ou alumina em pó, formando um compósito, que foi tratado termicamente para sinterização e formação de poros. No caso da matriz vítrea, a sinterização ocorreu com cristalização simultânea e concorrente. As cerâmicas resultantes foram caracterizadas por microscopia óptica e eletrônica de varredura, sendo possível observar a formação de macroporos aproximadamente esféricos (de 600 μm a 2 mm de diâmetro) revestidos internamente por uma camada de material com possível composição bioativa. / A tough requirement in the manufacture of implants for medicine is to conciliate appropriate mechanical properties and the porosity necessary for bone ingrowth. It is further important to control the fraction, morphology, size, surface to volume ratio and interconnectivity of pores. The difficulty in matching these characteristics is a deterrent for practical applications. High strength materials coated with a bioactive layer can overcome this problem. Therefore, the aim of the present study was to develop a new method for production of implants with functionalized macro porosity on ceramic. The production of a porous glass-ceramic and the internal coating of the pores with a bioactive material were performed in situ. The bioactive glass coating and calcium phosphate coating were studied. In order to achieve this goal, a porogenic agent in the form of beads (from 600 μm to 2 mm diameter) were prepared by the gelation of a water solution of sodium alginate into calcium nitrate solution (0.5 M), and incorporation of other components to yield the Bioglass composition or a calcium phosphate. The beads were further mixed with glass or ceramic powder and the assembly was heat treated for sintering. In the case of glass, the sintering occurred with concurrent crystallization. The obtained ceramics were characterized by optical and scanning electronic microscopy, which indicated that the porogenic beads acted successfully as a sacrificial template to produce functionalized macro pores.
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Isolamento, identificação fenogenotípica e potencial bioativo de microrganismos endofíticos intrinsecamnete associados à Miconia albicans no Cerrado de São Carlos - SPPiza, Ana Candida Martins Toledo 03 September 2009 (has links)
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Previous issue date: 2009-09-03 / Universidade Federal de Sao Carlos / Endophytic microorganisms lives in symbiotic association with plants and in one unique biological niche, and they are potential producers of natural bioactive substances with different chemical structure and biological activity. This study aimed to isolate and characterize endophytic microorganisms from Miconia albicans from Cerrado of São Carlos - SP. Samples were characterized phenotypically from typical features of colony morphology and macroscopic measurements, physiological, biochemical and morphodyeing and genotypically by 16S rRNA analysis. We evaluated the antagonistic potential of the isolates against Staphylococcus aureus ATCC 25923, Escherichia coli ATCC 25922, Serratia marcensis IAL 1475, Enterococcus faecalis ATCC 29212, Shigella sonnei ATCC 10231 and Candida albicans ATCC 10231. Two samples (1 and 3) showed bioactivity against E. faecalis, with inhibition halos of 1.30 and 1.90 cm in diameter, respectively. A single sample (2) showed activity against S. marcensis (3.60 cm) with no significant bioactivity against the other microorganisms tested. In one sample (4) showed activity against four of the six microorganisms tested: E. faecalis (3,15 cm) , S. aureus (3,50 cm), C. albicans (3,35 cm) e S. sonnei (3,20 cm). In another sample (6) was detected bioactivity against E. faecalis and S. aureus, with inhibition zones of 1.80 and 1.50 cm, respectively. One of the samples (8) showed bioactivity against the greatest number of indicator microorganisms with inhibitory halos of 2.60 cm against E. faecalis, 1.50 cm against S. aureus, 2.40 cm against C. albicans, 2.10 cm against E. coli and 2.50 cm against S. sonnei. In two samples (5 and 7) there was no evidence the bioactive ability against indicator microorganisms tested. Phenotypic analysis of 8 endophytic microorganisms isolated allowed us to classify 50% of these (samples 4, 6, 7 and 8) in the Actinomyces group and the others were classified in the genus Streptomyces (samples 1, 2, 3 and 5). In the genotypic analysis of two isolates with bioactivity were identified as Nocardiopsis Dassonville (sample 3) and Amycolatopsis orientalis (sample 8), reporting for the first time his association with endophytic aerial parts of Miconia albicans from Cerrado of São Carlos, SP. / Microrganismos endofíticos vivem em associação simbiótica com plantas e habitam nichos biológicos únicos, além de serem potenciais produtores de substâncias naturais bioativas com estrutura química e atividade biológica diversas. Este trabalho objetivou isolar e caracterizar microrganismos endofíticos a partir de Miconia albicans do Cerrado de São Carlos SP. Amostras foram caracterizadas fenotipicamente a partir de tipicidade de morfologia colonial e determinações macroscópicas, fisiológicas, bioquímicas e morfo-tintoriais e genotipicamente através de análises de RNAr 16S. Foi avaliado o potencial antagônico dos isolados contra Staphylococcus aureus ATCC 25923, Escherichia coli ATCC 25922, Serratia marcensis IAL 1475, Enterococcus faecalis ATCC 29212, Shigella sonnei ATCC 10231 e Candida albicans ATCC 10231. Duas amostras (1 e 3) apresentaram bioatividade contra E. faecalis, com halos de inibição de 1,30 e 1,90 cm de diâmetro, respectivamente. Uma única amostra (2) apresentou atividade contra S. marcensis (3,60 cm), não apresentando bioatividade contra os demais microrganismos testados. Em uma amostra (4) observou-se atividade contra quatro dos seis microrganismos testados: E. faecalis (3,15 cm) , S. aureus (3,50 cm), C. albicans (3,35 cm) e S. sonnei (3,20 cm). Em outra amostra (6) detectou-se bioatividade contra E. faecalis e S. aureus, com halos de inibição de 1,80 e 1,50 cm, respectivamente. Uma das amostras (8) apresentou bioatividade contra o maior número de microrganismos indicadores, com halos inibitórios de 2,60 cm contra E. faecalis, 1,50 cm contra S. aureus, 2,40 cm contra C. albicans, 2,10 cm contra E. coli e 2,50 cm contra S. sonnei. Em duas amostras (5 e 7) não foi evidenciada habilidade bioativa contra os microrganismos indicadores testados. Análises fenotípicas dos 8 microrganismos endofíticos isolados permitiram classificar 50% destes (amostras 4, 6, 7 e 8) no grupo Actinomyces e os outros foram classificados no gênero Streptomyces (amostras 1, 2, 3 e 5). Na análise genotípica dois dos isolados apresentando bioatividade foram caracterizados como Nocardiopsis dassonvillei (amostra 3) e Amycolatopsis orientalis (amostra 8), relatando pela primeira vez sua associação endofitica com partes aéreas de Miconia albicans do Cerrado de São Carlos, SP.
