Orientador: Juliany Gomes Quitzan / Resumo: O carcinoma de células escamosas (CCE) é uma neoplasia epitelial originada dos queratinócitos da pele de cães. Sua etiologia está relacionada à exposição a raios solares ultravioletas, o que o coloca como uma das neoplasias mais frequentes em países tropicais de clima quente. O CCE cutâneo tem comportamento invasivo local, baixa capacidade de metástase e frequentemente encontra-se associado à ceratose actinica. Neste estudo, objetivou-se avaliar o efeito do tratamento pré-operatório com piroxicam (Px) na expressão de COX-2 e Ki67, indicadores de inflamação e proliferação celular, respectivamente, em cães acometidos por CCE cutâneo. Além disso, o intervalo livre de doença (ILD) por um período de pelo menos 180 dias após excisão cirúrgica associada a regime de baixa dose diária com Px (0.3mg/kg) e ciclofosfamida (CYC; 15mg/m2) foi determinado nesta população. Não houve diferença estatística significativa na expressão de COX-2 após o tratamento pré-cirúrgico com Px; no entanto, houve diminuição no índice proliferativo marcado com Ki67 (P<0.05). Não foi encontrada alteração significativa no ILD no grupo tratado com Px e CYC (160 dias), quando comparado com o grupo controle retrospectivo (145 dias), tratado somente com ressecção cirúrgica. Não houve diferença estatística no ILD quando analisados o grau histológico, índice mitótico, tempo de evolução, metástase de linfonodos e o comprometimento das margens cirúrgicas. Adicionalmente, cães com estadiamento T4, independente do tratam... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Squamous cell carcinoma (SCC) is an epithelial neoplasm that arises from skin keratinocytes of the dogs. Its etiology is related to ultraviolet sunlight, which puts it as one of the most frequent neoplasm in tropical hot weather countries. Cutaneous SCC have a locally invasive, low metastatic behavior, and is often associated with actinic keratosis. This study aimed to evaluate the effect of pre-operative treatment with piroxicam (Px) on COX-2 and Ki67 expression, indicators of inflammation and cell proliferation, respectively. Besides that, the evaluation of disease-free interval (DFI) of these animals for at least 180 days after surgical excision associated with a daily low-dose treatment with Px (0.3mg/kg) and cyclophosphamide (CYC; 15mg/m2). There was no statically significant difference between COX-2 expression before and after treatment with Px; However, there was a significant decrease on Ki67 proliferative index (P<0.05). No significance was found in DFI when comparing the group treated with Px and CYC (160 days) and the control retrospective group (145 days), treated only with surgical resection. There was no statically difference on DFI when accessing histological grade, mitotic index, evolution time, lymph node metastasis, and incomplete surgical margins (P>0.05). Additionally, dogs with T4 stage, independent of the treatment, were 3.2 and 4.8-fold more likely to develop an early recurrence when comparing with T3 and T2, respectively. The results of this study demo... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Ana Maria Pires Soubhia / Banca: Suzana Cantanhede Orsini Machado de Souza / Banca: Décio dos Santos Pinto Júnior / Resumo: A incidência mundial de câncer em jovens tem aumentado e estudos recentes mostram que o câncer de boca também segue esta tendência. O objetivo deste trabalho foi avaliar e comparar as características clínicas, histopatológicas e imunoistoquímicas entre pacientes jovens, com idade igual ou inferior a 40 anos, e pacientes idosos, com idade igual ou superior a 65 anos, diagnosticados com carcinoma espinocelular em língua. Foram selecionados 19 casos de pacientes jovens e 19 casos de pacientes idosos e coletados dados clínicos dos prontuários. A gradação histológica foi realizada utilizando os critérios de classificação de Bryne et al (1992), na região do fronte tumoral. Também foi analisada a expressão imunoistoquímica das proteínas Bcl-2, Cerb-b2 e Ki-67. Neste estudo foi observado maior número de carcinomas espinocelulares moderadamente e pobremente diferenciados no grupo de pacientes jovens enquanto que no grupo de idosos houve maior prevalência de carcinomas bem diferenciados. Houve também no grupo de pacientes jovens um aumento do infiltrado linfoplasmocitário. A expressão imunoistoquímica das proteínas Bcl-2, Cerb-b2 e Ki-67 não mostrou diferenças significantes no fronte tumoral entre pacientes jovens e idosos. Na amostra estudada, foram detectadas diferenças morfológicas entre o grupo de pacientes jovens e idosos, no entanto, estas diferenças não foram expressas de forma significativa na análise imunoistoquímica. / Abstract: The worldwide incidence of cancer in young is increasing and recent studies show that the oral cancer also follows this trend. The objective of this study was to evaluate and to compare the clinical, histopathological and immunohistochemical features between young patients, with 40 years old or less, and elderly patients, with 65 