A degradação de proteínas da matriz extracelular pelas metaloproteases da matriz (MMPs) ocorre nos processos fisiológicos (turnover) bem como nos processos patológicos (inflamação, neoplasias, etc). A atividade das MMPs nos tecidos é regulada, naturalmente, por um grupo de inibidores teciduais de metaloproteases (TIMPs). Recentemente, um novo inibidor de MMPs, chamado RECK (proteína indutora de reversão rica em cisteína com domínios Kazal) foi identificado. Neste estudo, verificamos os níveis de transcritos para metaloproteases da matriz (MMP-2, -9 e -14), inibidores teciduais de metaloproteases (TIMP-1 e -2) e RECK, por meio da técnica de Real-Time RT-PCR, assim como as células envolvidas em granulomas periapicais para MMP-2 e -9, por meio de marcações de imuno-histoquímica. As amostras deste estudo foram coletadas de cirurgias paraendodônticas, sendo 15 submetidas ao Real-Time RT PCR (8 granulomas periapicais, 6 cistos periapicais e 1 cicatriz apical), e 10 para imuno-histoquímica (10 granulomas periapicais). Os resultados para o Real-Time PCR demonstraram que houve a expressão de MMP-2, -9, -14, TIMP-1, -2, e RECK em granulomas e cistos periapicais, não havendo diferença estatisticamente significante entre as duas patologias periapicais frente aos genes testados. Todavia, quando o grupo lesão periapical (granuloma e cisto periapical) foi confrontado frente aos genes pesquisados, houve uma correlação significativa entre os níveis de transcritos para MMP-2, -9 e -14, TIMP-1, -2 e RECK. Para as imunomarcações nos granulomas periapicais, a MMP-2 apresentou um padrão mais difuso, dispondo-se perifericamente às células e dispersas pela MEC, em comparação com a MMP-9 que apresentou um padrão mais localizado e restrito. Os macrófagos foram às células que mais expressaram estas metaloproteases da matriz. / Degradation of extracellular matrix (ECM) proteins by matrix metalloproteinases (MMPs) occurs during matrix turnover and pathologic processes (inflammation, cancers). MMP activity in the tissues is regulated in part by a group of tissue inhibitors (TIMPs). Recently, a new MMP inhibitor called RECK (reversion inducing cysteine-rich protein with a Kazal motif) has been identified. In this study, we verified the message (mRNA) for MMPs (MMP-2, -9 e -14), tissue inhibitors of metalloproteinases (TIMP-1 e -2) and RECK, through a Real-Time RT-PCR technique, as well as the cells expressing MMP-2 and -9 in periapical granulomas using immunohistochemistry. Samples were collected during periapical surgery, of which 15 were used for Real-Time RT PCR (8 periapical granulomas, 6 periapical cysts and 1 apical scar), and 20 for immunehistochemistry (10 periapical granulomas). The results for Real-Time PCR showed MMP-2, -9, -14, TIMP-1, -2, and RECK expression in periapical granulomas and cysts, with no significant statistical differences between the twoperiapical pathologies regarding the genes tested. However, when the group periapical lesion (granuloma and cyst) was confronted with the genes tested,there was a significant correlation in some mRNA expression for MMP-2, -9, - 14, TIMP-1, -2 and RECK. Regarding immunostainings in the periapical granulomas, MMP-2 was more diffusely expressed, being located peripherally to the cells and dispersed through the ECM, when compared to MMP-9 which presented a more localized and restrained pattern. Macrophages were the most abundant cells expressing these MMPs.

MOURÃO, Renata Veras Carvalho. Estudo da relação do infiltrado inflamatório mononuclear e expressão de Ki-67, colágeno tipo IV e laminina em cistos radiculares. 2013. 55 f. Dissertação (Mestrado em Patologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2013. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2013-05-10T16:16:51Z No. of bitstreams: 1 2013_dis_rvcmourão.pdf: 1282049 bytes, checksum: 3750ec775d984e0cf02e33acd4dd7626 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes(erikaleitefernandes@gmail.com) on 2013-05-16T13:40:33Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_dis_rvcmourão.pdf: 1282049 bytes, checksum: 3750ec775d984e0cf02e33acd4dd7626 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-05-16T13:40:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_dis_rvcmourão.pdf: 1282049 bytes, checksum: 3750ec775d984e0cf02e33acd4dd7626 (MD5) Previous issue date: 2013 / Jawbone cysts are classified as odontogenic and non-odontogenic cysts. The radicular cyst is the most common odontogenic cyst of inflammatory origin, whereas the detigerous cyst is the most common type of developmental odontogenic cyst. These cysts and their variations have different etiopathogenesis and biological behavior, but are equally lytic. The proliferation activity of the epithelial lining and the components of the basement membrane and extracellular matrix constitute targets of research. The aim of this study was to evaluate the relation between mononuclear inflammatory infiltrate and the expression of proliferative immunomarkers (Ki 67), and proteins of basement membrane and extracellular matrix in radicular cysts. In this retrospective observational study, all cases of jawbone cysts that had been recorded in the files of the Department of Pathology and Legal Medicine (FAMED), and of the Laboratory of Oral Pathology (FFOE) of the Federal University of Ceará (UFC) and reviewed. After histological revision, the groups were divided into heavily inflamed radicular cysts (HIRC) (n=17), slightly inflamed radicular cysts (SIRC) (n=9) and dentigerous cysts (DC) (n=9). The presence and intensity of the lymphoplasmacytic inflammatory infiltrate and the preservation of the epithelial lining were the parameters used to select the cases. Immunohistochemical analyses were performed using the standard streptavidin-biotin-peroxidase method. The primary antibodies used in this study included Ki 67 (Dako®, 1:50), Anti-Collagen Type IV (DBS®, 1:40) and Anti- Laminin (DBS®, 1:20).The immunoexpression of Ki-67 was more intense in the SIRC group compared to the HIRC group and DC. Likewise, the immunoexpression of Anti-Collagem Type IV in the basement membrane of the SIRC group presented a statistically significant difference compared to the HIRC group and DC . The expression of laminin in the basement membrane and in group HIRC and DC was negative and the group of SIRC was weak and punctual. It was concluded that presence and severity of inflammatory content wall of radicular cysts appear to modify the expression of proliferation factors in the coating epithelium and collagen type IV and laminin in the basement membrane but not modific with the behavior of extracellular matrix in radicular cyst. The expression of basement membrane components (laminin and collage type IV) is higher in radicular cyst with mild inflammatory infiltrade. / Os cistos dos ossos maxilares são classificados como odontogênicos e não odontogênicos. Dentre os odontogênicos inflamatórios, destaca-se o cisto radicular, e entre os de desenvolvimento, o dentígero. Estes cistos e suas variantes apresentam etiopatogênese e comportamento biológico diferentes, mas são igualmente líticos. A atividade proliferativa do epitélio de revestimento, dos componentes da membrana basal e da matriz extracelular, possivelmente, interferem nos mecanismos de crescimento, constituindo alvos de pesquisas. Este trabalho teve por objetivo avaliar a relação do infiltrado inflamatório mononuclear com a expressão de marcadores de proliferação (Ki 67) e das proteínas da membrana basal e matriz extracelular nos cistos radiculares. Trata-se de um estudo retrospectivo e observacional tendo sido realizado um levantamento dos casos catalogados no Serviço de Biopsia do Departamento de Patologia e Medicina Legal (FAMED) e no Laboratório de Patologia Bucal (FFOE) (UFC). Após a revisão histológica, os grupos foram divididos em cisto radicular intensamente inflamado (CRII) (n=17), cisto radicular levemente inflamado(CRLI)(n=.9) e cisto dentígero (CD) (n= 9). A presença e intensidade do infiltrado inflamatório histiolinfoplasmocitário e preservação do epitélio de revestimento foram os parâmetros utilizados para seleção dos casos. Os espécimes foram submetidos à reação de imuno-histoquímica por estreptoavidina biotina, utilizando-se os anticorpos Ki 67 (Dako®, 1:50), anti-colágeno IV (DBS®, 1:40) e anti-laminina (DBS®, 1:20). A expressão de Ki 67 foi mais intensa no grupo CRLI, quando comparada ao grupo CRII e CD. A expressão de colágeno tipo IV na membrana basal foi significante no grupo CRLI, quando comparada com o grupo CRII e CD. Já a imunomarcação de matriz extracelular variou de ausente a fraca nos grupos CRII e CRLI, enquanto no CD se exibiu de forma fraca a moderada, sendo esta diferença significativa. A expressão de laminina em membrana basal nos grupos CRII e CD foi negativa e no grupo dos CRLI foi fraca e pontual. Concluiu-se que a presença e a intensidade do conteúdo inflamatório na parede dos cistos radiculares parecem modificar a expressão dos fatores de proliferação no epitélio de revestimento, e colágeno tipo IV e laminina na membrana basal, mas não interferem no comportamento do colágeno IV da matriz extracelular nos cistos radiculares. A expressão de componentes da membrana basal (laminina e colágeno tipo IV) é maior nos cistos radiculares com leve infiltrado inflamatório.

A degradação de proteínas da matriz extracelular pelas metaloproteases da matriz (MMPs) ocorre nos processos fisiológicos (turnover) bem como nos processos patológicos (inflamação, neoplasias, etc). A atividade das MMPs nos tecidos é regulada, naturalmente, por um grupo de inibidores teciduais de metaloproteases (TIMPs). Recentemente, um novo inibidor de MMPs, chamado RECK (proteína indutora de reversão rica em cisteína com domínios Kazal) foi identificado. Neste estudo, verificamos os níveis de transcritos para metaloproteases da matriz (MMP-2, -9 e -14), inibidores teciduais de metaloproteases (TIMP-1 e -2) e RECK, por meio da técnica de Real-Time RT-PCR, assim como as células envolvidas em granulomas periapicais para MMP-2 e -9, por meio de marcações de imuno-histoquímica. As amostras deste estudo foram coletadas de cirurgias paraendodônticas, sendo 15 submetidas ao Real-Time RT PCR (8 granulomas periapicais, 6 cistos periapicais e 1 cicatriz apical), e 10 para imuno-histoquímica (10 granulomas periapicais). Os resultados para o Real-Time PCR demonstraram que houve a expressão de MMP-2, -9, -14, TIMP-1, -2, e RECK em granulomas e cistos periapicais, não havendo diferença estatisticamente significante entre as duas patologias periapicais frente aos genes testados. Todavia, quando o grupo lesão periapical (granuloma e cisto periapical) foi confrontado frente aos genes pesquisados, houve uma correlação significativa entre os níveis de transcritos para MMP-2, -9 e -14, TIMP-1, -2 e RECK. Para as imunomarcações nos granulomas periapicais, a MMP-2 apresentou um padrão mais difuso, dispondo-se perifericamente às células e dispersas pela MEC, em comparação com a MMP-9 que apresentou um padrão mais localizado e restrito. Os macrófagos foram às células que mais expressaram estas metaloproteases da matriz. / Degradation of extracellular matrix (ECM) proteins by matrix metalloproteinases (MMPs) occurs during matrix turnover and pathologic processes (inflammation, cancers). MMP activity in the tissues is regulated in part by a group of tissue inhibitors (TIMPs). Recently, a new MMP inhibitor called RECK (reversion inducing cysteine-rich protein with a Kazal motif) has been identified. In this study, we verified the message (mRNA) for MMPs (MMP-2, -9 e -14), tissue inhibitors of metalloproteinases (TIMP-1 e -2) and RECK, through a Real-Time RT-PCR technique, as well as the cells expressing MMP-2 and -9 in periapical granulomas using immunohistochemistry. Samples were collected during periapical surgery, of which 15 were used for Real-Time RT PCR (8 periapical granulomas, 6 periapical cysts and 1 apical scar), and 20 for immunehistochemistry (10 periapical granulomas). The results for Real-Time PCR showed MMP-2, -9, -14, TIMP-1, -2, and RECK expression in periapical granulomas and cysts, with no significant statistical differences between the twoperiapical pathologies regarding the genes tested. However, when the group periapical lesion (granuloma and cyst) was confronted with the genes tested,there was a significant correlation in some mRNA expression for MMP-2, -9, - 14, TIMP-1, -2 and RECK. Regarding immunostainings in the periapical granulomas, MMP-2 was more diffusely expressed, being located peripherally to the cells and dispersed through the ECM, when compared to MMP-9 which presented a more localized and restrained pattern. Macrophages were the most abundant cells expressing these MMPs.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Odontologia, Florianópolis, 2009. / Made available in DSpace on 2012-10-24T13:57:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 267161.pdf: 2643687 bytes, checksum: cbc35430374d13d70bc30bf92fdd1b70 (MD5) / Esse estudo propôs investigar os aspectos relacionados à proliferação celular e ao mecanismo da apoptose no epitélio de revestimento de cistos radiculares (CRs) e dentígeros (CDs). Secções seriadas de 17 cistos radiculares e nove cistos dentígeros foram preparadas para detecção imunoistoquímica, pelo método estreptavidina-biotina-peroxidase (LSAB), dos antígenos Caspase-3 (pró-apoptótico), Bcl-2 (anti-apoptótico) e do marcador de proliferação celular Ki-67. A análise e quantificação das reações foram obtidas com auxílio do programa NIH ImageJ. O marcador Caspase-3 foi detectado principalmente nas camadas suprabasal e superficial de CRs e CDs, enquanto a expressão de Ki-67 foi predominante na camada basal dessas lesões. Ambos marcadores tiveram expressão mais significativa em epitélios hiperplásicos, relacionados a um intenso infiltrado inflamatório na cápsula conjuntiva. A expressão de Bcl-2 foi observada exclusivamente na camada basal do epitélio, com diminuição em áreas associadas a infiltrado inflamatório na cápsula. Nos CDs a expressão de Bcl-2 foi significantemente maior quando comparada aos CRs. Esses resultados sugerem que a atividade proliferativa dos cistos é balanceada pela apoptose, agindo como um mecanismo regulador na manutenção da espessura do revestimento epitelial. Demonstrou-se, ainda, que o processo inflamatório inibe a expressão de Bcl-2, sendo esse resultado mais evidente em CRs. Os cistos dentígero e radicular apresentam mecanismos distintos de formação, mas possuem comportamento biológico semelhante do revestimento epitelial diante da presença de intenso infiltrado inflamatório na cápsula de tecido conjuntivo fibroso. / This study proposed to investigate the aspects related to cell proliferation and the mechanism of apoptosis in epithelial linings of radicular cysts (RCs) and dentigerous cysts (DCs). Serial sections of 17 RCs and nine DCs were prepared for immunohistochemical detection, by the method streptavidin-biotin-peroxidase (LSAB), of antigens Caspase-3 (pro-apoptotic), Bcl-2 (anti-apoptotic) and of the cell proliferation marker Ki-67. The analysis and quantification of the reactions were obtained using the program NIH ImageJ. The marker Caspase-3 was detected mainly in the suprabasal and superficial layers of RCs and DCs, while the expression of Ki-67 was predominantly in the basal layer of these lesions. Both markers had higher expression in hyperplasic epithelium, related to an intense inflammatory infiltrate in conjunctive capsule. The expression of Bcl-2 was observed exclusively in the basal layer of the epithelium, with a reduction in areas associated with inflammatory infiltration in the capsule. The expression of Bcl-2 in DCs was significantly higher when compared to the RCs. These results suggest that the proliferative activity of the cysts is balanced by apoptosis, acting as a regulatory mechanism in maintaining the thickness of the lining epithelium. It was shown also that the inflammatory process inhibits the expression of Bcl-2, this result was more evident in RCs. The dentigerous and radicular cysts have different mechanisms of formation, but have similar biological behavior of the epithelial lining facing the presence of intense inflammatory infiltrate in the capsule of fibrous connective tissue.

Submitted by Hiolanda Rêgo (hiolandarego@gmail.com) on 2016-09-05T14:49:21Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_ODONTO_Osvaldo SCHITINI Jr.pdf: 11162311 bytes, checksum: ab68e0a9ed3cfb9d9080a1738bb6b50c (MD5) / Approved for entry into archive by Delba Rosa (delba@ufba.br) on 2016-10-07T13:00:02Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação_ODONTO_Osvaldo SCHITINI Jr.pdf: 11162311 bytes, checksum: ab68e0a9ed3cfb9d9080a1738bb6b50c (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-07T13:00:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação_ODONTO_Osvaldo SCHITINI Jr.pdf: 11162311 bytes, checksum: ab68e0a9ed3cfb9d9080a1738bb6b50c (MD5) / CAPES / O cisto dermóide é uma malformação cística com uma ocorrência incomum, revestido internamente por um epitélio semelhante à epiderme e contém em suas paredes anexos cutâneos. O termo dermóide, refere-se também aos cistos epidermóides e teratomas. A fim de contribuir para um melhor conhecimento do perfil biológico dessas lesões, este trabalho teve como objetivo caracterizar 10 casos de cistos epidermóides e 4 de cistos dermóides originados da boca e seus aspectos clínicos patológicos. Foram avaliados 12 casos, sendo 8 de epidermóides e 4 de dermóides por meio da técnica imunohistoquímica. As citoqueratinas analisadas foram 6, 7, 10, 13, 14, 16, 18 e 19. As citoqueratinas mais prevalentes foram as 10, 13 e 14 em ambos os cistos. Em relação à citoqueratina 13, não houve positividade nos anexos dos cistos dermóides, nem na glândula dos grânulos de fordyce. Nos dois casos de grânulos de fordyce, o padrão foi semelhante, com presença das citoqueratinas 10 e 14 nas glândulas sebáceas e 13 na camada intermediária do revestimento epitelial adjacente. Apenas nos casos de cisto epidermóide, a citoqueratina 6 foi positiva. Os cistos epidermóides e dermóides ocorreram mais em mulheres, com idade variável em ambos os casos. Sendo a região jugal mais acometida nos epidermóides e o assoalho bucal mais acometido nos cistos dermóides. Concluiu-se que este estudo contribuiu para o conhecimento do perfil das CQs 6, 7, 8, 10, 13, 14, 18 e 19 em cistos epidermóides e dermóides da boca, destacando-se que a maturação epitelial dessas lesões encontra-se alteradas, especialmente em relação à mucosa de revestimento.

Made available in DSpace on 2014-12-17T15:32:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MaiaraM_Dissert.pdf: 2968185 bytes, checksum: 105b46ac6fb81afd7b7596a11828a3c8 (MD5) Previous issue date: 2010-03-10 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / Receptor ativador nuclear κappa B (RANK), ligante do receptor ativador nuclear κappa B (RANKL) e osteoprotegerina (OPG) s?o membros da fam?lia do fator de necrose tumoral relacionados com o metabolismo ?sseo. A forma??o, diferencia??o e atividade dos osteoclastos s?o reguladas por estas tr?s prote?nas. RANK ? um receptor transmembrana presente em diversos tipos celulares, principalmente em c?lulas de linhagem macrof?gica, linf?citos, c?lulas dendr?ticas e fibroblastos e quando ativado pelo seu ligante, RANKL, promove a diferencia??o e ativa??o de c?lulas osteocl?sticas respons?veis pelo processo de reabsor??o ?ssea. A OPG impede a liga??o RANK/RANKL atuando como um receptor inibit?rio para a atividade osteol?tica. O objetivo deste estudo foi comparar a express?o imuno-histoqu?mica destes biomarcadores em cistos radiculares (n=20) e cistos dent?geros (n=20). A express?o imuno-histoqu?mica destes marcadores foi avaliada no epit?lio e na c?psula dos cistos por escores e percentuais m?dios de imunomarca??o. Para o epit?lio, a an?lise semi-quantitativa revelou um padr?o similar dos escores de imunomarca??o de RANK, RANKL e OPG nas les?es, n?o havendo diferen?a estat?stica significante (p=0.589, p=0.688, p=0.709, respectivamente). Para a c?psula c?stica a an?lise quantitativa, mostrou diferen?a estat?stica significante entre os percentuais m?dios de imunomarca??o do RANK e RANKL (p=0,001 e p=0,005, respectivamente) nos cistos. A correla??o dos escores de imunomarca??o de RANKL e OPG no epit?lio do CR e do CD revelou diferen?a estat?stica significante (p=0,029, p=0,003, respectivamente). No epit?lio dos CRs e dos CDs observou-se uma maior imunoexpress?o da OPG comparada a do RANKL. Os resultados apontam a presen?a de RANK, RANKL e OPG nos cistos radiculares e cistos dent?geros, sugerindo a atua??o destas prote?nas no desenvolvimento e expans?o das les?es no osso adjacente / Receptor ativador nuclear κappa B (RANK), ligante do receptor ativador nuclear κappa B (RANKL) e osteoprotegerina (OPG) s?o membros da fam?lia do fator de necrose tumoral relacionados com o metabolismo ?sseo. A forma??o, diferencia??o e atividade dos osteoclastos s?o reguladas por estas tr?s prote?nas. RANK ? um receptor transmembrana presente em diversos tipos celulares, principalmente em c?lulas de linhagem macrof?gica, linf?citos, c?lulas dendr?ticas e fibroblastos e quando ativado pelo seu ligante, RANKL, promove a diferencia??o e ativa??o de c?lulas osteocl?sticas respons?veis pelo processo de reabsor??o ?ssea. A OPG impede a liga??o RANK/RANKL atuando como um receptor inibit?rio para a atividade osteol?tica. O objetivo deste estudo foi comparar a express?o imuno-histoqu?mica destes biomarcadores em cistos radiculares (n=20) e cistos dent?geros (n=20). A express?o imuno-histoqu?mica destes marcadores foi avaliada no epit?lio e na c?psula dos cistos por escores e percentuais m?dios de imunomarca??o. Para o epit?lio, a an?lise semi-quantitativa revelou um padr?o similar dos escores de imunomarca??o de RANK, RANKL e OPG nas les?es, n?o havendo diferen?a estat?stica significante (p=0.589, p=0.688, p=0.709, respectivamente). Para a c?psula c?stica a an?lise quantitativa, mostrou diferen?a estat?stica significante entre os percentuais m?dios de imunomarca??o do RANK e RANKL (p=0,001 e p=0,005, respectivamente) nos cistos. A correla??o dos escores de imunomarca??o de RANKL e OPG no epit?lio do CR e do CD revelou diferen?a estat?stica significante (p=0,029, p=0,003, respectivamente). No epit?lio dos CRs e dos CDs observou-se uma maior imunoexpress?o da OPG comparada a do RANKL. Os resultados apontam a presen?a de RANK, RANKL e OPG nos cistos radiculares e cistos dent?geros, sugerindo a atua??o destas prote?nas no desenvolvimento e expans?o das les?es no osso adjacente

FERREIRA, T. A. P. Avaliação da imunoexpressão do fator induzido por hipóxia 1α (hif-1α) em cistos radiculares e dentígeros. 2017. 78 f. Dissertação (Mestrado em Odontologia) - Faculdade de Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2017. / Submitted by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-04-03T16:04:56Z No. of bitstreams: 1 2017_dis_tapferreira.pdf: 1815935 bytes, checksum: 497436a1657a7015396f9e473040cadf (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-04-03T16:05:27Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_dis_tapferreira.pdf: 1815935 bytes, checksum: 497436a1657a7015396f9e473040cadf (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-03T16:05:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_dis_tapferreira.pdf: 1815935 bytes, checksum: 497436a1657a7015396f9e473040cadf (MD5) Previous issue date: 2017-02-21 / Odontogenic cysts are classified according to their origin in: developmental cysts, which include the dentigerous cyst (CD), or in inflammatory cysts, which have the root cyst (CR) as the main representative. In lesional microenvironments with low oxygen concentrations, the Hypoxia Induced Factor 1α (HIF-1) influences mechanisms responsible for cell survival. Thus, the aim of this research was to analyze the immunoexpression of HIF-1α in root and dentigerous cysts. The sample consisted of 40 cases of odontogenic cysts, 20 of CD and 20 of CR. Verification of HIF-1α expression was performed by the immunohistochemistry technique using anti-HIF-1α primary antibody (Clone EP1215Y, Abcam®, 1: 500, overnight, citrate pH 6, Pascal). Quantitative analysis was performed by counting the number of epithelial cells with immunostaining in the cytoplasm or nucleus in five fields photographed at a magnification of 400x. A qualitative analysis was also performed, observing the intensity of cytoplasmic immunostaining. The collected clinical data, such as sex, age and location site, were expressed in absolute and percentage frequency form and compared by Pearson's Chi-square test or Fisher's Exact and by Binomial Logistic Regression. The number of positive epithelial cells