Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2005. / Made available in DSpace on 2013-07-16T00:21:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 272753.pdf: 8451665 bytes, checksum: 06d74a876fbbd5e0af8515941c00b6b6 (MD5) / A azidotimidina, mais conhecida como zidovudina (AZT) corresponde ao fármaco antiretroviral mais amplamente utilizado no tratamento da Síndrome da Imunodeficiência Adquirida (AIDS). Entretanto, o esquema posológico do AZT é demasiado complexo, incluindo várias administrações diárias, fazendo com que a aderência ao tratamento seja prejudicada. O desenvolvimento de formas farmacêuticas de liberação prolongada constitui uma alternativa promissora na otimização de esquemas posológicos, em resultado a maior manutenção de níveis plasmáticos de fármacos e diminuição do número de administrações diárias. Dentre as alternativas tecnológicas utilizadas com esse fim, os polímeros hidrofílicos vem sendo extensivamente empregados, a exemplo da hipromelose. Objetivo: desenvolver formas farmacêuticas de liberação prolongada do antiretroviral zidovudina a partir de sistemas matriciais formados por hipromelose. Metodologia: caracterização físico-química do fármaco e do agente formador de matriz (hipromelose) através de métodos farmacopéicos (identificação, pureza, viscosidade) e não farmacopéicos (estabilidade, determinação do padrão cristalino e morfologia das partículas). Preparação de comprimidos matriciais de AZT por compressão direta do fármaco e excipientes. Avaliação das características das matrizes quanto à resistência ao esmagamento, friabilidade, variação de peso, doseamento e umidade. Avaliação por técnicas termoanalíticas e cristalográficas da influência do processo de compressão nas características físico-químicas do AZT. Verificação das propriedades físico-mecânicas dos comprimidos matriciais. Avaliação comparativa e cinética do perfil de dissolução das matrizes. Preparação e avaliação da cinética de liberação do AZT a partir de cápsulas matriciais. Resultados: a caracterização físico-química do AZT confirmou a adequação e a qualidade da matéria-prima. A partir de estudos termoanalíticos estimou-se a validade do AZT de 427 dias. A cristalinidade do AZT, verificada por difração de raios-X de pó foi de aproximadamente 75 %, correspondendo a presença de cristais ortorrômbicos, como verificado por microscopia eletrônica de varredura. A caracterização físico-química da hipromelose demonstrou a adequação da matéria-prima quanto às especificações farmacopéicas. O padrão cristalino e morfológico das partículas caracterizaram-na como material preferencialmente amorfo. Os comprimidos matriciais produzidos por compressão direta apresentaram especificações farmacopéicas adequadas, não sendo evidenciada a influência do processo de compressão nas características físico-quimicas do AZT. A avaliação físico-mecânica das matrizes caracterizou os processos de captação de água, intumescimento e erosão das matrizes. A captação de água foi matematicamente elucidada (com exceção de F1) como um processo Fickiano de difusão, sendo influenciado pelo AZT. F1 adequou-se a um modelo de função racional. O modelo matemático de Hixson-Crowell melhor descreveu o perfil cinético de erosão das matrizes. O perfil de dissolução dos comprimidos matriciais evidenciou semelhança entre as formulações, com exceção de F1 que se mostrou menos estável. O processo de liberação do AZT pelas matrizes foi regido por uma cinética anômala descrita pelo modelo de Korsmeyer-Peppas. Entretanto, a liberação do AZT por cápsulas matriciais apresentou perfis distintos, evidenciando a influência do processo de compressão na liberação do AZT. A cinética de dissolução dessas formas farmacêuticas foi condizente com os modelos de Higuchi para a formulação com maior conteúdo de HPMC e Higuchi/Korsmeyer-Peppas para a formulação com menor conteúdo. Conclusão: a partir dos resultados verifica-se que o desenvolvimento de matrizes de liberação prolongada do AZT constitui uma alternativa tecnológica promissora na otimização do esquema posológico do tratamento da AIDS. Como perspectiva, entretanto, sugere-se a otimização e o estudo in vivo das formulações.

Submitted by Heitor Rapela Medeiros (heitor.rapela@ufpe.br) on 2015-03-03T17:48:31Z No. of bitstreams: 2 Tese de Doutorado.pdf: 3636904 bytes, checksum: d5e0cfe5aa2b337256f8d9469e479a57 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-03T17:48:31Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Tese de Doutorado.pdf: 3636904 bytes, checksum: d5e0cfe5aa2b337256f8d9469e479a57 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2012 / CNPQ Fundação de Apoio a pesquisa do estado do Piauí – FAPEPI / A Síndrome da Imunodeficiência Adquirida (AIDS) é uma manifestação causada pelo vírus HIV. A zidovudina (3 – azido – 3 – oxidimetilamina) – AZT foi o primeiro composto anti-hiv aprovado para uso clínico e utilizado para terapia antirretroviral. O ponto crucial do tratamento anti-hiv é a manutenção sistêmica do fármaco dentro de níveis terapêuticos. O AZT tem curto tempo de meia-vida, baixa biodisponibilidade em função do efeito de primeira passagem, por isso são necessárias altas doses para manutenção dos níveis terapêuticos. Com isso, a via transdérmica surge como alternativa para a passagem do fármaco através das camadas da pele até atingir a corrente sanguínea. Diversas estratégias têm sido investigadas para promover a penetração cutânea do AZT, em função de sua hidrofilia, como a utilização de promotores físicos (iontoforese e fonoforese), promotores químicos (etanol, uréia e terpenos) e de sistemas microemulsionados / nanoparticulados. O objetivo deste trabalho foi realizar uma avaliação biofarmacotécnica de microemulsões (ME) de zidovudina a 2.5% em pele de cobra e orelha de porco, na ausência e presença de diferentes promotores químicos. Para isso, realizaram-se diversas técnicas de caracterização físico-química (características macroscópicas, pH, densidade, potencial zeta, SAXS, comportamento reológico, determinação do tamanho de partícula), estudos de estabilidade preliminar, permeação e retenção cutânea, FT-IR em pele de cobra e irritabilidade dérmica acumulada em camundongos. Além disso, foram desenvolvidos e validados 02 (dois) métodos analíticos, por espectrofotometria ultravioleta e por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE – UV) para avaliação do AZT em estudos de permeação e retenção cutânea. Consequentemente, obteve-se microemulsões e formulação de cristal liquido lamelar (LP), transparentes, isotrópicas com tamanho de partícula < 160 nm e biocompatível com a pele. A formulação que possuiu o melhor desempenho foi composta do terpeno 1,8 cineol como promotor de permeação cutânea, pois conseguiu alcançar de forma significativa o compartimento receptor da célula de FRANZ e poderá ser um veículo promissor para liberação transdérmica do AZT.

Made available in DSpace on 2014-06-12T16:32:46Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo6463_1.pdf: 1938424 bytes, checksum: 52ba0c7bd79a83d6fca575ddac24eeab (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2006 / O acesso ao tratamento antiretroviral aos pacientes infectados nos países em desenvolvimento é uma prioridade da saúde pública mundial. Novos fármacos e associações terapêuticas têm proporcionado uma maior adesão ao tratamento, diminuindo a mortalidade pelo vírus HIV e melhorando a qualidade de vida dos pacientes infectados. Tendo em vista, a necessidade de viabilizar alternativas que aumentem essa adesão e conseqüentemente a eficácia terapêutica, tem se desenvolvido antiretrovirais em dose-fixa combinada, que são produtos que combinam dois ou mais fármacos em uma única cápsula ou comprimido. Entre as vantagens desta associação, a mais evidente é a maior adesão ao tratamento em relação ao que já é administrado individualmente na terapia aos pacientes. Este estudo foi realizado em parceria com o Laboratório de Tecnologia dos Medicamentos do Departamento de Ciências Farmacêuticas da UFPE e o Laboratório Farmacêutico do Estado de Pernambuco (LAFEPE) e teve como objetivo principal o desenvolvimento farmacotécnico industrial da associação de zidovudina, lamivudina e nevirapina, contemplando, desde o estudo de pré-formulação quali-quantitativo de excipientes até a transposição para escala industrial, buscando desenvolver uma formulação e forma farmacêutica estável, que atenda as Boas Práticas de Fabricação e Controle e que proporcione sua produção a baixo custo. Foi realizado o desenvolvimento e validação de um método analítico específico para quantificação dos fármacos nos comprimidos revestidos obtidos, por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência, garantindo a qualidade do produto a ser disponibilizado para o Programa Nacional DST/AIDS do Ministério da Saúde Brasileiro (PNDST/AIDS)

