Orientador: Jose Roberto Trigo / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-03T16:09:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 GuimaraesJunior_PauloRoberto_M.pdf: 3789804 bytes, checksum: 9b0f124ff4de38cd1150f8a53a219c00 (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: Não informado / Abstract: Not informed. / Mestrado / Mestre em Ecologia

Orientador: Ivanira Jose Bechara / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-03T16:38:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Bockelmann_PetraKarla_M.pdf: 3545716 bytes, checksum: 14a2bf292fa6eb03926de15ae4a33858 (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: As nadadeiras dos peixes teleósteos apresentam uma capacidade de regeneração bastante rápida, o que as torna um modelo biológico importante e adequado para o estudo do efeito de drogas que possam alterar esse crescimento. Os raios que constituem as nadadeiras são constituídos, em grande parte, por colágeno e glicosaminoglicanos e, sabe- se, por relatos na literatura, que certas drogas anti-inflamatórias, esteróides e não esteróides, podem afetar a composição da matriz extracelular dos tecidos conjuntivos. Este trabalho tem como objetivo estudar o efeito do naproxeno, uma droga anti-inflamatória não esteróide utilizada no tratamento de doenças reumáticas, durante o processo regenerativo da nadadeira caudal do peixe teleósteo Cyprinus carpio. Para isso, 2 aquários com 6 litros de água cada um foram montados. A água foi declorada e limpa, a temperatura foi de 24°C e a aeração foi constante. Em um dos aquários foi dissolvido o naproxeno na dose 10,4mgIL. O outro aquário, contendo apenas água, serviu como controle. Quarenta e dois alevinos foram anestesiados com benzocaína (1: 10000) e tiveram suas nadadeiras caudais amputadas transversalmente. Após a amputação, os peixes foram divididos em 2 grupos de 21 peixes cada. Um grupo foi para o aquário contendo o naproxeno dissolvido e o outro grupo foi para o aquário controle. Os peixes permaneceram nestes aquários até que a regeneração ocorresse. Diariamente, até o final do experimento, metade da água de cada aquário foi . trocada por água limpa e, no aquário experimental, metade da dose de naproxeno, 5,2 mgIL, foi acrescentada. Os animais foram anestesiados, sacrificados e as nadadeiras em regeneração foram excisadas e fixadas em intervalos de 1, 2, 4, 6, 8, 10 e 12 dias após a amputação. Foram utilizados 3 espécimes, por grupo, para cada intervalo de tempo. As amostras foram processadas para permitir estudos através da microscopia de luz convencional e polarizada e através da microscopia eletrônica de transmissão. No geral, o naproxeno, na dose utilizada neste trabalho, não afetou a organização dos componentes da matriz extracelular e nem a mineralização da substância fundamental da lepidotriquia durante o processo regenerativo da nadadeira caudal. Como o efeito do naproxeno, bem como de outras drogas anti-inflamatórias não esteróides, depende da dose utilizada, da via de administração e do metabolismo do animal em que a droga esta sendo testada, talvez doses maiores da droga possam provocar um atraso ou até inibir por completo esse processo de regeneração, podendo, também, provocar uma desorganização da matriz lepidotriquial / Abstract: The fins of teleosts show a very fast capacity for regeneration, what make them one important and appropriate biologic model for study of the drugs that can affect their development. The rays of fins are formed, for the most part, of collagen and glycosaminoglycans and, as showed on literature reports, some antiinflammatory drugs, steroidal and nonsteroidal, may affect the extracellular matrix composition of connective issue. In the present investigation we studied the effect of naproxen, a non-steroidal antiinflammatory drug used for the treatment of rheumatic disease, during the regeneration process of the tail fin of the teleost fish Cyprinus carpio (carp). The beginning of the experiment was conducted using 2 aquaria containing 6 liters of water each were set up. The water was clear and decWorinated, the temperature was kept at 24°C and under constant aeration. The naproxen was dissolved in one of them to obtain the dose of 10.4 mg/L, while the other contained on1y water and was used as