was expressed as mean and standard deviation and analyzed using the Student's T-test using the Statistical Package for the Social Sciences program. For all the tests performed, a significance level of 5% (p <0.05) was established. Immunohistochemical analysis evidenced positive marking throughout the sample. For the total number of cells with cytoplasmic immunostaining, between CR (67.7 ± 12.6) and CD (64.5 ± 16.1), there was no significant difference between the lesions (p = 0,480) and the Same result was found for nuclear immunostaining (p = 0.354). When the intensity of strong cytoplasmic immunostaining was observed and the clinical characteristics, the CD group presented a lower number of cells immunized by HIF-1α (11.7 ± 13.6) for the age group up to 30 years when compared to the age group of Individuals older than 30 years (34.5 ± 20.0), showing statistical difference (p = 0.010). When the strong cytoplasmic immunostaining was observed between the CR and CD groups in the anterior region of the jaws, it was verified that the CR group presented a greater quantity of immunolabelled cells (28.5 ± 8.5) than the CD group (14 , 0 ± 11.4), with statistical difference (p = 0.014). Considering the results obtained in this research, it can be concluded that HIF-1α is present in the epithelial constituents of CR and CD. However, further studies are needed to better elucidate the role of HIF-1α in odontogenic cysts. / Os cistos odontogênicos são classificados conforme sua origem em: cistos de desenvolvimento, dos quais faz parte o cisto dentígero (CD), ou em cistos inflamatórios, que têm o cisto radicular (CR) como principal representante. Em microambientes lesionais com baixas concentrações de oxigênio, o Fator Induzido por Hipóxia 1α (HIF-1) influencia mecanismos responsáveis pela sobrevida celular. Assim, o objetivo desta pesquisa foi analisar a imunoexpressão do HIF-1α em cistos radiculares e dentígeros. A amostra foi constituída por 40 casos de cistos odontogênicos, sendo 20 de CD e 20 de CR. A verificação da expressão de HIF-1α foi realizada através da técnica de imunoistoquímica, utilizando anticorpo primário anti-HIF-1α (Clone EP1215Y,Abcam®, 1:500, overnight,citrato pH 6, Pascal). A análise quantitativa foi realizada por meio da contagem do número de células epiteliais com imunomarcação no citoplasma ou núcleo, em cinco campos fotografados no aumento de 400x. Realizou-se, também, uma análise qualitativa observando a intensidade de imunomarcação citoplasmática. Os dados clínicos coletados, tais como sexo, idade e sítio de localização, foram expressos em forma de frequência absoluta e percentual e comparados por meio do teste qui-quadrado de Pearson ou Exato de Fisher e por meio de Regressão Logística Binomial. O número de células epiteliais positivas foi expresso em forma de média e desvio-padrão e analisado por meio do teste de T de Student, utilizando-se o programa Statistical Package for the Social Sciences. Para todos os testes realizados, foi estabelecido o nível de significância de 5% (p <0,05). A análise imunoistoquímica evidenciou marcação positiva em toda a amostra. Para o total de células com imunomarcação citoplasmática entre os casos de CR (67,7±12,6) e CD (64,5±16,1), não houve diferença significativa entre as lesões (p=0,480), bem como o mesmo resultado foi encontrado para imunomarcação nuclear (p=0,354). Quando se observou a intensidade de imunomarcação citoplasmática forte e as características clínicas, o grupo de CD apresentou para faixa etária de até 30 anos menor número de células imunomarcadas por HIF-1α (11,7±13,6) quando comparada à faixa etária de indivíduos maiores de 30 anos (34,5±20,0), demonstrando diferença estatística (p= 0,010). Já quando observada a imunomarcação citoplasmática forte entre os grupos de CR e CD na região anterior dos maxilares, verificou-se que o grupo de CR apresentou maior quantidade de células imunomarcadas (28,5±8,5) que o grupo de CD (14,0±11,4), com diferença estatística (p= 0,014). Diante dos resultados obtidos nesta pesquisa, pode-se concluir que HIF-1α está presente nos constituintes epiteliais de CR e CD. No entanto, novos estudos são necessários para melhor elucidar o papel desenvolvido pelo HIF-1α nos cistos odontogênicos.

Resumo: O presente trabalho objetivou a avaliação da divergência genética entre linhagens e cultivares de soja com resistência ao nematóide de cisto (NCS) através de marcadores moleculares do tipo microssatélite, a fim de identificar genótipos similares e grupos heterogêneos. Foram utilizadas 30 cultivares de soja e 10 genótipos em geração F8, todos resistentes ao NCS. As análises foram realizadas com 12 iniciadores, a saber: Satt185, Satt308, Satt187, Satt070, Satt009, Satt129, Satt154, Satt152, Satt175, Satt045, Satt162 e Satt163. As análises de dissimilaridade foram realizadas através do complemento dos coeficientes de Coincidência Simples e de Rogers e Tanimoto. Os agrupamentos foram realizados pelos Métodos de Otimização de Tocher, Vizinho mais Próximo, Vizinho mais Distante, Ward, Ligação Média Dentro de Grupo, UPGMA e WPGMA. Em adição, foram feitas as projeções no plano bi e tridimensional. Os resultados mostraram coeficientes de dissimilaridade de Coincidência Simples e de Rogers e Tanimoto com médias de 0,36 e 0,5, respectivamente. Foram observados genótipos mais semelhantes e grupos mais divergentes, na maioria das vezes concordando com as respectivas fontes de resistência. Os resultados dos diferentes métodos aglomerativos confirmaram a existência de uma estrutura natural de agrupamento em função da similaridade genética entre os genótipos. Entretanto, o emprego de mais de um método de agrupamento pode ser recomendado devido às diferenças entre as metodologias. Alguns métodos mais comumente utilizados como o Vizinho Mais Distante, Ward, WPGMA e UPGMA foram considerados adequados ao agrupamento de genótipos no presente estudo, apresentando coincidência de resultados, inclusive em relação às genealogias dos genótipos analisados. As projeções no plano... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The present work aimed the evaluation of the genetic divergence among soybean lines and cultivars, resistant to cyst nematode (NCS). Therefore microsatellite molecular markers were used, with the objective of identify similar genotypes and heterogeneous groups. There were used 30 soybean cultivars and 10 genotypes in F8 generation, all of them resistant to NCS. The analyses were made using 20 primers (Satt185, Satt308, Satt187, Satt070, Satt009, Satt129, Satt154, Satt152, Satt175, Satt045, Satt162 and Satt163). The dissimilarity analyses were made through the complement of Simple Coincidence and Rogers and Tanimoto Coefficients. Clusters were performed by the following methods: Tocher Optimization, Single Linkage, Complete Linkage, Ward, Average Link Within a Group, UPGMA and WPGMA. In addition, the bi and tridimensional plan projections were made. The results showed average values of 0,36 and 0,5 in the Simple Coincidence and Rogers and Tanimoto dissimilarity coefficients, respectively. Most similar genotypes and most divergent groups were found, usually according to the respective resistant sources. Results of the different cluster methods confirmed a group's structure according to genotypes similarity. However, the use of many clustering methods should be recommended, because of their methodology differences. Some of the most used methods, like Complete Linkage, Ward, WPGMA and UPGMA, were considered adequate for clustering the genotypes in this case. There were observed coincidence of results confirming the genotypes genealogies. The plan projections were not satisfactory for these analyses, showing high distortion and stress. The results combination can be useful in the parental choice for crosses of Soybean Breeding Programs. / Orientador: Antonio Orlando Di Mauro / Coorientador: Sandra Helena Unêda Trevisoli / Banca: Rinaldo César de Paula / Banca: Antonio Luis de Oliveira / Mestre

O cisto periodontal apical (CPA) forma-se como resultado de uma inflamação crônica induzida por um processo infeccioso bacteriano, com a presença de células inflamatórias e citocinas, as quais estão relacionadas com a formação e crescimento cístico. Os linfócitos são as células predominantes no infiltrado inflamatório de lesões periapicais, e podem se diferenciar em células das respostas imunes Th1 e Th2. Assim como os linfócitos, os macrófagos podem se diferenciar em subtipos celulares. Macrófagos M1 e M2 desempenham um papel importante no direcionamento da resposta imune, devido a sua capacidade de promover a diferenciação de linfócitos em Th1 e Th2 respectivamente. Assim, o presente trabalho teve como objetivo avaliar a presença da resposta Th1 e macrófagos M1, por meio da expressão de IL-1β, TNF- α e IL-6, e a resposta Th2, pela presença de macrófagos M2 por meio da expressão de CD163 na cápsula cística de 24 casos de CPAs. A avaliação dos biomarcadores foi realizada através de reações imuno-histoquímicas, dividindo a espessura da cápsula em regiões superficial e profunda. Observou-se uma maior expressão das citocinas IL-1β, IL-6, TNF-α e macrófagos M2 na região superficial (p < 0,001). Ausência de correlação foi notada entre a intensidade da inflamação e CD163 na região superficial (p = 0,082; r = 0,362) e profunda (p = 0,415; r = 0,174). Verificou-se, ainda, correlação positiva entre IL-1β e IL-6 e a intensidade da inflamação em ambas regiões. A correlação das expressões das citocinas IL-1β, IL-6 e TNF-α mostrou-se positiva em ambas regiões. Em relação ao CD163, houve correlação positiva quando correlacionado com o TNF-α (p = 0,007; r = 0,537) e a IL-6 (p = 0,018; r = 0,478) na região superficial. Nossos resultados demonstraram a presença da resposta imune Th1 e macrófagos M1 nos CPAs por meio da expressão das citocinas TNF-α, IL-1β, IL-6 e resposta imune Th2 por meio da presença de macrófagos M2 nestas lesões, sendo estas células