Submitted by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com) on 2014-10-20T17:09:26Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Cássia Silva de Miranda Godoy - 2012.pdf: 2252636 bytes, checksum: cdb569738a5d271a5bc6ac26e7d4dc4e (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Jaqueline Silva (jtas29@gmail.com) on 2014-10-20T17:39:39Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Cássia Silva de Miranda Godoy - 2012.pdf: 2252636 bytes, checksum: cdb569738a5d271a5bc6ac26e7d4dc4e (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-10-20T17:39:39Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Cássia Silva de Miranda Godoy - 2012.pdf: 2252636 bytes, checksum: cdb569738a5d271a5bc6ac26e7d4dc4e (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2012-03-23 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Goiás - FAPEG / Acinetobacter baumannii (Ab), has an important role in healthcare-associated infections, present a rapid global and emerging multidrug-resistant (MDR) strains, affecting many countries. In Brazil, Ab is responsible for outbreaks infections in intensive care units (ICUs) since 1996, with high rates of antimicrobial resistance. This was a descriptive cohort study of adult infected with Ab during the period of June to December of 2010, that evaluated the clinical and epidemiological profile of infections caused by Ab and analyzed genetically, by pulsed field gel electrophoresis (PFGE), clinical isolates from patients admitted in five ICUs of the Municipality of Goiania. We identified 64 cases of patient infected or colonized with Ab during the study period, 84 samples culture positive for Ab with a global infection rate of 4.8%. Infection incidence at each hospital was as follows: 10 % in ICU-1, 4.3% in ICU-2, 7.8% in ICU-3, 1.3% in ICU-4, and 7.5 % in ICU-5. The mean age of patients was 53.2 years (sd=19) and 59.4% (38) were male. Symptomatic infections occurred in 90.6% of the cases. The most frequent site of infection was pulmonary (53.1%), followed by surgical site (10.9%), and urinary tract (7.8%). The most common underlying diseases were neoplasia (34.4%) and AIDS (17.2%). Most of the patients infected with Ab (98.4%) had received antimicrobial therapy previously. The most frequently used drugs were cephalosporins (71.4%), carbapenems (50.8%), glycopeptides (46.0%), and fluoroquinolones (33.3%). Among the invasive procedures realized prior to Ab infection, intravascular catheters and vesical catheters where the most frequent (93.7%). The culture results from the isolate of each patient revealed that carbapenems resistance was 73.4%, ampicillin-sulbactam 60.9%, amikacin 20.3%, polymyxins 6.2%, tigecycline 3.1%. The overall mortality rate was 79.7% and related mortality rate to Ab infection was 67.2%. PFGE analysis of the isolates from 56 patients demonstrated the dissemination of genetically related clones within the ICU and between the different ICUs, and the identification of a major outbreak of MDR Ab in four out of the five analyzed ICUs involving 12 patients. In conclusion a high rate of antimicrobial resistance was detected as well as a high mortality rate among ICU patients infected with Ab, requiring stronger and more efficient measures to control this agent, as well as urgent measures are needed for the rational utilization of antibiotics in ICUs. / O Acinetobacter baumannii (Ab) tem importante papel nas infecções relacionadas à assistência à saúde e apresenta emergência rápida e global de cepas multidrogarresistentes (MDR), atingindo vários países. No Brasil, o Ab é responsável por surtos de infecções em unidades de terapia intensiva (UTIs) desde 1996, com elevadas taxas de resistência aos antimicrobianos. Esse estudo foi delineado como uma coorte descritiva de pacientes adultos infectados por Ab no período de junho a dezembro de 2010. Avaliou o perfil clínico e epidemiológico das infecções causadas por Ab e analisou geneticamente, por eletroforese em gel de campo pulsado (PFGE), os isolados clínicos destes pacientes em cinco UTIs de Goiânia e Aparecida de Goiânia. Foram identificados 64 casos de pacientes infectados ou colonizados por Ab no período do estudo, 84 amostras de cultura positivas para Ab e taxa global de infecção de 4,8 %. A frequência de infecções por UTIs foi de: 10% na UTI-1; 4,3% na UTI-2; 7,8% na UTI-3 e 1,3% na UTI-4 e 7,5% na UTI-5. A média de idade dos pacientes foi de 53,2 anos (dp=19) sendo 59,4% (38) do sexo masculino. Infecção sintomática ocorreu em 90,6% dos casos. O sítio de infecção mais frequente foi o pulmonar com 53,1%, seguido de infecção do sítio cirúrgico 10,9% e trato urinário 7,8%. As doenças de base mais comuns foram neoplasia (34,4%) e AIDS (17,2%). Dos pacientes com infecção pelo Ab, 98,4% receberam antibacteriano prévio. Os antibacterianos mais usados foram: cefalosporinas 71,4% (45); carbapenêmicos 50,8% (32), glicopeptídeos 46,0% (29) e fluorquinolonas 33,3% (21). Dos procedimentos invasivos realizados previamente à infecção pelo Ab, cateter vascular central e sondagem vesical de demora (93,7%) foram os mais comuns. A letalidade global foi de 79,7% (51/64), e a relacionada às infecções pelo Ab foi de 67,2% (39/58). Avaliando os resultados de cultura positiva, a resistência aos carbapenêmicos foi de 73,4%, à ampicilina/sulbactam de 60,9% (39/64), amicacina de 20,3% (13/64), polimixinas de 6,2% (4/64) e tigeciclina de 3,1% (2/64). A análise por PFGE das isolados bacterianos dos pacientes (56), demonstrou a disseminação clonal de Ab dentro das UTIs, e entre as diferentes UTIs, com identificação de um surto por Ab MDR entre quatro das cinco UTIs investigadas no período do estudo, envolvendo 12 pacientes. Constatamos alto índice de Ab MDR e alta letalidade nas UTIs avaliadas, com necessidade de intensificar o controle deste agente, além de racionalização do uso de antimicrobianos nas UTIs.

O resultado deste estudo foi dois artigos relacionados às lesões intestinais encontradas e presença de agentes associados a infecção por PCV2 e um terceiro artigo sobre a associação entre a presença de lesões histopatológicas em diferentes porções do trato intestinal e a carga viral presente nestas regiões e nas fezes. O primeiro artigo apresenta as lesões macroscópicas e microscópicas encontradas em 79 animais da fase de crescimento. As principais lesões macroscópicas foram: aumento de tamanho dos linfonodos mesentéricos (56), enterite necrótica (24), edema mesentérico (20), linfangectasia (15) e espessamento da parede do íleo (5). Marcação IHQ anti-PCV2 foi associada com depleção de células caliciformes (24), atrofia e fusão de vilosidades do íleo (18) e dilatação de vasos linfáticos (11). Foi observada a presença de co-infecções por Escherichia coli (5) Lawsonia intracellularis (1), Brachyspira spp.(4), Salmonella spp. (17), rotavírus (6) e calicivírus entérico (6). O segundo artigo avaliou 63 casos de enterite necrótica, nos quais o cólon foi o principal local onde foi observada necrose, aparecendo em 55 casos. Em 24 casos observou-se co-infecção de PCV2 e Salmonella spp. As alterações descritas: depleção de células caliciformes, índice apoptótico elevado em enterócitos do cólon, e marcação de IHQ positiva no citoplasma de enterócitos sugerem o envolvimento de PCV2 nos casos de enterocolite necrótica. A carga viral de PCV2 no trato intestinal, fezes e sangue de suínos, avaliada pela técnica de PCR em tempo real, associada com lesões histológicas e marcação de IHQ, bem como a interpretação destes resultados foi detalhadamente descrita no terceiro artigo. / The result of this study are presented in two articles describing intestinal lesions and the presence of associated agents with PCV2 and a third article that describes the association between the presence of histopathological lesions in different areas of the intestinal tract and viral load present in those areas and in the feces. The first report showed macroscopical and microscopical lesions in samples collected from 79 growing pigs. The main macroscopical lesions were: enlargement of mesenteric lymph-nodes (56), necrotic enteritis (24), mesenteric edema (20), limphangectasy (15) and thickening of the ileal wall (5). Immunohistochemistry (IHC) staining anti-PCV2 was associated with depletion of goblet cells (24), villous fusion and atrophy of the ileum (18) and dilatation of lymphatic vessels (11). It was observed the presence of co-infections with Escherichia coli (5) Lawsonia intracellularis (1), Brachyspira spp. (4), Salmonella spp. (17), rotavirus (6) and enteric caliciviruses (6). The second article evaluated 63 cases of necrotic enteritis, in which the colon was the main target of necrotic lesions, observed in 55 cases. In 24 cases co-infection with PCV2 and Salmonella spp. was observed. The main findings described: depletion of goblet cells, high apoptotic rate in colon enterocites and positive anti-PCV2 IHC staining in cytoplasm of enterocites suggests the involvement of PCV2 in cases of necrotic enterocolitis. The viral load of PCV2 in intestinal tract, feces and blood of swine, associated with histological lesions and IHC staining, evaluated by Real time PCR technique, as well as the interpretation of these results were described in details in the third article.

A mastite bovina é comprovadamente um dos maiores problemas atuais da pecuária leiteira no Brasil e no mundo, acarretando ônus aos produtores, à indústria e ao consumidor final. Foram analisadas 240 amostras de leite proveniente de animais com mastite clínica e de animais com mastite subclínica, criados em propriedades leiteiras de alta produção, da região do Planalto Médio, Rio Grande do Sul. Houve isolamento de 250 agentes bacterianos em 218 amostras (90,8%) e 65 agentes leveduriformes em 39 amostras (16,25%). Foram identificados 10 gêneros e 12 espécies de bactérias, sendo os gêneros Staphylococcus, Corynebacterium e Nocardia responsáveis por 88% dos isolados. Foram identificados 08 gêneros (29 espécies) de leveduras além de 02 gêneros de fungos semelhantes a leveduras (04 espécies), sendo os gêneros Candida, Pichia, Cryptococcus e Rhodotorula responsáveis por 80% das espécies isoladas.Apenas 03 amostras apresentaram crescimento puro de leveduras, o restante estando associado com isolamentos bacterianos, o que demonstra uma importante relação entre fungos e bactérias na etiologia das mastites. Mais de 90% dos agentes leveduriformes isolados tiveram crescimento em temperaturas acima de 37ºC, demonstrando seu potencial patogênico. Verificou-se que a prevalência de mastite fúngica na região é significante e fortemente relacionada com a presença de agentes bacterianos, o tratamento inadequado com produtos antimicrobianos e a saúde do úbere. / The bovine mastitis is one of the largest problems of dairy herds in Brazil and all over the world, resulting in losses to producers, to the industry and to the final consumer. High production dairy herds were analyzed in Planalto Médio, Rio Grande do Sul, were 240 samples with clinical and subclínica mastitis were collected. There was the isolation of 250 bacterial agents in 218 samples (90,8%) and 65 yeast organisms in 39 samples (16,25%). There was identification of 10 genera and 12 species of bacteria, and 88% of the isolates were from genera Staphylococcus, Corynebacterium and Nocardia. There was the identification of 08 genera (29 species) of yeasts and 02 genera of yeast-like organisms (04 species), and 80% of the isolates were from genera Candida, Pichia, Cryptococcus and Rhodotorula. Only 03 samples presented pure growth of yeasts, the remaining was associated with bacterial isolations, which demonstrates an important relationship between yeasts and bacteria in the etiology of the mastitis. More than 90% of the yeast isolates had growth in temperatures above 37ºC, which demonstrates their pathogenic potential. It was verified that in this particularly region, the occurrence of mastitis caused by yeasts has a significant importance and are closely related with the bacterial agents' presence, the inadequate treatment with antibiotic products and udder’s health.

