Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:13Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-02-20Bitstream added on 2014-06-13T18:46:39Z : No. of bitstreams: 1 000734559.pdf: 1183972 bytes, checksum: 9325cbfb199c737993d9c5590b41b911 (MD5) / A lesão renal aguda isquêmica é fenômeno comum no período perioperatório e em doentes críticos internados em unidades de terapia intensiva. O restabelecimento do fluxo sanguíneo pode piorar a lesão pelo mecanismo de isquemia e reperfusão (I/R). O objetivo do estudo foi avaliar o efeito do uso da dexmedetomidina no rim de ratos, em modelo experimental de I/R. Foram selecionados 34 ratos Wistar e alocados em quatro grupos aleatórios. