Esta tesis doctoral se planteó con el fin de profundizar en el estudio de la acidosis ruminal y evaluar nuevas estrategias de prevención.En el experimento 1, se desarrolló la PCR cuantitativa para detectar y cuantificar Streptococcus bovis y Megasphaera elsdenii, bacterias relacionadas con la producción y utilización del lactato, respectivamente. La técnica se desarrolló con unas eficiencias del 88% (S. bovis) y 99% (M. elsdenii). Posteriormente se empleó esta técnica en los experimentos siguientes, permitiendo progresar en comprender el rol que tienen estas bacterias en el proceso de la acidosis.El experimento 2 se realizó con el objetivo de determinar los efectos de administrar altos niveles de carbohidratos no fibrosos (CNF) en la dieta sobre la fermentación ruminal y el metabolismo de vacas lecheras. Para ello se utilizaron 62 vacas Holstein en un diseño cross-over 2x2. Los tratamientos fueron: una dieta tradicional de vacas de alta producción (TR, CNF = 43%) y una dieta alta en CNF (HC, CNF = 47%). El grupo HC incrementó la producción de leche y su contenido en proteína, pero afectando negativamente a la salud de los animales (síndrome de baja grasa, mayor riesgo de cojeras, más horas a pH ruminal subóptimo).El experimento 3 consistió en describir los cambios fisiológicos en la fermentación ruminal durante la inducción a la acidosis en terneras de engorde y su control mediante una preparación comercial de anticuerpos policlonales (mayoritariamente contra S. bovis). Se utilizaron 12 terneras cruzadas que se distribuyeron completamente al azar en 2 grupos de 6 animales cada uno: el grupo control (CTR) y el grupo que recibía el tratamiento de anticuerpos (PAP). El 83,3% y el 50,0% de los animales entraron en acidosis en el grupo CTR y PAP, respectivamente, y tardaron de media 5,25 ± 0,17 d. Asimismo, el perfil de fermentación de los animales acidóticos fue similar entre tratamientos. El grupo PAP tuvo mayores valores de pH a las 0h post-alimentación en los días 16, 18 y 19 de experimento comparado con el grupo CTR. Estos resultados indican que PAP puede ser efectivo para controlar la acidosis en terneras durante una transición rápida a concentrado.El objetivo del experimento 4 fue evaluar los efectos de un inhibidor de la actividad α-amilasa (acarbosa) en el control de la acidosis ruminal sobre la fermentación ruminal y el metabolismo en vacas lecheras. Se usaron 8 vacas Holstein en un diseño cross-over 2x2. Los tratamientos fueron: control (sin aditivo, CTR) y acarbosa (0,75 g/animal/d, AMI). Se observó que el grupo AMI estuvo menos horas a pH ruminal subóptimo y tuvo un pH ruminal medio superior comparado con el grupo CTR. Microbiológicamente, los animales AMI tendieron a tener una menor ratio S. bovis:M. elsdenii comparado con los CTR. No se observaron diferencias en el resto de parámetros. Estos resultados indican que el suplemento de dietas con acarbosa en vacas lecheras alimentadas con raciones de alta producción puede ser efectivo en reducir la acidosis ruminal sin repercusiones en la fermentación ruminal del animal ni en su metabolismo. / This doctoral thesis was designed to increase our knowledge of ruminal acidosis and to valuate new strategiesIn experiment 1, quantitative PCR probes were developed to detect and quantify S. bovis and M. elsdenii, lactic acid-producing and lactic acid-utilizing bacteria, respectively. The two PCR probes had efficiencies of 88% (S. bovis) and 99% (M. elsdenii). In the following experiments of this thesis, these techniques were used to progress in the understanding of the role that these bacteria have in the development of acidosis.The experiment 2 was designed to study the effects of administrating high levels of NFC in the diet on ruminal fermentation and animal metabolism of lactating dairy cows. Sixty-two lactating Holstein cows were used in a cross-over 2x2. Treatments were: a traditional ration of high-producing dairy cows (TR, NFC = 43%) and a high-NFC ration (HC, NFC = 47%). Milk yield and milk protein content were greater in HC group, but had negative effects on animal health (milk fat depression, greater lameness risk, more hours at suboptimal pH).In experiment 3, physiological changes in rumen fermentation during acidosis induction and its control using a multivalent polyclonal antibody preparation against S. bovis (PAP) in heifers were studied. A completely randomized experiment was designed using 12 crossbred heifers. Treatments were control (CTR) and PAP. After the feeding challenge, acidosis was declared 5.25 ± 0.17 d after the start of transition, during which 83.3 and 50.0% of the animals entered in acidosis in CTR and PAP groups, respectively. However, the fermentation profile of animals with acidosis was similar between treatments. Heifers fed PAP had greater pH before feeding on days 16, 18 and 19 of the experiment compared with CTR. These results indicate that PAP may be effective in controlling acidosis of heifers during a rapid transition to a high-concentrate diet.The objective of experiment 4 was to evaluate the effects of an amylase inhibitor (acarbose) in dairy cows to control ruminal acidosis in a 2x2 cross-over design. Eight Holstein cows were used to study animal metabolism and ruminal fermentation. Treatments were: control (no additive, CTR) and acarbose (0.75 g/cow/d, AMI). AMI group stayed less hours below pH = 5.6 and had greater daily average pH compared with CTR group. AMI animals tended to have lower S. bovis to M. elsdenii ratio than CTR. These results indicate that supplementing diets with acarbose to dairy cattle fed high-NFC rations may be effective in reducing acidosis in lactating cows with no negative effects on ruminal fermentation and animal metabolism.

Durante su desarrollo los linfocitos tienen una serie de elecciones secuenciales para definir su identidad. Primero, la selección entre el linaje T (LT) o B (LB), luego la definición de su TCR como αβ o γδ posteriormente definir su identidad con los correceptores CD4 vs CD8 y, en periferia después de la activación del LT naive definir los linajes Th1, Th2, células T reguladores (Treg) o Th17. Algunos estadios de diferenciación en las células T son complejos de identificar y cuantificar. Especialmente, en sangre periférica, un ejemplo claro son las Treg o las células emigrantes tímicas recientes (RTEs). El control de la diferenciación y desarrollo de los LT se inician sin cambios en la secuencia del DNA pero con una constante activación y represión de transcritos de muchos genes. La regulación epigenética tiene un papel clave en la dinámica del genoma de los LT. Los cambios epigenéticos mantienen la estructura de la cromatina y regulan la transcripción de genes durante su desarrollo y diferenciación, principalmente por la metilación del DNA. La metilación se da en dinucleótidos CG. Sin embargo, hay unas regiones ricas en estos dinucleótidos conocidas como islas CpG (CGI), que no se metilan comúnmente y que se ubican en regiones promotoras, intergénicas o intragénicas. La metilación diferencial de estas regiones en muchos genes establecer perfiles de metilación de cada estadio de diferenciación celular y podrían ser marcadores de estadios celulares. Nuestra hipótesis es que la metilación del DNA, juega un papel clave en la diferenciación e identidad celular en humanos y que los perfiles de metilación del DNA de algunos genes, expresados diferencialmente en los estadios de maduración de los LT, como los genes que codifican para CD4 y CD8 pueden ser un marcador celular especialmente para el estadio de RTEs. Los objetivos fueron: i) analizar los patrones de metilación de los genes CD4, CD8A y CD8B durante el desarrollo de LT tímicos y periféricos; ii) diseñar una prueba molecular sensible y específica para identificar gradientes de metilación en poblaciones de LT y asociarlas con su grado de diferenciación. Estudiamos una CGI en el gen CD4 y tres CGIs en el gen CD8A en diferentes poblaciones de LT separadas por FACS sorting, de timo, sangre de cordón y sangre periférica de adultos sanos. Extrajimos el DNA, el cual se trato con bisulfito de sodio y luego se secuenció cada CGI. Nuestros resultados muestran que las CGI del gen CD4 no se metila diferencialmente en LT. La CGI-2 del gen CD8A no se metila en ningún caso, la CGI-3 presenta el mayor grado de metilación, pero sin diferencias entre linajes ni poblaciones y en la CGI-1 del gen CD8A identificamos una región diferencialmente metilada (DMR). Sobre esta región diseñamos por primera vez una prueba de PCR cuantitativa con sondas FRET, que permiten discriminar cambios en las temperaturas de melt cuando las CpG están o no metiladas en cada población de LT. Usando esta prueba pudimos analizar la DMR y pudimos discriminar claramente entre LT CD4 y CD8. Además, permite identificar en sangre periférica de adultos entre RTE CD8 y LT CD8 naive. También observamos que los LT CD4 incrementan la metilación de esta región a medida que van madurando En conclusión encontramos una región en el gen CD8A, ubicada en el extremo 5’ de la CGI-1 que puede ser un marcador epigenético para diferenciar LT CD4 y CD8 y algunos estadios de desarrollo celular. Esta región puede estar involucrada en mecanismos de regulación de la expresión del gen CD8 y con la identidad celular. / During development the lymphocytes have many choices by taking in order to define their identity. The first choice is about T (LT) or B (LB) lineage. Then the lymphocytes select their TCR αβ or γδ. Later they define their identity with CD4 vs CD8 co-receptors. Finally, in periphery they define among Th1, Th2, Th17, or regulatory T cells (Treg) lineages. Some stages of T cells differentiation are complex to identify such as Treg or Recent Thymic Emigrants (RTEs). The T cell differentiation and development are control by activation and repression a lot of specific genes. The Epigenetica and specifically the DNA methylation has a pivotal role in genome dynamics. In the human genome DNA methylation plays an important role in establishing and maintaining chromatin structures and in regulating gene transcription during development and differentiation. DNA methylation predominantly occurs at cytosine guanine dinucleotide (CpG). However, some areas are CpG rich and they are not always methylated. These regions are calling CpG islands (CGIs) and are present in many promoter genes or intragenic places. This mechanism has an important role in T-cell and lineage commitment and differentiation. The CD4 and CD8 co-receptor is coded by the CD4, and CD8A, and CD8B genes, and is the main lineage differentiation protein for T cells. CD4 gene has a CGIs upstream on the promoter and CD8A gene has three well-defined CGIs amenable to perform quantitative DNA methylation analysis. The aim of the present work is to analyze the methylation pattern of CD4 and CD8A genes and assess its possible use for staging the maturation state of CD4 and CD8 T lymphocytes. We studied three CpG islands located within promoter region of CD8A gene. The methylation analysis was performed in purified T cell populations from human thymus, cord blood and adult peripheral blood. T lymphocytes were sorted by FACS and included: i) single positive CD4 and CD8 T cells from thymus and ii) recent thymic emigrants (RTEs), naïve and memory T cells from cord blood and from adult blood. Genomic DNA from each population was treated with bisulfite and amplified by Nested-PCR with specific primers for each CpG island. The PCR products were cloned and sequenced for quantitative methylation analysis. Initial results showed that CpG Island 2 is not methylated in any of the T cell populations studied, while the CpG islands 1 and 3 have a variable degree of methylation. We identified a specific region of CD8A CpG island 1 that is differentially methylated in T cell populations. This region is clearly more methylated in CD4 T cells than in CD8 T cells. Moreover, within CD8 T cell populations there were differences between naïve and memory cells. It was also feasible to design a protocol for the rapid detection of methylation in this region. This protocol is based on the ability of FRET probes to discriminate nucleotide changes in a melting step by qPCR. Using it we were able to analyze 4 CpG positions and we determined the exact number of methylated positions (0-4) in each sample. In conclusion, we have identified a specific region in CD8A gene that is differentially methylated in T cell populations, which could be an epigenetic marker for T cell differentiation between CD4 and CD8 lymphocytes. The methylation patterns of this region are probably part of the maturation mechanisms that occur in the transition from naïve to memory cells among CD8 T lymphocytes.

