Orientador: Maria Lucia Furlan Wada / Tese (doutorado) - Universidade estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-24T14:42:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Genari_SelmaCandelaria_D.pdf: 7860909 bytes, checksum: c06aff4e50ce3da83aae6bebb70ad6c6 (MD5) Previous issue date: 1998 / Resumo: Condições não fisiológicas de tratamento por estresse nutricional e diminuição do pH, têm sido associadas a indução de efeitos genotóxicos e transformação em cultura de células de mamíferos. As linhagens celulares Vero, estabelecida a partir de células fibroblásticas renais de macaco verde da África (Cercopithecus aethiops) e MDCK (Madin-Darby canine kidney) a partir de células epiteliais renais, assim como células de cultura primária de líquido amniótico humano foram submetidas ao estresse nutricional, com o objetivo de se investigar o efeito desse sobre vários caracteres celulares. As células estressadas assim como seus respectivos controles foram analisadas com relação a aspectos morfológicos e de crescimento em cultura, características citogenéticas e alterações no citoesqueleto e elementos de matriz extracelular. As linhagens estabelecidas Vero e MDCK assim como as células de cultura primária de líquido amniótico, apresentam inibição por contato e crescimento em monocamadas. Após serem submetidas ao estresse nutricional essas populações passaram a crescer em múltiplas camadas com formação de agregados celulares, perdendo portanto a inibição por contato. A linhagem Vero estressada mostrou alterações morfológicas na superficie celular, com aumento em estruturas vesiculares e microvilosidades, pouco observadas na população controle, que exibia superficie regular. As células presentes nos agregados ou grumos da população Vero estressada apresentaram ainda um certo grau de diferenciação, com células achatadas na superficie do grumo e células arredondadas no interior do mesmo e presença de material extracelular, simulando a formação de pequenas colônias tumorais. Nas monocamadas celulares da população MDCK estressada houve a formação de estruturas denominadas domes, evidenciando a ocorrência de transporte transepitelial. Após a confluência e crescimento em múltiplas camadas, as células MDCK estressadas organizaram-se formando estruturas tubulares. As células Vero controle apresentaram codistribuição de fibronectina e actina, as quais concentraram-se principalmente nas fibras de estresse e se acumularam nas regiões de contato entre as células da monocamada. Nas células Vero estressadas houve redução da resposta imunocitoquímica para fibronectina sem codistribuição com a actina, bem como a redução da coloração para vimentina. A diminuição de fibronectina nas células Vero estressadas provavelmente encontra-se associada à desorganização no padrão de crescimento, levando à formação de múltiplas camadas e diminuição nos índices de adesão, enquanto a presença da fibronectina entre as células da monocamada manteria a adesão ao substrato e o crescimento em monocamadas. As células MDCK controle e estressadas exibiram codistribuição de fibronectina e actina especialmente nas regiões de contato entre as células estressadas, enquanto a vimentina apresentou-se mais intensamente corada nas células MDCK estressadas. A codistribuição de fibronectina e actina nas regiões de contato entre células adjacentes da população MDCK estressada, assim como o aumento da evidenciação de vimentina encontram-se associados à formação de estruturas tubulares por estas células. Células Vero, MDCK e de líquido amniótico apresentaram número modal de cromos somos diferentes de suas populações celulares controle, assim como elevados índices de poliploidia, indicando que o estresse nutricional associado ao abaixamento do pH é responsável não somente por alterações morfológicas, mas também genéticas nos tipos celulares estudados. Pelo presente trabalho pudemos concluir que condições não fisiológicas de tratamento por estresse nutricional associado à redução do pH do meio, foram responsáveis pela indução da transformação em todos os tipos celulares estudados, levando a alterações em vários dos aspectos celulares analisados / Abstract: Non-physiological treatment conditions by nutritional stress and lowered pH have been associated with genotoxic effect and cellular transformation in mammalian culture cells. Vero cell tine, obtained ITom fibloblastic kidney cells of African green monkey (Cercopithecus aethiops), and MDCK (Madin-Darby canine kidney) epithelial cells as well as a primary culture of amniotic human cells were submitted to nutritional stress conditions, o investigate the effect of this treatment, in several cellular characteristics in these cell types. The cellular morphological, growth, cytogenetical, cytoskeleton and extracellular characteristics of cells submitted to stress conditions and their respective controls were analyzed. Vero and MDCK cell lines as well as the primary culture of amniotic cells presented contact inhibition and monolayer growth. After submitted to nutritional stress conditions all these cell types presented multilayered growth with formation of