a control. Forty-two alevins were anesthetized with benzocaine (1 : 1 0000) and their tail fins were transversely amputated. After amputation, the fishes were divided into 2 groups of 21 animaIs each. One group was placed in the aquarium containing the drug and the other was placed in the control aquarium. The fishes were left in the aquaria until the occurrence of regeneration. Half of the water in each aquarium was exchanged daily with clean water until the end of the experiment and half of the dose of naproxen, 5.2 mg/L, was added to the experimental aquarium in order to restaured the initial concentration. The animaIs were anesthetized and sacrificed and the regenerating fins were excised and fixed at intervals of 1,2,4,6,8, 10 and 12 days after amputation. Three specimens per time point were used. The collected samples were processed for standard and polarized light microscopy and for transmission electron microscopy. In general, naproxen at the dose used in the present study did not affect the organization of the extracellular matrix components and the mineralization of the fundamental substance of the lepidotrichia during the process of tail fin regeneration. Since the effect of naproxen, as well as of other non-steroidal anti-inflammatory drugs, depends on the dose used, the route of administration and the metabolism of the animal in which the drug is being tested, higher doses of the drug may perhaps delay or even fully inhibit this process, possibly also provoke disorganization of the lepidotrichial matrix / Mestrado / Histologia / Mestre em Biologia Celular

Orientador: Marcelo de Carvalho Ramos / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T17:04:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Calusni_AnaLuciaRoscani_D.pdf: 14978312 bytes, checksum: fabcaa4f8e5f09a9656a39cfb1bb7020 (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: A tuberculose é um importante problema de saúde pública no Brasil e no mundo e a síndrome da imunodeficiência adquirida (aids) tem um papel importante no agravamento deste quadro. Estima-se que existam de 35 a 45 milhões de pessoas infectadas pelo Mycobacterium tuberculosis no Brasil; este grande número de casos vem despertando o interesse em se investigar melhor a epidemiologia da doença. Esta investigação tem como ferramenta importante as técnicas de biologia molecular, que estão sendo cada vez mais utilizadas. A técnica melhor padronizada e mais utilizada é o RFLP com a 1S6110, por meio da qual podemos demonstrar o número e as posições das seqüências de inserção 1S6110 no cromossomo do Mycobacterium tuberculosis. As amostras foram isoladas de pacientes portadores de tuberculose pulmonar, atendidos no Hospital das Clínicas da Unicamp, no período de janeiro de 1996 a março de 1999. Foram estudados 76 pacientes, a maioria do sexo masculino, com faixa etária entre 20 e 40 anos. O DNA cromossômico das cepas foi obtido através da técnica de extração internacionalmente padronizada. Após análise dos padrões de bandas obtidos e comparação dos dados com um banco internacional, cinqüenta e nove isolados revelaram perfil genotípico único, enquanto que outros dezessete foram agrupados em conglomerados distintos. Dez pacientes foram agrupados em conglomerados arbitrariamente designados como se segue: padrão "BE" com 2 pacientes, padrão "BF" com 6 pacientes, padrão "BH" com 2 pacientes e um padrão "AK", descrito em uma contaminação laboratoriaL em um paciente. Nos seis pacientes restantes, foram encontrados padrões anteriormente descritos por um grupo de Houston (EUA), que são: padrão"137" encontrado em Houston com 3 pacientes; padrão "Z" encontrado em EI Paso e Juarez com 1 paciente e padrão "AZ" encontrado em Nova York com 2 isolados. O fato de utilizar uma técnica padronizada por vários centros de pesquisa possibilita a comparação dos padrões obtidos e assim confirmar a transmissão global da tuberculose / Abstract: Tuberculosis is a major concem in developing countries. The contribution of genotyping techniques to trace epidemiological chains is remarkable, IS 6110RFLP being the preferred typing method. AIDS epidemics has had a major impact on the incidence of tuberculosis. Not so many genotyping studies have been made in Brazil in order to check for the number of