Made available in DSpace on 2014-08-13T14:50:39Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-09-16Bitstream added on 2014-08-13T18:01:31Z : No. of bitstreams: 1 000746985_20150927.pdf: 1074107 bytes, checksum: 736b109d2ccde3c59ca3e85ff6da7aea (MD5) Bitstreams deleted on 2015-09-28T16:42:56Z: 000746985_20150927.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2015-09-28T16:43:44Z : No. of bitstreams: 1 000746985.pdf: 3182272 bytes, checksum: 2f1f8eea88932fcd1181df434e0bea11 (MD5) / O vírus da dengue afeta milhões de pessoas a cada ano no mundo todo. O processo de infecção viral pela via endossomal é intermediada pela sequência 98 a 112 (DRGWGNGCGLFGKGG), conhecido como peptídeo de fusão, este segmento faz parte da glicoproteína E, localizado no envelope do vírus. Todos os flavivirus, incluindo os quatro sorotipos da dengue, apresentam esta sequência em regiões próximas, além de apresentarem alta identidade. Apesar de intensas pesquisas e o aumento da incidência de casos da dengue, não existem drogas antivirais específicas, até este momento, para o combate desta doença. Deste modo, a compreensão da interação do vírus com as células hospedeiras é importante na busca de novos fármacos. Neste sentido, este trabalho visou entender melhor o modo de ação do peptídeo de fusão da dengue e a importância de suas regiões laterais. O objetivo deste projeto teve por finalidade avaliar as contribuições das regiões laterais ao peptídeo de fusão, isto é, 88-97 e 113-123, em sua atividade, para os quatro sorotipos da dengue. A obtenção dos peptídeos foi realizada por meio da síntese em fase sólida. Os modelos de membrana utilizados foram micelas zwitteriônicas (LPC) e vesículas (PC ovo e POPG). Sabendo-se que a exposição desta sequência e, consequente, fusão da membrana é dependente do pH do meio, os estudos foram realizados em pHs 5,5 e 7,1. Nestes estudos, foram utilizadas as técnicas de Transferência de Energia de Ressonância de Föster (FRET), Dicroísmo Circular, Fluorescência, Monocamadas de Langmuir e BAM. O aminoácido triptofano foi usado como sonda para analisar a profundidade da inserção em miméticos de membrana. Os resultados mostraram que a SPFS foi útil, obtendo os materiais desejados. Avaliando a habilidade fusogênica dos 14 peptídeos estudados, observamos que cada sorotipo apresenta atividade diferente um do outro, sendo que os peptídeos do sorotipo 2 foram os que... / Dengue virus affects millions of people worldwide every year. The process of viral infection via endosomal is mediated by the sequence 98-112 (DRGWGNGCGLFGKGG), known as the fusion peptide. This segment is part of the glycoprotein envelope of the virus. All flavivirus, including all four dengue serotypes, contain this fusion sequence and all serotypes present high sequence identity. Although intense researches, the dengue cases have increased and, up to date, there are no specific antiviral drugs to combat this disease. Thus, understanding the virus interaction with host cells is essential for the search and development of new drugs against the dengue virus. Therefore, this study craved a better understanding of the mode of action of the dengue fusion peptide sequence and the importance of its lateral regions. This project aimed to assess the contributions of the lateral regions of the fusion peptide (88-97 and 113-123 sequences) on its activity, for the four dengue serotypes. The synthesis of peptides was performed by solid phase peptide synthesis (SPPS). The membrane models used were zwitterionic micelles (LPC) and vesicles (egg PC and POPG). Since the exposure of this sequence and the resulting membrane fusion is dependent on pH, studies were performed in pH 5.5 and 7.1. In these studies, the techniques of Resonance Energy Transfer Föster (FRET), circular dichroism, fluorescence, Langmuir monolayers and BAM (Brewster angle microscopy) were used. The amino acid and natural fluorophore tryptophan was used as a probe to analyze the insertion depth of the fusion peptide in the membrane mimetic by fluorescence. The results showed that the SPPS was feasible, obtaining the desired materials. Assessing the fusogenic ability of 14 peptides studied, the data indicated that each serotype has different activity and the serotype 2 peptides presented the major interaction. The studies of interaction peptide/membrane mimetic indicated...

