Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Excessive sunlight exposure can cause several forms of potentially malignant disorders, including actinic cheilitis, a precursor lesion of lip squamous cell carcinoma. The objective of this research was to investigate the actinic cheilitis prevalence among fishermen in the southern coast of Sergipe, Brazil. A cross-sectional study was carried out involving a sample (n = 210) of fishermen on this region. Data related to age, skin type, daily and accumulated solar radiation exposure time, smoking, sun protection and the presence of actinic cheilitis were collected. A Poisson regression model estimated the prevalence ratio of variables. Actinic cheilitis prevalence was 11.4% (95% CI: 7.8 - 16.4%). The disease was more prevalent in fair-skinned fishermen (PR = 3.2), aged 50 years (PR = 2.3), with a time of cumulative exposure to solar radiation more than 30 years (PR = 4.0), duration of daily exposure more than four hours (PR = 8.0) and no using of sun protection (PR = 2.1). In the presence of all independent variables, the probability of finding the disease in a fisherman in this region is 55%. This probability decreases to 6% with the use of sunscreens and with sun exposure of less than four hours daily. Fishermen working at the south coast of Sergipe constitute a population at risk for cancer of the lip, making necessary the establishment of public health policies aimed specifically to encourage the use of sun protection and a lower burden of daily exposure to solar radiation. / A exposição excessiva à radiação solar pode causar várias formas de alterações teciduais cancerizáveis, dentre elas a queilite actínica, uma lesão precursora do carcinoma de células escamosas e de lábio. O objetivo dessa pesquisa foi verificar a prevalência da queilite actínica em pescadores do litoral sul de Sergipe, Brasil. Um estudo transversal foi realizado envolvendo uma amostra (n = 210) de pescadores desta região. Dados relacionados à idade, cor da pele, tempo de exposição diária e acumulada à radiação solar, uso de tabaco, medidas de proteção ao sol e presença de queilite actínica foram coletados. Um modelo de regressão de Poisson foi criado para estimar a razão de prevalência das variáveis. A queilite actínica teve uma prevalência de 11,4% (IC 95%, 7,8 16,4%). A doença foi mais prevalente em pescadores de pele clara (RP = 3,2), com idade superior a 50 anos (RP = 2,3), tempo de exposição acumulada à radiação solar maior do que 30 anos (RP = 4,0); tempo de exposição diária maior do que quatro horas (RP = 8,0) e que não usavam fotoprotetores (RP = 2,1). Na presença de todas as variáveis independentes, a probabilidade de encontrarmos a doença em um pescador nessa região é de 55%. Esta probabilidade decresce para 6% quando do uso de fotoprotetores e uma exposição solar menor do que 4 horas diárias. Os pescadores do litoral sul de Sergipe se constituem em uma população de risco para o câncer de lábio, fazendo-se necessária a implantação de políticas públicas de saúde voltadas especificamente para o estímulo ao uso de fotoprotetores e uma menor carga de exposição diária à radiação solar.

O carcinoma epidermóide de lábio (CEL) e a queilite actínica (QA) são condições que atingem o vermelhão do lábio e são causadas pela exposição crônica e excessiva à radiação ultravioleta (UV) do sol. A absorção da radiação UV produz dois tipos predominantes de danos ao DNA, os dímeros de pirimidina-ciclobutanos (CPD) e os fotoprodutos 6-4 pirimidina-pirimidona (6-4PP). Se não forem reparadas estas lesões induzidas por UV podem dar lugar a mutações em seqüências de DNA. Essas mutações compreendem a transição CT e CC TT em seqüências dipirimidínicas, conhecidas como mutações com assinatura UV. CPDs e 6-4PPs são primariamente reparadas por um sistema de reparo de DNA chamado reparo por excisão de nucleotídeo (NER). Polimorfismos presentes em genes do NER podem gerar maior susceptibilidade ao desenvolvimento de vários tipos de câncer, incluindo o câncer de pele. O presente trabalho teve por objetivos: realizar levantamento epidemiológico de pacientes com QA e CEL bem como avaliar seus hábitos de exposição solar; verificar se os polimorfismos genéticos XPD (Asp312Asn) e XPD (Lys751Gln) estão relacionados com risco para o desenvolvimento de QA e verificar a expressão imunoistoquímica das proteínas XPC, XPF e dos CPDs em CEL e QA. Os hábitos de exposição solar e os dados epidemiológicos foram coletados através de um questionário aplicado a 84 pacientes com diagnóstico prévio de QA, 6 pacientes com diagnóstico de CEL e 63 indivíduos sem lesões. As reações de imunoistoquímica foram realizadas em 38 casos de QA distribuídos nos diferentes graus de displasia epitelial, 9 casos de CEL e 7 casos sem alterações no epitélio. O estudo dos polimorfismos contou com 41 indivíduos no grupo controle e 63 no grupo QA, dos quais o DNA foi extraído a partir de amostras de raspado bucal. Através da entrevista, obtiveram-se informações condizentes com as da literatura internacional além de dados inéditos sobre hábitos de exposição solar de pacientes com QA. A análise dos genótipos mostrou que indivíduos que têm o genótipo AG no códon 312 do gene XPD apresentam maior risco de desenvolvimento de QA. O fato de ter residido em área rural e exercido atividades profissionais ao ar livre também estavam associados ao