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Avaliação do perfil imunológico e de resistência/susceptibilidade ao óxido nítrico em portadores de leishmaniose cutânea na Terra Indígena Xakriabá, Minas Gerais, Brasil

Gontijo, Raquel Carvalho January 2013 (has links)
Submitted by Nuzia Santos (nuzia@cpqrr.fiocruz.br) on 2013-06-14T12:31:47Z No. of bitstreams: 1 Dissertação Raquel Gontijo.pdf: 2958488 bytes, checksum: 8dbc875d07ab2eefcee30117ac6d2fbf (MD5) / Made available in DSpace on 2013-06-14T12:31:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação Raquel Gontijo.pdf: 2958488 bytes, checksum: 8dbc875d07ab2eefcee30117ac6d2fbf (MD5) Previous issue date: 2013 / Infecções causadas por Leishmania (Viannia) braziliensisapresentam manifestações clínicas diversas e a leishmaniose cutânea localizada (LCL) é a forma clínica mais comum. Na Terra Indígena Xakriabá, localizada no norte de Minas Gerais, 212 casos autóctones de LCL foram registrados no período de 2001 a 2007. O grande número de casos e as particularidades da área reforçam o interesse de investigar aspectos da resposta imune do hospedeiro em relação à infecção.O óxido nítrico (NO) é um potente agente citotóxico presente na resposta imune anti-Leishmania. Na LCL, um dos mecanismos de produção de NO envolve a ligação de IgE ao receptor CD23 de macrófagos num microambiente de citocinas IFN-γou IL-4. Apesar do papel crucial do NO no curso da infecção, tem sido relatada a existência de isolados de L. (V.) braziliensis resistentes à ação dessa molécula. Assim, os objetivos do presente trabalho foram avaliar por citometria de fluxo, o perfil de expressão do marcador de ativação CD23 e de produção de NO intracelular por monócitose o perfil de expressão das citocinas IFN-γe IL-4 por linfócitos T do sangue periférico de indivíduos não infectados (NI, n=10), Teste de Montenegro positivosem lesão (TM +, n=13) e portadores de leishmaniose cutânea localizada (LCL,n=17), considerando o tempo de evolução da lesão (LCL<60 dias, n=7; LCL>60 dias, n=10). Foi feita também a dosagem dos níveis séricos de IgE dos indivíduos participantes. Além disso, investigou-se a possível presença de L. (V.) braziliensis resistentes/susceptíveis ao NO em isolados de pacientes responsivos (C, n=5) e refratários ao tratamento (FT, n=5) com Glucantime®. Para o estudo imunológico foram realizadas culturas de leucócitos do sangue periférico na ausência (CC) ou presença de formas promastigotas vivas de L. (V.) braziliensis (LEISH) ou na presença de antígeno solúvel de L. (V.) braziliensis. A dosagem dos níveis séricos de IgE foi feita utilizando-se kit específico baseado na técnica ELISA sanduíche. Para identificação do perfil de resistência dos isolados foram feitos ensaios de viabilidade utilizando-se a técnica do MTT. Os resultados obtidos com o estudo imunológico mostram que o grupo LCL apresentou maior expressão de CD23 e maior produção de NO por monócitos em relação aosgrupos TM + e NI, além de menor expressão de IFN-γe IL-4 por linfócitos T CD4+ em relação ao grupo TM +. Por outro lado, o grupo TM + apresentou aumento relevante no percentual de altoprodutores das citocinas avaliadas, NO e CD23 quando comparadoao grupo NI. Ao dividirmos o grupo LCL por tempo de lesão, observamos no grupo LCL<60 grande frequência de alto produtores de IL-4, NO e CD23, indicando um perfil misto de ativação/modulação da imunidade inata. Os níveis séricos de IgE total foram menores no grupo LCL quando comparado aos grupos NI e TM + , havendo redução do grupo TM + em relação ao grupo NI. Além disso, dos 10 isolados testados, 8 foram resistentes à ação do NO, sendo que, os 2 sensíveis foram provenientes de indivíduos responsivos ao tratamento com Glucantime®. Diante disso, foi possível inferir queo utras fontes celulares, além dos linfócitos T, podem estar envolvidas na produção de citocinas no grupo LCL e que no grupo TM + há forte indício da participação do mecanismo de ativação de monócitos e indução de NO investigado neste estudo, favorecendoo controle da infecção, impedindo assim, o aparecimento de lesões. Além disso, a existência de isolados de L. (V.) braziliensis resistentes à ação do NO corrobora com achados de outros autores e pode estar diretamente relacionada com a resistência à ação do Glucantime®. / Infections caused by Leishmania (Viannia) braziliensis presents many clinical manifestations and localized cutaneous leishmaniasis (LCL) is the most common clinical form. At the Xakriabá Indigenous Land, located in the northern Minas Gerais, 212 autochtone cases of LCL was reported during theperiod of 2001 to 2007. The elevated number of cases and particularities of thearea reinforces the interest to investigate aspects of the host immune response in relation with infection. Nitric oxide (NO) it’s a potent cytotoxical agent present in theanti-Leishmania immune response. In LCL, one of many mechanisms of NO production involves the IgE bind to the macrophages CD23 receptor in a cytokines IFN-γor IL-4 microenvironment. Despite the crucial role of NO in the infection course, hasbeen related the existence of Leishmania (Viannia) braziliensis isolates resistant to NO action. Thus, the aims of this study was evaluate, by flow cytometry, the expression profile of CD23 activation marker and NO production by monocytes, and the expression profile of cytokines IFN-γ and IL-4 by T lymphocytes subpopulations of peripheral blood of noninfected individuals (NI, n=10), Positive Montenegro Skin Test without lesion (TM+, n=13) and patients with Localized Cutaneous Leishmaniasis (LCL, n=17), considering the evolution time of the lesion (LCL<60 days, n=7; LCL>60 days, n=10). Was made too, the seric IgE levels dosage in the participants. Besides this, was investigated the possible presence of the resistant/susceptible L. (V.) braziliensis isolates from responsive (C, n=5) and refractory (FT, n=5) patients to treatment with Glucantime®. For the immunological study, was realized leucocytes cultures of peripheral blood in the absence (CC) or presence of live L. (V.) braziliensis promastigotes/L. (V.) braziliensis soluble antigen (LEISH). The dosage of seric IgE levels was made using a specific kit based on sandwich ELISA technique. For the resistant/susceptible profile investigation, viability assays was made using the MTT technique. The obtained results with immunological study show that the LCL group present higher CD23 expression and higher NO production by monocytes in relation with TM + e NI groups, besides lower expression of IFN-γe IL-4 by CD4+ T lymphocytes when compared to TM + group. On the other side, TM + group presents relevant increase in the percentage of higher producers of evaluated cytokines, NO and CD23 when compared with NI group. Dividing LCL group for lesion evolution time, was observed in LCL<60 increase frequency of higher producers of IL-4, NO and CD23,indicating a mixed profile of activation/modulation of the innate immunity. The total IgE seric levels was lower in the LCL group when compared to the NI and TM + groups, with a reduction of TM + in relation with NI group. Besides this, of 10 isolates tested, 8 was resistant to NO action and the 2 sensible was obtained from individuals that was responsible to the treatment with Glucantime®. In front this, was possible to infer that other cellular sources, besides T lymphocytes, could be involved in the cytokine production in LCL group and in the TM + group there is a strong possibility for the participation of monocytes activation and induction mechanism and NO induction investigated in this study, favoring the infection control, preventing the occurrence of skin lesions.Besides this, the existence of NO resistant L. (V.) braziliensis isolates, corroborates with other authors findings and could be directly related with Glucantime® treatment resistance.