cellular aggregates, losing the contact inhibition property. Vero stressed cells presented morphological alterations at the cellular surface, with enhanced of vesicular and microvilli structures, not often observed in controí cells. At the periphery of Vero cell aggregates, flattened cells were observed, while in the aggregate, the inner cells presented a rounded shape with extracellular material, indicating an ability to stimulate miniature tumoral colony formation. On the monolayer of stressed MDCK cells specific structures called domes were observed, which indicate that transepithelial transport has been performed. After confluence an multilayered growth of stressed MDCK cells were organized in tubular structures. ContraI Vero cells presented fibronectin and actin codistribution at stress fibers and between adjacent cells in the monolayer. Stressed Vera cells showed reduced immunocytochemical response to fibronectin and vimentin without actin codistribution. The reduction of. fibronectin response in Vero stressed cells probably is associated to the growth pattem disorganization, with multilayer growth and a reduced adhesion index, while fibronectin between adjacent cells is responsible forthe substrate adhesion and monolayer growth. Control and stressed MDCK celIs presented fibronectin and actin codistribution at the cell-cell contact regions, while the vimentin immunocytochemical response was enhanced in stressed cells. These characteristics in stressed MDCK celIs probably are associated with the formation of the tubular structures observed. Vero and MDCK lines as well as amniotic human celIs presented altered modal chromosome number and enhanced polyploidy index when compared at their controls, showing that nutritional stress conditions and lowered pH are associated, not only to morphological, but also to genetical alteration in the analyzed celI types. In the present research we can conclude that non physiological conditions by nutritional stress associated with lowered medium pH were responsible by transformation induction in alI the cellular types studied. / Doutorado / Biologia Celular / Doutor em Ciências

Orientador: Sonia Nair Bao / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-24T20:35:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Fernandes_AdriennedePaiva_M.pdf: 6560480 bytes, checksum: cb5545c7c98c2ac29b30cb2ab3aa4c47 (MD5) Previous issue date: 1999 / Resumo: Percevejos fitófagos (Hemiptera, Pentatomidae) são as principais pragas de colheitas economicamente importantes ao redor do mundo. Entre os pentatomídeos pragas de leguminosas, o percevejo verde Nezara viridula talvez seja o mais importante, bem como as espécies do gênero Acrosternum. Portanto, a caracterização estrutural e ultraestrutural do espermatozóide destes insetos poderá ser importante futuramente para programar e direcionar o controle bioquímico destas pragas, bem como para a manipulação genética de populações através de machos estéreis e semi-estéreis. A espermiogênese assim como o espermatozóide de Acrosternum aseadum e Nezara viridula são muito semelhantes e portanto, foram descritos conjuntamente. A espermiogênese envolve a elongação nuclear, a condensação da cromatina, a formação do acrosoma, e o desenvolvimento flagelar, com a formação do axonema bem como dos derivados mitocondriais. Durante as fases iniciais da espermátide, o núcleo se parece com o núcleo de uma célula somática. O citoplasma circundante apresenta um complexo de Golgi bem desenvolvido, o qual é impregnado por tetróxido de ósmio - iodeto de potássio no "cis Golgi network", em cisternas cis e em várias vesículas do "trans Golgi network". O produto de reação de atividade fosfatase ácida e glicose-6-fosfatase é observado principalmente na porção "1rans network" do complexo de Golgi. O complexo de Golgi contribui para a formação do acrosoma. Primeiro um grânulo pró-acrosomal é formado pela fusão de vesículas oriundas do Golgi. Este grânulo se ancora no núcleo e sofre diferenciação simultaneamente com o núcleo e o flagelo. O núcleo sofre uma condensação gradual da cromatina com um aumento em sua ele1rondensidade. Durante a sua compactação a cromatina apresenta um aspecto fibrilar, o qual evolui para um arranjo paracristalino e então se toma muito compactada e ele1ron densa. Em espermátides jovens pode ser visto o adjunto do centriolo localizado posteriormente ao núcleo, na região de implantação do flagelo. Próximo ao adjunto do centriolo observamos um bastão ele1ron denso, o qual apresenta marcação positiva com anticorpos para as tubulinas a, J3 e total, e cuja a marcação desaparece nos estádios finais da espermiogênese, sugerindo uma função como cen1ro organizador de microtúbulos. O axonema da espermátide contém uma variedade de elementos tubulares que persistem no espermatozóide. O axonema apresenta o padrão de 9+9+2 microtúbulos que mos1ram produtos de reação de atividade fosfatase ácida, glicose 6-fosfatase e tiamino pirofosfatase. Dois derivados mitocondriais, contendo duas es1ruturas paracristalinas flanqueiam o axonema. Esses derivados mitocondriais são conectados ao axonema por pontes, que