Introdução: As doenças cardiovasculares representam a principal causa de morte no mundo, sendo o aumento da concentração de colesterol sanguíneo um dos seus principais fatores de risco. O processo aterosclerótico envolve não apenas a deposição de colesterol nas artérias, mas a inflamação tem papel central em todas as fases do processo aterosclerótico. Estudo em animais mostrou, por sua vez, que a proteína de feijão caupi é um potente redutor na concentração de colesterol sangüíneo. Objetivo: Avaliar a influência da proteína de feijão caupi sobre o perfil lipídico, apolipoproteínas, glicose, insulina, HOMA-IR, marcadores de inflamação e de disfunção endotelial em pacientes hipercolesterolêmicos. Métodos: A proteína de feijão caupi foi isolada por precipitação isoelétrica da farinha de feijão caupi desengordurada. O isolado protéico de caupi (IPC) foi utilizado no desenvolvimento do shake à base de proteína de caupi, caseinato de cálcio foi utilizado para desenvolvimento do shake controle. Realizou-se um ensaio clínico do tipo crossover, aleatorizado, cego e controlado. Uma amostra de 44 indivíduos hipercolesterolêmicos foi dividida em 2 grupos (Grupo Controle e Grupo IPC), cada grupo recebeu shake caseína e shake IPC, respectivamente, por 6 semanas cada. Depois do washout de 4 semanas, os indivíduos receberam o shake oposto por mais 6 semanas. Foram quantificadas as variáveis bioquímicas: colesterol total, LDL-c, HDL-c, triglicerídeos, colesterol não-HDL, apo A1, apo B, razão LDL/HDL, razão TG/HDL, razão apo B/apo A1, glicose de jejum, insulina de jejum, HOMA-IR (modelo de avaliação da homeostase), proteína C reativa (PCR), molécula de adesão intercelular solúvel-1 (sICAM-1) e molécula de adesão vascular solúvel-1 (sVCAM- 1) antes e após cada período experimental. A diferença entre os shakes foi analisada com ANOVA para medidas repetidas ao nível de significância de 5 por cento . Resultados: A amostra final foi composta por 38 indivíduos com idade média de 57 anos. A redução em cadeia (delta após consumo de proteína de feijão caupi menos delta após consumo de caseína) no colesterol total foi de 21,0 mg.dL-1 (p < 0,001), CT( por cento ) foi de 8,4 por cento (p < 0,001), LDL( por cento ) foi de 14,4 por cento (p < 0,001), colesterol não-HDL foi de 24,3 mg.dL-1 (p < 0,001) e apo B foi de 15,5 mg.dL-1 (p < 0,001). A ingestão de proteína de caupi afetou significativamente o HDL-c e a mudança em cadeia observada foi um aumento de 3,2 mg.dL-1 (p =0,044). Os marcadores de metabolismo glicídico (glicose de jejum, insulina de jejum e HOMA-IR), bem como os marcadores de inflamação (PCR) e de disfunção endotelial (sVCAM-1 e sICAM- 1) não sofreram modificações significativas após consumo de proteína de feijão caupi (p > 0,05). Conclusão: O presente estudo mostra que a ingestão diária de 25 g de proteína de feijão caupi durante 6 semanas é capaz de reduz os níveis de colesterol sanguíneo, em especial a fração LDL-c; no entanto, não parece exercer influência sobre os marcadores de inflamação subclínica e de disfunção endotelial. Portanto, o aumento do consumo de feijão caupi pode representar uma alternativa eficaz, barata e viável na melhora dos níveis lipídicos em indivíduos hipercolesterolêmicos / Introduction: Cardiovascular diseases are the leading cause of death worldwide, and the increase of cholesterol in blood is one of their main risk factors. The atherosclerotic process involves not only the deposition of cholesterol in the arteries, inflammation plays a central role in all stages of atherosclerosis. Animal study showed that the protein of cowpea is a potent reducer of blood cholesterol. Objective: To evaluate the influence of cowpea protein on blood lipids, apolipoproteins, glucose, insulin, HOMA-IR, markers of inflammation and endothelial dysfunction in hypercholesterolemic patients. Methods: The protein of cowpea was isolated by isoelectric precipitation of defatted flour of cowpea. Cowpea protein isolate (CPI) was used to develop the cowpea protein shake, and calcium caseinate was used for development of the control shake. A cross-over, randomized, blinded and controlled clinical trial was conducted with a sample of 44 hypercholesterolemic subjects, which was divided into two groups (control group and CPI group). Each group received casein shake and CPI shake, respectively, for taken for 6 weeks. After this period and a 4-week washout, subjects received the opposite shake for taken for 6 weeks. Biochemical variables were measured: total cholesterol, LDL-C, HDL-C, triglycerides, non-HDL cholesterol, apo A1, apo B, LDL/HDL ratio, TG/HDL ratio, apo B/apo A1 ration, fasting glucose, fasting insulin, HOMA-IR (homeostasis model assessment), C-reactive protein (CRP), soluble intercellular adhesion molecule-1 (sICAM-1) and soluble vascular adhesion molecule-1 (sVCAM-1) before and after each experimental period. The difference between the shakes was analyzed with repeated measures analysis of variance (ANOVA) at a significance level of 5 per cent . Results: The final sample consisted of 38 subjects with mean age of 57 years. The net changes in serum total cholesterol concentrations was a decrease of -21.05 mg.dL-1 (p < 0.001), in total cholesterol was -8.42 per cent (p < 0.001), in LDL-c was -14.36 per cent (p < 0.001), in non-HDL cholesterol was -24.29 mg.dL-1 (p < 0.001) and apoB was -15.55 mg.dL-1 (p < 0.001). Cowpea protein intake significantly affected serum HDL-c concentrations, the net change was a increase of 3.24 mg.dL-1 (p= 0,044). Markers of glycemic control (fasting glucose, fasting insulin and HOMA-IR) and inflammation markers (CRP) and endothelial dysfunction (sICAM-1 and sVCAM-1) have not changed significantly after consumption of cowpea protein (p > 0.05). Conclusion: This study shows that daily intake of 25 g of cowpea protein for 6 weeks can reduce levels of blood cholesterol, especially LDL-c, however did not exhibit influence on markers of subclinical inflammation and endothelial dysfunction. Therefore, the consumption of cowpea can be an effective, inexpensive and feasible way to control blood lipids of hypercholesterolemic subjects

