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Procedimentos de recobrimento radicular no tratamento das retrações gengivais: Revisão Cochrane e meta-análise / Root coverage procedures for the treatment of recession-type defects. A Cochrane Systematic Review

Chambrone, Leandro 11 August 2008 (has links)
O objetivo desta revisão sistemática da literatura foi avaliar a efetividade de diferentes procedimentos de cirurgia plástica periodontal (CPP) no tratamento de retrações gengivais localizadas e generalizadas e, determinar a existência de superioridade de uma determinada técnica cirúrgica sobre as demais. Foram identificados e incluídos apenas ensaios clínicos controlados aleatorizados (ECA), com período de acompanhamento mínimo de 6 meses de duração com as seguintes características: 1) diagnóstico clínico de retração gengival; 2) pelo menos 10 pacientes por grupo ao final do período de acompanhamento; 3) áreas de retração Classe I ou Classe II (MILLER 1985) > 3 mm de comprimento; e 4) áreas de retração que não apresentassem dentes com cáries ou restaurações. Nestes ensaios, avaliou-se a alteração da condição estética observada pelos pacientes, alterações na retração gengival, no nível clínico de inserção e no tecido queratinizado, sítios com recobrimento radicular completo, percentual de recobrimento radicular completo e recobrimento radicular médio. Na estratégia de pesquisa os bancos de dados Cochrane Oral Health Group\'s Specialised Register, CENTRAL, MEDLINE e EMBASE foram pesquisados até novembro de 2007. Busca manual e avaliação de literatura não publicada também foi realizada. A seleção e avaliação dos estudos foram realizados em duplicata, e os autores dos trabalhos incluídos foram contatados de forma a fornecer informações relevantes aos ensaios. Os critérios de seleção e análise dos resultados seguiram as diretrizes do Cochrane Oral Health Group (Cochrane Handbook for Systematic Reviews of Interventions 5.0.0). Os resultados mostraram que 21 ECAs se enquadraram nos critérios de inclusão entre 89 pré-selecionados. Destes, 12 foram utilizados na condução de meta-análises. Apenas quatro ECAs apresentaram alterações na condição estética. Verificou-se em uma das meta-análises, redução estatisticamente significante maior para o enxerto conjuntivo sub-epitelial (ECS) quando comparado a regeneração tecidual guiada, com uma diferença de médias entre os grupos de -0,39 mm [95% IC: -0,65, -0,12]. Alterações estatisticamente significantes foram observadas também para nível clínico de inserção (0,62 mm na comparação entre o enxerto de matriz dérmica acelular e o retalho deslocado coronariamente [95% IC: 0,09, 1,140]) e tecido queratinizado em três diferentes comparações. Em geral, todos os estudos incluídos, apresentaram redução estatisticamente significante na profundidade dos defeitos iniciais e ganhos no nível clínico de inserção e faixa de tecido queratinizado, independente do procedimento utilizado. Concomitantemente, observou-se um recobrimento radicular médio de 80,94% e um recobrimento radicular completo de 46,63% com uma grande variação nos resultados. Em conclusão, todos os procedimentos avaliados proporcionaram melhoras significantes nos parâmetros clínicos avaliados, independente da técnica empregada. Entretanto, o ECS apresentou melhores resultados. Em adição, é necessária a realização de novos estudos e que estes sigam as recomendações do CONSORT comparando os diferentes procedimentos de CPP ao ECS (como grupo controle), de forma a avaliar as alterações clínicas e estéticas dos pacientes. / The objective of this systematic review was to evaluate the effectiveness of different root coverage procedures in the treatment of localized or multiple recession-type defects. Only randomised controlled clinical trials (RCTs) of at least 6 months\' duration were included if the participants met the following criteria: 1) a clinical diagnosis of localized or multiple recession-type defects; 2) recession areas selected for treatment classified as Miller (MILLER 1985) Class I or Class II; 3) recession areas containing teeth with no caries or restorations; and 4) at least 10 participants per group at final examination. In these trials we evaluated the aesthetic condition change related to patient\'s opinion, gingival recession change, clinical attachment change, keratinized tissue change, percentage of sites with complete root coverage and mean root coverage. We searched the Cochrane Oral Health Group\'s Trials Register, the Cochrane Central Register of Controlled Trials (CENTRAL), MEDLINE and EMBASE. Handsearching included several dental journals. Grey literature included SIGLE search. Quality assessment of the included RCTs was carried out in duplicate and the authors were contacted for missing information. Selection criteria and evaluation followed the Cochrane Oral Health Group\'s statistical guidelines. Twenty one RCTs were identified between 89 in potential. From them, 12 were included in meta-analysis. One of them showed a statistically significant reduction in gingival recession for subepithelial connective tissue grafts (SCTG) in comparison to guided tissue regeneration (0,39 mm [95% CI: -0,65, -0,12]. Statistically significant changes were also observed related to clinical attachment level (0,62 mm acelluar dermal matrix allograft versus coronally advanced flap [95% CI: 0,09, 1,140]) and for keratinized tissue in three comparisons. Overall, All PPS procedures produced statistically significant improvements in gingival recession, clinical attachment level and keratinized tissue. Mean root coverage and sites with complete root coverage were 80.94% and 46.63%, respectively. In conclusion, all PPS produced statistically significant improvements in all outcomes. However, the SCTG presented the best overall results. In addition, more research is needed to compare different PPS to SCTG (as a control group) in order to evaluate clinical and aesthetic changes. Future RCTs should follow CONSORT guidelines.
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Desempenho horticultural de clones de lima ácida `Tahiti´ enxertados em citrumelo `Swingle´ cultivados com e sem irrigação / Horticultural performance of Tahiti lime selections grafted on Swingle citrumelo under irrigated and non-irrigated conditions

Bremer Neto, Horst 29 June 2012 (has links)
A partir da década de 1990, em função da valorização da fruta no mercado interno e do aumento das exportações da fruta in natura, observou-se aumento da importância da lima ácida Tahiti (Citrus latifolia (Yu. Tanaka) Tanaka) sob os aspectos econômico e social no agronegócio brasileiro. A diversidade genética da espécie é pequena e os cultivos comerciais são baseados, predominantemente, nos clones IAC 5 e Quebra-galho. Atualmente, existem novos clones para a diversificação de copas. Entretanto, a baixa disponibilidade de informações sobre os mesmos dificulta a diversificação dos pomares. Além da baixa diversificação de copas, grande parte dos pomares utilizam o limão Cravo (Citrus limonia Osbeck) como porta-enxerto, por induzir maior produtividade e tolerância à deficiência hídrica. Por outro lado, a combinação dos clones IAC 5 e Quebra-galho com o limoeiro Cravo tem levado à produção de plantas de porte elevado e baixa longevidade devido às elevadas taxas de mortalidade causadas por gomose de Phytophthora (Phytophthora spp.) e à presença de estirpes severas do vírus da tristeza dos citros e do viróide da exocorte. Dessa forma, este trabalho avaliou o desempenho horticultural de clones de limeira ácida Tahiti enxertados em citrumelo Swingle [Citrus paradisi Macfad. cv. Duncan x Poncirus trifoliata (L.) Raf.] em Bebedouro, SP. Tendo em vista as restrições do uso comercial do citrumelo Swingle em ambientes que apresentam deficiência hídrica prolongada, os clones foram avaliados em duas áreas distintas, diferenciadas pelo uso da irrigação. Foram avaliados os clones IAC 5, IAC 5-1, CNPMF/EECB, CNPMF 2000 e CNPMF 2001. O experimento foi instalado em março de 2005 e as avaliações foram realizadas entre 2007 e 2011. Foram avaliados o crescimento vegetativo, produção, eficiência produtiva, qualidade dos frutos, fotossíntese e potencial da água na folha em ambas as áreas. Adicionalmente, na área não irrigada, a tolerância à deficiência hídrica, condutância estomática e transpiração foram avaliados visando à seleção de clones mais adequados para cultivos não irrigados. A análise de variância dos dados obtidos na área irrigada e não irrigada foi realizada conjuntamente e as médias foram comparadas pelo teste de Duncan (P<0,05). O clone CNPMF/EECB apresentou maior produção acumulada de frutos e maior eficiência produtiva, independentemente da condição de cultivo. Sob cultivo irrigado, o clone CNPMF/EECB apresentou maior produção de frutos na entressafra. Os clones IAC 5-1, CNPMF/EECB, CNPMF 2000 e CNPMF 2001 apresentaram maior crescimento vegetativo em relação ao clone IAC 5, independentemente da condição de cultivo. O clone IAC 5-1 induziu maior porcentagem de frutos adequados à exportação, maior tolerância à deficiência hídrica e maior suscetibilidade à podridão floral dos citros. A irrigação induziu maior crescimento vegetativo, maior precocidade de produção, maior produção de frutos na safra e entressafra, maior eficiência produtiva, maior rendimento de suco, maior acidez e maior porcentagem de frutos exportáveis. / Since the 90s, Tahiti lime (Citrus latifolia (Yu. Tanaka) Tanaka) has increased its importance in the Brazilian agribusiness with economic and social impacts, due to higher fruit value recorded both on domestic and international markets. Genetic diversity of this species is restricted, and in Brazil, most of the commercial orchards are predominantly based on IAC 5 and Quebra-galho selections. Currently, new selections are available for scion diversification. Nonetheless, technical information about these materials is very limited, thus restricting the studies on scion diversification. Besides the low diversification of scions, most of the orchards are established onto the Rangpur lime (Citrus limonia Osbeck), because of higher yield and tolerance to water deficit induced by this rootstock. IAC 5 and Quebra-galho selections grafted onto the Rangpur lime result in large-sized plants of low longevity, because of their high susceptibility to Phytophthora gummosis (Phytophthora spp.), and the endemic presence of severe Citrus Tristeza Virus strains and the Exocortis Citrus Viroid. Restricted scion and rootstocks diversification increase the risks associated with outbreaks of new and more severe diseases and pests that threaten the whole Tahiti lime production chain. This study evaluated the horticultural performance of five Tahiti\' lime selections grafted on Swingle citrumelo [Citrus paradisi Macfad. cv. Duncan x Poncirus trifoliata (L.) Raf.], in Bebedouro, São Paulo State, Brazil. Due to constraints for the commercial use of Swingle citrumelo as rootstock in environments under prolonged water deficit conditions, two trials were conducted for evaluation of Tahiti lime selections under irrigated and non irrigated conditions. The following Tahiti lime selections were studied: IAC 5, IAC 5-1, CNPMF/EECB, CNPMF 2000 and CNPMF 2001. The experiment was installed in March 2005 and the evaluations were performed between 2007 and 2011, involving the following variables: plant growth, yield, yield efficiency, fruit quality, photosynthesis rate and leaf water potential in both irrigated and non-irrigated trials. In addition, plant water deficit tolerance, stomatal conductance, transpiration rate and water use efficiency were evaluated in the non-irrigated trial for selecting suitable selections for non-irrigated plantings. Data obtained in the irrigated and non-irrigated trials were submitted to individual and joint analyses of variance, and the comparisons among means were performed by Duncan test (P<0.05). The CNPMF/EECB selection had larger cumulative fruit yield and yield efficiency both in the irrigated and non-irrigated plantings. In the irrigated trial, the CNPMF/EECB selection presented larger offseason fruit yield. The IAC 5-1, CNPMF/EECB, CNPMF 2000 and CNPMF 2001 selections had larger tree size than the IAC 5 selection, both in the irrigated and non-irrigated plantings. The IAC 5-1 selection induced larger percentage of fresh fruit for export under irrigated and non-irrigated plantings, conferring higher water deficit tolerance and lower tolerance to postbloom fruit drop. Irrigation increased plant growth, early bearing, main-season and off-season fruit production, yield efficiency, juice percentage, juice acidity and the percentage of fresh fruit classified for export.
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Interação Phytophthora nicotianae - porta-enxerto de citros (tangerina Sunki e citrumelo Swingle): efeito no sistema radicular, aspectos fisiológicos e bioquímicos / Phytophthora nicotianae - citrus rootstocks (Sunki tangerine and Swingle Citrumelo) interactions: effect on root system, physiological and biochemical aspects

Beltrame, André Boldrin 07 April 2010 (has links)
Doenças causadas por Phytophthora spp. ocorrem em todas as regiões produtoras de citros do mundo e as manifestações mais comuns são a podridão do pé e de raízes. A principal medida de controle desses patógenos é a exclusão, porém em áreas contaminadas o mesmo pode ser obtido através do uso de produtos químicos ou com o plantio de copas enxertadas sobre portaenxertos resistentes, que onera menos o custo de produção. Os porta-enxertos menos suscetíveis a Phytophthora nicotianae são o citrumelo Swingle e o Poncirus trifoliata. Apesar de sua importância, pouco se sabe sobre as alterações fisiológicas e bioquímicas da interação citros - P. nicotianae. Dessa maneira, o trabalho visou analisar e comparar alterações fisiológicas e bioquímicas provocadas por P. nicotianae em dois porta enxertos de citros: tangerina Sunki (suscetível) e citrumelo Swingle (resistente). Para tanto, porta-enxertos das duas variedades com nove ou dois meses de cultivo tiveram as raízes inoculadas com P. nicotianae. As plantas mais velhas foram mantidas sob condições de campo por nove meses e as mais novas foram mantidas por uma semana a 28 oC sob 12 h de luz. Periodicamente, avaliou-se a biomassa do sistema radicular e a colonização pelo patógeno, bem como parâmetros fisiológicos: troca gasosa, consumo de água e produção de etileno; do metabolismo primário: carboidratos e proteínas; e secundário: atividades da superóxido dismutase, catalase, quitinase, -1,3-glucanase, guaiacol peroxidase, polifenoloxidase, fenilalanina amônia-liase, fenóis totais e lignina. Observou-se nos porta-enxertos inoculados aos nove meses de cultivo que P. nicotianae comprometeu o sistema radicular e a troca gasosa apenas de tangerina Sunki a partir do quarto e quinto meses após a inoculação, respectivamente. A concentração de carboidratos em raízes de tangerina Sunki foi reduzida pelo patógeno a partir do terceiro mês após a inoculação, enquanto que em citrumelo Swingle só foram detectadas diferenças no terceiro e no quinto meses após a inoculação. Além disso, análises em HPLC, que envolveram os porta-enxertos com dois meses de cultivo, mostraram que as concentrações de sacarose e glicose em raízes de citrumelo Swingle foram afetadas pelo patógeno. Ademais, P. nicotianae estimulou a produção de etileno em plântulas de tangerina Sunki seis e sete dias após a inoculação, bem como reduziu a troca gasosa e o consumo de água nesse porta-enxerto a partir do quarto e quinto dia após a inoculação, respectivamente. Conclui-se que P. nicotianae reduz o sistema radicular de tangerina Sunki, o que diminui as trocas gasosas e afeta o balanço hídrico e estimula a síntese de etileno. Além disso, inicialmente P. nicotianae altera o metabolismo de carboidratos em raízes de citrumelo Swingle, seguida por reduções mais severas nas concentrações de açúcares em raízes de tangerina Sunki. Finalmente, não foram verificadas alterações relevantes no metabolismo secundário, que pudessem auxiliar na elucidação dos mecanismos de resistência de citrumelo Swingle a P. nicotianae. / Phytophthora diseases affect citrus plantations all over the world and the main symptoms are foot and root rot. Exclusion is the most important control method for these diseases, but they can be controlled in infected areas by using chemical control, or by planting scion grafted on resistant rootstocks, which is less costly. The less susceptible rootstocks to Phytophthora nicotianae are Swingle citrumelo and Poncirus trifoliata. Besides the importance of citrus-P. nicotianae interactions, it is still poorly understood its physiology and biochemistry. In this way, the objectives of this work were to analyze and to compare physiological and biochemical changes caused by P. nicotianae in two citrus rootstock: Sunki tangerine (susceptible) and Swingle citrumelo (resistant). Initially, nine and two months-old plants of both genotypes had their roots inoculated with P. nicotianae. The oldest plants were kept under field conditions during nine months and the youngest ones were incubated at 28 oC under 12 h of light for one week. Periodically, it was analyzed root biomass and pathogen colonization as well as physiological parameters: gas exchange, water consumption and ethylene production; primary metabolism: carbohydrates and protein; and secondary metabolism: superoxide dismutase, catalase, chitinase, -1,3-glucanase, guaiacol peroxidase, polyphenoloxydase, phenylalanine ammonia-lyase activities, total phenolics and lignin content. P. nicotianae reduced the root system and gas exchange of Sunki tangerine on the oldest rootstocks after the fourth and fifth months after the inoculation, respectively. This rootstock also showed reduction on the root carbohydrate content from the third month after the inoculation to the end of the experiment. On the other hand, the pathogen just changed this parameter on Swingle citrumelo on the third and fifth months after the inoculation. More over, HPLC analysis on two month-old plants indicated that sucrose and glucose concentration on Swingle citrumelo root system were affected by the pathogen. P. nicotianae also stimulated the ethylene production on Sunki tangerine six and seven days after the inoculation as well as decreased gas exchange and water consumption from the fourth to fifth days after the inoculation, respectively. It was concluded that P. nicotianae reduces the root system of Sunki tangerine, which decreases the gas exchange and water balance and increases ethylene synthesis. Moreover, initially P. nicotianae changes the carbohydrate metabolism in Swingle citrumelo root system, which is followed by severe reductions on sugar content on Sunki tangerine root. It was not found relevant changes on the secondary metabolism that could explain the mechanisms of resistance in Swingle citrumelo against P. nicotianae.
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Influência do enxerto de pele humana irradiada na regeneração tecidual de camundongos nude / Skin graft influence in human tissue radiated in Nude mice regeneration

Miranda, Jurandir Tomaz de 28 June 2016 (has links)
Nas últimas décadas tem aumentado o interesse pelos enxertos de pele humana radioesterilizadas, para aplicação principalmente em queimaduras extensas e profundas. Isto se deve ao fato destes enxertos apresentarem rápida aderência e menor potencial antigênico, em comparação com os demais tratamentos utilizados. A proposta deste estudo foi avaliar a histoarquitetura do enxerto de pele humana irradiada com doses de 25 kGy, 50 kGy e não irradiada, durante o processo de reparação tecidual, em camundongos Nude submetidos a enxertia de pele na região dorsal. Três grupos de animais receberam enxertos de pele humana irradiada (25 kGy e 50 kGy) e não irradiada e foram eutanasiados no 3º, 7º e 21º dia após a realização da cirurgia. Após os procedimentos histológicos de rotina, as amostras de tecido foram coradas com hematoxilina e eosina (HE) para a quantificação de queratinócitos, fibroblastos, células de defesa e vasos sanguíneos e a reação de imunofluorescência (IF) foi realizada para a determinação da expressão de colágeno do tipo I humano e do colágeno dos tipos I e III de camundongo. A quantificação, tanto das células quanto dos tipos de colágeno foi realizada por análise de imagem, utilizando o programa Image-Pro PLus 6.0. Os resultados histológicos demostraram que a pele humana irradiação, quando enxertada, influencia o aumento do número de células no local de cicatrização ao longo do tempo, principalmente na dose de 25 kGy, além de proporcionar uma melhor dispersão destas células. No 21º dia, os três grupos de animais com enxertia de pele humana tiveram parte do enxerto incorporado no processo de cicatrização. O grupo não irradiado apresentou maior incorporação do enxerto (43%), porém menor produção de colágeno do tipo III de camundongo (22%). Já os grupos com enxertia de pele irradiada apresentaram menor incorporação do enxerto (6 e 15%), mas com maior produção de colágeno do tipo III de camundongo (35% e 28%, para 25 kGy e 50 kGy, respectivamente). Com este estudo pôde-se concluir que o grupo irradiado a 25 kGy, apresenta maior proliferação celular e formação de vasos,além de melhor remodelamento da região de cicatrização. / Over the last few years it has increased the interest in the human skin grafts radio sterilized for application mainly in extensive and deep burns. Because these grafts quickly grip and present antigenic lower potential, compared with other treatments used. The purpose of this study was to evaluate the histoarchitecture of human skin grafts irradiated with doses 25 kGy, 50 kGy and non-irradiated during the pepair tissue process in nude mice submitted by skin grafting in the dorsal region. Three groups of animals received irradiated human skin grafts (25 kGy and 50 kGy) and non-irradiated and were euthanized on the 3rd, 7th and 21th day after the surgery. Indeed, routine histologic procedures, tissue samples were stained with hematoxylin and eosin (HE) for quantification of keratinocytes, fibroblasts, immune cells and blood vessels and immunofluorescence (IF) was performed to determine the expression human collagen type I and collagen type I and III mouse. Therefore, quantification of both the cells and the collagen types was performed by image analysis using Image-Pro Plus 6.0 software. Histologic results demonstrated at a dose of 25 kGy that human skin irradiation when grafted influences the increase in the number of cells in wound site over time and it provides better dispersion of these cells. In addition, on the 21st day, three groups of animals with human skin graft were embedded part of the graft in the healing process. On the other hand, the group not irradiated showed greater incorporation of the graft (43 %), but less production of collagen type III mouse (22 %). Since the groups irradiated skin graft showed lower graft incorporation (6 and 15%), but with greater production of collagen type III mice (35 % and 28 % to 25 kGy and 50 kGy, respectively). In conclusion, this study presented that the group irradiated to 25 kGy and it has a higher cell proliferation and vessel formation, and better remodeling of the healing area.
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Histologia e bioquímica da interação entre porta-enxertos de citros resistente e suscetíveis a Phytophthora nicotianae / Histology and biochemistry of the interaction between resistant and susceptible citrus rootstocks to Phytophthora nicotianae

Escanferla, Maria Eugenia 14 December 2011 (has links)
No Brasil Phytophthora nicotianae é um dos principais agentes causadores da podridão do pé e de raízes e radicelas em citros. As doenças provocadas pelo gênero ocasionam danos elevados à produção agrícola e o uso de porta-enxertos resistentes é medida importante para controle. Nesse trabalho objetivou-se estudar aspectos relacionados à histologia e bioquímica da interação entre P. nicotianae e porta-enxerto de tangerineira Sunki (suscetível) e citrumeleiro Swingle (resistente). Para tal, raízes de plântulas desses genótipos com dois, três ou seis meses foram inoculadas com suspensão de 105 zoósporos/mL de P. nicotianae e mantidas a 25°C. As análises foram realizadas em microscópio de luz (ML) e confocal (MC), em cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE), em cromatógrafo a gás (CG) e em microscópio eletrônico de varredura (MEV). Em ML, as secções de raízes coradas com azul de toluidina um, dois, quatro e seis dias após a inoculação (dai) indicaram diferenças entre os porta-enxertos no modo e na velocidade de colonização do patógeno. O hospedeiro resistente apresentou menor número de hifas nos tecidos e essas se localizaram principalmente nos espaços intercelulares. Em MC, analisou-se a distribuição da elicitina do patógeno em secções de raízes um, dois e quatro dai. A elicitina foi detectada em menor quantidade e mostrou concentração constante em raízes de citrumeleiro Swingle e em quantidade maior e em gradual aumento em raízes tangerineira Sunki. Análises da superfície das raízes em MEV, 1, 2 e 4 horas após a inoculação, revelaram menor número de cistos do patógeno sobre o hospedeiro resistente no tempo de 2 horas. Testes histoquímicos com cloreto de zinco iodado e cloreto férrico para a detecção, respectivamente, de lignina e compostos fenólicos, em secções a fresco de raízes dos porta-enxertos um, três e seis dai foram visualizadas em ML e evidenciaram ausência de alteração nos níveis desses compostos entre raízes inoculadas e não inoculadas. A análise em CLAE, três dai, demonstrou que ambos os porta-enxertos, possuem compostos fenólicos em suas raízes. Entretanto, não houve diferença qualitativa e quantitativa destes compostos em plantas de um mesmo genótipo não inoculado e inoculado com P. nicotianae. Porém, diferenças quantitativas foram observadas entre ambos os genótipos. Em citrumeleiro Swingle encontrou-se menor quantidade de equivalentes em ácido clorogênico e apigenina e maior quantidade de equivalentes em rutina, quando comparado à tangerineira Sunki. A produção de etileno dos genótipos, analisada em CG, foi avaliada durante dez dai. O hospedeiro suscetível inoculado apresentou maior produção do gás comparado ao controle, do primeiro ao sexto dia. O hospedeiro resistente inoculado e não inoculado não apresentaram diferenças na produção do gás durante o ensaio. Esses resultados indicam diferenças na interação entre P. nicotianae e plântulas de citrumeleiro Swingle e tangerineira Sunki. Todavia, não esclarecem os mecanismos pelos quais essas diferenças ocorrem. Tais resultados fornecem subsídios para estudos sobre os mecanismos envolvidos na resistência de genótipos de citros à P. nicotianae. / In Brazil Phytophthora nicotianae is one of the main causal agents of foot and root rot in citrus. Diseases caused by this genus are responsible for significant losses in agricultural production and the use of resistant rootstocks is an important control procedure. This work aimed to study aspects related to histology and biochemistry of the interaction between P. nicotianae and Swingle citrumelo (resistant) and Sunki tangerine (susceptible) rootstocks. For this purpose, roots of two, three or six months old seedlings of both genotypes were inoculated with a suspension of 105 zoospores/mL of P. nicotianae and kept at 25°C. Analyses were performed with light (LM) and confocal (CM) microscope, with high performance liquid chromatograph (HPLC), with gas chromatograph (GC) and, with scanning electron microscope (SEM). In LM, root sections stained with toluidine blue one, two, four and six days after inoculation (dai) indicated differences in the mode and speed of colonization of the pathogen between the rootstocks. The resistant host showed a lower number of hyphae inside its tissue, mainly in the intercellular spaces. In CM, the pathogen elicitin distribution was analyzed in root sections one, two and four dai. The elicitin amount was lower and apparently stable in Swingle citrumelo root and it was higher and increasing gradually in Sunki tangerine roots. Roots surface analysis by SEM, 1, 2 and 4 hours after inoculation, indicated fewer pathogen cysts on resistant host at 2 hours. Histochemical tests in fresh root sections with iodized zinc chloride and ferric chloride for detection, respectively, of lignin and phenolic compounds were seen one, three and six dai in LM. The results showed no change in levels of these compounds in roots of inoculated and uninoculated rootstocks. HPLC root analysis, three dai, revealed that both rootstocks, inoculated and uninoculated, had phenolic compounds. However, there was no qualitative and quantitative difference in phenolic compounds between inoculated and uninoculated plants of the same genotype. Quantitative differences were observed between both hosts. There was lower concentration of apigenin and chlorogenic acid equivalents and higher concentration of rutin equivalents in Swingle citrumelo as compared to Sunki tangerine. Production of ethylene by the genotypes was analyzed in GC during 10 dai. The susceptible host, when inoculated, showed higher ethylene production compared to control from the first to the sixth day. The resistant host, inoculated or not, showed no difference in ethylene production during the test. These results indicate differences in the interaction between P. nicotianae and seedlings of Swingle citrumelo and Sunki tangerine. Nevertheless, they do not clarify the mechanisms through which these differences occur. These results indicate some points where further studies should concentrate on the resistance mechanisms of citrus genotypes against P. nicotianae.
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Estudo comparativo da fixação e integração de enxertos ósseos \'onlay\' com o uso de n-Butil-2-Cianocrilato ou parafuso de titânio. Estudo histológico, imunohistoquímico e tomográfico em coelhos / Comparative study of the fixation and integration of \"onlay\" bone grafts with the use of n-Butyl-2-cyanoacrylate or titanium screw. Histological, immunohistochemical and CT in rabbits

Oliveira Neto, Patricio José de 28 May 2010 (has links)
Alguns trabalhos sobre a resposta do tecido ósseo ao Cianocrilato podem ser encontrados na literatura, embora nenhum deles avalie a resposta histológica e a fixação de enxertos ósseos onlay com o N-Butil-2-Cianocrilato (Indermil&trade;). O objetivo do estudo proposto foi (1) analisar a manutenção do volume de enxertos ósseos onlay fixados à mandíbula de coelhos usando N-Butil-2-Cianocrilato (NB-Cn) ou parafuso de titânio, assim como avaliar (2) a remodelação e incorporação desses enxertos ao leito receptor e também (3) observar a diferença do nível de expressão da proteína tartarato-resistente ácido fosfatase (Trap) envolvida na absorção dos mesmos na presença do NB-Cn e do parafuso de titânio. Dezoito coelhos adultos foram envolvidos nesse estudo. Dois blocos ósseos provenientes da calvária dos coelhos foram transplantados para a mandíbula, em que de um lado do leito receptor o osso autógeno foi fixado com parafuso de osteossíntese (Grupo I - controle), e do outro lado com NB-Cn (Grupo II). Após o procedimento cirúrgico, os animais foram submetidos a exame tomográfico. O sacrifício dos animais ocorreu após 1 (n=9) e 6 (n=9) semanas do procedimento cirúrgico inicial, quando então os animais foram submetidos à nova tomografia. As imagens de tomografia foram usadas para estimativa da manutenção do volume dos enxertos. Cortes histológicos das áreas enxertadas foram preparados para se avaliar o reparo dos enxertos ósseos no sítio receptor e o nível de expressão da proteína Trap. Os resultados tomográficos mostraram melhor manutenção do volume dos enxertos fixados com NB-Cn (p&le;0,05) em comparação àqueles fixados com parafuso, em ambos os tempos experimentais. Na avaliação imunohistoquímica, observou-se que a marcação da proteína Trap no período de 6 semanas foi significativamente maior em comparação ao tempo de 1 semana, sem apresentar diferença significante entre os grupos. A análise histológica revelou que embora o NB-Cn tenha provocado a destruição do periósteo, a estabilidade promovida pela cola permitiu que a revascularização e incorporação do enxerto ocorresse de forma semelhante ao grupo controle. Esses resultados indicam que o NB-Cn se comportou de forma superior ao parafuso como material de osteossínte. No entanto, estudos adicionais são necessários para se investigar a toxicidade deste composto quando utilizado como meio de fixação óssea. / Some experimental studies on the bone tissue responses to cyanoacrylate can be found in the literature, although neither evaluating the histological response and the fixation of onlay bone grafts with Indermil&trade;. The aim of the proposed study is (1) to analyze the bone grafts volume maintenance fixed to the mandible of rabbits using Indermil&trade; or titanium screw, as well as (2) assess the healing of onlay grafts to the recipient bed and (3) the differences of level expression of Trap protein involved in reabsortion of these bone grafts using Indermil&trade; or an osteosynthesis screw. Eighteen adult New Zealand White rabbits were submitted to calvaria onlay bone grafts on both sides of the mandible. On one side the onlay bone graft were fixated with Indermil&trade;, and on the other side bone graft with an osteosynthesis screw. The wounds were then closed, and a computed tomography was realized immediately after this procedure. The animals were killed after 1 (n=9) and 6 weeks (n=9), then the animals were submitted to another computed tomography (CT). The CT images were used to estimate the bone grafts volume maintenance. Histological sections of the grafted areas were prepared to evaluate the healing of bone grafts in the receptor site and the expression level of Trap protein. The CT scan showed better volume maintenance of the bone grafts fixed with Indermil&trade; (p&le;0.05) compared to those fixed with screws, in both the experimental times. The immunohistochemical evaluation showed that the protein Trap expression in 6-week period was significantly higher compared to the 1-week period, without showing significant difference between the groups. Histological analysis revealed that although the Indermil&trade; has caused the destruction of the periosteum, the stability provided by the glue allowed that the bone graft revascularization and incorporation has occurred in a similar manner to the control group. These results indicate that the Indermi&trade; behaved than the screw as osteosynthesys material. However, further studies are needed to investigate the toxicity of this compound when used as a means of bone fixation.
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Fusão de protoplastos visando a reconstrução da laranja azeda / Protoplast fusion aiming the reconstruction of sour orange

Carvalho, Dayse Cristina de 12 December 2006 (has links)
O objetivo deste trabalho foi aplicar a técnica de fusão química de protoplastos para desenvolver híbridos somáticos interespecíficos entre tangerinas (Citrus reticulata) e toranjas (Citrus grandis), visando a obtenção de porta-enxertos semelhantes à laranja azeda Citrus aurantium). Como fonte de protoplastos foram utilizadas suspensões celulares embriogênicas de tangelo \'Page\' (C. reticulata x C. paradisi) e tangor \'Murcote\' (C. reticulata x C. sinensis) e folhas jovens de seedlings de toranjas \'Lau Tau\' e \'Ogami\' (Citrus grandis). Após a fusão os protoplastos foram cultivados sob ausência de luz, até a formação de microcolônias, que foram então cultivadas em meio de cultura EME em dupla-fase, suplementado com 13,33 g/L de maltose para a indução da embriogênese. Os embriões globulares formados foram transferidos para meio EME com 25 g/L de sacarose e quando em estádio cotiledonar foram transferidos para meio de cultura suplementado com 1,5 g/L de extrato de malte. As brotações obtidas foram enxertadas in vitro sobre laranja \'Hamlin\' e \'Valência\'. As plantas obtidas foram levadas para casa de vegetação e cultivadas em substrato comercial. As 17 plantas regeneradas de tangelo \'Page\' + toranja \'Lau Tau\' apresentaram conformação fenotípica adversa aos genitores, com folhas de tamanho reduzido, ápice arredondado, coloração verde escura, mesófilo enrugado e ausência de pecíolo alado. A análise de citometria de fluxo confirmou o caráter diplóide das plantas regeneradas. Marcadores moleculares RAPD apresentaram padrão de bandas similar entre a planta regenerada e o genitor tangelo \'Page\'. O protocolo utilizado para isolamento, fusão e cultura de protoplastos, bem como para a regeneração e aclimatização de plantas permitiram a obtenção 17 plantas da combinação entre tangelo \'Page\' e toranja \'Lau Tau\' com conformação fenotípica diferente dos genitores, duas plantas da combinação entre tangor \'Murcote\' e toranja \'Ogami\' e uma planta da combinação entre tangor \'Murcote\' e toranja \'Lau Tau\'. / The aim of this work was to apply the technique of chemical fusion of protoplasts, in order to develop interspecific somatic hybrids between mandarins (Citrus reticulata) and pummelos (Citrus grandis), in order to produce similar to sour orange (Citrus aurantium). The sources for protoplasts were embryogenic suspension cultures of \'Page\' tangelo (C. reticulata x C. paradisi) and \'Murcott\' tangor (C. reticulata x C. sinensis) and young leaves from seedlings of \'Lau Tau\' and \'Ogami\' pummelos (Citrus grandis). After the fusion, the protoplasts were cultivated in the absence of light, until the formation of microcolonies, and were then cultivated in double-phase EME medium, supplemented with 13.33 g/L of maltose for embryogenesis induction. The globular embryos thus formed were transferred to EME medium with 25 g/L of sucrose and, when in cotyledonal stage, were transferred to a culture medium supplemented with 1.5 g/L of malt extract. The shoots obtained were grafted in vitro onto \'Hamlin\' and \'Valencia\' sweet oranges. The regenerated plants were cultivated in a greenhouse, over commercial substrate. In this process, 17 plants were obtained. These plants presented phenotypic conformation different from the genitors, with leaves with reduced size, round apex, dark green coloration, rough leaf blade and absence of developed petiole. The analysis by flow cytometry confirmed the diploid character of the regenerated plants. RAPD molecular markers presented a similar band pattern between the regenerated specimen and the genitor \'Page\' tangelo. The protocol used for isolation, hybridization and cultivation of protoplasts, as well as for the regeneration and acclimatization of the plants allowed the obtainment of 17 plants from the combination of \'Page\' tangelo + \'Lau Tau\' pummelo, with phenotypic conformation different from the genitors, two plants from the combination of \'Murcott\' tangor + \'Ogami\' pummelo and one plant from the combination of Murcote\' tangor + \'Lau Tau\' pummelo.
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Procedimentos de recobrimento radicular no tratamento das retrações gengivais: Revisão Cochrane e meta-análise / Root coverage procedures for the treatment of recession-type defects. A Cochrane Systematic Review

Leandro Chambrone 11 August 2008 (has links)
O objetivo desta revisão sistemática da literatura foi avaliar a efetividade de diferentes procedimentos de cirurgia plástica periodontal (CPP) no tratamento de retrações gengivais localizadas e generalizadas e, determinar a existência de superioridade de uma determinada técnica cirúrgica sobre as demais. Foram identificados e incluídos apenas ensaios clínicos controlados aleatorizados (ECA), com período de acompanhamento mínimo de 6 meses de duração com as seguintes características: 1) diagnóstico clínico de retração gengival; 2) pelo menos 10 pacientes por grupo ao final do período de acompanhamento; 3) áreas de retração Classe I ou Classe II (MILLER 1985) > 3 mm de comprimento; e 4) áreas de retração que não apresentassem dentes com cáries ou restaurações. Nestes ensaios, avaliou-se a alteração da condição estética observada pelos pacientes, alterações na retração gengival, no nível clínico de inserção e no tecido queratinizado, sítios com recobrimento radicular completo, percentual de recobrimento radicular completo e recobrimento radicular médio. Na estratégia de pesquisa os bancos de dados Cochrane Oral Health Group\'s Specialised Register, CENTRAL, MEDLINE e EMBASE foram pesquisados até novembro de 2007. Busca manual e avaliação de literatura não publicada também foi realizada. A seleção e avaliação dos estudos foram realizados em duplicata, e os autores dos trabalhos incluídos foram contatados de forma a fornecer informações relevantes aos ensaios. Os critérios de seleção e análise dos resultados seguiram as diretrizes do Cochrane Oral Health Group (Cochrane Handbook for Systematic Reviews of Interventions 5.0.0). Os resultados mostraram que 21 ECAs se enquadraram nos critérios de inclusão entre 89 pré-selecionados. Destes, 12 foram utilizados na condução de meta-análises. Apenas quatro ECAs apresentaram alterações na condição estética. Verificou-se em uma das meta-análises, redução estatisticamente significante maior para o enxerto conjuntivo sub-epitelial (ECS) quando comparado a regeneração tecidual guiada, com uma diferença de médias entre os grupos de -0,39 mm [95% IC: -0,65, -0,12]. Alterações estatisticamente significantes foram observadas também para nível clínico de inserção (0,62 mm na comparação entre o enxerto de matriz dérmica acelular e o retalho deslocado coronariamente [95% IC: 0,09, 1,140]) e tecido queratinizado em três diferentes comparações. Em geral, todos os estudos incluídos, apresentaram redução estatisticamente significante na profundidade dos defeitos iniciais e ganhos no nível clínico de inserção e faixa de tecido queratinizado, independente do procedimento utilizado. Concomitantemente, observou-se um recobrimento radicular médio de 80,94% e um recobrimento radicular completo de 46,63% com uma grande variação nos resultados. Em conclusão, todos os procedimentos avaliados proporcionaram melhoras significantes nos parâmetros clínicos avaliados, independente da técnica empregada. Entretanto, o ECS apresentou melhores resultados. Em adição, é necessária a realização de novos estudos e que estes sigam as recomendações do CONSORT comparando os diferentes procedimentos de CPP ao ECS (como grupo controle), de forma a avaliar as alterações clínicas e estéticas dos pacientes. / The objective of this systematic review was to evaluate the effectiveness of different root coverage procedures in the treatment of localized or multiple recession-type defects. Only randomised controlled clinical trials (RCTs) of at least 6 months\' duration were included if the participants met the following criteria: 1) a clinical diagnosis of localized or multiple recession-type defects; 2) recession areas selected for treatment classified as Miller (MILLER 1985) Class I or Class II; 3) recession areas containing teeth with no caries or restorations; and 4) at least 10 participants per group at final examination. In these trials we evaluated the aesthetic condition change related to patient\'s opinion, gingival recession change, clinical attachment change, keratinized tissue change, percentage of sites with complete root coverage and mean root coverage. We searched the Cochrane Oral Health Group\'s Trials Register, the Cochrane Central Register of Controlled Trials (CENTRAL), MEDLINE and EMBASE. Handsearching included several dental journals. Grey literature included SIGLE search. Quality assessment of the included RCTs was carried out in duplicate and the authors were contacted for missing information. Selection criteria and evaluation followed the Cochrane Oral Health Group\'s statistical guidelines. Twenty one RCTs were identified between 89 in potential. From them, 12 were included in meta-analysis. One of them showed a statistically significant reduction in gingival recession for subepithelial connective tissue grafts (SCTG) in comparison to guided tissue regeneration (0,39 mm [95% CI: -0,65, -0,12]. Statistically significant changes were also observed related to clinical attachment level (0,62 mm acelluar dermal matrix allograft versus coronally advanced flap [95% CI: 0,09, 1,140]) and for keratinized tissue in three comparisons. Overall, All PPS procedures produced statistically significant improvements in gingival recession, clinical attachment level and keratinized tissue. Mean root coverage and sites with complete root coverage were 80.94% and 46.63%, respectively. In conclusion, all PPS produced statistically significant improvements in all outcomes. However, the SCTG presented the best overall results. In addition, more research is needed to compare different PPS to SCTG (as a control group) in order to evaluate clinical and aesthetic changes. Future RCTs should follow CONSORT guidelines.
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Métodos alternativos de produção de mudas cítricas em recipientes na prevenção da morte súbita dos citros. / Alternative production methods of containergrown citrus nursery trees related to prevention of citrus sudden death disease.

Girardi, Eduardo Augusto 30 May 2005 (has links)
A Morte Súbita dos Citros (MSC) é uma nova doença que afeta a citricultura paulista, podendo levar à morte de milhões de plantas cítricas enxertadas sobre limão 'Cravo' (Citrus limonia Osbeck), com um impacto comparável ao do vírus da Tristeza dos Citros durante as décadas de 30 e 40. Técnicas alternativas na propagação dos citros podem contornar os efeitos da MSC, seja diretamente, pela produção de subenxertos tolerantes, ou indiretamente, pelo emprego de estaquia de citros e interenxertia em combinações copa/porta-enxerto incompatíveis, mas sobre porta-enxertos tolerantes à MSC. O presente trabalho visou avaliar diferentes métodos de produção de mudas cítricas em recipientes que proporcionem possível prevenção futura das plantas à MSC em condições de campo, através de três experimentos. 1) desenvolvimento de onze porta-enxertos para fins de subenxertia, em diferentes recipientes. Os recipientes usados foram tubetes de 290 mL, sacolas de 1,7L e porta-enxertos transplantados de tubetes de 75mL para sacolas de 1,7L e 4,5L; 2) viabilização de produção de mudas de laranja 'Pêra' (Citrus sinensis L. Osbeck) sobre porta-enxertos citrumelo 'Swingle' (Poncirus trifoliata x Citrus paradisi) e limão 'Volkameriano' (Citrus volkameriana Pasquale), através de interenxertos de laranjas 'Valência' e 'Hamlin'(Citrus sinensis L. Osbeck), tangerina 'Sunki' (Citrus sunki Hort. ex Tanaka) e tangerina 'Cleópatra' (Citrus reshni Hort. ex Tanaka); 3) produção de mudas cítricas e subenxertos a partir de estacas enraizadas de citrumelo 'Swingle'. Utilizaram-se estacas herbáceas, semi-lenhosas e lenhosas obtidas de porta-enxertos de seis meses de idade, submetidas a imersão em solução com IBA 0 ou 500mg L-1 e a enxertia antes do enraizamento. Porta-enxertos produzidos diretamente em sacolas de 1,7L atingiram ponto ideal de subenxertia em menor tempo, ou seja, cerca de 100 a 150 dias após a semeadura, além de permitir a obtenção de plantas maiores e com sistema radicular adequado em mesmo espaço de tempo, quando se necessitar de subenxertos mais vigorosos no campo. A interenxertia se mostrou uma técnica promissora para propagação de citros, especialmente no caso de viabilizar o plantio de laranja 'Pêra' sobre citrumelo 'Swingle' em áreas afetadas pela MSC. Contudo, determina um ciclo de produção mais prolongado e com maior percentagem de descarte de mudas, levando-se até 17 meses para a formação da muda a partir da semeadura do porta-enxerto. Estacas herbáceas com um par de folhas são as mais indicadas para enraizamento e multiplicação de citrumelo 'Swingle'. / Citrus Sudden Death (CSD) is a new disease detected in the citrus industry in São Paulo State, Brazil. It affects all citrus varieties budded on ‘Rangpur’ Lime (Citrus limonia Osbeck), causing lost of vigor and leaf brightness, root system destruction, yield reduction, degeneration of rootstock phloem tissue and death of plants in few months. CSD has a great potential to destroy millions of plants such as Citrus Tristeza Virus has caused between 1930 and 1940. Alternative production methods of container-grown citrus nursery trees could prevent some effects of CSD, for instance, by the use of tolerant inarchings, citrus cuttings, or even interstocks in incompatible scion/rootstock combinations. This work evaluated the following alternative production methods of citrus aiming to prevent occurrence of CSD in groves: 1) production of citrus inarchings using eleven rootstocks in four container types: 290mL tubes and 1,7L and 4,5L plastic bags; 2) production of 'Pera' sweet orange (Citrus sinensis L. Osbeck) nursery trees on incompatible 'Swingle' citrumelo (Poncirus trifoliata x Citrus paradisi) and 'Volkamer' lemon (Citrus volkameriana Pasquale) with four interstocks: 'Valencia' and 'Hamlin' sweet oranges (Citrus sinensis L. Osbeck), 'Sunki' mandarin (Citrus sunki Hort. ex Tanaka) and 'Cleópatra' mandarin (Citrus reshni Hort. ex Tanaka); 3) production of citrus inarchings and nursery trees using 'Swingle' citrumelo cuttings. Herbaceous, semi-hardwood and hardwood cuttings were used and were submitted to IBA solution (0 or 500mg L-1) and budded before rooting. Production of inarchings directly sowed in 1,7L containers resulted in rootstocks ready for use about 100 to 150 days after sowing with more vigorous plants and well shaped root system. Interstocking is a promising citrus propagation technique especially regarding incompatible combinations, and could allow the use of 'Pera' sweet orange on 'Swingle' citrumelo in areas affected by CSD. On the other hand, the production cycle is longer, up to 17 months from sowing, besides producing a higher percentage of inadequate plants. Twoleaf herbaceous cuttings are indicated for appropriate rooting and multiplication of 'Swingle' citrumelo.
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Fusão de protoplastos visando a reconstrução da laranja azeda / Protoplast fusion aiming the reconstruction of sour orange

Dayse Cristina de Carvalho 12 December 2006 (has links)
O objetivo deste trabalho foi aplicar a técnica de fusão química de protoplastos para desenvolver híbridos somáticos interespecíficos entre tangerinas (Citrus reticulata) e toranjas (Citrus grandis), visando a obtenção de porta-enxertos semelhantes à laranja azeda Citrus aurantium). Como fonte de protoplastos foram utilizadas suspensões celulares embriogênicas de tangelo \'Page\' (C. reticulata x C. paradisi) e tangor \'Murcote\' (C. reticulata x C. sinensis) e folhas jovens de seedlings de toranjas \'Lau Tau\' e \'Ogami\' (Citrus grandis). Após a fusão os protoplastos foram cultivados sob ausência de luz, até a formação de microcolônias, que foram então cultivadas em meio de cultura EME em dupla-fase, suplementado com 13,33 g/L de maltose para a indução da embriogênese. Os embriões globulares formados foram transferidos para meio EME com 25 g/L de sacarose e quando em estádio cotiledonar foram transferidos para meio de cultura suplementado com 1,5 g/L de extrato de malte. As brotações obtidas foram enxertadas in vitro sobre laranja \'Hamlin\' e \'Valência\'. As plantas obtidas foram levadas para casa de vegetação e cultivadas em substrato comercial. As 17 plantas regeneradas de tangelo \'Page\' + toranja \'Lau Tau\' apresentaram conformação fenotípica adversa aos genitores, com folhas de tamanho reduzido, ápice arredondado, coloração verde escura, mesófilo enrugado e ausência de pecíolo alado. A análise de citometria de fluxo confirmou o caráter diplóide das plantas regeneradas. Marcadores moleculares RAPD apresentaram padrão de bandas similar entre a planta regenerada e o genitor tangelo \'Page\'. O protocolo utilizado para isolamento, fusão e cultura de protoplastos, bem como para a regeneração e aclimatização de plantas permitiram a obtenção 17 plantas da combinação entre tangelo \'Page\' e toranja \'Lau Tau\' com conformação fenotípica diferente dos genitores, duas plantas da combinação entre tangor \'Murcote\' e toranja \'Ogami\' e uma planta da combinação entre tangor \'Murcote\' e toranja \'Lau Tau\'. / The aim of this work was to apply the technique of chemical fusion of protoplasts, in order to develop interspecific somatic hybrids between mandarins (Citrus reticulata) and pummelos (Citrus grandis), in order to produce similar to sour orange (Citrus aurantium). The sources for protoplasts were embryogenic suspension cultures of \'Page\' tangelo (C. reticulata x C. paradisi) and \'Murcott\' tangor (C. reticulata x C. sinensis) and young leaves from seedlings of \'Lau Tau\' and \'Ogami\' pummelos (Citrus grandis). After the fusion, the protoplasts were cultivated in the absence of light, until the formation of microcolonies, and were then cultivated in double-phase EME medium, supplemented with 13.33 g/L of maltose for embryogenesis induction. The globular embryos thus formed were transferred to EME medium with 25 g/L of sucrose and, when in cotyledonal stage, were transferred to a culture medium supplemented with 1.5 g/L of malt extract. The shoots obtained were grafted in vitro onto \'Hamlin\' and \'Valencia\' sweet oranges. The regenerated plants were cultivated in a greenhouse, over commercial substrate. In this process, 17 plants were obtained. These plants presented phenotypic conformation different from the genitors, with leaves with reduced size, round apex, dark green coloration, rough leaf blade and absence of developed petiole. The analysis by flow cytometry confirmed the diploid character of the regenerated plants. RAPD molecular markers presented a similar band pattern between the regenerated specimen and the genitor \'Page\' tangelo. The protocol used for isolation, hybridization and cultivation of protoplasts, as well as for the regeneration and acclimatization of the plants allowed the obtainment of 17 plants from the combination of \'Page\' tangelo + \'Lau Tau\' pummelo, with phenotypic conformation different from the genitors, two plants from the combination of \'Murcott\' tangor + \'Ogami\' pummelo and one plant from the combination of Murcote\' tangor + \'Lau Tau\' pummelo.

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