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Efeito da associação entre laserterapia e farmacoterapia no modelo de inflamação aguda do tendão induzida por colagenase em ratos / Effect of the association of laser therapy and pharmacotherapy in tendon with acute inflammation model induced by collagenase in rats

Faria, Raquel Santos de 16 December 2014 (has links)
Submitted by Nadir Basilio (nadirsb@uninove.br) on 2016-05-19T18:01:17Z No. of bitstreams: 1 Raquel Santos de Faria.doc: 12783104 bytes, checksum: 4980beadad8794c67cfd474377a224ff (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-19T18:01:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Raquel Santos de Faria.doc: 12783104 bytes, checksum: 4980beadad8794c67cfd474377a224ff (MD5) Previous issue date: 2014-12-16 / The tendinopathy are changes in the health of the tendon, usually frequent and difficult to treat (Langberg and Kongs-GAARD, 2008), requiring considerable financial resources for its treatment.The main objective of the tendon healing process is the restoration of mechanical strength, since the injury induces changes in these mechanical properties. For the assessment of these changes, some models are used, including the monotonic traction tests to failure of the tissue that provide important information about the stiffness and elongation, assisting in the understanding of functional aspects in the progression of the lesion, determining the biomechanical aspects of therapies used for tissue repair. OBJECTIVES: Evaluate the low-level laser action (830nm) and its association with pharmacotherapy using diclofenac sodium in tissue repair tendon, analyzing their mechanical behavior and histological aspects.The animals were anesthetized by intraperitoneal injection of ketamine hydrochloride (90mg / kg) and xylazine (10mg / kg). Then the control animals received as vehicle a transcutaneous injection with 100 mL of sterile saline 0.9% NaCl in the posterior region of the right foot, the Achilles tendon. The animals of the other groups received 100 of transcutaneous injection of collagenase (1 mg / ml;. Sigma Chemical Co, Cat C-6885) in the same region of the Achilles tendon. Next, the animals returned to the containment boxes separated into 5 experimental groups with 7 animals per group: - Control group (CTL): 100 μL was injected of sterile saline (0.9%) in Peritendinous region of the Achilles tendon. - Tendonitis Group untreated (NT): 100 μl was injected Collagenase (1 mg / ml) in Peritendinous region of the Achilles tendon. Diclofenac group (DIC): 100 μl was injected of Collagenase (1 mg / ml) in Peritendinous region of the Achilles tendon. Immediately after injury, the anti-inflammatory diclofenac sodium was injected (1 mg / kg IM).From our results we can conclude that tendinitis promotes histological changes leading to biomechanical changes translating into weakening of the tendon tissue. Pharmacologic therapy with diclofenac sodium improves some mechanical properties, reducing the loss of the maximum traction strength, but the histological aspects are far from healthy tendon. Low power laser therapy also improved both the histological appearance as a functional feature translated by the improvement in maximum traction strength. The association between laser and pharmacological therapies changed histological and biomechanical aspects of the tendon, increasing the deformability due to the increase in displacement at the time of breakage. / As tendinopatias são alterações na saúde do tendão, geralmente frequentes e difíceis de serem tratadas, com uma variedade de terapias e tratamentos e o mais utilizado é o farmacológico para o alívio da dor com resultados pouco satisfatórios devido aos seus efeitos indesejáveis no uso prolongado. A busca de novas terapias não farmacológicas no tratamento destas doenças bem como o entendimento das associações entre terapia farmacológica e não farmacológica assume papel de destaque na área médica. A terapia com laser de baixa potência aparece como terapia promissora na modulação do processo inflamatório agudo e crônico com ausência de efeitos adversos. No entanto, o estabelecimento de parâmetros clínicos para a utilização desta técnica é extremamente importante para sua validação. Objetivo: O objetivo do trabalho foi estudar o efeito do laser de baixa potência e sua associação com anti-inflamatório Diclofenaco de sódio, no reparo do tendão após a indução da tendinite pela injeção de colagenase, investigando aspectos histológicos e biomecânicos. Material e métodos: Foram utilizados ratos Wistar machos pesando entre 150 e 200g, provenientes do Biotério da UNINOVE Comitê de ética AN0037/2013. Os animais foram separados em 5 grupos: Controle, com tendão saudável (CTL), Tendinite não tratado (NT), Tendinite e tratado com Diclofenaco de sódio (DIC), Tendinite e tratado com Laser de baixa potência (L3J) e Tendinite e tratado com associação de Diclofenaco e Laser (D+L). Para indução da tendinite os animais dos grupos NT, DIC, L3J e D+L foram anestesiados e receberam injeção transcutânea de colagenase (100µg/animal) na região posterior da pata direita, no tendão calcâneo. Os tratamentos iniciaram imediatamente à indução da tendinite e continuaram diariamente até o 7º dia. Após 28 dias os animais foram eutanasiados e o tendão foi removido para análises histológicas e de propriedades mecânicas. Resultados e Discussão: Os animais do grupo NT apresentaram alterações na organização do colágeno e redução da força máxima de tração. Tanto o grupo DIC quanto o L3J apresentaram melhora da força máxima de tração. O grupo DIC apresentou discreto aumento da rigidez enquanto que o grupo L3J apresentou organização de colágeno mais próximo ao grupo CTL. O grupo D+L apresentou aumento da capacidade de deformação e alterações histológicas. Conclusão: A terapia com laser de baixa potência melhorou o reparo do tendão após a indução da tendinite. O tratamento com diclofenaco aumentou discretamente a rigidez do tecido. O tratamento farmacológico pelo Diclofenaco de sódio associado a laserterapia aumentou a capacidade de deformação do tendão, porém, com menor força de tração.
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Estudo comparativo da membrana e do hidrogel de celulose bacteriana com colágeno em dorso de ratos / Comparative study of membrane and hydrogel bacterial cellulose with collagen on the backs of rats

Moraes, Paula Rodrigues Fontes de Sousa 25 September 2013 (has links)
Desde o início da espécie humana, houve quem procurasse auxiliar o corpo na tentativa natural de restaurar suas partes injuriadas. Um dos grandes desafios atuais é a substituição de tecidos do organismo, inclusive em áreas de lesão cutânea. Um biomaterial pode ser utilizado para melhorar, aumentar ou substituir, parcial ou inteiramente tecidos ou órgãos. A membrana de celulose bacteriana (CB) possui moldabilidade, boas propriedades mecânicas, permeabilidade seletiva, permitindo a passagem de vapor d\'água, mas impedindo a passagem de microrganismos. O colágeno (COL) vem sendo amplamente usado como material na fabricação de biomateriais. Neste trabalho obteve-se membrana e hidrogel de CB-COL, caracterizados de diferentes maneiras. Foram realizados, estudos in vivo, análises macroscópica e histológica de coberturas de CB-COL, comparando com os controles (coágulo e a pomada de colagenase), após a aplicação sobre as feridas confeccionadas no dorso de ratos. Os animais foram sacrificados depois de 3, 7, 15 e 30 dias, e os dorsos processados segundo rotina histológica para coloração em HE. As caracterizações realizadas neste trabalho (microscopia eletrônica de varredura (MEV), análise termogravimétrica (TG), espectroscopia no infravermelho com transformada de Fourier (FT-IR) e difratometria de raios-X (DRX)) confirmaram a incorporação do COL às matrizes de CB. A avaliação macroscópica somente demonstrou diferença estatisticamente significante da reparação tecidual entre os tratamentos aos sete dias de pós-operatório, sendo que o hidrogel apresentou uma tendência para uma reparação mais rápida. Os resultados da avaliação histológica demonstraram diferença estatisticamente significante para reação inflamatória tecidual entre os tratamentos em todos os períodos estudados. Na avaliação da qualidade, quantidade e orientação das fibras colágenas, somente o período de três dias que não apresentou diferença estatisticamente significante entre os tratamentos. Conclui-se com esses resultados que as duas coberturas são biocompatíveis. / Since the beginning of the human race, there was those who sought to assist the body in a natural attempt to restore yours injured parts. One of the main current challenges is the replacement of body tissues, including areas of skin lesion. A biomaterial can be used to improve, enhance or replace, partially or fully tissues or organs. The membrane of bacterial cellulose (BC) has moldability, good mechanical properties, selective permeability, allowing the passage of water vapor but preventing the passage of microorganisms. The collagen (COL) has been widely used as material in the manufacture of biomaterials. In this study was obtained hydrogel and membrane BC-COL, characterized in different ways. Were realized in vivo studies, macroscopic and histological analyzes from dressings of BC-COL, comparing with controls (clot and collagenase ointment), after applying in wounds on the backs of rats. The animals were sacrificed after 3, 7, 15 and 30 days, and the scars were processed according to histological routine to HE staining. The characterizations performed in this study (scanning electron microscopy (SEM), thermogravimetric analysis (TGA), infrared spectroscopy with Fourier transform (FT-IR) and X-ray diffraction (XRD)) confirmed the incorporation of the COL to matrices BC. The macroscopic evaluation only demonstrated statistically significant difference of tissue repair between treatments at seven days postoperative, and the hydrogel showed a trend for a faster repair. The results of the histological evaluation showed statistically significant difference in inflammatory tissue reaction between treatments in all periods studied. In quality evaluation, quantity and orientation of collagen fibers, only three days period didnt show statistically significant difference between treatments. We conclude from these results that the two dressings are biocompatible.
