En la Unión Europea, la inactividad física se considera la cuarta causa de fallecimiento, tras el tabaco, la hipertensión arterial y la obesidad que, por otra parte son factores de riesgo estrechamente relacionados con la inactividad física. Por ello, en las últimas décadas, Europa ha presentado una claro progreso en temas de promoción del deporte. El objetivo principal de esta tesis doctoral ha sido analizar el comportamiento en cuanto a nivel de actividad física y factores que previenen la inactividad en los habitantes de países de la Unión Europea y hacer un estudio epidemiológico de las lesiones deportivas en algunos de estos países. Los resultados pueden contribuir a mejorar las estrategias de las administraciones sanitarias modificándolas o legislando de una forma adecuada. / In the European Union, physical inactivity is considered the fourth leading cause of death, after tobacco, hypertension and obesity. There are risk factors that are closely related to physical inactivity. Physical activity is closely related to morbidity and mortality in developed countries, where non-communicable diseases have increased rapidly. Therefore, in recent decades, Europe has made clear progress in the promotion of sports topics. The main goal of this thesis is to analyze the level of physical activity, identify the factors that prevent the physical inactivity of inhabitants in the European Union countries and do an epidemiological study of sports injuries in some of these countries. With these relationships, we can develop specific strategies to improve prevention and to reduce the injuries that may occur.

Las enfermedades cardiovasculares son la causa principal de muerte prematura en los países desarrollados. El control de los factores de riesgo disminuye la aparición de estas enfermedades (Prevención Primaria) o su recaída (Prevención Secundaria). Sin embargo, a pesar del uso de tratamientos farmacológicos optimizados, en muchas ocasiones siguen apareciendo eventos adversos debido a un riesgo residual por lo que resulta esencial la búsqueda de estrategias complementarias a estos tratamientos farmacológicos. En dos ensayos clínicos aleatorios de un año, triple-ciego, de tres brazos, controlados por placebo, en 150 pacientes de Prevención Primaria y Secundaria, hemos constatado la mejora del perfil aterogénico, inflamatorio y fibrinolítico tras el consumo de un extracto de uva enriquecido en resveratrol. Nuestros resultados avalan que este suplemento contribuye a la prevención cardiovascular y complementa su tratamiento, sin efectos adversos, y supone un importante avance en la prevención del riesgo cardiovascular a través de un tratamiento no farmacológico. / Cardiovascular diseases are the main cause of premature death in developed countries. Controlling risk factors reduces the beginning (Primary Prevention) or relapse (Secondary Prevention) of these diseases. Nevertheless, a residual risk still remains and adverse outcomes often arise despite of optimized pharmacological treatments, thus the search for complementary strategies to these treatments is essential. In two randomized, triple blind, three-arm parallel, placebo-controlled clinical trials, with 150 primary and secondary prevention patients, we observed an improvement on the atherogenic, inflammatory and fibrinolytic profile after the consumption of a resveratrol enriched grape extract. Our results support that this supplement contributes to cardiovascular prevention and complements its treatment, without adverse effects, and is an important advance in cardiovascular risk prevention through a non-pharmacological treatment.

La transferencia nuclear de células somáticas (SCNT) en la especie porcina se ha convertido en una herramienta muy útil para para la elaboración de modelos genéticos de enfermedades humanas y para el uso en xenotransplantes. Aunque el número de cerdos clonados aumenta cada año, la eficiencia total de esta tecnología es todavía muy baja. Uno de los pasos más difíciles de la SCNT en porcino es la enucleación del ovocito, principalmente debido a que su citoplasma contiene numerosas gotas lipídicas. El principal objetivo de la tesis fue evaluar el efecto de diversas técnicas para visualizar la placa metafásica y el corpúsculo polar sobre la capacidad de desarrollo de ovocitos porcinos madurados in vitro. / Somatic cell nuclear transfer (SCNT) technology in porcine has become a very useful tool for the elaboration of genetic models for human diseases and the use in xenotransplantation. The efficiency of SCNT is still very low, although the number of cloned pigs increases each year. One of the hardest steps of porcine SCNT is the enucleation of the oocyte because its cytoplasm contains many lipid droplets. The main objective of this thesis was to assess the effect of several approaches to visualize the metaphase II plate and the first polar body on the developmental ability of in vitro mature porcine oocytes.