years old or a superior age, diagnosed with tongue squamous cell carcinoma. Nineteen cases of young patients and 19 cases of elderly patients were selected and clinical data were collected from medical records. The histological grading was carried out using the criteria of classification of Bryne et al (1992) in the tumoral front region. The immunohistochemical expression of the proteins Bcl-2, Cerb-b2 and Ki-67 was also analyzed. In the present study, the group of young patients presented a higher number of moderately and poor differentiated squamous cell carcinomas whereas the elderly group had a greater prevalence of well differentiated carcinomas. The group of young patients also showed an increase in the lympho-plasmacytic infiltration. The immunohistochemical expression of the proteins Bcl-2, Cerb-b2 and Ki-67 did not show significant differences in the tumoral front region between young and elderly patients. In the studied sample, morphological differences between the group of young and elderly patients were detected, however, these differences were not expressed in in the immunohistochemical analysis. / Mestre

Orientador: Alexandre Lima de Andrade / Banca: Silmara Sanae Sakamoto de Lima / Banca: Flávia Rezende Eugênio / Resumo: As neoplasias oculares representam uma crescente preocupação na oftalmologia veterinária. O carcinoma de células escamosas (CCE) corneal é raro em cães, pouco estudado e as investigações sobre os mecanismos da carcinogênese são escassos. O presente trabalho teve por objetivo avaliar a imunoexpressão das proteínas p53, p63 e PUMA e suas possíveis contribuições quanto ao prognóstico e terapêutica no CCE corneal espontâneo de cães. Foram identificados seis casos, cinco diagnosticados como CCE e um como ceratite actínica. Na imunoistoquímica avaliou-se o número de células marcadas por campo no microscópio adotando-se dois critérios de classificação, quanto à intensidade e quanto à frequência de marcação. Também foi avaliada a graduação histológica dos tumores quanto ao grau de malignidade nos casos de carcinoma de células escamosas de córnea, utilizando o índice mitótico como principal referência. Todas as amostras apresentaram imunomarcação para as proteínas estudadas, porém com intensidade e frequência variadas. Não foi observada relação entre maior índice mitótico e, portanto, maior malignidade, com uma maior expressão de qualquer uma das proteínas analisadas. Conclui-se que a imunoexpressão das proteínas p53, p63 e PUMA estão presentes nos CCE corneal de cães podendo contribuir para sua carcinogênese, mas não fornece indicadores de prognóstico nesta neoplasia / Abstract: Ocular tumors play an increasing concern in veterinary ophthalmology. Corneal squamous cell carcinoma (SCC) is unfrequent in dogs, and by this way it has little studies, and the investigations of carcinogenesis mechanisms are rare. The aim of this work was to identify the p53, p63 and PUMA proteins expression in the spontaneous dog corneal SCC. For this work, were used five cases of corneal SCC and one case of actinic keratitis and their possible contributions to prognosis and therapy. The immunohistochemical analysis could evaluated the number of stained cells by field in optic microscopy using two classifications methods: intensity and immunofrequency. Also, we could evaluated histological grade of tumor related to malignancy in corneal SCC cells by using the mitotic index as a pattern. All samples showed immunolabelling to those proteins studied, although with diversity in intensity and frequency. The authors couldn't observe relationship between the biggest mitotic index, and, by this way, most malignancy, with the expressions of all analysed proteins. These results could support the conclusions that p53, p63 and PUMA proteins immunoexpression are present in canine corneal SCC and could give help to their carcinogenesis, but they don't give a prognostic indicator of these tumors / Mestre

Orientador: Mariângela Esther Alencar Marques / Coorientador: Luciana Abbade / Banca: Renata Aparecida Martinez Antunes Ribeiro Vieira / Banca: Gisele Alborghetti Nai / Resumo: O carcinoma espinocelular (CEC) é tumor maligno das células espinhosas da epiderme caracterizado por evolução mais rápida, maior poder invasivo e metastático em relação ao carcinoma basocelular (CBC). A área mais profunda e infiltrativa do CEC, conhecida como fronte de invasão, revela células neoplásicas malignas com menor grau de diferenciação comparadas à totalidade da lesão. Estudos recentes demonstram a influência do padrão do fronte de invasão tumoral no prognóstico de CEC de laringe e colo uterino. Contudo, não há estudos sobre o mesmo em relação a CEC cutâneos de cabeça e pescoço. Estudar as características clínicas, histopatológicas e perfil imuno-histoquímico do CEC de cabeça e pescoço e fronte de invasão tumoral, correlacionando-o com comportamento biológico. O estudo foi do tipo coorte retrospectivo, sendo selecionados os pacientes que tiveram diagnóstico de CEC de cabeça e pescoço confirmados pelo exame anatomopatológico no período de 1999 a 2009. A avaliação do fronte de invasão tumoral foi realizada empregando-se imuno-histoquímica para E-caderina, ki-67 e p53. Resultados: O tipo de fronte de invasão, bem como as expressões de E-caderina e ki-67, seja em sítio superficial ou profundo, não apresentaram associação com os critérios prognósticos histopatológicos. Os achados mostraram que a E-caderina, o p53 e o ki-67 foram mais expressos em tumores com tamanho ˃ 2cm. Em relação a espessura do tumor, observamos que o p53 foi mais expresso na profundidade nas lesões mais espessas (índice de Breslow maior que 2mm), e que foi acompanhada também pela expressão maior do Ki-67.A expressão de p53 em sítio superficial teve associação inversa com o critério de espessura (p<0,049) e, em sítio profundo, teve associação direta com a intensidade do processo inflamatório local (p<0,046). O tipo de fronte de invasão, bem como as expressões de E-caderina, ki-67 e p53, em sítios ... / Abstract: The Squamous Cell Carcinoma (SCC) is a malignant epidermal tumor of squamous epithelial cells, characterized for greater aggressiveness much higher incidence of metastasis than Basal Cell Carcinoma (BCC). The deepest invading tumor area, known as invasive tumor front usually disclose less differentiated malignant cells, compared with the whole lesion. Recent studies demonstrate the influence of the invasive tumor front pattern on the prognosis of larynx and uterine cervix SCC. However, there is no studies about that on cutaneuos SCC of the head and neck. To study the clinical, histopathological and immunohistochemical profile of the SCC from head and neck and its invasive tumor front, correlating it with its biological behavior. The study was a retrospective type coorte, where the patients with histopathological diagnosis of head and neck cutaneous SCC among 1999 to 2009 were selected. The evaluation of invasive tumor front was immunohistochemistry for E-cadherin, ki-67 and p53. The pattern of invasive tumor front, as well as E-cadherin and ki-67 expressions, at superficial and deep sites, did not present association with histopathological prognostic criteria. The findings showed that E-cadherin, p53 and Ki-67 were more highly expressed in tumors with size ˃ 2cm. Regarding the thickness of the tumor, we observed that p53 was expressed in depth in thicker lesions (Breslow thickness greater than 2 mm), which was also accompanied by higher expression of Ki-67. p53 expression, at superficial site, had inverse association with thickness criteria (p<0,049) and, at deep site, had direct association with local inflammatory process intensity (p<0,046). The invasive tumor front, as well as E-cadherin, ki-67 and p53 expressions, at superficial and deep sites, did not demonstrate impact on free disease survival. The characteristics of invasive tumor front did not correlate with prognosis in cutaneuos SCC of the head and neck regarding to the ... / Mestre

Orientador: Janete Dias Almeida / Coorientador: Celina Faig Lima Carta / Banca: Emília Ângela Lo Schiavo Arisawa / Banca: Ana Lia Anbinder / Banca: Alberto José de Araújo / Banca: José Benedito Oliveira Amorim / Resumo: Os carcinógenos do tabaco estão relacionados a diversos tipos de câncer incluindo o carcinoma de células escamosas (CCE) bucal. Aliado ao álcool, o tabaco contribui para o desfecho desfavorável destes casos. A susceptibilidade individual ao câncer pode estar relacionada a expressão das enzimas que metabolizam tais carcinógenos. O objetivo deste trabalho é avaliar a expressão dos genes CYP1A1, CYP1B1, CYP2A6 e CYP2E1 no CCE bucal por meio de qPCR. Foram coletadas amostras de 32 indivíduos com CCE e de 15 controles submetidos a cirurgias bucais por lesões benignas. Foram constituídos quatro grupos: Grupo CCE fumante (n=26), Grupo CCE não fumante (n=6), Grupo controle fumante (n=9) e Grupo controle não fumante (n=6). O Teste de Fagerström para Dependência a Cigarros (TFDC) foi usado para avaliar a dependência nicotínica (DN) e AUDIT para avaliação do consumo de etílicos. Houve diminuição da expressão do gene CYP1B1 nos casos de CCE comparados aos controles. Foram encontradas diferenças estaticamente significativas de expressão gênica de CYP1B1 entre os Grupos CCE fumante e controle fumante (p=0,0018), Grupo CCE não fumante e controle não fumante (p=0,0079) e CCE fumante com CCE não fumante (p=0,0385) e entre os quatro grupos (p<0,0001). Houve diminuição da expressão do CYP2A6 no Grupo CCE fumante em relação ao Grupo controle, mas apenas um paciente do Grupo controle expressou este gene. Houve aumento da expressão de CYP2E1 entre os Grupos CCE fumante e controle fumante (p=0,0424... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Tobacco carcinogens are related to various types of cancer, including oral squamous cell carcinoma (OSCC). Allied to alcohol, tobacco contributes to the unfavorable outcome of the cases. Individual cancer susceptibility may be related to an expression of the enzymes that metabolize such carcinogens. The aim of this work is to evaluate the expression of the genes CYP1A1, CYP1B1, CYP2A6 and CYP2E1 on OSCC by qPCR. Samples were collected from 32 individuals with OSCC and 15 controls submitted to oral surgeries due to benign lesions. There were four groups: Smoker SCC group (n = 26), nonsmoker SCC group (n = 6), Smoker control group (n = 9) and nonsmoker control group (n = 6). The Fagerström Test for Cigarette Dependence (TFCD) was used to evaluate nicotinic dependence (ND) and AUDIT for the evaluation of alcohol consumption. There was a decrease in CYP1B1 gene expression in cases of SCC compared to controls. (P = 0.0018); smoker CCE and non-smoker control (p = 0.0079); smoker SCC with nonsmoker SCC (p = 0.0385) and between the four groups (p <0.0001). There was a decreased expression in CYP2A6 in the smoker SCC Group compared to the control group, but only one control group patient expressed this gene. There was an increased expression of CYP2E1 between the smoking and nonsmoking SCC groups (p = 0.0424). In conclusion, large interindividual variability was found in the study of the expression of the genes studied. There was greater expression of CYP1A1 and CYP2E1 in samples from... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Submitted by Rosina Valeria Lanzellotti Mattiussi Teixeira (rosina.teixeira@unisantos.br) on 2015-04-28T12:44:29Z No. of bitstreams: 1 Victor Miguel Coutinho Fernandes.pdf: 1491721 bytes, checksum: 2c2467271922975844f9dcc9fc53afb8 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-04-28T12:44:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Victor Miguel Coutinho Fernandes.pdf: 1491721 bytes, checksum: 2c2467271922975844f9dcc9fc53afb8 (MD5) Previous issue date: 2013-09-24 / The Cutaneous Squamous Cell Carcinoma (SCC) is the second most common form of skin cancer in the white population worldwide. This carcinoma has shown steady increase in incidence worldwide. Thus, becoming an important public health problem because of its high morbidity and high health service costs. There are few studies evaluating the epidemiological profile of the SCC in the brazilian population and none has specifically been done in the state of Paraíba. OBJECTIVE: To verify the clinical and epidemiological profile of the SCC cases of patients treated at the main referral hospital for cancer treatment in the state of Paraiba from 2009 to 2011, taking into consideration peculiarities of the behavior of this tumor in males and females, as well as the regions the state is divided in. METHODS: A crosssectional study was conducted using secondary data such as sex, age, origin, degree of invasion and tumor differentiation, affected part of the body and largest tumor diameter. It was done a descriptive analysis and used the chi-square test, test to compare two percentages, U Mann-Whitney, Kruskal-Wallis and Dunn's multiple comparison tests. Association analyses were performed and comparison of percentages. The significance level was 5%. RESULTS: There were 1225 cases of SCC, with a 2:1 ratio between men and women (p<0,05), respectively. The average age was 69 years old and the majority of the cases ¿ 940 (77%) - occurred in patients over 60 years old. The sun-exposed regions of the body were the most affected ones with 996 (81,3%) tumors. The head and neck area was the most common place of SCC, with 900 (73,5%) lesions. Most of the identified tumors, i.e. 942 (77%), were of the invasive type; among these, 558 (59%) had moderate grade of differentiation. Men showed SCC in average four years earlier than women (68 vs 72 years). Their SCC was also more aggressive than those identified in women with a higher percentage of poorly differentiated tumors (8,0% vs. 4,2%) (p = 0,02). Besides, men showed a higher proportion of tumors than women when located in the ear (6,9% vs 3,1%) (p=0,048) and chest (15,9% vs 6,7%) (p<0,001). Women had a higher proportion of tumors than men in the lower limbs (7,0% vs 2,1%) (p <0,001). Most patients with tumors, i.e. 643 (52%), came from Zona da Mata ¿ the coastal area of the state. However, considering the regions of the state of Paraíba, there were no statistically significant differences regarding the size of tumors or the degree of invasion and histological differentiation. CONCLUSION: This study has a pioneer character considering it evaluated the profile of the SCC separately from Basal Cell Carcinoma (BCC) in the state of Paraíba. By doing this, it was possible to highlight clinical and epidemiological particularities of the SCC. Doctors and healthcare managers in the state of Paraiba may find the data produced through this study useful in order to take preventive, diagnostic and precocious treatment measures that may contribute to diminish the incidence and morbidity of this malignancy. / O Carcinoma Espinocelular Cutâneo (CEC) é a segunda forma de câncer de pele mais frequente na população branca mundial. Este tumor vem apresentando aumento crescente da incidência em todo o mundo, constituindo-se importante problema de saúde pública devido à sua alta