IS6110 present in local strains of M tuberculosis, as well as the distribution and clustering ofM tuberculosis strains. We performed DNA finger printing using Restriction-Fragment-Length-Polymorphism (RFLP) analysis of at least one isolate from every patient with positive AFB smear, confirmed pulmonary tuberculosis at a major hospital in Campinas, São Paulo, Brazil from January 1996 through July 1999. All fmgerprints were analyzed using proper software, and compared to an international database from the Institute for the Study of Human Bacterial Pathogenesis, Department of Pathology, Baylor College of Medicine. Medical records were reviewed for relevant clinical data. During the study period, 98 patients were included, yelding 76 fingerprints. All M tuberculosis strains had an adequate number of IS6110 (5-21) for the analysis. HIV infection was confirmed in nearly half the patients when it was available. 58 strains exhibited unique patterns whereas 17 others could be grouped in 7 clusters (2 to 6 strains in each cluster). When compared to the mentioned database, 6 strains matched the same genotype from strains originated from El Passo, Juarez, Houston, and New York. Some clustered strains could be recovered during almost all the study period. M tuberculosis strains recovered from patients in Brazil can be genotyped using IS6110 RFLP, since they harbor an adequate number of such sequences. Recently acquired infections could be documented in 19% of cases since the strains could be clustered. The transmission of infection is intense, since some of clustered strains could be recovered during all the study period. The global dissemination of M tuberculosis strains could be evidenced by demonstration of identical fingerprints occurring in a distant country / Doutorado / Ciencias Basicas / Mestre em Ciências Médicas

Orientadores: Mary Anne Heidi Dolder, Selma Candelaria Genari / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-03T18:31:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Oliveira_NailaFrancisPaulode_M.pdf: 3107927 bytes, checksum: ddd1703cab1bc79c091cc502cc1e0f07 (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: Alguns fármacos apresentam potencial quimioterápico contra neoplasias, por inibirem a proliferação celular e induzirem a morte celular. Muitos desses agentes podem apresentar efeitos citotóxicos em tecidos normais como linfopenia, devido à indução de apoptose com diminuição das células T CD4, podendo levar a implicações na resposta imune. O tamoxifeno (T AM) é um agente não esteróide antiestrógeno utilizado como quimioterápico coadjuvante no tratamento de câncer de mama. Trabalhos recentes têm demonstrado que o T AM pode causar câncer endometrial em pacientes pós-menopausa, como sério efeito colateral. O presente trabalho objetivou investigar a capacidade do T AM de induzir apoptose em linfócitos humanos cultivados in vitro. Para tanto, amostras de sangue de voluntárias jovens (grupo A= 25 a 30 anos;n=3) e idosas (grupo B= 58 a 77 anos;n=3), foram centrifugadas em gradiente de densidade de Percoll (percoll-50%) para separação de linfócitos e monócitos. Os monócitos foram excluídos por cultura dependente de adesão por 2 horas. O sobrenadante contendo linfócitos controle foram cultivados em meio RPMI suplementado com 10% de soro fetal bovino por 24 e 48 horas, enquanto linfócitos, denominados tratados, receberam 20J.1M de T AM no meio de cultura. Após a cultura, as células foram: 1) contadas em hemocitômetro, sendo estipulado a porcentagem de células viáveis para o total de células analisadas, utilizando-se o método de exclusão pelo Azul Tripan; 2) incubadas com anexina-biotina, que possui alta afinidade pela fosfatidilserina, seguido de incubação com anti-biotina conjugada à fluoresceína, para marcação das células em apoptose e analisadas ao microscópio de fluorescência; 3) fixadas em formaldeído e coradas com Leishman para estudos em microscopia de luz (ML); 4) depositadas em lamínulas, fixadas em glutaraldeído seguido de pós-fixação com tetróxido de ósmio e analisadas ao microscópio eletrônico de varredura (MEV); 5) fixadas em solução de glutaraldeído, ácido pícrico e formaldeído seguido de pós-fixação com tetróxido de ósmio e analisadas ao microscópio eletrônico de transmissão (MET); 6) a