Made available in DSpace on 2014-06-12T16:27:01Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo2748_1.pdf: 4472160 bytes, checksum: 06a79310374c92cea54422244ed049d5 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2011 / O presente trabalho apresenta o desenvolvimento tecnológico de um produto inédito contendo a associação em dose fixa (ADF) dos antirretrovirais zidovudina (AZT, 300 mg), lamivudina (3TC, 150 mg) e efavirenz (EFV, 300 mg), todos de primeira escolha no tratamento antirretroviral. O produto visa agregar novas vantagens a terapia medicamentosa atual ao modificar a posologia do EFV, associando este ao produto combinado contendo AZT + 3TC. Inicialmente, realizou-se uma caracterização dos insumos farmacêuticos ativos (IFA) selecionados, aprofundando-se no EFV, responsável por diversos casos de falhas terapêuticas, devido a sua baixa solubilidade aquosa (± 9 &#956;g/mL). Todos os IFA apresentaram características inadequadas de fluxo, evidenciando a necessidade de um processo produtivo de compressão por granulação via úmida. O estudo de compatibilidade fárma-fármaco teve por finalidade compreender as possíveis interações no estado sólido entre os IFA, avaliando a possibilidade de se combiná-los em um único produto, sem mecanismos de segregação dos pós, além da análise da influência do contato destes com a água, presente no processo produtivo do comprimido. O estudo possibilitou observar que a associação dos fármacos não apresenta impedimentos físicos, desde que não haja a fusão destes durante a manufatura. Observou-se também uma influência positiva no incremento do percentual dissolvido do EFV, quando associado aos outros dois IFA. O desenvolvimento tecnológico do comprimido apresentou três principais entraves tecnológicos solucionados, dentre estes a dissolução do EFV, a compatibilidade da formulação e a obtenção de um comprimido com dimensões adequadas a deglutição oral. O estudo de compatibilidade fármaco-excipiente, selecionou os melhores excipientes para a formulação. O comprimido foi obtido com peso de 900 mg, sendo 750 mg de IFA e 150 mg de excipientes (celulose microcristalina, croscarmelose sódica, polivinilpirrolinona, estearato de magnésio, dióxido de silício coloidal e lauril sulfato de sódio). Por meio do teste de dissolução desenvolvido e validado obteve-se, em 30 minutos, os valores de 91,5% para o 3TC, 95,0% para o AZT e 90,2% para o EFV. As condições estabelecidas para o teste de dissolução foram aparato pá com rotação a 100 rpm e 900 mL do meio de lauril sulfato de sódio a 1% (pH 6,8) a 37°C ± 0,5°C. O doseamento do comprimido foi realizado por método analítico desenvolvido e validado utilizando coluna cromatográfica C18, fase móvel gradiente de acetonitrila e água purificada, &#955; 248 nm e tempo de corrida de 14 minutos. Para o estudo de estabilidade este método foi adaptado por meio de amostras estressadas, gerando um novo método indicativo de estabilidade, com 35 minutos de corrida. Concluí-se que a abordagem integrada da tecnologia farmacêutica proporcinou a obtenção de um produto farmacêutico inovador, dentro das exigências regulatórias e requisitos técnicos selecionados

Made available in DSpace on 2014-06-12T16:32:54Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo6587_1.pdf: 1720609 bytes, checksum: f4e03d0a78e1141d199add6aade62405 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2011 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O presente trabalho apresenta o desenvolvimento tecnológico de um novo produto comprimido contendo a associação em dose fixa dos antirretrovirais zidovudina (AZT, 300 mg), lamivudina (3TC, 150 mg) e efavirenz (EFV, 300 mg), de primeira escolha no tratamento antirretroviral. O produto visa agregar novas vantagens à terapia atual, devido ao menor número de comprimidos e redução dos custos produtivos, ao modificar a posologia do EFV e ao associar este ao produto combinado contendo AZT e 3TC. Foi realizado estudo de compatibilidade fárma-fármaco, tendo por finalidade compreender as possíveis interações no estado sólido entre os insumos farmacêuticos ativos (IFA); avaliando a possibilidade de se processá-los em um único produto, sem mecanismos de segregação dos pós. O estudo possibilitou observar que a associação destes não apresenta impedimentos físicos, desde que estes não sejam fundidos durante o processo. Observou-se também uma influência positiva no incremento do percentual dissolvido do EFV [devido a sua baixa solubilidade aquosa (± 9 &#956;g/mL)], quando associado aos outros dois IFA. O desenvolvimento tecnológico do comprimido apresentou três principais entraves tecnológicos solucionados, dentre estes a dissolução do EFV, a compatibilidade da formulação e a obtenção de um comprimido com dimensões adequadas, devido ao grande aporte de fármaco. Foi realizado estudo de compatibilidade fármacos-excipiente, selecionando assim, os melhores excipientes para a formulação. O comprimido foi obtido com peso de 900 mg, sendo 750 mg de IFA e 150 mg de excipientes (celulose microcristalina, croscarmelose