juntamente com as estruturas paracristalinas são características sinapomórficas dos espermatozóides dos Heteroptera. Nas fases iniciais da espermiogênese pode ser observado o produto de reação da atividade enzimática para glicose-6-fosfatase no nebenkem e para cito cromo C oxidase nas cristas dos derivados mitocondriais. Nos estádios finais de diferenciação algum produto de reação da atividade enzimática para tiamino pirofosfatase é observado nas estruturas paracristalinas. Assim, podemos observar que durante a espermiogênese de Acrosternum aseadum e Nezara viridula as espermátides sofrem modificações morfofuncionais que têm a participação do sistema complexo de Golgi-retículo endoplasmático, bem como de várias fosfatases e oxidases / Abstract: Phytophagous stink bugs (Hemiptera, Pentatomidae) are the main pests of economicaly important crops throughout the world. Among the several pentatomid pests of legume crops, the southem green stink bug Nezara viridula is perhaps the most imp0l1ant ones as well as the specie A. aseadum of the genus Acrosternul11. Thus, the structural and ultrastructural characterization of these insects spenl1atozoa will be velY imp0l1ant to programmes directed towards the biochemical control of insect pests and genetic manipulation of populations through sterile and semi-sterile males. The spelmiogenesis as well as the spennatozoon of Acroslernul11 aseadul11 and Nezara viridula were found to be very similar and were described together. The spenniogenesis involves nuclear elongation, chromatin condensation, acrosomal fOlmation, and flagellar development, along with fonnation of the axoneme as well as mitochondrial derivatives. During the early spennatid phase, the nucleus resembles that of a somatic cell. The sUITounding cytoplasm contained a well developed Golgi complex which was impregnated with tetroxide osmium potassium iodide on the cis Golgi network, cis cistemae and in several vesicles of the trans Golgi network. The acid phosphatase and glucose-6-phosphatase reaction products were observed mainly in the trans-most pOl1ion of the Golgi complexo The Golgi complex contributes to the formation of the acrosome. Initially, a proacrosomal granule is formed; it is attached to the nucleus and undergoes differentiation simultaneously with the nucleus and the flagellum. The nucleus undergoes a gradual chromatin condensation with an increase in its electron density. During its condensation the chromatin presents a fibrillar aspect which turns into a paracristalline arrangement and then becomes very compact and electron dense. In ear1y spennatids the centriolar adjunct could be seen located posterior to the nucleus in the region of flagellum implantation. Near the centriolar adjunct we observed an electron dense rod that presents positive labelling to antibodies against a, J3 and total tubulin, and this labelling disappears in the final stages of spermiogenesis, suggesting that this structure could be a microtubule organizing center. The spennatid axoneme contained a variety of tubular elements that persists in the spennatozoon. The axoneme has a 9+9+2 microtubular pattern that is reactive to acid phosphatase, glucose-6-phosphatase and thiamine pyrophosphatase. Two mitochondrial derivatives, containing two paraclystalline structures, flanked the axoneme. These mitochondrial derivatives are connected to the axoneme by bridges that together with the paracrystalline structures are synapomorphic characteristics of Heteropteran spermatozoa. ln the early phase of spenniogenesis the glucose-6 phosphatase reaction product was found on the N ebenkem; and cytocht.ome-C oxidase reaction product occurs on the cristae of the mitochondrial derivatives. Ln the final stages of differentiation some reaction product for thiamine was observed on the paracrystalline structures. In conclusion, it is clear that during spermiogenesis of AcroslernU111 aseadum and Nezara viridula, the spermatids undergo morphofunctional modification involving participation of the Golgi complex-endoplasmic reticulum system, as well as of several phosphatases and oxidases / Mestrado / Mestre em Biologia Celular

Orientador: Carmen Sílvia Bertuzzo / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-24T23:18:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_TerezaCristinaLima_M.pdf: 2638948 bytes, checksum: 04c2e300a07fa9fae3ca1892ccb76175 (MD5) Previous issue date: 1999 / Resumo: A doença de Huntington (HD) é uma afecção neurodegenerativa com padrão de herança autossômica dominante caracterizada por demência e movimentos involuntários. O início dos sintomas ocorre em tomo dos 40 e 50 anos de idade, progredindo até a morte em um período de cerca de tO'anos após o início da doença. A HD está associada a expansão trinucleotídica CAG presente na poção 5' do gene IT15. Nós investigamos a repetição CAG no gene IT15 em 44 indivíduos .brasileiros pertencentes a 34 famílias não relacionadas. Quarenta e dois desses pacientes apresentavam demência e ou movimentos invoIuntários, dois pacientes eram assintomáticos e pertenciam a uma família com um indivíduo afetado também genotipado. A