Introdução: Doenças cardiovasculares constituem importante causa de morte em todo mundo e a hipercolesterolemia está diretamente relacionada a elas. A dieta desempenha papel importante neste processo e alguns alimentos como o feijão caupi (Vigna unguiculata L. Walp), especialmente sua proteína, tem sido apontado com potencial capacidade de redução do colesterol plasmático. Os efeitos hipocolesterolêmicos já observados indicaram o uso da proteína do feijão caupi, ou dos seus peptídeos, como ingrediente funcional de alimentos para a promoção da saúde e a redução do risco de doenças. Entretanto, as consequências da digestão gastrointestinal na absorção destes peptídeos são claramente complexas tornando essenciais estudos in vitro e in vivo para avaliar a sua bioacessibilidade e sua resistência à degradação gastrointestinal, além da disponibilidade e real eficácia destes peptídeos. Objetivo: Analisar a biodisponibilidade de peptídeos e avaliar parâmetros ligados ao metabolismo do colesterol em modelos animais após ingestão de isolado proteico de feijão caupi. Métodos: A farinha de feijão caupi foi desengordurada e sua proteína isolada. O isolado proteico foi submetido a métodos de hidrólise in vitro, para verificação das frações peptídicas formadas e inferência sobre a capacidade de ligação à albumina. Dois experimentos in vivo foram conduzidos. No primeiro, o isolado proteico do feijão caupi foi administrado a ratos e a concentração dos peptídeos monitorada no sangue, por 2 horas. O experimento in vivo 2 consistiu na alimentação de hamsters com dietas normo (N) - e hipercolesterolêmicas por 21 dias, contendo a proteína do feijão caupi como única proteína da ração (I), comparada ao controle de caseína (H). Neste experimento foram analisados no plasma: colesterol total (CT) e frações (LDLc, VLDLc e HDLc), triglicerídeos (TG) e peptídeos; nas fezes: colesterol total (CF) e ácidos biliares (AB); no fígado: colesterol (CH) e lipídeos totais (LH), HMGCR (atividade enzimática e expressão) e expressão de SREBP2, LDLR, ABCA1, ABCG1, ABCG5, ABCG8, LXRa e AMPK. Resultados: Os peptídeos identificados a partir da hidrólise proteica do feijão caupi, ou a partir do plasma dos animais estudados não evidenciaram similaridades entre os experimentos ou corresponderam a sequências previamente identificadas para o feijão caupi a partir de banco de dados. CT, VLDLc, HDLc, TG, CH dos hamsters foram maiores nos grupos H e I quando comparado ao N; LDLc foi maior para I comparado aos demais; LH foi maior em H comparado a N, sendo que I não diferiu dos demais; CF foi maior para I comparado a N, sendo que H não diferiu dos demais. A expressão de ABCA1 foi maior para I em relação aos demais; LXRa foi maior para I em relação a H, mas N não diferiu dos demais; SREBP2 foi menor em H em comparação aos demais; HMGCR foi mais expressa em N em comparação aos demais, ao passo que a atividade desta enzima foi maior em I quando comparado a N, sendo que H não diferiu dos demais. Não houve diferença entre os grupos quanto a AB ou expressão de ABCG8 ou AMPK. Não foram obtidos resultados de expressão para LDLR, ABCG1 e ABCG5. Conclusão: Apesar de pesquisas anteriores a este trabalho terem evidenciado a capacidade do isolado proteico do feijão caupi em inibir a atividade da HMGCR, inibir a solubilização micelar ou melhorar o perfil de lipídeos plasmáticos, no trabalho atual esta matéria prima não mostrou atuação positiva quanto ao metabolismo do colesterol de hamsters nas condições experimentais utilizadas. Os fragmentos indicados como peptídeos obtidos a partir da hidrólise proteica do feijão caupi, ou do plasma dos animais estudados não corresponderam a peptídeos com comprovada, ou até mesmo, com indicação de bioatividade / Introduction: Cardiovascular diseases are important cause of death worldwide and hypercholesterolemia is directly related to them. Diet plays an important role in this process and some foods such as cowpea (Vigna unguiculata L. Walp), especially its protein, have been shown to have a potential for reducing plasma cholesterol. The hypocholesterolemic effects already observed indicated the use of cowpea protein, or its peptides, as a functional food ingredient for health promotion and reduction of disease risk. However, the consequences of gastrointestinal digestion on the absorption of these peptides are clearly complex, making in vitro and in vivo studies essential to assess their bioaccessibility and resistance to gastrointestinal degradation, as well as the availability and actual efficacy of these peptides. Objectives: To analyze the bioavailability of peptides and evaluate parameters related to cholesterol metabolism in animal models after ingestion of protein isolate of cowpea. Methods: Cowpea flour was defatted and its protein isolated. The protein isolate was subjected to in vitro hydrolysis methods to verify the formed peptide fractions and inference about albumin binding ability. Two in vivo experiments were conducted. In the first, the cowpea protein isolate was administered to rats and the concentration of the peptides monitored in the blood for 2 hours. The in vivo experiment 2 consisted of feeding hamsters with normal (N) - and hypercholesterolemic diets for 21 days, containing the cowpea protein as the sole dietary protein (I), compared to casein control (H). In this experiment were analyzed in the plasma: total cholesterol (TC) and fractions (LDLc, VLDLc and HDLc), triglycerides (TG) and peptides; In feces: total cholesterol (CF) and bile acids (AB); In the liver: cholesterol (CH) and total lipids (LH), HMGCR (enzymatic activity and expression) and expression of SREBP2, LDLR, ABCA1, ABCG1, ABCG5, ABCG8, LXRa and AMPK. XX. Results: The peptides identified from the protein hydrolysis of cowpea or from the plasma of the animals studied did not show similarities among the experiments or correspond to sequences previously identified for the cowpea from the database. CT, VLDLc, HDLc, TG, CH of hamsters were higher in groups H and I when compared to N; LDLc was higher for I compared to the others; LH was higher in H compared to N, and I did not differ from the others; CF was higher for I compared to N, and H did not differ from the others. The expression of ABCA1 was higher for I than the others; LXRa was higher for I than H, but N did not differ from the others; SREBP2 was lower in H compared to the others; HMGCR was more expressed in N compared to the others, whereas the activity of this enzyme was higher in I when compared to N, and H did not differ from the others. There was no difference between groups regarding AB or expression of ABCG8 or AMPK. No expression results were obtained for LDLR, ABCG1 and ABCG5. Conclusion: Although previous research to this work evidenced the ability of the cowpea protein isolate to inhibit HMGCR activity, inhibit micellar solubilization or improve the plasma lipid profile, in the current work this raw material did not show a positive cholesterol metabolism of hamsters under the experimental conditions used. The fragments indicated as peptides obtained from the protein hydrolysis of cowpea beans, or from the plasma of the animals studied did not correspond to peptides with proven, or even, with indication of bioactivity

A interação Pratylenchus brachyurus x caupi (Vigna unguiculata) merece atualmente atenção especial no Brasil, pela escassez de informações contraposta à sua elevada ocorrência na cultura. O objetivo primário deste trabalho foi aprimorar o conhecimento sobre a importância potencial do nematóide na cultura do caupi no Brasil, por meio de experimentos em condições controladas, que demonstraram que P. brachyurus é patogênico para o caupi, por sua capacidade de interferir no crescimento das plantas. Como conseqüência e primeiro passo para o desenvolvimento de técnicas de manejo para P. brachyurus na cultura do caupi, foram conduzidos experimentos com o objetivo de avaliar a resistência de cultivares de caupi ao nematóide. Concluiu-se que o grau de resistência em caupi é baixo, provavelmente em função da grande similaridade genética dos materiais comerciais dessa planta. Portanto, o uso da resistência genética para o manejo de P. brachyurus em caupi dependerá da disponibilidade de cultivares com base genética mais ampla que a atual. Verificou-se ainda a existência de variação interpopulacional em relação à agressividade de P. brachyurus ao caupi, o que motivou a realização de estudos sobre a diversidade morfológica do nematóide. Análises multivariadas (PCA) de seis variáveis morfométricas (L, St, a, b, c e V%), obteve-se a efetiva separação de 11 populações de P. brachyurus em cinco grupos distintos; é possível que essa análise seja útil na identificação de populações do nematóide com diferentes agressividades ao caupi. Em outro estudo, sobre condições de campo, foi demonstrado que sistemas intensivos de cultivos, com dois ou mais ciclos anuais (usualmente na seqüência algodão, milho, soja e caupi), propiciam a manutenção de elevadas densidades de nematóides polífagos, como P. brachyurus em áreas infestadas, e, além disso, forneceu indícios de que M. incognita e P. brachyurus causam perdas de produção ao caupi em áreas irrigadas. / Pratylenchus brachyurus x cowpea (Vigna unguiculata) relationships are worthy of special concern in Brazil, due to scarcity of pertinent information and because the nematode is widespread in local plantations. The primary aim of this research - to improve the knowledge about the potential importance of P. brachyurus on cowpea in Brazil &#150; was achieved though experiments developed under controlled conditions, which demonstrated that P. brachyurus actually is pathogenic and affected significantly the growth of cowpea plant. Furthermore, as a first step to the development of P. brachyurus management strategies in cowpea, greenhouse experiments were carried out in order to evaluate the resistance of cowpea cultivars to the nematode. It was concluded that the level of resistance to P. brachyurus in cowpea is low, probably due to the high genetic similarity among the current commercial cultivars. Thus, the use of genetic resistance for management of P. brachyurus in cowpea will depend on the future availability of cultivars characterized by a broader genetic base. Moreover, inter-population variation on nematode aggressiveness was detected and, accordingly, studies concerning the morphological diversity of the nematode were done subsequently. Multivariate analyses (PCA) of six morphometric variables (L, St, a, b, c, and V%) allowed 11 P. brachyurus populations to be separated for five distinct groups, a condition that can eventually be useful to identify populations with different degrees of aggressiveness to cowpea. In another study, under field conditions, it was demonstrated that intensive cropping systems, with two or more crops per year (usually in the sequence cotton, maize, soybean, cowpea), may be relevant for the maintenance of high population densities of polyphagous nematodes, as P. brachyurus, in the infested areas, and provided support to the idea that P. brachyurus and M. incognita can cause yield losses in irrigated areas.

Introdução: As proteínas alimentares são fontes de peptídeos atuantes em vários processos metabólicos. Existem evidências de que a proteína do feijão caupi (Vigna unguiculata L. Walp) é capaz de reduzir o colesterol em hamsters e em humanos, porém, a permeabilidade após a digestão, o mecanismo de ação e a evidência direta da participação de peptídeos no metabolismo colesterol não são claros. Objetivo: Investigar a permeabilidade intestinal e avaliar o efeito nas vias luminal e endógena do metabolismo do colesterol de peptídeos provenientes de feijão caupi (Vigna unguiculata L. Walp). Metodologia: A permeabilidade dos peptídeos provenientes do caupi produzidos por hidrólise enzimática foi testada em linhagens de células Caco-2 usando placas Transwell®. Para investigar o efeito na via luminal, três peptídeos identificados na fração 3 kDa do hidrolisado (LLNPDDEQL; FFFGQDGGSKGEE e LNL) foram testados na solubilização de colesterol e fosfatidilcolina, no tamanho das micelas de colesterol e interação com ácidos biliares in vitro. Para verificar o efeito no metabolismo endógeno, linhagens de células HepG2 foram incubadas com peptídeos sintéticos (MELNAVSVVHS e MELNAVSVVSH) identificados como resultado do ensaio de permeação nas células Caco-2. A expressão de RNAm dos transportadores de colesterol NPC1L1, ABCA1 e ABCG1 foi realizada nas células Caco-2 e a expressão de HMGCR, SREBP2, LDLR, LXR, AMPK1 foi avaliada nas células HepG2. Resultados: A exposição das células Caco-2 à fração 3 kDa do hidrolisado (2,5 e 5 mg/mL) aumentou a expressão de ABCG1 nos tempos 6 h e 12 h. O níveis de RNAm dos genes SREBP2, HMGCR e LDLR reduziram nas HepG2 após 24h do tratamento com o peptídeo MELNAVSVVHS (50 M e 100 M). A fração 3 kDa do hidrolisado e os peptídeos LLNPDDEQL; FFFGQDGGSKGEE e LNL foram capazes de reduzir a solubilidade do colesterol micelar in vitro em no máximo 42 por cento , bem como, provocaram mudanças estruturais ao interagirem com a fosfatidilcolina, com destaque ao peptídeo LNL (50 por cento de ligação). O peptídeo LNL foi o único capaz de promover a precipitação do colesterol em forma de cristais devido à interação com os ácidos biliares. Conclusões: A fração 3 kDa do hidrolisado e todos os peptídeos testados foram capazes de insolubilizar o colesterol in vitro. Constata-se que o mecanismo de competição pelo espaço intramicelar com o colesterol se dá pela interação com os componentes micelares e não diretamente com o colesterol. O peptídeo do feijão caupi MELNAVSVVHS foi permeável e foi capaz de reduzir a expressão do fator de transcrição SREBP2 (consequentemente reduzindo HMGCR e LDLR) / Introduction: Food proteins are sources of peptides acting in sevral metabolic processes. There is evidence that cowpea (Vigna unguiculata L. Walp) protein is able to lower cholesterol levels in hamsters and humans, but its permeability after digestion, mechanism of action and direct evidences of peptide participation in cholesterol metabolism are not clear. Objective: To investigate the intestinal permeability and to evaluate the effect on the luminal and endogenous cholesterol metabolism pathways of peptides from cowpea (Vigna unguiculata L. Walp). Methods: The permeability of the cowpea peptides produced by enzymatic hydrolysis was tested on Caco-2 cell lines using Transwell® plates. To investigate the effect on the luminal pathway, three peptides identified in the 3 kDa hydrolyzate fraction (LLNPDDEQL; FFFGQDGGSKGEE and LNL) were tested for in vitro cholesterol and phosphatidylcholine solubilization, cholesterol micelle size changing and interaction with bile acids. To verify the effect on endogenous metabolism, HepG2 cell lines were incubated with synthetic peptides (MELNAVSVVHS or MELNAVSVVSH) identified as a result of the permeation assay on Caco-2 cells. The mRNA expression of the cholesterol transporters NPC1L1, ABCA1 and ABCG1 was performed on Caco-2 cells and the expression of HMGCR, SREBP2, LDLR, LXR, AMPK1 was evaluated in HepG2 cells. Results: Exposure of Caco-2 cells to the 3 kDa hydrolyzate fraction (2.5 and 5 mg/mL) increased ABCG1 expression at 6 h and 12 h times. The mRNA levels of the SREBP2, HMGCR and LDLR genes were reduced in HepG2 after 24h of treatment with the MELNAVSVVHS peptide (50 M and 100 M). The 3 kDa of the hydrolyzate fraction and the peptides LLNPDDEQL; FFFGQDGGSKGEE and LNL were able to reduce the solubility of micellar cholesterol in vitro in a maximum of 42 per cent , as well as, caused structural changes when interacting with phosphatidylcholine, with emphasis on the LNL peptide (50 per cent of binding). The LNL peptide alone was able to promote cholesterol precipitation in the form of crystals due to interaction with bile acids. Conclusions: The 3 kDa hydrolysate fraction and all peptides tested were able to insolubilize cholesterol in vitro. It was observed that the mechanism of competition for the intramicellar space with cholesterol is given by the interaction with the micellar components and not directly with the cholesterol. The MELNAVSVVHS cowpea peptide was permeable and was able to reduce the expression of the SREBP2 transcription factor (thereby reducing HMGCR and LDLR)

Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2016-12-22T12:34:03Z No. of bitstreams: 1 Karmile Maria da Silva.pdf: 752860 bytes, checksum: 79554571701439a052d6a07f24499392 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-12-22T12:34:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Karmile Maria da Silva.pdf: 752860 bytes, checksum: 79554571701439a052d6a07f24499392 (MD5) Previous issue date: 2013-02-22 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The seeds of cowpea (Vigna uniguiculata (L.) Walp.) Can be treated with essential oil, in order to reduce the attack of insect pests during storage, but it is important that this treatment does not interfere so harmful physiological quality seed. The aim of this study was to evaluate the feasibility and the degree of infestation of cowpea seeds, cv. IPA 206 treated with essential oil of clove and stored for a period of six months at ambient conditions, both in paper and in PET bottles. We used two methods of applying essential oil, a direct method (immersion) at concentrations of 0, 1, 2, 4 and 8%, and an indirect method (fumigation) in the following doses: 0, 5, 10, 15 and 20μL. We used a completely randomized case (DIC) for each type of packaging two experiments were conducted in factorial 5 x 4 (concentrations or dosages and storage periods) with four replications. The following variables were determined: Seedling emergence, speed of emergence index, mean emergence time, emergence rate coefficient, length of the area and root dry mass of the aerial part and root system of the seedling fresh weight part of the area and the root system and electrical conductivity. This was followed by the analysis of variance, treatment means were compared by Tukey test at 5% probability by the program SISVARUFLA, performed the analysis of simple linear correlation at a significance level of 1% (p <0,01), using the statistical program Soc (NTIA / EMBRAPA, 1989), with the exception of water content and degree of infestation. We conclude that the plastic pet bottle got better efficiency, along with the direct method (immersion) that maintained the physiological quality of seeds treated and controlled better insect pests in storage period of six months, except for the concentration 8%. As for the indirect method the highest doses 15 and 20μL, were the most efficient. / As sementes de feijão caupi (Vigna uniguiculata (L.) Walp.) podem ser tratadas com óleo essencial, com intuito de diminuir o ataque de insetos-praga durante o armazenamento, mas é importante que este tratamento não interfira de modo prejudicial na qualidade fisiológica das sementes. O objetivo desse trabalho foi avaliar a viabilidade e o grau de infestação das sementes de feijão caupi, cv. IPA 206, tratadas com óleo essencial de cravo da índia e armazenadas durante um período de seis meses em condições ambientais, tanto em sacos de papel como em garrafas pet. Foram utilizados dois métodos de aplicação do óleo essencial, um método direto (imersão) nas concentrações de 0; 1; 2; 4 e 8%, e um método indireto (fumigação) nas seguintes dosagens: 0; 5; 10; 15 e 20μL. Utilizou-se o delineamento inteiramente ao caso (DIC), para cada tipo de embalagem foram realizados dois experimentos em esquema fatorial 5 x 4 (concentrações ou dosagens e períodos de armazenamento) com quatro repetições. Foram determinadas as seguintes variáveis: Emergência de plântulas, índice de velocidade de emergência, tempo médio de emergência, coeficiente de velocidade de emergência, comprimento da parte área e do sistema radicular, massa seca da parte área e do sistema radicular da plântula, massa fresca da parte área e do sistema radicular e teste de condutividade elétrica. Posteriormente, foi realizada a análise de variância, as médias dos tratamentos foram comparadas pelo teste de Tukey a 5% de probabilidade pelo programa SISVAR-UFLA, Realizou-se a análise de correlação linear simples, em nível de significância de 1% (p< 0,01), utilizando-se o programa estatístico Soc (NTIA/EMBRAPA, 1989), com exceção do teor de água e grau de infestação. Conclui-se que a embalagem plástica de garrafa pet obteve melhor eficiência, juntamente, com o método direto (imersão) que mantiveram a qualidade fisiológica das sementes tratadas e controlaram melhor os insetos-praga no período de armazenamento de seis meses, com exceção da concentração de 8%. Já para o método indireto as maiores doses 15 e 20μL, foram as mais eficientes.