Tesis por compendio de publicaciones / La gran preocupación que existe actualmente alrededor del peso corporal, está colaborando a la proliferación de innumerables dietas de adelgazamiento entre las personas “no satisfechas con su peso”. En este sentido hemos estudiado la obesidad desde un punto de vista cronobiológico, para poder dilucidar la importancia que tiene la alteración circadiana de ciertos ritmos biológicos en la ganancia de peso o la no pérdida del mismo. El acúmulo de grasa corporal y el grado de lipogénesis en el tejido adiposo podría ser diferente a distintas horas del día, ingiriendo las mismas calorías. A su vez uno de los aspectos más interesantes, es poder conseguir una caracterización cronobiológica de cada individuo, establecer mejoras en las terapias de comportamiento alimentario, introducir nuevos índices que permitan detectar pacientes de riesgo y poder establecer pautas alimentarias y hábitos de vida individualizados que ayuden a estos pacientes a alcanzar la meta de peso propuesta. / The great controversy now there about body weight, is collaborating with the proliferation of countless diets among people "not satisfied with their weight." In this sense, we have studied obesity from a chronobiological viewpoint, to elucidate the importance of the alteration of circadian biological rhythms in weight gain or no loss. The accumulation of body fat and the degree of lipogenesis in adipose tissue may be different n accordance with the time of day, even eating the same calories. In turn one of the most interesting aspect, is to be able to characterize the individual chronobiology of each patient, establish improved therapies feeding behavior, introducing new indices to detect patients at risk and to establish dietary patterns and lifestyle habits that help these patients to achieve the proposed weight goal.

En este trabajo se evaluó la utilidad de una serie de marcadores: triglicéridos, ácido úrico, forma soluble de la tirosín kinasa 1 (sFlt-1), factor de crecimiento placentario (PlGF), múltiplo de la mediana de la proteína plasmática A asociada al embarazo (MoM PAPP-A), antígeno sérico CA125 (CA125), enzima convertidora de angiotensina (ECA) y el estudio ecográfico Doppler, como posibles predictores de preeclampsia en el primer y segundo trimestre de gestación. Se incluyeron un total de 68 gestantes con “riesgo a priori” de desarrollar preeclampsia (diabetes mellitus tipo I, enfermedad renal preexistente, hipertensión crónica sin proteinuria, etc) y un grupo control. De esas 68 gestantes, 8 desarrollaron preeclampsia. La combinación de marcadores más eficiente fue utilizando el PlGF del primer trimestre con un punto de corte ≤37,6 pg/ml, un índice de resistencia ≥0,7 y la ECA≥ 40,4 U/L del segundo trimestre, pudiendo predecir el 87,5% de las gestantes que desarrollarían preeclampsia. / This study evaluated the usefulness of several biomarkers: triglycerides, uric acid, soluble fms-like tyrosine kinase-1 (sFlt-1), placental growth factor (PlGF), multiple of the median of pregnancy associated plasma protein-A (PAPP-A MoM), serum antigen CA125 (CA125), angiotensin converting enzyme (ACE) and the Doppler ultrasound as predictors of preeclampsia in the first and second trimester of pregnancy. We included a total of 68 pregnant women with "a priori risk" of develop preeclampsia (type I diabetes mellitus, preexisting renal disease, chronic hypertension without proteinuria, etc) and a control group. Of those 68 pregnant women, 8 developed preeclampsia. The most efficient combination of the studied biomarkers was the use of PlGF in the first-trimester with a cut-off ≤37.6 pg/ml, a resistance index ≥0.7 and ACE ≥40,4 U/L in the second trimester which can predict 87,5% of pregnant women who develop preeclampsia.

Este trabajo estudia la prevalencia de desórdenes musculoesqueléticos y trastornos del sueño en dentistas de nuestro medio; pretende determinar su relación con factores ocupacionales específicos propios de la profesión odontológica, y establecer las necesidades preventivas en nuestro entorno sociodemográfico para esta profesión. Material y método: Se utiliza un cuestionario autoadministrado enviado por correo postal o electrónico, que incluye datos de filiación, preguntas sobre el ambiente laboral, características y ritmo de trabajo, dolores musculoesqueléticos, y calidad del sueño. La muestra de estudio fueron 220 dentistas pertenecientes al Colegio de Odontólogos y Estomatólogos de la Región de Murcia, que fueron los que devolvieron el cuestionario debidamente cumplimentado, de los 845 a los que se les envió, una vez excluidos los de aquellos con menos de 12 meses de ejercicio profesional. Resultados: Encontramos una alta prevalencia de dolores musculoesqueléticos en los dentistas encuestados: 28,2% en cuello y hombros, 18,2% en lumbares, 15,5% en cabeza, 11,4% en dorsales, y 7,3% en manos y muñecas. Hay una relación positiva y estadísticamente significativa entre el número de horas de trabajo y el índice de dolor corporal. También existe entre las horas de trabajo al día y el dolor lumbar, de cuello y hombros. Sin embargo, no se ha encontrado relación entre índice de dolor corporal y la carga física de trabajo (número de pacientes por