La epidemiología es aquel conjunto de métodos y técnicas que se ocupa del estudio del estado de bienestar de cualquier tipo de población (humanos y animales). En consecuencia, se centra en el estudio de la evolución de los trastornos a través del tiempo y en distintas áreas geográficas con el objetivo de determinar la incidencia y prevalencia de los trastornos explorados, y determinar su distribución diferencial en las distintas áreas y en los distintos momentos temporales trabajados; y por último, establecer los factores asociados a la aparición de los diferentes trastornos, ya sean de riesgo o de protección, con la finalidad última de prevenir la aparición de los mismos en la población.En sus inicios, el campo de estudio de la epidemiología eran las enfermedades infecciosas, aunque actualmente abarca todo lo que haga referencia al estado de bienestar de los individuos, por lo que su ámbito de trabajo se caracteriza por una evidente fragmentación. Directamente relacionado con el estudio de la evolución de los trastornos en las poblaciones está el tema del procedimiento diagnóstico, aspecto de enorme importancia en cualquier estudio epidemiológico para la correcta delimitación de la prevalencia e incidencia del trastorno bajo estudio, con el objetivo de desarrollar una política de actuación adecuada para disminuir la aparición del trastorno en la población. Se trata de una área importante de investigación en el campo de la salud, y en especial en el ámbito de la psicología, debido a la baja sensibilidad y especificidad de los instrumentos diagnósticos utilizados (Anthony, Eaton y Henderson, 1995a), lo que lleva a que los diagnósticos no sean del todo correctos y ello revierte, a su vez, en la validez de los estudios llevados a cabo.Ahora bien, las técnicas que se han desarrollado hasta el momento en el ámbito de la epidemiología hacen referencia al estudio de una única ocurrencia del trastorno bajo estudio, generalmente el primer episodio. Por el contrario, muchos de los trastornos propios del campo de la salud mental no implican una sucesión de múltiples episodios, no son crónicos y tampoco suponen la muerte del sujeto por esa enfermedad. Es el caso de las esquizofrenias, los trastornos del estado de ánimo, las adicciones... Se trata de una circunstancia que también puede producirse en otros campos de la salud. El estudio de las recaídas ha sido abordado en diversas ocasiones por parte de los investigadores que trabajan en el ámbito de la epidemiología, según distintos puntos de vista. Algunos autores estudian la probabilidad de transición entre los diferentes estados, de salud a trastorno y viceversa, a partir de modelos de Markov (Tager, 1998; Beckett et al, 1996 y Hilton et al, 1997), mientras que otros intentan determinar cuáles son los factores que llevan a los individuos a recaer en su trastorno, realizando un análisis a partir de técnicas estadísticas clásicas (Fischl et al, 1981; Center et al, 1984; Brown et al 1990 y Simkin et al, 1994). También se ha propuesto la aplicación de técnicas de análisis multivariables como pueden ser el análisis discriminante, el análisis de supervivencia, la regresión logística,... (Burton et al, 1991; Coryell et al, 1991; Tohen et al, 1992; Salive et al, 1992; Verheul et al, 1998; Fava et al, 1998 y Robinson et al, 1999). Sin embargo, ninguno de todos estos autores ha abordado el fenómeno de las recaídas desde un punto de vista epidemiológico, es decir, a partir de la obtención de indicadores típicos de este ámbito de estudio.Lo explicado en el párrafo anterior pone de manifiesto el gran vacío que existe hoy en día en el abordaje del estudio de diferentes fenómenos en el ámbito epidemiológico, ya sea por la falta de técnicas adecuadas en el trabajo en diferentes materias en las que la epidemiología está desarrollando un papel importante, como por ejemplo la epidemiología genética. Así Foppa et al, 1997 propusieron una aproximación que ayude a elaborar el diseño de un estudio de caso-control adecuado en el estudio de la interacción gen-entorno, aunque los autores consideran que ésta es aplicable a cualquier estudio con un factor de exposición ordinal politómico o con factores de exposición dicotómicos. De esta investigación se desprende que aportaciones de campos concretos revierten de manera general en cualquier aproximación epidemiológica.Ya que este vacío puede ser debido a aspectos más técnicos (como pueden ser el estudio del fenómeno de las recaídas, la mejora del procedimiento diagnóstico en los diferentes ámbitos de aplicación, y en especial, en el de la Psicología), debido a la detección de este vacío, el eje vertebrador de esta tesis será una propuesta tecno-metodológica de estudio del fenómeno de las recaídas desde un punto de vista epidemiológico, con el fin de cubrir algunas de las lagunas existentes en este sector.

Fundamentos: Para algunos trastornos psiquiátricos se ha podido establecer que existe relación entre las disfunciones cognitivas y las alteraciones en el FSCr. Para el trastorno bipolar (TB), distintos trabajos previos han sugerido que los pacientes con este trastorno presentan disfunciones cognitivas. Asimismo, en distintos estudios han sido halladas alteraciones en la distribución del flujo sanguíneo cerebral regional (FSCr) de estos pacientes. No obstante, no existe ningún trabajo publicado en que se haya estudiado la relación entre ambos tipos de marcadores en pacientes con TB.Objetivos: Determinar las posibles alteraciones en el rendimiento neuropsicológico y en el FSCr de los pacientes con TB, y establecer la relación entre ambos tipos de marcadores y con la psicopatología propia del trastorno.Pacientes y métodos: Se incluyeron 43 pacientes con TB (RDC) que se clasificaron según su fase en la enfermedad a partir de la puntuación obtenida en las escalas YMRS y HDRS en fase maníaca (n=7), hipomaníaca (n=8), depresiva (n=12) o eutímica (n=3), y 6 sujetos control. Se evaluó además el estado clínico mediante las escalas PANSS y GAF, la función cognitiva mediante los tests neuropsicológicos WAIS, WCST, Stroop, TMT, CVLT, WMS y FAS/COWAT, y se obtuvieron imágenes SPECT administrando el contraste radiológico 99mTc-HMPAO. Resultados: Las principales correlaciones halladas fueron entre: función ejecutiva (WCST) y FSCr de estriado, frontal, temporal, cerebelo, parietal y cingulado; función mnésica (WMS, WAIS-dígitos) y FSCr de estriado, frontal, temporal y parietal; tareas atencionales (Stroop) y FSCr de estriado, temporal media y parietal; aprendizaje verbal (CVLT) y FSCr de frontal, temporal posterior, cingulado y occipital; alteraciones psicomotoras (TMT) y FSCr de temporal anterior; empeoramiento intelectual (WAIS-Vocabulario) y FSCr de cerebelo y parietal.Conclusiones: Los resultados del estudio corroboran las hipótesis actuales que señalan la existencia de anomalías funcionales en estructuras fronto-subcorticales, cerebelo y sistema límbico en el TB.

