A hansenÃase à uma doenÃa infecciosa crÃnica causada pelo Mycobacterium leprae, um bacilo Ãlcool-Ãcido resistente. Tem alta infectividade, porÃm baixa patogenicidade, e quando se manifesta, apresenta-se sob uma grande diversidade de formas clÃnicas. Essa diversidade depende, em grande parte, da resposta imunolÃgica do hospedeiro, sendo os linfÃcitos, em sua plasticidade, componentes essenciais no desenvolvimento da imunidade. Assim, este trabalho teve como objetivo descrever as subpopulaÃÃes linfocitÃrias: linfÃcitos T totais (CD3+), T auxiliares (CD4+), T citotÃxicos (CD8+), T CD4+CD8+, B (CD19+), Natural killers-NK (CD3- CD16+ CD56+) e T Natural killers - NKT (CD3+ CD16+ CD56+) no sangue perifÃrico de pacientes portadores de hansenÃase, antes e apÃs uso da multidrogaterapia. Os pacientes foram selecionados no Centro de Dermatologia D. LibÃnia, Fortaleza-CE, Brasil. A determinaÃÃo de linfÃcitos em cada subpopulaÃÃo foi realizada por citÃmetria de fluxo e anÃlise estatÃstica pelo programa GraphPad Prism 5.0 para Windows. A significÃncia foi estabelecida para valores de p<0,05. Um total de 133 amostras foram utilizadas para as comparaÃÃes, sendo 79 (59,4%) do gÃnero masculino e 54 (40,6%) do gÃnero feminino. A mediana da idade dos pacientes foi de 43 anos no grupo prÃ-tratamento e de 46 anos no pÃs-tratamento. Nove pacientes foram incluÃdos na forma paucibacilar e 124, na multibacilar. As medianas das contagens (cÃlulas/mm3) de linfÃcitos NK (CD3-CD16+ CD56+) nos grupos antes e apÃs tratamento foram 142,0 [15,0â463,0] e 189,5 [18,0 â 1037,0], respectivamente (p=0,0484), enquanto nÃo houve diferenÃas quando foram comparados os grupos pauci e multibacilar. As contagens de linfÃcitos T totais (CD3+), T auxiliares (CD4+), T citotÃxicos (CD8+), T (CD4+CD8+), B (CD19+), e NKT(CD3+CD16+CD56+) mantiveram-se inalteradas nos grupos antes e pÃs-tratamento, assim como nos grupos pauci e multibacilar. Em conclusÃo, os resultados deste estudo apontam para uma reduÃÃo na populaÃÃo de cÃlulas NK (CD3-CD16+CD56+) em indivÃduos com hansenÃase antes de qualquer intervenÃÃo terapÃutica. ApÃs o tratamento, hà uma recuperaÃÃo na contagem desta populaÃÃo celular. / Leprosy is a chronic infectious disease caused by the Mycobacterium leprae, a resistant alcohol-acid bacillus. It has a high infectivity, although the pathogenicity is low. Clinical manifestations present a great diversity. Host immune response is an important determinant of this clinical diversity, whilst lymphocytes collaborate to it. Thus, the present study aimed to describe lymphocyte subpopulations: T lymphocytes (CD3+), T helper lymphocytes (CD4+), T cytotoxic (CD8+), T CD4+CD8+, B (CD19+), Natural killers-NK (CD3- CD16+ CD56+) and T Natural killers - NKT (CD3+CD16+ CD56+) in peripheral blood samples from patients with leprosy, before and after the treatment with multidrugtherapy. Patients were selected at the Dona Libania Dermatology Center, at Fortaleza-CE, Brazil. The determination in each subpopulation of lymphocytes was done by flow-cytometer and statistical analysis by GraphPad Prism 5.0 for Windows. Significance was established at p values of <0.05. A total of 133 samples were studied, while 79 (59,4%) were males and 54 (40,6%)females. Median age of patients was 43 years old for the group before treatment and 46 years old for the group after treatment. Nine patients presented with paucibacillary and 124 with multibacillary form. NK (CD3-CD16+ CD56+) lymphocytes medians cells/mmÂ) were 142.0 [15,0â463,0] and 189,5 [18,0 â 1037,0], respectively for the groups before and after treatment, with a p value of 0.0484. On the other hand, no differences were observed when pauci and multibacillary groups were compared. T lymphocytes (CD3+), T helper lymphocytes (CD4+), T cytotoxic lymphocytes (CD8+), T (CD4+CD8+), B lymphocytes (CD19+) and NKT lymphocytes (CD3+CD16+CD56+)were similar at the groups before and after treatment and also at pauci and multibacillary. In conclusion, data from this study shows a reduction at NK lymphocytes (CD3-CD16+CD56+) populations in leprosy before any therapeutical intervention. After leprosy treatment, a recovery of this cell population occurs.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Os cistos dos ossos maxilares sÃo classificados como odontogÃnicos e nÃo odontogÃnicos. Dentre os odontogÃnicos inflamatÃrios, destaca-se o cisto radicular, e entre os de desenvolvimento, o dentÃgero. Estes cistos e suas variantes apresentam etiopatogÃnese e comportamento biolÃgico diferentes, mas sÃo igualmente lÃticos. A atividade proliferativa do epitÃlio de revestimento, dos componentes da membrana basal e da matriz extracelular, possivelmente, interferem nos mecanismos de crescimento, constituindo alvos de pesquisas. Este trabalho teve por objetivo avaliar a relaÃÃo do infiltrado inflamatÃrio mononuclear com a expressÃo de marcadores de proliferaÃÃo (Ki 67) e das proteÃnas da membrana basal e matriz extracelular nos cistos radiculares. Trata-se de um estudo retrospectivo e observacional tendo sido realizado um levantamento dos casos catalogados no ServiÃo de Biopsia do Departamento de Patologia e Medicina Legal (FAMED) e no LaboratÃrio de Patologia Bucal (FFOE) (UFC). ApÃs a revisÃo histolÃgica, os grupos foram divididos em cisto radicular intensamente inflamado (CRII) (n=17), cisto radicular levemente inflamado(CRLI)(n=.9) e cisto dentÃgero (CD) (n= 9). A presenÃa e intensidade do infiltrado inflamatÃrio histiolinfoplasmocitÃrio e preservaÃÃo do epitÃlio de