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Scaffolds de óxido de titânio e biosilicato para aplicações médicas e odontológicas obtidos com o uso de partículas orgânicas / Titanium dioxide and biosilicate scaffolds prepared with organic particles for medical and dental applicationsFernandes, Mérilin Cristina dos Santos 30 January 2015 (has links)
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Previous issue date: 2015-01-30 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Scaffolds are an alternative to natural grafts to help bone regeneration in
large bone defects. Regardless of the material chosen for its manufacture,
scaffold should have a suitable dimensional microenvironment to promote
osteogenesis and an appropriate mechanical stability for the defect site.
Titanium dioxide (TiO2) is a highly biocompatible ceramic with good
osteoconductive properties and high reliability mechanical; biosilicate has
excellent bioactivity level. Thus, in order to fabricate scaffolds allying positive
mechanical strength and bioactivity characteristics necessary to a good product,
biosilicate was pioneered combined with TiO2. Among the techniques available
for scaffolds production, the sacrificial template method, in which porosity is
generated by thermal elimination of organic materials added to the ceramic
matrix, has a low cost, simplicity and versatility. Different sacrificial agents were
tested and the presentation of sawdust as a promising material in scaffolds
manufacture proved to be innovative and satisfactory. Microstructural analyzes
showed that controlled addition of wood sawdust amounts generated a
homogeneous and highly interconnected pore structure with 63% apparent
porosity and an average pore size higher than 200 μm. Bioactivity tests in SBF
showed that after 4 days of immersion has already observed starting
precipitation of hydroxycarbonate apatite in products with biosilicate, and after
12 days of immersion the scaffold was fully covered by this mineral. Mechanical
tests allowed evaluating the scaffolds behavior when they are requested by
tensile efforts, and revealed for samples with maximum porosity obtained,
higher values of strength for samples containing biosilicate. The produced
scaffolds had success in the pore structure obtained by sacrificial template
method being biosilicato addition guaranteed improvements in bioactivity and
mechanical strength. / Os scaffolds são uma alternativa aos enxertos naturais para auxiliar a
regeneração do osso em grandes defeitos ósseos. Independente do material
escolhido para sua fabricação, o scaffold deve possuir um microambiente
tridimensional apropriado para promover osteogênese e uma estabilidade
mecânica adequada para o local do defeito. O óxido de titânio (TiO2) é uma
cerâmica altamente biocompatível com boas propriedades osseocondutoras e
elevada confiabilidade mecânica; o biosilicato apresenta excelente nível de
bioatividade. Desta forma, visando fabricar scaffolds que aliassem
características positivas de resistência mecânica e bioatividade necessárias
para um bom produto, biosilicato foi pioneiramente combinado com TiO2.
Dentre as técnicas disponíveis para a fabricação de scaffolds optou-se pelo uso
do método do sacrifício, que apresenta baixo custo, simplicidade e
versatilidade, sendo a porosidade gerada pela eliminação térmica de materiais
orgânicos adicionados à matriz cerâmica. Diversos agentes formadores de
poros foram testados, e a apresentação da serragem de madeira como um
material promissor na fabricação de scaffolds mostrou-se inovadora e
satisfatória. Análises microestruturais mostraram que a adição de quantidades
controladas de serragem de madeira gerou estruturas de poros homogêneas e
altamente interconectadas com até 63% de porosidade aparente e tamanho
médio de poros maior que 200 μm. Testes de bioatividade em SBF revelaram
que após 4 dias de imersão já era observado o início da precipitação de
hidroxiapatita carbonatada nos produtos com biosilicato, sendo que após 12
dias, o scaffold estava totalmente coberto por este mineral. A realização de
testes mecânicos permitiu avaliar o comportamento dos scaffolds quando
solicitados por tração e revelaram, para amostras com o máximo de porosidade
obtida, valores mais altos de resistência mecânica para aquelas que continham
biosilicato. Os scaffolds produzidos tiveram sucesso na estrutura de poros
obtida pelo uso do método do sacrifício, sendo que a adição de biosilicato
garantiu melhoras na bioatividade e na resistência mecânica.