jornada y tiempo por paciente). Tampoco se ha podido encontrar relación significativa entre índice de dolor corporal y los años de ejercicio. De hecho, a mayor edad y más años de ejercicio, se encuentra significativamente menos dolor de cuello y hombros. En nuestro estudio no se encuentra relación de la edad y los años de ejercicio con la corrección postural durante el trabajo, con lo que la puesta en práctica de principios ergonómicos por mayor experiencia y conocimiento de tales principios, no es un hecho en nuestra muestra. Se observa una relación negativa estadísticamente significativa (p=0.020) entre el índice de dolor corporal y corrección postural. Concretamente, hay menor dolor de lumbares, y de pies y tobillos, al corregir las malas posturas. Trabajar más horas de pie o sentado no está relacionado significativamente con frecuencia de síntomas dolorosos. Parece que lo más conveniente es alternar la postura para relajar las lumbares al sentarse. A más años de ejercicio profesional, hay significativamente menor calidad del sueño, como síntoma de causa ocupacional, ya que esta relación es independiente de la edad. La calidad del sueño no mejora al mejorar la postura de trabajo adoptada. Se ha visto una fuerte relación entre la ansiedad percibida por el dentista en el desarrollo de su trabajo y el dolor de lumbares. A mayor frecuencia de esta percepción, peor calidad del sueño. Aquellos que practicaban algún deporte regularmente, padecían significativamente menor ansiedad, lo que induce a recomendar la actividad física para mitigar la prevalencia de dolor lumbar en dentistas. Los dentistas más sedentarios referían significativamente (p=0.019) mayor dolor. Los sujetos que habían estado de baja por enfermedad tenían un índice de dolor corporal significativamente más elevado (p=0,003). Los diagnósticos y las bajas por trastornos musculoesqueléticos no se asocian a los parámetros relacionados con trastornos del sueño estudiados. / Aim: The aim of this work is to study the prevalence of musculoskeletal disorders and sleep disorders in dentists of our environment ; It’s focus on determinating their relation to specific occupational factors specific to the dental profession and to establish preventive needs in our demographic environment for this profession. Material and methods: A self-administered questionnaire sent by mail or email, including personal data, questions about the work environment, characteristics and patterns of work, musculoskeletal pain, and sleep quality is used. The sample were 220 dentists belonging to the College of Dentistry of Murcia, who were those who returned the completed questionnaire from 845 to which they were sent, those with less than 12 months of practice where not included in this study. Results: We found a high prevalence of musculoskeletal pain in dentists surveyed: 28.2% in neck and shoulders, 18.2 % at the lumbar area, 15.5 % in head, 11.4% in the dorsal zone, and 7.3 % in hands and wrists. There is a positive and statistically significant relationship between the number of hours worked and the rate of body pain. Also between the hours of work a day and back, neck and shoulders pain. However, no relationship was found between the index of body pain and physical workload (number of patients per day and time dedicated to each of them). The relationship between pain and years of exercise could have not been proved. In fact, the older the dentist is and the more years on duty he has been, the less neck and shoulder pain they normally have. This fact has been found to be statistically significant. In our study, no relationship was found between age and years of professional practice, and postural correction during work. This means that the implementation of ergonomic principles because of having greater experience and knowledge of these principles is not a fact in our sample. A statistically significant negative relationship (p=0.020) between the index of body pain and postural correction is observed. Specifically, there is less pain in the lower back, feet and ankles, when bad postures are corrected. The frequency of painful symptoms is not significantly related to the number of hours working no matter if standing or sitting. It seems that it is best to alternate both of them to relax the lower back when working sitted. The more years of practice dentist have the less sleep quality is reported. This is considered a symptom of occupational cause, and this relationship is independent of age. Sleep quality is not improved by improving working postures. It has been a strong relationship between the anxiety dentists perceive during their work and lumbar pain. The higher this perception is the worse sleep quality is revealed. Those who practice sport regularly, suffered significantly lower anxiety. This fact lead us to recommend physical activity to relieve back pain prevalence in dentists. The more sedentary life dentists had, the greater pain they referred. These two facts are significantly related (p=0.019). Subjects who had been on sick leave had a significantly higher rate of body pain (p = 0.003). Diagnoses and sick leaves due to musculoskeletal disorders are not associated with the parameters related to sleep disorders studied.