revestimento foram os parÃmetros utilizados para seleÃÃo dos casos. Os espÃcimes foram submetidos à reaÃÃo de imuno-histoquÃmica por estreptoavidina biotina, utilizando-se os anticorpos Ki 67 (DakoÂ, 1:50), anti-colÃgeno IV (DBSÂ, 1:40) e anti-laminina (DBSÂ, 1:20). A expressÃo de Ki 67 foi mais intensa no grupo CRLI, quando comparada ao grupo CRII e CD. A expressÃo de colÃgeno tipo IV na membrana basal foi significante no grupo CRLI, quando comparada com o grupo CRII e CD. Jà a imunomarcaÃÃo de matriz extracelular variou de ausente a fraca nos grupos CRII e CRLI, enquanto no CD se exibiu de forma fraca a moderada, sendo esta diferenÃa significativa. A expressÃo de laminina em membrana basal nos grupos CRII e CD foi negativa e no grupo dos CRLI foi fraca e pontual. Concluiu-se que a presenÃa e a intensidade do conteÃdo inflamatÃrio na parede dos cistos radiculares parecem modificar a expressÃo dos fatores de proliferaÃÃo no epitÃlio de revestimento, e colÃgeno tipo IV e laminina na membrana basal, mas nÃo interferem no comportamento do colÃgeno IV da matriz extracelular nos cistos radiculares. A expressÃo de componentes da membrana basal (laminina e colÃgeno tipo IV) à maior nos cistos radiculares com leve infiltrado inflamatÃrio. / Jawbone cysts are classified as odontogenic and non-odontogenic cysts. The radicular cyst is the most common odontogenic cyst of inflammatory origin, whereas the detigerous cyst is the most common type of developmental odontogenic cyst. These cysts and their variations have different etiopathogenesis and biological behavior, but are equally lytic. The proliferation activity of the epithelial lining and the components of the basement membrane and extracellular matrix constitute targets of research. The aim of this study was to evaluate the relation between mononuclear inflammatory infiltrate and the expression of proliferative immunomarkers (Ki 67), and proteins of basement membrane and extracellular matrix in radicular cysts. In this retrospective observational study, all cases of jawbone cysts that had been recorded in the files of the Department of Pathology and Legal Medicine (FAMED), and of the Laboratory of Oral Pathology (FFOE) of the Federal University of Cearà (UFC) and reviewed. After histological revision, the groups were divided into heavily inflamed radicular cysts (HIRC) (n=17), slightly inflamed radicular cysts (SIRC) (n=9) and dentigerous cysts (DC) (n=9). The presence and intensity of the lymphoplasmacytic inflammatory infiltrate and the preservation of the epithelial lining were the parameters used to select the cases. Immunohistochemical analyses were performed using the standard streptavidin-biotin-peroxidase method. The primary antibodies used in this study included Ki 67 (DakoÂ, 1:50), Anti-Collagen Type IV (DBSÂ, 1:40) and Anti- Laminin (DBSÂ, 1:20).The immunoexpression of Ki-67 was more intense in the SIRC group compared to the HIRC group and DC. Likewise, the immunoexpression of Anti-Collagem Type IV in the basement membrane of the SIRC group presented a statistically significant difference compared to the HIRC group and DC . The expression of laminin in the basement membrane and in group HIRC and DC was negative and the group of SIRC was weak and punctual. It was concluded that presence and severity of inflammatory content wall of radicular cysts appear to modify the expression of proliferation factors in the coating epithelium and collagen type IV and laminin in the basement membrane but not modific with the behavior of extracellular matrix in radicular cyst. The expression of basement membrane components (laminin and collage type IV) is higher in radicular cyst with mild inflammatory infiltrade.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / O Mycobacterium leprae, agente etiolÃgico da hansenÃase, nÃo à cultivÃvel em meio axÃnico. A quantificaÃÃo do bacilo realizada pelo exame baciloscÃpico e histopatolÃgico à Ãtil para a classificaÃÃo da hansenÃase na escolha e monitoramento do tratamento. No entanto, esta metodologia produz resultados de especificidade e sensibilidade limitada. A PCR em tempo real (qPCR) à um ensaio sensÃvel e especÃfico que permite a quantificaÃÃo a partir de diversas amostras e pode ser utilizada no diagnÃstico diferencial de muitos patÃgenos. Atà o momento, nenhum estudo avaliou a sensibilidade e especificidade da qPCR para o diagnÃstico da hansenÃase utilizando amostras de secreÃÃo nasal. Portanto, este estudo teve como objetivo detectar e quantificar o DNA de M. leprae por qPCR em amostras de secreÃÃo nasal e biÃpsias de pacientes com hansenÃase, correlacionando com a avaliaÃÃo clÃnica e o Ãndice baciloscÃpico. Foram analisadas 61 amostras de muco nasal e 19 amostras de biÃpsia de lesÃo de pele (pareadas) de casos confirmados de hansenÃase atendidos no Centro de ReferÃncia Nacional em Dermatologia SanitÃria Dona LibÃnia. Todas as amostras foram submetidas à extraÃÃo e amplificaÃÃo de DNA por nested PCR da regiÃo de 238 pb da sequÃncia RLEP2. Posteriormente as amostras foram submetidas à quantificaÃÃo da regiÃo 16S rRNA do genoma de M. leprae pela qPCR, cuja especificidade foi verificada atravÃs da curva de dissociaÃÃo (Tm=79,5ÂC). O mÃtodo foi suficientemente sensÃvel para detectar 20 fg de DNA de M. leprae, o equivalente a quatro bacilos. Na anÃlise da secreÃÃo nasal, o ensaio foi capaz de confirmar o diagnÃstico em 89,7% dos casos multibacilares (MB), e 73,3% dos casos paucibacilares (PB). A sensibilidade foi de 100% na analise de biÃpsias de