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Avaliação da bioatividade de revestimentos produzidos sobre Tântalo por oxidação eletrolítica assistida por plasma / Bioactivity evaluation of coatings produced on Tantalum by plasma electrolytic oxidationAntonio, Rosana Fernandes [UNESP] 28 April 2016 (has links)
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Previous issue date: 2016-04-28 / O tântalo vem se destacando entre os biomateriais metálicos devido a propriedades como baixa reatividade química, ótima duc¬tibilidade, elevada resistência à corrosão e ótima bioatividade. Neste trabalho foi utilizada a técnica de oxidação eletrolítica assistida por plasma (PEO- do ingês, Plasma Electrolytic Oxidation) em substrato de tântalo, utilizando-se como eletrólito uma solução de acetato de cálcio e glicerofosfato dissódio, com a finalidade de se crescer um revestimento de hidroxiapatita sobre a superfície metálica. No processo PEO empregou-se pulsos de tensão contínua com frequência de 100 Hz e foram avaliados os efeitos da variação da diferença de potencial aplicada entre os eletrodos, que foi variada de 350 a 500 V, e do tempo de tratamento, que variou de 60 a 600 s. Para análises da composição química e estrutural dos revestimentos foram utilizadas espectroscopias de reflexão/absorção no infravermelho (IRRAS) e de energia dispersiva de raios X (EDS) e difração de raios X (XRD), enquanto que a morfologia da superfície foi avaliada por microscopia eletrônica de varredura (MEV). Empregando-se a técnica de perfilometria determinou-se a rugosidade das superfícies tratadas. A bioatividade dos revestimentos foi avaliada a partir de ensaios de adesão e crescimento de células osteoblásticas. Os melhores resultados foram obtidos com amostras tratadas em 500V com um tempo mínimo de 300 s. Nestas condições foi possível a formação de um revestimento de hidroxiapatita cristalina, confirmada por XRD. Os espectros obtidos com IRRAS também confirmaram a presença de espécies químicas responsáveis pela formação de hidroxiapatita como fosfatos (PO43-), hidroxilas (OH-) e carbonatos (CO3-2). As amostras tratadas apresentaram bioatividade e viabilidade celular maiores que as observadas com o tântalo como recebido, devido às estruturas cristalinas de hidroxiapatita juntamente com a elevada rugosidade superficial obtida com o tratamento. A energia térmica gerada nas amostras durante o tratamento foi um fator determinante para se explicar a formação da hidroxiapatita. / Tantalum is becoming increasingly important amongst metallic biomaterials due to its special properties such as low reactivity, excellent ductility, high resistance to corrosion as well as high bioactivities. In this work Plasma Electrolytic Oxidation technique PEO, was employed on Tantalum substrate using a calcium acetate and glycerophosphate sodium with the goal of generating a coating of hydroxyapatite on the metallic surface. In this PEO process, DC pulses of 100 Hz were used. The differential of potential between the electrodes in the range of 350 V to 500 V were applied that lasted from 60s to 600s and their *effects were evaluated. For chemical composition and structural analysis of coating, Infrared Reflection Absorption Spectroscopy (IRRAS) were employed together with energy dispersive X-ray spectroscopy (EDS) and diffraction of X-ray (XRD). The morphology of the surface was evaluated with Electronic Scanning Microscopy. With profilometry techniques the roughness of the treated surface was determined. The bioactivity of the coating was assessed by testing the adhesion and development of osteoblastic cells. The best results were obtained with samples undergoing a tension of 500 V lasting for a minimum of 300 s. Under these conditions it was possible to form hydroxyapatite crystal that was confirmed by DRX. The spectra obtained with IRRAS also confirmed the presence of chemical species responsible for the formation of hydroxyapatite such as phosphate groups (PO43-), hydroxyls (OH-) and carbonates (CO32-). The treated samples show greater cellular bioactivity and viability than those observed in raw tantalum due to the crystal structure of hydroxyapatite together with high surface roughness obtained as a result of the treatment. The thermal energy generated in samples during the treatment was a determining factor for explaining the formation of hydroxyapatite.
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Avalia??o da capacidade antioxidante do ?leo vegetal oriundo da extra??o de astaxantina a partir da farinha e do res?duo de camar?o (Litopenaeus Vannamei)Silva, Denise Maria de Lima e 12 December 2016 (has links)
Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2017-03-14T23:53:02Z
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Previous issue date: 2016-12-12 / A astaxantina ? encontrada naturalmente em res?duos de camar?o e pode ser extra?da de diversas formas, dentre elas tem-se a extra??o com ?leo vegetal, o qual contribui para a estabilidade, retardando a oxida??o. O ?leo de soja por sua vez apresenta como vantagens a excelente otimiza??o de extra??o e o baixo custo. Objetivou-se com esse estudo, avaliar as caracter?sticas f?sicas e f?sico-qu?micas e a capacidade antioxidante de ?leos vegetais pigmentados, oriundos da extra??o da astaxantina a partir do res?duo de camar?o (Litopenaeus vannamei). Os ?leos pigmentados do res?duo de camar?o (OR) e da farinha do res?duo de camar?o (OF) obtidos foram avaliados quanto ao teor de astaxantina, caracter?sticas f?sicas e f?sico-qu?micas e capacidade antioxidante. As amostras de OR e OF apresentaram um teor de astaxantina respectivamente de 70,9 e 264,7 ?g/g, sendo a desidrata??o a respons?vel por esse aumento de 3,7 vezes. Do mesmo modo, seu poder antioxidante est? diretamente associado com o teor de astaxantina. No teste da Capacidade de Absor??o de Radicais de Oxig?nio (ORAC), OR e OF exibiram uma atividade antioxidante de 0,4957 e 0,4840 ?mol eq trolox/g, respectivamente. Entretanto, algumas carater?sticas f?sicas e f?sico-qu?micas de OF apresentaram altera??es. Diante do exposto, os ?leos pigmentados oriundo dos res?duos de camar?o apresentam um significativo potencial para uso em alimentos como um antioxidante natural devido ao poder antioxidante, e ao baixo custo de obten??o. / Astaxanthin is found naturally in shrimp residues and can be extracted in varying ways. The extraction with vegetable oil contributes to stability from this carotenoid, retarding its oxidation. The advantages of the soybean oil are excellent extraction optimization and low cost.The objective of this study was to evaluate the physical and physical-chemical characteristics and the antioxidant capacity of the pigmented oils obtained from the extraction of astaxanthin from the shrimp waste (litopenaeus vannamei). The obtained pigmented oils of the shrimp waste (OW) and of the shrimp waste flour (OF) were evaluated for astaxanthin content, physical and physico-chemical characteristics and antioxidant capacity. The samples of OW and OF showed an astaxanthin content of 70.9 and 264.7 ?g / g, respectively, where the decrease in moisture was responsible for this increase of 3.7 times. Likewise, its antioxidant power is directly associated with the astaxanthin contente. In the Oxygen Radical Absorption Capacity (ORAC) test, OW and OF exhibited an antioxidant activity of 0.4957 and 0.4840 ?mol eq trolox / g, respectively. However, some physical and physico-chemical characteristics of OF presented changes. Therefore, the pigmented oils from shrimp waste present a significant potential for the use in food as a natural antioxidant due to its antioxidant power, as well as the low price to obtain it.