análise estatística foi realizada a partir de análise de variância one-way ANOV A com p< 0,05. As culturas tratadas demonstraram menor viabilidade celular e maior índice apoptótico que seus controles. Ainda, culturas controle e tratadas de linfócitos de mulheres idosas apresentaram maior porcentagem de células em apoptose quando comparadas com linfócitos de mulheres jovens. Os estudos em ML e MET revelaram maior condensação cromatínica e redução do volume celular, e ainda, ao MET foram observados vacúolos autofágicos no citoplasma. A MEV revelou células com perda de microvilosidades e perda da morfologia arredondada após 48 horas de tratamento. Conclui-se, então que os linfócitos foram afetados pelo tratamento com o TAM em ambos os grupos, embora o grupo de mulheres idosas se mostrou mais susceptível a apoptose / Abstract: Some drugs have a chemotherapic potential against neoplasms, through inhibition of proliferation and cell death induction. Many of these agents can display cytotoxic effects in normal tissues such as lymphopeny due apoptosis induction with a consequent decrease of T CD4 cells and its implications in the immune response. Tamoxifen is a synthetic non steroidal antiestrogenic drug which is currently being widely employed in the treatment of female breast cancer. Recent studies have shown that TAM can cause endometrial cancer in postmenopausal patients, considered a serious side effect. The purpose of this work was to investigate the capacity of T AM to induce apoptosis in human lymphocytes cultivated in vitro. Samples of peripheral blood were obtained from young (group A= 25-30 years 0Id;n=3) and old (group B= 58-77 years 01d;n=3) women and centrifuged in a Percoll density gradient, to separate lymphocytes and monocytes (percoll-50%). Monocytes were excluded by culturing for 2 hours. The supernatant with control lymphocytes was cultivated in RPMI containing 10% fetal bovine serum, for 24 and 48 h as controls, whereas treated lymphocytes received TAM (20JlM) added to the culture medium. After the culture, the cells were: 1) counted in a hemocytometer, and the viable cell number for each sample was obtained through an exclusion test of intact cells by using 1 % Tripan Blue and establishing the percentage of unstained, alive cells for the total of ressuspended cells; 2) incubated with annexin-biotin, which has high affinity for phosphatidilserine (PS), followed by incubation with FITC conjugated anti-biotin, to target apoptotic cells and examined by fluorescence microscopy; 3) fixed in formaldehyde and stained with Leishman and examined by light microscopy (LM); 4) placed on coverslips, where the cells were fixed, post fixed in osmium tetroxide and examined with the scanning electron microscope (SEM); 5) fixed in in glutaraldehyde, formaldehyde and picric acid, post fixed in osmium tetroxide, and examined in a transmission electron microscope (TEM); 6) statistical analysis was performed using one-way analysis of variance (ANOV A) with p< 0.05. The treated cultures showed less viable cells and more apoptotic cells than control cultures. Moreover, group B showed more apoptotic cells in comparison with group A, in both control and treated cultures. LM and TEM showed treated cells with more condensed chromatin and reduction of cell volume. In TEM some autophagic vacuoles in the cytoplasm were observed. SEM showed loss of microvilli and loss of spherical shape at 48 h, when compared with the controls. Thus, a response to TAM was observed in both groups, although group B was more susceptible to apoptosis / Mestrado / Biologia Celular / Mestre em Biologia Celular e Estrutural

Orientadores: Edi Lucia Sartorato, Andrea T. Maciel Guerra / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-03T19:24:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Brianti_MitsueTaukeuti_M.pdf: 3392678 bytes, checksum: 88dc15b47c9245c79d493f2070d20835 (MD5) Previous issue date: 2003 / Mestrado

Orientador: Leonilda Maria Barbosa dos Santos / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-03T19:25:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Garcia_Flavia_M.pdf: 784656 bytes, checksum: 385fe85499774a8f5f11a26bb4ae6615 (MD5) Previous issue date: 2003 / Mestrado