Orientador : Profª. Drª. Maria Rita Sierakowski / Coorientador : Prof. Dr. Rilton Alves de Freitas / Tese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Ciências : Bioquímica. Defesa: Curitiba, 28/04/2017 / Inclui referências: 122-134 / Resumo: Novos materiais desenvolvidos a partir de fontes naturais de origem renovável, biocompatíveis e de baixo custo vêm recebendo atenção da academia e da indústria, e duas fontes promissoras são os cristais de celulose (NC) e as xiloglucanas (XG) de sementes de Tamarindus indica. O objetivo desta tese se baseou no desenvolvimento de materiais suportes a base desses polissacarídeos e, de acordo com as publicações geradas, a tese foi dividida em três partes. Na primeira (1), foi realizada a adsorção de XG em camadas de NC com quatro diferentes graus de sulfatação e de potencial zeta [0% SO3 -, isolado com HCl (? -4,8 mV); 0.42% SO3 -, usando uma mistura de HCl e H2SO4 (? -39,6 mV); e 0,65% SO3 -, usando somente H2SO4 (? -45,6 mV)]. A interação foi investigada através de várias técnicas [isotermas de Langmuir, microscopia de força atômica (AFM), ângulo de contato, espalhamento de luz dinâmico, elipsometria e medidas por microbalança de cristal de quartzo (QCM)]. Os experimentos de adsorção em água e por layer by layer (LbL) sugerem que o maior grau de esterificação na superfície de NC (0,65% SO3 -) prejudica a capacidade máxima de adsorção da XG e cria camadas adsorvidas instáveis. Entretanto, para o grupo 0,42% SO3 - não foi verificada alterações significativas na adsorção da XG além de ter uma maior estabilidade coloidal do que o grupo 0% SO3 - e de formar filmes mais estáveis, com menor rugosidade e espessura. Mas, testes iniciais de formação de filmes de XG com NC submetidos a oxidação com o reagente TEMPO apresentaram delaminação e foram descartados para a etapa de produção de biossensores bidimensionais. Na segunda parte (2), sensores piezoelétricos foram revestidos com filmes de NC e em seguida foi imobilizado anticorpos monoclonais IgG específicos para o antígeno NS1 do vírus da dengue. O revestimento do sensor foi acompanhado por AFM, QCM e QCM-D. O sensor desenvolvido foi capaz de detectar o antígeno NS1 em amostras de soros sanguíneos simulados no intervalo de concentração de 0,01 à 10 ?g.mL-1. O revestimento ainda proporcionou a capacidade de reconhecimento de NS1 através de ambos os equipamentos, QCM-D e QCM, com limites de detecção de 0,1 ?g.mL-1 e 0,32 ?g.mL-1, respectivamente. Na terceira parte (3), na tentativa de baratear o sensor desenvolvido na metodologia do artigo anterior, foi proposta a otimização do procedimento de obtenção de NC. Para isso, foi verificada a influência de prétratamentos mecânicos antes do procedimento de hidrólise da celulose. As amostras foram segregadas em relação ao grau de intensidade do tratamento mecânico, sendo: (a) agitação mecânica, (b) trituração, (c) cisalhamento por 20 passagens por moinho e (d) cisalhamento por 40 passagens por moinho. E foram caracterizadas por reologia, AFM, difração de raios-x e rendimento de NC isolados. De acordo com os resultados obtidos, não foi verificada diferença significativa do pré-tratamento para produção de NC. Assim, sugere-se que não é necessário um pré-tratamento mecânico e, com isso, o custo final da obtenção de NC pode ser diminuído. Palavras-chave: Xiloglucana. Nanocristais de celulose. Biossensores. Dengue. Filmes finos. Proteína NS1 / Abstract: Novel materials developed from renewable and natural sources with biocompatibility and low cost have receiving great attention from academia and industry. Two promises sources are cellulose nanocrystals (NC) and xyloglucan (XG) from Tamarindus indica. seeds. At present thesis, the main goal was the development of support materials based on these two polysaccharides. In according to published papers, this thesis was organised in three sections. The first (1), the adsorption behavior of XG on layers of bacterial cellulose nanocrystals (BCN) with four different sulfate content and zeta potential (?) values [0% SO3 -, using only HCl (? -4.8 mV); 0.42% SO3 -, using a mix of HCl and H2SO4 (? -39.6 mV); and 0.65% SO3 -, using only H2SO4 (? -45.6 mV)] was investigated. The adsorption was evaluated by several techniques (Langmuir isotherms, atomic force microscopy, contact angle, dynamic light scattering, ellipsometry and quartz crystal microbalance measurements). The experiments in water suspension and layer by layer (LbL) suggest that high sulfate substitution on BCN surface (0.65% SO3 -) impairs the original interaction with XG, resulting in lower maximum adsorbed amount (Qmax) of XG on BCN and unstable deposited layers with desorption. Therefore, 0.42% SO3 - did not significantly impair XG adsorption, and the greater colloidal stability than 0% SO3 - resulted in higher XG mass adsorption in water suspension and thin films with lower roughness, thickness and without desorption. However, initial test of XG films with NC subjected to oxidation with the TEMPO reagent presented delamination and were discarded for the production stage of twodimensional biosensors. In the second section (2), piezoelectric sensors were previously coated with thin films of bacterial cellulose nanocrystals (CN) to provide a more sensitive and adapted interface for the attachment of monoclonal immunoglobulin G (IgGNS1) and to favor specific detection of non-structural protein 1 (NS1) of dengue fever. The assembly of the immunochip surface was analyzed by atomic force microscopy (AFM) and the NS1 detection was followed by quartz crystal microbalance with (QCM-D) and without energy dissipation monitoring (QCM). The CN surface was able to immobilize IgGNS1, as confirmed by AFM topography and phase images along with QCM-D. The system was able to detect the NS1 protein in serum simulated in the range of 0.01- 10 ?g.mL-1, by both QCM and QCM-D. The limits of detection of the two devices were 0.1 ?g.mL-1 for QCM-D and 0.32 ?g.mL-1 for QCM. At last (3), in order to optimize and reduce the cost of piezoeletric immunochip, was proposed a study to optimize the hydrolysis procedure. For this, the influence of mechanical pretreatment before the hydrolysis procedure was verified on the pristine cellulose submitted to four different mechanical process: (1) magnetic stirring, (2) blender, and milled by (3) 20 and (4) 40 passages in supermasscolloider mill. All the samples were evaluated according to yield, morphology and size (atomic force microscopy), crystallinity (x-ray diffraction). Not all CNC differed in evaluated characteristics suggesting that, intense mechanical pretreatment are not exclusively required, prior to hydrolysis. Key-words: Xyloglucan. Celulose nanocrystals. Biossensors. Dengue. Thin films. NS1 protein.