desenvolvimento da QA. Os achados da análise imunoistoquímica, nos permitem sugerir que a eficiência do NER está prejudicada na QA e que, portanto este sistema de reparo é importante para o desenvolvimento da fotocarcinogênese em lábio. Além disso, os casos que mostram acúmulo de CPD associado à ausência de XPC e XPF são provavelmente, os mais propensos a sofrerem transformação maligna, já que CPDs não reparados podem levar ao aparecimento de mutações no DNA. / Lip squamous cell carcinoma (LSCC) and actinic cheilitis (AC) are both conditions affecting the vermilion border of the lip which are caused by chronic and excessive exposure to the ultraviolet (UV) radiation in sunlight. Absorption of UV radiation produces two predominant types of DNA damage, cyclobutane pyrimidine dimers (CPD) and pyrimidine (6-4) pyrimidone photoproducts (6-4PP). If not repaired, UVinduced DNA lesions can lead to mutations in the DNA sequences. These mutations are in the form of C-T and CC-TT transitions in dipyrimidine sequences, known as UV signature mutations. CPDs and 6-4 PPs are primarily repaired by a DNA repair system called nucleotide excision repair (NER). Polymorphisms present in NER genes are related to the risk of developing varied types of cancer, including skin cancer. The objectives of the present study were: to carry out epidemiological data of patients with AC and LSCC as well as to evaluate their habits of solar exposure; to verify if genetic polymorphisms XPD (Asp312Asn) and XPD (Lys751Gln) are related to the risk of developing AC and to analyze the immunoexpression of XPC and XPF proteins and CPDs in LSCC and AC. Solar exposure habits and epidemiological data were collected through an interview survey, which was administered to 84 patients with prior diagnosis of AC, 6 patients with LSCC diagnosis and 63 individuals without injuries. Immunohistochemmical reactions were carried out on 38 cases of AC distributed into the different degrees of epithelial dysplasia, 9 cases of CEL and 7 cases without epithelium alterations. The polymorphisms analysis was performed with 41 individuals in control group and 63 in AC group, from which the DNA was extracted from buccal scraped samples. The survey provided information that is on agreement with those in international literature besides unpublished data about solar exposure habits of AC patients. The analysis of the genotypes showed that individuals with the AG genotype in the codon 312 of the XPD gene, present higher risk to AC. Rural residence and outdoor working were also associated to the development of AC. Immunohistochemical findings suggest that in AC, there is a deficiency in NER; therefore, this DNA repair system is important to the lip photocarcinogenesis development. Furthermore, the cases which show CPD accumulation associated with XPC and XPF absence are probably, more prone to undergo malignant changes, since not repaired CPDs may lead to mutations in DNA.

A queilite actínica (QA) é o resultado da exposição crônica dos lábios à radiação ultravioleta do sol. É considerada uma lesão cancerizável e calcula -se que cerca de 10% a 20% evoluirão para carcinoma epidermóide. Já foi sugerido que virtualmente todos os carcinomas epidermóides de lábio (CEL) iniciem como QA. Sabe-se que as radiações solares têm a capacidade de alterar o DNA e que, nesse contexto, os genes de reparo de DNA têm papel fundamental em reparar essas alterações e limitar os danos causados. Porém, estes genes também podem ser vítimas das radiações ultravioletas do sol. O objetivo deste trabalho foi estudar a participação dos genes de reparo de mau pareamento (RMP) do DNA em QA de diferentes graus de atipia e comparar os achados ao carcinoma de lábio relacionado à QA. Para tanto, foram analisadas nestas lesões a expressão e distribuição das proteínas codificadas por dois destes genes, hMLH1 e hMSH6, através da imunoistoquímica. Foi observado que a expressão das duas proteínas diminuía de acordo com o agravamento da indiferenciação celular das lesões. A partir disto, pode-se concluir que a diminuição na expressão de hMLH1 e hMSH6 parece estar relacionada com a progressão do grau de atipia nas QA, e, conseqüentemente, com a tumorigênese do CEL. Além disso, a proteína hMSH6 não pareceu ter um papel importante no reparo do DNA do epitélio labial normal. / Actinic cheilitis (AC) results from chronic and excessive exposure of the lips to the ultraviolet radiation in sunlight. AC is recognized as a potentially malignant condition and it is estimated that 10% to 20% will become lip squamous cell carcinoma (LSCC). It has been suggested that virtually every LSCC was initially AC. It is well known that solar radiation causes DNA damage and, in this context, the DNA repair systems play an extremely important role in restoring the injuries. The purpose of this study was to evaluate the participation of the mismatch repair (MMR) system in AC with all grades of dysplasia, as well as, LSCC related to AC. The protein expression and distribution of two of these genes, hMLH1 and hMSH6 were analyzed by means of immunohistochemistry. The results have shown an association between decreased expression of hMLH1 and hMSH6 proteins and the progression of the dysplasia in AC and, therefore, LSCC carcinogenesis. In addition, the hMSH6 protein does not seem to have a primary role in DNA repair of the normal lip epithelium.

