Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Físicas e Matemáticas, Programa de Pós-Graduação em Química, Florianópolis, 2014. / Made available in DSpace on 2014-08-06T18:11:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 326933.pdf: 1076335 bytes, checksum: df92c3616cd94e55b77a7f837b3f3e3f (MD5) Previous issue date: 2014 / Este trabalho descreve o desenvolvimento de um novo sensor eletroquímico baseado em filme orgânico iônico para a determinação de compostos fenólicos totais em extratos de erva-mate obtidos a partir de amostras comerciais, utilizando a técnica de voltametria de onda quadrada (SWV). A molécula iônica anfifílica, iodeto de 1-metil-4-(4-decicloxifeniletinil)piridínio (10Pyl), que apresenta propriedades líquido-cristalinas, foi aplicada na forma de filme sobre a superfície de um eletrodo de carbono vítreo (GCE), dando origem ao novo sensor GCE/10Pyl. A partir da avaliação de compostos fenólicos (ácido cafeico, ácido ferúlico, rutina e quercetina), o sensor mostrou maior sensibilidade ao ácido cafeico, sendo este composto selecionado como padrão para a otimização do sensor e aplicação analítica. Sob as condições ótimas de trabalho estabelecidas ([10Pyl] = 1,0 x 10-4 mol L-1; tampão fosfato (0,1 mol L-1; pH 2,0); frequência 100 Hz; amplitude de pulso 60 mV e incremento de varredura 5,0 mV), a curva de calibração apresentou duas regiões lineares distintas, a primeira de 9,9 x 10-7 a 3,8 x 10-5 mol L-1 e a segunda de 4,7 x 10-5 a 9,9 x 10-5 mol L-1 e os limites de detecção para o ácido cafeico nessas faixas foram de 9,0 x 10-7 mol L-1 e 8,9 x 10-6 mol L-1, respectivamente. O sensor GCE/10Pyl demonstrou excelentes reprodutibilidade (RSD = 2,8%) e repetibilidade (RSD = 4,8%). A determinação de compostos fenólicos totais nos extratos de erva-mate utilizando o sensor desenvolvido apresentou erro relativo inferior a 1,5% e uma ótima correlação com o método espectrofotométrico de referência (Folin-Ciocalteu). Portanto, o sensor proposto representa uma ferramenta útil para a detecção rápida e com exatidão adequada de compostos fenólicos totais em extratos de amostras comerciais de erva-mate, podendo ser avaliado também para aplicação em outras amostras.<br> / Abstract : This work describes the development of a new electrochemical sensor based on ionic organic film for the determination of total phenolic compounds in extracts of mate herb obtained from the commercial samples using the technique of square-wave voltammetry (SWV). The amphiphilic ionic molecule, 4-[(4-decyloxyphenyl)-ethynyl]-1-methylpyridinium iodide (10PyI), which has liquid-crystalline properties, was applied in the film form on the surface of glassy carbon electrode (GCE), giving rise to new GCE/10Pyl sensor. From the evaluation of phenolic compounds (caffeic acid, ferulic acid, rutin and quercetin), the sensor showed higher sensitivity to caffeic acid. Therefore, this compound was selected as standard for the optimization of the sensor and analytical application. Under the optimum conditions established ([10PyI] = 1.0 x 10-4 mol L-1; phosphate buffer (0.1 mol L-1; pH 2.0); frequency 100 Hz; pulse amplitude 60 mV and scan increment 5.0 mV), the calibration curve showed two linear ranges: 9.9 x 10-7 to 3.8 x 10-5 mol L-1 and 4.7 x 10-5 to 9.9 x 10-5 mol L-1caffeic acid with detection limits of 9.0 x 10-7 mol L-1 and 8.9 x 10-6 mol L-1, respectively. The GCE/10Pyl sensor demonstrated excellent reproducibility (RSD = 2.8%) and repeatability (RSD = 4.8%). The determination of total phenolic compounds in extracts of mate herb using the proposed sensor showed a relative error less than 1.5% and a good correlation with the spectrophotometric reference method (Folin-Ciocalteu). Therefore, the proposed sensor represents a useful tool for the rapid and accurate detection of total phenolic compounds in extracts of mate herb commercial samples and may also be evaluated for application in other samples.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2010 / Made available in DSpace on 2012-10-25T05:09:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 279151.pdf: 2245447 bytes, checksum: a45d313ab0cdd8f206af85a4660f0aac (MD5) / A Cecropia glaziovii Sneth, popularmente conhecida como embaúba, é utilizada na medicina popular visando os efeitos diurético, anti-hipertensivo, antiinflamatório, expectorante, antiasmático e antitérmico. Esta planta é principalmente encontrada em áreas de reflorestamento e na Mata Atlântica brasileira. O presente trabalho tem como objetivo a padronização de soluções extrativas de Cecropia glaziovii e posterior-mente realizar um estudo preliminar para a encapsulação dos extratos padronizados em um sistema microestruturado. A influência dos fatores tecnológicos como teor etanólico, tempo e temperatura sobre a extração de compostos fenólicos foi avaliada para os métodos estudados, macera-ção e decocção. As soluções foram preparadas utilizando delineamento fatorial 22 com ponto central e avaliadas quanto ao seu resíduo seco, pH, teor de fenólicos totais, teor de ácido clorogênico e ácido cafeico, sendo estas duas substâncias consideradas como marcadores químicos e doseados por metodologia validada de CLAE. Os extratos obtidos com 20% de etanol apresentaram elevada concentração de ácido cafeico, substância que praticamente não está presente nas outras soluções extrativas. Em função deste resultado, foram realizados estudos para avaliação da influência da temperatura e da presença de conservante sobre os teores dos marcadores químicos durante o processo extrativo, sendo para isto elaborados dois delineamentos fatoriais 23. A atividade dos extratos brutos no tratamento do diabetes e da hipertensão foi avaliada. Os extratos obtidos por maceração foram efetivos na redução da glicemia em ratos hiperglicêmicos e apresentaram surpreendente atividade vasorrelaxadora. A atividade farmacológica serviu como fator de escolha dos extratos a serem microencapsulados em sistema polimérico, utilizando a técnica de dupla emulsão (A/O/A) com evaporação/extração do solvente. Para avaliação da interferência dos diferentes fatores na formulação das micropartículas foi utilizado o delineamento fatorial 24. As micropartículas foram avaliadas quanto ao seu rendimento, formação, aparência, tamanho e eficiência de encapsulação. / Cecropia glaziovii Sneth, known as embaúba, is used in folk medicine as diuretic, antihypertensive, anti-inflammatory, expectorant, as relief for asthma and fever. This plant is mainly found in reforestation areas and Brazilian Atlantic Rain Forest. The present work aims to develop Cecropia glaziovii padronized extracts and lately perform preliminary extracts encapsulation in microstructured system. The influence of some technological factors as ethanol concentration, time and temperature extraction above phenolic compounds was evaluated in studied methods, maceration and decoction. The extractive solutions were prepared employing a 22 factorial design with central point and evaluated as dry residue, pH, total phenolics content, chlorogenic and caffeic acids concentration, both considered as chemical markers and the assay was carried out by HPLC validated methodology. In the 20% ethanolic extracts a great amount of caffeic acid was observed, compound that was not detected in the extracts with higher ethanolic concentrations. In order to investigate this result, the influence of temperature and the presence of a preservative on chemical markers content during extraction process were evaluated according to a two 23 factorial designs. The antidiabetic and antihypertensive activity of the extracts were evaluated. The extracts obtained by maceration reduced glucose level on blood samples in hyperglycemic rats and showed surprisingly vasodilator activity. The pharmacological activity was used as a factor to choose the extracts for microencapsulation in polymeric system, using double emulsion technique (W/O/W) with solvent evaporation/extraction. In order to investigate the influence of different factors in microparticles formulation a 24 factorial design was performed. Microparticles were evaluated as yield, formation, aspect, size and encapsulation efficiency.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Físicas e Matemáticas. Programa de Pós-graduação em Química / Made available in DSpace on 2012-10-23T22:47:26Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / O comportamento eletroquímico da rutina e do ácido cafeico na presença de ácidos sulfínicos foi estudado através das técnicas de voltametria cíclica, voltametria de pulso diferencial, voltametria de onda quadrada e eletrólise com potencial controlado. Métodos cromatográficos foram empregados para purificar os produtos e análises espectroscópicas de IV, RMN1H, RMN13C, massas e análise elementar para a caracterização estrutural. Os resultados voltamétricos mostram que a oxidação inicial da rutina e do ácido cafeico envolve a participação de dois elétrons e de dois prótons, levando a formação das suas orto-quinonas correspondentes. Estas orto-quinonas, por sua vez, participam de reações de adição de Michael com os ácidos sulfínicos, formando os derivados sulfínicos da rutina e do ácido cafeico. Através de métodos eletroquímicos foram sintetizados quatro derivados sulfínicos da rutina: (1) 6'(fenilsulfonil)-rutina, (2) 6'(fenilsulfonil)-quercetina, (3) 6'(4-metil-fenilsulfonil)-rutina e (4) 6'(4-metil-fenilsulfonil)-quercetina e seis derivados sulfínicos do ácido cafeico, sendo que dois são majoritários: (5) ácido 6-fenilsulfonil cafeico e (8) ácido 6-(4-metil-fenilsulfonil) cafeico e quatro são minoritários: (6) ácido 2-fenilsulfonil cafeico, (7) ácido 5-fenilsulfonil cafeico, (9) ácido 2-(4-metil-fenilsulfonil) cafeico e (10) ácido 5-(4-metil-sulfonil) cafeico. Além disso, o comportamento eletroquímico do ácido benzenossulfínico e do ácido p-toluenossulfínico também foi investigado. A oxidação eletroquímica destes ácidos sulfínicos envolve a transferência irreversível de um elétron. Os resultados obtidos dos espectros de RMN1H para os produtos de oxidação do ácido benzenossulfínico e do ácido p-toluenossulfínico não foram muito conclusivos. Como propostas de produtos da oxidação eletroquímica destes ácidos sulfínicos estão o ácido benzossulfônico e o ácido p-sulfobenzóico.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Farmacologia. / Made available in DSpace on 2012-10-21T11:00:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 199965.pdf: 450160 bytes, checksum: 7f32f5751da8a451f3ddcc62acbcb77b (MD5) / O ácido caféico e alguns de seus derivados como o ácido caféico fenetil e octil éster são potentes antioxidantes e detentores de importantes ações antiinflamatórias. Neste estudo, foi analisado o efeito de 6 derivados do ácido caféico (metil, etil, butil, octil, benzil e fenetil éster) em modelos de inflamação in vitro e in vivo. No modelo da produção de óxido nítrico (NO) por macrófagos RAW 264.7 estimulados com lipopolissacarídeo bacteriano (LPS), a pré-incubação dos derivados inibiu o acúmulo de nitrito (um produto estável da oxidação do NO) de forma significativa e concentraçãodependente. De acordo com os resultados descritos no presente trabalho, a inibição do acúmulo de nitrito no sobrenadante das células RAW 264.7 parece decorrer, pelo menos em parte, ao scavenge do NO produzido assim como da inibição da expressão da enzima responsável pela síntese do NO, a óxido nítrico sintase induzida (iNOS). Adicionalmente, os derivados butil, octil e fenetil também apresentaram ação antiinflamatória no modelo do edema de pata de camundongos induzido pela injeção de carragenina, inibindo acentuadamente o edema assim como o aumento dos níveis da citocina interleucina-1ß e a migração de neutrófilos nas patas injetadas com carragenina.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Farmácia. / Made available in DSpace on 2012-10-22T08:38:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 226339.pdf: 2710123 bytes, checksum: a20d190831a6779c0388646cfa5bd118 (MD5)

