Made available in DSpace on 2015-06-17T19:33:46Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-02-27. Added 1 bitstream(s) on 2015-06-18T12:48:04Z : No. of bitstreams: 1 000833148_20180227.pdf: 274222 bytes, checksum: 48043d225ec3119a6147bf4fb6eab980 (MD5) Bitstreams deleted on 2018-03-02T12:39:56Z: 000833148_20180227.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2018-03-02T12:40:53Z : No. of bitstreams: 1 000833148.pdf: 772007 bytes, checksum: e2f86651040f87915c5e2b2074a07a94 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Os carrapatos, ectoparasitas hematófagos, produzem uma saliva em cuja composição encontram-se moléculas capazes de modular o sistema imuneinflamatório e hemostático do hospedeiro. No presente estudo, foi realizada a caracterização do extrato de glândulas salivares de fêmeas do carrapato Rhipicephalus sanguineus (Latreille, 1806) alimentadas por quatro dias em coelhos hospedeiros, por meio de espectrometria de massas (LCMS-IT-TOF) pela estratégia de Shotgun, que identificou 14 proteínas, com as mais diversas funções como componentes estruturais de junções celulares, do citoesqueleto, do nucleossomo, além de proteínas com ações anticoagulante e anti-inflamatória corroborando os dados presentes na literatura. Neste trabalho buscou-se, ainda, analisar o potencial antitumoral desse extrato em células das linhagens tumorais SK-HEP-1 e HEP-G2, por meio de ensaios de MTT; análise, por técnicas de Microscopia de Confocal de Varredura a Laser, do núcleo e citoesqueleto; e análise do padrão de transcrição de mRNAs envolvidos nos eventos ou mecanismos de morte celular por apoptose, incluindo os produtos dos genes Bax, Bcl-2, Caspases 3 e 9, Fas e Interleucina 1 α. Os resultados obtidos mostraram que o extrato na concentração de 50 μg/mL inibiu significativamente a proliferação celular das duas linhagens testadas. Pela análise dos núcleos e filamentos de actina das células expostas, não foram verificadas características morfológicas que indicassem processos de morte celular por apoptose. Já a análise do padrão de transcrição de mRNAs envolvidos nos mecanismos de morte celular por apoptose, evidenciou a expressão significativa de alguns genes anti e pró-apotóticos nas células tratadas quando comparadas às do grupo controle, sugerindo que a ação do extrato pode causar o desbalanço na homeostase celular, que pode desencadear processos de morte celular por apoptose, corroborando os dados apresentados na... / Ticks, hematophagous ectoparasites produces saliva that presents molecules capable of modulating the immune-inflammatory and hemostatic system of the host. The present study was performed to characterize the salivary gland extract of female Rhipicephalus sanguineus (Latreille, 1806) fed for four days in rabbits by mass spectrometry (LCMS-IT-TOF) by shotgun strategy, which identified 14 proteins with diverse functions: as structural components of cell junctions, cytoskeleton, the nucleosome, and protein with anticoagulant and antiinflammatory actions corroborating data in the literature. In this study, we attempted to also examine the antitumor potential of this extract on tumor cell lines SK HEP-1 and HEP-G2, by MTT assay; analysis by Laser Scanning Confocal Microscopy techniques, and pattern analysis of mRNA transcription involved in cell death by apoptosis, including the products of genes Bax, Bcl-2, Caspases 3 and 9 Fas and Interleukin-1 α. The results showed that the extract obtained in concentration of 50 μg/ml significantly inhibited the proliferation of both cell lines tested. In the analysis of cores and actin filaments, of the treated cells were not observed morphological characteristics that indicate cell death processes by apoptosis. The analysis of the pattern of transcription of mRNAs involved in mechanisms of cell death by apoptosis, showed a significant expression of some apoptotic genes, in treated cells compared to the control group, suggesting that the action of the extract can cause an unbalance homeostasis in the cell, which can trigger processes of cell death by apoptosis, confirming the data presented in the literature / FAPESP: 2013/00654-0

Os carrapatos estão distribuídos por todo mundo e impactam tanto a saúde animal quanto humana. A espécie Rhipicephalus (Boophilus) microplus é o principal parasita que afeta a bovinocultura nas regiões tropicais e subtropicais do globo, causando grandes prejuísos econômicos. Os métodos de controle estão baseados no uso de acaricidas químicos, o que resulta na seleção de populações resistentes e no risco de poluição do meio ambiente e dos alimentos. As vacinas têm-se mostrado um método de controle factível, e representam uma alternativa ao uso de acaricidas químicos. No entanto, dez anos após a disponibilização da primeira vacina comercial contra carrapatos, ainda não foi encontrada uma formulação capaz de alcançar a proteção necessária para dispensar o uso de agentes químicos. Sendo assim, estudar a biologia do parasita e conhecer mecanismos de importância fisiológica pode ser uma boa estratégia para encontrar moléculas alvo que possam ser usadas como antígenos no desenvovimento de uma vacina eficaz. Com este objetivo, nesta tese foi estudada a reprodução em carrapatos e avaliada a eficácia de uma enzima evolvida neste processo como antígeno vacinal. Foram abordados os processos de vitelogênese e de embriogênese. Em uma primeira etapa, usando carrapatos da espécie Amblyomma hebraeum como modelo, foi investigada a atuação do hormônio 