Este estudo propôs-se a avaliar lesões de lábio inferior de pescadores nas praias de Florianópolis, Santa Catarina, Brasil, através de análise clínica, cito e anatomopatológica. Foi realizada análise citológica de esfregaços do lábio inferior de todos os pescadores (125) cuja celularidade foi adequada (83,2% dos casos). Em 16 pescadores a avaliação clínica indicou a necessidade de biópsia, nos quais observaram-se 4 casos de lesão maligna (3,2%) e 12 de graus variados de displasia (9,6%). A análise citológica dos esfregaços não foi capaz de detectar nenhuma das alterações displásicas ou malignas diagnosticadas nas biópsias. Todos os casos em que as características clínicas indicaram a necessidade de biópsia revelaram alterações significativas na análise histopatológica. Concluiu-se que a incidência de lesões displásicas e malignas é alta na população de pescadores estudada e que está fortemente associada às manifestações clínicas correspondentes à alteração na delimitação entre vermelhão do lábio e pele e aumento da consistência à palpação, não sendo a citologia esfoliativa adequada, apenas em bases morfológicas, para avaliação de queilite actínica e câncer de lábio. / This study proposed to evaluate the injury of lower lip of fishermen on the beaches of Florianópolis, Santa Catarina, Brazil, through clinical, cytopathological and histopathological analysis. Cytological examination was performed on smears of the lower lip of all fishermen (125) whose cellularity was satisfactory in 83,2% of the cases. On 16 fishermen the clinical evaluation indicated the need of biopsy. In 4 cases (3.2%) it was observed malignant lesions and in 12 cases (9,6%) it was observed differents degrees of dysplasia. The cytological analysis was unable to detect any of the dysplastic changes or malignancies diagnosticated in the histopathological study. In all cases where the clinical features indicated the need of biopsy it had significant changes in microscopic analysis. It was concluded that the incidence of malignant and premalignant lesions is high in this fishermen studied population, which is strongly associated with the clinical manifestations corresponding to blurring of vermilion margin and infiltration, and the exfoliative cytology is inadequate, only in morphological basis, to detect dysplastic alterations and cancer of the lip.

Este estudo propôs-se a avaliar lesões de lábio inferior de pescadores nas praias de Florianópolis, Santa Catarina, Brasil, através de análise clínica, cito e anatomopatológica. Foi realizada análise citológica de esfregaços do lábio inferior de todos os pescadores (125) cuja celularidade foi adequada (83,2% dos casos). Em 16 pescadores a avaliação clínica indicou a necessidade de biópsia, nos quais observaram-se 4 casos de lesão maligna (3,2%) e 12 de graus variados de displasia (9,6%). A análise citológica dos esfregaços não foi capaz de detectar nenhuma das alterações displásicas ou malignas diagnosticadas nas biópsias. Todos os casos em que as características clínicas indicaram a necessidade de biópsia revelaram alterações significativas na análise histopatológica. Concluiu-se que a incidência de lesões displásicas e malignas é alta na população de pescadores estudada e que está fortemente associada às manifestações clínicas correspondentes à alteração na delimitação entre vermelhão do lábio e pele e aumento da consistência à palpação, não sendo a citologia esfoliativa adequada, apenas em bases morfológicas, para avaliação de queilite actínica e câncer de lábio. / This study proposed to evaluate the injury of lower lip of fishermen on the beaches of Florianópolis, Santa Catarina, Brazil, through clinical, cytopathological and histopathological analysis. Cytological examination was performed on smears of the lower lip of all fishermen (125) whose cellularity was satisfactory in 83,2% of the cases. On 16 fishermen the clinical evaluation indicated the need of biopsy. In 4 cases (3.2%) it was observed malignant lesions and in 12 cases (9,6%) it was observed differents degrees of dysplasia. The cytological analysis was unable to detect any of the dysplastic changes or malignancies diagnosticated in the histopathological study. In all cases where the clinical features indicated the need of biopsy it had significant changes in microscopic analysis. It was concluded that the incidence of malignant and premalignant lesions is high in this fishermen studied population, which is strongly associated with the clinical manifestations corresponding to blurring of vermilion margin and infiltration, and the exfoliative cytology is inadequate, only in morphological basis, to detect dysplastic alterations and cancer of the lip.

A queilite actínica (QA) é o resultado da exposição crônica dos lábios à radiação ultravioleta do sol. É considerada uma lesão cancerizável e calcula -se que cerca de 10% a 20% evoluirão para carcinoma epidermóide. Já foi sugerido que virtualmente todos os carcinomas epidermóides de lábio (CEL) iniciem como QA. Sabe-se que as radiações solares têm a capacidade de alterar o DNA e que, nesse contexto, os genes de reparo de DNA têm papel fundamental em reparar essas alterações e limitar os danos causados. Porém, estes genes também podem ser vítimas das radiações ultravioletas do sol. O objetivo deste trabalho foi estudar a participação dos genes de reparo de mau pareamento (RMP) do DNA em QA de diferentes graus de atipia e comparar os achados ao carcinoma de lábio relacionado à QA. Para tanto, foram analisadas nestas lesões a expressão e distribuição das proteínas codificadas por dois destes genes, hMLH1 e hMSH6, através da imunoistoquímica. Foi observado que a expressão das duas proteínas diminuía de acordo com o agravamento da indiferenciação celular das lesões. A partir disto, pode-se concluir que a diminuição na expressão de hMLH1 e hMSH6 parece estar relacionada com a progressão do grau de atipia nas QA, e, conseqüentemente, com a tumorigênese do CEL. Além disso, a proteína hMSH6 não pareceu ter um papel importante no reparo do DNA do epitélio labial normal. / Actinic cheilitis (AC) results from chronic and excessive exposure of the lips to the ultraviolet radiation in sunlight. AC is recognized as a potentially malignant condition and it is estimated that 10% to 20% will become lip squamous cell carcinoma (LSCC). It has been suggested that virtually every LSCC was initially AC. It is well known that solar radiation causes DNA damage and, in this context, the DNA repair systems play an extremely important role in restoring the injuries. The purpose of this study was to evaluate the participation of the mismatch repair (MMR) system in AC with all grades of dysplasia, as well as, LSCC related to AC. The protein expression and distribution of two of these genes, hMLH1 and hMSH6 were analyzed by means of immunohistochemistry. The results have shown an association between decreased expression of hMLH1 and hMSH6 proteins and the progression of the dysplasia in AC and, therefore, LSCC carcinogenesis. In addition, the hMSH6 protein does not seem to have a primary role in DNA repair of the normal lip epithelium.

A hipótese das células-tronco tumorais vem ganhando destaque como um dos principais modelos para explicar a formação de neoplasias malignas. CD44, ALDH1 e p75NTR são alguns dos marcadores usados com êxito para separar a subpopulação de células-tronco tumorais, mas sua expressão imuno-histoquímica nunca foi estudada em lesões de lábio causadas pela radiação ultravioleta (UV). O objetivo deste estudo foi avaliar a expressão de CD44, ALDH1 e p75NTR em lábio normal (LN), queilite actínica (QA) e carcinoma epidermoide de lábio (CEL), além de estudar a expressão de p53 e correlacioná-la com a expressão dos marcadores de células-tronco tumorais. Para isso, foram selecionados blocos de material parafinado provenientes do serviço de patologia oral, resultando em 4 casos de LN, 43 casos de QA, subdivididos de acordo com o grau de displasia, e 20 casos de CEL. Os casos foram submetidos à reação imuno-histoquímica. Todos os casos foram positivos para CD44, com expressão membranosa e padrão de marcação praticamente invariável entre os grupos de QA e CEL (p=0,09). Os casos de LN foram negativos para o ALDH1; 51,1% e 55,5 % dos casos de QA e CEL, respectivamente, forma positivas para o ALDH1. A marcação era citoplasmática, geralmente em poucas células. Não houve diferença na expressão de ALDH1 entre os graus de displasia epitelial (p=0,37) e quando CEL era comparado à QA (p=0,9). Todos os casos de LN foram positivos para p75NTR; 95,3% e 80% dos casos de QA e CEL foram positivos para p75NTR. A expressão era membranosa/citoplasmática em LN e QA, em camada basal e parabasal, e citoplasmática em CEL, na região periféricas das ilhas. Houve diferença na expressão de p75NTR entre os grupos de displasia epitelial (p<0,001), mas não entre QA e CEL (p=0,4). Todos os casos de LN e QA foram positivos para p53; 80% dos casos de CEL foram positivos. A expressão foi nuclear apenas, mas não houve diferença na expressão de p53 entre os graus de displasia epitelial (p=0,33) e entre QA e CEL (0,24). Não houve correlação significativa entre CD44, ALDH1 e p75NTR, quando avaliados entre si, e não houve correlação entre p53 e os marcadores de células-tronco tumorais. Os marcadores de células-tronco tumorais estão presentes em lesões potencialmente