média da idade de início dos sintomas foi de 39 anos. Um alelo CAG expandido foi encontrado em 32 indivíduos (76%) pertencentes a 25 famílias não relacionadas. Os alelos expandidos variaram de 43 a 73 unidades de repetição CAG e os alelos normais apresentaram uma variação de 18 a 26 unidades de repetição CAG nesses pacientes. Uma significativa correlação negativa foi encontrada entre a idade de início dos sintomas e o tamanho da expansão trinucleotídica CAG (r=O,6; p=O,OOOI); no entanto, o tamanho da repetição CAG expandida foi capaz de explicar somente 400-fo da variação encontrada na idade de início da doença (r=O.4). Além disso, nós genotipamos um total de 25 indivíduos pertencentes a uma grupo controle da população brasileira ( 50 alelos), sendo que o alelo normal apresentou uma variação de 16 a 33 unidades de repetição CAG. A porcentagem de heterozigozidade do alelo nomiaI na população brasileira controle foi de 88%. É importante notar que existe a possibilidade de superposição entre o tamanho do alelo nolmal e expandido, os chamados alelos intermediários. Na BD um dos fatores que contribuem para o aparecimento dos alelos intermediários é a presença do polimorfismo (CCG)n. Existem algumas evidências de que a freqüência desses alelos polimórficos é dependente da origem étnica dos indivíduos 9,25,26. Sendo assim para a caracterização da variação do alelo CCG polimórfico na população brasileira foram também analisados 25 indivíduos pertencentes ao controle normal (total de 50 alelos), cujo alelos variaram de 158pb a 185pb (média=167.7), demonstrando uma alta variabilidade polimórfica. Em conclusão nossos resultados mostraram que nem todos os pacientes com fenótipo "00" possuíam a expansão CAG no gene IT15. Como não foi encontrado, em nossa amostra, nenhum alelo de tamanho intermediário, não tivemos dificuldades para realizar o diagnóstico molecular. Com isso, verificamos que a confirmação molecular do diagnóstico na HD deve ser realizada em todos os casos suspeitos a fim de proporcionar subsídios para um aconselhamento genético adequado / Abstract: Not informed. / Mestrado / Farmacologia / Mestre em Ciências Médicas

Orientador: João Semir / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-24T21:39:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Stehmann_JoaoRenato_D.pdf: 19699605 bytes, checksum: 7d73538ccfc5b80d79e6d21478e5bb54 (MD5) Previous issue date: 1999 / Resumo: Os limites e a circunscrição dos gêneros Calibrachoa La Llave & Lex. e Petunia Juss. (Nicotianeae, Solanaceae) foram revisados com base na análise de caracteres morfológicos, citológicos e paleológicos. Calibrachoa é morfológica e citologicamente distinto de Petunia. As espécies de Calibrachoa possuem corola com prefloração conduplicada e números cromossômicos n =9 ou n =18, enquanto que as espécie de Petunia possuem corola com prefloração imbricada e número cromossômico n =7. O exame da testa de sementes através de microscópio eletrônico de varredura mostrou que as espécies de Calibrachoa possuem células com paredes anticlinais retas, enquanto que as de Petunia, células com paredes anticlinais onduladas. A morfologia polínica analisada sob microscopia óptica é relativamente uniforme e não permitiu separar os gêneros. O tratamento taxonômico de Petunia reconheceu onze espécies e dois centros de diversidade na região sul do Brasil. A metade das espécies do gênero é endêmica de regiões muito restritas. A relação do tamanho entre o androceu e o gineceu mostrouse um importante caráter diagnóstico interespecífico. A revisão das Calibrachoa brasileiras reconheceu 20 espécies e dois centros de diversidade na região sul do Brasil. Descrições, chaves para identificação e ilustrações das espécies dos dois gêneros são apresentadas. Um novo gênero monotípico para a tribo Nicotianeae, Petuniopsis, é proposto. Petuniopsis pygmaea possui prefloração imbricada, número cromossômico n=9 e células da testa da semente com paredes anticlinais retas. As relações filogenéticas entre Petunia, Calibrachoa e Petuniopsis permanecem desconhecidas. Petuniopsis parece ser estreitamente relacionado com Calibrachoa. Sugere-se que a semelhança morfológica entre as flores das espécies melitófilas de Petunia e Calibrachoa, especialmente a forma da corola e a coloração purpúrea, seja produto de um processo de coevolução difusa ocorrido com grupos de abelhas solitárias. Padrões de distribuição geográfica, sistemas reprodutivos e mecanismos de isolamento e especiação são discutidos para cada gênero / Abstract: The limits and circumscription of genera Calibrachoa La Llave & Lex. e Petunia Juss. (Nicotianeae, Solanaceae) were revised based on morphological, cytological and palynological analyses. Calibrachoa is morphologically and cytologically distinct from Petunia. Calibrachoa species have the corolla with conduplicate aestivation and chromosome number (n) of 9 or 18, while Petunia species have the corolla with imbricate aestivation and chromosome number of 7. Examination of seed coats by SEM showed that Calibrachoa species have cells with straight anticlinal walls, and those of Petunia have wavy anticlinal walls. Pollen morphology, analyzed with a light mocroscope, is fairly uniform and did not allow separation of the genera. The taxonomic treatment of Petunia recognized 11 species and two centers of diversity in southem Brazil Half of the species are endemic and only found in very restricted areas. The size relation of androecium and gynoecium proved to be an important interspecific diagnostic character. The revision of Brazilian Calibrachoa species recognized 20 species and two centers of diversity in southem BraziL Descriptions, identification keys and illustrations of the species of both genera are presented. A new monotypic genus for tribe Nicotianeae, Petuniopsis, is proposed. Petuniopsis pygmaea has imbricate aestivation, chromosome number of 9 and seed coat cells with straight anticlinal walls. The phylogenetic relationships between Petunia, Calibrachoa, and Petuniopsis remain unknown. Petuniopsis appears to be closely related to Calibrachoa. 1t is suggested that the morphological similarity among the flowers of the melittophilous species of Petunia and Calibrachoa, particularly the shape of the corolla and the purple coloration, is the product of a diffuse co evolutionary process among groups of solitary bees. Patterns of geographic distribution, reproductive systems, as well as isolation and speciation mechanisms are discussed for each genus / Doutorado / Biologia Vegetal / Doutor em Ciências

Orientador: João Vasconcellos Neto / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-25T00:43:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Sa_FlaviaNogueirade_M.pdf: 4771870 bytes, checksum: 01b1bea0715d7da1011ec699f929bdab (MD5) Previous issue date: 1999 / Resumo: Neste trabalho foram estudadas populações de Cassidinae na Serra do Japi (SP) com os objetivos pricipais de determinar quais as espécies de planta da família Asteraceae são utilizadas por estes besouros, descrever a abundância dos Cassidinae (nas fases de ovo, larva e pupa) consumidores de Asteraceae ao longo do ano e determinar a influência de fatores abióticos e bióticos nas populações estudadas. Nosso estudo enfatizou as três espécies de Chrysomelídae consumidoras de Asteraceae mais abundantes na Serra do Japi, Stolas chalybea, S. areQlatae Anacassis phaeopoda,_todas especialistas em suas hospedeiras, Bidens segetum, Mikania cordifolia e Baccharis trimera, respectivamente. Apesar de muitas espécies de Asteraceae terem sido observadas nas trilhas estudadas (n=15), poucas foram utilizadas como hospedeiras (n=5). Desovas e larvas dos primeiros estádios de S. chalybea e S. areoloata foram mais frequentemente encontradas na superficie abaxial das folhas de suas plantas hospedeiras, enquanto que larvas mais desenvolvidas e adultos foram mais frequentemente encontrados na superficie adaxial da folhas. As frequências de Cassidinae em plantas hospedeiras foram significativamente relacionadas a características como altura, número de folhas e ramos nas plantas. O período de atividade das três espécies estudadas foi durante os nove meses mais chuvosos e quentes, e a diapausa ocorreu durante os meses de inverno (período de seca). A reprodução ocorreu principalmente durante os meses de verão. Além de fatores climáticos como chuva e temperatura, a presença de determinadas feno-fases nas plantas influenciaram a abundância e atividade reprodutiva dos Cassidinae. Também foram encontrados inimigos naturais das três espécies de Cassidinae, sendo a maioria parasitóides de ovos e larvas pertencentes às ordens Hymenoptera e Diptera. Um mermitídeo (Nematoda) parasita de adultos de S. chalybea e alguns hemípteros e aranhas predadando larvas foram também coletados. Censos de potenciais predadores de Cassidinae nas plantas hospedeiras dos mesmos durante o ciclo de 1997-1998 revelaram a sincronia das abundâncias dos predadores e suas presas ao longo do ano. Experimentos de exclusão indicam que predadores invertebrados voadores tendem a ser os maiores responsáveis pela mortalidade de larvas de S. chalybea. Nós sugerimos a influência de inimigos naturais como um dos principais fatores determinando o tamanho das populações dos Cassidinae estudados / Abstract: We studied Cassidinae populations at Serra do Japi (SP) with the objectives of recognizing the species of Asteraceae that were consumed by these beetles, describing the abundance of Cassidinae (during egg, larva and adult stages) for a year and knowing the influence of abiotic and biotic factors on the study populations. We focused our investigation on the three commonest species of Chrysomelidae that consumed Asteraceae at Serra do Japi: Stolas chalybe;!, S. areolata and Anacassis phaeopoda. We observed that few species were consumed by those beetles, despite the dose taxonomic relation of plants. These species were specialists to their host plants, Bidens segetum, Mikania cordifolia and Baccharis trimera, respectively. We observed that egg dusters and larvae of S. chalybea and S. areolata were more frequently localized on the underside of plant leaves, whereas older larvae and adult were more frequently found on the upper surface of leaves. The frequency of