associadas às citocinas TNF-α e IL-6. / The radicular cyst (RC) results from chronic inflammation induced by a bacterial infectious process and reveals the presence of inflammatory cells and cytokines, which are related to the cystic formation and growth. The lymphocytes are the predominant cells in the inflammatory infiltrate of periapical lesions. These cells can differentiate into cell subtypes and produce two types of cellular immune responses: T-helper type 1 (Th1) and T-helper type 2 (Th2). In the same way as lymphocytes, the macrophages can differentiate into cell subtypes. M1 and M2 macrophages play an important role in the targeting of the immune response, due to their ability to promote the differentiation of lymphocytes towards Th1 and Th2 pathways, respectively. The aim of the present study was to evaluate the presence of Th1 response and macrophages M1, through the expression of IL-1 β, TNF-α and IL-6, and Th2 response and the presence of macrophages M2 through the expression of CD163 in cystic capsule of twenty-four cases of RCs. The biomarkers were evaluated by immunohistochemical reactions, dividing the capsule thickness into superficial and deep regions. A greater expression of the cytokines IL-1β, IL-6, TNF-α and M2 macrophages in the superfcial region (p < 0.001) was observed. Absence of correlation was noted among the intensity of inflammation and CD163 in the superficial (p = 0.082, r = 0.362) and deep region (p = 0.415; r = 0.174). There was also a positive correlation among IL-1β and IL-6 and the intensity of inflammation in both regions. The correlation of IL-1β, IL-6 and TNF-α cytokines expression was positive in both regions. In relation to CD163, there was a positive correlation when correlated with TNF-α (p = 0.007, r = 0.537) and IL-6 (p = 0.018, r = 0.478) in the superficial region. Our results demonstrated the presence of the Th1 immune response and M1 macrophages in CPAs through the expression of TNF-α, IL-1β, IL-6 cytokines and Th2 immune response through the presence of M2 macrophages in these lesions. In addition, M2 cells were associated with TNF-α and IL-6 cytokines. / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais - FAPEMIG

Cistos dentígeros (CD) são cistos odontogênicos de desenvolvimento e consistem em uma lesão cística que envolve a coroa de um dente não erupcionado, estando unido ao colo do dente na altura da junção cemento-esmalte. Os objetivos deste estudo foram: 1)estabelecer critérios histopatológicos para o diagnóstico de CD; 2)associar a presença e o padrão do infiltrado inflamatório presente na cápsula conjuntiva dos CD com o padrão do epitélio de revestimento da cavidade cística; 3) analisar as características das pessoas que receberam os diagnósticos histopatológicos de folículo pericoronário (FP) e CD, a fim de compará-los com levantamentos prévios e traçar um perfil destas entidades em uma população brasileira; 4) associar os diagnósticos de FP e CD com a posição do terceiro molar incluso envolvido. Foram incluídos no estudo 151 casos diagnosticados no Laboratório de Patologia Bucal da Universidade Federal do Rio Grande do Sul como FP e CD no período de agosto/2009 a julho/2010. Desses, 22 casos pertencentes ao grupo referência (com critérios clínicos, radiográficos, cirúrgicos e microscópicos para o diagnóstico de CD) e 129 casos ao grupo teste (sem características clínicas, radiográficas e cirúrgicas de CD). Na análise histopatológica das amostras do grupo referência foram definidas as características microscópicas da membrana cística, que foram confrontadas com o grupo de comparação. Todo o material histopatológico foi analisado por examinadores previamente calibrados para os critérios préestabelecidos. Avaliaram-se as informações contidas nas fichas de biópsia (gênero, idade, etnia e localização) e as imagens radiográficas, a fim de classificar a posição dos dentes não-erupcionados extraídos de acordo com as classificações de Pell- Gregory e Winter Foi feita a análise estatística descritiva dos dados e aplicado o teste estatístico Qui-Quadrado, com nível de significância de 5%. Dos 129 casos do grupo de comparação, 24,0% (n=31) receberam o diagnóstico histopatológico (DH) de CD e 76,0% (n=98) de folículo pericoronário (FP). Os três grupos avaliados apresentaram epitélio odontogênico. Os FP apresentaram inflamação escassa (p<0,001). Os CD do grupo referência apresentaram predominantemente a membrana cística com epitélio estratificado escamoso (EEE) hiperplásico (72,7%) e inflamação difusa (72,7%) (p<0,001). Os CD do grupo de comparação apresentaram EEE atrófico (54,8%) e inflamação escassa (51,6%) (p<0,001). Essa associação epitélio-inflamação foi positiva (p≤0,001) para os dois casos. O perfil dos indivíduos que apresentaram esse diagnóstico foi mulher (66%), branca (88,7%), com mais de 20 anos (79,2%), acometidas preferencialmente na mandíbula (84,9%). Não houve associação estatística entre a posição do dente incluso e o aparecimento de lesões císticas, 10 porém, os dentes que desenvolveram CD estavam predominantemente na posição “C” de Pell-Gregory (39,6%) e mesioangular de Winter (49,1%). O DH de CD pode ser estabelecido com a identificação de EEE em tecido mole pericoronário advindo da extração de um dente incluso. O padrão de inflamação na cápsula do CD parece exercer um importante papel no padrão de epitélio de revestimento da cavidade cística. A variável idade parece ser uma importante característica no que diz respeito à formação cística e, apesar da posição em que o dente incluso se encontra não poder ser considerado um preditor para o desenvolvimento de CD, deve ser considerada no momento da decisão da extração preventiva de terceiros molares inclusos.