20- hidroxiecdisona (20E) e de fatores adicionais, presentes na hemolinfa, na captação de vitelogenina (Vg) pelos oócitos. Neste trabalho, verificamos que existem diferentes estratégias de controle da captação de Vg pelo ovário nos carrapatos Ixodide, e que para que ocorra capatação de Vg pelos oócitos de A. hebraeum é necessaário um fator adicional presente na hemolinfa das fêmeas. Uma vez que o desenvolvimento do embrião depende da disponibilidade do material do vitelo estocado nos oócitos, a segunda parte da tese explorou uma cisteíno endopeptidase envolvida na degradação de vitelina (Vt) em ovos do carrapato R. microplus denominada Vitellin Degrading Cysteine endopeptidase (VTDCE). As enzimas da classe das cisteíno endopeptidases estão amplamente distribuidas nas fêmeas deste carrapato. Os estudos com VTDCE mostraram que esta é uma enzima de origem materna, com provável síntese extraovariana e transporte pela hemolinfa, até ser internalizada pelos oócitos. A VTDCE está presente durante todo o desenvolvimento embrionário, assim como em larvas. Interessantemente, esta cisteíno endopeptidase apresenta a propriedade de se associar a Vt por um outro sítio, além do sítio ativo. A VTDCE é a enzima mais eficiente na degradação de vitelina (Vt) em ovos de R. microplus, e devido a sua importância fisiológica, a VTDCE foi testada como antígeno em experimento de vacinação de bovinos e desafio com larvas de R. microplus. Os parâmetros mais afetados nos carrapatos alimentados em bovinos vacinados, com relação aos controles, foram o peso das fêmeas ingurgitadas (19,3 %) e a fertilidade dos ovos (17,6 %). Relacionado os parâmetros análisados, vimos que este antígeno confere uma proteção de 21% aos animais imunizados quando infestados por R. microplus. A proteção parcial alcançada pela VTDCE pode ser complementar a de outros antígenos no desenvolvimento de um coquetel antigênico contra carrapatos, uma vez que nenhum antígeno encontrado até o momento foi capaz de oferecer a proteção necessária para ser empregado individualmente na composição de uma vacina. Estudos como os realizados nesta tese contribuem para o melhor entendimento da biologia dos carrapatos, assim como para o desenvolvimento de novos e melhores métodos de controle desses parasitas. / Ticks are distributed worldwide impacting human and animal health. The cattle tick Rhipicephalus (Boophilus) microplus is the main parasite that affects livestock in tropical and subtropical regions of world, causing large economical losses. Tick control methods are based on the application of chemical acaricides, which has resulted in selection of resistant ticks and a potential risk of environmental pollution and food contamination. Vaccines have been shown to be a feasible tick control method that offers a cost-effective, environmentally friendly alternative to chemical control. However, ten years after the commercialization of the first vaccine against ticks, to identify tickprotective antigens remains a limiting step in the development of an efficient formulation that would avoid the use of chemical acaricides. In face of this situation, to study the parasite biology and understanding physiological important mechanisms could be a good strategy to find new targets to be used in an efficient vaccine. In order that, this thesis subject was to investigate the reproduction process in ticks and to evaluate the efficiency of an enzyme involved in this process as vaccinal antigen. The process of vitellogenesis and embryogenesis were studied. In the first part, using Amblyomma hebraeum ticks as model, the role of 20- hydroxiecdisone and additional hemolymph borne factors in vitellogenin (Vg) uptake by oocytes were investigated. Our findings showed that there are different strategies to control Vg uptake by ovary in Ixodide ticks. Additionally, for Vg uptake in A. hebraeum ovaries, a vitellogenin uptake factor (VUF) present in female hemolymph is required. As embryo development depends on the availability of yolk material stored into the oocytes, in the second part we studied a cysteine endopeptidase involved in Vt digestion in R. microplus eggs, named vitellin-degrading cysteine endopeptidase (VTDCE). Cysteine endopeptidase enzymes are widely distributed in these tick females. Studies with VTDCE demonstrate that it is a maternal derived endopeptidase involved in a route including extraovarian synthesis, transport, and ovary uptake, before internalization by oocytes. VTDCE is present during all tick development, as well as in larva. Interestingly, this cysteine endopeptidase is able to associate with Vt in another site than the active site. VTDCE showed to be the most efficient Vt hydrolytic enzyme in R. microplus eggs. So, supported by its physiological role, VTDCE was used as antigen in bovine vaccination and R. microplus challenge experiment. The most affected biological parameters in ticks fed on vaccinated animals were weight of engorged ticks (19.3 %), and egg fertility (17.6 %). Relating the biological parameters analyzed, bovine vaccination with VTDCE as antigen resulted in an overall protection of 21%. Therefore, this partial protection could be complementary in the formulation of an antigenic cocktail against tick, once there is not one single protein that achieves the protection level necessary for an efficient and practical vaccine development. Studies like that contribute to the better understanding of tick biology, as well as to the development of new and more efficient methods of control.

Resumo: A Rickettsia rickettsii, bactéria Gram-negativa intracelular obrigatória, é o principal agente etiológico da Febre Maculosa Brasileira (FMB) e da Febre Maculosa das Montanhas Rochosas nos Estados Unidos. A sua transmissão para o homem e para outros animais, ocorre principalmente pela picada do carrapato infectado. Os sintomas no hospedeiro aparecem depois de um período de incubação, que varia de 2 a 14 dias após a picada. As riquetsias são bactérias que se disseminam nos carrapatos ixodideos, por se multiplicarem no citoplasma das células intestinais, ovarianas, de glândulas salivares, e de túbulos de Malpighi sendo encontradas também na própria hemolinfa do ectoparasito. Na América Latina o carrapato Amblyomma cajennense tem sido considerado o principal vetor da R. rickettsii para humanos, todavia o Rhipicephalus sanguineus, por ser o principal carrapato que parasita os cães, e estando presente principalmente em áreas urbanas, pode ser também um possível portador do patógeno. Embora ainda não confirmado como vetor da Febre Maculosa para humanos no Brasil, o ixodideo é da R. rickettsii nos EUA, no México e, possivelmente na Colômbia. Sendo assim, este estudo teve por objetivo investigar como ocorre a disseminação e a distribuição da bactéria R. rickettsii em ovários e glândulas salivares de fêmeas adultas de carrapatos R. sanguineus, por meio de técnicas histológicas. A análise dos resultados revelou a presença da bactéria nos ovários e glândulas salivares das fêmeas do carrapato R. sanguineus. Nos ovários as bactérias estavam presentes em todos os estágios de desenvolvimento dos ovócitos (I, II, III, IV e V), preferencialmente, no pólo voltado para o pedicelo, produzindo lesão, bem como nas células do pedicelo. Nas glândulas salivares, a R. rickettsii foi observada em todos os tipos... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Rickettsia rickettsii, a Gram negative bacterium, obligate intracellular, is the main pathogen of the Brazilian Spotted Fever (BSF) and Rocky Mountain Spotted Fever in the United States. Its transmission to humans and other animals occurs primarily through the bite of infected ticks. The symptoms in the host come after an incubation period of two to 14 days after the bite. Rickettsiae are bacteria that spread in ixodid ticks by multiplying in the cytoplasm of intestinal cells, ovary, salivary glands and Malpighian tubules and can be found also in the hemolymph of the ectoparasite. In Latin America the tick Amblyomma cajennense has been considered the main vector of R. rickettsii to humans, however Rhipicephalus sanguineus as the main tick that parasitizes dogs and largely present in urban areas, can become a possible vector. This ixodid has not been confirmed as a vector of spotted fever to humans in Brazil, but it can transmit R. rickettsii in the U.S., Mexico, and possibly in Colombia. Thus the main objective of this study was to investigate how R. rickettsii spreads and what is its behavior in different tissues of adult female ticks R. sanguineus, through application of histologic techniques. The results showed the presence of the bacterium in the ovaries and salivary glands of females of the tick. In the ovaries bacteria were present in all stages of development of oocytes (I, II, III, IV and V), and causing lesion preferably at the pole of oocytes, as well as in pedicel cells. In the salivary glands, R. rickettsii was observed in all acini types (agranular and granular), beyond the wall and the lumen of the excretory ducts. Histological analysis of ovaries showed that infection by the R. rickettsii negative impact the process of reproduction... (Complete abstract click electronic access below) / Orientador: Maria Izabel Camargo Mathias / Coorientador: Marcelo Bahia Labruna / Banca: Gervasio Henrique Bechara / Banca: Solange Aparecida Rossini de Oliveira / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:15Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-08-22Bitstream added on 2014-06-13T20:27:43Z : No. of bitstreams: 1 demoner_lc_me_botfmvz.pdf: 668999 bytes, checksum: f0837d7e0a185cd0a8385b4105355512 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Hepatozoon canis é um hemoparasita transmitido por carrapatos que afeta cães em diversas regiões do mundo. Rhipicephalus sanguineus é considerado seu vetor biológico, entretanto, é possível que existam outros vetores. No Brasil, H. canis é descrito principalmente em áreas rurais, onde cães podem ser infestados por outras espécies, incluindo Amblyomma spp. O objetivo do presente trabalho foi infectar experimentalmente diferentes espécies de carrapatos com H. canis, a partir de cães naturalmente infectados. Para isso, foram utilizadas ninfas de A. cajennense e R. sanguineus e adultos de A. cajennense e A. ovale. Após o ingurgitamento dos espécimes em animal infectado, foi realizada pesquisa de formas evolutivas do protozoário na hemolinfa, intestino e hemocele dos ixodídeos, por técnicas citológicas e histológicas. Alguns carrapatos foram submetidos ao diagnóstico molecular pela técnica de PCR. Somente em duas fêmeas de A. cajennense foram observadas estruturas morfologicamente semelhantes a Hepatozoon spp. e uma fêmea de A. ovale apresentou oocistos na hemocele. Além disso, duas fêmeas de A. ovale e uma de A. cajennense foram positivas na PCR. Entretanto, não é possível caracterizar essas espécies como vetores de H. canis, pois foram usados muitos exemplares nas infecções experimentais e poucos foram capazes de se infectar com o parasita. É provável que R. sanguineus tenha pouca importância epidemiológica na transmissão de H. canis no Brasil, pois este estudo, assim como pesquisas anteriores, demonstraram que a espécie foi incapaz de se infectar experimentalmente com o protozoário / Hepatozoon canis is a hemoparasite that afflicts dogs in several regions of the world. Rhipicephalus sanguineus is considered to be the biologic vector of this agent, although other species may act as possible vectors. In Brazil, H. canis is described mainly in rural areas, where dogs are infested by other species, such as Amblyomma spp. The aim of this study was to transmit experimentally H. canis to different species of ticks, using naturally infected dogs. For this purpose A. cajennense and R. sanguineus nymphs and A. cajennense and A. ovale adults were used. After the repletion of specimens fed on a naturally infected animal, we searched for development forms of the protozoa in hemolymph, gut and hemocoel of the ticks by cytological and histopathologic examinations. Some ticks were also examined by molecular detection (PCR). Only two female ticks of the species A. cajennense contained structures morphologically similar to Hepatozoon spp. and oocysts were recovered from the hemocoel of an A. ovale female. In addition, two females of A. ovale and one female of A. ovale were positive through PCR. However, our results are not enough to characterize these species as vectors of H. canis mainly because many ticks were used in experimental infections and few were infected with the parasite. It is likely that R. sanguineus has little epidemiological importance in the transmission of H. canis in Brazil, since this research and previous researchers demonstrated that R. sanguineus was unable to experimentally get infected with the protozoan

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:16Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-07-05Bitstream added on 2014-06-13T19:35:10Z : No. of bitstreams: 1 000735861.pdf: 1757660 bytes, checksum: fe912f998b0eeae4266b156b3428c7fe (MD5) / Os extratos vegetais têm sido importantes fontes de substâncias com diferentes estruturas químicas expressando diversas atividades deletérias contra os parasitas. A presente pesquisa teve como objetivo avaliar a ação antiparasitária de Artemisia annua in vivo. Para tal, foram propostos dois estudos: um utilizando bovinos naturalmente infestados e outro usando ovinos artificialmente infectados. Experimento I: foram selecionadas vinte novilhas com peso médio de 280 kg para avaliar a eficácia carrapaticida sobre R. (Boophilus) microplus. As mesmas foram divididas em dois grupos experimentais, um grupo que recebeu por via oral 200g/dia de A. annua em cocho coletivo e outro não recebeu. As contagens foram realizadas nos dias 0, 3, 7, 21, 35, 42, 49, 56, pós tratamento.Foi realizada a quantificação de artemisinina por cromatografia líquida de alta eficiência. Os resultados das três contagens de carrapatos com o valor referente às médias do dia foi 96,55. Nas contagens posteriores não observou-se diferença significativa entre ambos os grupos. Experimento II: Para avaliar a atividade antihelmíntica, foi conduzido um estudo controlado utilizando-se vinte e quatro ovinos machos Santa Inês com peso médio de 20 Kg artificialmente infectados com H. contortus e randomizados em quatro grupos homogêneos com seis animais cada, sendo, controle não tratado (Grupo I), Controle positivo tratado com levamizol 10 mg/kg (GII), A. annua a 10% (GIII) e A. annua a 20% (GIV). Contagens de OPG foram realizadas nos dias -3, -2, - 1, 0 (dia do tratamento), 3, 7, 10, 14, 17, 21, 24 e 28 pós-tratamento. De acordo com as quantificações estatísticas, foram observadas eficácias persistentes de 92,57% e de 85,00% no grupo controle positivo tratado com levamizol. Nota-se não houve diferença significativa entre ambos os grupos. Portanto, os resultados obtidos possibilitam inferir que A. annua administrada via... / Vegetal extracts has been important sources for substances with different chemical structures that express several deleterious activities against parasites. The present study focused on evaluating the anti-parasitic action of Artemisia