Objetivos: Generales (1) Explorar la relación existente entre las personas que intervienen en el cuidado de una persona ingresada en una unidad de hospitalización de media estancia. (2) Identificar las necesidades que presentan los familiares de pacientes ingresados en una unidad de estancia media y explorar el grado de satisfacción de dichas necesidades. Específicos (1) Conocer la construcción de la figura del cuidador familiar hospitalario desde la perspectiva de los propios familiares cuidadores y de los profesionales de los cuidados (enfermeras y auxiliares de enfermería) en una unidad de hospitalización de estancia media. (2) Determinar el modelo de interacción entre cuidadores familiares y los profesionales del cuidado en una unidad de hospitalización de estancia media. (3) Explorar los perfiles de cuidadores familiares más frecuentes y describir las características sociodemográficas (sexo, edad, parentesco, estudios, ocupación y convivencia con el paciente) que los definen. (4) Evaluar las diferencias en las necesidades y el grado de satisfacción de las mismas de los cuidadores familiares de los pacientes según los perfiles hallados. (5) Analizar el porcentaje de necesidades importantes que han sido totalmente satisfechas según los perfiles de cuidador familiar. (6) Examinar la relación entre la situación de dependencia clínica del paciente con las necesidades y la satisfacción de las mismas del cuidador familiar según los perfiles hallados. Método: Diseño mixto cuali-cuantitativo. La investigación se ha llevado durante los años 2012 y 2013 en un hospital clínico universitario de la Región de Murcia, en el área destinada a pacientes con patologías neurológicas. Parte cualitativa: Orientación fenomenológica e interaccionismo simbólico. Se realizó un grupo focal en el que participaron 4 enfermeras y 4 auxiliares de enfermería aplicando un muestreo teórico. Se realizaron dos grupos triangulares con los cuidadores familiares, el primero compuesto por 3 cuidadores familiares masculinos y el segundo por 3 familiares femeninos. Se transcribieron los datos y se realizó un análisis de contenido tras categorización inicial que atendía a los fundamentos del marco teórico. Parte cuantitativa: Estudio observacional transversal. Población de estudio: familiares que ejercían de cuidadores informales. Criterios de inclusión: familiar, cuidador habitual del paciente y estancia mínima una semana. Tamaño muestral de 150 sujetos. Muestreo no probabilístico consecutivo. La recogida de información se llevó a cabo mediante llamada telefónica tras el alta del paciente. Se empleó un cuaderno de recogida de datos que incluía: a) características clínicas de los pacientes b) aspectos sociodemográficos del cuidador familiar (CF); y c) necesidades y la satisfacción de las mismas percibidas por los CF. Para ello se empleó el Cuestionario de Necesidades Familiares (FNQ) validado en el contexto español. El cuestionario mide 6 necesidades (puntuadas de 4 muy importante a 1 nada importante) y la satisfacción de estas necesidades (puntuadas de 0 no satisfecha a 2 satisfecha). Para el análisis de los datos se llevó a cabo un análisis estadístico descriptivo, y se utilizó programa estadístico SPSS 21.0. Resultados: El rol del cuidador en el hospital se construye a partir de cuatro grandes categorías: funciones atribuidas a la familia, demandas de los cuidadores formales e informales, falta de legitimidad y características de la interacción cuidador familiar-enfermera y cuidador familiar-auxiliar de enfermería. En el estudio cuantitativo participaron 152 sujetos, 34,4% hombres y un 65,6% mujeres. El grupo de edad más frecuente (44,7%) es el que oscila entre 41y 60 años. Los CFs más numerosos son hijas, con estudios primarios y trabajadoras en activo. El diagnóstico principal de los pacientes atendidos por los CF es el accidente cerebro vascular (ACV) con un 58,6%. Además, casi un 50% tiene riesgo moderado-alto de UPP y un 62% de los pacientes tienen riesgo alto de caídas. La necesidad más valorada por los CF es la necesidad de información (media (M): 3,75; Desviación Típica (DT): 0,32). Le siguen la necesidad de apoyo profesional (M:3,65; DT:0,45), de implicación (M:3,44; DT:0,48), de apoyo comunitario (M:3,43; DT:0,56) , de apoyo instrumental (M:3,34; DT:0,57) y de apoyo emocional (M:3,13 DT:0,71). Ninguna de las necesidades se considera satisfecha completamente. La necesidad más satisfecha es la necesidad de información (M:1,51; DT: 0,41). Le siguen la necesidad de apoyo comunitario (M:1,45; DT: 0,48), de implicación (M:1.45; DT:0,50), de apoyo emocional (M:1,25; DT:0,59), apoyo profesional (M:1,08; DT:0,58) y de apoyo instrumental (M: 1,07; DT: 0,57). Conclusiones: Se diferencian tres perfiles de cuidador familiar (CF) en el ámbito hospitalario, las variables que predicen estos perfiles son género, parentesco y tipo de ocupación. El perfil más habitual es el de mujer, hija del paciente, con estudios universitarios, edades comprendidas entre los 26 y 40 años y trabajo remunerado. El segundo perfil más frecuente es el de mujer, esposa o cónyuge, con edades entre 41 y 60 años, estudios primarios y se dedica a la labores del hogar. El tercer perfil diferenciado es el de hombre, hijo del paciente, que tiene entre 41-60 años, con estudios primarios y trabajo remunerado. El modelo de relación que emerge entre las profesionales de cuidados y los CF podría enmarcarse dentro del modelo Trabajador-Trabajador en las enfermeras. El discurso de las auxiliares es más cercano a un