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Efeito da via de sinalização slam sobre células T na resposta in vitro à leishmania braziliensis / Effect of signaling pathway in T cells slam on in vitro response to Leishmania braziliensis

Coelho, Zirlane Castelo Branco January 2011 (has links)
COELHO, Zirlane Castelo Branco Coelho. Efeito da via de sinalização slam sobre células T na resposta in vitro à leishmania braziliensis. 2011. 139 f. Tese (Doutorado) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina. Programa de Pós-Graduação em Ciências Médicas, Fortaleza, 2011. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2011-10-06T16:31:31Z No. of bitstreams: 1 2011_tese_coelho.pdf: 25504477 bytes, checksum: a82cdf50308ae9157f67686e4e70241e (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2011-10-07T16:41:43Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_tese_coelho.pdf: 25504477 bytes, checksum: a82cdf50308ae9157f67686e4e70241e (MD5) / Made available in DSpace on 2011-10-07T16:41:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_tese_coelho.pdf: 25504477 bytes, checksum: a82cdf50308ae9157f67686e4e70241e (MD5) Previous issue date: 2011 / Immune cells activation is modulated by balancing the signals triggered by a variety of cell surface receptors, including receptor activators, co-stimulating receptors and inhibitory receptors. Receptor-related signaling molecule in lymphocyte activation (SLAM) influences the immune cell activation. In this study we investigated the role of SLAM in immune response of cutaneous leishmaniasis caused by L. braziliensis, as well as if the response of individuals high (HP) or low (LP) IFN-γ producers is modulated by SLAM signaling pathway. Peripheral blood monocuclear cells (PBMC) isolated from 43 health individuals were cultured in vitro with anti-SLAM, rIFN-γ, rIL-12 and phytohemagglutinin in the presence or in the absence of L. braziliensis. It was found that L. braziliensis promoted a significantly reduced SLAM expression in T cells, after 120 h of cultured, possibly indicating activation of this pathway in the initial immune response. SLAM expression behaved differently in HP and LP groups. In LP group, L. braziliensis did not modify SLAM expression in T cells in early immune response. The effect of anti-SLAM on SLAM pathway reduced the expression of this protein in the early stages of the immune response of PBMC stimulated with L. braziliensis. After 120 h the effect of anti-SLAM did not alter CD3+SLAM+ expression in both groups. The proinflammatory cytokines, rIFN-γ and rIL-12, present in the microenvironment with L. braziliensis, reduced SLAM expression only in HP group after 6 h of culture and did not change this response after 120 h. Anti-SLAM at a concentration of 10 μg/ml presented no effect on production of cytokines IFN-γ and IL-13 in both groups, but significantly increased IL-10 production in the HP group. Furthermore anti-SLAM associated with L. braziliensis and rIFN-γ simultaneously did not modify IFN-γ, IL-13 and IL-10 productions. Anti-SLAM associated with L. braziliensis and rIL-12 simultaneously induced an increase of IFN-γ in LP group, and increased IL-13 in HP group. These results suggest that in vitro immune response of PBMC exposed to L. braziliensis, the SLAM signaling pathway acts in modulating Th1 response in HP group and induces a condition of temporary immunosuppression in LP group, not previously described in literature. / A ativação das células do sistema imunológico é modulada através dos sinais acionados por uma diversidade de receptores de superfície celular, incluindo os receptores ativadores, receptores coestimuladores e receptores inibidores. Receptores relacionados à molécula sinalizadora na ativação do linfócito (SLAM) têm influência na ativação imunológica celular. Neste trabalho, investigou-se a função de SLAM na resposta imunológica à Leishmania braziliensis, e se a resposta de indivíduos alto (AP) ou baixo (BP) produtores de IFN-γ seria modulada pela via de sinalização SLAM. Células monocucleadas do sangue periférico (CMSP) de 43 indivíduos foram bloqueadas com α-SLAM, rIFN-γ, rIL-12 e fitohemaglutinina, após estimulação com L. brazilensis. Verificou-se que L. braziliensis promoveu uma significante redução da expressão de SLAM nas células T, com 120h de cultivo, possivelmente indicando ativação desta via na resposta imunológica inicial. A expressão de SLAM se comportou de modo diferenciado nos indivíduos AP e BP. Nos indivíduos BP, L. braziliensis não alterou a expressão de SLAM nas células T, na fase inicial da resposta imunológica. O bloqueio da via de SLAM com α-SLAM reduziu significativamente a expressão desta proteína nos primeiros momentos da resposta imunológica das CMSP estimuladas com L. braziliensis. O bloqueio com α-SLAM, avaliado com 120 horas, não alterou a expressão de CD3+SLAM+, em ambos os grupos. As citocinas proinflamatórias, rIFN-γ e rIL-12, presentes no microambiente com L. braziliensis, reduziram a expressão de SLAM apenas em indivíduos AP com 6h de sensibilização e não modificaram esta resposta com 120h de cultivo, na presença do antígeno. O bloqueio com α-SLAM, na concentração de 10μg/ml, não interferiu na produção das citocinas IFN-γ e IL-13, em ambos os grupos, entretanto aumentou de forma significativa a produção de IL-10 em indivíduos AP. O bloqueio da via de SLAM associado à L. braziliensis e rIFN-γ não modificou a produção de IFN-γ, IL-13 e IL-10. O bloqueio da via de SLAM associado à L. braziliensis e rIL-12 induziu aumento de IFN-γ, nos indivíduos BP, e aumento de IL-13, nos indivíduos AP. Os resultados deste trabalho sugerem que, na resposta in vitro de CMSP, sensibilizadas com L. braziliensis, a via de sinalização SLAM atua na modulação da resposta Th1 em indivíduos AP e induz uma condição de imunossupressão temporária nos indivíduos BP, não descrita anteriormente na literatura.