pacientes MB. O nÃmero de bacilos detectados nas amostras de secreÃÃo nasal de pacientes com hansenÃase se manteve no intervalo de 1,39 x 103 a 8,02 x 105 bacilos, enquanto a detecÃÃo em biÃpsia de pacientes MB variou de 1,87 x103 a 1,50 x 106. A PCR em tempo real à mais sensÃvel do que a PCR convencional e pode ser utilizada como uma ferramenta complementar para o diagnÃstico clÃnico e histopatolÃgico da hansenÃase. / Mycobacterium leprae, the etiologic agent of leprosy, is not cultivable in axenic medium. The quantification of bacilli performed by skin bacilloscopy and histopathology is useful for the clinical classification of leprosy and treatment monitoring. However, this methodology yields low results regards to sensitivity and specificity. On the other way, the real-time quantitative PCR (qPCR) is a sensitive and specific assay that allows quantification of a varied of samples and also can be used for differential diagnosis of many pathogens. To this date, no studies have evaluated the sensitivity and specificity of qPCR for the diagnosis of leprosy from nasal secretion samples. Therefore, this study aimed at detecting and quantifying DNA from M. leprae by qPCR from nasal secretion and biopsy samples from leprosy cases, correlating with clinical and bacteriological index. We analyzed 61 samples of nasal secretion and 19 biopsy specimens of skin lesion (paired) from confirmed leprosy cases seen at the National Reference Center for Sanitary Dermatology Dona LibÃnia. All samples were subjected to DNA extraction followed by amplification by nested PCR of a region of 238 bp which targets a RLEP2 repetitive sequence. The samples were subjected to quantification of 16S rRNA region of the genome of M. leprae by qPCR, which specificity was verified by amplicon melting temperature (Tm = 79.5  C). The method was able to detect amounts over to 20 fg of M. leprae DNA, equivalent to four bacilli units. Nasal secretion assay was able to confirm the diagnosis in 89.7% of the multibacillary cases (MB) and 73.3% of the paucibacillary cases (PB). In addition, MB patient biopsies sensitivity was 100%. The number of bacilli detected in nasal secretion samples from leprosy patients ranged from 1.39 x 10 to 8.02 x 105 bacilli, while detection in MB patient biopsy ranged from 1,87 x 103 to 1,50 x 106. The real-time PCR is more sensitive than conventional PCR and can be used as a complementary tool for the clinical and histopathological diagnosis of leprosy.

nÃo hà / Annona muricata, conhecida popularmente como gravioleira, à uma planta usada amplamente na medicina popular na forma de chÃs e infusÃes para o tratamento de diversas doenÃas, como o cÃncer. O objetivo deste trabalho foi avaliar a citotoxicidade e a atividade antitumoral do extrato acetÃnico das sementes de Annona muricata. O presente estudo foi realizado frente a um painel de 4 linhagens de cÃlulas tumorais, as cÃlulas HL-60, HCT-116, SF-295 e OVCAR-8 obtiveram os valores de IC50 0,1944Âg/mL, 0,1488Âg/mL, 0,0601Âg/mL e 0,0987 Âg/mL respectivamente. Na anÃlise frente a eritrÃcitos de camundongos obtivemos a IC50 de 9,23Âg/mL. O estudo de toxicidade aguda foi realizado in vivo e a DL50 foi de 310,2 mg/kg. O estudo da atividade hemolÃtica foi feita utilizando suspensÃo de eritrÃcitos de camundongos nÃo causando lise. O estudo da avaliaÃÃo antitumoral nas doses (7,5; 15 e 30mg/kg/dia por via oral) em camundongos transplantados com Sarcoma 180 revelou atividade em todas as doses, causando uma reduÃÃo de 48,41% do crescimento tumoral na maior dose. As anÃlises do fÃgado e rins revelaram que houve algumas alteraÃÃes no fÃgado, como esteatose e necrose focal sugerindo toxicidade hepÃtica nos camundongos tratados com o extrato acetÃnico das sementes da Annona muricata. Essas alteraÃÃes sÃo, entretanto, consideradas de possÃvel reversÃo do tecido com a descontinuidade do tratamento ou adequaÃÃo da dose. As anÃlises bioquÃmicas, revelaram um aumento nos nÃveis sÃricos da creatinina nas doses de 15 e 30 mg/kg/dia. Nos testes hematolÃgicos nÃo houve alteraÃÃes nos grupos tratados com o extrato acetÃnico das sementes da Annona muricata. Os resultados mostraram poucas alteraÃÃes dos animais nos parÃmetros fÃsicos, bioquÃmicos e hematolÃgicos, mostrando que o extrato à bem tolerado e pouco tÃxico. / Annona muricata, popularly known as soursop, is a plant widely used in folk medicine as teas and infusions for the treatment of various diseases such as cancer. The aim of this study was to cytotoxicity evaluate the antitumor activity of the acetone extract of the seeds of Annona muricata. This study was conducted with a panel of four tumor cell lines, HL-60 cells, HCT-116, SF-295 and OVCAR-8 IC50 values obtained 0.1944 Âg/ ml, 0.1488 Âg/mL, 0.0601 Âg/mL and 0.0987 Âg/mL, respectively. In the analysis across from erythrocytes of mice obtained the IC50 of 9.23 Âg/mL. The acute toxicity study was conducted in vivo and DL50 was 310.2 mg/kg. The study of hemolytic activity was performed using cell suspension from mice without causing lysis. The evaluation study antitumor doses (7.5, 15 and 30mg/kg/day orally) in mice transplanted with Sarcoma 180 showed activity at all doses, causing a reduction of 48.41% of tumor growth at the highest dose . Analyses of liver and kidney revealed that there were some changes in the liver, such as steatosis and focal necrosis suggesting liver toxicity in mice treated with acetone extract of the seeds of Annona muricata. These changes are, however, considered the possible reversal of the tissue with treatment discontinuation or dose adjustment. Biochemical analysis revealed an increase in serum creatinine at doses of 15 and 30 mg/kg/day. In haematological tests there were no changes in the groups treated with acetone extract of the seeds of Annona muricata. The results showed little change in physical parameters of the animal, biochemical and hematological showing that the extract is well tolerated and less toxic

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / A doenÃa de Chagas (DC) à uma patologia de natureza endÃmica, causada pelo protozoÃrio Trypanosoma cruzi, com pronunciada relevÃncia entre as doenÃas cardÃacas. Foi descrita oficialmente em 1909 e mesmo apÃs mais de um sÃculo de sua descoberta ainda representa um problema de saÃde pÃblica. O objetivo deste trabalho foi avaliar a efetividade da quimioterapia com Benzonidazol (Bz) em pacientes chagÃsicos crÃnicos atravÃs de anÃlise sorolÃgica e eletrocardiogrÃfica. Trata-se de um estudo prospectivo nÃo concorrente e concorrente, onde os pacientes foram acompanhados sorologicamente uma vez ao ano depois do tratamento, a partir de 2005, 2006 ou 2007 (antes do tratamento) atà 2011. A avaliaÃÃo eletrocardiogrÃfica foi realizada no inÃcio (2005 a 2007) e final da pesquisa (2011). Os pacientes foram tratados com Bz na dosagem de 5mg/Kg/dia em duas a trÃs tomadas diÃrias durante 60 dias. A anÃlise sorolÃgica foi realizada atravÃs das tÃcnicas de ELISA (Ensaio ImunoenzimÃtico) e IFI (ImunofluorescÃncia indireta). A avaliaÃÃo eletrocardiogrÃfica foi feita atravÃs dos eletrocardiogramas (ECG) realizados no Hospital UniversitÃrio Walter CantÃdio e disponÃveis nos prontuÃrios dos pacientes. Foram acompanhados 31 pacientes, 20 (64,5%) do sexo masculino e 11 (35,5%) do feminino, de 25 a 64 anos, dos quais 51,6% (16/31) cursaram o primeiro grau incompleto e 22,6% (7/31) eram agricultores. A anÃlise sorolÃgica atravÃs do teste ELISA demonstrou queda significativa da densidade Ãptica das amostras coletadas antes (2005 a 2007) em relaÃÃo Ãs amostras pÃs-tratamento (2011). Com relaÃÃo à IFI, os pacientes mantiveram-se inalterados durante o segmento (variaÃÃo de no mÃximo uma diluiÃÃo entre a amostra basal e 2011). No que diz respeito à avaliaÃÃo eletrocardiogrÃfica, 76,2% (16/21) apresentaram manutenÃÃo dos laudos eletrocardiogrÃficos ao longo do estudo, com exceÃÃo de cinco casos. Um dos pacientes excluÃdo da anÃlise eletrocardiogrÃfica (nÃo existia ECG realizado em 2011) necessitou de um implante de desfibrilador ao longo do acompanhamento (2010). Em conclusÃo, pode-se afirmar que embora o Bz apresente efetividade limitada em pacientes na fase crÃnica da DC, este estudo demonstrou um efeito benÃfico do medicamento na maioria dos pacientes acompanhados, jà que a maioria destes apresentou manutenÃÃo dos laudos eletrocardiogrÃficos e a sorologia mostrou uma tendÃncia à queda. Entretanto, faz-se necessÃrio um perÃodo maior de segmento, jà que o tempo de acompanhamento deste estudo (5 a 7 anos) à considerado curto para pacientes na fase crÃnica da doenÃa. / Chagas disease (CD) is a pathology of endemic nature, caused by the protozoan Trypanosoma cruzi, with pronounced relevance between heart disease. It was officially described in 1909 and even after more than a century of its discovery is still a public health problem. The aim of this study was to evaluate the effectiveness of chemotherapy with Benznidazole (Bz) in patients with chronic Chagas disease by serological analysis and electrocardiography. This is a prospective non-concurrent and concurrent study, where patients were followed serologically once a year after treatment, from 2005, 2006 or 2007 (before treatment) until 2011. The electrocardiographic evaluation was performed at baseline (2005-2007) and end of the study (2011). The patients were treated with Bz in dose of 5mg/kg/day in two to three daily doses for 60 days. The serological analysis was conducted, through the techniques of ELISA (enzyme immunoassay) and IIF (indirect immunofluorescence). The electrocardiographic evaluation was performed at the University Hospital Walter CantÃdio through the electrocardiograms (ECG) available in patient charts. This study followed 31 patients, 20 (64,5%) male and 11 (35,5%) female, from 25 to 64 years, where 51.6% (16/31) did not finish high school and 22,6% (7/31) were farmers. Serological analysis by ELISA demonstrated a significant decrease in the optical density of the samples collected before (2005 to 2007) when compared with the samples after treatment (2011). Now with regard to IIF, patients remained unchanged during the segment (variation in a maximum of a dilution of the sample between baseline and 2011). Regarding the electrocardiographic evaluation, 76.2% (16/21) showed maintenance of electrocardiographic reports throughout the study, with the exception of cinco cases. One patient was excluded from analysis electrocardiographic (there wasnât ECG performed in 2011) required a defibrillator implantation during follow-up (2010). In conclusion, one can say that although Bz presents limited effectiveness in patients in the chronic phase of CD, this study demonstrated a beneficial effect of the drug in most followed patients, as the majority of these reports showed maintenance of electrocardiographic and serology showed a downward trend. However, it is necessary a longer segment, since the follow-up period of this study (5-7 years) is considered short for patients in the chronic phase of the disease.