malignas e malignas de lábio, porém suas expressões não variaram entre QA e CEL. A expressão de p75NTR variou entre os graus de displasia epitelial. / Cancer stem cell hypothesis is becoming one of the main models to explain the generation of malignant neoplasms. CD44, ALDH1 and p75NTR are some of the markers successfully used to sort the subpopulation of cancer stem cells. However, their immunohistochemical expression were not studied in lip lesions caused by ultraviolet radiation (UV) so far. The aim of this study was to evaluate CD44, ALDH1 and p75NTR expression in normal lip (NL), actinic cheilitis (AC) and lip squamous cell carcinoma (LSSC). We also evaluated p53 expression and its correlation with the expression of the stem cell markers. In order to do that, paraffin-embbeded cases were selected from the oral pathology service, giving a total of 4 cases of NL, 43 cases of AC and 20 cases of LSCC. Immunohistochemical staining was performed in all the sample. All cases were positive for CD44, showing a membranous staining and a pattern of expression almost invariable between the groups AC and LSSC (p=0,09). All cases of NL were negative for ALDH1; 51,1% of AC and 55,5% of LSCC were positive. It was observed cytoplasmic staining, usually in a few cells. The ALDH1 expression showed no difference between the grades of epithelial dysplasia (p=0,37) and between AC and LSCC (p=0,9). All cases of NL were positive for p75NTR; 95,3% of AC and 80% of LSCC were positive for p75NTR. We observed membranous/cytoplasmic staining in NL and AC in the basal and parabasal layer and cytoplasmic staining in LSCC in the peripheral layers of the tumor islands. P75NTR showed difference in the expression among the grades of epithelial dysplasia (p<0,001) but showed no difference between the groups AC and LSCC (p=0,4). All cases of NL and AC were positive for p53; 80% of LSCC were positive for p53. The protein showed nuclear expression with no difference among the grades of epithelial dysplasia (p=0,33) and between AC and LSCC (0,24). There was no significant correlation among CD44, ALDH1 and p75NTR was observed and no significant correlation between p53 expression and the stem cell markers. The stem cell markers are present in potentially malignant and malignant lesions of the lip, but their expression show no variation between AC and LSCC. The expression of p75NTR varied between the grades of epithelial dysplasia.

A hipótese das células-tronco tumorais vem ganhando destaque como um dos principais modelos para explicar a formação de neoplasias malignas. CD44, ALDH1 e p75NTR são alguns dos marcadores usados com êxito para separar a subpopulação de células-tronco tumorais, mas sua expressão imuno-histoquímica nunca foi estudada em lesões de lábio causadas pela radiação ultravioleta (UV). O objetivo deste estudo foi avaliar a expressão de CD44, ALDH1 e p75NTR em lábio normal (LN), queilite actínica (QA) e carcinoma epidermoide de lábio (CEL), além de estudar a expressão de p53 e correlacioná-la com a expressão dos marcadores de células-tronco tumorais. Para isso, foram selecionados blocos de material parafinado provenientes do serviço de patologia oral, resultando em 4 casos de LN, 43 casos de QA, subdivididos de acordo com o grau de displasia, e 20 casos de CEL. Os casos foram submetidos à reação imuno-histoquímica. Todos os casos foram positivos para CD44, com expressão membranosa e padrão de marcação praticamente invariável entre os grupos de QA e CEL (p=0,09). Os casos de LN foram negativos para o ALDH1; 51,1% e 55,5 % dos casos de QA e CEL, respectivamente, forma positivas para o ALDH1. A marcação era citoplasmática, geralmente em poucas células. Não houve diferença na expressão de ALDH1 entre os graus de displasia epitelial (p=0,37) e quando CEL era comparado à QA (p=0,9). Todos os casos de LN foram positivos para p75NTR; 95,3% e 80% dos casos de QA e CEL foram positivos para p75NTR. A expressão era membranosa/citoplasmática em LN e QA, em camada basal e parabasal, e citoplasmática em CEL, na região periféricas das ilhas. Houve diferença na expressão de p75NTR entre os grupos de displasia epitelial (p<0,001), mas não entre QA e CEL (p=0,4). Todos os casos de LN e QA foram positivos para p53; 80% dos casos de CEL foram positivos. A expressão foi nuclear apenas, mas não houve diferença na expressão de p53 entre os graus de displasia epitelial (p=0,33) e entre QA e CEL (0,24). Não houve correlação significativa entre CD44, ALDH1 e p75NTR, quando avaliados entre si, e não houve correlação entre p53 e os marcadores de células-tronco tumorais. Os marcadores de células-tronco tumorais estão presentes em lesões potencialmente malignas e malignas de lábio, porém suas expressões não variaram entre QA e CEL. A expressão de p75NTR variou entre os graus de displasia epitelial. / Cancer stem cell hypothesis is becoming one of the main models to explain the generation of malignant neoplasms. CD44, ALDH1 and p75NTR are some of the markers successfully used to sort the subpopulation of cancer stem cells. However, their immunohistochemical expression were not studied in lip lesions caused by ultraviolet radiation (UV) so far. The aim of this study was to evaluate CD44, ALDH1 and p75NTR expression in normal lip (NL), actinic cheilitis (AC) and lip squamous cell carcinoma (LSSC). We also evaluated p53 expression and its correlation with the expression of the stem cell markers. In order to do that, paraffin-embbeded cases were selected from the oral pathology service, giving a total of 4 cases of NL, 43 cases of AC and 20 cases of LSCC. Immunohistochemical staining was performed in all the sample. All cases were positive for CD44, showing a membranous staining and a pattern of expression almost invariable between the groups AC and LSSC (p=0,09). All cases of NL were negative for ALDH1; 51,1% of AC and 55,5% of LSCC were positive. It was observed cytoplasmic staining, usually in a few cells. The ALDH1 expression showed no difference between the grades of epithelial dysplasia (p=0,37) and between AC and LSCC (p=0,9). All cases of NL were positive for p75NTR; 95,3% of AC and 80% of LSCC were positive for p75NTR. We observed membranous/cytoplasmic staining in NL and AC in the basal and parabasal layer and cytoplasmic staining in LSCC in the peripheral layers of the tumor islands. P75NTR showed difference in the expression among the grades of epithelial dysplasia (p<0,001) but showed no difference between the groups AC and LSCC (p=0,4). All cases of NL and AC were positive for p53; 80% of LSCC were positive for p53. The protein showed nuclear expression with no difference among the grades of epithelial dysplasia (p=0,33) and between AC and LSCC (0,24). There was no significant correlation among CD44, ALDH1 and p75NTR was observed and no significant correlation between p53 expression and the stem cell markers. The stem cell markers are present in potentially malignant and malignant lesions of the lip, but their expression show no variation between AC and LSCC. The expression of p75NTR varied between the grades of epithelial dysplasia.

Made available in DSpace on 2014-12-17T15:32:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DmitryJSS_DISSERT.pdf: 3987707 bytes, checksum: acff9df3451c8d6fc62a6e590d027fca (MD5) Previous issue date: 2011-12-09 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico / Lip squamous cell carcinoma (SCC) may develop from a premalignant condition, actinic cheilitis (AC) in 95% of the cases. Both premalignant and neoplastic lip diseases are caused mainly by chronic exposure to the ultraviolet component of solar radiation, especially UVB. This exposure causes disruption of the cell cycle and damage to DNA repair systems, like mismatch repair, altering proteins repair as hMLH1 and hMSH2. This research aimed to investigate the immunohistochemical expression of hMLH1 and hMSH2 proteins in lower lip SCCs and ACs, providing additional information about carcinogenesis of the lower lip. The sample consisted 40 cases of ACs and 40 cases of lower lip SCCs. Histological sections of 3 &#956;m were submitted to immunoperoxidase method, for immunohistochemical analysis of lesions were counted in 1000 cells (positive and negative), data were evaluated both in absolute numbers and percentage of immunostained cells, the latter by assigning scores. Associations of the variables and comparative analysis of biomarker expression were performed by Fisher s exact and Pearson s chi-square, "t" student, one-way ANOVA, Mann- Whitney e Kruskal-Wallis tests. The level of significance was 5%. It was found that, in lower lip SCC, the mean of the proteins was higher in female patients (hMLH1= 369,80 + 223,98; hMHS2 = 534,80 + 343,62), less than 50 years old (hMLH1 = 285,50 + 190,65; hMHS2 = 540,00 + 274,79) and classified as low-grade malignancy (hMLH1 = 264,59 + 179,21; hMHS2 = 519,32 + 302,58), in these data only to sex, for hMLH1 protein, was statistically significant (p=0.034). Comparing the different lesions, we observed that for both hMLH1 and hMSH2 protein, the average of positive epithelial cells decreased as the lesion was graded at later stages. The ACs classified without dysplasia or mild dysplasia had the highest average of immunostained cells (hMLH1 = 721.23 + 88.116; hMHS2 = 781.50 + 156.93). The ACs classified as moderate or severe dysplasia had intermediate values (hMLH1 = 532,86 + 197,72; hMHS2 = 611,14 + 172,48) and SSCs of the lower lip had the lowest averages (hMLH1 = 255,03 + 199,47; hMHS2 = 518,38 + 265,68). There was a statistically significant difference between groups (p<0.001). In conclusion, our data support the hypothesis that changes in immunoexpression of these proteins is related to the process of carcinogenesis of the lower lip / O carcinoma epiderm?ide (CE) de l?bio inferior evolui, em 95% dos casos, de uma condi??o potencialmente maligna denominada queilite act?nica (QA). Ambas les?es s?o causadas principalmente pela exposi??o cr?nica ao componente ultravioleta da radia??o solar, especialmente o subtipo UVB. Esta exposi??o pode causar altera??es no ciclo celular e danos aos sistemas de reparo do DNA, como o mismatch repair, conduzindo a altera??es em prote?nas de reparo, como hMLH1 e hMSH2. Esta pesquisa objetivou investigar a express?o imunoistoqu?mica das prote?nas hMLH1 e hMSH2 em CEs de l?bio inferior e QAs com graus variados de displasia epitelial e desse modo tentar fornecer informa??es adicionais sobre a carcinog?nese de l?bio inferior. A amostra foi composta por 40 casos de QAs e 40 casos de CEs de l?bio inferior. Cortes histol?gicos de 3 &#956;m foram submetidos ao m?todo da imunoperoxidase, para a an?lise imunoistoqu?mica das les?es foram contadas 1000 c?lulas (positivas e negativas), os dados foram avaliados tanto em n?meros absolutos quanto em percentual de c?lulas imunomarcadas, este ?ltimo atrav?s da atribui??o de escores. Para as associa??es e compara??es das m?dias e escores da imunoexpress?o das prote?nas foram utilizados os testes estat?sticos Qui-quadrado de Pearson, Exato de Fisher, t student, ANOVA one-way, Mann-Whitney e Kruskal-Wallis. O n?vel de signific?ncia adotado foi de 5%. Verificou-se que, em CEs de l?bio inferior, as m?dias das prote?nas foram maiores em pacientes do sexo feminino (hMLH1 369,80 + 223,98 =; hMHS2 = 534,80+343,62), com menos de 50 anos (hMLH1 = 285,50 + 190,65; hMHS2 = 540,00 + 274,79) e que foram classificados como de baixo grau de malignidade (hMLH1 = 264,59 + 179,21; hMHS2 = 519,32 + 302,58), apenas a vari?vel sexo (prote?na hMLH1) apresentou signific?ncia estat?stica (p=0,034). Ao comparar as diferentes les?es, observou-se que em ambas prote?nas, a m?dia das c?lulas epiteliais positivas diminuiu conforme a les?o era gradada em est?gios mais avan?ados. As QAs classificadas sem displasia ou com displasia epitelial leve apresentaram a maior m?dia de c?lulas imunomarcadas (hMLH1 = 721,23 + 88,116; hMHS2 = 781,50 + 156,93). As QAs gradadas como displasia epitelial moderada ou severa apresentaram valores intermedi?rios (hMLH1 = 532,86 + 197,72; hMHS2 = 611,14 + 172,48) e os CEs de l?bio inferior apresentaram as menores m?dias (hMLH1 = 255,03 + 199,47; hMHS2 = 518,38 + 265,68), observou-se diferen?a estat?stica significante entre os grupos (p<0.001). Em conclus?o, os dados deste estudo sustentam a hip?tese de que altera??es na imunoexpress?o destas prote?nas est?o relacionadas ao processo de carcinog?nese de l?bio inferior

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Objective: To evaluate tissue and salivary expressions of HLA-G, HLA-E and PD-L1 molecules and IL-10 and TGF-β1, -β2 e -β3 cytokines in OPMDs, and relate such immunomodulatory mediators with antitumor immune response and potential for malignant transformation of lesions. Methods: Samples of patients with OL (n= 80) were submitted to immunohistochemistry and ELISA techniques to evaluate tissue and salivary expressions of the HLA-G, HLA-E, PD-L1, IL-10, TGF-β1, TGF-β2 and TGF-β3. In addition, samples of patients with QA (n= 30) were submitted to immunohistochemistry technique to evaluation tissue expression of HLA-G, HLA-E, PD-L1 and IL-10. Control group (n= 20) consisted of saliva and tissue of healthy individuals. The immunostained tissue samples were measured using a semi-quantitative method in association with staining intensity. The expression of these molecules and cytokines were related with the malignant potential of the lesions (epithelial dysplasia grading, proliferation- Ki-67 and apoptosis index- mutated p53). Moreover, the association with the density of granzyme B (GB+) cells and regulatory T cells FOXP3+ was investigated. The statistical tests used were: Fisher’s exact or Pearson Chi-Squared, Mann-Whitney and Kruskal- Wallis tests. The significance level was set at P < 0.05. Results: Fifteen samples showed severe dysplasia, twenty moderate, thirty-two mild and thirteen non-dysplasia. Forty samples (50%) of OL presented combined high Ki-67/p53. Irrespective of the severity of epithelial dysplasia and