sódica, polivinilpirrolinona, estearato de magnésio, dióxido de silício coloidal e lauril sulfato de sódio). Todos os IFA apresentaram características inadequadas de fluxo, evidenciando a necessidade de um processo produtivo de compressão por granulação via úmida para a sua produção. Por meio do teste de dissolução desenvolvido e validado obteve-se, em 30 minutos, os valores médios de 91,5% para o 3TC, 95,0% para o AZT e 90,2% para o EFV. As condições estabelecidas para o teste de dissolução foram aparato pá com rotação a 100 rpm e 1000 mL do meio de lauril sulfato de sódio a 1% (pH 6,8) a 37°C ± 0,5°C. O doseamento do comprimido foi realizado por método analítico desenvolvido e validado utilizando coluna cromatográfica C18, fase móvel gradiente de acetonitrila e água purificada, &#955; 248 nm e tempo de corrida de 14 minutos. Concluí-se que a abordagem integrada da tecnologia farmacêutica proporcinou a obtenção de um novo produto farmacêutico dentro das exigências regulatórias e requisitos técnicos selecionados

Submitted by Fabio Sobreira Campos da Costa (fabio.sobreira@ufpe.br) on 2017-04-03T15:40:58Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) 13.09.16 dissertação .pdf: 1795574 bytes, checksum: 69b2e4f379a6d4cddabad843b16888e1 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-03T15:40:58Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) 13.09.16 dissertação .pdf: 1795574 bytes, checksum: 69b2e4f379a6d4cddabad843b16888e1 (MD5) Previous issue date: 2015-07-06 / Os Insumos Farmacêuticos Ativos (IFAs) são considerados uma nova classe de micropoluentes orgânicos ambientais podendo causar impactos negativos aos ecossistemas. As indústrias farmacêuticas são umas das responsáveis por essa poluição, por isso buscam novos métodos para tratar seus efluentes. Dentre esses fármacos tem-se a Zidovudina (AZT) que pode ser considerado um poluente de difícil degradação nos efluentes industriais via processos convencionais, o que motivou o desenvolvimento de um método de degradação eletroquímico com baixos custos através de uma eletrólise. O AZT foi doado pelo Laboratório Farmacêutico do Estado de Pernambuco (LAFEPE), e caracterizado através de análise termogravimétrica, espectroscopia de absorção na região do infravermelho e difração de raios-X de pó. Como técnicas analíticas, a voltametria de pulso diferencial foi a primeira a ser explorada, utilizando eletrodos de amálgama de mercúrio e carbono vítreo com e sem deposição de zinco na superfície, para pH de 7,2 e 9,6, solução de tampão sódio-potássio de AZT 16 mm, a fim de identificar o melhor pico de redução. Os resultados mostram que o AZT sofre degradação com o eletrodo de amálgama e de carbono vítreo, esse último em menor intensidade. Em busca de uma técnica menos poluente, o eletrodo de carbono vítreo foi o que melhor se enquadrou à proposta de descontaminação de efluentes. As condições ótimas para essa degradação foram solução de tampão sódio-potássio de AZT 16 mm em pH 9,6, com uma corrente (I) de 0,04 A e tempo de reação de 24 horas, em que os resultados obtidos com a Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE) revelaram uma degradação de 100% do fármaco Zidovudina, e formação de produtos de degradação. / Active Pharmaceuticals (AP) are considered as a new class of environmental organic micropollutant which are causing negative impact to the ecosystems. The pharmaceutical industries are one of the main responsible for this pollution leading to the search of new wastewater treatment methods. Among these pharmaceuticals, the Zidovudin (AZT) may be considered a pollutant of hard degradation profile by the conventional known methodologies and this problem motivated the development of a low cost electrochemical degradation method. The AT was donated by the Pernambuco State Pharmaceutical Laboratory (LAFEPE) and characterized by thermogravimetric analysis, infrared absorption spectroscopy and powder X-ray diffraction. The differential pulse voltammetry was first explored applying Hg amalgam and vitreous carbon electrodes, with and without Zn surface deposition. These conditions were tested at a H = 7.2 and pH = 9.6, using a 16 mm AZT in a sodium-phosphate buffer in order to identify and optimize the reduction peak. The results show that the AZT degrades when the amalgam and the vitreous carbon are applied. Searching for a less pollutant technique, the vitreous carbon electrode was chosen for the continuation of the studies. The optimized experimental conditions were found to be: 16 mm AZT in a sodium-phosphate buffer, with a current of I = 0.04 A, and 24 h reaction time. The High Performance Liquid Chromatography revealed 100% degradation for the AZT drug and the occurrence of degradation products. The present study shows the possibility of its use in the decontamination of the AZT industrial production wastewater.