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Físicas e Matemáticas, Programa de Pós-Graduação em Química, Florianópolis, 2012 / Made available in DSpace on 2013-06-26T00:10:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 315354.pdf: 2133522 bytes, checksum: eefe0b703be4f764c790aa76e4b7ac36 (MD5) / Este trabalho descreve o desenvolvimento de novos biossensores para determinação de hidroquinona em creme dermatológico e ácido cafeico em erva-mate empregando a técnica de voltametria de onda quadrada. Inicialmente, um biossensor para hidroquinona foi construído utilizando a enzima peroxidase (PER) obtida do extrato de broto de alfafa (Medicago sativa) imobilizada sobre a superficie de um eletrodo de ouro recoberta com surfactante zwitteriônico 3-(1-tetradecil-imidazólio-3-il)propano-1-sulfonato (ImS3-14) contendo nanopartículas (NP) de ouro dispersas. Na presença de H2O2, esta enzima catalisa a oxidação da hidroquinona a sua correspondente o-quinona, a qual é reduzida eletroquimicamente na superfície do eletrodo a um potencial de +0,09 V vs. Ag/AgCl. Com as condições experimentais otimizadas, o biossensor proposto apresentou uma resposta linear para hidroquinona na faixa de 7,0x10-7 a 8,5x10-6 mol L-1 com um limite de detecção de 2,0x10-7 mol L-1. Esse biossensor apresentou excelentes resultados para a repetibilidade, reprodutibilidade, seletividade e estabilidade. Os resultados obtidos na determinação de hidroquinona em produtos dermatológicos com este biossensor estão de acordo com aqueles obtidos com o método espectrofotométrico em um nível de 95% de confiança com valores de recuperação entre 98,3 a 104,5%. Um segundo biossensor foi desenvolvido utilizando a enzima lacase (LAC) imobilizada em matriz de quitosana previamente reticulada com genipina. O suporte contendo a enzima foi posteriormente incorporado em uma pasta de carbono que apresentou uma resposta linear para ácido cafeico no intervalo de 2,7x10-7 a 3,3x10-5 mol L-1 com limite de detecção de 2,0x10-7 mol L-1. Além disso, a recuperação de ácido cafeico nas amostras de erva-mate variou de 92,8 a 103,1% para os eletrodos desenvolvidos. O método foi aplicado com sucesso na determinação do teor de polifenóis totais em erva-mate sendo que o excelente desempenho do biossensor proposto foi atribuído à efetiva imobilização do lacase no suporte reticulado.<br> / Abstract : This paper describes the development of biosensors applied in the determination of hydroquinone in dermatological cream and caffeic acid in mate herb samples employing square-wave voltammetry technique. Initially, a biosensor for hydroquinone was constructed using peroxidase enzyme obtained from alfalfa sprout extract (Medicago sativa) immobilized on a gold electrode using a solution of the zwitterionic surfactant 3-(1-tetradecyl-3-imidazolio)propanesulfonate (ImS3-14) containing well-dispersed gold nanoparticles. In the presence of H2O2, this enzyme catalyzes the oxidation of hydroquinone to its corresponding o-quinone, which is electrochemically reduced at a potential of + 0.09 V vs. Ag/AgCl at the electrode surface. Under the optimized experimental conditions, the proposed biosensor showed a linear response for hydroquinone in the range of 7.0x10-7 to 8.5x10-6 mol L-1, with a detection limit of 2.0x10-7 mol L-1. This biosensor showed excellent results for repeatability, reproducibility, stability and selectivity. The results obtained in the determination of hydroquinone in dermatological products with this biosensor are in agreement with those obtained with spectrophotometric method at a 95% confidence level with recovery values between 98.3 to 104.5%. A second biosensor was developed using laccase enzyme immobilized in the chitosan matrix previously cross-linked with genipin.The support with laccase was subsequently incorporated into a carbon paste electrode which presented a linear response to caffeic acid in the range from 2.7x10-7 to 3.3x10-5 mol L-1 with a detection limit of 2.0x10-7 mol L-1. In addition, recovery of caffeic acid in mate herb samples ranged between 92.8 and 103.1% to the electrodes developed. The method was successfully applied to the determination of the total phenolic content in the mate herb samples and excellent performance of the proposed biosensor was attributed to the effective immobilization of laccase in the cross-linked support.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias. Programa de Pós-Graduação em Ciência dos Alimentos. / Made available in DSpace on 2013-07-15T22:42:56Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2013-07-16T19:47:48Z : No. of bitstreams: 1 222721.pdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5)

