Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Instituto de Física, 2012. / Submitted by Alaíde Gonçalves dos Santos (alaide@unb.br) on 2013-03-27T13:14:21Z No. of bitstreams: 1 2012_AlessandraSofiaKiametis.pdf: 12579290 bytes, checksum: a110ee337316c3fde86e0f0a0a81a997 (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2013-03-27T13:56:55Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_AlessandraSofiaKiametis.pdf: 12579290 bytes, checksum: a110ee337316c3fde86e0f0a0a81a997 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-03-27T13:56:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_AlessandraSofiaKiametis.pdf: 12579290 bytes, checksum: a110ee337316c3fde86e0f0a0a81a997 (MD5) / A doença de Alzheimer é a principal causa de demência entre pessoas com mais de 65 anos de idade. Embora sua etiologia não seja completamente conhecida, a diminuição dos níveis de acetilcolina tem sido associada fisiopatologia da doença. A hipótese colinérgica é uma linha terapêutica baseada no aumento do nível de acetilcolina por inibição reversível da enzima acetilcolinesterase (AChE). O presente trabalho tem como objetivo propor possíveis candidatos a inibidores da AChE, concebidos a partir dos derivados fenólicos do líquido da castanha de caju, por meio de modelagem molecular no âmbito da mecânica quântica. Para tanto, várias propriedades eletrônicas importantes no reconhecimento molecular pela enzima foram calculadas para os compostos estudados usando-se o nível de cálculo B3LYP e funções de base 6-311+G(2d.p). A análise de componentes principais revela que alguns destes compostos estão correlacionados com o donepezil, fármaco de atividade biológica conhecida. __________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Alzheimer's disease is the leading cause of dementia among people over 65 years of age. Although its etiology is not fully known, the decreased levels of acetylcholine has been linked to the pathophysiology of the disease. The cholinergic hypothesis is a line therapy based on increasing the level of acetylcholine by reversible inhibition of the enzyme acetylcholinesterase (AChE). This paper aims to propose possible candidates to AChE inhibitors, designed from the liquid phenolic derivatives of cashew, through molecular modeling in the context of quantum mechanics. To this end, several electronic properties important for the molecular recognition by the enzyme were calculated for the compounds studied using the B3LYP level of calculation and basis set functions 6-311+G(2d,p). The principal components analysis reveals that some of these compounds are correlated to donepezil, a drug with known biological activity.

SANTOS NETO, Messias Simoes. Um estudo renal das interações entre uroguanilia, urodilatina e bradicinina na presença dos bloqueadores da guanilato ciclase isatin e ODQ. 2008. 189 f. Tese (Doutorado em Farmacologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2008. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2012-09-04T16:45:44Z No. of bitstreams: 1 2007_tese_mssantosneto.pdf: 8132448 bytes, checksum: 9ad02a09231aaec89ee52dd6686537a9 (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-09-05T11:32:15Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2007_tese_mssantosneto.pdf: 8132448 bytes, checksum: 9ad02a09231aaec89ee52dd6686537a9 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-09-05T11:32:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2007_tese_mssantosneto.pdf: 8132448 bytes, checksum: 9ad02a09231aaec89ee52dd6686537a9 (MD5) Previous issue date: 2008 / Guanylins, natriuretic peptides (ANP and urodilatina) and bradykinin are involved in the pathophysiology, with therapeutic potential, of salt metabolism and hypertension. Objective: To study the mechanism of action and possible interactions of these peptides, with the employment of guanylate cyclase inhibitors isatina and ODQ. Method: Experiments were performed on isolated perfused rat kidney with pharmacological tools, isatin (IS; 0.3 or 10μM) or with ODQ (37μM), in studies with uroguanylin (UGN, 0.3 or 0.6μM), bradykinin (BK , 0.3 or 0.9 or 1.8nM) or urodilatin (UD, 0.03nM). It was also investigated possible interactions between those peptides. Results: Alone, IS (0.3μM), ODQ, UGN (0.3μM), BK (0.9 or 0.3nM) did not interfere significantly in perfusion perfusion (PP), in diuresis or in fractional renal tubular reabsorption of electrolytes (sodium - %TNa+; potassium - %TK+; chloride - %TCl-). In experimental conditions, ODQ proved to be effective (p<0.05) in inhibiting the effects of BK (1.8nM) on the PP (ODQ+BK120min: 111+3mmHg; BK120min: 139+5mm Hg) and %TNa+ (ODQ+BK120min: 80+1%; BK120min: 76+2%). IS (3μM) proved to be partially effective in inhibiting effects of UGN (0.6μM; IS+UGN90min: 76+2%; UGN90min: 72+2%) and BK (1.8nM; IS+BK90min: 81+2%; BK60min: 0.76+2%) on %TNa+. UD (0.03nM90min: 86+2%; UGN+UD90min: 73+4%, p<0.05) increased the natriuresis produced by UGN (0.3μM90min: 83+2%), whose vascular effects were inhibited with BK (0.3nM90min: 104+5mmHg; UGN0, 6μM; 90min: 135+4mmHg; UGN+BK90min: 110+2mmHg). Conclusions: IS and ODQ confirmed the participation of the NO-GMP signalling pathway in the mechanism of action of peptides studied. The infusion simultaneously over a peptide, proved that there are interactions in their different signalling pathway. / Guanilinas, peptídeos natriuréticos (ANP e urodilatina) e bradicinina estão implicados na fisiopatologia, com potencial terapêutico, do metabolismo do sal e da hipertensão. Objetivo: Estudar o mecanismo de ação e possíveis interações destes peptídeos, pelo emprego de inibidores da guanilato ciclase isatina e ODQ. Método: Foram realizadas experiências no rim isolado e perfundido de rato com ferramentas farmacológicas, isatina (IS; 0,3 ou 10μM) ou com ODQ (37μM), nos estudos com uroguanilina (UGN; 0,3 ou 0,6μM), bradicinina (BK; 0,3 ou 0,9 ou 1,8nM) ou urodilatina (UD; 0,03nM). Investigaram-se ainda possíveis interações entre os referidos petídeos. Resultados: Isoladamente, IS (0,3μM), ODQ, UGN (0,3μM), BK (0,9 ou 0,3nM) não interferiram signficativamente na presssão de perfusão, na diurese ou na reabsorção tubular fracionada renal de eletrólitos (sódio - %TNa+; potássio - %TK+; cloreto - %TCl- ). Nas condições experimentais, ODQ mostrou-se eficaz (p<0,05) em inibir os efeitos de BK (1,8nM) sobre a pressão de perfusão (ODQ+BK120min: 111+3mmHg; BK120min: 139+5mmHg) e %TNa+ (ODQ+BK120min: 80+1%; BK120min: 76+2%). IS (3μM) mostrou-se parcialmente eficaz em inibir efeitos de UGN (0,6μM; IS+UGN90min: 76+2%; UGN90min: 72+2%) e de BK (1,8nM; IS+BK90min: 81+2%; BK60min: 0,76+2%) sobre %TNa+. UD (0,03nM90min: 86+2%; UGN+UD90min: 73+4%; p<0,05) potencializou a natriurese produzida por UGN (0,3μM90min: 83+2%), cujos efeitos vasculares foram inibidos com BK (0,3nM90min: 104+5mmHg; UGN0,6μM; 90min: 135+4mmHg; UGN+BK90min: 110+2mmHg). Conclusões: IS e ODQ comprovaram a participação da via de sinalização NO-GMP no mecanismo de ação dos peptídeos estudados. A perfusão simultânea com mais de um peptídio, comprovou que há interações em suas diferentes vias de sinalização.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas, 2014. / Submitted by Ana Cristina Barbosa da Silva (annabds@hotmail.com) on 2015-01-29T18:42:10Z No. of bitstreams: 1 2014_GiselledeAndradeRamos_Parcial.pdf: 223168 bytes, checksum: 9fd475647c175ccdaad31dee250ad14f (MD5) / Approved for entry into archive by Patrícia Nunes da Silva(patricia@bce.unb.br) on 2015-02-03T12:15:47Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_GiselledeAndradeRamos_Parcial.pdf: 223168 bytes, checksum: 9fd475647c175ccdaad31dee250ad14f (MD5) / Made available in DSpace on 2015-02-03T12:15:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_GiselledeAndradeRamos_Parcial.pdf: 223168 bytes, checksum: 9fd475647c175ccdaad31dee250ad14f (MD5) / A Doença de Alzheimer (DA) acomete a área cortical do cérebro, tendo a demência como manifestação clínica clássica, e outros sintomas tais como: perda de memória e cognição, alteração do comportamento, e outros, sendo considerada como doença progressiva que se instala de maneira lenta e irreversivel. No âmbito de uma linha de pesquisa que visa ao desenvolvimento de novos inibidores da enzima acetilcolinesterase (AChE), descrevemos neste estudo a síntese e caracterização de intermediários e produtos finais planejados a partir do cardol (1), bem como a avaliação de seus perfis inibitórios frente à AChE. Foram sintetizados dois intermediários chave, LDT490 (41, 76%) e LDT490Ms (42, 80%), e vinte compostos em rendimentos globais que variaram entre 4,59% a 9,73%. Os derivados foram avaliados frente à AChE de E. electricus com percentual de inibição (%I) que variou de 10% a 92% e IC50 entre 7,2 a 75,3 μM, determinados para os compostos com %I ≥ 50%. Dentre a classe dos bioisostéricos cíclicos o %I variou de 62% a 92%, sendo LDT491 (43) o melhor composto (IC50 7,2 μM). Os derivados da série de piperazínico e arilpiperazínicos, somente o LDT495 (46) apresentou %I ≥ 50% (64%) a 100 μM, sendo os outros derivados não apresentando %I significativo a 30 μM. O derivado pirrolidínico LDT506 (53) apresentou IC50 de 9,1 μM, similar ao derivado piperidínico substituído LDT516 (57, IC50 10,2 μM). Os derivados benzilamínicos IC50 entre 13,8 a 75,3 μM, tendo o LDT519 (58) como o melhor da série. Os resultados sugeriram que ALH/DLH são tolerados na posição 2 em aminas heterocíclicas e que aminas cíclicas possuem bom perfil de inibição, destacando-se LDT491 (43). A avaliação farmacológica de novos compostos faz-se necessária para melhor racionalização dos resultados e estabelecimento de relações estrutura-atividade. Adicionalmente, estudos de modelagem molecular e a avaliação frente a AChE, BuChE bem como da atividade antiagregante βA induzida pela própria AChE, constituem perspectivas do trabalho na validação do planejamento estrutural de inibidores desta classe. / Alzheimer's disease (AD) affects cortical area of the brain, showing dementia as classical manifestation, and other symptoms such as loss of memory