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Células-tronco mesenquimais autólogas no tratamento da osteoartrite induzida da articulação coxofemoral em coelhos (Oryctolagus cuniculus) / Use of autologous mesenchymal stem cells in the treatment of hip osteoarthritis in rabbits (Oryctolagus cuniculus)

Coelho, Lívia de Paula [UNESP] 24 February 2017 (has links)
Submitted by LÍVIA DE PAULA COELHO null (coelholivia@hotmail.com) on 2017-04-25T16:42:01Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_Lívia_de Paula_Coelho.pdf: 1644637 bytes, checksum: 23b5d8d8d626124c1f92f58da2470387 (MD5) / Rejected by Luiz Galeffi (luizgaleffi@gmail.com), reason: Solicitamos que realize uma nova submissão seguindo a orientação abaixo: O arquivo submetido não contém o certificado de aprovação. Corrija esta informação e realize uma nova submissão com o arquivo correto. Agradecemos a compreensão. on 2017-04-26T16:31:22Z (GMT) / Submitted by LÍVIA DE PAULA COELHO null (coelholivia@hotmail.com) on 2017-04-28T15:28:35Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_Lívia_de Paula_Coelho.pdf: 1693903 bytes, checksum: 19b7ed665d5907083e027dbd119748c8 (MD5) / Approved for entry into archive by Luiz Galeffi (luizgaleffi@gmail.com) on 2017-05-03T13:39:08Z (GMT) No. of bitstreams: 1 coelho_lp_me_jabo.pdf: 1693903 bytes, checksum: 19b7ed665d5907083e027dbd119748c8 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-03T13:39:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 coelho_lp_me_jabo.pdf: 1693903 bytes, checksum: 19b7ed665d5907083e027dbd119748c8 (MD5) Previous issue date: 2017-02-24 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A cartilagem articular possui capacidade de reparação limitada, aumentado a predisposição ao desenvolvimento de alterações degenerativas, muitas vezes irreversíveis. Diversas formas de tratamento, cirúrgicas ou conservativas, são descritas, entretanto a terapêutica da osteoartrite continua sendo grande desafio ao médico veterinário. Neste contexto, a pesquisa envolvendo células-tronco mesenquimais destaca-se na busca de melhorias e avanços na reparação da cartilagem articular. Objetivou-se, no presente projeto, comparar a regeneração cartilaginosa da articulação coxofemoral de coelhos, com e sem o transplante de células-tronco mesenquimais autólogas, por meio de exames radiográficos e histopatológicos. Dois grupos, com 15 animais da espécie leporina cada, foram submetidos à indução química de osteoartrite com solução de colagenase 2% na articulação coxofemoral direita. No Grupo 1 (Células-tronco) realizou-se a aplicação intra-articular de células-tronco mesenquimais autólogas, enquanto que, o Grupo 2 (Controle) foi constituído por animais submetidos à aplicação intra-articular de solução salina estéril. Foram realizadas avaliações radiográficas e histopatológicas aos 30, 60 e 90 dias após a aplicação. Os resultados histológicos deste ensaio indicam que células-tronco mesenquimais (Grupo 1) melhoraram discretamente a qualidade do tecido de reparo, de acordo com os critérios da escala semi-quantitativa ICRS 1 (“International Cartilage Repair Society”). O Grupo 1 (Células-Tronco) demonstrou superioridade em relação ao Grupo 2 principalmente nos parâmetros: Superfície articular, matriz extracelular e distribuição celular. / The articular cartilage has limited repair capacity, leading to an increased risk for degenerative changes, potentially irreversible. Several treatments, surgical or not, are described, however osteoarthritis remains a major challenge for the veterinarian. In this context, research involving mesenchymal stem cells stands out. The aim of this study was to compare cartilage regeneration of the hip in rabbits, with and without the transplantation of autologous mesenchymal stem cells. Radiographic and histopathological evaluation were used. Thirty rabbits were submitted to chemical induction of osteoarthritis with a 2% colagenase in the right hip. They were divided into 2 groups of 15 animals each: Group 1 (intra-articular application of autologous mesenchymal stem cells) and Group 2 (control - intra-articular application of sterile saline solution). Radiographic and histopathological evaluations were performed at 30, 60 and 90 days after application. The mesenchymal stem cells group (Group 1) showed slight improvement of the quality of the repair tissue, according to the semi-quantitative scale criteria ICRS 1 (International Cartilage Repair Society). The Group 1 (Stem Cells) showed superiority in relation to Group 2, specially in the parameters joint surface, extracellular matrix and cellular distribution.