annua in vivo. For such, two experiments were proposed: one using naturally infested animals and a second one with artificially infected sheep. Experiment I: twenty heifers weighing around 280 kg were selected in order to evaluate the acaricidal efficacy of the compound against Rhipicephalus (Boophilus) microplus. These animals were divided in two experimental groups: one being held as a control group and the second one were animals received, orally, 200 g/day of A. annua in a collective trough on days 0, 3, 7, 21, 35, 42, 49 and 56, post-treatment. Artemisinine was quantified through high performance liquid chromatography. Results of the three tick counts, regarding the average values, was of 96.55. In subsequent counts, no significant difference was observed between both groups. Experiment II: To evaluate the anthelmintic efficacy of the compound, a controlled trial was conducted using 24 male sheep, from the “Santa Inês” breed, with an average weight of 20 Kg, artificially infected with H. contortus. These animals were randomized in four homogeneous groups with six animals each, being: untreated control (Group I); positive control, treated with levamisole at 10 mg/kg (Group II); A. annua at 10% (Group III) and A. annua at 20% (Group IV). EPG counts were conducted on days -3, -2, -1, 0 (treatment day), 3, 7, 10, 14, 17, 21, 24 and 28 post-treatment. According to statistical quantifications, persistent efficacies of 92.57% and 85.00% were observed in the positive controls, treated with levamisole. It is possible to note that no significant difference was observed between the other groups. Therefore, the obtained results allow inferring that Artemisia annua ...

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:22:58Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-02-17Bitstream added on 2014-06-13T20:49:40Z : No. of bitstreams: 1 costa_lfs_me_rcla.pdf: 613629 bytes, checksum: 407288830b86bc11f72ddc8e5e695ec0 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A Rickettsia rickettsii, bactéria Gram-negativa intracelular obrigatória, é o principal agente etiológico da Febre Maculosa Brasileira (FMB) e da Febre Maculosa das Montanhas Rochosas nos Estados Unidos. A sua transmissão para o homem e para outros animais, ocorre principalmente pela picada do carrapato infectado. Os sintomas no hospedeiro aparecem depois de um período de incubação, que varia de 2 a 14 dias após a picada. As riquetsias são bactérias que se disseminam nos carrapatos ixodideos, por se multiplicarem no citoplasma das células intestinais, ovarianas, de glândulas salivares, e de túbulos de Malpighi sendo encontradas também na própria hemolinfa do ectoparasito. Na América Latina o carrapato Amblyomma cajennense tem sido considerado o principal vetor da R. rickettsii para humanos, todavia o Rhipicephalus sanguineus, por ser o principal carrapato que parasita os cães, e estando presente principalmente em áreas urbanas, pode ser também um possível portador do patógeno. Embora ainda não confirmado como vetor da Febre Maculosa para humanos no Brasil, o ixodideo é da R. rickettsii nos EUA, no México e, possivelmente na Colômbia. Sendo assim, este estudo teve por objetivo investigar como ocorre a disseminação e a distribuição da bactéria R. rickettsii em ovários e glândulas salivares de fêmeas adultas de carrapatos R. sanguineus, por meio de técnicas histológicas. A análise dos resultados revelou a presença da bactéria nos ovários e glândulas salivares das fêmeas do carrapato R. sanguineus. Nos ovários as bactérias estavam presentes em todos os estágios de desenvolvimento dos ovócitos (I, II, III, IV e V), preferencialmente, no pólo voltado para o pedicelo, produzindo lesão, bem como nas células do pedicelo. Nas glândulas salivares, a R. rickettsii foi observada em todos os tipos... / Rickettsia rickettsii, a Gram negative bacterium, obligate intracellular, is the main pathogen of the Brazilian Spotted Fever (BSF) and Rocky Mountain Spotted Fever in the United States. Its transmission to humans and other animals occurs primarily through the bite of infected ticks. The symptoms in the host come after an incubation period of two to 14 days after the bite. Rickettsiae are bacteria that spread in ixodid ticks by multiplying in the cytoplasm of intestinal cells, ovary, salivary glands and Malpighian tubules and can be found also in the hemolymph of the ectoparasite. In Latin America the tick Amblyomma cajennense has been considered the main vector of R. rickettsii to humans, however Rhipicephalus sanguineus as the main tick that parasitizes dogs and largely present in urban areas, can become a possible vector. This ixodid has not been confirmed as a vector of spotted fever to humans in Brazil, but it can transmit R. rickettsii in the U.S., Mexico, and possibly in Colombia. Thus the main objective of this study was to investigate how R. rickettsii spreads and what is its behavior in different tissues of adult female ticks R. sanguineus, through application of histologic techniques. The results showed the presence of the bacterium in the ovaries and salivary glands of females of the tick. In the ovaries bacteria were present in all stages of development of oocytes (I, II, III, IV and V), and causing lesion preferably at the pole of oocytes, as well as in pedicel cells. In the salivary glands, R. rickettsii was observed in all acini types (agranular and granular), beyond the wall and the lumen of the excretory ducts. Histological analysis of ovaries showed that infection by the R. rickettsii negative impact the process of reproduction... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:22:59Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-07-29Bitstream added on 2014-06-13T20:49:41Z : No. of bitstreams: 1 arnosti_a_dr_rcla.pdf: 716330 bytes, checksum: 028490dea75ddeba4b2b4e3b790178aa (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O presente trabalho traz informações que mostram a interferência dos ésteres do ácido ricinoléico extraídos do óleo de mamona (Ricinus communis), no ciclo secretor das glândulas salivares e na vitelogênese de fêmeas do carrapato Rhipicephalus sanguineus, agindo diretamente nos processos de alimentação e de reprodução, respectivamente. Para a realização deste estudo, coelhos hospedeiros infestados com carrapatos, foram alimentados com ração comercial comum (controle-GC) e com ração enriquecida com os ésteres em diferentes concentrações (tratamento- GT). As glândulas salivares sofreram danos, e tiveram o citoplasma das células acinares alterado, trazendo prejuízos ao seu funcionamento, além desta substância ter acelerado a degeneração do órgão como um todo. Os ésteres interferiram na atividade de secreção celular alterando a composição da glicoproteína salivar, especialmente nas células glandulares dos ácinos II. O efeito dos ésteres na vitelogênese foi observado nos ovócitos dos carrapatos do grupo tratamento (GT), os quais apresentaram células germinativas com alterações citoplasmáticas, inibição do desenvolvimento dos ovócitos I e II para os estágios avançados (IV e V), além da interferência na maturação dos ovócitos V. Além disso, nas ampolas dos ovários dos indivíduos tratados, espermatozóides não foram observados no seu interior confirmando a ação dos ésteres no processo de reprodução. Ficou demonstrado também que os danos causados pelos ésteres nas células das glândulas salivares e dos ovários desses ectoparasitas, aumentaram na mesma proporção que houve aumento das concentrações do produto, provocando intensa degeneração dos órgãos / The present study brings information which shows the interference of ricinoleic acid esters extracted from castor oil (Ricinus communis) on the secretory cycle of Rhipicephalus sanguineus female ticks’ salivary glands and vitellogenesis, acting directly on the feeding and reproduction processes respectively. To perform this study, host rabbits were infested with ticks, fed with regular commercial rabbit food (control-CG) and with food enriched with ester in different concentrations (treatment- TG). The salivary glands were damaged and had the cytoplasm of acinar cells altered, impairing their functioning, and the toxic substance also accelerated the degeneration of the organ as a whole. The esters interfered in the cellular secretion activity altering the composition of salivary glycoproteins, especially in the glandular cells of acini II. The effect of the esters in the vitellogenesis was observed in the oocytes of ticks belonging to the treatment group (TG), whose germinative cells presented cytoplasmic alterations, inhibition of the development of oocytes I and II for advanced stages (IV and V) and interference in the maturation of oocytes V. In addition, spermatozoa were not observed in the interior of the ovaries ampoules, confirming the acaricidal potential of the esters. It was also demonstrated that the damages caused by esters in the salivary glands cells and ovary cells of these ectoparasites increased in the same proportion of the increase in the concentrations of the toxic product, causing intense degeneration of the organs