morbidade e aos elevados custos aos serviços de saúde. Existem poucos estudos avaliando o perfil epidemiológico do CEC na população brasileira e nenhum, especificamente, no estado da Paraíba. OBJETIVO: Verificar o perfil clínico-epidemiológico dos casos de CEC dos pacientes atendidos no principal hospital de referência no tratamento do câncer do estado da Paraíba nos 2009 a 2011, observando peculiaridades do comportamento deste tumor nos sexos masculino e feminino, bem como nas mesorregiões que compõem o estado. MÉTODO: Foi realizado um estudo transversal com dados secundários, analisando variáveis como: sexo, idade, procedência, grau de invasão e diferenciação histológica do tumor, local do corpo acometido e tamanho do tumor. Foi realizada análise descritiva e utilizado os testes de qui-quadrado, comparação entre duas porcentagens, teste U de Mann-Whitney, Kruskal-Wallis e teste de comparações múltiplas de Dunn. O nível de significância foi de 5%. RESULTADOS: Foram encontrados 1225 casos de CEC, com uma relação de 2:1 entre homens e mulheres (p<0,05), respectivamente. A média das idades foi de 69 anos, com a maioria - 940 (77%) - dos casos ocorridos em pacientes com mais de 60 anos de idade. As regiões fotoexpostas foram as mais acometidas com 996 (81,3%) tumores. A região da cabeça e pescoço foi a mais comum para o CEC com 900 (73,5%) lesões. A maioria dos tumores identificados foram invasivos ¿ ou seja, 942 (77%) casos ¿ dentre esses, 558 (59%) tinham grau de diferenciação moderado. Os homens apresentaram CEC em média quatro anos antes que as mulheres (68 vs 72 anos). Seus CEC também foram mais agressivos com maior percentual de tumores pouco diferenciados (8,0% vs 4,2%) (p=0,02). Além disso, o sexo masculino apresentou maior proporção de tumores que mulheres quando localizados na orelha (6,9% vs 3,1%) (p=0,048) e no tórax (15,9% vs 6,7%) (p<0,001). As mulheres apresentaram maior proporção de tumores em membros inferiores (7,0% vs 2,1%) (p<0,001). A maioria dos tumores, isto é, 643 (52%) dos casos, veio da Zona da Mata, no litoral do estado. Entretanto, considerando as mesorregiões da Paraíba, não houve diferenças estatisticamente significantes entre as mesmas quanto aos tamanhos de tumores, nem associação estatisticamente significante quanto aos graus de invasão e diferenciação histológica. CONCLUSÃO: O estudo foi pioneiro ao avaliar o perfil do CEC separadamente do Carcinoma Basocelular (CBC) no estado da Paraíba, o que permitiu constatar particularidades clínicas e epidemiológicas desse tumor. Espera-se que os dados obtidos sejam úteis às equipes médicas e aos gestores da saúde no estado da Paraíba para que sejam tomadas medidas de prevenção, diagnóstico e tratamentos precoces que contribuam para a diminuição da incidência e morbimortalidade desta neoplasia.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:34:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 412814.pdf: 570341 bytes, checksum: c9e6231d0926e5ded8d0c4095b48dedd (MD5) Previous issue date: 2009-03-30 / Com a finalidade de obter maiores conhecimentos sobre mecanismos de reparo de DNA no desenvolvimento do c?ncer bucal, foi avaliado o reparo da quebra da dupla fita de DNA (DSBs) em c?lulas de indiv?duos com menos de 40 anos e com mais de 40 anos. O objetivo foi determinar se as c?lulas de carcinomas epiderm?i?ides de boca de indiv?duos com menos de 40 anos de idade e com mais de 40 anos diferem em rela??o ? capacidade para reparar as DSBs por meio de ambos os mecanismos de reparo por recombina??o, a recombina??o hom?loga (HR) e a jun??o de extremidades n?o hom?logas (NHEJ). Foi acessada funcionalmente a quebra da dupla fita de DNA utilizando linhagens celulares UT-SCC desenvolvidas a partir de indiv?duos com menos de 40 anos e com mais de 40 anos. Foi examinado o dano global de DNA pelo ensaio do cometa utilizando radia??o ionizante (RI). Um total de 200 c?lulas por amostra foi analisado utilizando o sistema de an?lise de imagem, Komet software. Para a an?lise da capacidade das linhagens celulares UT-SCC repararem o dano ao DNA por HR e NHEJ, foi utilizado um ensaio com plasm?deo, descrito por Secretan et al., 2004. No ensaio do cometa foram realizados tr?s experimentos independentes para cada linhagem celular, e n?o foi observada diferen?a entre as linhas celulares provenientes de indiv?duos com menos de 40 anos e com mais de 40 anos em rela??o ao reparo das DSBs de forma global. Quando foram comparadas c?lulas irradiadas versus c?lulas n?o-irradiadas, observou-se que ambas as linhagens de celulares foram capazes de reparar as DSBs causadas pela radia??o ionizante em um per?odo de 24 horas. Para testar se houve defici?ncia ou compensa??o de um mecanismo de reparo sobre o outro, foi realizada uma an?lise de HR e NHEJ, na qual se observou que tanto nas linhagens celulares de indiv?duos com menos de 40 anos quanto nas dos com mais de 40 houve uma redu??o em ambos os mecanismos de reparo por recombina??o, quando comparados ? linhagem celular de ceratin?citos normais. Com base nos resultados, concluiu-se que as linhagens celulares de indiv?duos com menos de 40 anos, bem como os com mais de 40 anos, t?m seus mecanismos de reparo por recombina??o reduzidos. N?o h? diferen?a estatisticamente significante na efici?ncia de recombina??o NHEJ entre as linhagens celulares UT-SCC de indiv?duos jovens e com mais de 40 anos. H? uma maior redu??o no reparo das DSBs por HR em linhagens celulares de indiv?duos com mais de 40 anos.