nÃo hà / O uso do perÃxido de carbamida a 10% em moldeiras para o clareamento caseiro por 2 a 8 horas diÃrias, de 2 a 6 semanas pode resultar em grande satisfaÃÃo do paciente. A associaÃÃo de dentes brancos a um aumento da autoestima do indivÃduo promoveu o aparecimento de agentes clareadores disponÃveis para a compra sem, necessariamente, passar pela supervisÃo do dentista. Como consequÃncia, podem surgir efeitos adversos na estrutura dental. Baseado nesse contexto, o presente estudo avaliou a microdureza do esmalte apÃs a utilizaÃÃo de agentes clareadores. 70 amostras de esmalte humano, com 4x4mm, foram divididas em sete grupos (G1 a G7). Cada grupo recebeu trÃs tratamentos por 28 dias: G1: pasta nÃo clareadora, Ãgua destilada e gel placebo; G2: pasta clareadora, Ãgua destilada e gel placebo; G3: pasta nÃo clareadora, enxaguatÃrio clareador e gel placebo; G4: pasta nÃo clareadora, Ãgua destilada e gel perÃxido de carbamida a 10%; G5: pasta clareadora, Ãgua destilada e gel de perÃxido de carbamida a 10%; G6: pasta nÃo clareadora, enxaguatÃrio clareador e gel de perÃxido de carbamida a 10%; G7: pasta clareadora, enxaguatÃrio clareador e gel de perÃxido de carbamida a 10%. A microdureza foi aferida antes dos tratamentos, com 14 dias e no 28Âdia. AtravÃs da anÃlise de variÃncia ANOVA verificou-se diferenÃa entre os tipos de tratamento. Para os nÃveis de tempo, o teste de Tukey mostrou diferenÃas significativas nas medidas antes, apÃs 14 e 28 dias. O G2 se comportou estatisticamente semelhante ao G1. O G3 e G6 se mostraram estÃveis durante todo o tratamento. O G4 e G5 nÃo mostraram diferenÃa significativa entre si. O Ãnico grupo que desmineralizou significativamente entre os trÃs nÃveis de tempo foi o G7. Logo, demonstra-se que a reduÃÃo da microdureza ocorreu de forma mais intensa pelo uso coletivo de agentes clareadores durante o tratamento.

nÃo hà / IntroduÃÃo: MutaÃÃes nos genes GNAS e AIP estÃo presentes em 35% e 3%, respectivamente, dos somatotrofinomas esporÃdicos. Recentemente, observa-se importÃncia biolÃgica crescente dos microRNAs (miRNAs) na tumorigÃnese hipofisÃria. Entretanto, mecanismos moleculares envolvidos na patogÃnese de 60% desses tumores permanecem nÃo elucidados. Objetivos: Identificar a prevalÃncia de mutaÃÃes nos genes GNAS e AIP em um grupo de somatotrofinomas esporÃdicos. Comparar parÃmetros clÃnicos e bioquÃmicos ao diagnÃstico como idade, tamanho tumoral e agressividade (escore Hardy), hormÃnio do crescimento (GH), prolactina (PRL) e Fator de Crescimento Insulin-Like I (IGF-1) e resposta as terapÃuticas entre os grupos com (gsp+) e sem (gsp-) mutaÃÃo no GNAS. Analisar a expressÃo dos genes GNAS e BTG2 e miRNAs entre somatotrofinomas e hipÃfises normais (HN) e a associaÃÃo entre a expressÃo com agressividade, a resposta à cirurgia e a todas as terapÃuticas adjuvantes disponÃveis. Material e MÃtodos: 26 pacientes com diagnÃstico de acromegalia. Tamanho tumoral foi avaliado por RNM/CT e o grau de invasibilidade pelo escore de Hardy (I a IV). GH basal &#8804;2.5&#956;g/L ou nadir de GH apÃs o GTT&#8804;1&#956;g/L e IGF-1 normal para idade e sexo foram utilizados como critÃrio de cura apÃs cirurgia transesfenoidal (CTE). Como controle com o anÃlogo da somatostatina (AS), adotamos a normalizaÃÃo dos nÃveis de IGF-1 para idade e sexo. As amostras tumorais (n=26) foram obtidas durante a CTE, realizado histopatolÃgico e armazenadas a -70 ÂC, para estudos moleculares. HN (07) foram obtidas durante autÃpsias. RNA e DNA total foram extraÃdos pelo TRIzolÂ. Os cÃdons 201 e 227 do gene GNAS e o AIP completo foram sequenciados. ExpressÃo relativa dos genes GNAS e BTG2 e dos miRNAs let-7a, miR-16a, miR-21, miR-141, miR-143, miR-15a, miR-145, miR-23a, miR-23b e miR-24-2 foi avaliada por qPCR (sondas TaqMan), pelo mÃtodo 2-&#916;&#916;Ct. Resultados: A frequÃncia de mutaÃÃes no GNAS foi de 35% e no AIP 3,8%. NÃo houve diferenÃa entre as mÃdias de idade (39,0Â11,5 vs 43,6Â9,0 anos; p=0,32), nas concentraÃÃes plasmÃticas basais de GH (62,4Â128,1 vs 39,9Â48,3Âg/L; p=0,39), IGF-1 (435,5Â230,8 vs 556,9 238,3 %ULNR; p=0,32), PRL (25,7Â29,8 vs 30,9Â32,8 ng/L; p=0,69) e agressividade tumoral entre os gsp+ e gsp-(p=1,00). Ao analisar o uso do AS como terapÃutica adjuvante à CTE, observamos que 04/05 (80%) dos indivÃduos com somatotrofinoma gsp+ obtiveram controle da doenÃa, enquanto que no grupo gsp- 02/06 (33%) obtiveram controle (p=0,08). Quando associamos ao AS, os agonistas dopaminÃrgicos e/ou radioterapia externa, observamos que 05/05 (100%) dos pacientes gsp+ tiveram critÃrio de controle da doenÃa, contra (04/09) 44% no grupo gsp- (p=0,09). NÃo houve diferenÃa na expressÃo de GNAS entre os somatotrofinomas e as HN (1,07Â0,55 vs 0,98Â0,28; p=0,97), e entre os gsp+ e gsp- (1,04Â0,59 vs 1,10Â0,55; p=0,97, respectivamente). Os tumores Hardy I / II apresentaram maior expressÃo do GNAS do que os tumores classificados como III / IV (p=0,02). NÃo houve associaÃÃo entre a expressÃo do GNAS e o controle da doenÃa com cirurgia isolada ou com o uso de todas as terapÃuticas adjuvantes. Observamos hipoexpressÃo do BTG2 e dos miR-16a e miR-141 em somatotrofinomas quando foram comparados com as HN (p=0,002, fold=-6,63; p=0,01, fold=-10,00; p=0,0003, fold=-50,00, respectivamente) sem diferenÃas entre os gsp+ e gsp-. Houve hiperexpressÃo do miR-21 (p=0,02;fold=10,18) em somatotrofinomas (20,16Â18,48) quando comparado