Submitted by (ana.araujo@ufrpe.br) on 2017-02-07T18:00:48Z No. of bitstreams: 1 Eva Maria Rodrigues Costa.pdf: 711267 bytes, checksum: a86bd11ae168a3d37f4a02c1f445907c (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-07T18:00:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Eva Maria Rodrigues Costa.pdf: 711267 bytes, checksum: a86bd11ae168a3d37f4a02c1f445907c (MD5) Previous issue date: 2010-02-24 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / The genetic divergence assessement provides important information for breeding programs. In the present study, the genetic diversity among lines from Embrapa Mid-North’s Cowpea Germoplasm Active Bank (BAG) was evaluated morphoagronomically 57 cowpea lines. The experiment was carried out in august/2009. Field plots were arranged in a randomized block design with three replicates containing 57 of cowpea lines. The lines The behaviour of accessions was evaluated by univariate and multivariate analyses, with dissimilarities obtained by the generalized distance of Mahalanobis (D2) and the grouping technique by the UPGMA method. The genetic distances between pairs of lines ranged from 1.21 to 221.35. The lines IT89KD-245 indicated as the most divergent should through quantitative characteristics be included as parental in intercross programs. Were formed four groups by UPGMA method. The characteristics which most contributed to genetic divergence were total weight of a hundred grain (49.7 %), length of the pod (16.7 %), length of the grain (12.0 %) and number of grains per pod (9.7 %). The lines were studied to verify the efficiency of dissimilarity measures and to discriminate genotypes, based on 26 multicategoric variables. The lines IT98K-491-4 e IT00K- 898-5; IT99K-494-6 e IT98K-131-2; IT99K-718-6 e IT89KD-245; IT99K-494-6 e IT97K-568-14 e IT98K-128-3 e IT99K-718-6 confirming these genotypes as the most similar among the evaluated for quality characteristics. Based in these characteristics the lines formed eleven groups by Tocher method. Through analyzing morphoagronomical traits were possible identify genetic divergence among lines studies. Were evaluated by SSR marker 32 african lines cowpea using 10 SSR locos that generating 24 polymorphic bands. The data matrix was analyzed by UPGMA (Unweighted Pair Group using mathematical averages) using NTSYs 2.1 program. The accessions were distributed in eight clusters, and the lines IT00K-1217-2 e IT00K-718-6; IT99K-316-2, IT98K-205-8 e IT98K-506-1; IT98K-1111-1, IT00K-491-7, IT93K-625 e IT96D-610; IT97K-568-18 e T89KD-260; IT99K-1060, IT00K-1263-2 e IT00K-1263-1, presented high similarity to each other. The average polymorphism information content (PIC) was 0.2552, in the range of 0.0587 - 0.4188 for VM36 and VM39 locos. The lines IT87D-1627 was confirmed as the most divergent of all, could be use as parental in crosses for purposes. The SSR results of the underscore their potential in elucidating patterns of germplasm diversity of cowpea from Embrapa Mid- North’s BAG. / A avaliação da divergência genética fornece informações importantes aos programas de melhoramento. Com o objetivo de caracterizar a diversidade genética entre linhagens de feijão-caupi do Banco Ativo de Germoplasma (BAG), da Embrapa Meio-Norte, foram caracterizados morfoagronomicamente 57 linhagens. O plantio foi realizado em agosto de 2009. O experimento foi em blocos ao acaso, com três repetições, contendo 57 linhagens. As linhagens foram avaliadas por meio de análise univariada e multivariada, com dissimilaridade obtida por meio da distância de Mahalanobis (D2), e utilizando o método de agrupamento UPGMA. As distâncias entre os pares formados pelas linhagens, oscilou entre 1,21 a 221,35. A linhagem IT89KD-245 foi considerada a mais divergente entre os genótipos estudados por meio das características quantitativas, podendo ser indicado como parental em programas que envolvem cruzamentos. Foram formados quatro grupos pelo método UPGMA. As características que mais contribuíram para a divergência foram: peso de cem grãos (49,7 %), comprimento da vagem (16,7 %), comprimento do grão (12,0 %) e número de grãos por vagem (9,7 %). As linhagens foram avaliadas através das medidas de dissimilaridade com base em 26 variáveis multicategóricas. As linhagens IT98K-491-4 e IT00K-898-5; IT99K-494-6 e IT98K-131-2; IT99K-718-6 e IT89KD-245; IT99K-494-6 e IT97K-568-14 e IT98K-128-3 e IT99K-718-6 foram as mais similares através dos caracteres qualitativos. Baseado nestas características foram formados onze grupos entre as linhagens estudadas pelo método de Tocher. Através da caracterização morfoagronômica foi possível quantificar a divergência genética presente nas linhagens estudadas. Foram caracterizadas por meio de marcadores SSR 32 linhagens africanas de feijão-caupi, que geraram 24 bandas polimórficas, a partir de 10 locos de microssatélites. Os resultados obtidos foram analisados pelo método UPGMA (Unweighted Pair Group Method with Arithmatic Mean) com o auxílio do programa NTSYs versão 2.1. O dendrograma gerado apresentou oito grupos de linhagens. As linhagens IT00K-1217-2 e IT00K-718-6; IT99K-316-2, IT98K-205-8 e IT98K-506-1; IT98K-1111-1, IT00K-491-7, IT93K-625 e IT96D-610; IT97K-568-18 e T89KD-260; IT99K-1060, IT00K-1263-2 e IT00K-1263-1 apresentaram alta similaridade entre si. O conteúdo de informação polimórfica (PIC) médio para os dez marcadores microssatélites foi de 0,2552, com valores variando entre 0,0587 para o loco VM36 e 0,4188 para o loco VM39. A linhagem IT87D-1627 foi considerada a mais divergente, devendo assim, ser indicada para programas de hibridação para a obtenção de populações segregantes e, possivelmente, de genótipos superiores. Os resultados dos marcadores SSR, confirmam o seu potencial na caracterização da diversidade genética em germoplasma de feijão caupi.

Submitted by (ana.araujo@ufrpe.br) on 2017-02-16T16:59:31Z No. of bitstreams: 1 Iradenia da Silva Sousa.pdf: 500772 bytes, checksum: 8fe476304d2b3fb43577f5ce58d236e7 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-16T16:59:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Iradenia da Silva Sousa.pdf: 500772 bytes, checksum: 8fe476304d2b3fb43577f5ce58d236e7 (MD5) Previous issue date: 2008-04-04 / The cowpea is a main source of vegetable protein for the people of lower purchasing power of Asia, Africa, Europe and North America, Central and South. In the North and Northeast of Brazil, represent one the most important leguminous food of the diet. Most of the genotypes grown in the world have simple inflorescence. However, cultivars with composite inflorescence were find in cowpea. The aim this work was to study the inherintance of the characters related to production and to inflorescence in crosses between genotypes with simple inflorescence and composite inflorescence. The work was realized at Embrapa Meio-Norte, in Teresina, PI, in the years from 2006 to 2007. It was been made crosses between TVx 5058-09C (P2) x Cacheadoroxo (P1) and Cacheado-roxo (P1) x AU94-MOB-816 (P3). The genitor Cacheadoroxo with composite inflorescence and the other two genitors presenting simple inflorescence. The parents, the generations F1's, F2's and the backcrosses were evaluated in complete randomized blocks design with six repetitions. The parents and F1's consisted of a plot per block, the F2 generations and the backcrosses consisted of five and two rows per block, respectively. The plots were represented per one row with 7,0 m of length, the spacing between rows was 1,0 m and between hole in rows of 0,70 m. The genetic studies were realized with based on the means and variances, with help of the Program Genes. The comparison of means between the populations with simple inflorescence and with composite inflorescence was made using the “t” test with the degrees of freedom obtained by the approach of Satterthwaite. The complete model was enough to explain the observed variation in the characters related to production and peduncle. The additive effect was the more important in the genetic control for most of the characters, suggests are useful in the selection for increased of the production. The heritabilities were low and average magnitudes, recommending that the selection is made in generations more advanced. Statisticaly were differences significant between the mean of the population with simple inflorescence and the averages of populations with composite inflorescence for the characters under study. / O feijão-caupi é uma das principais fontes de proteína vegetal, para as populações de menor poder aquisitivo da Ásia, África, Europa e Américas do Norte, Central e do Sul. Nas regiões Norte e Nordeste do Brasil, representa uma das leguminosas mais importantes da dieta alimentar. A maioria dos genótipos cultivados em todo o mundo possui inflorescência simples. Contudo, foram encontradas cultivares com inflorescência composta. O objetivo deste trabalho foi estudar a herança dos caracteres relacionados à produção e à inflorescência em cruzamentos entre genótipos com inflorescência simples e inflorescência composta. O trabalho foi realizado na Embrapa Meio-Norte, em Teresina, PI, nos anos de 2006 a 2007. Foram feitos dois cruzamentos entre TVx 5058-09C (P2) x Cacheado-roxo (P1) e Cacheado-roxo (P1) x AU94-MOB-816 (P3). O genitor Cacheado-roxo com inflorescência composta e os outros dois genitores apresentam inflorescência simples. Os genitores, as gerações F1’s, F2’s e os respectivos retrocruzamentos foram avaliados quanto aos caracteres relacionados à produção e à inflorescência em um experimento em blocos casualizados com seis repetições. Os genitores e as F1’s constaram de uma parcela por bloco; as gerações F2’s e os retrocruzamentos constaram de cinco e duas fileiras por bloco,respectivamente. As parcelas foram representadas por uma fileira com 7,0 m de comprimento, o espaçamento entre fileiras foi de 1,0 m e entre covas dentro da fileira de 0,70 m. Os estudos genéticos foram realizados com base nas médias e variâncias com auxilio do Programa Genes. A comparação de médias entre as populações com inflorescência simples e composta foi feito utilizando-se o teste ‘’t’’ com o grau de liberdade obtido pela aproximação de Satterthwaite. O modelo completo foi suficiente para explicar a variação observada nos caracteres relacionados à produção e ao pedúnculo. O efeito aditivo foi o mais importante no controle genético para a maioria dos caracteres, sendo úteis na seleção para aumento da produção. As herdabilidades foram de baixa e média magnitudes, recomendando-se que a seleção seja feita em gerações mais avançadas. Estatisticamente, houve diferenças significativas entre as médias das populações com inflorescência simples e as das populações com inflorescência composta para os caracteres em estudo.

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / FundaÃÃo de Amparo à Pesquisa do Estado do Cearà / Water stress, induced by drought or salinity, is the major environmental restriction to plant survive and crop sustainability, specially in semi-arid areas, where they are often associated to high temperatures and high radiation rates. Part of the effects exerted by these abiotic stresses on plant metabolism is mediated by oxidative damage due to an increased production of active oxygen species (AOS). The present study aims to elucidate the interactions and the importance of the catalase (CAT) and ascorbate peroxidase (APX) enzymatic antioxidants systems in the protection of cowpea leaf tissues [Vigna unguiculata (L.) Walp.] against the oxidative damage induced by water deficit and salinity. The experimental approach adopted, involved 3 different experiments, using PEG-induced water stress or NaCl-induced salt stress, combined to the CAT inhibitor 3-Amino-1,2,4-trizole (3-AT) application. These experiments were conduced under two environmental conditions: in a growth chamber, under controlled conditions, and in a greenhouse, under the typical semiarid conditions of the Brazilian Northeast. PEG and NaCl treatments were applied to the nutritive solution for 72 h, while the 3-AT was daily sprayed in the shoot. The osmotic stress induced by PEG or NaCl caused acute declines in the transpiration rates, due to increase in stomatal resistance, as well as an intense growth reduction, in the plants cultivated in the greenhouse conditions. The osmotic stressed plants presented significant increases on lipid peroxidation and on the ascorbate content, in addition to a CAT activity reduction. The osmotic stress and 3-AT combination raised the APX activity levels that counteracted, at least in part, the CAT absence. The fall in the CAT activity was related to a strong mRNA expression restraint, followed by an up-regulation of the cytosolic APX mRNA. These results indicate the presence of a controlled synchrony between the expression and enzymatic activity of these antioxidant systems, in the regulation and detoxification of the AOS produced in plant cells, during environmental stresses situations. / O estresse hÃdrico induzido por seca ou salinidade à a principal restriÃÃo ambiental à sobrevivÃncia das plantas e sustentabilidade das culturas, principalmente nas regiÃes semiÃridas, onde estÃo frequentemente associados a altas temperaturas e taxas de luminosidade. Uma grande parte dos efeitos destes estresses ambientais no metabolismo das plantas à mediada por danos oxidativos devido ao aumento na produÃÃo de espÃcies ativas de oxigÃnio (AOS). O presente estudo se propÃs a estudar a interaÃÃo e a importÃncia dos sistemas antioxidantes enzimÃticos da catalase (CAT) e da peroxidase de ascorbato (APX) na proteÃÃo dos tecidos foliares de feijÃo caupi [Vigna unguiculata (L.) Walp.] contra os danos oxidativos induzidos por condiÃÃes de deficiÃncia hÃdrica e salinidade. Para isso, foi utilizada uma abordagem experimental envolvendo 3 experimentos, utilizando combinaÃÃes de estresse hÃdrico, induzido por polietilenoglicol (PEG), ou salino, induzido por NaCl, com a pulverizaÃÃo do inibidor de catalases 3-Amino-1,2,4-Triazol (3-AT). Estes experimentos foram, ainda, realizados em duas condiÃÃes ambientais: uma em cÃmara de crescimento sob condiÃÃes controladas e em casa de vegetaÃÃo, sob condiÃÃes tÃpicas do semi-Ãrido. O PEG e o NaCl foram aplicados na soluÃÃo nutritiva durante 72 h, e o 3-AT pulverizado diariamente na parte aÃrea. O estresse osmÃtico causado pela aplicaÃÃo de PEG ou de NaCl induziu uma forte reduÃÃo na transpiraÃÃo, associada a uma maior resistÃncia estomÃtica, e uma acentuada reduÃÃo no crescimento nas plantas submetidas as condiÃÃes de casa de vegetaÃÃo. Houve um considerÃvel aumento na peroxidaÃÃo de lipÃdeos e do conteÃdo do antioxidante ascorbato das plantas tratadas, bem como uma diminuiÃÃo da atividade de CAT. As plantas submetidas a uma combinaÃÃo de estresse osmÃtico e a aplicaÃÃo do 3-AT apresentaram um acentuado aumento da atividade da enzima APX, compensando, em parte a ausÃncia da atividade da enzima CAT. Esta diminuiÃÃo da atividade enzimÃtica de CAT foi acompanhada por uma forte repressÃo dos mRNAs para esta enzima, enquanto que houve uma induÃÃo dos mRNAs da APX citossÃlica. Estes resultados indicam que hà uma controlada sincronia entre a expressÃo e a atividade enzimÃtica destes dois sistemas, na regulaÃÃo e desintoxicaÃÃo das AOS produzidas na cÃlula vegetal, durante situaÃÃes de estresse ambiental.

A absorÃÃo lÃquida de nitrato à um processo dependente da relaÃÃo influxo/efluxo na membrana plasmÃtica das raÃzes. O balanÃo entre esses dois processos pode afetar a aquisiÃÃo de nitrato em plantas expostas ao estresse salino. Infelizmente, ainda nÃo se conhece os mecanismos de inibiÃÃo da absorÃÃo de nitrato na presenÃa de excesso de Ãons Na+ e Cl-, situaÃÃo comum nos solos salinos sÃdicos. O objetivo do estudo foi avaliar o efeito da salinidade sobre os mecanismos de influxo e efluxo de NO3- em raÃzes de feijÃo caupi, caracterizando-se a cinÃtica da absorÃÃo na presenÃa de agentes iÃnicos e osmÃticos. RaÃzes de feijÃo caupi foram destacadas e incubadas para as mensuraÃÃes de influxo e efluxo de NO3- em experimentos de tempo e nÃveis de nitrato variados. O prÃ-tratamento das plantas com 50 e 100 mM de NaCl alterou a cinÃtica de influxo e efluxo de nitrato, comparando-se com raÃzes de plantas nÃo prÃ-tratadas: induzindo efeitos mais pronunciados sobre ambos processos, inibindo o influxo e estimulando o efluxo. O efeito inibitÃrio do NaCl sobre o influxo de nitrato foi dependente da dose do sal. O NaCl 100 mM reduziu o valor de Vmax de 12,35 (controle) para 7,14 e manteve o valor de Km praticamente inalterado (3,05 e 3,21, respectivamente), evidenciando uma inibiÃÃo do tipo nÃo competitiva. Interessantemente, o Na2SO4 100 mM causou o mesmo tipo de inibiÃÃo do NaCl mas o KCl 100 mM causou uma inibiÃÃo incompetitiva, reduzindo simultaneamente Vmax e Km. No sentido de verificar os efeitos da componente osmÃtica da salinidade, observou-se que PEG e Manitol causaram inibiÃÃo do tipo aproximadamente competitiva, aumentando o Km (de 3,01 do controle para 6,21 e 7,35 para PEG e Manitol, respectivamente), e mantendo Vmax ligeiramente abaixo do controle. O efeito inibitÃrio do NaCl foi mais intenso sobre o sistema de baixa afinidade de absorÃÃo de nitrato (60%) do que sobre o de alta afinidade (45%). Os efeitos do NaCl e Manitol sobre o sistema de alta afinidade, ambos em 100 mM, foram semelhantes entre si no tocante ao tipo de