modelo Enfermera-Ayudante. Todas las necesidades de los CF han obtenido puntuaciones bastante próximas y superiores a 3 puntos. Se evidencia que la demanda de información de los CF es un aspecto destacado. La primera y tercera necesidad señaladas como más importantes (información e implicación) para los encuestados, son también las más satisfechas. / Abstract Aims: General aims: (1) To explore the relationship between those involved in the care of a person admitted to an inpatient unit of length of stay. (2) To identify the needs presented by family members of patients admitted to a unit of length of stay and explore the satisfaction of those needs. Specific aims: (1) To know the construction of the figure of the hospital family caregiver from the perspective of their own family caregivers and care professionals (nurses and nursing assistants) in an inpatient unit of length of stay. (2) To determine the model of interaction between family caregivers and professional care in an inpatient unit of length of stay. (3) To browse profiles more frequent family caregivers and describe the sociodemographic characteristics (gender, age, parentage, education, occupation and living with the patient) that define. (4) To assess differences in the needs and satisfaction of these family caregivers of patients according to the profiles found. (5) To analyse the percentage of major needs have been fully met as family caregiver profiles. (6) To examine the relationship between clinical status of the patient dependency needs and meeting them as family caregiver profiles found. Method: Qualitative and quantitative mix design. The research was carried out during the years 2012 and 2013 in a university teaching hospital of the Region of Murcia, in the area for patients with neurological diseases. Qualitative part: phenomenological orientation and symbolic interaction. A focus group with the participation of four nurses and four nursing assistants applying a theoretical sampling was done. Two triangular groups with family caregivers were conducted, the first consisting of three male family caregivers and the second by 3 female relatives. Data were transcribed and content analysis was performed after initial categorization attending the fundamentals of theoretical framework. Quantitative part: Cross-sectional study. Study population: exercising informal family caregivers. Inclusion criteria: family, patient and caregiver usual minimum one weeks stay. Sample size of 150 subjects. Consecutive non-probabilistic sampling. The collection of information was conducted by telephone after discharge. A notebook of data collection was used included: a) clinical characteristics of patients b) sociodemographic aspects of the family caregiver (CF); c) needs and satisfaction of the same perceived by CF. For this, the Family Needs Questionnaire (FNQ) validated in the Spanish context was used. The questionnaire measures 6 needs (scored from 4 very important to 1 not important) and meeting these needs (scored from 0 unsatisfied to 2 satisfied). For the analysis of the data it was carried out a descriptive statistical analysis, and SPSS 21.0 was used. Results: The role of the caregiver in the hospital is built from four main categories: attributed to family functions, demands formal and informal caregivers, lack of legitimacy and features family-nurse interaction caregiver and family caregiver nursing-assistant. In the quantitative study 152 subjects were collected, 34.4% men and 65.6% women. The most frequent age group (44.7%) is ranging between 41 and 60 years. CF are the most numerous daughters, with primary education and active workers. The main diagnosis of patients seen by the CF is the stroke with 58.6%. In addition, almost 50% have moderate to high risk of pressure ulcers and 62% of patients at high risk of falling. The need valued by CF is the need for information (mean (M): 3.75, Standard Deviation (SD): 0.32). Followed by the need for professional support (M: 3.65, SD: 0.45), involvement (M: 3.44, SD: 0.48), community support (M: 3.43; DT: 0 , 56), instrumental support (M: 3.34, SD: 0.57) and emotional support (M: 3.13 TD: 0.71). None of the requirements is satisfied completely. The unmet need is the need for information (M: 1.51, SD: 0.41). Followed by the need for community support (M: 1.45, SD: 0.48), involvement (M: 1.45, SD: 0.50), emotional support (M: 1.25, SD: 0.59 ), professional support (M: 1.08, SD: 0.58) and instrumental support (M: 1.07, SD: 0.57). Conclusions: Three profiles of family caregiver (CF) in hospitals differ, variables that predict these profiles are gender, kinship and type of occupation. The most common profile is that of woman, daughter of the patient, college educated, aged between 26 and 40 years and paid work. The second most common profile is that of a woman, wife or spouse, aged 41 and 60, primary school and is engaged in the housework. The third differential profile is that of man, son of the patient, which is between 41-60 years, with primary education and paid work. The model of relationship that emerges between care professionals and the CF could be framed within the model worker-worker in the nurses. The auxiliary speech is closer to a nurse-assistant model. All needs of CF scores were obtained quite close and more than 3 points. It is evident that the demand for information CF is an important aspect. The first and third need mentioned as most important (information and involvement) to the respondents, are also the most satisfied.