Orientador : Maria Palmira Daflon Gremião / Coorientador: Beatriz Stringhetti Ferreira Cury / Banca: Marcos Luciano Bruschi / Banca: Sergio Paulo Campana Filho / Banca: Marlus Chorilli / Banca: Marco Vinícius Chaud / Resumo: A zidovudina (AZT) é o fármaco mais utilizado isoladamente ou em associação para o tratamento da Síndrome da Imunodeficiência Adquirida (AIDS), causada pelo vírus HIV. A baixa biodisponibilidade do AZT é o grande desafio a ser vencido para otimizar seu desempenho na terapêutica por via oral, já que sua elevada taxa de metabolização e baixa permeabilidade resultam na necessidade de administração de elevadas doses do fármaco. Além disto, este fármaco ainda é substrato do mecanismo de efluxo mediado pela glicoproteína-P no intestino, o que diminui ainda mais sua biodisponibiidade. Desta forma, dispersões sólidas (DS) e nanopartículas poliméricas (NP) foram desenvolvidas por complexação polieletrolítica com diferentes proporções entre o fármaco e os polímeros quitosana (QS) e ftalato de hidroxipropilmetilcelulose (HP). O teor de incorporação de fármaco nas DSs (em torno de 98%) foi maior que nas NPs (cerca de 65%). Os ensaios de liberação in vitro realizados em HCl 0,1 mol/l (pH 1,2) demonstraram que a complexação entre os polímeros e compartimentalização do fármaco reduziu as taxas de liberação do AZT tanto para as DSs (26 a 50%) quanto nas NPs (aproximadamente 60%) e, em tampão fosfato 50 m mol/l (pH 7,4), ambos sistemas de liberação prolongaram a liberação do fármaco por até 240 minutos. A determinação da granulometria confirmou a obtenção de sistemas micro (até 100 μm) e nanoparticulados (até 400 nm) e o potencial zeta evidenciou a carga superficial negativa das DSs e positiva das NPs. Os dados de DSC e DRX mostraram que o AZT estava molecularmente disperso em ambos os sistemas e que as DSs apresentaram estrutura amorfa, enquanto as NPs apresentaram estrutura predominantemente cristalina.A espectroscopia na região do infravermelho mostrou a formação de ligações entre a QS e o HP tanto nas DSs quanto nas NPs, sem alterar a... / Abstract: Zidovudine (AZT) is the most widely used drug alone or in combination with other antiretroviral agents for the treatment of AIDS, caused by the HIV virus. The low AZT bioavailability is the great challenge to be overcome to optimize its performance in oral therapy, since its high rate of hepatic metabolism and low permeability results in the need for high doses of the drug. In addition, this drug is substrate of the efflux mechanism mediated by P-glycoprotein in the gut, which further decreases its bioavailability. Thus, solid dispersions (SD) and polymeric nanoparticles (NP) were developed by complexation polyelectrolyte with different ratios between the drug and the polymers chitosan (CS) and hydroxypropyl methylcellulose phthalate (HP). The drug content in the SDs (around 98%) was higher than in NPs (about 65%). The in vitro release assays performed in HCl 0.1 mol/l (pH 1.2) showed that polymeric complexation and drug entrapment reduced the AZT rates release in both SDs (26 to 50%) and NPs (around 60%), and in phosphate buffer 50 m mol/l (pH 7.4), both modified the drug release until 240 minutes. The particle size determination confirmed obtaining micro systems (around 100 micron) and nanoparticles (around 400 nm) and zeta potential showed the negative surface of SDs and the positive charge of NPs. DSC and XRD data showed that AZT remained molecularly dispersed in both systems and the DSs had an amorphous structure, while the NPs showed structure crystalline predominantly. The IR spectroscopy showed in both SDs and NPs the formation of bonds between CS and the HP without changing the structure of AZT. The NPs showed higher liquid absorption capacity (until 260%) relative to SDs (until 160%) in different pH values, while SDs presented higher mucin adsorption capacity. The SDs and NPs mucin adsorption occurs according to the mechanism of Freundlich and Langmuir, respectively. Intestinal permeability assay showed the influence of SD to ... / Doutor