Cassidinae on plants were significantly related to traits like height and number of leaves and branches. The three species were active for about nine months per year, and had an arrest of development and activity during the winter/ dry season. Reproductive activities occurred mainly during summer months. Besides dimatic factors like rain and temperature, the presence of some pheno-phases of the host plants also exerted influences on the abundance and reproduction of Cassidinae. We also found natural enemies of the three species of Cassidinae. They were mostly hymenopteran and dipteran egg and larva parasitoids. A mermithida (Nematoda) parasiting adults and some heteropteran and spider predators were observed too. One year census on studied Cassidinae host plants revealed that the abundance of potential predators are synchronous to abundance of the beetles. Exdusion experiments suggested that flying invertebrate predators might be the main responsible for mortality of S. chalybea larvae. We suggest the importance of natural enemies of Cassidinae as one of the main factors in determining the size of the populations of tortoise beetles / Mestrado / Ecologia / Mestre em Ciências Biológicas

Orientador: Anete Pereira de Souza / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-25T01:37:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dias_SandraMarthaGomes_M.pdf: 7578353 bytes, checksum: 742e89735a431a4c7c34d2d5348b7bb4 (MD5) Previous issue date: 1999 / Resumo: Com o objetivo de identificar e clonar um gene novo do DNA mitocondrial (DNAmt) de Coix lacryma-jobi L. (coix), utilizou-se a estratégia da hibridização heteróloga. Para tanto amplificou-se por PCR um fragmento correspondente a um quadro de leitura aberto ("open reading frame"-oif), denominado orf167, presente no DNAmt da briófita Marchantia polymorpha, e tido como um possível gene. Marcou-se radioativamente e utilizou-se esta sequência como sonda em hibridizações com o DNAmt de coix digerido com várias enzimas. Identificou-se um fragmento homólogo Bgl II/ Bgl II de 1,4 kb, o qual foi clonado em pBluescript. Elaborou-se o mapa de restrição deste fragmento e localizou-se nele a exata região de homologia com a orf167. A região de homologia estava presente em um fragmento interno de 0,5 kb Spe I / Pvu II. Este fragmento de 0,5 kb, homólogo à orf167, foi utilizado em hibridizações com o DNArmt de várias espécies de plantas superiores (alfafa, batata, coix, couve-flor, ervilha, milho e soja), verificando-se que o mesmo correspondia a uma seqüência altamente conservada. Este mesmo fragmento foi também hibridizado em membranas contendo o RNAmt tota de oix e de outras espécies de plantas superiores (milho e couve flor). Os resultados revelaram que ele é transcrito na mitocôndria das espécies analisadas. O fragmento original de 1,4 kb Bgl II / Bgl II foi divido em 5 subfragmentos, os quais foram clonados e sequenciados. Após a análise da homologia desta sequência com outras presentes nos bancos de dados, verificou-se que o fragmento de 1,4 kb Bgl II./ Bgl II, isolado do DNAmt de coix, contém um "cluster" gênico onde estão presentes o gene que codifica o tRNA serina (tRNAScr), um pseudo-gene provavelmente originado do tRNA fenilananina (tRNAPhe), os genes nad3 e rps12. Tais genes presentes em coix são muito similares àqueles presentes em trigo e milho, os quais se organizam também em um "c1uster" gênico muito similar ao existente em coix. Estudos de expressão realizados através de "Northern Blotting" e RT ¿PCR mostraram que os genes tRNA ser, nad3 e rps12 são transcritos, sendo os dois últimos cotranscritos. Vinte e três elones de cDNA dos transcritos dos genes nad3 e rps12 foram seqüenciados, e tiveram suas sequências comparadas com a seqüência genômica. Encontrou-se 21 sítios de edição nos transcritos do gene nad3 e 8 sítios nos transcritos do gene rps12. Após comparações entre a sequência de aminoácidos predita a partir do clone genômico e do cDNA, observou-se que todas as edições modificam o aminoácido especificado pelo codon onde O evento de edição foi detectado, tornando a sequência de aminoácidos editada diferente da prevista pela sequência genômica. Vinte sítios de edição no gene nad3, e 6 no gene rps12, alteram a identidade do codon, de modo a especificar um aminoácido mais conservado durante a evolução entre diferentes espécies vegetais. Os outros três sítios, sendo I no gene nad3 e 2 no gene rps12, acarretam mudanças raras, espécie-específicas e não conservativas. Todos os 23 elones de cDNA investigados estavam diferentemente editados, predominando os cDNAs com sítios parcialmente editados. Não foi encontrada nenhuma orientação preferencial (5' para 3', ou 3' para 5') para o processamento da edição. Discute-se os motivos do reconhecimento do gene nad3 de coix pela orf167 de M. polymorpha / Abstract: We have cloned and sequenced the nad3 and rps12 mithocondrial genes from Coix lacryma-jobi L., whose sequence were found to be similar to the corresponding genes in wheat and maize. In addition, we have indentified a tRNA Ser and a pseudo-tRNA genes on the 5¿ upstream of nad3, generating a locus organization