proliferation/apoptosis index in OL, an overexpression of HLA-G, -E, PD-L1, IL-10, TGF-β2 and -β3 was found in OL when compared with control (P < 0.05). The number of GB+ and FOXP3+ cells in OL was similar to control. Salivary concentration of sHLA-G, IL-10 and TGF-β did not allow distinction between OL patients and healthy individuals (P > 0.05). As regards to AC, we showed that this lesion had an increase in expression of HLA-G, HLA-E, IL-10 and PD-L1 when compared to control; however this increase was statistically significant only for PD-L1 (P= 0.04). Conclusion: The OL showed a reduced cytotoxic immune response (low number of GB+ cells) associated with a high expression of immunomodulatory mediators; however, this expression was independent of epithelial dysplasia grading, proliferation and apoptosis index. Regarding AC we also showed an increase in expression of HLA-G, -E, IL-10 and PD-L1 when compared to the control. Thus, our findings suggest that this lesion present an immunosuppressive microenvironment which favors the escape of mutated keratinocytes in any stage dysplastic, proliferation or apoptosis which this disease finds itself. / Justificativa do estudo: As desordens potencialmente malignas (DPMs) de boca consistem em tecidos morfologicamente alterados, os quais apresentam maior risco de transformação maligna que o tecido normal. Dentre as DPMs de boca, as mais frequentes são a leucoplasia (LE) e a queilite actínica (QA). Atualmente, sabe-se que células mutadas ou geneticamente alteradas são capazes de desenvolver estratégias imunomodulatórias que lhes permitem a evasão à resposta imune antitumoral. Dentre esses mecanismos, pode-se citar a expressão das moléculas HLA-G, HLA-E e PD-L1 e das citocinas IL-10 e TGF-β. Objetivo: Avaliar a expressão tecidual e salivar das moléculas HLA-G, HLA-E e PD-L1 e das citocinas IL-10 e TGF-β1, -β2 e -β3 em DPMs de boca e relacionar tais mediadores imunomodulatórios com a resposta imune antitumoral e com o potencial de transformação maligna dessas lesões. Metodologia: Amostras de pacientes acometidos pela LE (n= 80) foram submetidas às técnicas da imunoistoquímica e ELISA para avaliação da expressão tecidual e salivar, respectivamente, das proteínas supracitadas. Adicionalmente, amostras de pacientes acometidos pela QA (n= 30) foram submetidas à técnica da imunoistoquímica para avaliação da expressão tecidual das proteínas HLA-G, HLA-E, PD-L1 e IL-10. O grupo controle (n= 20) consistiu de tecido e saliva de indivíduos saudáveis. As amostras teciduais imunomarcadas foram mensuradas por um método semi-quantitativo associado à intensidade de marcação. A expressão dos mediadores imunomodulatórios foi associada com o potencial de malignização das lesões (gradação de displasia epitelial, índice de proliferação celular- Ki-67 e apoptose- p53 mutado). Além disso, a associação com a densidade de células granzima B+ (GB+) e células T regulatórias FOXP3+ foi investigada. Os testes estatísticos utilizados foram: teste exato de Fisher ou qui-quadrado de Pearson, Mann-Whitney e Kruskal- Wallis. O nível de significância foi estabelecido em P < 0,05. Resultados: No que se refere a LE, o presente estudo demonstrou que 15 amostras apresentaram displasia severa, 20 moderada, 32 leve e 13 sem displasia. Quarenta amostras (50%) apresentram o combinado alto Ki-67/p53. Independente da severidade da displasia epitelial e do índice de proliferação celular/ apoptose, observou-se uma expressão aumentada de HLA-G, HLA-E, PD-L1, IL-10, TGF-β2 e -β3 quando comporado ao controle (P < 0.05). O número de células GB+ e FOXP3+ nas LE foi similar ao controle. Os níveis salivares de HLA-G solúvel (HLA-Gs), IL-10 e TGF-β não nos possibilitou uma diferenciação entre os pacientes com LE e indivíduos saudáveis (P > 0,05). Em relação aos resultados obtidos para QA, evidenciou-se que essa lesão teve um aumento na expressão de HLA-G, HLA-E, IL-10 e PD-L1 em comparação ao controle, todavia esse aumento só foi estatisticamente significativo para o PD-L1 (P= 0,04). Conclusão: As LEs apresentaram uma reduzida resposta imunológica citotóxica (baixo número de células GB+) associada a uma elevada expressão de mediadores imunomodulatórios; todavia essa expressão não possui relação com a gradação de displasia epitelial e índice de proliferação celular e apoptose. Em relação à QA, nós também evidenciamos uma maior expressão de HLA-G, HLA-E, IL-10 e PD-L1 se comparado ao controle. Desta forma, nossos achados sugerem que tais lesões apresentam um microambiente imunossupressor que favorece a evasão de queratinócitos mutados em qualquer estágio de alteração displásica, proliferação ou apoptose que essa doença se encontre.