Made available in DSpace on 2015-12-06T22:54:32Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Introdução: O melanoma é decorrente de um crescimento celular descontrolado, com perda de inibição por contato e alterações no núcleo, afetando a manutenção dos telômeros. A telomerase, responsável pela síntese do telômero, protege o final da molécula de DNA. Sua atividade está ausente na maioria das células somáticas humanas e presente em quase todas linhagens de células tronco, germinativas e em mais de 90% dos tumores humanos. Estudos sugerem que a progressão de doenças malignas depende da reativação da telomerase, e que um agente inibidor dessa enzima poderia ser uma droga antitumoral efetiva, entre elas, o azidotimidinatrifosfato (AZT), sendo provado que o uso dessa droga em algumas neoplasias inibe in vitro sua ação. Objetivo: Avaliação da atividade da telomerase e da proliferação de células imortalizadas de melanoma Hs839T catalogo CRL-7572 submetidas à ação do AZT. Métodos: Foram utilizadas, linhagens de células de melanoma Hs839T catalogo CRL-7572, adquiridas via American Type Culture Collection, derivada da pele de um indivíduo caucasiano do sexo feminino de 42 anos. As células foram cultivadas em meio de cultura, suplementadas com diferentes concentrações de AZT em triplicata com 50, 100 e 200µM por 24h e 48h e comparados seus efeitos ao grupo controle. A avaliação da proliferação celular foi realizada pela técnica de MTT. A detecção da atividade da telomerase por KIT TRAPEZE® RT s7710 e PCR ELISA. Resultados: No tempo de 24 horas, quando comparado ao grupo controle, não houve inibição da proliferação celular e da atividade da telomerase da linhagem de melanoma Hs839T catalogo CRL-7572, embora sugira tendência à diminuição, quando comparados os grupos controle e 200µM. No tempo de 48 horas, houve uma diminuição momentânea, seguida de rápida recuperação, sugerindo que as células de linhagem utilizadas neste estudo são sensíveis ao AZT, mas que recuperam a atividade enzimática e proliferativa. Conclusão: A ação do AZT em células de melanoma HS839.T catalogo CRL-7572 estudadas nas concentrações e tempos propostos, não inibiu a atividade da telomerase e não afetou a proliferação celular. / Introduction: Melanoma is caused by an uncontrolled cell growth, with lossof inhibition contact and changes in the nucleus, affecting the maintenance of telomeres. Telomerase, responsible for telomere synthesis, protects the end of the DNA molecule. Its activity is absent in most human somatic cells and present in almost all lines of stem cells, germinatives, and in more than 90% of human tumors. Studies suggest that the malignancy progression depends on the telomerase reactivation, and that an inhibitor of this enzyme could be an effective antitumor drug, including the Azidothymidine-triphosphate (AZT) and proved that the use of this drug in some neoplasms inhibits their action “in vitro”. Objective: Evaluation of telomerase activity and proliferation of melanoma cells immortalized Hs839T catalog CRL-7572 subjected to the AZT action. Methods: We used melanoma cell lines of Hs839T catalog CRL-7572, acquired through American Type Culture Collection, derived from the skin of a 42-year-old Caucasian female person. The cells were grown in culture environment supplemented with different AZT concentrations in triplicate 50, 100 and 200µM) withim 24 and 48 hours and its effects compared to the control group. The cell proliferation evaluation was performed by MTT. Detection of telomerase activity by KIT S7710 TRAPEZE ® RT and PCR ELISA. Results: In 24 hours time, when compared to the control group, there was no inhibition of proliferation cell and telomerase activity, although there was tendency to decrease when compared to the control group and 200µM. In 48 hours time, there was a momentary decrease, followed by rapid recovery, suggesting that the cell lines used in this study are sensitive to AZT, but they recover the enzyme activity and proliferation. Conclusion: The action of AZT in melanoma cells HS839.T studied in the proposed concentrations and times did not inhibit telomerase activity and did not affect cell proliferation. / FAPESP: 07/59225-0 / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Made available in DSpace on 2015-12-10T14:24:19Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-07-29. Added 1 bitstream(s) on 2015-12-10T14:30:31Z : No. of bitstreams: 1 000851698_20160729.pdf: 547839 bytes, checksum: 2adff6a515f107e4e977600d01ec7ba7 (MD5) Bitstreams deleted on 2016-07-29T12:53:57Z: 000851698_20160729.