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:22:59Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-02-22Bitstream added on 2014-06-13T19:08:38Z : No. of bitstreams: 1 nunes_et_me_rcla.pdf: 1014029 bytes, checksum: 950755006ea9299ef56aac556c21f073 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / As glândulas salivares dos carrapatos são órgãos importantes na transmissão de patógenos a seus hospedeiros, entretanto, o conhecimento das mudanças morfofisiológicas que nelas ocorrem durante o período de alimentação são limitados. Neste trabalho estudou-se as glândulas salivares de fêmeas de carrapatos Rhipicephalus (Boophilus) microplus por meio de técnicas de morfologia, histoquímica e citoquímica de luz e ultra-estrutural em fêmeas em dois diferentes estágios de alimentação (inicial: 24 a 48 horas de infestação, peso inferior a 0,03g e semiingurgitado: 4 a 5 dias de infestação, peso entre 0,13g e 0,25g), de modo a verificar as mudanças que ocorreriam no tecido glandular neste período e identificar quando teria início o processo de degeneração, além de estabelecer que tipo de morte celular estaria envolvida. As glândulas salivares das fêmeas em início de alimentação mostraram suas células fortemente positivas para ATPase e eficientes na exclusão de corante vital, estando portanto, ativas ou apenas em início de degeneração. Os núcleos, de maneira geral, apresentaram-se preservados, sendo assim, descartada a ocorrência de morte celular neste estágio. A localização da fosfatase ácida demonstrou a participação desta enzima na atividade metabólica destes órgãos, regulando o processo secretor e degradando proteínas. Fêmeas no estágio semiingurgitado apresentaram glândulas com características de degeneração, como perda das especializações de membrana, presença de figuras mielínicas, vacúolos autofágicos, lisossomos, além de alterações nucleares como condensação e marginalização cromatínica, formação de blebs e chegando à fragmentação nuclear. À medida que o processo de alimentação avançou, houve aumento da enzima fosfatase ácida, entretanto, os ácinos mantiveram-se fortemente ATPase positivos. / The ticks salivary glands are important organs to the pathogens transmission to their hosts, however, the knowledge regarding the morphophysiological changes which occur in these structures during the feeding period are limited. In this work, the salivary glands of the Rhipicephalus (Boophilus) microplus female ticks were studied, using morphological,histochemical and ultrastructural citochemistry techniques in individuals at two different feeding stages (initial: 24-48 hours of attachment; weigh lower than 0.03g, and semi-engorged : 4-5 days of attachment; weigh around 0.13 and 0.25g ), in attempt to verifying the changes that would occur in the glandular tissue at this feeding period and identifying when the degeneration process would start, besides establishing which cell death type would be involved. The salivary glands from females at beginning of feeding showed their cells strongly positive to ATPase and efficient for the vital stain exclusion, being thus, active or at initial stages of degeneration. The nuclei, in a general way, present themselves preserved, being thus discarded the signs of the apoptosis occurrence in this stage. The acid phosphatase localization demonstrated this enzyme participation in the metabolic activity of these organs, regulating the secretory process and degrading proteins. Females at semi-engorged stage showed glands with degenerative characteristics, as loss of membrane especialization, presence of mielinic figures, autophagic vacuoles, lysosomes, besides nuclear alterations as chromatin condensation and marginalization, blebs formation and nuclear fragmentation. As the feeding process progressed, there was a acid phosphatase enzyme increase, however, the acini maintained strongly ATPase- positive. The results here obtained showed that the R. (B.) microplus salivary glands in females at... (Complete abstract, click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:00Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-06-30Bitstream added on 2014-06-13T20:10:22Z : No. of bitstreams: 1 sanches_gs_me_rcla.pdf: 728083 bytes, checksum: 12fcc56f356d12f1c615de733e01452c (MD5) / O presente estudo apresenta a descrição da morfologia externa de larvas e a redescrição de ninfas do carrapato Amblyomma brasiliense, utilizando microscopia de luz, lupa estereoscópica e microscopia eletrônica de varredura. As larvas apresentaram a base do capítulo retangular, palpos curtos e idiossoma arredondado, coxa I com dois espinhos, sendo o externo mais longo que o interno e coxas II e III com um espinho, enquanto as ninfas apresentaram a base do capítulo também retangular, com córnua pontiaguda, idiossoma oval, coxa I com dois espinhos evidentes, sendo o externo mais longo que o interno, coxas II e III com um espinho curto em cada uma, e coxa IV, com um espinho muito pequeno e a presença de tubérculos quitinosos na superfície interna da borda posterior dos festões. Além disso, a morfologia do ovário e o processo de dinâmica da vitelogênese dos ovócitos de fêmeas ingurgiradas desta espécie de carrapato também são apresentados. O ovário, classificado como panoístico por não apresentar células foliculares e nutridoras, consiste em estrutura tubular única e contínua com ovócitos de vários tamanhos e diferentes estádios de desenvolvimento, presos a parede epitelial por meio do pedicelo. Tais