Tesis por compendio de publicaciones / Esta tesis doctoral, por compendio de artículos, ha sido diseñada con el fin de producir avances en la medición de biomarcadores de estrés y para desarrollar y validar un panel de biomarcadores salivares para evaluar los diferentes sistemas fisiológicos (simpático-adrenomedular (SAM), hipotálamo-pituitario-adrenal (HPA), hipotálamo-pituitario-gonadal (HPG) y sistema inmune) que participan en el mecanismo de estrés. Para ello, los objetivos de esta tesis son los siguientes: desarrollar y validar un ensayo inmunofluorométrico a tiempo resuelto (TR-IFMA) para las mediciones de cromogranina A (CgA) salivar porcina, utilizando un anticuerpo específico de la especie, y evaluar su comportamiento como posible biomarcador del sistema SAM en un modelo de estrés agudo. Además, estudiar si las concentraciones de CgA salivar exhiben un patrón circadiano durante el día, y evaluar su estabilidad bajo diferentes condiciones de almacenamiento. Por otra parte, validar inmunoensayos disponibles comercialmente para la cuantificación de cortisol (biomarcador del sistema HPA), testosterona (biomarcador del sistema HPG) e IgA (biomarcador del sistema inmune) en la saliva de los cerdos. Evaluar la respuesta de un panel de varios biomarcadores salivares tanto del sistema inmune como del sistema neuroendocrino a la administración repetida de Escherichia coli lipopolisacárido (LPS) y, por último, investigar la respuesta de todo este grupo de biomarcadores salivares después de aplicar un modelo de estrés psicosocial en cerdos basado en el aislamiento y el reagrupamiento. En cuanto a la metodología empleada, los anticuerpos policlonales específicos producidos para el desarrollo del TR-IFMA fueron obtenidos mediante la inmunización con un péptido recombinante de proteína CgA porcina. La precisión, exactitud y sensibilidad analítica del TR-IFMA desarrollado y de los inmunoensayos comerciales empleados fueron evaluadas mediante los coeficientes de variación intra- e interensayo, la linealidad bajo dilución y el porcentaje de recuperación, el límite de detección y los límites de cuantificación. Para estudiar la respuesta de los biomarcadores salivares frente al estrés se emplearon modelos en los que los animales fueron inmovilizados con un acial o transportados a matadero. Tomando muestras de saliva antes y después de aplicar dichos estímulos estresantes. Por otro lado, en el caso de la administración de LPS, los cerdos que fueron utilizados recibieron tres dosis de LPS en intervalos de 48 h. Las muestras de saliva fueron tomadas antes de la administración de LPS y 3 h después de cada una de las administraciones. Por otra parte, en el modelo de aislamiento y reagrupamiento todos los animales se adaptaron a la vida en grupo durante 5 días, después de lo cual, un grupo de cerdos fueron sometidos al procedimiento de aislamiento, donde los animales permanecieron sin contacto físico con otros cerdos durante 5 días. Después, los cerdos del ensayo se reagruparon de nuevo durante 3 días, regresando a las condiciones iniciales. Los cerdos controles permanecieron en las mismas condiciones durante todo el estudio. Las muestras de saliva se tomaron diariamente, a la misma hora, y un muestreo adicional fue realizado a los 30 min tras los procedimientos de aislamiento y reagrupado. En general, nosotros podemos concluir de este trabajo que: el TR-IFMA desarrollado permite la cuantificación de CgA en muestras de saliva porcina de una forma precisa, exacta y sensible y su concentración aumenta significativamente después de una situación de estrés agudo. Además, no ha sido detectado un patrón circadiano para la CgA salivar y este biomarcador fue bastante estable, siendo posible su almacenamiento hasta un año a -20ºC o -80ºC. Por otra parte, los inmunoensayos comerciales validados para las concentraciones de cortisol, testosterona e IgA pueden ser utilizados para su uso en muestras de saliva de cerdos con una buena precisión, sensibilidad y exactitud. En cuanto a la administración de LPS, una sola administración en cerdos produce incrementos de IgA salivar y cortisol. Sin embargo, administraciones repetidas solo producen incrementos en IgA mientras que el cortisol retorna a valores basales. No se observaron variaciones en las concentraciones de CgA ni con una sola administración ni con administraciones repetidas. Finalmente, el uso de un panel de biomarcadores salivares podría ser esencial en la investigación de estrés, ya que estos reaccionan de manera diferente a diversos tipos de factores estresantes. En el caso del aislamiento, CgA e IgA parecen ser marcadores más sensibles que el cortisol y la testosterona, mientras que después del proceso de reagrupado, el cortisol, la testosterona y la CgA parecen ser marcadores más sensibles que la IgA. / This PhD thesis, for compendium of articles, was designed in order to produce advances in the measurement of salivary biomarkers of stress and to develop and validate a panel of salivary biomarkers to evaluate the different physiological systems (sympatho-adrenomedullary (SAM), hypothalamic-pituitary-adrenal (HPA), hypothalamus-pituitary-gonadal (HPG) and immune system) that are taking part in stress mechanism. To this end, the objectives of this thesis are: to develop and validate a time-resolved immunofluorometric assay (TR-IFMA) for porcine salivary chromogranin A (CgA) measurements, using a species-specific antibody, and evaluate its behaviour as a potential biomarkers of SAM system in an acute stress model. In addition, to study if salivary CgA concentrations exhibit any circadian pattern during the daytime, and to evaluate its stability under different storage conditions. Moreover, validate commercially available immunoassays for cortisol (HPA system biomarker), testosterone (HPG system biomarker) and IgA (immune biomarker) quantification on the saliva of pigs. To evaluate the response of a panel of several salivary biomarkers both of immune system as well as of the neuroendocrine system to repeated administration of Escherichia coli lipopolysaccharide (LPS) and, finally, to investigate the responses of this group of salivary biomarkers after applying a psychosocial stressor model in pigs based on isolation and regrouping. Regarding the methodology, polyclonal antibodies specific for the development of TR-IFMA were produced in rabbits immunized with a recombinant protein peptide of CgA porcine. Precision, accuracy and analytical sensitivity of the TR-IFMA developed and of the commercial immunoassays used were evaluated by the coefficients of variation intra- and inter-assay, linearity under dilution and the percentage of recovery, limits of detection and limits of quantitation. To study the stress response of salivary biomarkers, models in which the animals were immobilized with a nose-snare