which is identical to what has been observed in wheat and maize. The locus identification was performed with a heterologous hibridization using the mitochondrial probe orf167 from Marchantia polymorpha. The gene expression was analysed using NoI1hern hybridization and RT -PCR, indicating that nad3 and rps12 gene were cotranscribed in a 1.3 kb RNA molecule. Concernig the RNA editing, we have found 21 and 8 sites in the nad3 and rps12 genes respectively. In general terms, the observed coix mRNA editing has changed the codon identities in such a way that the NAD3- and RPS12- protein aminoacid sequence was kept closer to the corresponding ones in other organisms. However, we have detected three specie-specific editing sites which were not conservative. As for the editing processing, we have analysed 23 cDNA clones which showed different editing pattems. A predominance of partial editing was observed where the edited sites were randomly distributed. / Mestrado / Genetica Vegetal e Melhoramento / Mestre em Genética e Biologia Molecular

Orientador: Fernando Ferreira Costa / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-25T12:07:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Grignoli_CarlosRobertoEscrivao_M.pdf: 6927532 bytes, checksum: 04f15dab880c63f76741351c93bd0646 (MD5) Previous issue date: 1999 / Resumo: As hemoglobinas humanas, compreendem um grupo de moléculas protéicas responsáveis pelo transporte de oxigênio dos capilares alveolares dos pulmões para os tecidos. As moléculas variantes de hemoglobinas são caracterizadas pela anormalidade estrutural de uma subunidade particular da globina e podem ou não resultar em alterações clínicas detectáveis. Existem alterações que levam a uma redução no ritmo de síntese de uma ou mais cadeias polipeptídicas da hemoglobina denominada de síndromes talassêmicas. Neste estudo identificamos as alterações moleculares em pacientes portadores de variante de cadeia d, 7 pacientes com variantes de cadeia (3 e 2 pacientes com talassemia Beta. A caracterização das alterações foi feita pelo sequenciamento de DNA dos genes de globina beta e delta após amplificação pela reação em cadeia da polimerase. Variantes como as Hbs Lepore-Boston-Washington, Leiden, Korle-Bu e A2 'B2 representam os primeiros casos descritos na nossa população sendo que as Hbs Leiden e Korle-Bu foram demonstradas pela primeira vez por análise de DNA. Uma nova variante de cadeia ß eletroforeticamente silenciosa detectada pela eletroforese de cadeia de globinas, denominada de Hb Rio Claro ß34(B16)Val->Met, e encontrada em associação com Hb Hasharon (a47 Asp->His) e alfa talassemia-2 (-a3.7). Foi descrita neste trabalho adicionalmente uma nova mutação de ponto afetando o codon 6 no gene da beta globina (GAG->TAG), criando um "stop codon" e uma alteração rara na nossa população na região promotora do gene da globina beta (-88), ambas levando a talassemia ß / Abstract: Not informed / Mestrado / Farmacologia / Mestre em Ciências Médicas

Orientador: Woodruff W. Benson / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-13T23:43:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Fonseca_CarlosRobertoSorensenDutrada_M.pdf: 1903209 bytes, checksum: 10f5114b1877f62bace49bc1a45ea889 (MD5) Previous issue date: 1991 / Resumo: 0 mutualismo entre formigas e plantas é o tema do presente estudo, sendo que a compreensão de alguns de seus aspectos ecológicos e evolutivos constitui o meu objetivo central. O sistema escolhido inclui a árvore mirmecófila Tachiaalia mvrmecophila. as formigas associadas dos gêneros Pseudomvrmex e Azteca, além de uma guilda de insetos fitófagos. Este trabalho é constituído de dois capítulos independentes, porém complementares, que permitirão, espero, esclarecer algumas questões sobre a evolução da mirmecofilia em Tachigalia. o primeiro capitulo, denominado "Padrões de herbivoria em uma árvore mirmecofila de uma floresta tropical úmida: Tachiaalia mvrmecophila (Caesalpinaceae)" visa, através de uma abordagem experimental e quantitativa, testar a hipótese de que há um beneficio mútuo advindo da interação entre os organismos em questão. o segundo capitulo, "Sucessão de formigas em uma "mirmecófita neotropical, Tachigalia myrmecophila Ducke (Caesalpinaceae)", descreve uma seqüência de ocupação não sazonal, continua e direcional de oito espécies de formigas em relação ao desenvolvimento ontogenético da planta hospedeira. Formigas Pseudomyrmex spp. e Azteca spp. parecem contribuir substancialmente para o aptidão de Tachigalia myrmecophila diminuindo a pressão exercida por herbivoros generalistas e especialistas. A diversidade de formigas é assegurada pela partilha dos recursos oferecidos, em um processo de Bucessao ecológica que é possivel graças a alta complexidade arquitetural da planta hospedeira / Abstract: The ant-plant mutualism is the theme of this study, being the comprehension of some of its ecological and evolutionàry aspects my main objective. The system chosen enclose the myrmecophilous tree Tachigalia mvrmecophila, the plant-ants of the genus Pseudomyrmex and Azteca, and a guild of phytophagous insects. This work has