inibiÃÃo: ambos reduziram Vmax e aumentaram os valores de Km. Quando concentraÃÃes isosmÃticas de NaCl, PEG e manitol (&#936;os= - 0,23 MPa) foram testadas, verificou-se que os dois primeiros induziram aumentos no efluxo (15 e 34%, respectivamente), enquanto que, inesperadamente, o manitol causou uma reduÃÃo de 40%, todos comparados ao controle. Concluindo, a salinidade causa reduÃÃo na absorÃÃo lÃquida de NO3- em raÃzes de feijÃo caupi atravÃs de reduÃÃo no influxo e aumento no efluxo. No influxo, ocorre uma inibiÃÃo nÃo-competitiva com o Cl-, tanto no sistema de baixa como no de alta afinidade. Aparentemente, o componente osmÃtico à mais importante na inibiÃÃo da absorÃÃo de nitrato, mas aparentemente o tipo de sal (Ãons) tambÃm interfere no processo. Entretanto, mais estudos sÃo necessÃrios para esclarecer completamente os mecanismos envolvidos na inibiÃÃo. / Nitrate uptake is a process dependent on the influx/ efflux relationship in the plasma membrane of roots cells. The balance between these two processes may affect the NO3- acquisition in plants exposed to salt stress. Unfortunately, we do not know the mechanisms of inhibition of NO3- uptake in the presence of excess Na + and Cl- ions, a common situation in saline-sodium soil. The objective was to evaluate the effect of salinity on the NO3- influx and efflux mechanisms in cowpea roots, building the uptake kinetics in the presence of ion and osmotic agents. Cowpea roots were excised for nitrate influx and efflux measurements in time-course and NO3- levels experiments. In plants pre-treated with 50 and 100 mM NaCl, NO3- influx and eflux kinetics has been altered, compared with plants not pre-treated roots: inducing pronounced effects on both processes, inhibiting the influx and stimulating the efflux. The NaCl inhibitory effect on the NO3- influx was dependent on the dose of salt. The 100 mM NaCl reduced the value of Vmax (control) of 12.35 to 7.14 and the Km value remained unchanged (3.05 and 3.21, respectively), showing a non-competitive inhibition. Interestingly, the Na2SO4 100 mM caused the same inhibition of NaCl, but 100 mM KCl caused an incompetitive inhibition, reducing Vmax and Km. In order to check the osmotic effects components by salinity, it was observed that PEG and Mannitol caused a competitive inhibition, increasing the Km (from 3.01(control) to 6.21 7.35 for PEG and Mannitol, respectively) and maintaining Vmax below the control. The NaCl inhibitory effect was more intense on NO3- uptake low affinity system (60%) than on the high-affinity system (45%). The NaCl and mannitol effects on the high affinity system, both in 100 mM, were similar to each other inhibition type: Vmax reduced both and increased the Km. When NaCl, PEG and mannitol isosmotic concentrations were tested (&#936;os= - 0.23 MPa), it was found that the first two induced efflux increases (15 and 34% respectively), whereas, unexpectedly, Mannitol caused a reduction of 40%, all compared to control. In conclusion, the salinity caused reduction in net NO3- uptake in cowpea roots through reduction in the influx and efflux increases. In the influx, there is a non competitive inhibition with the Cl-in both low and high affinity systems. Apparently, the osmotic component is more important inhibiting the NO3- uptake, but apparently, the salt type (ions) also interferes in the process. Meanwhile, more studies are needed to shed light on the mechanisms involved in inhibition

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / EmbriogÃnese SomÃtica à o processo pelo qual, tecidos somÃticos vegetais dÃo origem a embriÃes de plantas sob condiÃÃes indutivas. A embriogÃnese somÃtica à atualmente a ferramenta mais empregada para a propagaÃÃo de plantas em escala comercial. Recentemente foram identificados alguns genes envolvidos no processo. Alguns desses genes estÃo envolvidos com a manutenÃÃo do meristema, outros estÃo envolvidos com a formaÃÃo de padrÃo. Existem genes que quando expressos ectopicamente podem induzir a formaÃÃo de embriÃes somÃticos. Existem poucos trabalhos na literatura sobre a embriogÃnese somÃtica em feijÃo-de-corda. AlÃm disso, esses trabalhos apresentam uma freqÃÃncia de regeneraÃÃo pequena e um complicado sistema de regeneraÃÃo que envolve muitas etapas. O objetivo deste trabalho foi isolar linhagens de calos embriogÃnicos de feijÃo-de-corda e estabelecer as condiÃÃes de cultivo ideais para estes calos. AnÃlises histolÃgicas foram utilizadas para a caracterizaÃÃo anatÃmica das linhagens de calos isolados. Das 4 linhagens de calos isolados trÃs apresentam cÃlulas com caracterÃsticas de cÃlulas embriogÃnicas, sendo que apenas a linhagem 2 deu origem a estruturas embriogÃnicas em suspensÃo celular. Essas linhagens de calos foram subcultivadas por mais de um ano sem perder as suas caracterÃsticas. Os experimentos de crescimento das suspensÃes celulares mostraram que as suspensÃes devem ser subcultivados em perÃodos de 5 dias. Os prÃximos trabalhos que envolvam a regeneraÃÃo em feijÃo-de-corda devem trabalhar com essa linhagem de calo facilmente isolÃvel e altamente estÃvel em cultura. / Somatic embryogenesis is the process by which somatic plant tissues gives rise to plant embryos under inductors conditions. Somatic embryogenesis represents the most commonly employed tool in commercial propagation of plants. In recent times, genes involved in the process have been identified, partucularly those involved in the maintenance of meristems and pattern formation. There are genes which, when ectopically expressed, can induce the formation of somatic embryos. In cowpea, there are few reports on somatic embryogenesis. In addition, the reports on the process recorded a very low frequency and a complicated system of regeneration involving several steps. This work attempted to isolate callus lines of cowpea and establish an ideal culture condition necessary for their maintenance. Histological analysis was conducted to characterize the isolated lines of callus anatomically. From the four lines obtained, 3 presented cells exhibiting the charactersitc embryogenic potential and of this, Line 2 actually gave rise to embryogenic structures when cultured in liquid media. The lines of callus were maintained in cultured condition for over a year without loss of their characteristics. Experiments that monitored the growth of cell suspension from the callus revealed that five days is the best period for subculture of the cells. Regeneration experiments in cowpea will find the different callus lines isolated in this work useful in the attempt to optimize the different strategies of regeneration of the crop in vitro.