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Atividade biológica da seiva e de compostos extraídos da seiva de Hymenaea courbaril sobre leveduras e fungos filamentosos / Biological activity of the sap and compounds extracted from the sap of Hymenaea courbaril on yeast and filamentous fungiCosta, Maysa Paula da 08 March 2012 (has links)
Submitted by Cláudia Bueno (claudiamoura18@gmail.com) on 2015-11-11T19:43:11Z
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Previous issue date: 2012-03-08 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Secondary metabolites that have been discovered from the plant kingdom are major sources of innovative therapeutic agents for infectious diseases. Plants have been demonstrated to present important biological activities and are considered as potential clinical application when show compatibility with the human organism. Hymenaea courbaril Linnaeus var. stilbocarpa a tree known as jatoba, presents chemicals products obtained from their leaves, stem, fruit and seeds that are used in folk medicine. Antimicrobial and cytotoxic activity of this plant is little known. An initial screening was performed to evaluate the in vitro susceptibility to sap and compounds of H. courbaril against dermatophytes and Cryptococcus isolates. The sap and the compound fisetin were more active and thus they were used to determine the in vitro susceptibility against eighteen dermatophytes and twenty-six Cryptococcus isolates. The results of in vitro susceptibility assay showed antifungal activity of H. courbaril against all fungi studied. The sap of H. courbaril showed minimal inhibitory concentrations (MIC) ranging between 32-128 μg/mL for dermatophytes and 8-256 μg/mL for complex C. neoformans yeast. The compound of H. courbaril fisetin inhibited the growth of dermatophytes and of Cryptococcus in concentration of 4-128 μg/ml, and of 8 a 128 μg/ml, respectively. In vitro cytotoxicity assays of sap and compound were performed with fibroblast 3T3-A31 by using the technique of absorption of the dye neutral red. Cytotoxicity assays showed that sap and compound have an low toxicity on these cells. The sap and the compound showed IC50 values of 109 μg/mL of 158μg/mL, respectively. The results of this study are relevant and promising because they show that the “fisetin” present a good biological activity for fungi, and is a compound biocompatible with basal cells of mammals. Products with such concentrations of MIC and IC50 can be considered of great value for further pharmacological studies. / As plantas e seus metabólitos secundários são uma grande fonte de inovação de agentes terapêuticos para inúmeras enfermidades, incluindo doenças infecciosas. Plantas de uso popular apresentam atividade biológica em potencial, sendo que devem ser consideradas a importância da aplicação clínica e a compatibilidade com o organismo humano. Hymenaea courbaril Linnaeus var. stilbocarpa uma árvore conhecida como jatobá, possui produtos químicos obtidos de suas folhas, tronco, frutos e sementes que são usadas na medicina popular, no entanto atividade antifúngica e a citotoxicidade desta planta ainda é pouco conhecida. Uma triagem inicial foi realizada para avaliação da suscetibilidade in vitro com a seiva e compostos de H. courbaril sobre isolados de dermatófitos e Cryptococcus. A seiva e o composto fisetina apresentaram-se mais ativos e desta forma foram usados para determinar a suscetibilidade de dezoito isolados de dermatófitos e vinte e seis de Cryptococcus. A seiva de H. courbaril apresentou concentrações inibitórias mínima (CIMs) que variaram de 32 a 128 μg/mL para os dermatófitos e de 8 a 256 μg/mL para as leveduras do complexo C. neoformans. O composto fisetina foi capaz de inibir os dermatófitos em CIMs que variaram de 4 a 128μg/mL e as leveduras do complexo C. neoformans em CIMs que variaram de 8 a 128 μg/mL. A avaliação da citotoxicidade in vitro com fibroblastos 3T3-A31 foi realizada para a seiva e o composto fisetina usando a técnica de absorção do corante vermelho neutro. Por este método foi possível verificar que a seiva de H. courbaril apresentou um IC50 de 109 μg/mL e o composto de 158μg/mL Os resultados encontrados neste estudo são relevantes e promissores, pois mostram que esta planta apresenta uma boa atividade biológica para fungos, além de possuir um composto isolado biocompatível com celulas basais de mamíferos. Produtos com tais concentrações de CIM e IC50 podem ser considerados de grande valor para posteriores estudos farmacológicos.