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Condições particulares de transmissão da leishmaniose tegumentar americana em localidades do Campus FIOCRUZ da Mata Atlântica - Jacarepaguá, Rio de Janeiro, RJ / Particular conditions of transmission of american tegumentary leishmaniasis in localities of Campus FIOCRUZ of Mata Atlântica - Jacarepaguá, Rio de Janeiro, RJ

Gouveia, Cheryl January 2008 (has links)
Made available in DSpace on 2012-09-06T01:12:02Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) 1018.pdf: 10545395 bytes, checksum: 93a3342fac468270eb7975afeabf4d01 (MD5) Previous issue date: 2008 / A leishmaniose tegumentar americana (LTA) pode ser caracterizada como uma doença focal, onde as características de instalação e manutenção de seu ciclo de transmissão são específicas a um determinado local de ocorrência. Tendo em vista que as localidades apresentam uma historicidade única, com momentos singulares nos quais a transmissãoda doença pode ou não ser viabilizada, o entendimento da dinâmica de produção da doença em nível local é cada vez mais discutido. O presente estudo busca conhecer os determinantes sócio-ambientais e biológicos relacionados com a transmissão da LTA nas localidades do Campus FIOCRUZ da Mata Atlântica (Jacarepaguá, Rio deJaneiro/RJ). Para isso, foram utilizadas técnicas quantitativas e qualitativas no sentido de agregar informações produzidas sob diferentes perspectivas. Assim, a distribuição da LTA foi descrita tendo como base os dados de notificação fornecidos pela SMS-RJ. A partir de dados secundários de pesquisas anteriores, de entrevistas com informantes chave e da observação sistemática da área foram investigadas as características particulares das localidades que poderiam estar associadas à ocorrência e manutençãodo ciclo de transmissão. Também foi realizada investigação entomológica mensal com armadilha HP, durante um ano, em três estações de monitoramento na localidade com maior número de notificações, Caminho da Cachoeira (sítios de coleta instalados nointradomicílio, peridomicílio e no limite da mata). Nas localidades do campus, a LTA ocorre em indivíduos de diversas idades sem distinção de gênero e ocupação. As informações qualitativas permitiram uma descrição histórica das características de cada localidade, identificando diferentes condições de receptividade para a doença. / A presença de Lutzomyia (N.) intermedia e L. migonei, vetores de Leishmania (V.) braziliensis, em abundância no intra e peridomicílio, bem como características essenciais aos criadouros e abrigos, favorecem a ocorrência do ciclo de transmissão na área. Verificou-se que, apesar da grande proximidade geográfica e de históricos de ocupação parecidos, a LTA ocorre de modo heterogêneo nas localidades, estando, provavelmente, influenciada pelo modo de vida dos grupos populares, que gera diferentes condições de receptividade à LTA. Nesse tipo de cenário torna-se fundamental uma proposta de manejo ambiental e de mobilização comunitária, que viseintegrar técnicos e moradores na formulação de estratégias que interfiram na exposição do homem ao vetor sem comprometer o modo de vida característico de cada localidade.
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Fatores envolvidos na cronicidade das lesões cutâneas e na progressão da forma cutânea para a forma mucosa tardia da leishmaniose tegumentar americana

Mira, Ana Cláudia Maretti January 2011 (has links)
Submitted by Anderson Silva (avargas@icict.fiocruz.br) on 2012-10-18T17:38:37Z No. of bitstreams: 1 ana_c_m_mira_ioc_bcm_0030_2011.pdf: 1715147 bytes, checksum: 54b54aa7c73f82debfcc2d92f0038a0b (MD5) / Made available in DSpace on 2012-10-18T17:38:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ana_c_m_mira_ioc_bcm_0030_2011.pdf: 1715147 bytes, checksum: 54b54aa7c73f82debfcc2d92f0038a0b (MD5) Previous issue date: 2011 / Fiocruz LABioMed/UCLA / Los Angeles Biomedical Research Institute. Molecular Medicine. Torrance, CA, USA / A forma de apresentação mais comum da leishmaniose tegumentar americana (LTA) é o aparecimento de uma úlcera auto-limitada no local da picada do inseto vetor. Embora estas lesões requeiram até 6 meses para atingirem a cura completa, o tratamento com antimoniais pentavalentes pode reduzir significativamente este tempo de cicatrização. Entretanto, a quimioterapia nem sempre apresenta resultados satisfatórios, seja por não resolver a injúria tecidual, seja por permitir a persistência parasitária e desenvolvimento de lesões na mucosa oro-nasal. Desta forma, o presente estudo teve como objetivos principais avaliar fatores envolvidos na cronicidade das lesões cutâneas e na progressão da forma cutânea da leishmaniose para a forma mucosa tardia. A cronicidade de lesões cutâneas de diversas etiologias tem sido relacionada ao desequilíbrio da atividade de algumas metaloproteinases de matriz (MMPs), em especial, das gelatinases MMP-2 e MMP-9. Portanto, decidimos avaliar a participação destas enzimas e de seus moduladores nos danos teciduais causados por LTA. Verificamos que a atividade destas gelatinases atinge extensas áreas das lesões de má resposta, a qual estava associada a um elevado número de células produzindo IFN-γ, TGF-β e IL-10, com preponderância da citocina pró-proteolítica IFN-γ. O oposto foi observado nas lesões de boa resposta, onde, paralelamente aos baixos níveis de atividade gelatinolítica e prevalência da citocina anti-inflamatória IL-10, pôde-se observar altos níveis de mRNA para MMP-2 e elevados valores da razão MMP-2:TIMP-2. Sugere-se então que o perfil imunológico in situ controla o balanço entre MMPs e inibidores, determinando assim, o sucesso ou fracasso da cicatrização. Entretanto, mesmo após a cura clínica, alguns indivíduos progridem para a forma mucosa, fato associado com a disseminação parasitária via células fagocíticas. Considerando a importância de MMP-9 na migração de células imunológicas, decidimos estudar a atividade desta gelatinase em cultura de macrófagos humanos infectados por Leishamnia braziliensis. Observamos que a infecção por L. braziliensis induziu ao aumento de atividade de MMP-9 no sobrenadante das culturas e que os níveis de atividade de MMP-9 são maiores nas culturas de macrófagos de indivíduos que, no passado, desenvolveram a forma mucosa. Estes dados sugerem uma diferença fundamental na imunidade inata do hospedeiro, onde o padrão de ativação de MMP-9 pode ser um indicador de predisposição para o desenvolvimento de leishmaniose mucosa. Além da disseminação parasitária, o sistema imunológico também exerce controle sobre a evolução da forma cutânea para a forma mucosa de LTA. Por isso, a análise do transcriptoma do microambiente da lesão cutânea primária de indivíduos com a forma cutânea localizada e daqueles que desenvolveram a forma mucosa tardia pode auxiliar na compreensão deste quadro. Nossos resultados indicaram uma importante diferença da capacidade de resposta imunológica de ambos grupos, onde o grupo cutâneo mostrou maior eficácia no estabelecimento da resposta imune do tipo T helper 1 (Th1), com participação de células Th2 e forte controle imunotolerigênico. / The most common clinical presentation of American tegumentary leishmaniasis (ATL) is the development of a self-limited ulcer at the site of the insect vector’s bite. Although these lesions require up to 6 months to completely cure, the treatment with pentavalent antimonials can significantly reduce the healing time. Thus, the present study aimed to evaluate the factors involved in the chronicity of cutaneous lesions and in the progression of cutaneous leishmaniasis to late mucosal form. The chronicity of cutaneous lesions from different etiologies has long been associated to an imbalanced activity of matrix metalloproteinases, especially gelatinases MMP-2 and MMP-9. Therefore, we decided to evaluate the participation of these enzymes and their modulators in the tissue damage caused by ATL. We verified that the gelatinase activity was widespread in the lesions from poor responders, and associated to high rates of cells producing IFN-γ, TGF-β and IL-10, with preponderance of the pro-proteolytic cytokine IFN-γ. The opposite was observed in lesions from good responders, where, in parallel to the low levels of gelatinase activity and the prevalence of the anti-inflammatory cytokine IL-10, we observed high levels of MMP-2 mRNA and high MMP-2:TIMP-2 ratios. This suggests that the in situ immunological profile controls the balance between MMPs and inhibitors, thus determining the healing success or failure. Nevertheless, even after clinical cure, some individuals progress to mucosal forms, a fact associated to parasite dissemination via phagocytic cells. Considering the importance of MMP-9 in the migration of immunological cells, we decided to study this gelatinase activity in human macrophage cultures infected with Leishmania braziliensis. We observed that L. braziliensis infection induced the increase of MMP-9 activity in culture supernatants and that the level of MMP-9 activity was higher in cultures from individuals that, in the past, had developed the mucosal form. These data suggest a fundamental difference in the innate immunity of the host, where the MMP-9 activation pattern may be an indicator for the predisposition of mucosal leishmaniasis development. Besides parasite dissemination, the immunological system also controls the evolution from cutaneous to mucosal form in ATL. Therefore, the transcriptome analysis of the primary cutaneous lesion microenvironment from individuals that had localized cutaneous leishmaniasis and from those who developed the late mucosal form can help to understand this state. Our results indicated an important difference in the immune capacity from both groups, where the cutaneous group showed better efficacy in establishing a type 1 (Th1) immune response, with participation of Th2 cells and a strong immune-tolerigenic control.
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Sensibilidade ao antimonial pentavalente in vitro de amostras de Leishmania (Viannia) braziliensis isoladas antes e após o tratamento de pacientes

Miranda, Luciana de Freitas Campos January 2011 (has links)
Made available in DSpace on 2014-12-05T18:36:50Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) luciana_miranda_ipec_mest_2011.pdf: 2273487 bytes, checksum: 2458e3ceb6d02fad0808bbad9e7f3bd5 (MD5) Previous issue date: 2014-10-07 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Pesquisa Clínica Evandro Chagas, Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Os antimoniais pentavalentes representam a principal opção para tratamento das leishmanioses, sendo utilizado no Brasil, o antimoniato de meglumina (Glucantime\F0D2). A variabilidade da resposta ao tratamento pode estar condicionada a fatores relacionados ao hospedeiro, aos parasitas ou mesmo aos esquemas terapêuticos empregados. Neste estudo, avaliamos amostras de Leishmania (Viannia) braziliensis em ensaios in vitro quanto à sensibilidade ao antimoniato de meglumina. Foram comparadas as DL50 observadas, tanto para formas promastigotas quanto para formas amastigotas, de amostras isoladas no momento do diagnóstico antes do tratamento (amostra A) e de amostras isoladas após o primeiro ciclo de tratamento (amostra B). Sete pares de amostras (A e B) foram selecionados, sendo quatro isolados de pacientes com falha terapêutica e três de pacientes com reativação. As formas promastigotas foram expostas a concentrações de antimoniato de meglumina entre 3,955 \03BCg e 8,1 mg/mL e avaliadas após 24 e 48 horas de exposição. As formas amastigotas, em macrófagos murinos, foram expostas a concentrações de 20, 40 e 80 \03BCg/mL de antimoniato de meglumina, cuja cinética de infecção foi avaliada em intervalos de 0, 24, 48 e 72 horas, baseada em dois parâmetros: percentual de células infectadas e número médio de amastigotas por macrófago Todas as amostras B de formas promastigotas apresentaram valores da DL50 superiores aos obtidos com as amostras A, exceto para as amostras de um paciente. Nos ensaios com formas amastigotas, as amostras B apresentaram valores da DL50 mais elevados que a amostra A em 4 casos, com aumentos que variaram de 17 a 20% em 3 pacientes e de 100% em um caso. Nos demais pacientes, os valores da DL50 de A e B foram semelhantes. Dos sete pacientes estudados, um abandonou o tratamento e seis apresentaram cura, após retratamento, pelo uso da Anfotericina B (4 casos) ou antimoniato de meglumina (2 casos). Não foi possível correlacionar os resultados obtidos neste estudo com a clínica ou a resposta ao tratamento. É possível que outros fatores relacionados aos pacientes, tais como a condição imunológica e a resposta frente à infecção possam influenciar na resposta à terapêutica antimonial / Pentavalent antimonials are the first drug of choice for leishmaniasis treatment and in Brazil meglumine antimoniate (Gl u cantime  ) is used. The variability of the re sponse to treatment may be conditioned to factors related to the host, the parasites or even the therapeutic plan. In this study we assessed the susceptibility to meglumine antimoniate of samples of Leishmania (Viannia) braziliensis in in vitro tests. We compared the DL 50 of both promastigote and amastigote forms of samples isolated at diagnosis before treatment (sample A ) and samples isolated after the first cycle of treatment (sample B ). Seven pairs of samples ( A and B ) were selected, four isolated from patients with treatment failure and three from patients with reactivation. The promastigote forms were exposed to meglumine antimoniate concentrations between 3,955 μg and 8,1 mg/mL and were assessed after 24 and 48 hours of exposition. The amastigotes, in murine macrophages, were exposed to concentrations of 20, 40 and 80 μg/mL of meglumine antimoniate, and the infection kinetics was assessed at time intervals of 0, 24, 48 and 72 hours, through two parameters: percentage of infected cells and average numbe r of amastigotes per macrophage. All B samples of promastigotes presented DL 50 values higher than those obtained with A samples, except for one patient. In tests with amastigotes, the B samples showed higher DL 50 values than sample A in 4 cases, with incr eases ranging from 17 to 20% in 3 patients and 100% increase in one case. In other patients, DL 50 values of A and B were similar. One of the seven patients studied abandoned treatment and six were clinically healed after retreatment with Anphotericin B (4 cases) or meglumine antimoniate (2 cases). It was not possible to correlate the results of this study with the clinics or response to treatment. It is possible that other patient related factors such as immunological condition or response to infection may influence the response to antimonial treatment
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Caracterização da infecciosidade de pequenos roedores silvestres e sinantrópicos para incriminação de hospedeiros reservatórios de Leishmania (Viannia) brasiliensis / Characterization of infectivity of wild rodents and synanthropic for prosecution of reservoir hosts of Leishmania (Viannia) brasiliensis

Andrade, Maria Sandra January 2010 (has links)
Made available in DSpace on 2015-05-27T13:34:56Z (GMT). No. of bitstreams: 2 695.pdf: 4459312 bytes, checksum: 5c20207fa2c78a768fa3f491b2525c00 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2010 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Aggeu Magalhães. Recife, PE, Brasil / A história natural da leishmaniose tegumentar americana apresenta poucos estudos relacionados ao conhecimento dos reservatórios associados à Leishmania (Viannia) braziliensis. Com o objetivo de caracterizar a infecciosidade experimental de Necromys lasiurius, Nectomys squamipes e Rattus rattus, para incriminação de hospedeiros reservatórios de L. (V.) braziliensis, foram realizados dois experimentos, utilizando Lutzomyia longipalpis e dez animais de cada espécie, ambos colonizados em laboratório. Como grupo controle foi utilizado dois hamsters (Mesocricetus auratus) para cada grupo de dez animais. No primeiro experimento, os animais foram inoculados com 5,5x106/ml de promatigotas de fase log de L. (V.) braziliensis e o segundo com um inóculo de 2,8x105/ml, para posterior realização de xenodiagnóstico. Amostras obtidas de sangue, pele, fígado e baço dos animais e exemplares de flebotomíneos foram processadas para a visualização do parasito, através do exame direto e detecção de DNA por meio de PCR específica para o subgênero Viannia. No primeiro experimento, 570 exemplares de fêmeas foram submetidos ao xenodiagnóstico e dentre estes, 338 foram dissecados e observados formas compatíveis com promastigotas em 7,7 por cento. Dos 26 animais, 06 apresentaram resultados positivos de infectividade no teste de PCR e 08 exemplares de flebotomíneos foram positivos. No segundo experimento, 678 fêmeas foram submetidas ao xenodiagnóstico e 467 dissecadas. No exame direto, 37,3 por cento foram positivas. Foi verificada a positividade no teste de PCR em 15, dos 29 animais submetidos ao xenodiagnóstico. 27 exemplares de flebotomíneos foram positivos na PCR específica. Estes resultados sugerem que os roedores silvestre N. lasiurus, N. squamipes e o sinantrópico R. rattus são infectivos e prováveis hospedeiros reservatórios de L. (V.) braziliensis
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Caracterização clínica e laboratorial das manifestações orais de Leishmaniose Tegumentar Americana

Costa, Daniel Cesar Silva da January 2014 (has links)
Made available in DSpace on 2015-10-07T18:58:49Z (GMT). No. of bitstreams: 2 daniel_costa_ini_mest_2014.pdf: 1569859 bytes, checksum: 9e424e66219a8730f2969c99896f55e4 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2015-06-10 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Infectologia Evandro Chagas. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Introdução: A leishmaniose é uma zoonose infecciosa causada por protozoários do gênero Leishmania, que parasitam as células do sistema mononuclear fagocitário. Esta doença pode se manifestar de duas formas: leishmaniose tegumentar e a leishmaniose visceral. A leishmaniose tegumentar pode acometer pele ou mucosas inclusive da cavidade oral. As lesões orais de leishmaniose por não serem ainda bem estudadas são frequentemente confundidas com outras doenças da boca, o que atrasa o diagnóstico e o tratamento específico, aumentando a probabilidade de sequelas. Desta maneira, aumentar o conhecimento da evolução das lesões orais de leishmaniose tegumentar americana (LTA) pode auxiliar no diagnóstico precoce da infecção, melhorando seu prognóstico. Objetivos: Avaliar a frequência da ocorrência de lesões orais de LTA e descrever suas peculiaridades clínicas, laboratoriais, e terapêuticas. Métodos: Foi realizado um estudo transversal descritivo com amostra de conveniência, utilizando dados obtidos de prontuários e de exame clínico das mucosas das vias aéreo-digestivas superiores de 206 pacientes com Leishmaniose Mucosa (LM), atendidos no Laboratório de Vigilância em Leishmanioses-IPEC-Fiocruz entre 1989 e 2013. Para as variáveis categóricas foram calculadas proporções. Para as variáveis contínuas foram usados medidas de tendência central e dispersão. A associação entre as variáveis categóricas foi avaliada pelo teste chi-quadrado de Pearson. A diferença dos valores das variáveis contínuas foi verificada pelo teste t, no caso paramétrico e pelo teste de Mann-Whitney, no caso não paramétrico. P-valores menores que 0.05 indicaram testes estatisticamente significativos Resultados: Encontramos uma preponderância do gênero masculino (72,8%) dentre os pacientes com a forma mucosa. Foi possível determinar que o sítio mucoso mais acometido é o nasal, seguido do oral, faríngeo e laríngeo. Num universo amostral de 206 pacientes, 78 (37,9%) apresentavam lesões em cavidade oral, que tiveram mediana de tempo de evolução menor (8 meses) comparado aos outros sítios mucosos das Vias aéreas e digestivas superiores -VADS (nasal com 24 meses; laríngea e faríngea com 12 meses) e do tempo de cicatrização maior (oral= 113 dias; nasal= 90 dias, faríngea= 91 dias e laríngea= 78,5 dias). A presença de lesão oral foi associada a um maior tempo de cicatrização das lesões nasais e à presença de lesão nos outros três sítios mucosos. Conclusão: Considerando os piores resultados terapêuticos associados à presença de lesão oral, sugerimos que lesões nesta localização representem um fator de pior prognóstico para a LM / Introduction : Leishmaniasis is an infectious zoonotic disease caused by protozoa of the genus Leishmania, whic h infects the mononuclear phagocyte system. This disease can be clinical presented as : Tegumen tary leishmaniasis (TL) and visceral leishmaniasis. The TL can affect the skin and the mucosa (mucosal leishmaniasis – ML) , including oral cavity . The oral lesions of TL are often confused with mouth’s lesions with other ethiologies, and as there are few s tudies characterizing oral leishmaniasis , the correct diagnosis and treatment can be delayed, increasing the likelihood of sequelae . In this way, the increas e of knowledge about this site of TL lesions can help an early diagnosis of the infection and impr ove the patients prognosis . Objectives : Identify the frequency of occurrence of ATL oral lesions and describe the clinical, laboratorial and therapeutics characteristics . Methods : Was made a cross - sectional descriptive study with a convenience sample, us ing data obtained from medical records and specific clinical mucosa examination, especially the oral mucosa, of 20 6 patients with mucosal leishmaniasis (ML), treated at the ambulatory of Otorhinolaryngology, from Laboratório de Vigilância em Leishmanioses - IPEC - Fiocruz between 1989 e 2013. were calculated the proportions of categorical variables. M easures of central tendency and dispersion were used for continuous variables. The association between categorical variables was assessed by Chi - square test of Pea rson . The difference in the values of parametric continuous variables was assessed by t test and Mann - Whitney test for nonparametric . Results: A preponderance of males (72.8%) ware found among patients with ML . We could determined that most affected site is the nasal muco sae , followed by the oral, pharyngeal a nd laryngeal sites . In a sample of 206 patients, 78 had lesions in the oral cavity, which has a lower median (Md) of evolution time (8 months) than the other sites (Nasal= 24 months; laryngeal and ph aryngeal= 12months) ; and a higher time of healing ( oral = 113 days, as Nasal= 90 days, pharyngeal= 91 and laryngeal= 78.5 days). T he relationship between presence of oral lesions associated with lesions in each one of the other 3 sites; and presence of oral lesion in the time of nasal lesions healing w as statistical significant (<0.05) . Conclusion : . The oral lesions are generally associated with lesions in other mucosal sites, have a lower m e dian of evolution when compared with the others anatomical areas and have a higher median healing time. Our results suggests that ATL lesions in the oral cavity represent a negative prognostic factor for lesions in the nasal cavity
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Ensaio clínico de não inferioridade, randomizado, controlado, cego, de antimoniato de meglumina em dose baixa versus dose alta para leishmaniose cutânea americana no Rio de Janeiro, Brasil

Saheki, Mauricio Naoto January 2013 (has links)
Made available in DSpace on 2015-12-29T16:20:06Z (GMT). No. of bitstreams: 2 mauricio_saheki_ini_mest_2013.pdf: 3864342 bytes, checksum: 26a6397d32ef9389da0be24484b9110a (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2015-05-21 / Fundamento: Na atualidade, há um corpo crescente de pesquisas que apontam para novas drogas e esquemas alternativos de antimônio para o tratamento da leishmaniose tegumentar americana (LTA). Nesse contexto, as recomendações dos consensos mais recentes convergem para a necessidade urgente de ensaios clínicos na LTA. Embora o tratamento alternativo com dose baixa de antimônio venha sendo utilizado nos últimos 30 anos, a evidência disponível provém de dois estudos retrospectivos, dois estudos prospectivos e relatos de caso. Em nosso conhecimento, este é o terceiro estudo randomizado que compara dose baixa com a dose alta de antimônio pentavalente (Sb5+) para o tratamento da LTA. Métodos: Em um estudo de não inferioridade, randomizado, controlado, cego realizado no estado do Rio de Janeiro, uma área endêmica de transmissão de Leishmania (Viannia) braziliensis, o tratamento em dose baixa de antimoniato de meglumina (5 mg Sb5+/kg/dia durante 30 dias) foi comparado com o tratamento em dose alta (20 mg Sb5+/kg/dia durante 20 dias) para leishmaniose cutânea americana (LCA). Participantes com idade \2265 13 anos com diagnóstico parasitológico de LCA foram randomizados para tratamento com dose baixa ou dose alta de antimoniato de meglumina. Os investigadores foram mascarados para o tratamento alocado. O desfecho primário foi a cura clínica no dia 360 nas populações de intenção de tratar modificada (mITT) e por protocolo (PP). Os desfechos secundários foram tempo de epitelização, tempo de cura clínica, grau de redução da lesão e da úlcera no dia 30. A margem de não inferioridade predeterminada foi de 15%. Este estudo foi registrado no endereço eletrônico ClinicalTrials.gov, registro número NCT01301924 Resultados: Entre outubro de 2008 e dezembro de 2011, um total de 60 pacientes com LCA foi alocado para receber tratamento com antimoniato de meglumina em dose baixa ou em dose alta (30 por grupo). Na população de mITT, o desfecho primário foi atingido em 76,7% dos pacientes em dose alta versus 73,3% dos pacientes em dose baixa (diferença de risco 3,3%, IC 95% unicaudal: -15,2 a 21,9%; p=0.15) (não inferioridade não demonstrada). Na análise PP, a cura clínica no dia 360 foi observada em 84,6% dos pacientes em dose alta versus 75,9% em dose baixa (diferença de risco 8,8%, IC 95% unicaudal: -9,2% a 26,7%; p=0,28) (não inferioridade não demonstrada). Não foi observada diferença significativa nos desfechos secundários. Embora a diferença na frequência de efeitos adversos não tivesse sido significativa entre os grupos de tratamento, pacientes tratados em dose alta tiveram efeitos adversos clínicos (p=0,04) e laboratoriais (p=0,01) mais graves do que aqueles que receberam dose baixa. Interpretação: Este estudo pode constituir como evidência para as recomendações de um consenso recente que determina a utilização dos dias 180 a 360 como o desfecho de tempo ideal para avaliar cura clínica e levanta a questão intrigante sobre o melhor tempo para definir cura clínica na LTA. Embora a hipótese de não inferioridade não tenha sido formalmente determinada neste estudo, tendo em vista sua segurança e tolerabilidade, o tratamento com antimônio em dose baixa pode ser considerada como uma alternativa aceitável em pacientes incapazes de tolerar ou que apresentem contraindicação ao tratamento padrão em alta dose de antimônio / Background: There is an expanding field of research focusing on alternative schemes of antimony and new drugs to treat American tegumentary leishmaniasis (ATL). In thi s setting, recent guidelines convey that clinical trials are urgently needed. Although the alternative low dose antimony treatment has been used for the past 30 years, the available evidence comes from two retrospective, two prospective cohort studies and case reports. To o ur knowledge, this is the third randomized trial comparing low dose and high dose pentavalent antimony (Sb5+) to treat ATL. Methods: In a randomized, controlled, single blind, non - inferiority trial undertaken in Rio de Janeiro State, Braz il, an endemic area of Leishmania (Viannia) braziliensis transmission, low dose regimen of meglumine antimoniate (5 mg Sb5+/kg/day for 30 days) was compared with high dose regimen (20 mg Sb 5+/kg/day for 20 days) to treat American cutaneous leishmaniasis ( ACL). Participants aged ≥ 13 years with parasitologically confirmed ACL were randomly assigned to low dose or high dose treatment with meglumine antimoniate. Investigators were masked to treatment allocation. The primary endpoint was clinical cure at day 3 60 on modified intention to treat (mITT) and per protocol (PP) populations. Secondary endpoints were time to epithelization, time to clinical cure, adverse events, degree of total lesion and ulcer diameter reduction at day 30. The predetermined non - inferio rity margin was 15%. This trial is registered with ClinicalTrials.gov, number NCT01301924. Results: Between October, 2008, and December, 2011, a total of 60 patients with ACL were randomly assigned to low dose or high dose treatment of meglumine antimoniat e (30 per group). In the mITT population, the primary endpoint was reached in 76.7% given standard high dose versus 73.3% of patients given low dose treatment (risk difference 3.3%, one sided 95% CI: - 15.2 to 21.9%; p=0.15) (non - inferiority not confirmed). In PP analysis, clinical outcome was successful in 84.6% of patients given high dose versus 75.9% of patients given low dose treatment (risk difference 8.8%, one sided 95% CI: - 9.2% to 26.7%, p=0.28) (non - inferiority not confirmed). There were no signific ant differences in secondary measures. Although the occurrence of adverse events was not significantly different, patients in the high dose regimen were significantly more likely to have severe clinical (p=0.04) and laboratory (p=0.01) adverse events than those assigned to the low dose treatment. Interpretation: This study parallels a recent guideline that recommends day 180 - 360 as the ideal endpoint for clinical cure and raises the intriguing question about the optimal cutoff time to define clinical cure i n cutaneous leishmaniasis. Although the hypothesis of non - inferiority was not formally met in this trial, given its safety and tolerability, the low dose antimony regimen could be regarded as an acceptable alternative in patients unable to tolerate or who have a contraindication to the standard high dose treatment.
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Aspectos clínicos, epidemiológicos e laboratoriais da Leishmaniose tegumentar americana em hospital de referência de Teresina, Piauí

Almeida Neto, Walfrido Salmito de January 2015 (has links)
Made available in DSpace on 2016-04-15T12:58:15Z (GMT). No. of bitstreams: 2 walfrido_neto_ioc_mest_2015.pdf: 3256765 bytes, checksum: f963b0142dbc1e15dd0c61bbc2f7e663 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2015 / Universidade Federal do Piauí. Teresina,PI, Brasil / INTRODUÇÃO: A Leishmaniose Tegumentar Americana (LTA) é uma doença infecciosa, não contagiosa, reconhecida pela OMS no grupo das doenças negligenciadas causada por diferentes espécies de protozoários do gênero Leishmania spp., que acomete pele e mucosas. OBJETIVOS: O trabalho objetiva descrever aspectos clínicos, epidemiológicos e laboratoriais dos casos de LTA atendidos no Instituto de Doenças Tropicais Natan Portella (IDTNP) em Teresina, Piauí entre 2007 e 2014. A casuística apresentada corresponde a cerca de 50% de todos os casos piauienses de LTA no período de 2007 a 2014. Os demais foram notificados em outros serviços de saúde. MÉTODO: Foi realizado um estudo do tipo série de casos, sendo os dados obtidos através de formulário do Sistema Nacional de Agravos de Notificação (SINAN). RESULTADOS: Observou-se que o hospital atende uma média de 85 casos por ano, com registro de picos superiores a 100 casos/ano em 2007, 2011 e 2014. Entre os 676 casos, 463 (68,5%) foram autóctones do Piauí, 182 (26,9%) procedentes do Maranhão e 27 (4%) do Pará. No Piauí, os municípios que apresentaram maior casuística foram Teresina 260 (56,15%) e Altos 17 (3,67%). Em Teresina os bairros com maior número de casos foram: Santa Teresa 23 (8,8%) e Santa Maria da Codipi 11 (4,2%). Do total de atendidos no IDTNP, 240 (35,5%) eram do gênero feminino e 436 (64,5%) eram do gênero masculino. A média de idade das pessoas com LTA foi 43,9 ± 20,7 anos. A distribuição por faixa etária mostrou: 0 a 4 anos 20 (3%), 5 a 12 anos 27 (4%), 13 a 17 anos 34 (5%),18 a 30 anos 111 (16,4%), 31 a 50 anos 228 (33,7%), 51 a 65 anos 142 (21%), maior de 65 anos 114 (16,9%). A coinfecção com o HIV foi documentada em 20 (3%) dos pacientes Dentre os 676 casos, cerca de 615 (91%) foram confirmados por critérios laboratoriais e 282 (46%) tiveram apenas a intradermorreação de Montenegro positiva. O histopatológico mostrou lesões compatíveis com LTA, porém sem a visualização do parasita, sendo mais frequente nos casos da forma mucosa 63 do total de 77 (81,8%), nos casos de forma cutânea 144 dos 245 casos (58,8%). O tratamento com antimonial pentavalente foi aplicado em 511 (75,6%), 116 (17,2%) com anfotericina B e apenas 1 (0,1%) com pentamidina. Entre os casos, 570 (84,3%) tinham a forma cutânea e 106 (15,7%) tinham a forma mucosa da doença. Dos casos com comprometimento de mucosa, 24 (22,6%) apresentavam cicatrizes cutâneas. Entre os pacientes com a forma cutânea, 451 (79,1%) foram tratados com antimonial pentavalente e 79 (13,9%) com anfotericina B, entre as formas mucosas 43 (56,6%) foram tratados com antimoniais pentavalente e 27 (34,9%) com anfotericina B. O modelo multivariado demonstrou que a forma mucosa se associa a residir no Pará (OR = 5,43; IC 95% = 2,34 \2013 12,59), residir no Maranhão, (OR = 2,70; IC 95% = 1,72 \2013 4,25) e ter mais de 50 anos (OR = 1,94; IC 95% = 1,25 \2013 2,97). O gênero feminino apresentou apenas tendência a proteger do comprometimento da forma mucosa (OR = 0,64; IC 95% = 0,39 \2013 1,03). CONCLUSÕES: Conclui-se que a LTA vem sendo cada vez mais diagnosticada em Teresina e demais municípios do Piauí, em indivíduos do gênero masculino, sendo a forma mucosa identificada em níveis superiores à média nacional / The American Cutaneous Leishmaniasis (ACL) is an infectious disease, not contagious, recognized by WHO in the group of neglected diseases caused by different species of protozoa of the genus Leishmania, which affects the skin and mucous membranes. OBJECTIVES: The paper aims to describe the clinical, epidemiological and laboratory cases of ACL treated at a referral center in Teresina-Piauí between 2007 and 2014. The case presented corresponds to about 50% cases of ACL in Piaui during the period 2007 to 2014, others were reported in other health services. METHOD: A study of case series, and data obtained form the National Notifiable Diseases System (SINAN) was performed. RESULTS: It was observed that the hospital serves an average of 85 cases per year, with record peaks above 100 cases / year in 2007, 2011 and 2014. Among the 676 cases 463 (68.5%) were native of Piauí, 182 (26.9%) coming from Maranhão and 27 (4%) of Para. In Piaui, the municipalities that had larger samples were Teresina 260 (56.15%) and Altos 17 (3.67%). Teresina in the districts with the highest number of cases were: Santa Teresa 23 (8.8%) and Santa Maria da Codipi 11 (4.2%). Of the total, 240 (35.5%) were female and 436 (64.5%) were male. The average age of people with ACL was 43.9 ± 20.7 years. The age distribution showed: 0-4 years 20 (3%), 5-12 years 27 (4%), 13-17 years 34 (5%), 18-30 years 111 (16.4 %), 31-50 years 228 (33.7%), 51 to 65 142 (21%), greater than 65 114 (16.9%). Co-infection with HIV has been reported in 20 (3%) patients. Among the 676 cases, about 615 (91%) were confirmed by laboratory criteria, 282 (46%) had the only positive Montenegro's reaction Histopathological showed injuries consistent with ACL, but without viewing the parasite, most frequently in cases of mucosal form 63/77 (81.8%) than in cutaneous cases 144/245 (58.8%). The treatment with antimonial was applied in 511 (75.6%), 116 (17.2%) with amphotericin B, and only 1 (0.1%) with pentamidine. Among the cases 570 (84.3%) had the cutaneous form and 106 (15.7%) had the mucosal form of the disease. Part of cases with mucosal involvement, 24 (22.6%) had cutaneous scars. Among patients with cutaneous 451 (79.1%) were treated with antimonials, and 79 (13.9%) with amphotericin B, between the mucosal forms 56.6% were treated with antimonials and 34, 9% with amphotericin B. The multivariate model showed that the shape mucosa associated to reside in Pará (OR = 5.43; 95% CI = 2.34 to 12.59), reside in Maranhão (OR = 2, 70; 95% CI = 1.72 to 4.25) and have more than 50 years (OR = 1.94; 95% CI = 1.25 to 2.97). The females showed only tendency to protect the impaired mucosal form (OR = 0.64; 95% CI = 0.39 to 1.03). CONCLUSIONS: We conclude that the LTA has been increasingly diagnosed in Teresina and other cities of Piauí, in male subjects, the mucosal form identified at levels above the national average