or transported to slaughterhouse were used. Saliva samples were taken before and after of applying these stressful stimuli. On the other hand, in the case of LPS administrations, the pigs were selected to receive three doses of LPS at 48 h intervals. Saliva samples were taken prior to any LPS administration and at time points corresponding to 3 h after each injection. Moreover, in the model of isolation and regrouping all animals were adapted to group living for 5 days, after which time, pigs in one group were subjected to the isolation procedure, where each animal had not physical contact with other pigs during 5 days. After, test pigs were regrouped again during 3 days returning to the initial conditions. Control pigs were remained in the same housing condition during the entire experimental period. Saliva samples were taken daily, at the same time, and one sampling was carried out at 30 min after of isolation and regrouping events. In overall, we can conclude of this work that: the TR-IFMA developed allows the quantification of CgA in porcine saliva samples in a precise, accurate and sensitive way and its concentrations increase after an acute stress situation. In addition, no circadian pattern has been detected for salivary CgA and this biomarker was fairly stable being able to be stored till 1 year at -20ºC or -80ºC. Moreover, the commercial immunoassays validated for cortisol, testosterone and IgA concentrations can be suitable for its use in saliva samples of pigs with a good precision, sensitivity and accuracy. In relation to LPS administrations, a single administration in pigs produces increases of salivary IgA and cortisol. However, repeated administrations only produced increases in IgA whereas cortisol returned to baseline values. No variation in CgA concentrations were observed neither in single nor in repeated LPS administration. Finally, the use of a panel of salivary biomarkers would be essential in stress research, since these react differently to various types of stressors. In the case of isolation, CgA and IgA appear to be more sensitive markers than cortisol and testosterone, whereas after the process of regrouped, cortisol, testosterone and CgA seem to be more sensitive markers than IgA.

En los actuales tiempos de crisis económica, el personal sanitario está sometido a presión por parte de los superiores, de los usuarios y de uno mismo. La inestabilidad laboral, las exigencias, la falta de medios y de personal, hacen que este gremio sufra cada vez más el llamado "síndrome del quemado o burnout". El objetivo de la tesis es analizar si las dimensiones del Síndrome de Burnout (Cansancio Emocional, Despersonalización y Realización Profesional) se relacionan de forma estadísticamente significativa con las principales variables demográficas y personales de los trabajadores sanitarios de nuestra área de salud. Para ello nos proponemos determinar la prevalencia, describir las características sociodemográficas de los profesionales encuestados, detectar posibles factores de riesgo para, de esta forma, facilitar su detección precoz y prevención, y determinar el grado de satisfacción laboral del personal sanitario participante en el estudio. METODOLOGÍA: El estudio se llevó a cabo en el Área VI del Servicio Murciano de Salud. Entre el 1 de Febrero y el 30 de Abril de 2014, se repartieron cuestionarios entre el personal. El Síndrome de Burnout se estudió mediante la versión española del cuestionario de Maslach y se pasó también una encuesta de satisfacción laboral. Tanto el cuestionario, como la encuesta de satisfacción laboral fueron anónimos y se entregaron personalmente o a través de compañeros de trabajo, siendo su recogida igualmente anónima mediante buzón. El análisis estadístico se realizó con los programas SPSS v.15. y Epidat 4.1. La encuesta de satisfacción se valoró mediante una escala tipo Likert con puntuaciones de 1 a 4. CONCLUSIONES: 1ª.- Hemos observado una relación estadísticamente significativa entre las dimensiones del Síndrome de Burnout y determinadas características socio-demográficas del personal sanitario. 2ª.- La prevalencia de Síndrome de Burnout en los trabajadores sanitarios del Área de Salud VI de la Región de Murcia es alta para Despersonalización e intermedia para Cansancio Emocional y Realización Personal. 3ª.- Existen factores sociodemográficos relacionados con el desarrollo del Síndrome de Burnout. 4ª.- Detectar la existencia de estos factores podría contribuir al diagnóstico precoz y/o prevención del síndrome. 5ª.- La encuesta de satisfacción laboral refleja que su nivel de satisfacción es bueno, especialmente, en cuando a la relación con los compañeros. / In the current financial crisis, the health personnel is under pressure from superiors, users and oneself. Job insecurity, demanding workloads and the lack of resources and staff, are responsible for the so increasingly burnout syndrome. The aim of the thesis is to analyze if the dimensions of the Burnout Syndrome (Emotional Exhaustion, depersonalization and professional accomplishment) is statistically significantly associated with major demographic and personal variables of health workers in our health area. To do so, we propose to establish the prevalence, describe the sociodemographic characteristics of respondent professionals, identify potential risk factors, thus facilitating early detection and prevention and assessing the degree of job satisfaction among healthcare staff participating in the study. METHODOLOGY: The study was carried out in the Health Area VI of the Regional Health Service in Murcia. Between February 1 and April 30, 2014, questionnaires were distributed among staff. Burnout syndrome was studied by the Spanish version of the Maslach Burnout Inventory and it was also ran a survey of job satisfaction. Both the questionnaire and the job satisfaction survey were anonymous and delivered personally or by coworkers, being then collected in a mailbox anonymously. Statistical analysis was performed using SPSS v.15 software. and Epidat 4.1. The satisfaction survey was evaluated using a Likert scale with scores of 1-4. CONCLUSIONS: 1.- We have observed a statistically significant relationship between the dimensions of burnout syndrome and certain socio-demographic characteristics of health personnel. 2.- The prevalence of burnout syndrome in health workers Health Area VI of the Region of Murcia is high in depersonalization and intermediate in personal accomplishment and emotional exhaustion. 3.- There are sociodemographic factors associated with the development of burnout syndrome. 4.- Detecting the existence of these factors could contribute to early diagnosis and / or prevention of this syndrome. 5.- The job satisfaction survey shows that the overall satisfaction is good, especially concerning peer relationships.