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Estaurosporinas de Eudistoma vannamei: QuÃmica e Bioatividade / Staurosporines from Eudistoma vannamei: Chemistry and Bioactivity.Paula Christine Jimenez 15 July 2009 (has links)
Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / Eudistoma vannamei (Millar, 1977) à uma ascÃdia endÃmica do litoral do Nordeste brasileiro, largamente encontrado nas praias rochosas do estado do CearÃ. Previamente, o extrato bruto apresentou um interessante perfil em termos de bioatividade. O fracionamento bioguiado identificou uma mistura 1:1 altamente citotÃxica, contendo dois derivados inÃditos de estaurosporina, 2-hidroxi-7-oxoestaurosporina (I) e 3-hidroxi-7-oxoestaurosporina (II). IC50 para I/II e estaurosporina (STP) foram obtidas apÃs 72h de incubaÃÃo com diversas linhagens de cÃlulas tumorais, utilizando-se o ensaio do MTT, e em linfÃcitos humanos normais, atravÃs do ensaio de AlamarBlue. I/II superou a citotoxicidade de STP em 7 vezes, em mÃdia, para as cÃlulas tumorais, ao passo que mostrou-se tÃo ativa quanto frente Ãs cÃlulas normais. Uma anÃlise cinÃtica sobre a progressÃo de ciclo celular, ativaÃÃo de resposta a dano e vias de reparo de DNA, e induÃÃo de apoptose de cÃlulas HL-60 (leucemia) foi conduzida com 40 ou 80ng/mL I/II e acessada por citometria de fluxo e western blotting. Estudos de ciclo celular indicaram que I/II (40ng/mL) induz bloqueio de ciclo celular em G2/M e que este efeito prossegue irreversÃvel mediante a remoÃÃo do estÃmulo. STP (200ng/mL) induziu o bloqueio quase que completo em G2/M apÃs 24h de incubaÃÃo, enquanto perÃodos mais longos de incubaÃÃo provocam um aumento substancial de cÃlulas poliplÃides. A expressÃo de proteÃnas envolvidas no controle do ciclo celular (Cdk1, Cdk2, ciclina A e ciclina B1), associada à observaÃÃo morfolÃgica de cÃlulas tratadas com 40ng/mL I/II e coradas com H/E em lÃminas de vidro sugere que o bloqueio està ocorrendo, de fato, na fase G2. O bloqueio em G2 foi parcamente observado em cÃlulas tratadas com 80ng/mL I/II, conquanto caracterÃsticas apoptÃticas fizeram-se deveras evidentes. A avaliaÃÃo de dano à fita dupla de DNA atravÃs do teste do cometa neutro indica a induÃÃo apenas de baixo nÃvel de dano de DNA em cÃlulas tratadas com 40ng/mL I/II por 24, 48 ou 72h. Entretanto, cÃlulas tratadas com 80ng/mL I/II exibiram nÃveis mais elevados de dano. A expressÃo de proteÃnas relacionadas a dano de DNA (ATM e H2A.X) deu-se numa forma tempo- e concentraÃÃo-dependente, enquanto o bloqueio de ciclo e os marcadores de reparo (Chk1, Cdc25C, BRCA1) foram ativados, predominantemente, em cÃlulas tratadas com 40ng/mL I/II. Inversamente, a externalizaÃÃo de PS e a ativaÃÃo das caspases efetoras 3 e 7 e de PARP mostraram-se altamente expressos em cÃlulas tratadas com 80ng/mL I/II mostrou um claro efeito citostÃtico em cÃlulas HL-60 na menor concentraÃÃo testada, evidenciado pelo persistente bloqueio de ciclo celular e baixo dano em DNA; e um objetivo efeito citotÃxico na concentraÃÃo maior, motivado pelo extensivo dano em DNA e induÃÃo de apoptose. / Eudistoma vannamei Millar, 1977 is an endemic tunicate from the northeastern Brazilian coast, widely distributed over the rocky beaches of Cearà State. Previously, the crude extract showed an interesting bioactivity profile. Bioassay-guided fractionation yielded a highly cytotoxic 1:1 mixture identified as two novel staurosporine derivatives, 2-hydroxy-7-oxostaurosporine (I) and 3-hydroxy-7-oxostaurosporine (II). IC50 for I/II and staurosporine (STP) were obtained after 72h incubation with various tumor cell lines using the MTT assay and in normal human lymphocytes, by the AlamarBlue assay, where I/II outperformed STP in a 7-fold average. On normal cells, I/II showed to be equally effective as STP and, thus, showed a 25-fold average selectivity towards tumor cells. A kinetic analysis on cell cycle progression, activation of DNA damage and repair pathways and apoptosis induction of HL-60 cells (leukemia), was carried out with 40 or 80ng/mL I/II and accessed by flow cytometry and western blotting. Cell cycle studies indicated that I/II induces a G2-M arrest (at 40ng/mL, 45, 63 and 94% of arrested cells after 24, 48 and 72h treatment, respectively, against 9, 10 and 13% for the non-treated culture). Moreover, 24h-G2/M arrest is sustained and irreversible following removal of stimuli. STP induces 83% G2/M arrest at 200ng/mL after 24h incubation, whilst longer incubation periods provoke a substantial increase in polyploidy. Expression-rate of cell cycle related proteins (Cdk1, Cdk2, cyclin A and cyclin B1) paired with morphological observation of 40ng/mL I/II-treated H/E-stained cells placed on glass slides suggest that arrest is actually occurring at the G2 phase. G2 arrest is merely seen in 80ng/mL I/II-treated cells, while apoptotic features were quite evident. Double-strand breaks evaluated by the neutral comet assay indicates only low scored DNA damage against 24, 48 or 72h 40ng/mL I/II treated cells. However, 80ng/mL I/II-treated cells exhibited higher scored damage. DNA damage proteins (ATM and H2A.X) were expressed in a time- and concentration-dependent manner; while, cycle arrest and repair markers (Chk1, Cdc25C, BRCA1) were activated mostly on 40ng/mL I/II-treated cells. Conversely, PS externalization and activation of effector caspases 3 and 7 and PARP were highly blotted mostly for 80ng/mL I/II-treated cells. I/II induced a clear cytostatic effect on HL-60 cells at the lower concentration, distinguished by persistent cell cycle arrest and low DNA damage; and an objective cytotoxic effect at the higher concentration, motivated by extensive DNA damage and induction of apoptosis.