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Avaliação do teste rápido Sandfly para infecção natural por Leishmania em flebotomíneos / Rapid test evaluation Sandfly to natural infection by Leishmania in sand flies

Dias, Quezia Nunes Peres January 2015 (has links)
Made available in DSpace on 2016-05-02T13:01:26Z (GMT). No. of bitstreams: 2 78.pdf: 8994728 bytes, checksum: 69b907a918fd891b88f8ba01c3be666b (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2015 / Este trabalho buscou avaliar a eficiência do teste rápido SandFly em campo, tendo a PCR como padrão ouro. As coletas e a realização dos testes se deram na Ilha da Marambaia, Estado do Rio de Janeiro, que possui registros de LTA em humanos e LVC. As capturas de flebotomíneos ocorreram utilizando armadilhas luminosas do tipo CDC, que funcionaram entre 19:00 hr e 7:00 hr da manhã seguinte, durante 2 meses consecutivos, Setembro e Outubro de 2014, totalizando 8 coletas em 5 áreas distintas. No total, foram coletados 1505 espécimes de flebotomíneos. Para o diagnóstico de infecção, as fêmeas de cada coleta foram escolhidas ao acaso e separadas em pools de dez; cada pool foi macerado com o tampão de lise e metade de cada amostra foi utilizada nos testes; a outra metade foi encaminhada para realização da PCR. O restante dos flebotomíneos foi encaminhado para identificação de espécies. Nos TRs, 4 resultados foram positivos, 1 em Setembro (amostra A13) e 3 em Outubro (B11, B13 e B14) nos 49 pools analisados, todos sendo fracos. O diagnóstico pela PCR revelou infecção natural por Leishmania em flebotomíneos de 3 áreas na Ilha de Marambaia: Praia Grande, Praia de São José e Praia da Cutuca: 7 resultados positivos (A13, A17, A18, A19, A22, A23 e A24) nas 29 amostras de Setembro e 7 resultados positivos (B01, B02, B05, B06, B09, B13 e B17) nas 19 amostras com fêmeas de Outubro, totalizando 14 resultados positivos. Comparando ao padrão ouro, dos 49 testes realizados: 2 revelaram ser verdadeiros positivos, 33 verdadeiros negativos, 2 falsos positivos e 12 falsos negativos. / Cálculos foram feitos para avaliar a eficiência do TR comparado à PCR: a sensibilidade relativa encontrada foi de 14 por cento e a especificidade relativa de 94,2 por cento. O Valor Preditivo Positivo encontrado foi VPP= 0,50 enquanto o Valor Preditivo Negativo foi VPN= 0,73; a acurácia foi 0,71. Para verificar a concordância entre os testes diagnósticos foi utilizado o índice de concordância de Kappa. Esta concordância foi considerada fraca, com o valor de k= 0,1091 Concluiu-se que apesar do teste rápido SandFly possuir boa especificidade, a sensibilidade deve ser melhorada. Para identificar as espécies de flebotomíneos foi utilizada a nomenclatura de Galati (2003); dentre essas, 6 espécies foram identificadas Nyssomyia intermedia, Migoneimyia migonei, Pintomyia fischeri, Evandromyia edwardsi, Brumptomyia sp. e Micropygomyia capixaba. Cabe ressaltar que as taxas de infecção encontradas foram altas e carecem de mais investigações. A taxa mínima de infecção referente aos dois meses foi de 2,9 por cento e a taxa mínima de infecção em Praia Grande nos dois meses foi de 3,5 por cento. A melhora da sensibilidade do teste rápido e sua validação de campo apontam para um avanço significativo na luta contra as Leishmanioses. / This study aimed to evaluate the efficiency of the Sandfly rapid test in the field considering the PCR as the gold standard. The collections and the tests were performed in Marambaia Island (State of Rio de Janeiro) that has records of Tegumentar Leishmaniasis in humans and Visceral Leishmaniasis in dogs. The collections were performed using CDC light traps from 7 pm to 7 am, for 2 consecutive months - September and October 2014, totaling 8 collections in 5 different areas. A total of 1505 sandflies were collected. Females of each collection were chosen at random and stored in labeled pools of 10 specimens. Each pool was macerated with lysis buffer solution and half of each sample was used in the tests; the other half of the samples was referred for evaluation of infection by Leishmania spp. through PCR. The remaining sandflies were sent for species identification. 4 rapid test results were positive - 1 September (sample A13) and 3 October (B11, B13 and B14) in the 49 analyzed pools and all were weak. Diagnosis by PCR revealed Leishmania natural infection in 3 areas in Marambaia Island: Praia Grande, Praia de São José and Praia da Cutuca. It was 7 positive results (A13, A17, A18, A19, A22, A23 and A24) in 29 samples of September and 7 positive results (B01, B02, B05, B06, B09, B13 and B17) in 19 samples with October females, totaling 14 positive results. Considering PCR as the gold standard, 2 rapid tests results were evaluated as true positives, 33 as true negative, 2 as false positives and 12 as false negatives. Some calculations were performed to evaluate the rapid test efficiency compared to PCR. The relative sensitivity was 14 percent and the relative specificity was 94.2 percent. The Positive Predictive Value was PPV = 0.50 while the Negative Predictive Value was 0.73. The accuracy was 0.71. ^ien / The Kappa agreement index was used to verify the correlation between the diagnostic tests, that was considered weak, with the value of k = 0.1091. It was concluded that despite the Sandfly rapid test has a good specificity the sensitivity needs to be improved. 6 species of sandflies were identified: Nyssomyia intermedia, Migoneimyia migonei, Pintomyia fischeri, Evandromyia edwardsi, Brumptomyia sp. and Micropygomyia capixaba. It is noteworthy that infection rates found were high and require more investigation. The minimum infection rate of the two months was 2.9 percent and the minimum rate of infection in Praia Grande within two months was 3.5 percent. The improvement of the rapid test sensitivity and its field validation points to a significant advance in the fight against Leishmaniasis. (AU)^ien

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