La Memoria plantea el estudio de la biodiversidad parasitaria de los Mamíferos de vida libre que habitan el archipiélago canario. El objetivo principal ha sido contribuir al conocimiento de la helmintofauna y ectoparasitofauna en ecosistemas aislados. Estudios de esta índole son necesarios para poder establecer comparaciones con las faunas parasitarias que aparecen en otros ecosistemas insulares, de la región circummediterránea y/o macaronésica y de áreas continentales/peninsulares próximas. En la Tesis se han analizado parasitológicamente diez especies mastozoológicas pertenecientes a cuatro Órdenes diferentes: 3 Insectívoros (Atelerix algirus, Crocidura canariensis y Suncus etruscus); 1 Carnívoro (Felis catus); 2 Artiodáctilos (Ovis aries y Ammotragus lervia); y 4 Roedores (Atlantoxerus getulus, Rattus rattus, R. norvegicus y Mus musculus). En total, han formado parte del estudio 1090 hospedadores, procedentes de diferentes enclaves de cada una de las islas que conforman el archipiélago. Los helmintos y ectoparásitos hallados han sido estudiados siguiendo las técnicas de montaje tradicionales en Helmintología y Artropodología e identificados a través del microscopio óptico. Se ha realizado el análisis molecular de algunas especies que han entrañado dudas en su taxonomía. En total, el estudio de los Mamíferos silvestres de las Islas Canarias ha dado como resultado el hallazgo de 52 especies parásitas repartidas entre: 1 Trematoda, 11 Cestoda, 29 Nematoda, 2 Acanthocephala y 9 Arthropoda. En lo que se refiere a la helmintofauna de los hospedadores estudiados, esta es, estructuralmente, muy similar ha la que poseen estos mismos vertebrados en su hábitat originario continental y, como sucede en todos los ecosistemas insulares, se caracteriza por una disminución del número de especies parásitas y de sus porcentajes de infestación. Sin embargo, esta misma regla no se ha detectado en el caso de las pulgas, ya que la biodiversidad detectada en el archipiélago es cualitativamente superior a la de muchas zonas continentales. La distribución de las especies parásitas a lo largo del archipiélago se ha visto influenciada por las características climáticas y fisiográficas de las diferentes islas. La presencia de los hospedadores intermediarios adecuados, así como el papel de los hospedadores paraténicos, posiblemente han tenido también un importante papel en la distribución de los helmintos parásitos. Las diversas especies de pulgas tienden a agregarse en los hospedadores para formar comunidades organizadas mediante ciertas reglas de ensamblaje. Los resultados indican que la densidad de la población hospedadora y una elevada abundancia de pulgas hospedador-específicas, conducen a la no aleatoriedad de las comunidades de Sifonápteros sobre sus hospedadores. / The present Thesis evaluates the parasite biodiversity of free-living Mammals inhabiting the Canary archipelago. The main goal is the contribution to the knowledge of the helminth and ectoparasite fauna in isolated ecosystems. Those types of studies are required to establish comparisons with the parasite fauna present in other insular areas of the Mediterranean and Macaronesian Regions, as well as close peninsular and continental areas. A total of ten species of Mammals belonging to four different Orders were examined for the detection of parasites: 3 Insectivora (Atelerix algirus, Crocidura canariensis and Suncus etruscus); 1 Carnivora (Felis catus); 2 Artiodactyla (Ovis aries and Ammotragus lervia); and 4 Rodents (Atlantoxerus getulus, Rattus rattus, R. norvegicus and Mus musculus). In all, 1090 hosts were studied. Animals came from different habitats of each one of the Islands. Classical techniques of general Helminthology and Arthropodology were used to find, manipulate and identify the helminths and the ectoparasites. Molecular methods were used in those species which entailed some doubts in the final diagnosis. As a result of the analysis, 52 parasite species were detected, distributed in: 1 Trematoda, 11 Cestoda, 29 Nematoda, 2 Acanthocephala and 9 Arthropoda. Results shows that, structurally, the helminth biodiversity in Mammals from the Canary Islands is very similar to those fauna displayed by those vertebrates in their native continental habitats although, as it take place in all insular ecosystems, it is characterized by a decrease both in the number of species and in the prevalence of parasitization. Nevertheless, this pattern is not detected in fleas, which biodiversity in the Canary archipelago was qualitatively higher than in continental areas. In addition, the distribution of the parasite species throughout the archipelago was influenced by the climatic and physiographic characteristics of the different islands. Furthermore, the presence of suitable intermediary hosts, as well as paratenic hosts, could have an important role in the distribution of parasites. With regard to ectoparasites, fleas tend to be aggregated on hosts following certain assembly rules. Results showed that a high host population density as well as a high abundance of host-specific fleas, lead to the non-randomness of the Siphonaptera community on their hosts.

En la present tesi un dels primers objectius era caracteritzar el model caní per tal d'avaluar les seves similituds amb el melanoma humà. En aquest sentit, el primer que es va descriure va ser la caracterització de tres línies de melanoma caní (CML-1, CML-6M i CML-10c2) quant a l'expressió de proteoglicans (PGs) i la seva resposta a factors de creixement. D'aquest objectiu en sortí el primer article (Am J Vet Res 2002; 63:1151-1158), on es conclou que el contingut de proteoglicans i la resposta al tractament de TGF- de les línies de melanoma caní CML-1 i CML-6M són similars als de les línies de melanoma humà indiferenciades. En canvi, la línia cel·lular CML-10c2 produeix una baixa quantitat de proteoglicans d'elevat pes molecular. Com que aquests PGs extracel·lulars estan involucrats en el control de l'adhesió, proliferació i migració, poden jugar un important rol en la progressió dels melanomes en el gos.En veure els resultats previs de la diferencial expressió de les isoformes de versicà en les diferents línies de melanoma humà (Touab et al., 2002) i caní (Serra et al., 2002) es decidí sobreexpressar la isoforma V3 (que no conté cadenes de glicosaminoglicans) a dues línies cel·lulars de melanoma humà i dues de melanoma caní, on una era indiferenciada i expressava les isoformes V0 i V1 de versicà, i l'altra era diferenciada i no expressava cap isoforma de versicà. Es va utilitzar el sistema de transfecció retroviral per la sobreexpressió de V3 i es van fer els corresponents controls amb el vector sol. El treball es centrà en l'estudi del complex format per àcid hialurònic (HA), CD44 i versicà. La sobreexpressió de V3 reduïa marcadament el creixement cel·lular, incrementava l'adhesió i migració cel·lulars sobre HA. Aquesta migració incrementada es bloquejava quan les cèl·lules eren pre-incubades amb HA soluble o amb anticossos bloquejants de CD44, suggerint que V3 actuava alterant la interacció de l'HA amb el CD44. Per últim, es van realitzar estudis tumorigènics d'aquestes línies. Els resultats inicials mostraren que els ratolins injectats amb les cèl·lules que sobreexpressaven V3 tenien unes latències més llargues que els animals control, resultat que coincideix amb el retard del creixement observat in vitro. A més, els tumors expressaven versicà, CD44 i HA de forma diferencial entre els animals injectats amb les cèl·lules control i els injectats amb les cèl·lules. D'aquests resultats en sorgeix el segon article (acceptat sota minor revisions). Aquest segon