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Bioatividade de vidros contendo nióbio : estudo experimental in vivo / Bioactivity of glasses composed by niobium : an experimental in vivo studySouza, Lucas Pereira Lopes de, 1989- 25 August 2018 (has links)
Orientador: José Angelo Camilli / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-25T16:59:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2014 / Resumo: Alguns estudos mostram que a introdução do óxido de nióbio (Nb2O5) na composição do Bioglass® poderia ser uma solução para melhorar sua resistência mecânica, mantendo sua biocompatibilidade e bioatividade, porém, apesar da melhora na resistência mecânica causada pela adição deste óxido ser bem documentada na literatura, suas propriedades bioativas ainda são pouco conhecidas. Neste contexto, o objetivo do presente estudo foi avaliar experimentalmente as propriedades bioativas do óxido de nióbio em ratos albinos (Rattus norvegius) da linhagem Wistar. Para isso, bastões vítreos compostos por diferentes concentrações do Nb2O5 foram implantados na tíbia de ratos. Além disso, cada vidro teste, na forma de pó, foi implantado no músculo de ratos para análise de suas propriedades pró-angiogênicas, usando o Bioglass 45S5 (Bioglass®) como controle. As eutanásias foram realizadas 14 e 28 dias pós-cirurgias. Lâminas histológicas de cortes transversais das tíbias foram coradas a H&E para mensuração da área de osso subperiostal existente na cortical adjacente ao implante e a quantidade de osso esponjoso formado ao redor do bastão vítreo nos grupos de 14 dias, bem como da espessura da lâmina óssea formada ao redor do bastão nos grupos de 28 dias. Foi ainda realizada marcação imuno-histoquímica e a razão entre a área total do implante em mm2 e o número total de vasos sanguíneos contados manualmente num aumento de 400x para verificação a capacidade do material de estimular a angiogênese. A avaliação histológica revelou a ausência total de inflamação tanto após 14 quanto após 28 dias de implante. Os resultados das comparações entre as áreas de osso subperiostal dos grupos após 14 e 28 dias (feitas através de um teste ANOVA com post hoc tukey) e da quantidade de osso esponjoso formado ao redor do implante nos grupos 14 dias (feitas através do teste Kruskal-Wallis com Mann-Whitney como post hoc) mostraram que o BGPN1.3 apresentou maior capacidade de induzir a formação óssea do que o grupo controle, já com relação ao número de vasos sanguíneos e espessura da lâmina óssea formada ao redor do implante todos os grupos apresentaram resultado semelhantes. Assim, se concluiu que o BGPN1.3 trata-se de um material inovador por ser biocompatível, apresentar propriedade osteoindutiva superior e capacidade pró-angiogênica semelhante ao Bioglass® / Abstract: Some studies show that the introduction of niobium oxide (Nb2O5) into Bioglass® composition could be a solution to improve its mechanical strength while maintaining its biocompatibility and bioactivity, but in spite of improvement in resistance caused by addition of the oxide is well documented in the literature, their bioactive properties are still poorly known. In this context, the aim of this study was to experimentally evaluate the bioactive properties of niobium oxide in albino rats (Rattus norvegius). For this, glassy rods composed of different concentrations of Nb2O5 were implanted in the rats¿ tibia. In addition, each test glass in powder form was implanted into the muscle of mouse for analysis of their pro-angiogenic properties using 45S5 Bioglass (Bioglass®) as control. Euthanasia were performed 14 and 28 days post-surgery. Histological slides of cross sections of tibiae were H & E stained for measuring the area of existing subperiosteal bone in adjacent to the implant and the amount of cancellous bone formed around the vitreous rod after 14 days pos-surgery as well as the thickness of the formed bone sheet around the rod in groups of 28 days. It was also performed immunohistochemical staining to calculate the ratio between the total area in mm2 of the implant and the total number of blood vessels, counted manually using a magnification of 400x, to check the capacity of the material to stimulate angiogenesis. Histological evaluation revealed the complete absence of inflammation after both 14 and after 28 days of implantation. The results of the comparisons between the areas of subperiosteal bone of groups after 14 and 28 days (made by an ANOVA with Tukey post hoc test) and the amount of cancellous bone formation around the implant in the groups 14 days (done by Kruskal -Wallis with Mann-Whitney post hoc) revealed that BGPN1.3 showed greater ability to induce bone formation than the control group, when compared the number of blood vessels and thickness of the blade bone formed around the implant all groups showed similar results. Thus, we concluded that BGPN1.3 is an innovative material to be biocompatible and display better osteoinductive property than Bioglass® showing similar pro-angiogenic capacity / Mestrado / Anatomia / Mestre em Biologia Celular e Estrutural
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Bioatividade de extratos vegetais no controle de sitophilus oryzae (linné, 1763) em arroz / Bioactivity of vegetable extracts on the control of sitophilus oryzae (linné, 1763) in riceLeão, José Domingos Jacques 19 September 2007 (has links)