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-07-29T12:54:50Z : No. of bitstreams: 1 000851698.pdf: 3022510 bytes, checksum: a93d5ebfdfee8b2508562e1a0a8de9b2 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A zidovudina (AZT) é o fármaco mais utilizado isoladamente ou em associação para o tratamento da Síndrome da Imunodeficiência Adquirida (AIDS), causada pelo vírus HIV. A baixa biodisponibilidade do AZT é o grande desafio a ser vencido para otimizar seu desempenho na terapêutica por via oral, já que sua elevada taxa de metabolização e baixa permeabilidade resultam na necessidade de administração de elevadas doses do fármaco. Além disto, este fármaco ainda é substrato do mecanismo de efluxo mediado pela glicoproteína-P no intestino, o que diminui ainda mais sua biodisponibiidade. Desta forma, dispersões sólidas (DS) e nanopartículas poliméricas (NP) foram desenvolvidas por complexação polieletrolítica com diferentes proporções entre o fármaco e os polímeros quitosana (QS) e ftalato de hidroxipropilmetilcelulose (HP). O teor de incorporação de fármaco nas DSs (em torno de 98%) foi maior que nas NPs (cerca de 65%). Os ensaios de liberação in vitro realizados em HCl 0,1 mol/l (pH 1,2) demonstraram que a complexação entre os polímeros e compartimentalização do fármaco reduziu as taxas de liberação do AZT tanto para as DSs (26 a 50%) quanto nas NPs (aproximadamente 60%) e, em tampão fosfato 50 m mol/l (pH 7,4), ambos sistemas de liberação prolongaram a liberação do fármaco por até 240 minutos. A determinação da granulometria confirmou a obtenção de sistemas micro (até 100 μm) e nanoparticulados (até 400 nm) e o potencial zeta evidenciou a carga superficial negativa das DSs e positiva das NPs. Os dados de DSC e DRX mostraram que o AZT estava molecularmente disperso em ambos os sistemas e que as DSs apresentaram estrutura amorfa, enquanto as NPs apresentaram estrutura predominantemente cristalina.A espectroscopia na região do infravermelho mostrou a formação de ligações entre a QS e o HP tanto nas DSs quanto nas NPs, sem alterar a... / Zidovudine (AZT) is the most widely used drug alone or in combination with other antiretroviral agents for the treatment of AIDS, caused by the HIV virus. The low AZT bioavailability is the great challenge to be overcome to optimize its performance in oral therapy, since its high rate of hepatic metabolism and low permeability results in the need for high doses of the drug. In addition, this drug is substrate of the efflux mechanism mediated by P-glycoprotein in the gut, which further decreases its bioavailability. Thus, solid dispersions (SD) and polymeric nanoparticles (NP) were developed by complexation polyelectrolyte with different ratios between the drug and the polymers chitosan (CS) and hydroxypropyl methylcellulose phthalate (HP). The drug content in the SDs (around 98%) was higher than in NPs (about 65%). The in vitro release assays performed in HCl 0.1 mol/l (pH 1.2) showed that polymeric complexation and drug entrapment reduced the AZT rates release in both SDs (26 to 50%) and NPs (around 60%), and in phosphate buffer 50 m mol/l (pH 7.4), both modified the drug release until 240 minutes. The particle size determination confirmed obtaining micro systems (around 100 micron) and nanoparticles (around 400 nm) and zeta potential showed the negative surface of SDs and the positive charge of NPs. DSC and XRD data showed that AZT remained molecularly dispersed in both systems and the DSs had an amorphous structure, while the NPs showed structure crystalline predominantly. The IR spectroscopy showed in both SDs and NPs the formation of bonds between CS and the HP without changing the structure of AZT. The NPs showed higher liquid absorption capacity (until 260%) relative to SDs (until 160%) in different pH values, while SDs presented higher mucin adsorption capacity. The SDs and NPs mucin adsorption occurs according to the mechanism of Freundlich and Langmuir, respectively. Intestinal permeability assay showed the influence of SD to ... / FAPESP: 13/01670- 0 e 14/08044-0

Made available in DSpace on 2014-08-13T14:50:53Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-03-28Bitstream added on 2014-08-13T18:01:23Z : No. of bitstreams: 1 000765980_20150414.pdf: 404380 bytes, checksum: 96179c0575a35660857492c085ade65e (MD5) Bitstreams deleted on 2015-04-23T11:39:24Z: 000765980_20150414.pdf,Bitstream added on 2015-04-23T11:39:57Z : No. of bitstreams: 1 000765980.pdf: 4347682 bytes, checksum: 92fbfe6a7c4583f5c57af76211fc42f7 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Neste estudo foi proposta a utilização do processo antissolvente supercrítico (SAS), no qual o gás carbônico foi selecionado como agente antissolvente, para a obtenção de sistema de liberação controlada de fármaco. No delineamento experimental fatorial 32, a proporção entre zidovudina e poli(L-ácido lático) (AZT:PLLA) representou o fator X1, e as condições de temperatura e pressão representou o fator X2, sendo ambos variáveis independentes; o rendimento do processo e a morfologia macroscópica das partículas representaram as variáveis dependentes. No presente estudo, as variáveis dependentes determinaram os produtos dos lotes que foram selecionados para a caracterização do estado sólido, teor de AZT, tipo e cinética de liberação de AZT e permeação intestinal de AZT. A caracterização do estado sólido utilizou as análises de dispersão de raios X (DRX), microscopia eletrônica de varredura (MEV), espectroscopia de infravermelho com transformada de Fourier (FITR) e calorimetria exploratória diferencial (DSC). O teor de AZT foi determinado por metodologia analítica validada. O teste de dissolução forneceu dados para as avaliações da liberação e da cinética de liberação de AZT. O modelo de saco intestinal invertido de rato foi adotado para o estudo ex vivo de permeação intestinal do AZT. Os lotes L3 (91,54 % de rendimento e amostra com aspecto uniforme), L5 e L9 (59,06 % e 51,50 % de rendimento, respectivamente; ambos resultaram em amostra com aspecto não uniforme e sólido filamentoso) resultantes do planejamento fatorial 32 foram selecionados para os estudos analíticos. O lote L3 de proporção AZT:PLLA (1:2, m/m) resultou em rendimento de 91,54 % e teor de AZT 58,76 % elevados em comparação aos lotes produzidos e foi selecionado para o estudo de permeação intestinal. A permeabilidade do AZT a partir do lote L3 (9,87 ± 0,47 %) foi maior em relação ao AZT puro (3,84 ± 0,45 %). O AZT permaneceu ... / In this study we proposed the use of supercritical antisolvent process (SAS), in which carbon dioxide was selected as antisolvent agent, to obtain drug controlled release system. Factorial 32 experimental design use the of zidovudine and poly (L-lactic acid) ratio (AZT:PLLA ) as X1 factor, also the temperature and pressure conditions as X2 factor, both independent variables, the process yield and particles macroscopic morphology represented the dependent variables. In this study, the dependent variables determined the product that have been selected to solid state characterization, AZT content, type, release kinetics, and intestinal permeation. Solid state characterization used X-ray diffraction (XRD) analysis, scanning electron microscopy (SEM), infrared spectroscopy with Fourier transform (FTIR), and differential scanning calorimetry (DSC). The AZT content was determined by validated analytical methodology. The dissolution test provided data for AZT release and release kinetics evaluation. The rat everted gut sac model was take on for the ex vivo study of intestinal permeation of AZT. The L3 (91.54 % yield and sample with uniform appearance), L5 and L9 lots (59.06 % and 51.50 % yield , respectively , both of which resulted in samples with non-uniform and solid filamentous appearance) resulting from factorial 32 planning were selected for analytical studies. The L3batch ratio of AZT:PLLA (1:2, w/w) resulted in a high yield of 91.54 % and 58.76 % AZT content compared to batches produced, and was selected for the study of intestinal permeation . The AZT permeability from L3 lot (9.87 ± 0.47%) was higher than pure AZT (3.84 ± 0.45 %). AZT remained in crystalline form and PLLA remained in semi - crystalline form, in lots L3, L5, and L9 produced by the SAS process, when evaluated by SEM, XRD, DSC, and FTIR. This study demonstrated that it is possible to use the SAS process to obtaining modified release systems for poorly permeable drugs ...