Orientador: Vera Nisaka Solferini / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-03T19:25:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Jose_Juliana_M.pdf: 7749885 bytes, checksum: 5f4037339e73410385ee27981cfbc856 (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: Moluscos que vivem na zona entremarés estão sujeitos a uma grande heterogeneidade ambiental, o que influencia vários aspectos de sua biologia evolutiva. Entre eles, as lapas estão entre os gastrópodes mais abundantes nos costões de todo o planeta, sendo Collisella subrugosa a única espécie que ocorre ao longo da costa continental brasileira. Nesta dissertação foram investigados dois aspectos da biologia evolutiva dessa espécie: 1) a variabilidade genética e estruturação em escala macro e microgeográfica e 2) a variação de forma da concha e a influência de fatores ambientais sobre a mesma. Foram realizados dois grupos de coletas. O primeiro, amostrando 14 praias em 2.700 Km do litoral. O segundo, amostrando 2 costões de modo estratificado, com pontos de coleta seguindo distâncias em log2 em um transecto horizontal. Estas coletas foram repetidas três vezes no tempo. O primeiro e o segundo grupo de coletas foi usado para as análises de marcadores isoenzimáticos e o segundo usado também para a análise de morfometria geométrica. C. subrugosa apresentou alta variabilidade genética e baixa estruturação no espaço macrogeográfico. Além disso, todas as amostras macrogeográficas revelaram alta deficiência de heterozigotos para a grande maioria dos locos estudados. A hipótese de grupos de acasalamento foi considerada a mais plausível para explicar a alta deficiência de heterozigotos e a análise das coletas em escala microgeográfica visou testar essa hipótese. Nesta pequena escala foi observada uma grande variação temporal nas frequências alélicas no tempo e uma pequena variação no espaço do costão. Foi observado também que a alta deficiência de heterozigotos some em escala microgeográfica. Com isso, podem estar ocorrendo grupos de acasalamento como hipotetizado, mas que o padrão seria explicado de modo mais simples pelo Efeito Wahlund. Também foram observadas variações de forma e tamanho da concha, maiores no espaço que no tempo. Mas, os padrões não foram congruentes entre as duas praias estudadas o que deve ser resultado das diferentes características ambientais das mesmas. As variações e forma observadas indicam que ventos fortes ou turbulência da água tem grande importância e influência na determinação desta / Abstract: Intertidal molluscs are submitted to a great environmental heterogeneity what strongly influence their evolutionary biology. The limpets are one of the most common gastropods on rocky shores around the world, and Collisella subrugosa is the only species of this group in Brasilian continental shores. In the present manuscript we investigated two aspects of their evolutionary biology: 1) the genetic variability and structure in macro and microgeographic scales and 2) the shell shape and size variations and influence of environment on its shape. The samplings were divided in two groups. For the first, 14 beaches were sampled, in a coast range of 2.700 Km. For the second, 2 shores were sampled in a stratified way, on points along horizontal transects defined by 10g2. The last sampling group was repeated in three different seasons. The first and the second sampling groups were used for genetic analysis on isozyme loci and the second one was also used for geometric morphometrics. C. subrugosa showed high genetic variability and low structure in large-scale. Also, all of those large-scaled samples showed high levels of heterozygote deficiency for almost all loci. The "breeding groups" hypothesis was considered the most adequate to explain the high heterozygote deficiency and the aim of the microgeographic samples analysis was to test this hypothesis. In fine-scale samples all loci showed great variation in allelic frequencies in time and a little variation on the shore space. It was also observed that the high heterozygote deficiency disappear in fine-scaled samples. Those results suggest that could exist "breeding groups" on shores as hypothesized, but the pattern could be better explained by Wahlund effect. C. subrugosa also showed variation in shape and size, higher in space than in time. However, variations were not similar for the two studied shores, what can result of different environmental characteristics. Observed variations in shell shape suggest that strong waves and water turbulence have great influence on it / Mestrado / Genetica Animal e Evolução / Mestre em Genética e Biologia Molecular