apartat del treball es complementa amb l'estudi de l'expressió i activitat de MMPs i d'integrines en aquestes línies cel·lulars, així com de l'estudi de la migració sobre col·lagen tipus I i l'estudi del cicle cel·lular i dels seus inhibidors. Per continuar l'estudi del gos com a model del melanoma humà, el treball es va centrar en la relació existent en el complex format per versicà, HA i CD44, el principal receptor de superfície cel·lular de l'HA i sovint sobreexpressat en les cèl·lules tumorals. D'aquest objectiu en sortí el tercer article (J Comp Pathol, 2004, 130: 171-180). Per l'estudi in vitro es van utilitzar les línies cel·lulars canines CML-1 i CML-10c2. CML-1 expressa CD44, HA i versicà, cosa que permet la formació d'una matriu pericel·lular abundant, mentre que no es veu en el cas de CML-10c2, la qual expressa CD44, però produeix molt menys HA i no expressa versicà. Es van utilitzar biòpsies canines per fer l'estudi immunohistopatològic de CD44. Es va veure que la seva expressió era més intensa en els melanomes malignes, on tendia a estar present a la perfèria del tumor, mentre que era homogènia en el cas dels melanocitomes. / One of the most important aims was to characterize the canine model to evaluate its similitude with human melanoma. In this sense, the first step was to characterize the proteoglycans profile in three canine melanoma cell lines (CML-1, CML-6M and CML-10c2) and their response to growth factors. The first paper (Am J Vet Res 2002; 63:1151-1158) was originated from these results. We described that the proteoglycans content and the response to TGF- treatment are similar between CML-1, CML-6M and undifferentiated human melanoma cell lines. In contrast, CML-10c2 cell line produce a low quantity of high molecular weight proteoglycans as the differentiated human melanoma cell lines do. These extracellular proteoglycans are involved in adhesion, proliferation and migration control, so they may have an important role in canine melanoma progression. Because of our previous results about the differential expression of versican isoforms in different human and canine melanoma cell lines (Touab et al., 2002; Serra et al., 2002; Domenzain et al., 2003) we decide to continue with the study of versican. We overexpressed V3 isoform (it has not glycosaminoglycan chains) in two human and two canine melanoma cell lines, which differ in their endogenous versican expression. Retroviral system was used and the respective controls were done with the vector only (LXSN). The work was focused on the complex formed by hyaluronic acid (HA), CD44 and versican. V3 overexpression markedly cellular growth in vitro, and it increased adhesion and migration on HA substratum. This increased migration was blocked when cells were pre-incubated with soluble HA or with blocking anti-CD44 antibody, which suggest that V3 was changing HA-CD44 interaction. Finally, we performed tumorigenic assays with the transduced cell lines. Initial results showed that mice injected intradermically with V3 cells had longer latencies than animals injected with control cells, which is similar to the observed growth rates in vitro. Furthermore, primary tumors had different expression of versican, CD44 and HA between control and V3 cells. These results are compiled in the second paper (accepted under minor revisions). This second chapter it is also complemented with the study of MMPs and integrins expression and activity, and the study of migration on type I collagen and cellular cycle as well.To continue canine study as a human model of melanoma, we focused on the relationship within the complex formed by versican, HA and CD44, the major cellular surface receptor of HA, which is often overexpressed in tumoral cells. The third paper was derived from this goal (J Comp Pathol, 2004, 130: 171-180). For in vitro studies we used CML-1 and CML-10c2 canine melanoma cell lines. CML-1 expressed CD44 and versican and produced high amounts of HA, which allowed the formation of an important pericellular coat. In contrast, we couldn't see this pericellular coat in CML-10c2 cell line, which produced little amounts of HA and didn't express versican. Canine melanocytic tumors were used to study the expression of CD44. Malignant melanomas express more CD44 than melanocytomas and the expression pattern was different between benign and malignant lesions. In malignant tumors the CD44 expression was more intense in the periphery of the tumors, whereas an homogeneous CD44 expression was showed in benign lesions.

Existe poca literatura científica publicada sobre cuestiones de eficiencia en el ámbito de la gestión hospitalaria en nuestro entorno. Hay antecedentes de eficiencia y efectividad para unos pocos procesos clínicos específicos, pero en pocos casos se habla del impacto de la gestión de procesos complejos a nivel hospitalario. El propósito de este estudio es investigar, analizar e interpretar los resultados de una serie de intervenciones aplicadas en el área de gestión de pacientes de hospitalización de enfermedades agudas con el objetivo de incrementar la productividad y la eficiencia de la actividad asistencial. En concreto, esta tesis propone crear Unidades de recepción quirúrgica que faciliten el ingreso en el mismo día de la intervención quirúrgica, segmentación de la demanda de pacientes programados mediante la creación de Unidades de corta estancia quirúrgica, estandarizar la gestión de los procesos de ingreso y alta, y una herramienta que permita planificar la demanda de ingresos programados para que ésta se ajuste a la capacidad disponible en el hospital. Todo ello requiere de un sistema de gestión de pacientes con una visión global del hospital y conlleva que esta gestión se realice de forma centralizada en ciertos aspectos. Según los resultados encontrados, la puesta en marcha de las unidades de recepción y corta estancia quirúrgicas potenció un incremento en el porcentaje de pacientes que ingresaban en el mismo día de la intervención, al igual que se incrementó el porcentaje de pacientes que tenían el alta planificada. Estas unidades fueron de gran utilidad para la estandarización de los procesos de ingreso y alta del hospital y, a la vez, se consiguió reducir la estancia media prequirúrgica. La disminución de ingresos programados la tarde antes de la cirugía sin ningún criterio clínico liberó camas para los pacientes que ingresaban a través del servicio de urgencias. Ello conllevó una disminución de pacientes ingresados pendientes de cama en urgencias, facilitando la liberación de puntos de atención para visitar nuevas consultas urgentes. A la vez, estas unidades de recepción y corta estancia quirúrgicas permitían su cierre durante el fin de semana, generando un ahorro en las partidas de personal de enfermería del hospital. En esta misma línea, se segmentó la demanda de cama de hospitalización para el paciente programado, con el objetivo de acumular el mayor número de ingresos programados en unidades de hospitalización polivalentes para determinadas especialidades médicas. Estas unidades absorbían una parte importante de los ingresos programados y evitaba las cancelaciones de última hora por falta de cama, con la consecuente pérdida del recurso quirúrgico. También, esta segmentación de la demanda ofrecía la posibilidad de planificar qué tipo de ingresos podía absorber el hospital, de tal forma que a través del comité de quirófanos se condicionaban las sesiones quirúrgicas a la modalidad de paciente. Así, se ajustaba la demanda a la capacidad disponible y se evitaban también las cancelaciones de las cirugías en el último momento. Globalmente, los resultados encontrados han