The continuous growth of the world population, intensive competition among humans and plant pests for the same food sources, the resistence to existing inseticides by some insects and the persistence of residues in the environment and food created the necessity for new insecticides. In this research field, vegetable species appear as a promising source of new metabolites with insecticide activity. In the case of stored rice, the most important insect pest in the State of Rio Grande do Sul is the weevil Sitophilus oryzae (Linné, 1763). In order to explore plants with potential insecticide activity against this insect, several plant extracts were tested in the Federal University of Santa Maria (Santa Maria, RS). In a laboratory were evaluated the mortality rate, repellence and adult emergence of Sitophilus oryzae in hulled rice (Oryza sativa L.) treated with powder of Piper nigrum L., Chenopodium ambrosoides L., Nicotiana glauca Graham, Nicotiana tabacum L., Corymbia citriodora Hook., Trichillia catigua A. Juss , Melia azedarach L., Mentha pulegium L., Calopogonium caeruleum Hemsl., Ricinus communis L., and Ruta graveolens L. As standard were used Pyrimifos-methyl, Deltametrin and Diatomaceous Earth. The powder that caused the highest mortality rates was from C. ambrosoides.. The insecticides used as standard were more effective than the vegetable powders. As repellent, powder of Corymbia citriodora was the most effective and as adult emergence inhibitor, none presented a significant effect. As for the species that presented the highest insecticide activity, C. ambrosoides and C. caeruleum, the LD50 was 0.1999g/20g of rice and 0.254g/20g of rice respectively. This work also aimed to determine the damages caused by Sitophilus oryzae in rice using four insect populations in hulled rice samples and the populational growth at four grain moisture levels. It was observed that damage levels increased linearly with insect population althought consumption per capita was higher at lower populations. There was in increase in insect population as grain moisture increased up to 14,9% (U.B.) and the reafter decreased.Other experiment aimed to test the insecticide activity of aquous extracts of Chenopodium ambrosides and Calopogonium caeruleum compared to Artemia salina Leach. This microcrustaceous is used as toxicity bioindicator of chemical substances, agrochemicals, pollutants and other products. The LC50 of Chenopodium ambrosoides and Calopogonium caeruleum was found to be 1.76 mg/ml and 4.78 mg/ml respectively. In order to investigate the acute oral toxicity of the aquous extracts and analyse the biochemical and histological parameters in rats the plants was studied: Chenopodium ambrosoides and the Calopogonium caeruleum. For C. ambrosioides, the group of the males did not only present difference statistics for creatinina, whereas, for all the other parameters had differences between the treat groups and the control. The C. caeruleum presented statistical differences for creatinina, TGO and TGP, in both the sexs, with exception of the urea in the group of the females. In the results of the histopathological studies, the extract of C. ambrosoides of both concentrations, in the males provoked discrete liver cellular swollen, already with C. caeruleum 9%, in the males, verified discrete sclerosis to glomerular and discrete liver cellular swollen in the group of the females. / O crescimento contínuo da população mundial, a intensa competição entre humanos e pragas pelo mesmo tipo de alimentos, a resistência a inseticidas existentes por determinados insetos, e a persistência de resíduos de agrotóxicos no ambiente e nos alimentos, criam a necessidade de uma incessante busca de novos inseticidas. Nesse campo de pesquisa, as espécies vegetais surgem como fontes promissoras de metabólitos secundários com atividade inseticida. No caso do arroz armazenado, a principal praga no Estado do Rio Grande do Sul, é o gorgulho Sitophilus oryzae (LINNÉ, 1763). O presente trabalho baseou-se na realização de quatro experimentos. O primeiro experimento objetivou prospectar plantas com potencial inseticida para esse inseto, testou-se na Universidade Federal de Santa Maria (Santa Maria, RS) diversos extratos vegetais. Foram avaliadas, em laboratório, a mortalidade, a repelência e a emergência de adultos de Sitophilus oryzae em grãos de arroz (Oryza sativa L.) com casca, tratados com pós de Piper nigrum L., Chenopodium ambrosioides L., Nicotiana glauca Graham , Nicotiana tabacum L., Corymbia citriodora Hook, Trichillia catigua A. Juss., Melia azedarach L., Mentha pulegium L., Calopogonium caeruleum Hemsl., Ricinus communis L., e Ruta graveolens L. Os inseticidas padrões usados foram: Pirimifós-metil, Deltametrina, e Terra de Diatomáceas. O pó que provocou maior mortalidade foi C. ambrosioide. Para repelência, o pó com maior atividade foi Corymbia citriodora. Para C. ambrosioides e C. caeruleum, determinou-se a DL50 sendo de 0,199 g e 0,254 g/20 g de arroz, respectivamente. O segundo experimento buscou determinar os danos causados por Sitophilus oryzae em arroz com casca, usando quatro populações de insetos adultos em amostras de arroz; e o crescimento populacional do gorgulho usando amostras de arroz com quatro teores de umidade. Em relação aos danos causados, observou-se que o nível de dano aumentou de maneira linear com o aumento populacional, embora o consumo per capita tenha sido maior para a menor população. No estudo do crescimento populacional, constatou-se aumento da população de insetos com o aumento do teor de umidade dos grãos até 14,9% (B.U.), e a partir daí um decréscimo no crescimento populacional. O terceiro experimento tratou da realização do teste de citotoxicidade, para os extratos aquosos de Chenopodium ambrosiodes e Calopogonium caeruleum, frente à Artemia salina Leach. A CL50 dos extratos de Chenopodium ambrosioides e Calopogonium caeruleum foi determinada, sendo de 1,76 mg/ml e 4,78 mg/ml, respectivamente. E o quarto experimento tratou da investigação da toxicidade aguda oral do extrato aquoso, e análises dos parâmetros bioquímicos e histopatológicos em ratos, de Chenopodium ambrosoides e Calopogonium caeruleum. Para C. ambrosioides, somente o grupo dos machos não apresentou diferença estatística para creatinina, enquanto que, para todos os outros parâmetros, houve diferenças entre os grupos tratados e o controle. O C. caeruleum apresentou diferenças estatísticas para creatinina, TGO e TGP, em ambos os sexos, com exceção da uréia no grupo das fêmeas. Nos resultados dos estudos histopatológicos, o extrato de C. ambrosoides provocou, nas duas concentrações, discreta tumefação celular hepática para os ratos machos; enquanto o C. caeruleum apresentou resultado semelhante para os ratos machos a 9 %, e verificou-se discreta esclerose glomerular e discreta tumefação celular hepática no grupo das fêmeas.