two independent but complementary chapters that --will,I hope, shed light on the evolution of the myrmecophily on Tachjgaiia. The first chapter; entitled "Patterns of herbivory on amyrmecophilous tree of a tropical rain forest: chiga]j mvrmecophila (Caesalpinaceae)", presents through an experimental and quantitative approach a test of the. hypothesis of mutual benefit from the ant-plant interaction. -The second chapter, "Succession and diversity of ants on a myrmecophilous tree: achigalia myrmecophila (Caesalpinaceae)", describes a sequence of non-seasonal, continuous and directional occupations by. eight species of ants through the ontogenetic development of the host plant The ants PReuoomyrmex spp. and Azteca spp. seem to contribute / highly for the fitness of. Tachigalia myrmecophila, decreasing the force of the specialist "and generalist herbivores. The ant diversity is assured by tpe partitioning of the avaiable resource on a sucessional process made possible by the high architetural complexity of the host plant / Mestrado / Mestre em Ciências Biológicas

Orientador: Lucia Pereira da Silva / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-14T00:25:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Morselli_AnaLia_M.pdf: 4367604 bytes, checksum: 93c7e171933a30bca94c0c0c5bec2363 (MD5) Previous issue date: 1991 / Resumo: Neste trabalho procuramos estudar as alterações causadas na permeabilidade da membrana mitocondrial por agentes capazes de promover efluxo de 'Ca¿++. Após incubação de mitocôndrias isoladas de diferentes tecidos de rato. fígado. cérebro e rim ou de vegetais, milho, batata, em condições de ¿stress¿ oxidativo ou na presença de altas concentrações de 'Ca¿++ e Pi. extraíram-se dos sobrertadantes os lipídeos presentes e analisou-se qualitativamente a presença de ácidos graxos livres através de cromatografia em camada delgada em sílica gel ... Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Intramitochondrial phospholipase activity has been correlated with Ca++ efflux from mitochondria incubated in the presence of different Ca++ releasing agents. We compared the phospholipase 'A IND. 2¿ activity in mitochondria isolated from rat liver, brain and kidney and from corn and potato. These mitochondria show different sensitivities to the Ca++ releasing agents t-butylhydroperoxide, diamide and Pi ... Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Mestrado / Bioquimica / Mestre em Ciências Biológicas

Orientador: Keith Spalding Brown Junior / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-14T00:27:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Cardoso_MarcioZikan_M.pdf: 1065375 bytes, checksum: da95859ab91509c8d193adfe46a785d1 (MD5) Previous issue date: 1991 / Resumo: Predadores vertebrados com orientação sensorial por visão são considerados os principais predadores de lepidópteros adultos. Dentre estes, os pássaros são aqueles que exercem maior pressão de predação neste grupo de insetos. De modo a escapar ao ataque destes predadores, estes insetos desenvolveram os mais variados tipos de adaptação. A defesa quimica, advinda através do seqüestro seletivo de substâncias tóxicas de plantas ou de biossintese em adultos, é uma das mais importantes destas adaptações. Alcalóides pirrolizidinicos (PAs) são encontrados usualmente nas borboletas das subfamilias Ithomiinae e Danainae (Nymphalidae) e na familia de mariposas Arctiidae. Embora várias evidências experimentais apontem a .impalatabilidade dos insetos que estocam PAs, não há um teste especifico da resposta daquele grupo de predadores considerados os agentes seletivos mais importantes no desenvolvimento de contra-adaptações à predação os pássaros. Deste modo, foi idealizado um experimento com o propósito de testar especificamente a hipótese da impalatabilidae advinda do uso de PAs e da capacidade deste alcalóide em promover um processo de aversão condicionada nos predadores se este estiver associado a padrão de cor / Abstract: Visually-oriented vertebratepredators are ranked as the main enemies of adult butterflies and moths. Among them, birds are the most important, being considered strong selective agents in the development of several counter-adaptations by these insects in order to escape this intense pressure. Chemical defense acquired by the selective sequestration of toxic chemicals from plants or biosynthesized by the insects is one of the best known of these adaptations. Pyrrolizidine alkaloids are sequestered by butterflies of the Nymphalid subfamilies Ithomiinae and Danainae and moths of the family Arctiidae. Although, some experimental evidence supports the idea that PAs might be responsible for-the unpalatability of the insects that contain them, there is no direct experimental evidence that these chemicals may render a PA-bearing insect obnoxious to its major aelective agents -- birds. In this sense, an experiment was-designed to test the hypothesis of chemical defense by the accumulation of PA and also for its capacity to elicit an avertion conditioning in the predator if it is associated with a color pattern / Mestrado / Ecologia / Mestre em Ciências Biológicas