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Aspectos epidemiológicos de alterações do aparelho locomotor e uso da arnica montana no tratamento da tendinite experimental em eqüinos / Epidemiological aspects of alterations in the locomotor aparatus and use of arnica montana in the treatment of equine experimental tendinitis

MARANHÃO, Renata de Pino Albuquerque 29 September 2008 (has links)
Made available in DSpace on 2014-07-29T15:13:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese Renata de Pino A Maranhao.pdf: 884544 bytes, checksum: 6285e47eeba35dfba3fc97c0c9f7d235 (MD5) Previous issue date: 2008-09-29 / Dentre as enfermidades do aparelho locomotor, a tendinite eqüina representa parcela significativa das ocorrências clínicas de rotina. Os objetivos deste trabalho foram realizar um estudo da afecções do aparelho locomotor eqüino nos animais do Primeiro Regimento de Cavalaria de Guarda e testar um protocolo terapêutico com gel de Arnica montana como princípio ativo associado ao ultra-som terapêutico (UST) na tendinite eqüina induzida por colagenase. Verificou-se nos arquivos do 1º RCG, que os traumatismos contusos e cortantes foram as situações patológicas mais freqüentes, predominando nos animais do cerimonial militar. A tendinite dos flexores foi mais freqüente nos animais de pólo e do cerimonial, enquanto que a desmite do suspensório afetou mais os animais de salto. Na fase experimental, a tendinite foi induzida pela aplicação de colagenase no terço médio do tendão flexor digital superficial de quinze éguas, distribuídas em três grupos. No grupo GC, utilizou-se o ultra-som terapêutico (UST) desligado e gel de contato, no grupo GA, o gel contendo Arnica montana a 20% associado ao UST desligado e no grupo GAU, empregou-se gel de Arnica montana a 20%, porém com o UST ligado, na dose de 0,5watt/cm2, no modo contínuo, por cinco minutos. Observou-se no grupo GA uma redução precoce do edema metacarpiano e menor área de lesão ultra-sonográfica, enquanto que no grupo GAU a área total do tendão foi maior ao final do período. Concluiu-se que a ocorrência de enfermidades do aparelho locomotor nos eqüinos no 1º RCG é alta, estando relacionada principalmente às atividades desempenhadas pelos animais. Além disso, o gel de arnica utilizado isoladamente foi mais eficaz na redução dos sinais clínicos e da área da lesão.
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Estudo comparativo da membrana e do hidrogel de celulose bacteriana com colágeno em dorso de ratos / Comparative study of membrane and hydrogel bacterial cellulose with collagen on the backs of rats

Paula Rodrigues Fontes de Sousa Moraes 25 September 2013 (has links)
Desde o início da espécie humana, houve quem procurasse auxiliar o corpo na tentativa natural de restaurar suas partes injuriadas. Um dos grandes desafios atuais é a substituição de tecidos do organismo, inclusive em áreas de lesão cutânea. Um biomaterial pode ser utilizado para melhorar, aumentar ou substituir, parcial ou inteiramente tecidos ou órgãos. A membrana de celulose bacteriana (CB) possui moldabilidade, boas propriedades mecânicas, permeabilidade seletiva, permitindo a passagem de vapor d\'água, mas impedindo a passagem de microrganismos. O colágeno (COL) vem sendo amplamente usado como material na fabricação de biomateriais. Neste trabalho obteve-se membrana e hidrogel de CB-COL, caracterizados de diferentes maneiras. Foram realizados, estudos in vivo, análises macroscópica e histológica de coberturas de CB-COL, comparando com os controles (coágulo e a pomada de colagenase), após a aplicação sobre as feridas confeccionadas no dorso de ratos. Os animais foram sacrificados depois de 3, 7, 15 e 30 dias, e os dorsos processados segundo rotina histológica para coloração em HE. As caracterizações realizadas neste trabalho (microscopia eletrônica de varredura (MEV), análise termogravimétrica (TG), espectroscopia no infravermelho com transformada de Fourier (FT-IR) e difratometria de raios-X (DRX)) confirmaram a incorporação do COL às matrizes de CB. A avaliação macroscópica somente demonstrou diferença estatisticamente significante da reparação tecidual entre os tratamentos aos sete dias de pós-operatório, sendo que o hidrogel apresentou uma tendência para uma reparação mais rápida. Os resultados da avaliação histológica demonstraram diferença estatisticamente significante para reação inflamatória tecidual entre os tratamentos em todos os períodos estudados. Na avaliação da qualidade, quantidade e orientação das fibras colágenas, somente o período de três dias que não apresentou diferença estatisticamente significante entre os tratamentos. Conclui-se com esses resultados que as duas coberturas são biocompatíveis. / Since the beginning of the human race, there was those who sought to assist the body in a natural attempt to restore yours injured parts. One of the main current challenges is the replacement of body tissues, including areas of skin lesion. A biomaterial can be used to improve, enhance or replace, partially or fully tissues or organs. The membrane of bacterial cellulose (BC) has moldability, good mechanical properties, selective permeability, allowing the passage of water vapor but preventing the passage of microorganisms. The collagen (COL) has been widely used as material in the manufacture of biomaterials. In this study was obtained hydrogel and membrane BC-COL, characterized in different ways. Were realized in vivo studies, macroscopic and histological analyzes from dressings of BC-COL, comparing with controls (clot and collagenase ointment), after applying in wounds on the backs of rats. The animals were sacrificed after 3, 7, 15 and 30 days, and the scars were processed according to histological routine to HE staining. The characterizations performed in this study (scanning electron microscopy (SEM), thermogravimetric analysis (TGA), infrared spectroscopy with Fourier transform (FT-IR) and X-ray diffraction (XRD)) confirmed the incorporation of the COL to matrices BC. The macroscopic evaluation only demonstrated statistically significant difference of tissue repair between treatments at seven days postoperative, and the hydrogel showed a trend for a faster repair. The results of the histological evaluation showed statistically significant difference in inflammatory tissue reaction between treatments in all periods studied. In quality evaluation, quantity and orientation of collagen fibers, only three days period didnt show statistically significant difference between treatments. We conclude from these results that the two dressings are biocompatible.
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Efeitos da combinação do fator de crescimento de fibroblastos básico e fator de transformação de crescimento beta na proliferação, expressão de genes para colágeno tipos I e III, metaloproteases-1 e -2 e TIMPs 1,2 e 3, e na modulação da síntese destes próprios fatores de crescimento pelas células do ligamento periodontal de humanos

Ruiz, Karina Gonzales Silvério [UNESP] 06 June 2005 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:28Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2005-06-06Bitstream added on 2014-06-13T19:23:26Z : No. of bitstreams: 1 ruiz_kgs_dr_arafo.pdf: 357284 bytes, checksum: 93541a495590ca3b701f6cf9ef876131 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito da combinação do fator de crescimento de fibroblastos básico (b-FGF) e fator de transformação de crescimento beta (TGF- beta) na proliferação, expressão de genes para colágeno tipos I e III, metaloproteases -1 e -2 e TIMPs 1, 2 e 3, e na síntese destes próprios fatores de crescimento pelas células do ligamento periodontal de humanos. A avaliação da proliferação celular foi realizada após os períodos de 24 e 48h na presença dos fatores de crescimento, através da mensuração do nível de MTS reduzido a formazan pelas células viáveis, e a síntese de b-FGF e TGF-b pelo teste ELISA empregando a técnica sandwich. Conclui-se que as associações do bFGF e do TGF-b atuaram de maneira dose-dependente no estímulo à proliferação celular, o aumento na expressão de genes para colágeno e TIMPs e redução para as metalproteases e modulação da síntese deles próprios. / The aim of this study was to evaluate the effect of association of basic fibroblast growth factor and transforming growth factor beta on the proliferation, expression of colagen type I e III, matrix metalloproteinases-1 e -2 e TIMPs 1, 2 e 3, and on the modulation of the syntheses oh these growth factors by humans periodontal ligament cells. The cellular proliferation was evaluated to 24 and 48 hours of incubation by the colorimetric method. The synthese of bFGF and TGF-ß was verificated by ELISA method, using a sandwich techinique, and mRNA expression by Real Time - PCR. In conlusion, the associations of bFGF e TGF-ß influenced of dose-dependent manner on the cellular proliferation, on the increasing of the expression to collagen and TIMPs, and on the reduction to metaloproteinases and, the modulation of these own synthesis.
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Efeito do laser de baixa potência (660nm) na tendinite induzida por colagenase em tendão calcâneo de ratos / Effect of the low level laser therapy (660nm) in the induced tendinitis by collagenase in aquilles tendon of rats

Silva, Romildo Torres da 12 December 2013 (has links)
Submitted by Nadir Basilio (nadirsb@uninove.br) on 2015-07-20T18:29:39Z No. of bitstreams: 1 Romildo Torres da Silva.pdf: 1197534 bytes, checksum: 02ae9c343d597dbbc37f2a71f43ad453 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-07-20T18:29:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Romildo Torres da Silva.pdf: 1197534 bytes, checksum: 02ae9c343d597dbbc37f2a71f43ad453 (MD5) Previous issue date: 2015-12-12 / Tendinopathy is a common disease with a variety of treatments and therapies. Laser therapy appears as a alternative treatment. We research the effects of the laser irradiation in tendinitis model induced by collagenase injection on Achilles tendon rats, verified its action in important inflammatory markers. Methods: The male rats (Wistar) were used and divided in groups: Saline (C), Tendinitis (NT) and tendinitis treated with Sodium diclofenac (D) or Laser (1J) and (3J). The tendinitis was induced by collagenase (100μg/tendon) on the Achilles tendon which was removed for analyzes. The gene expression for COX-2; TNF-α; il-6 and IL-10 (RT-PCR) was measured. Results and discussion: The Laser therapy (660nm, 100mW, 3J) used in the treatment of the tendinitis induced by collagenase in Achilles tendon in rats, was effective in the reduction of important inflammatory markers, becoming a promising tool for the treatment of tendon diseases. / Tendinopatias são distúrbios comuns com uma variedade de tratamentos e terapias e a Laserterapia aparece como uma alternativa no tratamento destas doenças. Nós investigamos os efeitos da irradiação laser no modelo de tendinite induzida por colagenase, em tendões calcâneo de ratos, verificando sua ação em importantes marcadores inflamatórios. Métodos: Foram utilizados ratos machos (Wistar) divididos em grupos: Controle (C), Tendinite Não Tratado (NT), Tratamento com Diclofenado de Sódio (D) ou Laser (1J) e (3J). A tendinite foi induzida por colagenase (100μg/tendão) sobre o tendão calcâneo que foi removido para análises. Foi verificado a expressão gênica de COX-2, TNF-α, IL-6 e IL-10 (RT-PCR). Resultados e discussão: A laserterapia (660nm, 100mW, 3J), utilizada no tratamento da tendinite induzida por colagenase em tendão calcâneo de ratos, foi eficaz na redução de importantes marcadores inflamatórios, tornando-se uma ferramenta promissora para o tratamento de lesões tendíneas.
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Efeito do laser de baixa intensidade no colágeno tipo I e III na metaloproteinase de matriz em modelo experimental de tendinopatia induzida por colagenase em tendão calcâneo de ratas idosas / Effect of low level laser therapy on collagen type I and III in vascular endothelial grouth factor, and metalloproteinase in experimentally induced tendinopathy in aged rats

Marques, Anna Cristina de Farias 18 December 2015 (has links)
Submitted by Nadir Basilio (nadirsb@uninove.br) on 2018-06-18T21:18:10Z No. of bitstreams: 1 Anna Cristina de Farias Marques.pdf: 2073138 bytes, checksum: 63fce77ba3e8c96e01965f2b4cecc62c (MD5) / Made available in DSpace on 2018-06-18T21:18:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Anna Cristina de Farias Marques.pdf: 2073138 bytes, checksum: 63fce77ba3e8c96e01965f2b4cecc62c (MD5) Previous issue date: 2015-12-18 / This study investigates the effect of low-level laser therapy (LLLT) on collagen type I and III, matrix metalloproteinase (MMP), and vascular endothelial growth factor (VEGF) in experimentally induced tendinopathy in female aged rats. Tendinopathy was induced by collagenase peritendinous of the Achilles tendon. Forty-two Wistar rats (Norvegicus albinus) were used; groups consisted of 36 aged animals (18 months old; mean body weight, 517.7 ± 27.54 g) and 6 adult animals (12 weeks old; mean body weight, 266 ± 19.30 g). The animals were randomlydivided in three groups: control, aged tendinopathy, and aged tendinopathy LLLT; the aged groups were subdivided according to experimental periods: 7, 14, and 21 days. LLLT involved a gallium-arsenide-aluminum laser (Theralaser, DMC®) with active medium operating at wavelength 830 ± 10 nm, 50 mW power, 0.028 cm2 laser beam, 107 J/cm2 energy density, 1.7 w/cm2 power density, and 6 J of energy, with a frequency of 3 times per week, until euthanasia. VEGF, MMP-3, and MMP-9 were analyzed by immunohistochemistry, and collagen type I and III by Sirius red. LLLT increased the deposition of collagen type I and III in a gradual manner, with significant differences relative to the group aged tendonitis (p<0.001), and in relation to VEGF (p<0.001); decreased expression of MMP-3 and 9 was observed in group aged tendinopathy (p<0.001). LLLT, therefore, increased the production of collagen type I and III, downregulated the expression of MMP-3 and MMP-9, and upregulated that of VEGF, with age and age-induced hormonal deficiency. / O objetivo deste estudo foi investigar O Efeito da terapia Laser de baixa intensidade no Colágeno tipo I e III, Metaloproteinase e VEGF em Modelo Experimental de Tendinopatia, em ratas fêmeas idosas. A colagenase foi induzida na região peritendínea no tendão Calcâneo dos animais. Quarenta e duas ratas Wistar (Norvegicus albinus) foram utilizadas no estudo, com grupos consistindo de 36 animais idosos (18 meses de idade; com média da massa, 517.7 ± 27.54 g) e 6 animais adultos (12 semanas de idade; média da massa, 266, 19:30 0 ± g). Os animais foram randomizados e divididos em três grupos, Controle, tendinopatia idoso e tendinopatia Laser idoso, e subdividido em três grupos experimentai, 7, 14 e 21 dias. O tratamento com Laser de baixa intensidade foi aplicado utilizando um Laser Arseneto de Galium e Alumínio (AsGaAl) (Theralaser, DMC®) operando no comprimento de onda de 830nm (±10nm), 50 mW de potência, saída do feixe de 0,028 cm2, densidade de energia de 107J /cm2, densidade de potência 1,7 w/cm2 e energia de 3 J, com uma frequência de 3 vezes por semana, até a data da eutanásia (7, 14 e 21 dias). Foram analisados VEGF e MMP 3 e 9 por meio de Imunohistoquímica e Colágeno tipo I e III por Sirius red. Os resultados sugerem que a Terapia a Lesar de Baixa Intensidade foi capaz de aumentar os níveis de Colágeno tipo I e III de maneira gradual e com significante diferença no grupo Tendinpatia Idoso (p<0,001), isso pode ser observado em relação ao VEGF (p<0.001), foi também observado diminuição da expressão de MMP 3 e MMP 9 em relação ao grupo tendinopatia Idoso, com diferença estatística (p<0,001). Nós concluímos que a terapia Laser de Baixa Intensidade foi capaz de diminuir a produção de Colágeno tipo I e III, reduzir a expressão de MMP 3 e 9, e aumentar a expressão de VEGF, mesmo nas ratas fêmeas idosas com deficiência hormonal causada pela idade.
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Diferentes metodologias para isolamento, expansão e caracterização de células-tronco derivadas de tecido adiposo humano. / Different methodologies for isolattion and cultivation human adipose-derived stem cells.

Fuoco, Natalia Langenfeld 16 September 2014 (has links)
Os procedimentos para uso clínico de células-tronco derivadas de tecido adiposo (CT-TA) exigem grandes quantidades de células, por isso, em geral os protocolos envolvem a expansão e cultura celular in vitro. No entanto, as metodologias utilizadas rotineiramente para o cultivo de CT-TA envolvem a utilização de componentes xenobióticos, como a colagenase e o soro fetal bovino (SFB), que representam riscos potencias de reações imunológicas e transmissão de doenças infecciosas. Sendo assim, pretendeu-se no presente estudo analisar diferentes parâmetros metodológicos para isolamento e expansão de CT-TA, na ausência de componentes xenobióticos. Para tanto, as células-tronco foram isoladas por digestão enzimática ou dissociação mecânica e submetidas à expansão na presença de SFB ou lisado de plaquetas humano (LP). Os resultados mostraram que a metodologia de dissociação mecânica representa uma alternativa viável e eficiente para cultivo de CT-TA, e que o emprego de LP como suplemento para o meio de cultura aumentou de forma significativa a proliferação celular. Em função desses resultados, pode-se concluir que é possível a implementação de técnicas de isolamento e expansão de CT-TA, prescindindo-se de componentes xenobióticos. / The procedures for the clinical use of adipose-derived stem cells (ASC) require large amounts of cells, so in general protocols involve culture and cell expansion in vitro.However, the methods routinely used for the culture of ASC involves the use of xenobiotic components, such as collagenase and fetal bovine serum (FBS), that may representing potential risk of immunological reactions and the risk of transmission of infectious diseases. Thus, it was intended in this study to analyze different methodological parameters for the isolation and expansion of ASC in the absence of xenobiotic components. For this, stem cells were isolated by enzymatic digestion and mechanical dissociation and were submitted to expansion in the presence of FBS or human platelet lysate (PL). The results showed that the mechanical dissociation method represents an effective alternative to growing ASC, and that the use of PL as a supplement to the culture medium significantly increased cellular proliferation. In view of these results, we can conclude that it is possible to implement techniques for isolation and expansion of ASC, dispensing xenobiotic components.
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Diferentes metodologias para isolamento, expansão e caracterização de células-tronco derivadas de tecido adiposo humano. / Different methodologies for isolattion and cultivation human adipose-derived stem cells.

Natalia Langenfeld Fuoco 16 September 2014 (has links)
Os procedimentos para uso clínico de células-tronco derivadas de tecido adiposo (CT-TA) exigem grandes quantidades de células, por isso, em geral os protocolos envolvem a expansão e cultura celular in vitro. No entanto, as metodologias utilizadas rotineiramente para o cultivo de CT-TA envolvem a utilização de componentes xenobióticos, como a colagenase e o soro fetal bovino (SFB), que representam riscos potencias de reações imunológicas e transmissão de doenças infecciosas. Sendo assim, pretendeu-se no presente estudo analisar diferentes parâmetros metodológicos para isolamento e expansão de CT-TA, na ausência de componentes xenobióticos. Para tanto, as células-tronco foram isoladas por digestão enzimática ou dissociação mecânica e submetidas à expansão na presença de SFB ou lisado de plaquetas humano (LP). Os resultados mostraram que a metodologia de dissociação mecânica representa uma alternativa viável e eficiente para cultivo de CT-TA, e que o emprego de LP como suplemento para o meio de cultura aumentou de forma significativa a proliferação celular. Em função desses resultados, pode-se concluir que é possível a implementação de técnicas de isolamento e expansão de CT-TA, prescindindo-se de componentes xenobióticos. / The procedures for the clinical use of adipose-derived stem cells (ASC) require large amounts of cells, so in general protocols involve culture and cell expansion in vitro.However, the methods routinely used for the culture of ASC involves the use of xenobiotic components, such as collagenase and fetal bovine serum (FBS), that may representing potential risk of immunological reactions and the risk of transmission of infectious diseases. Thus, it was intended in this study to analyze different methodological parameters for the isolation and expansion of ASC in the absence of xenobiotic components. For this, stem cells were isolated by enzymatic digestion and mechanical dissociation and were submitted to expansion in the presence of FBS or human platelet lysate (PL). The results showed that the mechanical dissociation method represents an effective alternative to growing ASC, and that the use of PL as a supplement to the culture medium significantly increased cellular proliferation. In view of these results, we can conclude that it is possible to implement techniques for isolation and expansion of ASC, dispensing xenobiotic components.

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