com as HN (2,52 Â3,56), sem diferenÃa entre os gsp + e gsp-. NÃo houve diferenÃa na expressÃo entre os grupos gsp+ e gsp- para os miRNAs let-7a, miR-21, miR-143, miR-15a, miR-23a e miR-24-2. Entretanto, miR-145 e miR-23b foram mais hipoexpressos no grupo gsp+ quando comparados ao gsp- (p=0,03, fold=-4,83 e p=0,02, fold=-2,77, respectivamente). NÃo houve associaÃÃo entre a expressÃo do BTG2 e o painel de miRNAs com agressividade e com o controle da doenÃa. ConclusÃo: Na presente sÃrie de somatotrofinomas, assumidos como esporÃdicos, a frequÃncia de mutaÃÃes nos genes GNAS (35%) e AIP (3,8%) foram semelhantes aos relatados na literatura. NÃo houve diferenÃas nas caracterÃsticas clÃnicas e bioquÃmicas, agressividade, resposta Ãs terapÃuticas, e na expressÃo diferencial do GNAS entre os pacientes com tumores gsp+ e gsp-. HipoexpressÃo de BTG2 (gene supressor tumoral relacionado Ãs vias de sinalizaÃÃo do p53 e do Rb), baixa expressÃo de miRNAs (supressores tumorais) e alta expressÃo de oncomirs em somatotrofinomas sugerem um papel desses na tumorigÃnese somatotrÃfica. / Introduction: Mutations in GNAS and AIP genes are present in 35% and 3%, respectively, of the sporadic somatotropinomas. Recently, increased biological importance of microRNAs (miRNAs) has been observed in pituitary tumorigenesis. However, the molecular mechanisms involved in the pathogenesis of 60% of these tumors remain to be elucidated. Objectives: To identify the prevalence of mutations in GNAS and AIP genes in a series of sporadic somatotropinomas. Compare clinical, bioquimical parametrer at diagnosis as age, tumor size and theirs aggressiveness, pre-operative growth hormone (GH), prolactin (PRL) and insulin-like growth factor-I (IGF-1) levels and treatment responsiveness between somatotropinomas with (gsp+) and without (gsp-) GNAS mutation.To analyze the expression of GNAS and BTG2 genes and a panel of miRNAs between somatotrofinomas and normal pituitaries (NP) and the association between the expression of these genes and miRNAs with aggressiveness, as well as disease control with surgery or control with all adjuvant therapeutic approaches. Material and Methods: 26 patients with acromegaly. GH basal &#8804;2.5&#956;g/L or nadir after OGTT &#8804;1&#956;g/L and normal IGF-I matched for age and sex were used as diagnosis and for cure criteria after transsphenoidal surgery (TS). As control after somatostatin analogues (SA), we adopted the normalization of IGF-I matched for age and sex. Tumor size was evaluated by MRI/CT and the degree of invasiveness by Hardy score (I to IV).Tumor samples (26) were obtained during TS, processed for histopathology and stored at -70ÂC for molecular studies. NP (07) were obtained during autopsy. Total DNA and RNA were extracted by TRIzolÂ. Codons 201 and 227 of the GNAS gene and the whole AIP gene were sequenced. Relative expression of BTG2 and GNAS genes and miRNAs let-7a, miR-16a, miR-21, miR-141, miR-143, miR-15a, miR-145, miR-23a, miR-23b, and miR-24-2 was measured by qPCR (TaqMan probes) using 2-&#916;&#916;Ct method. Results: Frequencies of GNAS and AIP mutations were 35% and 3.8%, respectively. There was no difference between the mean age (39.0  11.5 vs 43.6  9.0 years, p=0.32), basal GH (62.4Â128.1 vs 39.9  48.3 &#956;g/L; p=0.39), IGF-I (435.5  230.8 vs. 556.9  238.3; p=0.32) and PRL (25.7  29.8 vs. 30.9  32.8 ng/L, p=0.69) in plasma concentration, and tumor aggressiveness (p=1.00) between (gsp+) and (gsp-) groups. We observed that 80% (04/05) of gsp+ whereas 33% (02/06) of the gsp- achieved control (p=0.07) after SA therapy adjuvant to TS. When SA, dopamine agonists and/or external radiotherapy were associated 100% (05/05) of gsp+ group and 44% (04/09) of gsp- group (p=0.08) showed disease control.There was no difference in GNAS expression between somatotropinomas and NP (1.07  0.55 vs 0.98  0.28, p=0.97) as well as between somatotropinomasgsp+ and gsp- (1.04  0.59 vs 1.10  0.55, p=0.97, respectively). Hardy I/II tumors showed higher GNAS expression than Hardy III/IV (p=0.02), but there was no association between GNAS expression and disease control with surgery alone or associated with other adjuvant therapies. We observed hypoexpression of BTG2 and miR-16a and miR-141 in somatotropinomas compared with NP (-6.6 fold, p=0.002; -10.0 fold, p=0.01; and -50.0 fold, p=0.0003, respectively) with no difference between gsp+ and gsp- somatotropinomas. There was miR-21 overexpression in somatotropinomas compared with NP (20.2  18.5 vs 2.5  3.6; 10.2 fold, p=0.02), with no difference between gsp+ and gsp- somatotropinomas. However, miR-145 and miR-23b were more hipoexpressed in gsp+ compared to gsp- (-4.8fold, p=0.03 and-2.7 fold, p=0.02). There was no association between the expression of BTG2 and a panel of miRNAs with aggressiveness or disease control. Conclusion: In this series of assumed sporadic somatotopinomas, the frequencies of mutations in GNAS (35%) and AIP (3.8%) were similar to the literature. There were no differences in clinical and biochemical characteristics, aggressiveness, response to therapy, and GNAS expression in patients with gsp+ and gsp- somatotropinomas. Hypoexpression of BTG2, a tumor suppressor gene related to p53 and Rb signaling pathways, low expression of tumor suppressor miRNAs and high expression of oncomirs in somatotropinomas suggest a role in the somatotrophic tumorigenesis.