Orientadores: Laura Maria Mariscal Ottoboni, Mirian Perez Maluf / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-03T19:42:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ribeiro_FernandaLattario_M.pdf: 1008298 bytes, checksum: f4425561e8e16a8ff6da119e1c8145c1 (MD5) Previous issue date: 2004 / Mestrado

Orientadores: Iscia Lopes Cendes, Fernando Cendes / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T20:07:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Araujo_PatriciaAlineOliveiraRibeirodeAguiar_M.pdf: 6980410 bytes, checksum: a30b4048981d48a03f1d0feb8a745b57 (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: As epilepsias generalizadas idiopáticas (EGI) perfazem aproximadamente 50% de todas as epilepsias e possuem em sua etiologia fatores genéticos envolvidos. A epilepsia mioclônica juvenil (EMJ), uma das formas mais comuns de EGI, foi a primeira síndrome epiléptica a ter um locus mapeado, em 1988 e, desde então, vários estudos foram realizados mas a localização de um ou mais loci para a EMJ e outras formas de EGI permanece ainda uma questão aberta e muito atual. o objetivo deste projeto foi mapear loci envolvidos na predisposição para a EMJ e outras formas de EGI por estudos de ligação e associação em pacientes brasileiros. Os estudos de ligação foram realizados utilizando-se seis famílias não relacionadas, com pelo menos dois pacientes com EGI, sendo o probando com EMJ. Para os estudos de associação foram utilizados 44 pacientes com EMJ, não relacionados e, como grupo controle, 63 indivíduos sem história pessoal ou familiarde epilepsia. Para ambos os estudos foram genotipados oito marcadores microssatélites nas regiões cromossômicas 6p21 e 6p12 e quatro marcadores que flanqueassem o locus 5q34. Para o estudo de ligação foram realizadas as análises de dois pontos e de múltiplos pontos com o aplicativo LINKAGE. Para a análise de associação foram utilizados os testes Qui-quadrado e exato de Fisher, quando indicado, e o cálculo de odds ratio com intervalo de confiança de 95%. Também foi realizada uma pesquisa direta de mutação do exon 9 do gene GABRA1, localizado em 5q34, pela análise de SSCP em 71 pacientes e 82 controles e subseqüentemente foi realizado seqüenciamento das variantes encontradas. Os nossos resultados do estudo de ligação não evidenciaram a presença de um gene principal nas regiões 6p21, 6p12 ou 5q34. No entanto, a análise de associação demonstrou a possível presença de genes de suscetibilidade (menor efeito) ou genes modificadores, nos pacientes com EMJ estudados, nas três regiões. A análise de mutação do exon 9 do gene GARRA] não revelou qualquer variante potencialmente patológica. Em conclusão, os nossos dados vêm contribuir para o melhor entendimento da EMJ e das EGI em geral, reforçando o conceito de doenças complexas, nas quais existe possivelmente uma herança poligênica e a presença de heterogeneidade genética / Abstract: The idiopathic generalized epilepsies (IGE), for which a genetic cause is widely accepted, account for approximately 50% of all epilepsies. Juvenile myoclonic epilepsy (JME), one of the most common forms of IGE, was the first epileptic syndrome to be mapped to a chromosome (ch) region, in 1988, and since then, although several studies were carried out, the localization of one or more loci for the JME and other forms of IGE remains still an open and very current question. The objective of this project was to map loci involved in the predisposition for JME and other forms of lGE, using linkage and association studies, in Brazilian patients. Linkage studies were carried out using six non-related families, with at least two patients with IGE, with the proband having JME. For the association studies 44 on-related individuals were genotyped. In addition, 63 normal controls without epilepsy, were studied. For both studies we genotyped eight microsatellite markers in ch 6p21 and ch 6p12 and four markers in ch 5q34. For linkage studies we used the