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:35:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 460424.pdf: 208542 bytes, checksum: c614e57b83b06eea8ef4c11836bbd946 (MD5) Previous issue date: 2014-01-14 / Oral cancer is among the six most common types of cancer worldwide, considered as the seventh most frequent in the Brazil. Tumor angiogenesis has become a promising target for the treatment of malignancies. Methods that allow three-dimensional evaluation of the vascular network of tumors have a great importance to assess the effects of antiangiogenic treatments in tumors. The objective of this study was to evaluate the effect of sunitinib maleate and the metronomic chemotherapy with cyclophosphamide on the vascular network of the oral squamous cell carcinoma by scanning electron microscopy (SEM) of corrosion casts. 24 Syrian hamsters (Mesocricetus auratus) were divided into three groups of eight animals each and had their right buccal pouches submitted to tumor induction with dimethylbenzanthracene and carbamide peroxide for 55 days. Following, the animals were maintained without treatment (group I) or receiving sunitinib (group II), or cyclophosphamide (group III) for a period of 4 weeks. After the treatment, six animals of each group had their vascular networks casted by Mercox? resin and analyzed qualitatively and quantitatively by SEM. The two remaining animals of each group had their buccal pouches prepared for qualitative analysis by light microscopy. It was observed changes in the angioarchitecture of the pouches that were treated with these two drugs, suggesting an improvement in the tumors vascularization. The main changes caused by the treatments were the reduction of vessel tortuosity, the reestablishment of vascular hierarchy, besides the decrease of sprouting and intussusception images, compressed vessels, saccular dilations, and other vascular figures. Quantitative analysis of the samples exhibited a statistically significant reduction in vascular diameter and intervascular distances ofthe pouches treated with cyclophosphamide, when compared with the pouches no treated and those treated with sunitinb. The findings of the present study suggest that these two drugs may act in the vascular normalization of squamous cell carcinomas induced in hamster buccal pouch, however the metronomic chemotherapy exhibited superior results. / O c?ncer oral est? entre os seis tipos mais comuns de c?ncer no mundo, sendo o s?timo mais encontrado entre a popula??o brasileira. O processo de angiog?nese tumoral tem-se tornado um alvo promissor para o tratamento de neoplasias malignas. Os m?todos que permitem a avalia??o tridimensional da angioarquitetura dos tumores s?o de grande import?ncia na an?lise dos efeitos de tratamentos antiangiog?nico. Este trabalho visou avaliar o efeito do maleato de sunitinibe e da quimioterapia metron?mica com ciclofosfamida na vasculatura do carcinoma oral de c?lulas escamosas, atrav?s de microscopia eletr?nica de varredura (MEV) de r?plicas vasculares. Assim, 24 hamsters s?rios (Mesocricetus auratus) divididos em tr?s grupos de oito animais cada, tiveram suas bolsas jugais direitas submetidas ? indu??o tumoral com dimetilbenzantraceno e per?xido de carbamida por 55 dias, sendo mantidos por mais 4 semanas sem tratamento (grupo I), ou recebendo sunitinibe (grupo II), ou ciclofosfamida (grupo III). Ap?s o tratamento, seis animais de cada grupo tiveram suas redes vasculares moldadas pela resina Mercox? e analisadas qualitativa e quantitativamente em MEV. Os dois animais restantes de cada grupo tiveram suas bolsas qualitativamente analisadas em microscopia de luz. Foram observadas modifica??es na angioarquitetura das bolsas que receberam tratamento com os dois f?rmacos, o que gerou uma normaliza??o da vasculariza??o dos tumores. As principais modifica??es provocadas pelos tratamentos foram a redu??o da tortuosidade dos vasos, o reestabelecimento da hierarquia vascular, al?m da diminui??o de imagens de sprouting e intussuscep??es, vasos comprimidos, dilata??es saculares e outras figuras vasculares. A an?lise quantitativa das amostras evidenciou uma redu??o estatisticamente significativa do di?metro vascular e das dist?ncias intervasculares nas bolsas tratadas com ciclofosfamida, quando comparadas com as bolsas que n?o receberam tratamento e com aquelas tratadas com sunitinibe. Os achados do presente estudo sugerem que essas duas drogas podem atuar na normaliza??o da rede vascular no carcinoma de c?lulas escamosas induzido em bolsa jugal de hamster; no entanto a quimioterapia metron?mica apresentou resultados superiores.

O carcinoma de células escamosas de cavidade bucal tem alta prevalência e índice de mortalidade considerável entre as principais neoplasias malignas. Acredita-se que carcinógenos químicos promovem a carcinogênese através de danos oxidativos e mutações genéticas, entre outros mecanismos. O organismo evita o acúmulo de espécies reativas de oxigênio (EROs), ou seja, o estresse oxidativo, através da produção endógena de antioxidantes como o -tocoferol, o retinol e a glutationa. Diversos estudos têm demonstrado que a administração de glutamina pode aumentar a produção de glutationa, proteger células de danos oxidativos e alterações genéticas, e, assim, inibir ou retardar a carcinogênese. Esse aminoácido é considerado um agente quimiopreventivo por atuar em alvos moleculares e celulares específicos, no processo de inflamação ou transdução de sinais, além de induzir atividade de enzimas de detoxificação e suprimir proliferação celular. O protocolo de indução de carcinogênese bucal induzida por DMBA, dimetilbenzantraceno dilúido em acetona, aplicado três vezes por semana, foi bem estabelecido em hamsters e sabe-se que a formação de EROs durante sua metabolização pode se difundir a partir do local de geração, para fora da célula, e iniciar a cadeia de peroxidação lipídica. Sabe-se que existe metabolização hepática do DMBA quando aplicado em mucosa jugal. Nesse estudo avaliou-se o efeito da suplementação de glutamina via oral e intragástrica em carcinogênese DMBA-induzida em mucosa de bolsa jugal de hamsters. Dosaram-se níveis de malondialdeído (MDA), principal produto de peroxidação lipídica, e antioxidantes -tocoferol, retinol e glutationa. Obteve-se como resultado a formação de carcinoma de células escamosas na maioria dos animais, independentemente da administração de glutamina, na dosagem testada. Não foram observadas diferenças na quantidade de MDA, glutationa, proteína e retinol no fígado dos animais. Tampouco houve diferença entre os níveis plasmáticos de glutationa entre os grupos. Esses resultados demonstram que não houve estresse oxidativo significativo nos tecidos testados. Porém houve acúmulo de -tocoferol no fígado dos animais tratados com o carcinógeno por 15 semanas, independentemente da administração de glutamina. Conclui-se, portanto, que pode ter ocorrido agressão ao tecido hepático desses animais e que a glutamina não foi eficiente na prevenção de carcinogênese ou agressão hepática. Possivelmente o tecido tumoral apresentaria alteração do equilíbrio oxidante/antioxidante, mas não foi avaliado nesse estudo. / Oral cavity squamous cell carcinoma has a high prevalence and substantial mortality rate among the major malignancies. It is believed that chemical carcinogens promote carcinogenesis by oxidative damage and mutation, among other mechanisms. The body prevents the accumulation of reactive oxygen species (ROS), oxidative stress, through the production of endogenous antioxidants such as -tocopherol, retinol, and glutathione. Several studies have demonstrated that glutamine administration can increase the production of glutathione, protecting cells from oxidative damage and genetic changes, and thus inhibit or delay the carcinogenesis. This amino acid is considered a chemopreventive agent to act on specific molecular and cellular targets, in inflammation or signal transduction, and activity to induce detoxification enzymes and suppress cell proliferation. The dimethylbenzanthracene (DMBA) induced carcinogenesis protocol consists in three times a week application of DMBA diluted in acetone, in hamsters. It is known that the formation of ROS during its metabolism can diffuse from the site of generation, outside the cell, and initiate the lipid peroxidation chain. It is known that there is hepatic metabolism of DMBA when applied to the buccal mucosa. This study evaluated the effect of oral and intragastric glutamine supplementation in DMBA-induced carcinogenesis on the cheek pouch mucosa of hamsters. Levels were assayed for malondialdehyde (MDA), the main product of lipid peroxidation, and the antioxidants -tocopherol, retinol and glutathione. The results show the formation of squamous cell carcinoma in most animals, regardless of this glutamine amount administration. There were no differences in the amount of MDA, glutathione, protein and retinol in the liver of animals. There was no difference between plasma levels of glutathione between groups. These results demonstrate that there was no significant oxidative stress in the tissues tested. However, there was accumulation of -tocopherol in the liver of animals treated with the carcinogen for 15 weeks, regardless of the administration of glutamine. Therefore that may have occurred aggression liver tissue of animals and that glutamine was not effective in the prevention of carcinogenesis or liver injury. Possibly the tumor tissue present shift in the balance oxidant / antioxidant, but it was not evaluated in this study.

Submitted by Fabíola Silva (fabiola.silva@famerp.br) on 2016-06-22T15:03:16Z No. of bitstreams: 1 vitorrafafelregiani_dissert.pdf: 1149352 bytes, checksum: 542e5f6273639354b00db640f941c027 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-22T15:03:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 vitorrafafelregiani_dissert.pdf: 1149352 bytes, checksum: 542e5f6273639354b00db640f941c027 (MD5) Previous issue date: 2015-08-25 / Introduction: DNA methylation plays an important role in regulating gene expression. During tumorigenesis, the hypermethylation of CpG-rich islands in promoter regions (Cytosine phosphodiester Guanine) is a mechanism that can inactivate tumor suppressor genes and contribute to the development of cancer. Objective: This study aimed to evaluate the methylation of promoter regions of tumor suppressor genes RASSF1A (Ras association domain family member 1) and MGMT (O-6-methylguanine-DNA methyltransferase) in squamous cell carcinoma of the head and neck. Methods: The methylation analysis of promoter regions of RASSF1A and MGMT genes was performed using the High Resolution Melting (HRM) in 42 and 37 tumor tissue samples, respectively. Samples of tissue adjacent to the tumor or peripheral blood were used as controls. Results: For the RASSF1A gene, 50% (21 of 42) of tumor tissue samples analyzed were methylated, whereas for MGMT of 37 tumor tissue samples analyzed, 17 (46%) showed methylation. Statistical analysis between pairs of tumor samples and controls (tissue adjacent to the site of tumor and peripheral blood) showed significant differences in the presence of methylation for the RASSF1A gene (P = 0.027, Chi-square test) and the MGMT gene (P = 0.002, Chi-square test). The evaluation of the presence of methylation between tumor tissue and surrounding tissue showed no significant difference for RASSF1A genes (P = 1.0) and MGMT (P = 0.38). For the subset of tumor tissue and peripheral blood statistic was significant for RASSF1A (P = 0.005) and MGMT (P = 0.002) genes. Analysis of the presence of methylation in tumors relative to non-tumor tissues (tissues adjacent to tumor or peripheral blood) in different anatomical sites of primary occurrence showed that in oral cavity and pharynx no statistically significant difference for the RASSF1A gene (P = 0.233) relative to non-tumor samples; MGMT gene statistical results were significant (P = 0.033). In the larynx, the statistical results were significant for the RASSF1A gene (P = 0.04) compared to non-tumor samples, while for the MGMT gene, the result was not statistically significant (P = 0.998). The presence of the methylation of the MGMT gene in both genes simultaneously, RASSF1A and MGMT, were associated with the category N (P = 0.045 and P = 0.035, respectively). For the RASSF1A gene was not observed this association (P = 0.093). The analysis by multiple logistic regression of the influence of epidemiological factors (gender and age), risk factors (smoking and drinking) and clinical parameters of the tumor for the presence of methylation showed no significant association for these variables. Conclusions: The prevalence presence of methylation in the promoter region of RASSF1A and MGMT genes in tumor tissue of the pairs of samples (tumor and non-tumor tissue) suggests the involvement of these genes in the process of squamous cells carcinoma of the head and neck, in particular of the MGMT gene in tumors of the oral cavity and pharynx and RASSF1A gene in larynx tumors. No was observed association between methylation of RASSF1A and MGMT genes and age, gender, the tobacco and alcohol consumption and clinical tumor parameters. / Introdução: A metilação do DNA desempenha um papel importante na regulação da expressão gênica. Durante a tumorigênese, a hipermetilação em regiões promotoras ricas em ilhas CpG (Cytosine phosphodiester Guanine) é um mecanismo que pode inativar genes supressores de tumor e contribuir para o desenvolvimento do câncer. Objetivo: O presente trabalho teve como objetivo avaliar a metilação das regiões promotoras dos genes supressores de tumor RASSF1A (Ras association domain family member 1) e MGMT (O-6-methylguanine-DNA methyltransferase) em carcinoma espinocelular de cabeça e pescoço. Casuística e Métodos: A análise de metilação das regiões promotoras dos genes RASSF1A e MGMT foi realizada pela técnica High Resolution Melting (HRM) em 42 e 37 amostras de tecidos tumorais, respectivamente. Amostras de tecido adjacente ao tumor ou de sangue periférico foram utilizadas como controle. Resultados: Para o gene RASSF1A, 50% (21 de 42) das amostras de tecidos tumorais analisadas foram metiladas, enquanto para o MGMT, das 37 amostras de tecidos tumorais analisadas, 17 (46%) apresentaram metilação. A análise estatística entre os pares de amostras tumorais e controles (tecido adjacente ao tumor e sangue periférico) mostrou diferença significante quanto à presença de metilação para o gene RASSF1A (P=0,027, teste de Qui-quadrado) e para o gene MGMT (P=0,002, teste de Qui-quadrado). A avaliação da presença de metilação entre subgrupos de tecido tumoral e tecido adjacente não mostrou diferença significante para os genes RASSF1A (P=1,0) e MGMT (P=0,38). Para o subgrupo de tecido tumoral e sangue periférico o resultado estatístico foi significante para os genes RASSF1A (P=0,005) e MGMT (P=0,002). A análise da presença de metilação nos tumores em relação aos tecidos não tumorais (tecidos adjacentes ou sangue periférico) nos diferentes sítios anatômicos de ocorrência primária mostrou que, em cavidade oral e faringe não houve diferença estatística significante para o gene RASSF1A (P=0,233) em relação às amostras não tumorais; para gene MGMT o resultado estatístico foi significante (P=0,033). Em laringe, o resultado estatístico foi significante para o gene RASSF1A (P=0,04) em relação às amostras não tumorais, enquanto para o gene MGMT, o resultado estatístico não foi significante (P=0,998). A presença de metilação no gene MGMT bem como em ambos os genes concomitantemente, RASSF1A e MGMT, foi associada com a categoria N (P=0,045 e P=0,035, respectivamente). Para o gene RASSF1A não foi observada tal associação (P=0,093). A análise por meio da regressão logística múltipla da influência dos fatores epidemiológicos (gênero e idade), dos fatores de risco (tabagismo e etilismo) e parâmetros clínicos do tumor quanto à presença de metilação não mostrou associação significante para essas variáveis. Conclusões: A presença de metilação nas regiões promotoras dos genes RASSF1A e MGMT apenas no tecido tumoral da maioria dos pares de amostras (tecido tumoral e não tumoral) sugere o envolvimento desses genes no processo neoplásico de cabeça e pescoço, em especial do gene MGMT em tumores da cavidade oral e faringe e do gene RASSF1A na laringe. Não há associação entre metilação dos genes RASSF1A e MGMT e a idade, o gênero, os hábitos tabagista e etilista e os parâmetros clínicos do tumor.