Submitted by Cássio da Cruz Nogueira (cassionogueirakk@gmail.com) on 2017-09-11T18:26:54Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese_CaracterizacaoFenotipicaMoleculas.pdf: 2228766 bytes, checksum: 4c3cd527165e56f0d24fca2bd0532ff3 (MD5) / Approved for entry into archive by Irvana Coutinho (irvana@ufpa.br) on 2017-09-25T13:48:39Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese_CaracterizacaoFenotipicaMoleculas.pdf: 2228766 bytes, checksum: 4c3cd527165e56f0d24fca2bd0532ff3 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-25T13:48:39Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese_CaracterizacaoFenotipicaMoleculas.pdf: 2228766 bytes, checksum: 4c3cd527165e56f0d24fca2bd0532ff3 (MD5) Previous issue date: 2015 / Introdução: A infecção causada pelo Micobacterium leprae leva a uma complexa relação entre o parasito e o hospedeiro, baseada principalmente nos aspectos imunopatológicos, que podem resultar na forma virchoviana, apresentando um perfil de células Th2, ou no pólo tuberculóide que apresenta um padrão imunológico Th1. Justificativa: Neste processo se fez necessário analisar participação do endotélio através do perfil de expressão de moléculas de adesão, buscando assim o entendimento de como a migração celular ocorre na hanseníase. Objetivo Geral: determinara o perfil da expressão de moléculas de adesão e a participação do endotélio na seleção de células para a formação do infiltrado inflamatório visto na doença. Objetivos específicos: quantificar a expressão das moléculas de adesão ICAM-1; ICAM-2, VCAM-1; VLA-4; E-selectina; P-selectina. Analisar a expressão das moléculas de adesão de acordo com o tipo ao padrão do infiltrado histopatológico nos polos da doença. Avaliar de forma quantitativa a presença das moléculas de adesão e correlacionar estas adesinas com os diferentes padrões celulares vistos nos polos da infecção. Metodologia: as amostras de pele foram seccionadas e as porções retiradas foram submetidas a análise imunohistoquímica através de anticorpos monoclonais contra os marcadores ICAM-1; ICAM-2 ; VCAM-1; VLA-4; P-selectina e a E-selectina. Resultados: A imunomarcação das adesinas ICAM-1, VCAM-1 e VLA-4 demonstravam uma maior presença destas moléculas no endotélio da forma tuberculóide (TT) da infecção. O ICAM-1 apresentou-se com 9,92±1,11 células/mm2 na forma TT, enquanto que o polo LL apresentou 5,87±1.01 células/ mm2. O VCAM-1 apresentou uma média 18,28±1,46 células/mm2 na forma TT, enquanto o virchoviana apresentou em média 10,67±1,25 células/ mm2. A análise da E-Selectina demonstrou que no polo tuberculóide da infecção há uma quantidade (13,00±1.59 células/mm2), significativamente (p<0.0001) maior da E-Selectina em comparação ao polo virchoviano que apresentou apenas 2,58±0.38 células/mm2. Discussão: o aumento das imunoglobulinas ICAM-1 e VCAM-1 resultam no fortalecimento da sinalização de transmigração tecidual, através da relação entre o LFA-1 com o seu ligante endotelial o ICAM-1. Este mesmo mecanismo está envolvido no fortalecimento da relação entre o endotélio e migração de células com o perfil de Th1 em direção ao tecido. O VLA-4 estar diretamente ligado a infiltração de células da linhagem Th1, sendo o mediador do aumento da presença de células T CD4+ no tecido inflamado. A falta do VLA-4, e da imunoglobulina VCAM-1 pode resultar também em uma inibição da adesão de linfócitos Th1. Devemos ressaltar ainda que a deficiência do ICAM-1 e do VCAM-1 influencia a migração dos linfócitos T CD8+ modificando assim a presença de células citotóxicas no tecido. Conclusão: o estudo fortalece o papel do endotélio como um dos responsáveis pelo perfil de células encontradas no tecido. Correlacionando a expressão das moléculas de adesão a seletividade na migração de células, o que resulta em uma influencia direta sobre a resposta imunológica presente na hanseníase. / Introduction: The infection caused by Mycobacterium leprae leads to a complex relationship parasite-host relationship based mainly on immunopathological aspects, that may result in lepromatous form, preseting a Th2 cell profile, or in the tuberculoid pole presenting a Th1 immune pattern. Rationale: In this process it was necessary to analyze the participation of the endothelium through expression profile of adhesion molecules, thus trying to understand how cell migration occurs in leprosy. Main Objective: the study will determine the profile of expression of adhesion molecule and the participation of the endothelium in the selection of cells to the formation of the inflammatory infiltrate seen in the disease. Specific objectives: to quantify the expression of the adhesion molecules ICAM-1; ICAM-2, VCAM-1; VLA-4; E-selectin; P-selectin. To analyze the expression of adhesion molecules according to the standard histopathological type infiltrate the poles of the disease. Quantitatively evaluate the presence of adhesion molecules and correlate these adhesins with different cell patterns seen at the poles of the infection. Methodology: The skin samples were sectioned taken portions were subjected to immunohistochemical analysis using monoclonal antibodies to ICAM-1; ICAM-2; VCAM-1; VLA-4; P-selectin and E-selectin markers. Results: immunostaining of ICAM-1, VCAM-1 and VLA-4 adhesins, showed a greater presence of these molecules on the endothelium of the tuberculoid form (TT) of the infection. ICAM-1 was presented with 9.92±1.11 cells/mm2 on TT form, whereas LT pole showed 5.87±1.1 cells/mm 2. The VCAM-1 averaged 18.28±1.46 cells/mm2 in TT form, while the lepromatous had on average 10.67±1.25 cells/mm2. The analysis of E-Selectin showed that the infection tuberculoid is present in an amount (13.00±1:59 cells/mm2), significantly (p <0.0001) higher than E-selectin when compared to lepromatous pole which had only 2.58±0:38 cells/mm2. Discussion: The increase quantity of immunoglobulins ICAM-1 and VCAM-1 result in strengthening the signaling of transmigration tissue through the relationship between LFA-1 with its endothelial connector ICAM-1. This same mechanism is involved in strengthening the relationship between the endothelium and migration of cells with Th1 profile towards the tissue. VLA-4 is directly linked to the infiltration of Th1 cell lines, being the mediator of the increased frequency of T CD4+ cells in inflamed tissue. The lack of VLA-4 and of VCAM-1 immunoglobulin can also result in inhibition of adhesion of Th1 lymphocytes. It is also important to notice that the ICAM-1 and VCAM-1 deficiency influences the migration of T CD8+ lymphocytes thus altering the presence of cytotoxic cells in the tissue. Conclusion: The study strengthens the role of the endothelium as one responsible for the profile found in tissue cells. Correlating the expression of adhesion molecules to the selectivity in cell migration, resulting in a direct influence on the immune response present in leprosy.

A intensificação da criação de felinos em todo o mundo demandam uma ampliação e aprofundamento dos conhecimentos da clínica e patologia de doenças infecciosas que acometem os gatos. Entretanto, existe uma escassez de informações sobre doenças infecciosas que acometem os gatos do Brasil, especialmente da região sul. Esta tese de doutorado teve como objetivo realizar um levantamento das principais causas de morte em gatos, além da caracterização anatomopatológica e identificação de agentes infecciosos em tecidos e células de gatos através da técnica de imuno-histoquímica (IHQ) e imunocitoquímica (ICQ). O primeiro artigo teve como objetivo determinar as principais causas de morte em gatos na região Sul do Brasil, através de um estudo retrospectivo, de 2000 a 2015. Foram realizadas um total de 1753 necropsias de felinos domésticos, destas 1364 (77,8%) foram conclusivas e 389 foram inconclusivos (22,2%). As categorias mais prevalentes foram: neoplasmas (20%), doenças infecciosas/parasitárias (17,8%), doenças do sistema digestório (14,1%), traumatismos (13,4%), doenças do sistema urinário (11,4%), doenças do sistema cardiovascular (6,9%), doenças do sistema respiratório (5,8%) e outras (8,5%). As causas de morte mais frequentes incluíram: politraumatismo (13,4%), linfoma (8,8%) e peritonite infecciosa felina (7,9%). O segundo artigo teve como objetivo fazer a identificação por ICQ dos antígenos do coronavírus felino (FCoV) em macrófagos e monócitos fixados em formol e embebidos em parafina a partir de derrame e sangue como alternativa diagnóstica ante mortem da peritonite infecciosa felina. Foram selecionados para o estudo gatos com pelo menos um dos seguintes sinais clínicos: derrame em cavidades abdominal e/ou torácica e/ou pericárdica, temperatura retal acima de 40oC, icterícia, linfoadenomegalia, e sinais clínicos oftálmicos e neurológicos. Foram recebidas 25 amostras provenientes de derrames. Dessas, 16 tiveram marcação positiva no interior de macrófagos. Nove desses casos, foram confirmados pela necropsia. De 17 amostras de sangue total, 3 amostras tiveram marcação positiva no interior de monócitos; dois desses casos foram confirmadas na necropsia. O teste de ICQ anti-FCoV foi sensível e específico como método diagnóstico ante mortem da PIF. O terceiro artigo teve como objetivo descrever cinco casos de gatos apresentando cardiomiopatia hipertrófica e miocardite associadas ao vírus da imunodeficiência felina (FIV). Na necropsia, os cinco gatos apresentaram o coração acentuadamente aumentado de tamanho, por hipertrofia ventricular esquerda, e múltiplos focos brancacentos coalescentes no miocárdio e no epicárdico. Microscopicamente, no miocárdio, havia infiltrado multifocal acentuado composto por linfócitos, alguns macrófagos, neutrófilos e plasmócitos. Na IHQ para FIV houve intensa imunomarcação no citoplasma e no núcleo, principalmente de linfócitos e no citoplasma de ocasionais macrófagos no miocárdio. O infiltrado inflamatório caracterizou-se por linfócitos T e macrófagos, o que foi evidenciado por imunomarcação específica para essas células. Este trabalho demonstra a importância das doenças infecciosas/parasitárias, consideradas como causa de morte em gatos, demonstra a utilidade da técnica técnica ocorrência de infecção pelo do vírus da imunodeficiência felina em células inflamatórias no miocárdio de gatos com miocardite e cardiomiopatia hipertrófica. / The increase of cat breeding worldwide demands an expansion in qualified information on clinic clinical and pathological aspects of feline infectious diseases. There is, however, a lack of information on the infectious diseases that affect cats in Brazil, especially in the Southern region. This doctoral thesis aimed to survey of the main causes of death caused in cats, as well as the anatomopathological characterization of tissue response and identification of infectious agents in the tissues and cells through immunohistochemistry (IHC) and immunocytochemistry (ICH). Three articles were written. The first one aimed to determine the main causes of death in cats in southern Brazil, through a retrospective study, from 2000 to 2015. A total of 1,753 domestic feline necropsies were reviewed, from which 1,364 (77.8%) had a conclusive diagnosis and 389 were inconclusive (22.2%). The most prevalent categories were neoplasms (20%), infectious/parasitic diseases (17.8%), diseases of the digestive system (14.1%), traumatisms (13.4%), diseases of the urinary system (6.9%), diseases of the respiratory system (5.8%) and others (8.5%). The most frequent causes of death included multiple trauma (13.4%), lymphoma (8.8%) and feline infectious peritonitis (7.9%). lymphoma (8.8%) and feline infectious peritonitis (7.9%). The second article aimed to tests and alternative antemortem diagnostic method to identified cats with feline infectious peritonitis feline coronavirus (FCoV) antigens; the method consists of applying ICH to macrophages and monocytes sampled from effusion and blood, fixed in formalin and embedded in paraffin. Cats with at least one of the following clinical signs were selected for being tested: cavitary (abdominal and/or thoracic and/or pericardial) effusion, rectal temperature above 40 ° C, jaundice, enlargement of lymph nodes, clinical ophthalmic and neurological signs. Twenty-five samples from effusions were received, of which 16 had positive marking within macrophages, 9 of which were confirmed by necropsy examination. Seventeen samples consisted of whole blood, from these, 3 samples had positive staining within monocytes and two cases were confirmed by postmortem examination. The anti-FCoV ICQ test was sensitive and specific as a PIF antemortem diagnostic method. The second article aimed to identify by ICQ the feline coronavirus (FCoV) antigens in macrophages and monocytes fixed in formalin and embedded in paraffin from effusion and blood as a diagnostic alternative antemortem of feline infectious peritonitis. Cats with at least one of the following clinical signs were selected: cavitary (abdominal and/or thoracic and/or pericardial) effusion, rectal temperature above 40°C, jaundice, enlargement of lymph nodes, clinical ophthalmic and neurological signs. Twenty-five samples from effusions were received, of which 16 had positive marking inside macrophages, 9 of which were confirmed by necropsy examination. 17 samples were also received from whole blood, these 3 samples had positive staining within monocytes and in 2 cases confirmed by postmortem examination. The anti-FCoV ICQ test was sensitive and specific as a PIF antemortem diagnostic method. The third article aimed to describe five cases of cats presenting hypertrophic cardiomyopathy and myocarditis associated with feline immunodeficiency virus (FIV). At necropsy, the five cats presented a markedly enlarged heart, marked left ventricular hypertrophy, multiple myocardial and epicardial whitening foci. Microscopically, in the myocardium, there was marked multifocal infiltrate composed of lymphocytes, macrophages, neutrophils and plasma cells. In the IHC for FIV there was intense immunostaining in the cytoplasm and nucleus, mainly of lymphocytes and occasional macrophages cytoplasm in the myocardium. The inflammatory infiltrate was predominantly composed of T lymphocytes and macrophages, evidenced by immunostaining. This work demonstrates the importance of 8 infectious/parasitic diseases, as the cause of death in cats, demonstrate the use of the IHC technique as an alternative antemortem diagnostic tool for FIP and the occurrence of feline immunodeficiency virus infection in inflammatory cells in the myocardium of cats with myocarditis and hypertrophic cardiomyopathy.

O presente trabalho objetivou avaliar diferenças na patogenicidade de 19 cepas de B. pilosicoli isoladas de casos de diarréia em suínos no Estado do Rio Grande do Sul. Foi utiliza o modelo experimental em pintos de um dia, que possui boa eficiência quando usado para a infecção oral com a B. pilosicoli, pois permite a consistente colonização cecal dos animais inoculados. Através dessa infecção experimental, buscou-se estabelecer diferenças de patogenicidade entre cepas de referência da B. pilosicoli e cepas dessa espécie isoladas previamente de casos de diarréia em leitões no Rio Grande do Sul. Foram inoculadas 21 cepas de origem suína e duas cepas controle (uma a referência da espécie, P43/6/78 e um isolado humano, P16). Os animais foram inoculados por via oral com uma suspensão de bactérias vivas multiplicadas em meio líquido, num inóculo de 0,8 mL contendo 1x106 espiroquetas na fase logarítmica de crescimento. Decorridos 21 dias após a infecção experimental, os animais foram sacrificados e os cecos fixados em formalina 10% tamponada, processados para exame histológico e os cortes examinados através da coloração pela prata e com uma técnica imunohistoquímica. Com o uso da coloração pela prata, 65% dos animais mostraram colonização pela B. pilosicoli do epitélio do cecal. Houve diferenças no tipo de colonização, consistindo de aderência contínua, aderência focal ou presença de bactérias livres na luz intestinal. Com a técnica de imunohistoquímica, 76,2% das cepas mostraram colonização. Dessa forma, concluiu-se que a imunohistoquímica foi superior à coloração pela prata para a avaliação da colonização intestinal dos pintos, pois foi capaz de detectar 11,2% de cepas colonizadoras a mais do que a coloração pela prata Um segundo experimento visou avaliar a transmissão horizontal da infecção por B. pilosicoli. Para tal, foram mantidos em contato na mesma gaiola, pintos inoculados com a bactéria e animais chamados “contatos”, não inoculados. Com o uso da coloração pela prata, 23,8 % apresentaram-se positivos e, pela imunohistoquímica, 54,2 % foram positivos. Aqui também a imunohistoquímica revelou-se mais eficiente do que a coloração pela prata. Como conclusão desse experimento, as cepas de campo analisadas mostraram alta capacidade de difusão horizontal. Um achado inesperado foi a presença de figuras elongadas dentro do citoplasma das células epiteliais cecais entre alguns animais inoculados. Essas estavam presentes em 33,3 % das cepas, quando analisadas através da coloração pela prata. Pelos dados obtidos, não foi possível concluir que as figuras fossem Brachyspira pilosicoli, pois poderia tratar-se de outra bactéria intracelular ou artefato. Entretanto, como recentemente (no ano de 2003) foi realizado o primeiro registro por microscopia eletrônica de um achado de Brachyspira spp. intracelular, esse achado poderia significar uma alta capacidade invasiva entre as cepas analisadas. Novos estudos serão realizados e, caso comprovado, esse fato poderia auxiliar em muito o entendimento da patogenia da infecção pela B. pilosicoli, pouco clara até o momento.

A implementação de programas de controle de salmonela em suínos, com objetivo de diminuir os riscos de infecção alimentar em humanos, exige métodos rápidos e baratos para medir a intensidade da infecção, bem como reduzir seus fatores de risco. A partir disso, desenvolveu-se um teste de ELISA, utilizando antígeno lipopolissacarídeo do sorovar Typhimurium, pela sua similaridade antigênica com os sorovares prevalentes em suínos no Rio Grande do Sul. O teste padronizado foi utilizado na determinação da soroprevalência em 65 rebanhos suínos, os quais participaram de estudo para identificação de fatores de risco. As granjas foram classificadas em três categorias de soroprevalência, baixa (até 40%), média (40-70%) e alta (mais de 70%) prevalência, estabelecidas como variável explicada. As respostas do questionário contituíram as variáveis explicativas. Aquelas associadas à variável explicada pelo teste de χ2 (p ≤ 0,1) foram submetidas à análise fatorial de correspondência múltipla (AFCM). Paralelamente, foram avaliados seis desinfetantes (amônia quaternária, glutaraldeído, iodóforo, hipoclorito de sódio (1 e 0,1%), fenol e ácido peracético) frente a amostras de Salmonella Typhimurium isoladas de suínos. Os produtos foram testados na presença e ausência de matéria orgânica, sob duas diferentes temperaturas e, posteriormente, frente a 8 isolados com diferentes perfis de resistência antimicrobiana, por um tempo de contato de 5 minutos. O teste de ELISA identificou a soroconversão nos animais inoculados (7 dias p.i.) e contatos (21 dias p.i.), bem como o aumento no número de animais positivos após infecção natural (28,6% para 76,9%). A sensibilidade e a especificidade do teste foram respectivamente de 92 e 100%. Após adaptações para suco de carne, estabelecendo o soro como referência, a sensibilidade do teste para suco de carne foi de 88,12% e a especificidade 70,43%. Em análise de concordância entre os testes, o índice kappa foi de 5,78, com p=0,002 no teste MacNemar. A AFCM identificou a associação da maior soroprevalência com o seguinte grupo de variáveis: nas granjas terminadoras, uso de ração peletizada, distribuição de dejetos a menos de 100m do local de captação de água, não utilização de comedouro do modelo comedouro/bebedouro, transporte com freteiro misturando animais de várias granjas; enquanto nas granjas de ciclo completo apareceram ingredientes de ração desprotegidos de outros animais, ausência de controle de roedores, ração seca, ausência de cerca, não uso da pintura com cal após lavagem e desinfecção e a entrada de outras pessoas além do técnico na granja. Todos os desinfetantes foram eficazes na ausência de matéria orgânica, nas duas temperaturas testadas. Entretanto, quando na presença de matéria orgânica ou após cinco minutos de contato, somente o hipoclorito de sódio (1%), fenol e o ácido peracético foram eficazes. Dessa forma, ao estabelecer uma ferramenta sorológica para medir a infecção pelos principais sorovares de Salmonella que afetam os suínos no sul do Brasil e identificar fatores de risco associados à alta soroprevalência, será possível dar início à implementação e validação de protocolos de controle da infecção em rebanhos.

Nas fases de recria e terminação espera-se que os suínos tenham um bom crescimento, representado por adequado ganho de peso diário e baixa conversão alimentar. Além disso, devem chegar ao abate dentro do tempo programado, atendendo as necessidades da indústria em peso, qualidade de carcaça e pouca variação no desenvolvimento dos animais de um mesmo lote, ou seja, apresentando uma uniformidade adequada. Até recentemente não era dado valor ao crescimento uniforme de suínos nas fases de recria e terminação, o que acarretava grandes perdas não só para a indústria, mas também para os produtores, pois havia queda na produtividade e renda. Existem muitas informações sobre o impacto econômico que a falta de uniformidade causa para a cadeia da suinocultura, mas poucos estudos investigaram quais as causas que poderiam levar a este problema. Um ponto já reconhecido é a influência dos problemas sanitários para um adequado crescimento. Uma das infecções que pode afetar o crescimento é causada pelo circovírus suíno tipo 2 (PCV2). Uma das formas dessa infecção viral cursa numa forma clínica de definhamento, com marcantes e evidentes prejuízos ao desenvolvimento dos animais. Com relação à possibilidade dessa infecção incidir numa forma clínica pouco evidente, mas com queda no desenvolvimento dos animais, inexistem dados para análise. O trabalho atual avalia o PCV2 como uma das causas potencialmente envolvidas no atraso do desenvolvimento de suínos nas fases de recria e terminação. Para tal, foram realizadas necropsias em 143 leitões dessas fases de seis diferentes Agroindústrias do Estado do Rio Grande do Sul. Destes 119 apresentavam baixo desenvolvimento, embora fossem animais clinicamente saudáveis e 24 apresentavam desenvolvimento normal, analisados como controles. De todos foram coletados materiais para realização de exames de histologia e imunohistoquímica para diagnóstico da infecção pelo PCV2. Foram realizados diagnósticos diferenciais para diversas infecções bacterianas e virais, usando técnicas de bacteriologia, histopatologia e PCR. Dos suínos com baixo desenvolvimento avaliados 87 (73%) apresentaram evidências da infecção pelo PCV2 e entre aqueles com desenvolvimento normal ou controles o número de afetados foi significativamente menor (5 animais, 20,8%). Com base nos dados obtidos, foi concluído que o PCV2 pode infectar os suínos numa forma subclínica, mas com impacto no seu desenvolvimento. / A good growth is expected from pigs in growing and finishing phases, represented by good weight gain and low feed conversion rate. Moreover, they must reach slaughter weight inside the expected age, attending the industry needs regarding weight, carcass quality and small variation in weight of pigs from the same group, meaning adequate uniformity. Until recently, little emphasis was placed in uniformity in growing and finishing pigs. This could pose big losses not only to the pig industry, but also for the producer, as it can cause losses in productivity and profit. A lot has been published about the economical impact of unevenness (attrition) to the pork production chain, but few studies analyzed the causes associated with the problem. A point recognized as significant is the influence of health problems in attaining a good growth. A form of pathology that can deeply impact in growth is the infection with porcine cirvovirus type 2 (PCV2 infection). One clinical form of infection with this agent is characterized by wasting, causing marked and evident impairment in growth. Regarding the possibility of this infection manifest itself in a clinically silent form, there are no data to be analyzed. The present work analyzed porcine circovirus (PCV2) as a cause potentially involved in attrition in growing and finishing pigs. Necropsies were performed in 143 pigs in growing and finishing pigs from 6 pig industries from the State of Rio Grande do Sul, Brazil, in pig farms with positive diagnosis of PCV2 infection. Among them, 119 showed attrition when compared with pigs of the same age in the farm, in spite of the fact that they did not present any clear signs of known pathologies. Other 24 pigs were included as controls. Materials were collected from all animals for histopathological and immuno-histochemistry aiming PCV2 diagnosis. Differential diagnosis for several bacterial infections was also carried out, using bacteriological techniques, histopathology and PCR in 24 control (healthy) animals. From pigs with attrition, 87 (73%) presented evidences of PCV2 infection and from normal pigs (controls) the number of affected pigs was significantly lower (5 animals, 20,8%). Based in the data obtained, we conclude that circovirus may infect swine in a sub-clinical form, but with impact in growth.

A mastite bovina é comprovadamente um dos maiores problemas atuais da pecuária leiteira no Brasil e no mundo, acarretando ônus aos produtores, à indústria e ao consumidor final. Foram analisadas 240 amostras de leite proveniente de animais com mastite clínica e de animais com mastite subclínica, criados em propriedades leiteiras de alta produção, da região do Planalto Médio, Rio Grande do Sul. Houve isolamento de 250 agentes bacterianos em 218 amostras (90,8%) e 65 agentes leveduriformes em 39 amostras (16,25%). Foram identificados 10 gêneros e 12 espécies de bactérias, sendo os gêneros Staphylococcus, Corynebacterium e Nocardia responsáveis por 88% dos isolados. Foram identificados 08 gêneros (29 espécies) de leveduras além de 02 gêneros de fungos semelhantes a leveduras (04 espécies), sendo os gêneros Candida, Pichia, Cryptococcus e Rhodotorula responsáveis por 80% das espécies isoladas.Apenas 03 amostras apresentaram crescimento puro de leveduras, o restante estando associado com isolamentos bacterianos, o que demonstra uma importante relação entre fungos e bactérias na etiologia das mastites. Mais de 90% dos agentes leveduriformes isolados tiveram crescimento em temperaturas acima de 37ºC, demonstrando seu potencial patogênico. Verificou-se que a prevalência de mastite fúngica na região é significante e fortemente relacionada com a presença de agentes bacterianos, o tratamento inadequado com produtos antimicrobianos e a saúde do úbere. / The bovine mastitis is one of the largest problems of dairy herds in Brazil and all over the world, resulting in losses to producers, to the industry and to the final consumer. High production dairy herds were analyzed in Planalto Médio, Rio Grande do Sul, were 240 samples with clinical and subclínica mastitis were collected. There was the isolation of 250 bacterial agents in 218 samples (90,8%) and 65 yeast organisms in 39 samples (16,25%). There was identification of 10 genera and 12 species of bacteria, and 88% of the isolates were from genera Staphylococcus, Corynebacterium and Nocardia. There was the identification of 08 genera (29 species) of yeasts and 02 genera of yeast-like organisms (04 species), and 80% of the isolates were from genera Candida, Pichia, Cryptococcus and Rhodotorula. Only 03 samples presented pure growth of yeasts, the remaining was associated with bacterial isolations, which demonstrates an important relationship between yeasts and bacteria in the etiology of the mastitis. More than 90% of the yeast isolates had growth in temperatures above 37ºC, which demonstrates their pathogenic potential. It was verified that in this particularly region, the occurrence of mastitis caused by yeasts has a significant importance and are closely related with the bacterial agents' presence, the inadequate treatment with antibiotic products and udder’s health.

O resultado deste estudo foi dois artigos relacionados às lesões intestinais encontradas e presença de agentes associados a infecção por PCV2 e um terceiro artigo sobre a associação entre a presença de lesões histopatológicas em diferentes porções do trato intestinal e a carga viral presente nestas regiões e nas fezes. O primeiro artigo apresenta as lesões macroscópicas e microscópicas encontradas em 79 animais da fase de crescimento. As principais lesões macroscópicas foram: aumento de tamanho dos linfonodos mesentéricos (56), enterite necrótica (24), edema mesentérico (20), linfangectasia (15) e espessamento da parede do íleo (5). Marcação IHQ anti-PCV2 foi associada com depleção de células caliciformes (24), atrofia e fusão de vilosidades do íleo (18) e dilatação de vasos linfáticos (11). Foi observada a presença de co-infecções por Escherichia coli (5) Lawsonia intracellularis (1), Brachyspira spp.(4), Salmonella spp. (17), rotavírus (6) e calicivírus entérico (6). O segundo artigo avaliou 63 casos de enterite necrótica, nos quais o cólon foi o principal local onde foi observada necrose, aparecendo em 55 casos. Em 24 casos observou-se co-infecção de PCV2 e Salmonella spp. As alterações descritas: depleção de células caliciformes, índice apoptótico elevado em enterócitos do cólon, e marcação de IHQ positiva no citoplasma de enterócitos sugerem o envolvimento de PCV2 nos casos de enterocolite necrótica. A carga viral de PCV2 no trato intestinal, fezes e sangue de suínos, avaliada pela técnica de PCR em tempo real, associada com lesões histológicas e marcação de IHQ, bem como a interpretação destes resultados foi detalhadamente descrita no terceiro artigo. / The result of this study are presented in two articles describing intestinal lesions and the presence of associated agents with PCV2 and a third article that describes the association between the presence of histopathological lesions in different areas of the intestinal tract and viral load present in those areas and in the feces. The first report showed macroscopical and microscopical lesions in samples collected from 79 growing pigs. The main macroscopical lesions were: enlargement of mesenteric lymph-nodes (56), necrotic enteritis (24), mesenteric edema (20), limphangectasy (15) and thickening of the ileal wall (5). Immunohistochemistry (IHC) staining anti-PCV2 was associated with depletion of goblet cells (24), villous fusion and atrophy of the ileum (18) and dilatation of lymphatic vessels (11). It was observed the presence of co-infections with Escherichia coli (5) Lawsonia intracellularis (1), Brachyspira spp. (4), Salmonella spp. (17), rotavirus (6) and enteric caliciviruses (6). The second article evaluated 63 cases of necrotic enteritis, in which the colon was the main target of necrotic lesions, observed in 55 cases. In 24 cases co-infection with PCV2 and Salmonella spp. was observed. The main findings described: depletion of goblet cells, high apoptotic rate in colon enterocites and positive anti-PCV2 IHC staining in cytoplasm of enterocites suggests the involvement of PCV2 in cases of necrotic enterocolitis. The viral load of PCV2 in intestinal tract, feces and blood of swine, associated with histological lesions and IHC staining, evaluated by Real time PCR technique, as well as the interpretation of these results were described in details in the third article.