LINKAGE software to calculate two-point and multipoint lod scores. For the association analyses, we used qui-square and Fisher's exact tests, when it was indicated, and odds ratio with 95% confidence intervalo. We also performed a mutation screening on exon 9 of the GABRA1 gene, on ch 5q34, for 71 patients and 82 controls using SSCP analysis and, subsequently,sequencing of the variants found. Our linkage results showed no evidence of a major locus on cromossomal regions 6p21, 6p12 or 5q34. However, association studies found some evidence for susceptibility genes (minor effect) or modifier genes in all three regions. Mutation screening of exon 9 of the GABRA1 gene did not identify any potential pathological variant. In conclusion,our data contribute for the general view of JME and other forms of IGE as complex trait, in which polygenic inheritance and genetic heterogeneity are probably / Mestrado / Neurociencias / Mestre em Fisiopatologia Médica

Orientadores: Maria Cecilia Barisson Vilares, Marcelo de Carvalho Ramos / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T20:36:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pavan_EricaMary_M.pdf: 4511784 bytes, checksum: f18e2ccff3e501d32cd9bb36915d1074 (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: A isoniazida, a rifampicina e a pirazinarnida, têm sido utilizadas no tratamento da Tuberculose em muitos países, inclusive no Brasil. A resistência das cepas de Mycobacterium tuberculosis aos antibióticos tem resultado em falência do tratamento e aumento do custo para o sistema de saúde. As Mycobacterium tuberculosis resistentes às drogas de primeira linha tem emergido e estas tem sido reportadas mundialmente. Nas mutações no gene rpo? têm se evidenciado o mecanismo de resistência prevalente das cepas de Mycobacterium tuberculosis resistentes à rifampicina. A fim de caracterizar as bases genéticas da resistência às drogas, do Mycobacterium tuberculosis, foram analisadas mutações envolvendo a resistência à rifampicina utilizando os métodos SSCP (Single Strand Conformation Polymorphism) e sequenciamento. As cepas de MTB (Mycobacterium tuberculosis) foram genotipadas e avaliadas quanto à suscetibilidade a rifampicina. Como resultado, foram encontradas 13 cepas sensíveis a rifampicina e 65 resistentes. O DNA genômico foi obtido de cada cepa e um fragmento constando de 157pb do gene rpo? foi amplificado, submetido ao SSCP e ao sequenciamento. As mutações identificadas pertenciam a região do gene rpo? entre o códon 511 e 533. A S531L (44%) foi a mutação de maior prevalência, seguida das mutações H526D (21%), H526Y (3%), L533P (3%), D516V (3%) e a inserção Phe514 e Met515 (3%) / Abstract: Isoniazid, rifampin, and pyrazinamide, have been used as the standard treatment for tuberculosis in many countries, including Brazil. Antimicrobial resistance among Mycobacterium tuberculosis strains results in increased morbidity, mortality and costs of health care. Control of tuberculosis is thus threatened by widespread emergence of drug resistance in Mycobacterium tuberculosis as reported worldwide. Mutations in the rpo? gene seems to be the most prevalent mechanism involved in rifampin resistance among M. tuberculosis strains. To characterize the genetic basis of drug resistance in Mycobacterium tuberculosis in Brazil, mutations involved in rifampin resistance were detected using single strand conformation polymorphism (SSCP) and sequencing studies. A sample consisting of 73 isoniazid resistant and 5 isoniazid sensitive isolates recovered from August, 1999 through September, 2000 was screened for susceptibility to rifampin. As a result, 13 susceptible, and 65 resistant strains were detected. Genomic DNA was obtained from each isolate, and a fragment consisting of 157 bp of the rpo? gene was amplified, and submitted to SSCP and sequencing studies. Mutations involving codon 511 through codon 533 were identified. S531L (44%) was the most prevalent mutation found, followed by H526D (21%), and H526Y, L533P, D516V, Ins Phe514, Met515 (3% each). Our study corroborates previous studies done in Brazil which identified S531L as the most prevalent mutation, and several other mutations on the same gene segment (codon 511 through 533) / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas