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Desenvolvimento de metodos enzimaticos em fluxo para a determinação quantitativa de acetilcolina e de peraoxonRodrigues, Tereza Cristina 24 July 2018 (has links)
Orientador: Matthieu Tubino / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-07-24T07:21:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 1998 / Doutorado
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Investigação Fitoquímica de extrato bruto e frações das folhas de Eugenia uniflora L. (Pitangueira)BEZERRA, Isabelle Cristinne Ferraz 01 March 2016 (has links)
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Previous issue date: 2016-03-01 / FACEPE / Eugenia uniflora L. (Myrtaceae), conhecida como pitangueira, é uma espécie nativa do Brasil, de importância econômica e terapêutica devido ao seu emprego como alimento e na medicina popular. Considerando as propriedades biológicas, diversas atividades são relatadas para E. uniflora entre as quais: antibacteriana, antifúngica, antidiarreica, hipoglicêmicas e antitumorais. A partir de 2009, a espécie foi inclusa na Relação Nacional de Plantas Medicinais de Interesse para o SUS (RENISUS), visando incentivar estudos relativos ao desenvolvimento biológico, analítico e tecnológico da espécie. Neste contexto, relatos acerca de investigações analíticas e tecnológicas para farmacógenos de E. uniflora são escassos. Portanto, o propósito deste trabalho foi o desenvolvimento e avaliação de ferramentas analíticas para a caracterização química de extratos e frações de E. uniflora. Assim, o monitoramento dos metabólitos da espécie foi empregado para o estabelecimento de especificações de qualidade para droga vegetal e avaliação de operações de transformação. As folhas secas e trituradas de pitangueira foram empregadas como material vegetal e caracterizadas de acordo com os Métodos Gerais em Farmacognosia da Farmacopeia Brasileira 5 ed. (2010). Para análise quantitativa de flavonoides e taninos na droga vegetal e extrato bruto foram avaliadas metodologias espectrofotométricas (UV/Vis) usando os reagentes AlCl₃ e Folin Ciocalteau para aumento de seletividade. A cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) acoplada a detector de arranjo de fotodo diodos também foi utilizada para análises quantitativas; as análises qualitativas foram conduzidas por CCD/CCDAE e CLAE. Além disso, um fracionamento preliminar das substâncias presentes nas folhas de pitanga foi executado através de sucessivas cromatografias de coluna aberta, utilizando gel de sílica como fase estacionária e posteriormente CCD preparativa para a obtenção das substâncias desejadas. Os procedimentos espectrofotométricos avaliados atendem as exigências preconizadas pela RE 899/2003, apresentando especificidade/seletividade para os marcadores eleitos, comportamento linear (R2 > 0,99); nos ensaios de repetitividade e precisão dentro dos limites determinados pela legislação (< 5%) onde foram encontrados teores médios de flavonoides de 1,82% (matéria prima – MP) e 4,90% (Extrato bruto – EB) na metodologia por doseamento direto, e 1,72% (MP) e 3,90 (EB) na metodologia após hidrólise ácida; no caso de taninos totais os teores médios encontrados foram de 10,12% (MP) e 21,11 (EB). No parâmetro exatidão, os resultados obtidos encontram-se de acordo com o preconizado pela RE899 (80-120%) para as três metodologias (faixa de recuperação de 92 a 107%); além de estabilidade às variações intencionais avaliadas na robustez (tempo de reação, reagentes e solventes). A metodologia por CLAE para a quantificação ácido gálico e ácido elágico e dos flavonoides presentes na matriz, também atendeu aos requisitos preconizados pela legislação, oferecendo dados quantitativos mais específicos relativos às substâncias presentes nas amostras. O fracionamento permitiu a obtenção de frações contendo os compostos de interesse, e através da CCD preparativa foi possível obter uma fração semi-purificada contendo duas substâncias flavonoídicas potenciais marcadoras da espécie. Adicionalmente, os perfis químicos (fingerprints) por CCD e CLAE permitiram identificar nas matrizes (droga, extratos e frações), bandas/picos relacionados a grupos de metabólitos promissores para apoiar a padronização química de produtos derivados das folhas de Eugenia uniflora. / Eugenia uniflora L. (Myrtaceae), known as pitangueira, is a native species from Brazil, with economic and therapeutic importance due to the extensive use as food and in traditional medicine. Considering the biological properties, various activities are reported to E. uniflora: antibacterial and antifungal, antidiarrheal, antitumor and hypoglycemics, among others. From 2009, the species was included in the National Ratio of medicinal plants of interest for the SUS (Brazilian Unified Health System)(RENISUS), to encourage studies about the biological, analytical and technological development of the specie. In this context, the reports about analytical and technological research for pharmacogens of E. uniflora are scarce. Therefore, the purpose of this work was the development and evaluation of analytical tools for chemical characterization of extracts and fractions from leaves of E. uniflora. Thus, the monitoring of the metabolites of the species were employed for the establishing quality specifications of plant drug and for the evaluation of processing operations. The dried and milled leaves of E. uniflora were used as plant material and characterized according to the General Methods in Pharmacognosy of the Brazilian Pharmacopoeia 5th ed. (2010). For the quantitative analysis of flavonoids and tannins in the raw material and crude extract, spectrophotometric methodologies (UV/Vis) were evaluated using AlCl₃ and Folin Ciocalteau reagents to increase selectivity. High performance liquid chromatography (HPLC) coupled to photodiode array detector was also used for quantitative analysis; the qualitative analyzes were conducted by TLC/HPTLC and HPLC. In addition, a preliminary fractionation of substances in ―pitanga‖ leaves was performed by successive classical column chromatographies, using silica gel as the stationary phase and subsequently preparative TLC for obtaining the desired substances. The data revealed that the spectrophotometric procedures evaluated meet the requirements of RE 899/2003, presenting specificity / selectivity for the chosen markers, and linear behavior (R2> 0,99). In the tests of repeatability and precision within the limits determined by the legislation (<5%) where average levels of flavonoids of 1,82% (raw material - MP) and 4.90% (crude extract - EB) were found in the methodology by dosing Direct, and 1,72% (MP) and 3,90 (EB) in the methodology after acid hydrolysis; besides accuracy compatible for the three methods (recovery range 92-107%), and stability to intentional variations evaluated (reaction time, reagents and solvents). The methodology by HPLC for the quantification of gallic acid and ellagic acid and the flavonoids present in the matrix, also have met the requirements preconized by legislation, providing more specific quantitative data relating to substances present in the samples. The fractionation enabled to obtain fractions containing the compounds of interest, and by preparative TLC was possible to obtain a semi-purified fraction containing two flavonoids potential marker species. Additionally, chemical profiles (fingerprints) by HPTLC and HPLC allowed to identified in different matrices (drug, extracts and fractions), bands/peaks related to promising groups of metabolites to assist the chemical standardization of products derived from the leaves of Eugenia uniflora.
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Obtenção e uso de gradientes de densidadeHechenleitner, Ana Adelina Winkler 17 July 2018 (has links)
Orientador : Fernando Galembeck / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-07-17T18:30:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 1987 / Doutorado
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Reações de quelatos N-aciltioureias de Ni(II), Zn(II) e Cd(II) com algumas bases nitrogenadasCosta, Creusa Maieru Macedo 19 July 2018 (has links)
Orientador : Yoshitaka Gushikem / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-07-19T03:16:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 1985 / Doutorado
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Estudo de metodologia quantitativa para determinação espectrofotometrica de acido sialico em leiteFukuda, Sandra Pereira 05 August 1994 (has links)
Orientador: Salvador Massaguer Roig / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-19T12:25:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 1994 / Resumo: A adulteração de leites, fluido e em pó, através da adição intencional de soro de queijo é um problema que vem preocupando as autoridades nacionais e internacionais. Isso ocorre em conseqüência do baixo valor comercial do soro e seu reduzido aproveitamento em derivados ou sub-produtos. Desde 1959 há citações de métodos para a detecção dessa fraude, incluindo processos químicos, enzimáticos e outros mais complexos, como o CLAE. Muitos baseiam-se na pesquisa do ácido siálico ou ácido N-acetilneuramínico (NANA), um açúcar aminado ligado ao glicomacropeptídeo da k-caseína, liberado pela ação da quimosina (EC 3.4.23.4) durante a fabricação de queijos. Esses métodos detectam o ácido siálico livre e, portanto, as amostras de leite precisam ser submetidas à hidrólise ácida á quente. No presente trabalho objetivou-se adaptar e padronizar o método da ninidrina ácida para a determinação quantitativa direta de ácido siálico em leite fluido e soro industrial . Elaborou-se protocolo partindo de amostras de10ml de leite ou soro, cujos resultados, além de maior rapidez de obtenção, mostraram boa repetibilidade. O método mostrou-se sensível à adição de pequenas quantidades de soro, possibilitando sua aplicação prática. O teor médio¬ de NANA observado foi de 2,71 +- 0,83 µg/ml de leite certificadamente autêntico e de 42,35 +- 6,60 µg /ml de soro industrial. A proposta de utilização do método como um teste de ¿screening" permite a classificação do leite em categorias como negativa, suspeita e positiva quanto à fraude por adição de soro, configurando variadas alternativas de interpretação na dependência do rigor a ser empregado / Abstract: Adulteration of fluid and powder milk through intented addition of rennet whey is a problem which has been worrying national and international authorities. Such fact occurs due to the low commercial value of rennet whey and its reduced utilization in derivatives and byproducts. Since1959 there has been quotations of methods for detecting such fraud, including chemical, enzymatic and more complex processes, as HPLC. A number of them are based on researches regarding sialic acid or N-acetylneuraminic acid (NANA), an amino sugar linked to glycomacropeptide of k-casein and liberated by chymosin action (EC3.4.23.4) during cheese production. Such methods detect free sialic acid, therefore, milk samples need to undergo heat acid hydrolysis. The present study aimed at adapting and standardizing the acidic ninhydrin reaction for direct quantitative determination of sialic acíd in fluid milk and rennet whey. A protocol was elaborated from 10ml samples, which results showed good repeatability, as well as great rapidity in obtainment. This method presented itself sensitive to addition of small amounts of whey, making its pratical application possible. The average content of NANA was 2.71 +- 0,83 µg/ml of certified authentic milk and 42.35 +- 6.60 µg/ml of rennet whey. The proposal of utilization of such method as a screening test makes the classification of milk possible as negative, suspicious and positive regarding the fraud by whey addition, and it creates a range of interpretation alternatives depending on the rigor to be applied / Mestrado / Mestre em Tecnologia de Alimentos
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DeterminaÃÃo de fÃsforo por espectrometria de emissÃo Ãtica com plasma indutivamente acoplado em matrizes contendo metais alcalinos e alcalinos terrosos / Determination of match for emission spectrometry optics with plasma inductively connected in matrices I contend alkaline metals and alkaline terrososFrancisco Furtado dos Santos 07 February 2008 (has links)
Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / O FÃsforo à um dos elementos essencial no corpo humano requerido pelas cÃlulas para o seu funcionamento; sendo o maior constituinte dos ossos do corpo humano, na forma de fosfato de cÃlcio. A determinaÃÃo de fÃsforo pode ser efetuada utilizando-se diferentes tÃcnicas tais como espectrofotometria de absorÃÃo molecular, cromatografia iÃnica, fosforescÃncia, espectrometria de emissÃo atÃmica, entre outras. Este trabalho tem como objetivo desenvolver uma metodologia para determinaÃÃo de fÃsforo em digeridos de amostras orgÃnicas por espectrometria de emissÃo Ãptica com plasma indutivamente acoplado. A metodologia desenvolvida estudou quatro linhas de emissÃo deste elemento e duas configuraÃÃes instrumentais, axial e radial. Somente os comprimentos de onda 213,617 e 214,914nm apresentaram sensibilidade adequada para o estudo. A faixa linear investigada foi de 50 a 300 mg.L-1 . A investigaÃÃo do efeito interferente foi realizado com os metais alcalinos (Na e K) e alcalinos terrosos (Ca e Mg) no sinal de fÃsforo. Mostrando-se aditiva para todos os metais estudados, com aumento do sinal em atà 50% para o potÃssio como interferente. Para resoluÃÃo desse efeito interferente investigou-se o aumento da potÃncia da radiaÃÃo do plasma gerado e uso de padrÃo interno. O uso do padrÃo interno mostrou-se mais adequado, no caso o Sc, com correÃÃes de 90 % de reduÃÃo da interferÃncia. A metodologia desenvolvida foi avaliada em amostras certificadas interlaboratoriais e os resultados obtidos foram compatÃveis com erros inferiores a 10%. O teor de fÃsforo foi determinado em amostras de banana submetidas a um tratamento de fertilizaÃÃo, sendo os valores obtidos na ordem de 765 e 1.167 mg.L-1 / The Phosphorus is an essential element for in body human required by cells for the operation; is the largest constituent of the bones of the human body in the form of calcium phosphate. The determination of phosphorus can be using different techniques is like Molecular Absorption Spectrophotometry, Ion Chromatography, Phosphorescence, Atomic Emission spectrometry, among others. This work has a goal to develop a methodology for determination of phosphorus in digest of organic samples by optical emission spectrometry with plasma inductive coupled. The methodology developed studies 4 lines of emission of this element and two instrumental settings, axial and radial. Only a wavelength 213.617 and 214.914nm had sensitivity suitable for the study. The linear range investigated was 50 to 300 mg. L-1. The investigation of the interference effect was studied by alkali metals (Na and K) and alkali earth (Ca and Mg) in the sign of phosphorus. The positive interference was obtained for all metals investigated with increase in the signal in up to 50% for potassium with interference. To resolve this effect interfering was investigated the increased power of radiation from the plasma generated and use of internal standard. The use of internal standard has been more appropriate, in case the Sc, with corrections of 90% reduction of interference. The methodology developed was evaluated in interlaboratory certified samples and the results were compatible with errors less than 10%. The content of phosphorus was determined in samples of banana subjected to a treatment of fertilization, and the values obtained in the order of 765 and 1.167mg.L-1
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Aplicação de métodos quimiométricos em análises de formas farmacêuticas sólidas lamivudina (3TC) + Zidovudina (AZT) baseados na espectrofotometria de absorção na região do Ultravioleta e do infravermelho próximoGrangeiro Júnior, Severino 31 January 2011 (has links)
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Previous issue date: 2011 / A lamivudina (3TC) e zidovudina (AZT) são análogos de nucleosídeos e potentes inibidores seletivos para os vírus da imunodeficiência humana 1 e 2 (HIV-1 e HIV-2). O emprego da combinação dose fixa, na terapêutica contra a Acquired Immunodeficiency Syndrome (AIDS), é de primeira escolha para tratamento de pacientes com infecções por HIV. A única metodologia encontrada em compêndios oficiais para determinação do teor dessa associação em comprimidos é por cromatografia líquida de alta eficiência que foi recentemente publicada na Farmacopéia Americana. O objetivo deste trabalho é desenvolver métodos analíticos utilizando a espectrofotometria derivativa e calibração multivariada para determinação da zidovudina e lamivudina combinados em dose fixa em preparações farmacêuticas, utilizando as regiões espectrais do ultravioleta (UV) e do infravermelho próximo (NIR), além de verificar outras propriedades como dureza do núcleo e umidade no granulado. Os métodos espectrofotométricos derivativas e multivariados usando UV foram aplicados com sucesso às amostras dos granulados, núcleos e comprimidos revestidos de AZT+3TC em dose fixa combinada, nas diferentes apresentações. Os métodos espectrofotométricos derivativos e regressão por mínimos quadrados parciais (Partial Least Squares Regression PLS) propostos utilizando a espectrofotometria na região UV foram desenvolvidos, validados e apresentaram uma boa correlação e RMSEP para o AZT e 3 TC respectivamente (0,99 e 0,34; 0,98 e 0,41) segundo a Internacional Conference on Harmonisation (ICH) e O Internacional Union of Pure and Applied Chemistry (IUPAC) e aplicados com sucesso às amostras dos comprimidos, AZT+3TC, dose fixa combinada, de diferentes fabricantes. O perfil de dissolução destes comprimidos também foi possível prever de forma confiável empregando estes métodos. Os métodos espectrofotométricos utilizando a região do infravermelho próximo e calibração multivariada, tanto por PLS quanto empregando regressão linear múltipla (Multiple Linear Regression MLR), foram validados e aplicados na determinação de dureza, determinação de água nos granulados e teores do AZT e 3 TC nos granulados, núcleos e comprimidos revestidos, fornecendo resultados confiáveis de RMSEP para o modelo PLS e os testes realizados respectivamente (0,21; 0,98; 7,11; 8,15; 9,41; 5,86; 5,99; 5,07) e para o modelo MLR (0,27; 1,12; 8,86; 8,20; 11,72; 5,77; 10,92; 9,96). Esses métodos atendem aos requisitos de tecnologia analítica de processo (Process Analytical Tecchnology PAT) que requer metodologias que possam ser facilmente adaptadas ao processo industrial existente; permitam monitoramento de diferentes etapas do processo e forneçam resultados confiáveis de forma simples, rápida e pouco onerosa.
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Desenvolvimento de sistemas de screening automatizados para determinação de sulfonamidas em mel e procedimento limpo para a quantificação de sulfaquinoxalina em medicamentos veterinários /Catelani, Tiago Augusto. January 2013 (has links)
Orientador: Helena Redigolo Pezza / Coorientador: Leonardo Pezza / Banca: Aristeu Gomes Tininis / Banca: Geoffroy Roger Pointer Malpass / Resumo: A determinação de antibióticos tem sido assunto cada vez mais presente nos estudos de química, seja sua determinação para o controle de qualidade dos medicamentos ou determinação de resíduos em alimentos. O trabalho foi desenvolvido em duas etapas. A primeira parte do trabalho permitiu o desenvolvimento de uma metodologia simples, rápida e de baixo custo, onde se faz uso do procedimento de Análise por Injeção em Fluxo (FIA) com detecção espectrofotométrica para averiguar a presença de sulfaquinoxalina sódica em amostras de três tipos diferentes de medicamentos veterinários. A metodologia foi otimizada por planejamento de experimentos. O reagente cromogênico utilizado foi o pdimetilaminocinamaldeído (p-DAC) que na presença de ácido clorídrico (HCl) e o surfactante Dodecilsulfato de sódio (SDS), forma um produto colorido (l = 560 nm) com a compostos da classe das sulfonamidas (Base de Schiff). A segunda parte do permitiu o desenvolvimento de uma metodologia simples (método de screening), rápida, de baixo custo e acima de tudo limpa para determinação de sulfonamidas em amostras de mel, considerando preceitos da Química Verde e com isso reduzir ao máximo a geração de resíduos químicos e o uso de solventes orgânicos. O procedimento de análise que serviu como base para obtenção dos resultados foi a Análise por Injeção em Fluxo (FIA) com o uso de uma cela de longo caminho óptico (b = 100 cm) para detecção espectrofotométrica, permitindo assim um aumento significativo na sensibilidade do método de screening proposto. O sistema de detecção utilizado foi o espectrofotométrico na região do visível através das medidas de absorbâncias, em um comprimento de onda de l = 560 nm, do produto formado entre o analito (sulfaquinoxalina sódica - SQX, sulfadimetoxina - SDX e sulfatiazol - STZ) e... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The analytical determination of antibiotics has been subject increasingly present in chemistry studies, whether its determination to verify the presence medications (with the purpose of comparison with the label) or determination of residues in foods. The first part of this work presents the development of a simple, fast and low cost method, which makes use of the FIA procedure with UV detection to determine the presence of sodium sulphaquinoxaline in samples of three different types of veterinary medicines. The methodology was developed through statistical analysis, optimizing the chemical parameters (concentration) and physical values that provided the best absorbance at l = 560 nm. The chromogenic reagent used was p-DAC in the presence of HCl and SDS form a colored product with the compounds of the class of sulfonamides (Schiff base). The second part of the study aims to develop a simple methodology (screening method), rapid, inexpensive and above all clean for the determination of sulfonamides in honey samples, considering principles of green chemistry and thereby reduce the maximum generation chemical waste and the use of organic solvents. The analysis procedure that will serve as the basis for obtaining the results is the Flow Injection Analysis (FIA) using a cell along the optical path (b = 100 cm) for spectrophotometric detection, thereby allowing a significant increase in sensitivity of the screening method proposed. The detection system will be in the visible region spectrophotometer by measuring absorbance at a wavelength l = 560 nm, the product formed between the analyte (sodium sulphaquinoxaline - SQX, sulfadimethoxine - SDX and sulfathiazole - STZ) and chromogenic reagent (p-dimethylaminocinnamaldehyde - p-DAC), known as Schiff base. The interest in using this method... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre
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Análise comparativa da transmitância de diferentes tipos de resina composta pelo método de espectrofotometria de luz visível /Queiroz, Renato Souza. January 2005 (has links)
Orientador: Sizenando de Toledo Porto Neto / Banca: Welingtom Dinelli / Banca: Alberto Magno Gonçalves / Resumo: Foi avaliada comparativamente, pelo método de espectrofotometria de luz visível, a transmitância de 7 diferentes resinas compostas: G1- Charisma A2; G2-Filtek Supreme A2E; G3- Filtek Supreme A2B; G4- Filtek Supreme YT; G5- Esthet-X A2; G6- Esthet-X YE; G7- Durafill A2, e G8- Z-100 A2. Foram confeccionados 10 corpos de prova para cada grupo experimental com 10 mm de diâmetro e 2 mm de espessura. As amostras foram avaliadas em 3 períodos (inicial, antes da imersão, 24h e 10 dias após imersão em saliva artificial). Os valores obtidos pela transmitância direta, nos comprimentos de onda de 460 a 640 nm, foram submetidos à análise de variância a dois critéiros e teste de Tukey. Os resultados evidenciaram uma homogeneidade de valores entre as amostras e em função do tempo. Pode-se concluir que os valores de transmitância aumentaram significativamente conforme se aumentou os comprimentos de onda de 460 a 640 nm; O comportamento dos grupos experimentais foi similar em função do tempo, sendo que no tempo inicial e após 10 dias os resultados foram semelhantes entre si e estatisticamente superiores aos valores obtidos após 24 horas de imersão; O grupo G4 apresentou sempre a maior média de transmitância ao longo dos comprimentos de onda, em todos os tempos; Os grupos G6 e G7 foram semelhantes entre si com relação à transmitância e superiores aos grupos em ordem crescente de transmitância por G8=G2=G1>(G5=G3). / Abstract: It was evaluated comparatively with ultra-visible spectrophotometer, the transmittance of 7 different composite resins: G1- Charisma A2; G2-Filtek Supreme A2E; G3- Filtek Supreme A2B; G4- Filtek Supreme YT; G5- Esthet-X A2; G6- Esthet-X YE; G7- Durafill A2, e G8- Z-100 A2.Ten samples (10 mm of diameter and 2 mm of thickness) were made for each experimental group. The samples were evaluated in 3 periods (initial, before the immersion, 24h and 10 days after immersion in artificial saliva). The values of the direct transmittance, in the wave lengths of 460 the 640 nm, were submitted to the two-way analysis of variance and Tukey's intervals. The results had evidenced homogeneity of values between the samples in function and of the time. It can be concluded that the values of transmittance had increased significantly if increased the wave lengths of 460 the 640 nm; The experimental groups reveled similar values in function of the time; the initial time and 10 days after immersion, the results had been similar between itself and superior to the values after 24 hours of immersion; The G4 group always presented the average greater of transmittance to the long one of the wave lengths, in all the times; The groups G6 and G7 had been similar between itself with relation to the transmittance and superiors to the groups orderly increasing of transmittance for G8=G2=G1>(G5=G3). / Mestre
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Estudio preliminar del veneno de Tachymenis chilensis (Schlegel, 1837) y Philodryas chamissonis (Wiegmann, 1835) capturadas en la Octava Región del BíoBío, Chile /Valenzuela Dellarossa, Gustavo André. González Acuña, Daniel González Muñoz, Fidelina January 2006 (has links)
Memoria de título (Méd. Veterinario).-- Universidad de Concepción, 2006. / Contiene resumen en español e inglés. Bibliografía: h. 22-27.
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