Tesis por compendio de publicaciones / El objetivo del presente estudio es el desarrollo y la evaluación psicométrica de dos instrumentos específicos que permiten la evaluación del fenómeno de la hostilidad (workplace bullying y violencia) percibida en personal sanitario, utilizando para ello una metodología cualitativa y cuantitativa rigurosa. En primer lugar se estudia el workplace bullying y la violencia en personal sanitario desde una perspectiva cualitativa, elaborando y validando semánticamente un banco de items pertenecientes a los tres focos de hostilidad: superiores, compañeros y usuarios, como primera fase del desarrollo de dos instrumentos de evaluación específicos. La segunda fase cuantitativa del estudio, trata del desarrollo y de la evaluación psicométrica del instrumento HABS-U (Hospital Aggressive Behaviour Scale- Users) el cuál permite evaluar las conductas violentas hacia el personal sanitario por parte de los usuarios, como son los pacientes y familiares. Formando parte de la fase cuantitativa del estudio, diferenciando entre los actores de este fenómeno, este compendio finaliza con el desarrollo y la evaluacion psicométrica de una escala de evaluación del workplace bullying por parte de los compañeros y superiores (HABS-CS, Hospital Aggressive Behaviour Scale - version Co-workers-Superiors). Es de destacar el elevado tamaño muestral de 1,484 sanitarios de todos los hospitales públicos de la Region de Murcia y la elevada tasa de respuesta (81,36%). Los instrumentos resultantes de 10 y 17 ítems, muestran adecuadas propiedades psicométricas pudiendo ser útiles en el ámbito de la prevención de riesgos psicosociales para indicar el tipo de intervención necesaria y también para valorar posteriormente la eficacia de programas de intervención. Aunque con este estudio se culmina en cierta medida el trabajo de investigación desarrollado, quedan abiertas varias perspectivas para el desarrollo de futuras líneas de investigación en este ámbito. / Work and stress: Workplace bullying and violence in nursing and the relationship with psychosocial factors Abstract Healthcare staff is one of the professional groups that suffers the highest exposure to sources of occupational stress such as workplace bullying from co-workers and superiors and violence from service- users. Aim: In order to contribute to the assessment of aggressive behaviours in the healthcare sector and to obtain brief and manageable instruments for the assessment of this psychosocial risk, we developed the Hospital Aggressive Behaviour Scale - version Co-workers-Superiors (HABS-CS) and the Hospital Aggressive Behaviour Scale – Users (HABS-U). Methods: Using qualitative and quantitative methodology, an instrument was applied to a sample of 1,489 nurses from 11 public hospitals of a south-eastern region of Spain (Murcia). Results: Exploratory factor analysis yielded a 10-item instrument (HABS-U) about service user violence distributed in two factors (non-physical violence and physical violence), which was validated by means of confirmatory factor analysis. Regarding the Hospital Aggressive Behaviour Scale - version Co-workers-Superiors (HABS-CS), the analyses concluded with the selection of 17 items. The internal 5-factor structure is the result of exploratory and confirmatory factor analysis conducted in two samples. The resulting questionnaires and the factors identified present adequate psychometric properties: high internal consistency and adequate external validity, analyzed by means of significant correlations between the HABS-CS, the HABS-U and psychosocial factors. Conclusion: The systematic use of both scales within the prevention of occupational hazards can be useful for the early detection of workplace bullying and violence from the organizational viewpoint, identifying the services at risk, and at the individual level, detecting conflicts among co-workers and superiors, where possible victims of workplace bullying could be identified. Another possible application of the instrument is its use as an indicator of the risk of psychological alterations due to exposure to violent behaviours at the workplace.