As leishmanioses são antropozoonoses com amplo problema de saúde pública, que acometem aproximadamente 12 milhões de indivíduos em todo o mundo e causam cerca de 60 mil mortes por ano. No Brasil, a leishmaniose tegumentar (LT) apresenta coeficiente médio de detecção de 16 casos por 100 mil habitantes, onde em notificações no estado do Maranhão apresenta um dos maiores índices de incidência. Os fármacos utilizados atualmente apresentam eficácia limitada e algumas vezes significante toxicidade e efeitos adversos, sendo necessária a busca por novos tratamentos. Um dos meios para obtenção deste propósito é obter extratos vegetais que proporcionem a inativação da enzima arginase presente no parasito e responsável pela produção de poliaminas essenciais a sua sobrevivência. A escolha do material vegetal foi baseada através de práticas medicinais de populações onde a planta Stachytarpheta cayennensis é utilizada como analgésica, antiinflamatória e no tratamento de úlceras causadas por Leishmania. A planta foi coletada e feita a identificação botânica, e a droga foi utilizada para preparo de dois extratos por decocção e maceração em etanol 50%. Ambos foram fracionados com n-butanol e utilizados em testes de inibição da arginase. A fração butanólica do chá (BUF) foi a que apresentou menor número de constituintes. A análise do BUF por ressonância magnética nuclear indicou a presença de uma mistura de 7:3 de verbascosídeo/isoverbascosideo. Em seguida foi realizado o teste de inibição enzimática com a mesma fração e com os compostos estruturalmente relacionado com o verbascosídeo: ácido cafeico (IC50 = 1.5 &micro;M), ácido clorogênico (IC50 = 3.4 &micro;M), e ácido rosmarínico (IC50 = 1.5 &micro;M). O teste de inibição na forma promastigota do parasito com a fração (BUF-CHÁ) em 72h de tratamento apresentou EC50 de 51 &micro;g/mL. A partir dos resultados encontrados faz-se necessário mais experimentos com a planta, como a realização de ensaios com amastigotas de Leishmania e teste de toxicidade celular. Conclusão: S. cayennensis pode ser uma promissora fonte de novos fármacos para leishmaniose. / Stachytarpheta cayennensis is a plant traditionally used to treat tegumentary Leishmaniasis and as an anti-inflammatory. The aim of this study was to evaluate the mechanisms of action of extracts from S. cayennensis on the arginase enzyme of the trypanosome parasite Leishmania (Leishmania) amazonensis. S. cayennensis was collected in Formosa da Serra do Maranhão, Brazil. Crude water extract was fractionated with n-butanol and fractions were tested against arginase enzymes collected from L. (L.) amazonensis. The most potent arginase inhibitor fraction was then tested against L. (L.) amazonensis promastigotes in axenic culture. To verify arginase inhibition in L. (L.) amazonensis, promastigote cultures were supplemented with L-arginine (substrate) and L-ornithine, a product of hydrolysis of L-arginine by the arginase enzyme. Butanolic fraction (BUF) is a potent L. (L.) amazonensis arginase inhibitor (IC50 = 5 ± 1 &micro;g/mL). BUF showed an IC50 of 51 &micro;g/mL against L. (L.) amazonensis promastigotas. In addition, caffeic acid and two acids containing caffeoyl moiety were tested against arginase showing IC50 1.5-3.4 &micro;M. The inhibition of arginase by BUF in the promastigote cultures was demonstrated by adding L-ornithine, which enhances parasite growth. In conclusion, verbascoside present in S. cayennensis extracts (BUF) target the arginase enzyme of L. (L.) amazonensis, resulting in the death of the parasites.