and cognition, behavior changes, and others, being considered as progressive disease that develops slowly and irreversibly. Within a line of research that aims to develop novel inhibitors of the enzyme acetylcholinesterase (AChE), in this study we describe the synthesis and characterization of intermediates and final products planned from cardol (1), as well the evaluation of their inhibitory profiles against AChE. Thus, we synthesized two key intermediates, LDT490 (41, 76%) and LDT490Ms (42, 80%) and twenty compounds in overall yields ranging from 4,59% to 9,73%. The derivatives were evaluated front AChE of E. electricus with a percentage of inhibition (%I) ranging from 10% to 92% and IC50 values between 7,2 to 75,3 μM, determined for the compound of %I ≥ 50%. Among the class of the cyclic bioisosters the %I ranged from 62% to 92%, the best being LDT491 (43, IC50 7,2 μM). For the series of piperazyne and arylpiperazine derivatives, only the LDT495 (46) showed %I ≥ 50% (64%) at 100 μM concentration, on the other hand, the derivatives in this series could not inhibit more than 50% at 30 μM. The pyrrolidine derivative LDT506 (53) showed IC50 of 9,1 μM, as the piperidine substituted derivative LDT516 (57, IC50 10,2 μM). The benzylamines derivatives showed %I between 47% to 64% and IC50 between 13,8 to 75,3 μM, and the LDT519 (58) as the best of the series. The results suggested that hidrogen bond aceptors and hidrogen bond donors are tolerated at position 2 in heterocyclic amines and cyclic amines have good inhibition profile, highlighting LDT491 (43). The pharmacological evaluation of new compounds is needed to better rationalization of results and establishment of structure-activity relationships. In addition, molecular modeling studies and evaluation against AChE, BuChE and anti-aggregation activity of βA-induced AChE itself, are the prospects in the validation of the structural design of inhibitors of this class in this work.

Orientador: Jaime Aparecido Cury / Dissertação (mestrado)- Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piraciaba / Made available in DSpace on 2018-07-22T15:07:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Peres_PauloEdelvarCorrea_M.pdf: 4032215 bytes, checksum: 9466284a4ef67d323b96cd6ed39c70d8 (MD5) Previous issue date: 1997 / Resumo: Fenilmetilsulfonilflúor (PMSF) é um inibidor de proteases amplamente utilizado em pesquisas. Entretanto, durante sua ação, ele libera íon flúor o qual pode ter efeitos indiretos em enzimas, na formação de película e no esmalte dental. Quarenta e nove blocos (4x4mm) polidos de esmalte bovino foram utilizados. Inicialmente, dureza superficial do esmalte (DSE) foi determinada, após o que os blocos foram submetidos a uma solução desmineralizante (ácido láctico 0,05 M, pH 5,0 , 50 % saturado em relação à hidroxiapatita e contendo carbopol 907 a 0,2 %) para provocar uma lesão superficial de cárie. A DSE foi novamente determinada e os blocos foram divididos casualmente em 5 grupos para serem submetidos aos seguintes tratamentos: I = Saliva humana estimulada (SHE) ; II = SHE contendo PMSF a 10,0 'mu'M ; III = SHE contendo PMSF a 50,0 'mu'M ; IV = SHE contendo PMSF a 100,0 'mu'M e V = SHE contendo 1,0 ppm F. Durante 12 dias estes blocos permaneceram, diariamente, 22h nas salivas de acordo com os tratamentos, e por 2h na solução desmineralizante (ciclagens de pH). As salivas foram trocadas 2x/dia e a solução desmineralizante após o 6° dia. A DSE (Knoop) foi novamente medida, sendo feitas sempre 05 indentações a cada 100 'mu'M de distância, com uma carga de 50 g por 5 seg, utilizando-se um microdurômetro Shimadzu HMV 2000. Flúor incorporado no esmalte (FIE) foi também determinado, removendo-se 05 camadas de esmalte com HCL 0,5 M e as análises de íon flúor foram realizadas com eletrodo específico Orion 96-09 e analisador de íons EA 940. Determinou-se também, a liberação de íon flúor do PMSF (100 'mu'M) pela ação da saliva. Os resultados mostraram que o PMSF liberou íon flúor e em 10 min/37°C a concentração na saliva aumentou de 0,078 para 1,732 ppm F. Calculou-se a % de recuperação da DSE (remineralização sendo os resultados (média + erro padrão) para os grupos de I a V, respectivamente de : 10,7 + 1,97 A; 30,8 + 2,90 B; 43,5 + 5,07 B,C ; 54,5 + 6,59 C; e 43,2 + 5,82 B,C. Os resultados de FIE na 1a camada foram: 2544,8 + 203,7 A; 6281,0 + 429,9 B; 13732,7 + 1372,8 C ; 13719,0 + 1552,1 Ce 11650,3 + 1394,2 C, sendo que médias seguidas de letras distintas difereJp estatisticamente (p <0,05). Concluiu-se que o PMSF libera íon flúor quando em contato com a saliva, o qual não só remineraliza e incorpora flúor no esmalte como poderá ter efeitos indiretos em outras pesquisas nas quais ele é utilizado com a finalidade de inibir enzimas proteolíticas / Abstract: Phenylmethylsulfonylfluoride (PMSF) is a widely used protease inhibitor that by releasing fluoride may have indirect effect on enzymes, pellicle formation and dental enamel. The objective of this research was to study the effect of PMSF on enamel remineralization through saliva action. Forty nine flat bovine enamel blocks (4x4mm) were used. Surface microhardness (SMH) was initially determined in the sound enamel. These enamel blocks were partially demineralized in 0.05 M lactic acid, 50% saturated hydroxiapatite sol. at pH 5.0 containing Carbopol 0.2%, during 16h at 37°C. SMH was determined again; the enamel blocks were randomly allocated in 5 groups and submitted to the following treatments: 1= Human Stimulated Saliva (HSS); II= HSS containing 10.0 'mu'M PMSF; III= HSS containing 50.0 'mu'M PMSF; IV= HSS containing 100.0 'mu'M PMSF and V= HSS containing 1.0 ppm F. The enamel blocks were submitted to a pH-cycling model for 12 days, kept 2h in demineralizing solution and 22h in HSS. The saliva was changed twice/day and the demineralizing sol. after the 6th day. The Knoop SMH was again determined. Enamel fluoride uptake was determined by removing 5 layers of enamel With 0.5 M HCL. Fluoride released from PMSF (100.0 'mu'M) through saliva action was determined. For the Knoop SMH analysis a microhardness tester SHIMADZU HMV -2000 was utilized and for the fluoride analysing, specific electrode ORlON 96-09 was utilized. The results showed that PMSF, releases fluoride and after 10 minutes at 37°C, the fluoride concentration in saliva increased significantly from 0.078 to 1.732 ppm F. The % of Knoop SMH recovery (mean + SE) was calculated; the results for the groups I to V were respectively: 10.7 '+ or -'1.97A; 30.8 '+ or -'2.90B; 43.5 '+ or -' 5.07B,C; 54.5 '+ or -' 6.59C; and 43.2 '+ or -' 5.82B,C. The results (mean '+ or -' SE) of enamel fluoride uptake (ppm) at the 1st layer were: 2544.8 '+ or -' 203.7A; 6281.0 '+ or -' 429.9B; 13732.7 '+ or -' 1372.8C; 13719.0 '+ or -' 1552.1C; and 11650.3 '+ or -' 1394.2C. Means followed by different letters are statistically significant (p<0.05). In conclusion, PMSF releases fluaride when in contact with saliva, which not only enhances remineralization and enamel fluoride uptake but may also have indirect effects on other researches where PMSF is used as protease inhibitor / Mestrado / Biologia e Patologia Buco-Dental / Mestre em Odontologia

Orientador: Saulo Santesso Garrido / Banca: Reinaldo Marchetto / Banca: Fillipe Vieira Rocha / Resumo: O presente trabalho descreve o estudo de um mimético da proteína CcdB, o CcdBSG-2, para verificar a possibilidade de formação de um complexo metálico com o lantanídeo Térbio (III) e com o íon metálico Cobre (II), bem como avaliar o potencial dos complexos em inibir a atividade das enzimas bacterianas DNA-girase e Topoisomerase IV. Este peptídeo foi sintetizado pela metodologia de síntese em fase sólida (SPFS), purificado por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) e identificado por espectrometria de massas (LC/ESI-MS). Posteriormente o peptídeo foi complexado com 3 equivalentes molares de Cu(II) e Tb(III) e acompanhou-se as alterações nos espectros de absorção e emissão de fluorescência do peptídeo e espectroscopia de luminescência após a adição dos metais. Estes mesmos estudos espectroscópicos foram realizados em função do tempo para verificar o intervalo necessário para a formação de cada complexo metal-peptídeo. Foram realizados também estudos de caracterização estrutural por espectroscopia de dicroísmo circular, avaliando o peptídeo na presença e ausência dos metais. Para avaliar o potencial de inibição dos peptídeos, utilizou-se ensaios de eletroforese em gel de agarose frente as enzimas DNA girase e Topoisomerase IV e ensaios de crescimento bacteriano em meio líquido frente as bactérias Escherichia coli enterohemorrágica e Staphylococcus aureus. Ambos os testes para avaliar o potencial de inibição mostraram que os metalopeptídeos Tb(III)-CcdBSG-2 e Cu(II)-CcdBS... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The present work describes the study of a mimetic of the protein CcdB, the CcdBSG-2, to verify the possibility of formation of a metallic complex with the lanthanide Terbium(III) and with the metallic ion Copper (II), as well as to evaluate the potential of the complexes in inhibiting the activity of bacterial enzymes DNA-gyrase and Topoisomerase IV. This peptide was synthesized by the methodology of solid phase peptide synthesis (SPPS), purified by high performance liquid chromatography (HPLC) and identified by mass spectrometry (LC / ESI-MS). Later the peptide was complexed with 3 molar equivalents of Cu (II) and Tb (III), followed by changes in the spectra of absorption and emission of fluorescence of the peptide and luminescence spectroscopy after the addition of the metals. These same spectroscopic studies were performed as a function of time to verify the interval required for the formation of each metal-peptide complex. Structural characterization studies were also performed by circular dichroism spectroscopy, evaluating the peptide in the presence and absence of metals. To evaluate the inhibition potential, electrophoresis and bacterial growth assays were used in liquid medium against the peptides produced. Both tests to assess the inhibition potential showed that theTb (III) -CcdBSG-2 and Cu (II) -CcdBSG-2 metallopeptides exhibit about three times greater activity than the CcdBSG-2 peptide in the absence of the metal. These important results indicate that the increas... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2016-09-01T16:28:46Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2181156 bytes, checksum: 1a75ca604e9d172abff343dcc414bc44 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-01T16:28:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2181156 bytes, checksum: 1a75ca604e9d172abff343dcc414bc44 (MD5) Previous issue date: 2016-02-19 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / As leishmanioses são uma das mais significantes doenças tropicais negligenciadas em todo o mundo, apresentando cerca de 1,3 milhão de novos casos anualmente e 20.000 a 30.000 mortes no mesmo período. Leishmania braziliensis é a principal espécie responsável pela Leishmaniose Tegumentar no Novo Mundo, sendo o Brasil o país com a maior incidência da doença frente a outros países da América do Sul. O arsenal terapêutico contra a Leishmaniose Tegumentar é ainda bastante restrito, e mesmo quando eficazes, as drogas de escolha causam efeitos colaterais graves. Dessa forma, este trabalho é parte de um esforço de várias instituições nacionais e internacionais, financiado pela Comunidade Europeia através do consórcio A- ParaDDisE (http://a-paraddise.cebio.org/), cujo objetivo é a descoberta de novas drogas para o tratamento de doenças parasitárias negligenciadas, incluindo as Leishmanioses. Enzimas modificadoras de Histonas (HMEs), como as histonas deacetilases (HDACs), estão envolvidas em processos celulares cruciais, como a ativação e inibição da expressão gênica. Inibidores dessas enzimas têm sido investigados como drogas candidatas para aplicação na quimioterapia de uma variedade de doenças, incluindo o câncer e doenças parasitárias, uma vez que eles inibem a progressão do ciclo celular e/ou induzem a apoptose. Neste trabalho foram testados compostos inibidores de HMEs (iHMEs), enviados por pesquisadores parceiros do consórcio A-ParaDDisE, em formas promastigotas axênicas e amastigotas intracelulares de L. braziliensis em infeção de células hospedeiras (macrófagos da linhagem Raw 264.7). Os resultados mostram diferentes efeitos para esses iHMEs em promastigotas e amastigotas, como observado para os compostos BSF38 e BSF39, que apresentaram efeito significante em promastigotas, mas não em amastigotas. Já o composto BSF2 foi eficaz em matar tanto as formas promastigotas axênicas quanto as amastigotas intracelulares, atingindo cerca de 95% de ação leishmanicida, similar à droga controle Anfotericina B. Além disto, a toxicidade destes compostos para macrófagos foi mínima ou não existiu. Sendo assim, o BSF2 pode ser considerado um bom alvo para continuidade do desenvolvimento de novas drogas leishmanicidas com ação sobre L. braziliensis. / Leishmaniasis is one of the major neglected tropical diseases worldwide, featuring about 1.3 million new cases annually and 20.000 - 30.000 deaths in the same period. Leishmania braziliensis is the main species responsible for cutaneous leishmaniasis in New World, and Brazil is the country with the highest incidence of the front disease to other countries in South America. The therapeutic arsenal against cutaneous leishmaniasis is still quite limited, and even when effective, the choice drugs cause serious side effects. Thus, this work is part of an effort of several national and international institutions, financed by the European Community by the consortium A-ParaDDisE (http://a-paraddise.cebio.org/), whose objective is the discovery of new drugs for the treatment of neglected parasitic diseases, including leishmaniasis. Histone modifying enzymes (HMEs), such as histone deacetylases (HDACs), are involved in key cellular processes such as activation and inhibition of gene expression. Inhibitors of these enzymes have been studied as candidate drugs for use in the chemotherapy of a variety of diseases, including cancer and parasitic diseases since they inhibit cell cycle progression and / or induce apoptosis. In this study we tested HMEs compounds inhibitors (iHMEs), submitted by A-ParaDDisE research partners, in promastigotes and intracellular amastigotes of L. braziliensis infection in host cells (macrophages of Raw 264.7 lineage). The results show different effects of these iHMEs in promastigotes and amastigotes, as observed for compounds BSF38 and BSF39, which showed significant effect in promastigotes, but not in amastigotes. BSF2 compound was effective in killing both promastigotes axenic forms as intracellular amastigotes, reaching about 95% of leishmanicidal action, similar to drug control Amphotericin B. In addition, the toxicity of these compounds to macrophages was minimal or did not exist. Thus, the BSF2 can be considered a good target for continued development of new drugs acting against L. braziliensis.

Submitted by Maurílio Figueiredo (maurilioafigueiredo@yahoo.com.br) on 2013-03-05T21:59:32Z No. of bitstreams: 1 TESE_CorrelaçãoAtividadeProteassoma.pdf: 2922794 bytes, checksum: bde4f13f98b7a755e7aadc3b3b3c1f62 (MD5) / Approved for entry into archive by Neide Nativa (neide@sisbin.ufop.br) on 2013-03-12T21:23:14Z (GMT) No. of bitstreams: 1 TESE_CorrelaçãoAtividadeProteassoma.pdf: 2922794 bytes, checksum: bde4f13f98b7a755e7aadc3b3b3c1f62 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-03-12T21:23:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TESE_CorrelaçãoAtividadeProteassoma.pdf: 2922794 bytes, checksum: bde4f13f98b7a755e7aadc3b3b3c1f62 (MD5) Previous issue date: 2011 / Os inibidores do tipo Bowman-Birk (BBI) são moléculas protéicas contendo dois domínios inibitórios distintos para enzimas semelhantes à tripsina e quimotripsina. O interesse por essa classe de inibidores decorre de estudos que demonstraram o efeito protetor dos BBI no câncer induzido quimicamente. No presente trabalho avaliou-se o efeito dos BBI isolados de Macrotyloma axillare e Glycine max na prevenção de neoplasias colo-retal induzidas por injeções intraperitoneais de dimetilhidrazina (DMH) durante 12 semanas. Os grupos de camundongos controle e testes (tratados com DMH) receberam uma dieta contendo BBI, na dose de 0,1% (p/p) associada (DMHV) ou não às vitaminas A, C e E, durante 24 semanas. Camundongos tratados com DMH apresentaram alterações histopatológicas compatíveis com a formação de pólipos neoplásicos. Em concordância com a histologia, a análise do marcador tumoral CD44, por Western blotting, revelou aumento significativo de expressão nos animais tratados com DMH e DMHV. Os extratos protéicos provenientes desses tecidos apresentaram aumento significativo de atividade proteolítica dependente de proteassoma, em ensaios peptidásicos para as atividades tripsina e quimotripsina símiles. Por outro lado, para o grupo de animais tratados com DMH e BBI observou-se atividade proteassomal comparável àquela dos animais do grupo controle. O tratamento de animais com BBI isoladamente promoveu a redução da atividade proteolítica dependente de proteassoma quando comparada àquela de animais alimentados com dieta normal. Além disso, retenção de enzimas com atividades proteolíticas tripsina e quimotripsina-símile, provenientes das frações lisossomal e solúvel, foi observada utilizando uma coluna de afinidade sepharose-BBI. As atividades dessas enzimas também se mostraram significativamente aumentadas no grupo de animais tratados com DMH. Esses resultados demonstraram que inibições de atividades proteolíticas distintas podem contribuir para o mecanismo protetor dos BBI. Coletivamente os resultados permitiram concluir que o tratamento com BBI foi capaz de prevenir a formação de pólipos intestinais, impedir o estabelecimento de eventos inflamatórios no intestino delgado, cólon e glândula anal, e manter em níveis normais o marcador clássico tumoral CD44. ___________________________________________________________________________________________________________________________________________________ / ABSTRACT: The Bowman-Birk inhibitors (BBI) are protein molecules containing two distinct inhibitory domains for trypsin and chymotrypsin-like enzymes. The interest for this class of inhibitors is based on studies which demonstrated a protective effect promoted by BBI, particularly for chemically-induced cancers. In the present work, we evaluated the effects of BBI isolated from Macrotyloma axillare and Glycine max in the prevention of colon cancers induced by intraperitoneal injections of dimethylhydrazine (DMH) during 12 weeks. Control and DMH-treated animals were fed a diet containing BBI at a dose of 0.1% (p/p) associated (DMHV) or not with the vitamins A, C and E, during 24 weeks. DMH-treated animals exhibited hystopathological alterations compatible with the formation of neoplastic polyps. In agreement with the hystological examinations, analysis of the tumor marker CD44, by Western blotting, revealed a significant increase in its expression for the DMH-treated group. Protein extracts from these tissues also contained increased proteasome-dependent proteolytic activity as judged by peptidase assays for the trypsin and chymotrypsin-like activities. In contrast, for DMH + BBI-treated animals proteasomal activity was comparable to that observed for the control group. In fact, animals given BBI alone, as a diet supplement, exhibited decreased proteasomal activity when compared to that from animals fed a normal diet. In addition, by using a sepharose-BBI affinity column, it was observed retention of enzymes displaying trypsin and chymotrypsin-like activities obtained from the lysosomal and soluble fractions. These proteolytic activities were also shown to be increased for DMH-treated animals. These results suggest that the inhibition of distinct proteolytic activities could account for the protective mechanisms produced by BBI. Collectively our analyses allowed us to conclude that BBI treatment was able to prevent intestine polyp formation, decrease any associated inflammatory processes and keep at basal levels the classic tumor marker CD44.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Animal, 2012. / Submitted by Alaíde Gonçalves dos Santos (alaide@unb.br) on 2012-09-04T10:47:40Z No. of bitstreams: 1 MARY-ANN ELVINA XAVIER.pdf: 1811588 bytes, checksum: b6a72e0cbefad213d4d0806947b0b504 (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2012-12-21T13:44:22Z (GMT) No. of bitstreams: 1 MARY-ANN ELVINA XAVIER.pdf: 1811588 bytes, checksum: b6a72e0cbefad213d4d0806947b0b504 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-12-21T13:44:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MARY-ANN ELVINA XAVIER.pdf: 1811588 bytes, checksum: b6a72e0cbefad213d4d0806947b0b504 (MD5) / Com o intuito de desenvolver novos materiais para tratamento do câncer, o objetivo deste trabalho foi associar dois componentes, sendo um com atividade anticarcinogênica comprovada: o BTCI e nanopartículas de maghemita recobertas por dextrana (MagDex) e caracterizar magnética e biofisicamente o complexo formado. A atividade antitumoral do BTCI foi comprovada contra células MCF-7 e essa molécula associada às nanopartículas biocompatíveis pode ser direcionada para um local sítio específico e lisar células tumorais no processo de magnetohipertermia. A caracterização do complexo foi feita pelos métodos: microscopia eletrônica de transmissão e de varredura, espalhamento de luz dinâmico (diâmetro hidrodinâmico, potencial zeta e polidispersividade), fluorescência (número de sítios e constante de associação), dicroismo circular, ensaios enzimáticos colorimétricos para avaliação da atividade inibitória do BTCI, birrefrigência magnética estática, ensaios de associação do inibidor. De acordo com análises de diâmetro hidrodinâmico, o BTCI complexou com as nanopartículas de MagDex. A constante de associação do complexo foi de 104 M-1 em pH 4,0 e 103 M-1 em pH 7,4 e pH 10,0. Segundo os parâmetros termodinâmicos, nessas três condições de pH, a associação do complexo foi espontânea, dirigida entropicamente com contribuições de associações hidrofóbicas e ligações de hidrogênio. A associação de BTCI a MagDex não alterou o conteúdo das estruturas secundárias, nem a atividade inibitória do BTCI complexado contra suas enzimas cognatas de forma expressiva. Adicionalmente, BTCI-MagDex manteve as características magnéticas de MagDex, como a maior resposta de susceptibilidade magnética a campos de (300 Oe), mesmo após diluições. O ensaio de sedimentação magnética sugere que 80% do BTCI associa às nanopartículas. Em conclusão, os resultados obtidos nesse trabalho sugerem que BTCI-MagDex apresenta características físico-químicas que favorecem a estabilidade e atividade do BTCI e a manutenção das propriedades magnéticas das nanopartículas, condição esta que é fundamental para estudos futuros que visem a aplicação desse sistema na terapia contra o câncer. / In order to develop new materials for the treatment of cancer, the objective was to associate two components, one with proven anticancer activity: the BTCI and maghemite nanoparticles coated with dextran (MagDex) and magnetic and biophysically characterize the complex formed. The antitumor activity of BTCI was proven against MCF-7 cells and this molecule associated with biocompatible nanoparticles can be targeted to a specific site location and kill tumor cells in the process of magnetohipertermia. The characterization of the complex was made by the methods: transmission electron microscopy and scanning electron microscopy, dynamic light scattering (hydrodynamic diameter, zeta potential and polydispersity), fluorescence (number of sites and association constant), circular dichroism, enzymatic colorimetric assays for assessment inhibitory activity of BTCI, static magnetic birefringence, tests of association of the inhibitor. According to analysis of hydrodynamic diameter, BTCI formed a complex with MagDex nanoparticles. The association constant of the complex was 104 M-1 at pH 4.0 and 103 M-1 at pH 7.4 and pH 10.0. According to the thermodynamic parameters, these three pH conditions, the association of the complex was spontaneous, entropically driven with contributions from hydrophobic associations and hydrogen bonding. The association of BTCI-MagDex did not alter the content of secondary structures, nor the inhibitory activity of the complexed BTCI against their cognate enzymes significantly. Additionally, BTCI-MagDex kept MagDex magnetic characteristics, such as susceptibility response to magnetic fields (300 Oe), even after dilution. The test of magnetic sedimentation suggests that 80% of BTCI associated with nanoparticles. In conclusion, the results suggest that BTCI-MagDex has physicochemical characteristics that favor the stability and activity of BTCI and maintenance of the magnetic properties of nanoparticles, a condition which is critical for future studies aimed at applying this system in therapy against cancer.

Orientador: Luiz Carlos Dias / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-07-31T17:14:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ferreira_Edilson_M.pdf: 5284953 bytes, checksum: e6bdcb2cea65bbd2f84a01043bf54da0 (MD5) Previous issue date: 2001 / Mestrado

Orientador: Adelino Vieira de Godoy Netto / Co-orientador: Antonio Eduardo Mauro / Banca: Isabele Rodrigues Nascimento / Banca: Victor Marcelo Deflon / Banca: Ana Maria da Costa Ferreira / Banca: Adriano Bof de Oliveira / Resumo: Nos últimos anos o interesse na obtenção de novos fármacos a base de metais vem aumentando consideravelmente. Desde a descoberta da atividade antitumoral da cisplatina na década de 60 inúmeros complexos de Pt(II) foram sintetizados, mas poucos chegaram aos testes clínicos. Por este motivo, o íon Pd(II) vem sendo usado sistematicamente no planejamento de novos compostos biologicamente ativos, pois apresenta a configuração eletrônica d8 e a mesma geometria quadrado planar dos compostos de platina, além de exibir outros modos de ação frente aos seus alvos biológicos. Neste trabalho foram sintetizados e caracterizados novos complexos de paládio(II) do tipo [PdX2(TAA)(PPh3)] e [PdX(L)(PPh3)]X [X = Cl-, Br-, I-, SCN-; TAA = tioacetamida; L = 4-metil-3-tiossemicarbazida (4-MeT) ou 4-fenil-3-tiossemicarbazida (4-PhT)]. Os complexos foram caracterizados pelas técnicas de IV, RMN, análise elementar e análise termogravimétrica. As estruturas moleculares dos complexos [PdI(4-MeT)(PPh3)]I (3), [Pd(SCN)(4-MeT)(PPh3)](SCN) (4) e [PdI(4-PhT)(PPh3)]I (7) foram determinadas via difração de raios X de monocristal, indicando um ambiente quadrático plano ao redor do metal, com seus sítios de coordenação ocupados pela trifenilfosfina, pela tiossemicarbazida coordenada de maneira bidentada e o I ou SCN. A citotoxicidade in vitro de todos os complexos foi avaliada pelo método do MTT, frente as culturas celulares de tumores murinos LM3 (adenocarcinoma mamário) e LP07 (adenocarcinoma pulmonar). Os compostos mais promissores tiveram sua capacidade de interação com o DNA investigada. Os resultados demostraram que o DNA não é o alvo principal, uma vez que os complexos só interagiram com a biomolécula em altas concentrações. Diante disto, outros possíveis alvos foram investigados. A capacidade dos complexos em inibir as enzimas topoisomerases foi avaliada pela técnica de eletroforese em gel de agarose e os dados mostraram que quase todos... / Abstract: In the last years the interest in obtaining new metal drugs has increased considerably. Since the discovery of the antitumor activity of cisplatin in the 60's, many Pt(II) complexes were synthesized, but only few reached the clinical trials. For this reason, the Pd(II) ion has been used systematically in the design of new biologically active compounds. Palladium complexes display the same electron configuration and square planar geometry of platinum compounds, furthermore these complexes can interact through different way towards pharmacological targets. In this work new palladium(II) complexes of the type [PdX2(TA)(PPh3)] and [PdX(L)(PPh3)]X [X = Cl-, Br-, I-, SCN-; TAA = thioacetamide , L = 4-methyl-3-thiosemicarbazide (4-MeT) or 4-phenyl-3-thiosemicarbazide (4-PhT)], were synthesized and characterized. All the compounds were characterized by infrared, nuclear magnetic resonance spectroscopy, elemental analysis and thermogravimetric analysis. The structures of three complexes [(PdI(4-MeT)(PPh3)]I, [Pd(SCN)(4-MeT)(PPh3)](SCN) and [(PdI(4-PhT)(PPh3)]I were determined by single crystal X-ray diffraction and was observerd a square planar environment around the metal center, with the coordination sites occupied by triphenylphosphine, the N,S-donors ligand and iodine atom or thiocyanate group. The in vitro cytotoxicity of the complexes were evaluated against the murine tumor cells LM3 (breast adenocarcinoma) and LP07 (lung adenocarcinoma). The most promising compounds were further evaluated by their ability to interact with a purine base and the DNA. The results showed that DNA is not the primary target of these compounds because they only interacted with this biomolecule at high concentrations. Thus, others potential targets were investigated . The capacity of the complexes to inhibit topoisomerase enzymes was evaluated by electrophoresis, and the data showed that almost all the compounds inhibit this enzyme at a concentration rage... / Doutor