evidenciado la posibilidad de tener una gestión de pacientes de hospitalización más flexible, ágil y eficiente, sin alterar la calidad y la seguridad clínicas. En esta tesis se han planteado dos tipos de intervenciones, algunas suponen aspectos de mejora continua de procesos previos y otras corresponden a procesos disruptivos, de cambio total del paradigma previo del hospital. En ambos casos el liderazgo del equipo directivo es fundamental, especialmente en aspectos de gestión del cambio entre los diferentes estamentos profesionales para lograr ponerlos en marcha sin generar conflicto de intereses ni disfunciones en las propias intervenciones que mermen su objetivo principal: mejorar la productividad y la eficiencia. / There is little scientific literature published about efficiency issues in the hospital management field in our environment. There is background of efficiency and effectiveness for a few specific clinical processes, but few are talking about the impact of complex processes management in hospitals. The purpose of this study is to investigate, analyse and interpret the results of a number of interventions applied in the area of inpatient management of acute diseases area in order to increase productivity and efficiency of the health care activity. Specifically, this thesis proposes to create surgical reception units to facilitate the hospitalization on the same day of the surgery, demand segmentation of the scheduled patients by creating short stay surgical units, standardize the management of admissions and discharges processes, and a tool to plan scheduled inpatients demand in order to adjust it to the available capacity in the hospital. All this requires a patient management system with an overview of the hospital and this means that it has to be centrally managed in certain aspects. According to the results found, the implementation of reception and short surgical stay units potentiated an increase in the percentage of patients admitted on the same day of the surgery, as well of patients who had a scheduled discharge. These units were useful to standardize the hospital processes of admission and discharge and, in turn, the average of presurgical stay was reduced. The decrease in the hospitalizations scheduled in the evening before the surgery without any clinical judgment liberated beds for patients admitted through the emergency department. This carried a reduction of inpatients pending of bed in the emergency room, facilitating the liberation of attention points for visit new emergency consultations. In turn, these reception and short surgical stay units allowed its closure during the weekend, generating savings in nurse hospital staff. In this regard, the demand of hospitalization beds for the scheduled patient was segmented, with the aim to accumulate the highest number of scheduled hospitalizations in polyvalent inpatient units for certain medical specialties. These units absorbed an important part of the scheduled hospitalizations and avoided last minute cancellations due to lack of bed, with the consequent loss of surgical resource. Also, this demand segmentation offered the possibility to plan what type of income could absorb the hospital, so through the surgical room committee the surgical sessions were conditioned according the patient type. So, demand was fit to available capacity and last minute cancellations of surgeries were also avoided. Overall the results found show the possibility to have a patient hospitalization management more flexible, agile and efficient, without altering the quality and clinical safety. In this thesis we have proposed two types of interventions, some involve continuous improvement aspects of the previous processes and others are related to disruptive processes, of total change of the previous hospital paradigm. In both cases the management team leadership is essential, especially in aspects of management change between the different professional groups to get them started without generating a conflict of interests or dysfunctions in the interventions that reduce its main aim: the improvement of productivity and efficiency.

Las cabras de cinco provincias de la región Apurímac del Perú fueron investigadas con el objetivo de caracterizarlas estructural, morfológica y genéticamente. Se encontró que la estructura de la totalidad de las explotaciones caprinas apurimeñas es característica de un sistema extensivo y de tipo familiar, donde prevalece el régimen de tenencia de tierra comunal (90,7%) y el minifundio [terrenos <10 ha (93,3%)]. Las distancias de las explotaciones al núcleo urbano son diferentes entre provincias (P<0,001), oscilando mayormente entre 1 y 6 km (68%), siendo el acceso por caminos afirmados (56%). El tamaño medio de los rebaños es reducido (13,6 animales) y distinto entre provincias (P<0,05), y se conforma en promedio por animales mayores de 1 año [1,03 machos (7,6%) y 6,25 hembras (45,8%)] y animales en crecimiento menores de 1 año [6,35 (46,6%)]. Estos animales descansan en corrales de madera, troncos y/o ramas (56%) y de piedra (16%), produciendo 1 litro de leche/día y al sacrificio 15,6 kg de carne. La venta de cabras mediante intermediarios es realizada por el 65,3% de los propietarios que en promedio tienen 49 años, no tienen estudios (33,3%), ni pertenecen a ningún tipo de asociación; sin embargo, un 89,3% de ellos desean asociarse con el objetivo de conseguir apoyo técnico y económico del gobierno (85,3%), así como mejorar los canales y formas de comercialización (77,3%). La media de mano de obra empleada por explotación es de 1,1 UTA (0,14 UTA por cabra). La cabra apurimeña se corresponde con un animal de formato eumétrico y tipo brevilíneo con tendencia mediolínea. De perfil frontonasal recto (69,4%), cuernos arqueados (53,6%) y color de la capa mayoritariamente manchado (44,5%) ─policromado en diferentes variedades─, pelo corto (86,6%), orejas medianas (57,4%) y horizontales (49,3%). Presenta perilla o barbilla (60,8%), piel y mucosas pigmentadas (82,3%) así como pezuñas (95,2%). Existe un marcado dimorfismo sexual para el perfil frontonasal y el tipo de cuernos (P<0,001). Dimorfismo significativo también se observa en las variables cuantitativas: altura a la cruz, diámetros dorsoesternal y bicostal, anchura de grupa, y perímetros torácico y de caña. La longitud y anchura de cabeza, el perímetro de caña, el diámetro longitudinal y dorsoesternal, fueron las variables más discriminatorias, en orden de importancia, entre las diferentes subpoblaciones caprinas. Los valores de las distancias de Mahalanobis determinaron que las subpoblaciones más semejantes morfológicamente fueron Andahuaylas y Chincheros (P>0,05) y las más heterogéneas Abancay y Chincheros (P<0,001). La variabilidad genética fue alta, con una heterocigosis esperada media de 0,70 a través de todos los loci, y un número medio de alelos por locus de 8,62. Las cinco subpoblaciones mostraron niveles similares de diversidad genética (diferencias no significativas) y la variabilidad genética explicada por las diferencias entre ellas fue pequeña (FST = 0,03). De manera individual (FIS = 0,11) y en conjunto (FIT = 0,13), las subpoblaciones se desviaron del equilibrio Hardy-Weinberg, debido a un déficit de heterocigotos, probablemente consecuente al tipo de manejo reproductivo propio de las zonas estudiadas, caracterizado por ser no planificado, practicar apareamientos indiscriminados, préstamo de machos entre explotaciones y mantener una ratio macho/hembra muy bajo. El análisis factorial de correspondencias y los dendrogramas obtenidos mediante los métodos UPGMA y NJ, señalan claramente que las subpoblaciones de