Os mecanismos envolvidos nas atividades toxicológicas e/ou farmacológicas dos compostos orgânicos de selênio são pouco conhecidos. Os compostos orgânicos de selênio (disseleneto de difenila e ebselen) e organotelúrio (ditelureto de difenila) foram alvo dos trabalhos realizados“in vitro”, neste estudo. Os compostos organocalcogênios apresentaram efeitos diversos sobre o influxo de 45Ca2+ medido em sinaptossomas de cérebro de rato, dependendo das condições e agentes despolarizantes usados. Ebselen, (PhSe)2 e (PhTe)2 alteram a captação de 45Ca2+ de maneira distinta quando expostos a aminopiridina ou KCl. Enquanto (PhTe)2 inibe a captação de cálcio em todas as condições experimentadas, (PhSe)2, apresenta este efeito apenas quando incubado em condições basais ou sob a ação de aminopiridina. Ebselen, por sua vez, aumenta a captação de cálcio em altas concentrações em condições basais e sob a ação de aminopiridina, porém, apresenta efeito inverso quando os sinaptossomas são despolarizados por KCl. Ebselen evitou a inibição da captação de 45Ca2+ “in vitro” provocada por cloreto de mercúrio(HgCl) em sinaptossomas de cérebro de rato em condições basais do ensaio, no entanto, ebselen não afetou a inibição da captação de glutamato “in vitro” por HgCl, indicando que ebselen pode atuar dependendo das proteínas-alvo consideradas.Os compostos de mercúrio, MeHg e HgCl, inibiram a captação de glutamato em córtex cerebral de ratos de 17 dias e ebselen reverteu somente o efeito do MeHg porém, não, o do HgCl. Disseleneto de difenila não alterou os parâmetros avaliados na exposição de ambos os compostos de mercúrio.Os compostos de mercúrio estudados provocaram a morte celular das fatias de córtex, porém, ebselen protegeu as fatias dos efeitos lesivos provocados por MeHg e não pelo HgCl.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-05-20T16:55:28Z No. of bitstreams: 1 Davi Wilson Mariano Gomes.pdf: 790856 bytes, checksum: 1a25923a053ecc7ed49441f2743006fc (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-20T16:55:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Davi Wilson Mariano Gomes.pdf: 790856 bytes, checksum: 1a25923a053ecc7ed49441f2743006fc (MD5) Previous issue date: 2011-02-14 / Microbusinesses and small businesses in Brazil account for a significant part of the country’s economy, generating jobs and income. Pet shops are included in this group, firms whose activities are directed to the sale and marketing of pets, a segment with a significant rate of growth, indeed one that is higher than GDP (gross domestic product), a fact that triggered the present study, particularly when the subject is linked to the market strategy of survival and expansion, as the figures show that these businesses have a high rate of insolvency in a short period of time. During the study – a qualitative and descriptive one – an attempt was made to identify the strategies used by the market leaders in the Metropolitan Region of Recife (MRR). The initial hypothesis was that only a professionalized quality management offering differential services could guarantee the maintenance and growth of companies in this sector, in a market that is not only growing but is also extremely demanding and characterized by a clientele that is highly educated and with great purchasing power, in addition to a strong emotional attachment to its pets. The present case study covered five firms in the MRR, all of which have been in business for over 10 years, with an established clientele and turnover regarded as substantial for companies in this sector. Over 100 interviews were conducted, including ones with customers, collaborators at various levels and with different functions within their companies, as well as the owners of the pet shops studied, in an attempt to identify their view of the future regarding the progression of the market in the face of intensifying competition, with the prospect of large national and international chains entering this segment. The results point to client satisfaction, which is explained by three basic factors: convenience, understood as the location of the shop and safety, adding value to the client’s perception of the business; excellence in the service provided (the affection and zeal displayed by the employees when receiving the animal and throughout the attendance, always closely observed by the owner); and the diverse nature of the products and services (clinical attendance, feeding and beautification). As regards the strategies employed, the segmentation of the market was identified as a variable of major importance for the success of the company. The study ends with a synthesis by means of a SWOT analysis, in which the main strengths and weaknesses of the companies studied are identified, as well as the threats posed by the competitive environment and the resulting opportunities. / As micro e pequenas empresas no Brasil são consideradas responsáveis por parte significativa da economia gerando emprego e renda. Neste grupo, estão incluídos os pet shops, empresas que têm suas atividades direcionadas à comercialização de produtos e serviços para animais de estimação, um segmento com taxas de crescimento significativas, acima do Produto Interno Bruto (PIB), fato que motivou este estudo, principalmente quando o assunto está ligado à estratégia de mercado para sobreviver e crescer, uma vez que as estatísticas demonstram um alto índice de insolvência dessas empresas, em pouco tempo, Durante esta pesquisa - de natureza qualitativa e descritiva - buscou-se identificar as estratégias utilizadas pelas empresas líderes de mercado na Região Metropolitana do Recife (RMR). Partiu-se da hipótese de que somente uma gestão profissionalizada com serviços diferenciados e de qualidade poderia responder pela manutenção e pelo crescimento das empresas no setor, em um mercado que cresce, mas altamente exigente e caracterizado por um público com elevado grau de instrução, poder aquisitivo, além de emotivo em relação ao seu pet. A pesquisa, caracterizada como estudo de caso, abrangeu cinco empresas da RMR, todas com mais de 10 anos de atuação, consolidadas junto à sua clientela e faturamento considerado importante para as empresas do ramo. Foram realizadas mais de 100 entrevistas, incluindo clientes externos, colaboradores de diversos níveis e funções dentro das empresas, como também os proprietários dos pet shops estudados, buscando-se identificar sua visão de futuro quanto à evolução do mercado, frente a uma concorrência que começa a se intensificar, com perspectivas de entrada de grandes redes nacionais e internacionais nesse segmento. Os resultados apontaram a satisfação do cliente, explicada por três fatores básicos: conveniência, entendida como localização da loja e segurança, agregando valor na percepção do cliente; excelência no atendimento (o carinho e o zelo demonstrados pelo colaborador na recepção do animal e durante todo o atendimento, sempre muito fiscalizado pelo proprietário); e a diversificação de produtos e serviços (atendimento clínico, alimentação e embelezamento). Quanto às estratégicas empregadas, identificou-se a segmentação de mercado como variável de grande importância para o sucesso da empresa. A pesquisa é finalizada endereçando-se uma síntese por meio de uma análise SWOT, na qual são identificadas as principais forças e fraquezas das empresas estudadas, bem como as ameaças do ambiente competitivo e as oportunidades resultantes.