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Estudo da influência do fluoreto de cálcio na bioatividade de vidros borato / Study of the influence of calcium fluoride on the bioactivity of borate glassesALVES, Luana Cristina Feitosa 13 July 2017 (has links)
Submitted by Rosivalda Pereira (mrs.pereira@ufma.br) on 2017-09-21T17:41:19Z
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Previous issue date: 2017-07-13 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Fundação de Amparo à Pesquisa e ao Desenvolvimento Científico e Tecnológico do Maranhão / Bioactive borate glass has presented superior results then bioactive silicate glasses, when
compared its conversion rates in apatite and its potential of bioactivity. In this work, new Borate
glasses with the basic 60B2O3 - 4P2O5 - 18Na2O – xCaF2 – (18-xCaO), com x = 0, 5 e 10 % wt
were synthesized, and investigated the influence of CaF2 addition on bioactivity of samples in
vitro, in a period of 28 days in a simulator of the body fluid (SBF). This bioactivity was
investigated by means of X-ray diffraction (DRX), Raman Spectroscopy, FTIR and by the
measure of pH. DRX measures, prior to immersion, presented wide bands, evidencing the
amorphous structure of glasses. The results of density, thermal analysis, XRD, Raman and FTIR
show that the addition of CaF2, until 10 % wt, did not cause significant changes in samples
network structure. The thermal stability for all samples was calculated from DSC data and all
presented values up to 120°C. The results of pH of SBF solution show increase from for 24
hours, which contributes to the dissolution of the outermost layer of the glass and the
precipitation of apatite. In XRD data for 60B sample soaked in SBF for 7 days, there was
formation of crystalline peaks, at 26° and 32° (2ϴ), in all measures. These peaks correspond to
patterns of hydroxyapatite (HA). The XRD spectra in 60B5CaF and 60B10CaF, soaked in SBF
for 7 days, presented peaks in 28°(2ϴ) corresponding to fluorapatite (FA), due to the presence
of CaF2 in these glasses. Raman and FTIR measurements confirmed what was measured by
XRD, showing characteristic peaks of HA and FA for all the samples. Results show that the
prepared samples present potential for being used as biomaterials in biomedical applications,
such as orthopedics, dentistry and tissue engineering. / Vidros boratos bioativos têm apresentado resultados superiores aos vidros silicatos bioativos,
quando comparamos suas taxas de conversão em apatita e seu potencial de bioatividade. Neste
trabalho sintetizamos novos vidros boratos com a composição básica 60B2O3 - 4P2O5 - 18Na2O
– xCaF2 – (18-xCaO), com x = 0, 5 e 10 % em massa, e investigamos a influência da adição de
CaF2 na bioatividade das amostras in vitro, em um período de 28 dias, em um simulador do
fluído corporal (SBF). As medidas de DRX, antes da imersão, apresentaram bandas largas,
comprovando a estrutura amorfa dos vidros. E verificou-se por meio das análises de Densidade,
análise térmica, DRX, Raman e FTIR, que a adição de CaF2 até 10%, em massa, não provocou
grandes mudanças estruturais na amostras. Por meio da calorimetria exploratória diferencial,
determinamos a estabilidade térmica dos vidros que apresentaram valores acima de 120°C. A
bioatividade foi investigada por meio das técnicas de difração de raios-X (DRX),
espectroscopia Raman e FTIR, e pela medida do pH da solução SBF. Os resultados obtidos
mostraram que, em 24h, houve um aumento no pH da solução SBF, o que contribui para a
dissolução da camada mais externa do vidro e sua conversão em apatita. Nos difratogramas
(DRX) para as amostras imersas por 7 dias, houve a formação de picos cristalinos, em 26° e
32° (2ϴ), em todas as amostras medidas. Esses picos correspondem aos padrões de
hidroxiapatita. A presença de CaF2 na composição das amostras imersas por 7 dias apresentou
picos em 28° (2ϴ) correspondendo a fluorapatita. A intensidade destes picos apresentou um
aumento em função do tempo de imersão, durante todo período estudado. As medidas de Raman
confirmaram os resultados do DRX, apresentando para todas as amostras espectros
característicos da hidroxiapatita em 960 cm-1
. As amostras preparadas com CaF2 apresentaram
picos em 965 cm-1
, que corresponde a fluorapatita. O FTIR confirmou os resultados
apresentados no DRX e Raman, em que todas as amostras apresentaram um pico centrado em
1041 cm-1
para a hidroxiapatita e 1042 cm-1 característico para a fluorapatita. Os resultados
demonstram que as amostras preparadas apresentam potencial para serem usados como
biomateriais em aplicações biomédicas, como ortopedia, odontologia e engenharia de tecidos.
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