Mosquito-borne diseases account for hundreds of thousands of deaths each year, highlighting the need for successful intervention methods, which can be targeted at either the pathogen, mosquito vector, or human host. This thesis aims to contribute to better intervention methods focused against malaria and dengue by either (i) improving available research tools, (ii) enhancing the understanding of a promising intervention method or (iii) designing new intervention candidates. Firstly, a superior method for studying in vitro malaria infection of the liver is shown, with implications for vaccine and drug interventions. Secondly, the biology of Wolbachia infection in Anopheles gambiae mosquitoes in the context of the target of rapamycin signalling cascade is investigated in an attempt to improve our understanding of its malaria inhibitory phenotype and inability to stably infect An. gambiae mosquitoes. Finally, an algorithm is developed for the design of a hypothesis driven conservation-based vaccine against viral mosquito diseases with a particular focus on dengue.

Orientador: Eduardo Maffud Cilli / Banca: Reinaldo Marchetto / Banca: Saulo Santesso Garrido / Banca: Pietro Ciancaglini / Banca: Luciana Malavolta Quaglio / Resumo: O vírus da dengue afeta milhões de pessoas a cada ano no mundo todo. O processo de infecção viral pela via endossomal é intermediada pela sequência 98 a 112 (DRGWGNGCGLFGKGG), conhecido como peptídeo de fusão, este segmento faz parte da glicoproteína E, localizado no envelope do vírus. Todos os flavivirus, incluindo os quatro sorotipos da dengue, apresentam esta sequência em regiões próximas, além de apresentarem alta identidade. Apesar de intensas pesquisas e o aumento da incidência de casos da dengue, não existem drogas antivirais específicas, até este momento, para o combate desta doença. Deste modo, a compreensão da interação do vírus com as células hospedeiras é importante na busca de novos fármacos. Neste sentido, este trabalho visou entender melhor o modo de ação do peptídeo de fusão da dengue e a importância de suas regiões laterais. O objetivo deste projeto teve por finalidade avaliar as contribuições das regiões laterais ao peptídeo de fusão, isto é, 88-97 e 113-123, em sua atividade, para os quatro sorotipos da dengue. A obtenção dos peptídeos foi realizada por meio da síntese em fase sólida. Os modelos de membrana utilizados foram micelas zwitteriônicas (LPC) e vesículas (PC ovo e POPG). Sabendo-se que a exposição desta sequência e, consequente, fusão da membrana é dependente do pH do meio, os estudos foram realizados em pHs 5,5 e 7,1. Nestes estudos, foram utilizadas as técnicas de Transferência de Energia de Ressonância de Föster (FRET), Dicroísmo Circular, Fluorescência, Monocamadas de Langmuir e BAM. O aminoácido triptofano foi usado como sonda para analisar a profundidade da inserção em miméticos de membrana. Os resultados mostraram que a SPFS foi útil, obtendo os materiais desejados. Avaliando a habilidade fusogênica dos 14 peptídeos estudados, observamos que cada sorotipo apresenta atividade diferente um do outro, sendo que os peptídeos do sorotipo 2 foram os que... / Abstract: Dengue virus affects millions of people worldwide every year. The process of viral infection via endosomal is mediated by the sequence 98-112 (DRGWGNGCGLFGKGG), known as the fusion peptide. This segment is part of the glycoprotein envelope of the virus. All flavivirus, including all four dengue serotypes, contain this fusion sequence and all serotypes present high sequence identity. Although intense researches, the dengue cases have increased and, up to date, there are no specific antiviral drugs to combat this disease. Thus, understanding the virus interaction with host cells is essential for the search and development of new drugs against the dengue virus. Therefore, this study craved a better understanding of the mode of action of the dengue fusion peptide sequence and the importance of its lateral regions. This project aimed to assess the contributions of the lateral regions of the fusion peptide (88-97 and 113-123 sequences) on its activity, for the four dengue serotypes. The synthesis of peptides was performed by solid phase peptide synthesis (SPPS). The membrane models used were zwitterionic micelles (LPC) and vesicles (egg PC and POPG). Since the exposure of this sequence and the resulting membrane fusion is dependent on pH, studies were performed in pH 5.5 and 7.1. In these studies, the techniques of Resonance Energy Transfer Föster (FRET), circular dichroism, fluorescence, Langmuir monolayers and BAM (Brewster angle microscopy) were used. The amino acid and natural fluorophore tryptophan was used as a probe to analyze the insertion depth of the fusion peptide in the membrane mimetic by fluorescence. The results showed that the SPPS was feasible, obtaining the desired materials. Assessing the fusogenic ability of 14 peptides studied, the data indicated that each serotype has different activity and the serotype 2 peptides presented the major interaction. The studies of interaction peptide/membrane mimetic indicated... / Doutor

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Humanas, Departamento de Geografia, 2008. / Submitted by Natália Cristina Ramos dos Santos (nataliaguilera3@hotmail.com) on 2009-09-15T12:24:18Z No. of bitstreams: 1 2008_ElaineCOliveira.pdf: 1382112 bytes, checksum: 632a6e23bb5cd3115dfbb049e532e771 (MD5) / Approved for entry into archive by Luanna Maia(luanna@bce.unb.br) on 2009-12-07T13:22:58Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2008_ElaineCOliveira.pdf: 1382112 bytes, checksum: 632a6e23bb5cd3115dfbb049e532e771 (MD5) / Made available in DSpace on 2009-12-07T13:22:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008_ElaineCOliveira.pdf: 1382112 bytes, checksum: 632a6e23bb5cd3115dfbb049e532e771 (MD5) Previous issue date: 2008 / Os objetivos principais deste trabalho foram investigar o surto de dengue no Distrito Federal no ano de 2002 e identificar os fatores ambientais e os padrões climáticos no período estudado que favoreceram a proliferação do mosquito Aedes aegypti. Para isso, foram utilizados dados da Secretaria de Estado de Saúde do Distrito Federal (SES/DF), Companhia de Saneamento Ambiental do Distrito Federal (CAESB) e Embrapa Cerrados. Para o processamento de tais dados, utilizou-se o software Spring 4.2. De acordo com os resultados, os indicadores climáticos, principalmente a temperatura do ar podem se configurar como fatores locais de risco e merecem maior atenção no monitoramento e controle da doença. _________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / The main objectives of this work were to investigate the dengue´s boom in the Federal District of Brazil in the year of 2002 and to identify environmental factors and climatic patterns that favoured the proliferation of Aedes aegypti mosquitoes. We used data from the State Secretariat of Health in the Federal District (SES/DF), Company for Environmental Sanitation of Federal District (CAESB) and Embrapa Cerrados. The data were processed in the SPRING 4.2 GIS software. According to the results, the climatic indicators, mainly the air temperature, presented high correlation with the local factors of risk and deserve higher attention in the desease monitoring and control.

p. 1-88 / Submitted by Santiago Fabio (fabio.ssantiago@hotmail.com) on 2013-04-29T20:08:20Z No. of bitstreams: 2 Tese_final_03_03_06-sec.pdf: 1176933 bytes, checksum: 4732a3b9f6c30648e6eab95b5a1ebb27 (MD5) APRESENTACAO1sec.pdf: 86251 bytes, checksum: 1cce3e3baefdfd417707e556ae897982 (MD5) / Approved for entry into archive by Maria Creuza Silva(mariakreuza@yahoo.com.br) on 2013-05-04T17:38:05Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Tese_final_03_03_06-sec.pdf: 1176933 bytes, checksum: 4732a3b9f6c30648e6eab95b5a1ebb27 (MD5) APRESENTACAO1sec.pdf: 86251 bytes, checksum: 1cce3e3baefdfd417707e556ae897982 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-05-04T17:38:05Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Tese_final_03_03_06-sec.pdf: 1176933 bytes, checksum: 4732a3b9f6c30648e6eab95b5a1ebb27 (MD5) APRESENTACAO1sec.pdf: 86251 bytes, checksum: 1cce3e3baefdfd417707e556ae897982 (MD5) Previous issue date: 2006 / Este trabalho representa parte dos requisitos exigidos pelo Colegiado de Cursos do Programa de Pós-Graduação do Instituto de Saúde Coletiva (ISC/UFBA) para obtenção do grau de Doutor em Saúde Pública, área de concentração Epidemiologia. A escolha do objeto de estudo, dengue, deveu-se à importância que a reemergência destas infecções no Brasil, evidenciada pela magnitude com que a doença vinha e continua ocorrendo, bem como a persistência da circulação desse vírus a despeito dos expressivos recursos financeiros que vinham sendo despendidos para as atividades de combate ao Aedes aegypti são justificativas, mais que suficientes para a realização desta avaliação. Em 2001, o Centro Nacional de Epidemiologia (CENEPI), órgão do Ministério da Saúde responsável pela vigilância e controle de doenças, lançou o Edital nº 2, cuja Linha Temática nº01 teve como objetivo avaliar o impacto do Programa de Erradicação do Aedes aegypti nos diferentes cenários de infestação. Este Programa, implantado em 1997, promoveu ajustes operacionais (PEAa) à proposta elaborada em 1996 pelo Conselho Nacional de Saúde em função de dificuldades política, administrativas e financeiras, reduzindo o escopo de ações, não contemplando a integralidade da proposta original. O projeto apresentado pelos pesquisadores do Programa Integrado de Investigação em Doenças Transmissíveis e Carências Nutricionais do ISC/UFBA e da Faculdade de Saúde Pública da USP, do qual participei desde o início de sua elaboração, foi o vencedor do Edital. Esta Tese de Doutorado representa o resultado final dos estudos desenvolvidos para atender ao solicitado pelo CENEPI. Para superar a complexidade de um estudo de avaliação de um programa que tem como objetivo finalístico eliminar, ou pelo menos, reduzir a incidência de uma doença, cuja cadeia epidemiológica envolve três diferentes populações de seres vivos que habitam espaços profundamente modificados pelo homem, optou-se por empregar distintos desenhos de estudos epidemiológicos. A primeira estratégia foi um estudo de agregados espaço-temporal tratando-se de uma avaliação do tipo ?adequação?, onde se procura observar se a tendência da evolução da doença esta ocorrendo no sentido esperado. A segunda, refere-se a um estudo de caso que avalia a efetividade do PEAa na ocorrência do dengue e a terceira constituiu-se de um inquérito soroepidemiológico da infecção pelo vírus produtor desta doença. Mediante estas estratégias de investigação, atendeu-se aos propósitos do referido Edita,l demonstrando empiricamente a real efetividade do Programa e fatores associados com a evolução da doença, que estão apresentados sob a forma de três artigos científicos. No primeiro artigo denominado, ?Dengue: distribuição espaçotemporal e relação com indicadores sociais, demográficos e ambientais. Brasil, 1997-2002?, descreve-se a distribuição espacial e evolução temporal da epidemia de dengue nos municípios brasileiros, analisando fatores associados à dinâmica de ocorrência da doença. Um estudo intitulado ?Avaliação do programa de combate ao Aedes Aegypti sobre a incidência de casos notificados de dengue em alguns municípios brasileiros, 1996-2002? constitui-se no segundo artigo, no qual se avalia a efetividade do Programa na incidência da doença em quatro municípios selecionados (?casos? e ?comparação?) obedecendo a critérios prédefinidos que incluíram variáveis epidemiológicas, climáticas e demográficas. O terceiro artigo, Avaliação da efetividade do programa de combate ao Aedes aegypti sobre a circulação do vírus do dengue é um estudo realizado em candidatos à doação de sangue, residentes naqueles municípios. Vale referir, entretanto, que em razão da hipótese de baixa efetividade do PEA já ter sido confirmada pela realidade concreta no momento de início da avaliação, o interesse do estudo passou a ser direcionado para verificar se a baixa efetividade estava relacionada às dificuldades técnico-operacionais ou às questões da fragilidade da tecnologia disponível para o controle da doença. / Salvador

CAVALCANTI, Luciano Pamplona de Góes. Potencial de cinco espécies de peixe como método de controle biológico de larvas de Aedes aegypti, em condições de laboratório, no Ceará. 2006. 117 f. Dissertação (Mestrado em Saúde Pública)-Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2006. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2011-11-08T12:05:40Z No. of bitstreams: 1 2006_dis_lpgcavalcanti.pdf: 2793222 bytes, checksum: 009a5da9c50bdada3753b6155a5032de (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2011-12-05T12:21:20Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2006_dis_lpgcavalcanti.pdf: 2793222 bytes, checksum: 009a5da9c50bdada3753b6155a5032de (MD5) / Made available in DSpace on 2011-12-05T12:21:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2006_dis_lpgcavalcanti.pdf: 2793222 bytes, checksum: 009a5da9c50bdada3753b6155a5032de (MD5) Previous issue date: 2006 / Dengue fever has been shown to be one of the main public health problems in Ceará the principal vector is the Aedes aegypti mosquito In recent decades chemical control has been under question, both due to the insect’s selective resistance capacity and for environmental reasons Thus the use of biological alternatives has been encouraged worldwide Consequently the objective of this study was to evaluate 5 fish species that have been used as an alternative for the control of Aedes aegypti larvae in domestic water tanks in the State of Ceará Brazil The species evaluated were Betta splendens Trichogaster trichopteros Astyanax fasciatus e Poecilias reticulata and sphenops Larvae-eating capacity prefered predation locations and resistence to chlorine were evaluated All five species had a high larvae-eating capacity; Betta splendens and Poecilias were noteworthy for their larger capacity in relation to weight and body size Astyanax fasciatus and Betta splendens appeared to survive well without the presence of larvae or artificial food in the domestic water tanks whilst Poecilias presented a significant weight loss during the 5-week evaluation Regarding the location of predation it was observed that Poecilias spent most of the time at the surface whereas Trichogaster and Betta had greater mobility in the container As to chorine resistance Poecilias had a significant mortality when exposed to concentrations of 0.5mg/litre while other species of Betta and Trichogaster were able to survive concentrations up to 4.00mg/litre Therefore it was possible to demonstrate that the 5 species can be used as biological control alternatives although each one is indicated for different water tanks due mainly to the food available and the chlorine concentrations. / O dengue vem se mostrando como um dos principais problemas de saúde pública no Ceará e o mosquito Aedes aegypti é seu principal vetor Nas últimas décadas o controle químico vem sendo questionado tanto pela capacidade de seleção de resistência dos insetos quanto por questões ambientais Com isso o uso de alternativas biológicas vem sendo incentivado no mundo Desta forma o objetivo deste trabalho foi avaliar 5 espécies de peixe que vem sendo utilizados como alternativa de controle para larvas de Aedes aegypti em depósitos domiciliares no Estado do Ceará As espécies avaliadas foram o Betta splendens Trichogaster trichopteros Astyanax fasciatus e Poecilias reticulata e sphenops Foram avaliadas capacidade larvófaga locais preferenciais de predação e resistência ao cloro Todas as cinco espécies apresentaram uma elevada capacidade larvófaga destacando-se o Betta splendens e os Poecilias por apresentarem as maiores capacidades em relação ao peso e tamanho corporal As espécies Astyanax fasciatus e Betta splendens parecem sobreviver bem sem a presença de larvas ou alimentos artificiais nos reservatórios domiciliares enquanto os Poecilias apresentam uma perda significativa de peso durante as 5 semanas de avaliação Em relação ao local de predação foi possível observar que os Poecilias permaneceram a maior parte do tempo na superfície enquanto o Trichogaster e o Betta apresentaram uma maior mobilidade no reservatório Quanto à resistência ao cloro mostrou-se que as espécies de Poecilias já apresentam uma significativa mortalidade quando expostos à concentrações de 0,5mg/litro enquanto alguns espécimens do Betta e do Trichogaster mostraram capacidade de sobreviver até concentrações de 4,00mg/litro Desta forma foi possível demonstrar que as 5 espécies podem ser utilizadas como alternativa de controle biológico entretanto cada uma se apresenta mais indicada a depósitos diferentes devido principalmente a oferta de alimentação e concentração de cloro.

Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-06-13T13:46:36Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 277021 bytes, checksum: b140d81ef2bf2924ec3c8af245e6a87d (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-13T13:46:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 277021 bytes, checksum: b140d81ef2bf2924ec3c8af245e6a87d (MD5) Previous issue date: 2003-03-13 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / A dengue é uma doença febril, exantemática aguda considerada a mais importante arbovirose que afeta o homem. O diagnóstico laboratorial da dengue é realizado após suspeita clínica e as técnicas imunoenzimáticas, principalmente ELISA, são as mais difundidas, detectando anticorpos das classes IgM e IgG. Este trabalho teve como objetivo o desenvolvimento de uma técnica de hemaglutinação passiva de fácil execução, rápida e eficiente na detecção de anticorpos antidengue em sangue humano total. As próprias hemácias do paciente foram utilizadas como antígeno figurado, sendo o anti- soro contra hemácias humanas produzido em coelhos e purificado por precipitação e cromatografia. As imunoglobulinas G obtidas foram digeridas com o uso de papaína para a obtenção de fragmentos Fab. Após a separação, os fragmentos foram ligados às partículas virais de dengue, previamente purificadas em gradiente de densidade contínuo de tartarato de sódio e potássio, utilizando o glutaraldeído como agente acoplador. Demonstrou-se que a estratégia de conjugação dos fragmentos Fab à partícula viral é factível com uso de glutaraldeído, contudo, há necessidade do desenvolvimento de estudos para a verificação do grau de eficiência de conjugação. O método de conjugação adotado não impediu os fragmentos Fabs de se ligarem às hemácias e nem os anticorpos antidengue de reconhecerem seus epítopos na partícula viral. A utilização de anticorpos monoclonais, ou sistemas de expressão para proteínas virais assim como para fragmentos de anticorpos facilitariam as etapas de montagem do conjugado, além de otimizar o funcionamento da técnica. Em conclusão, a detecção de anticorpos antidengue em amostras de soro e hemácias foi possível a partir do método proposto. / Dengue is an acute febrile illness considered the most important arthropod-borne viral disease affecting humans. Currently most laboratory diagnoses of dengue are made after some clinical observations and use of immunoenzimatic techniques, notably ELISA can reliably detect small amounts of IgM and IgG classes of antibodies and have deserved worldwide acceptance. However, ELISA is a somewhat laborious, time-consuming technique and requires a expensive equipment. The present work was carried out to develop a feasible, inexpensive, quick and efficient passive hemaglutination technique for detection of anti-dengue antibodies in human whole blood, using the patient's blood cells as figured antigen. Antiserum against human erythrocytes was produced in rabbits and the IgG was purified by precipitation and chromatographic methods. IgG was then fractioned by papain digestion to yield Fab fragments. After separation, these fragments were linked by glutaraldehyde to the dengue viral particles successfully purified following a protocol which included centrifugation through a sodium and potassium tartarate density- gradient. However, the glutaraldehyde-mediated step need further work to establish an efficient degree of conjugation. The method did not alter either the Fab binding to erythrocytes or the recognition of viral epitopes by anti-dengue antibodies. Possibly, the use of monoclonal antibodies or a suitable system for protein expression could improve the conjugation step and help to optimize the routine testing of samples. In conclusion, a simple technique has been demonstrated to be suitable for detection of anti-dengue antibodies in samples of human blood or erythrocytes plus serum.

ROQUE, C. R. Avaliação da detecção de antígenos NS1 e anticorpos IgM em amostras biológicas de vísceras in natura de pacientes que evoluíram para óbito por suspeita de dengue. 2017. 69 f. Dissertação (Mestrado em Patologia) - Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2017. / Submitted by PPG Patologia (pgpatol@ufc.br) on 2017-08-07T12:11:59Z No. of bitstreams: 1 2017_dis_crroque.pdf: 1123935 bytes, checksum: ea84be3a53ebfef0abfedabd1942a936 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-08-07T12:54:55Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_dis_crroque.pdf: 1123935 bytes, checksum: ea84be3a53ebfef0abfedabd1942a936 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-07T12:54:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_dis_crroque.pdf: 1123935 bytes, checksum: ea84be3a53ebfef0abfedabd1942a936 (MD5) Previous issue date: 2017-02-24 / Dengue is caused by an arbovirus of the Flaviviridae family, genus Flavivirus. Cases of infection with fatal evolution began to be reported from the introduction of DENV-2 in the state of Ceará in 1994. The study of these cases is necessary to know the causes that contribute to the death and the post-mortem diagnosis of dengue can contribute. The objective of the work was to evaluate the detection of NS1 antigen and IgM antibodies for the diagnosis of dengue in biological samples of fresh viscera collected from patients who died. A total of 109 patients were included from 2013 and 2014 whose samples were sent to LACEN/CE to perform laboratory tests to confirm death due to suspected dengue and they had at least one positive result or reagent in samples of viscera in formaldehyde, blood (serum) and/or CSF in the exams IgM ELISA, NS1 ELISA, RT-PCR, and Immunohistochemistry. The mean age of the patients was 33.46 ± 21.18 (5 days to 95 years old). The IgM ELISA in the blood showed a positivity of 21.1%; in the CSF showed a positivity of 22.0%; in the viscera showed a positivity of 16.5%. Of the positive IgM samples in viscera, 75.0% were also CSF positive IgM, and 78.3% of positive IgM samples in viscera were also positive IgM in the blood. There were more NS1 positive samples in the blood than in the CSF and in viscera. CSF and blood were the samples with the highest positivity of IgM antibodies. However, IgM antibody detection was also possible in samples of fresh viscera. The immunohistochemistry technique in preserved formalin material showed a higher positivity for the detection of dengue antigens, but it was also possible to detect NS1 antigen in fresh viscera samples. The detection of IgM antibody and NS1 antigen in the fresh viscera samples helped to improve the post-mortem diagnosis of dengue and it should be considered as another approach in the diagnosis of fatal dengue. / A dengue é causada por um arbovírus da família Flaviviridae, gênero Flavivirus. A partir da introdução do DENV-2 no Ceará, em 1994, casos de infecção com evolução fatal começaram a ser reportados. O estudo desses casos é necessário para que se conheçam as causas que contribuem para o óbito e o diagnóstico da dengue pos-mortem pode contribuir. O objetivo do trabalho foi avaliar a detecção de antígeno NS1 e de anticorpos IgM para diagnóstico de dengue em amostras biológicas de vísceras in natura, coletadas de pacientes que evoluíram para óbito. Foram incluídos 109 pacientes, dos anos de 2013 e 2014, cujas amostras foram encaminhadas ao LACEN/CE para realização de exames laboratoriais para confirmação de óbito por suspeita de dengue e que apresentaram pelo menos um resultado positivo ou reagente em amostras de vísceras em formol, sangue (soro) e/ou líquor nos exames: ELISA IgM, ELISA NS1, RT-PCR, e Imunohistoquímica. A média de idade dos pacientes foi de 33,46 ± 21,18 (5 dias a 95 anos). O ELISA IgM no sangue apresentou uma positividade de 21,1%; no líquor apresentou uma positividade de 22,0%; nas vísceras apresentou uma positividade de 16,5%. Das amostras de IgM positivo em vísceras, 75,0% foram também IgM positivo no líquor e 78,3% das amostras de IgM positivo em vísceras foram também IgM positivo no sangue. Houve mais amostras de NS1 positivo no sangue do que no líquor e vísceras. As amostras onde houve maior positividade de anticorpos IgM foram líquor e sangue, entretanto a detecção de anticorpo IgM também foi possível em amostras de vísceras in natura. A técnica de imunohistoquímica, em material de vísceras conservadas em formol, apresentou uma maior positividade para a detecção de antígenos de dengue, mas também foi possível detectar antígeno NS1 em amostras de vísceras in natura. A detecção de anticorpo IgM e de antígeno NS1 nas amostras de vísceras in natura contribuiu para melhorar o diagnóstico de dengue post-mortem, devendo ser considerada como mais uma abordagem no diagnóstico de casos fatais de dengue.

Submitted by Tatiana Silva (tsilva@icict.fiocruz.br) on 2012-11-19T17:36:07Z No. of bitstreams: 1 nildimar_a_honorio_ioc_bp_0038_2009.pdf: 5779614 bytes, checksum: f9c972b4d2b1eb9d105b918c0a7b0fc4 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-11-19T17:36:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 nildimar_a_honorio_ioc_bp_0038_2009.pdf: 5779614 bytes, checksum: f9c972b4d2b1eb9d105b918c0a7b0fc4 (MD5) Previous issue date: 2009 / Fundação Oswaldo Cruz.Instituto Oswaldo Cruz. Rio de janeiro, RJ, Brasil / A transmissão do dengue e a densidade populacional do Aedes aegypti apresentam-se de forma heterogênea na cidade do Rio de Janeiro. Os padrões de transmissão do dengue são determinados pela combinação de fatores que envolvem o hospedeiro humano, o vírus, o vetor e o ambiente. Objetivou-se estudar os indicadores de distribuição espacial e temporal do Ae. Aegypti e avaliar sua relação com variáveis climáticas, ambientais e transmissão de dengue em três áreas do Rio de Janeiro com diferentes padrões urbanísticos: urbano, suburbano e favela. Nessas áreas foram implantadas, aleatoriamente, 40 ovitrampas e 40 MosquiTRAPs. As coletas foram realizadas semanalmente, de setembro de 2006 a março de 2008, período correspondente a uma grande epidemia no Rio de Janeiro. Soros de indivíduos residentes nas três áreas de estudo foram coletados de julho a novembro de 2007 e fevereiro a abril de 2008. em nossos resultados obtivemos índices qualitativos e quantitativos característicos de um padrão sazonal da dinâmica populacional do vetor. A ovitrampa apresentou maior sensibilidade do que a MosquiTRAP para detectar a presença do vetor e discriminar áreas de alta infestação na série temporal. Espacialmente, contudo, as duas armadilhas revelaram padrões distintos. As ovitrampas só distinguiram áreas de risco relativo alto ou baixo em locais com pouca infestação. A MosquiTRAP identificou áreas com distintos riscos relativos, independente da densidade do vetor.Pontos estratégicos foram detectados e mapeados, apresentando alta heterogeneidade na produtividade de ovos e adultos de Ae. Aegypti; as chuvas acontecidas de 3 a 5 semanas antes exerceram um efeito positivo sobre a den sidade de ovos e adultos nas áreas; a temperatura média semanal > 22-24°C mostrou-se associada à alta abundancia do vetor e ao aumento do risco de transmissão de dengue. Durante a epidemia de dengue em 2008, constatamos a co-circulação dos sorotipos DENV-2 e DENV-3 e a predominância das infecções recentes de dengue em crianças <15 anos de idade. Por outro lado, não observamos correçãoes assintomáticas em todas elas, o que sugere a ocorrência de uma circulação silenciosa dos vírus dengue. Identificamos associação entre idade e soroprevalência de dengue nas áreas urbana e de favela. Os resultados da soroprevalencia apontaram para maior geterogeneidade espacial do dengue nas áreas suburbana e de favela, com maior soroprevalência nos pontos dos bairros com intensa atividade comercial e movimentação humana. Estudos longitudinais espaço-temporais do dengue e do Ae. Aegypti em áreas urbanas propiciam melhor entendimento da dinâmica de transmissão e oferecem subsídios para a implementação de estratégias mais efetivas de controle do vetor. / The transmission of dengue fever and the population density of the Aedes aegypti are heterogeneously in Rio de Janeiro. Dengue transmission patterns are determined by a combination of factors involving the human host, the virus, the vector and the environment. Objective to study the spatial distribution and temporal indicators of Ae. Aegypti and evaluate its relationship with environmental, climatic variables and transmission of dengue in three areas of Rio de Janeiro with different urbanistic standards: urban, suburban and slum. In these areas were deployed, randomly, ovitrampas and 40 MosquiTRAPs 40. The collections were held weekly, September 2006 and March 2008, corresponding to a large epidemic in Rio de Janeiro. Sera from individuals residing in the three study areas were collected from July to November 2007 and February to April 2008. in our results we have qualitative and quantitative characteristic indexes of a seasonal pattern of population dynamics of the vector. The ovitrampa showed greater sensitivity than the MosquiTRAP to detect the presence of the vector and discriminate high infestation areas in time series. Spatially, however, the two traps showed distinct patterns. The ovitrampas relative risk areas distinguished only high or low in places with little infestation. The MosquiTRAP has identified areas with different relative risks, regardless of the density of vector.Strategic points were detected and