As leishmanioses são antropozoonoses com amplo problema de saúde pública, que acometem aproximadamente 12 milhões de indivíduos em todo o mundo e causam cerca de 60 mil mortes por ano. No Brasil, a leishmaniose tegumentar (LT) apresenta coeficiente médio de detecção de 16 casos por 100 mil habitantes, onde em notificações no estado do Maranhão apresenta um dos maiores índices de incidência. Os fármacos utilizados atualmente apresentam eficácia limitada e algumas vezes significante toxicidade e efeitos adversos, sendo necessária a busca por novos tratamentos. Um dos meios para obtenção deste propósito é obter extratos vegetais que proporcionem a inativação da enzima arginase presente no parasito e responsável pela produção de poliaminas essenciais a sua sobrevivência. A escolha do material vegetal foi baseada através de práticas medicinais de populações onde a planta Stachytarpheta cayennensis é utilizada como analgésica, antiinflamatória e no tratamento de úlceras causadas por Leishmania. A planta foi coletada e feita a identificação botânica, e a droga foi utilizada para preparo de dois extratos por decocção e maceração em etanol 50%. Ambos foram fracionados com n-butanol e utilizados em testes de inibição da arginase. A fração butanólica do chá (BUF) foi a que apresentou menor número de constituintes. A análise do BUF por ressonância magnética nuclear indicou a presença de uma mistura de 7:3 de verbascosídeo/isoverbascosideo. Em seguida foi realizado o teste de inibição enzimática com a mesma fração e com os compostos estruturalmente relacionado com o verbascosídeo: ácido cafeico (IC50 = 1.5 &micro;M), ácido clorogênico (IC50 = 3.4 &micro;M), e ácido rosmarínico (IC50 = 1.5 &micro;M). O teste de inibição na forma promastigota do parasito com a fração (BUF-CHÁ) em 72h de tratamento apresentou EC50 de 51 &micro;g/mL. A partir dos resultados encontrados faz-se necessário mais experimentos com a planta, como a realização de ensaios com amastigotas de Leishmania e teste de toxicidade celular. Conclusão: S. cayennensis pode ser uma promissora fonte de novos fármacos para leishmaniose. / Stachytarpheta cayennensis is a plant traditionally used to treat tegumentary Leishmaniasis and as an anti-inflammatory. The aim of this study was to evaluate the mechanisms of action of extracts from S. cayennensis on the arginase enzyme of the trypanosome parasite Leishmania (Leishmania) amazonensis. S. cayennensis was collected in Formosa da Serra do Maranhão, Brazil. Crude water extract was fractionated with n-butanol and fractions were tested against arginase enzymes collected from L. (L.) amazonensis. The most potent arginase inhibitor fraction was then tested against L. (L.) amazonensis promastigotes in axenic culture. To verify arginase inhibition in L. (L.) amazonensis, promastigote cultures were supplemented with L-arginine (substrate) and L-ornithine, a product of hydrolysis of L-arginine by the arginase enzyme. Butanolic fraction (BUF) is a potent L. (L.) amazonensis arginase inhibitor (IC50 = 5 ± 1 &micro;g/mL). BUF showed an IC50 of 51 &micro;g/mL against L. (L.) amazonensis promastigotas. In addition, caffeic acid and two acids containing caffeoyl moiety were tested against arginase showing IC50 1.5-3.4 &micro;M. The inhibition of arginase by BUF in the promastigote cultures was demonstrated by adding L-ornithine, which enhances parasite growth. In conclusion, verbascoside present in S. cayennensis extracts (BUF) target the arginase enzyme of L. (L.) amazonensis, resulting in the death of the parasites.