Abancay, Andahuaylas y Chincheros están más relacionadas genéticamente, lo que está en perfecto acuerdo con la proximidad geográfica existente entre ellas. Asimismo, nos indican que las subpoblaciones de Grau y Aymaraes, muestran un cierto grado de separación con respecto a las otras subpoblaciones. En general las subpoblaciones constituyen un grupo genético homogéneo sugiriéndonos que existiría una única estructura genética poblacional. / Goats in five provinces of the Apurimac region of Peru were investigated with the objective of characterizing them structurally, morphologically and genetically. The structure of all apurimeñas goat farms is characteristic of an extensive system and family type, where the regime of communal land possession (90.7%) and the smallholding [land <10 ha (93.3 %)] predominate. The distances from the farms to the urban center are different between provinces (P<0.001), between 1 and 6 km (68%), with access by dirt roads (56%). The average size of flocks is reduced (13.6 animals) and differs between provinces (P<0.05), and it is mainly made of animals older than 1 year [1.03 males (7.6%) and 6.25 females (45.8%)] and growing animals under 1 year [6.35 (46.6%)]. These animals rest in farmyards made of wood, trunks and/or branches (56%) and stone (16%), producing 1 liter of milk/day and 15.6 kg of meat. The goats are sold through intermediaries by 65.3% of the farm owners, who are on average have 49 years old, have no education (33.3%), nor belong to any type of organization, however, 89.3% of them want to partner with the aim of obtaining technical and financial support from the government (85.3%), and also for improving marketing channels and means of marketing (77.3%). The average labor input per farm is 1.1 UTA (UTA 0.14 per goat). The apurimeña goat has a eumetric phenotype, with a brevilineous to mediolineous trend. Frontonasal profile is straight (69.4%), horns are arched (53.6%) and coat color is generally spotted in various patterns (44.5%). The hair is short (86.6%), ears have medium length (57.4%) and are horizontal (49.3%). Most have a beard (60.8%), skin and mucous membranes are usually pigmented (82.3%) as are hooves (95.2%). There is a marked sexual dimorphism for the frontonasal profile and the type of horns (P<0.001). Significant sexual dimorphism is also seen in these quantitative variables: height at withers, chest height, chest width, rump width, chest girth and cannon bone circumference. The head length, head width, cannon bone circumference, chest height and body length, were the variables most discriminating in order of importance, among different goat subpopulations. The values of Mahalanobis distances determined that the Andahuaylas and Chincheros subpopulations were the most morphologically similar (P>0.05) while Chincheros and Abancay were the most heterogenous (P<0.001). Genetic variability was high, with a mean expected heterozygosity of 0.70 across all loci and a mean number of alleles per locus of 8.62. The five subpopulations showed similar levels of genetic diversity (no significant differences) and genetic variability explained by the small differences between them (FST = 0.03). Individually (FIS = 0.11) and overall (FIT = 0.13), the subpopulations deviated from the Hardy-Weinberg equilibrium due to a deficit of heterozygotes, probably because of the bad practices of the farmers in these studied areas, characterised by unplanned reproductive management, indiscriminate mating, males loan between farms and maintaing a very low ratio of male/female. The factorial correspondence analysis and dendrograms obtained by UPGMA and NJ methods, clearly indicates that the subpopulations of Abancay, Andahuaylas and Chincheros are more related genetically, which is in perfect agreement with the geographical proximity between them. The analysis also indicate that the subpopulations Aymaraes and Grau show a degree of separation from the other subpopulations. Overall the subpopulations are a homogeneous genetic group suggesting that there is a single genetic population structure.

El óxido nítrico (ON) es una molécula endógena, de señalización intercelular y que se forma a partir del aminoácido L-arginina, a través de la enzima ON-sintasa (ONS). Está involucrado en un amplio espectro de procesos fisiopatológicos, dentro de los cuales cabe destacar los que afectan la vía respiratoria y los que implican fenómenos infecciosos. Los nitritos y nitratos (ONx) en sangre y orina son sus metabolitos estables y se utilizan como marcadores de la cuantía de su síntesis endógenaEl objetivo del estudio fue determinar el óxido nítrico expirado (ON exp) en los tres primeros días de vida del recién nacido en relación a: las horas de vida, edad gestacional, tipo de parto y riesgo de infección perinatal. Nuestra hipótesis fue que el ON exp aumentaría en recién nacidos con alto riesgo de infección perinatal. El gas expirado fue recogido utilizando una máscara facial y la concentración de ON determinada mediante quimioluminiscencia. Para la validación del sistema de recogida se realizaron diferentes experimentos: Limpieza del aire inspirado por el neonatos para evitar la contaminación con el ON ambiental; confirmación de la estanqueidad del sistema de recogida; descartar la interacción del ON con el material de recogida; limpieza del ON ambiental del sistema de recogida antes de la aplicación al recién nacido; estabilidad de las concentraciones de ON y ON2 con el tiempo; reproducibilidad intrasujeto; influencia del llanto y la sedación; El ON exp se recogió en 166 recién nacidos: 108 sanos (63 a término y 45 pretérmino). Treinta fueron neonatos con bajo riesgo de infección perinatal, y 28 con alto riesgo de infección perinatal (tratada con antibióticos pero que no tuvieron hemocultivo positivo). El ON exp total no correlacionó con la edad gestacional, el peso de nacimiento el tipo de parto ni los nitratos en sangre, si que existió relación con las horas de vida. El ONexp en el subgrupo de menos de 36 horas de vida (mediana, rango intercuartil) fue mayor en los recién nacidos con alto riesgo de infección perinatal (n= 8; 5.33 (4.5-7.2) nL/min*Kg) que en los recién nacidos sanos (n= 59; 4.13 (3.5-4.7) nL/min*Kg) o los de bajo riesgo de infección perinatal (n= 18; 3.99 (3.4-4.7) nL/min*Kg). En el subgrupo de 37 a 72 horas de vida también existieron diferencias entre los recién nacidos sanos (n= 49; 4.683 (4.1-5.3) nL/min*Kg) y los bajo riesgo de infección perinatal (n= 12; 4.55 (3.9-5.2) nL/min*Kg) por un lado y los de alto riesgo de infección perinatal por otra parte (n= 20; 9.69 (7.6-11.1) nL/min*Kg). Por lo tanto, los recién nacidos sanos, los de bajo riesgo de infección perinatal y los de alto riesgo, tienen diferencias significativas, respecto a las cifras de ONe en ppm (P= 0.026) como respecto a las cifras de ONet (p= 0.037) tanto si se examinan antes de las 36 horas de vida como después. El análisis univariado de la varianza de las cifras de ONet en relación a dos factores (nivel de riesgo de infección y horas de vida) y tres covariables (peso al nacimiento, edad gestacional y ON ambiental) mostraron que el modelo era adecuado (corrección R2= 0.530, p<0.001) y que el único factor con significación fue el nivel de riesgo de infección (sano, bajo riesgo, alto riesgo; p < 0.001). En relación a los nitritos y nitratos en sangre, no existieron diferencias significativas en relación a la edad gestacional, tipo de parto, horas de vida y riesgo de infección, ni correlación con el ON expirado. Tampoco se encontraron diferencias para dichas variables en los nitritos y nitratos en orina, ni los nitritos y nitratos/creatinina en orina.