ovócitos são aqui classificados em cinco estádios de acordo com a aparência do citoplasma, observação da vesícula germinal, aspecto dos grãos de vitelo e deposição do córion. Pela primeira vez foi observado em carrapatos ovócitos com o córion esculturado. / The present study shows the external morphological description of larvae and the redescription of nymphs of Amblyomma brasiliense ticks under light microscope, stereoscopic microscope and scanning electron microscope. Larvae present basis capituli rectangular, short palpi, idiosoma rounded, coxa I with two spurs being the external longer than the internal one and coxae II and III each with one short spur. Nymphs present basis capituli rectangular with a sharp pointed cornua, oval idiosoma with scutum reaching coxa III and coxae I with two evident spurs being the external longer than the internal one; coxae IIIII each with one short spur and coxae IV with a very short spur and chitinous tubercles on internal surface of posterior border of festoons. Furthermore, the ovary morphology and the dynamics of the vitellogenesis process in oocytes of Amblyomma brasiliense engorged females. The ovary is classified as the panoistic type; therefore, it lacks nurse and follicular cells. This organ consists of a single tubular structure, continuous, with oocytes of various sizes and at different developmental stages remain attached to the ovary through a cellular pedicel. The oocytes were classified into five stages described according to cytoplasm appearance, presence of the germ vesicle, yolk granules aspects, and chorion deposition. For the first time was related in ticks oocytes chorium sculptured.

Made available in DSpace on 2016-09-27T13:40:00Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-12-01. Added 1 bitstream(s) on 2016-09-27T13:45:09Z : No. of bitstreams: 1 000868779.pdf: 1054511 bytes, checksum: 839f416844e6ec28b8daeb9e6fd8b61c (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Ehrlichiose Monocítica Canina (EMC) é uma enfermidade infecciosa, potencialmente fatal, causada por Ehrlichia canis, transmitida pelo carrapato Rhipicephalus sanguineus. O curso da enfermidade é dividido em três fases: aguda, subclínica e crônica. O objetivo deste estudo foi avaliar as lesões anatomopatológicas que ocorreram no parênquima e no endotélio vascular do encéfalo, coração, pulmão, fígado, rim, baço e linfonodo mesentérico de 16 cães que vieram a óbito acometidos pela EMC na fase crônica. Esses animais apresentaram sinais clínicos neurológicos, porém na avaliação microscópica não exibiam lesões que justificassem esses sintomas. No coração foi possível notar a presença de alterações vasculares visíveis, como Coagulação Intravascular Disseminada, necrose dos miócitos próximos a esses vasos, congestão e hemorragias devido à severa trombocitopenia desenvolvida durante a infecção. No pulmão notou-se pneumonia em grande parte dos animais estudados. O fígado também se apresentou acometido, mas não diretamente pela infecção, mas sim por consequência de outros fatores prejudiciais relacionados à doença. Em todos os rins avaliados a glomerulonefrite se mostrou presente. Em todos os 16 animais pode-se notar a esplenomegalia. O linfonodo mesentérico não é uma estrutura muito estudada em animais com EMC, mas pode-se notar um grande infiltrado plasmocitário. No entanto, cocluiu-se que a vasculite foi responsável por grande parte das lesões, sendo predominante o infiltrado plasmocitário / Canine Monocytic Ehrlichiosis (CME) is an infectious disease, potentially fatal, caused by Ehrlichia canis, transmitted by Rhipicephalus sanguineus. The course of the disease is divided into three stages: acute, chronic and subclinical. The aim of this study was to evaluate the pathological lesions that occurred in the parenchyma and the vascular endothelium of the brain, heart, lung, liver, kidney, spleen and mesenteric lymph node of 16 dogs that died affected by CME in the chronic phase. These animals showed neurological signs, but in microscopic evaluation showed no injury to justify these symptoms. In the heart it was possible to notice the presence of visible vascular abnormalities, such as disseminated intravascular coagulation, necrosis of the myocytes near these vessels, congestion and bleeding due to severe thrombocytopenia developed during infection. In the lung was noted pneumonia in most animals studied. The liver also appeared affected, but not directly by infection, but as a result of other harmful factors related to the disease. In all evaluated kidneys showed this glomerulonephritis. In all 16 animals can be noted splenomegaly. The mesenteric lymph node is not a very studied structure in animal CME, but you may notice a large plasma cell infiltrate. However, the vasculitis was responsible for much of the lesions, predominant being the plasma cell infiltrate