Made available in DSpace on 2014-06-12T15:52:48Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo5096_1.pdf: 254073 bytes, checksum: 5827be40ecff661f6d409cc3b9ebfe20 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2003 / Nesse estudo, avaliamos a toxicidade pré-clínica aguda e crônica de 03 fitoterápicos, amplamente consumidos pela população brasileira para o tratamento de afecções respiratórias. A formulação dos três compostos contém mel de abelha e extrato de própolis acrescida de extrato fluído de Mikania glomerata (fitoterápico A), extrato fluído de Eucalyptus globulus (fitoterápico B) ou extratos fluídos de Zingiber officinale e Allium sativum (fitoterápico C), os fitoterápicos A e B são apresentados sob a forma de xarope e o fitoterápico C sob a forma de spray . O ensaio de toxicidade aguda dose única (7,5, 15, 25 ou 35 ml/kg; v.o.), em camundongos Swiss de ambos os sexos (n=10animais/grupo), demonstrou baixa ordem de toxicidade para os três compostos. Os fitoterápicos A e C, em doses de até 25 ml/Kg, não produziram mortalidade nos animais dos respectivos grupos, enquanto que na dose de 35 ml/kg foi verificado um percentual de 30% e 70% de mortalidade para os fitoterápico C e A, respectivamente. Em relação ao fitoterápico B, nos animais submetidos ao tratamento com doses de até 15 ml/kg, não foi verificado nenhum registro de morte. Entretanto, para as doses de 25 e 35 ml/kg foram observados mortalidade de 20% e 40%, respectivamente. Nos três estudos não foi possível determinar a DL50 dos fitoterápicos em função da impossibilidade de administração de volume superior ao volume máximo (1 ml), já utilizado na administração da dose de 35 ml/kg, permitido para a espécie estudada. Nas observações gerais, o tratamento agudo com os três fitoterápicos (7,5 e 15 ml/kg) não evidenciou nenhum indicativo de toxicidade, quando comparado ao grupo controle, do início até o 14o dia após o tratamento, para os animais sobreviventes. No estudo de toxicidade crônica em ratos de ambos os sexos, o tratamento com o fitoterápico A (7,5 ou 15 ml/kg; v.o.) não apresentou diferença no perfil hematológico e bioquímico dos grupos tratados em relação ao controle, após 90 dias de tratamento. O perfil hematológico dos grupos tratados com os fitoterápicos B ou C (7,5 ou 15 ml/kg; v.o.) também não diferiram do controle. Os animais do grupo tratado com o fitoterápico B (7,5 ml/kg), apresentaram um aumento significativo (p<0,01) na concentração plasmática de triglicérides (102,2±8.8 para machos e 100,0±8.8 mg/dl para fêmeas), em relação ao grupo controle salina (86,8±8.8 para machos e 84.6±8.8mg/dl para fêmeas). Os animais do grupo tratado com o fitoterápico C (15 ml/kg) apresentaram diferenças significantes (p<0,01) em relação à concentração plasmática de glicose (86,8±4,7 nos machos e 77,2&#1048690;4,7 mg/dl nas fêmeas), em relação aos valores do controle (66,7&#1048690;4,7 para os machos e 68,5&#1048690;4,7 mg/dl para as fêmeas). Os valores relativos à concentração de triglicérides (127,0&#1048690;11,0 nos machos e 96,0&#1048690;11,0 mg/dl nas fêmeas) também diferiram significantemente (p<0,05) em relação ao controle (86,8&#1048690;11,0 nos machos e 84,6&#1048690;11,0 mg/dl nas fêmeas). A nível clínico, estas diferenças constatadas, não parecem ser significativas, uma vez que os valores observados se encontra dentro da faixa de referência considerada normal para a espécie estudada. Após a administração crônica, o comportamento geral dos animais não apresentou alteração e a evolução do peso corporal dos grupos tratados não apresentou nenhuma diferença significante em relação ao controle. A análise macroscópica de órgãos vitais tais como pulmões, fígado, coração, rins e estômago não revelaram nenhuma alteração em relação ao grupo controle. Em relação ao peso desses órgãos, foi possível constatar que, somente nos grupos de machos tratados com o fitoterápico A foram observadas diferenças estatisticamente significativas (p<0,05) em relação ao peso do fígado e rim, para o grupo tratado com 7,5ml/kg, e do baço para o grupo tratado com 15 ml/kg. Porém, tais alterações não foram dose dependente e restringiram-se apenas aos machos. A análise desses resultados leva a conclusão que, em doses equivalentes em termos humanos, os três fitoterápicos (7,5 ou 15 ml/kg), não apresentaram efeitos tóxicos (agudo e crônico) relevantes do ponto de vista clinico, em camundongos Swiss e ratos Wistar de ambos os sexos