El Trastorno por Déficit de Atención con Hiperactividad (TDAH) es uno de los trastornos más prevalentes en la infancia y se caracteriza por un marcado deterioro en la Función Ejecutiva. La cual es un factor fundamental para que el niño se desenvuelva y se adapte a las exigencias de su entorno inmediato. Los déficits en este funcionamiento afectan de manera directa el desempeño escolar, el aprendizaje y la socialización de los niños con TDAH, y son expresados en una mala regulación emocional y conductual, dificultades para iniciar, planificar y organizar tareas, baja flexibilidad cognitiva, deficiencias en la memoria de trabajo y la monitorización. Actualmente existe gran controversia sobre la nosología del TDAH, debido a la gran incidencia de sobrediagnósticos y las altas tasas de comorbilidad reportadas en los últimos años. Ha adquirido gran relevancia el estudio del Tempo Cognitivo Lento, el cual está siendo estudiado para su definición y su relación con el TDAH; además, la distinción y comparación del TDAH con el Trastorno Negativista Desafiante (TND), el Trastorno Disocial (TD) y el fenotipo amplio del Trastorno Bipolar Pediátrico (TBP). Recientes investigaciones consideran de gran importancia conocer las características neurocognitivas del TDAH y trastornos comórbidos para mejorar su conceptualización y realizar diagnósticos diferenciales certeros. El objetivo general de esta tesis es estudiar el funcionamiento ejecutivo de niños y adolescentes con TDAH y otras sintomatologías asociadas, desde edad preescolar hasta la caracterización de este funcionamiento en adolescentes con diagnóstico clínico. Para ello, se realizaron tres estudios empíricos: 1) se estudió la asociación entre la Función Ejecutiva y los síntomas del TDAH, TND y TD, en una población española de 444 niños de entre 3 y 6 años de edad; 2) en una población clínica de 76 niños y adolescentes, se analizó el efecto directo de la sintomatología de TDAH en sus dos subtipos y los síntomas de Tempo Cognitivo Lento sobre los déficits de la Función Ejecutiva; 3) en la misma población clínica, se analizó la asociación entre los déficits de la Función Ejecutiva y la sintomatología de TDAH y fenotipo amplio del TBP a través de un modelo de ecuaciones estructurales. Los resultados indican que los síntomas de TDAH, TND y TD están asociados a diferentes déficits de la Función Ejecutiva; con ello ha sido posible distinguir los perfiles neurocognitivos relacionados con cada grupo de síntomas estudiado en preescolares. En el segundo estudio, resultó que la presencia de sintomatología del Tempo Cognitivo Lento implica déficits en la Función Ejecutiva independientemente de los síntomas de TDAH. Es decir, ambas sintomatologías fomentan un deterioro ejecutivo en los niños y adolescentes. En el tercer estudio resultó que los niños con síntomas de TDAH presentan un perfil neurocognitivo distinto de los niños con síntomas de fenotipo amplio de TBP, a pesar de que ambos grupos sintomáticos comparten problemas en la inhibición conductual y en la flexibilidad cognitiva, existen otras dificultades ejecutivas que los hacen diferentes. Como conclusión, las diferentes sintomatologías estudiadas resultaron asociadas a distintos perfiles de funcionamiento ejecutivo; los niños con síntomas de desatención presentaron más problemas relacionados con la Función Ejecutiva que el resto de niños, esto puede observarse desde primeras edades hasta la adolescencia. Esta información puede ser una aportación más a las investigaciones que se interesan por proporcionar un término adecuado al grupo de síntomas que representan la desatención. La detección temprana de déficits ejecutivos puede ayudar en la realización de diagnósticos certeros, dar pautas en la elaboración de estrategias adecuadas de enseñanza e intervención clínica, y con ello prevenir el incremento de estas deficiencias y mejorar las habilidades sociales y emocionales de los niños con TDAH. / The Attention Deficit with Hyperactivity Disorder (ADHD) is one of the most prevalent disorders in childhood and is characterized by a marked deterioration in Executive Function. Executive Function is a crucial factor for the child to function and adapt to the demands of his/her immediate environment. Deficits in this functioning directly affect school performance, learning and socialization of children with ADHD, and are expressed in an emotional and behavioral dysregulation, difficult to initiate, plan and organize tasks, low cognitive flexibility, and deficits in working memory and in monitoring. Currently there is great controversy over the nosology of ADHD because of the high incidence of overdiagnosis and high comorbidity rates reported in recent years. The study of Sluggish Cognitive Tempo has acquired great importance. It is being studied to be defined and to understand its relationship with ADHD. In addition, authors distinguish and compare ADHD with Oppositional Defiant Disorder (ODD), conduct disorder (CD) and the broad phenotype of Pediatric Bipolar Disorder (PBD). Recent research considered of great importance to knowing the neurocognitive characteristics of ADHD and comorbid disorders to improve their conceptualization and make accurate differential diagnoses. The general objective of this thesis was to study the executive function of children and adolescents with ADHD and other associated symptomatology, from preschool through the characterization of this functioning in adolescents with clinical diagnosis. To this end, three empirical studies were conducted: 1) the association between Executive Function and symptoms of ADHD, ODD and CD, in a Spanish population of 444 children between 3 and 6 years of age; 2) analysis of the direct effect of ADHD symptomatology and its two subtypes and the Sluggish Cognitive Tempo symptoms on Executive Function deficits in a clinical population of 76 children and adolescents; 3) the association between deficits in Executive Function and ADHD symptomatology and broad phenotype of PBD was analyzed through a structural equation model in the same clinical population. Results indicate that the symptoms of ADHD, ODD, and CD are associated with different Executive Function deficits. Thus, it was possible to distinguish the neurocognitive profiles associated with each group of studied symptoms in preschoolers. In the second study, it appeared that the presence of symptoms of Sluggish Cognitive Tempo involves deficits in Executive Function regardless of the symptoms of ADHD. That is, both symptomatologies promote executive impairment in children and adolescents. In the third study, children with ADHD have symptoms of neurocognitive profile different from that of children with symptoms of broad phenotype of PBD. Although both symptomatic groups share problems in behavioral inhibition and in cognitive flexibility, there are other executive difficulties making them different. As a conclusion, the different symptomatologies were associated with different patterns of executive functioning. Children with symptoms of inattention had more problems with Executive Function than other children. This can be observed from early age through adolescence. This information may be an additional contribution to the research concerned with providing an appropriate term to represent the group of symptoms of inattention. Early detection of executive deficits can help in achieving accurate diagnoses, provide guidance in developing appropriate instructional strategies and clinical intervention, and thus prevent the increase of these deficiencies and improve social and emotional skills of children with ADHD.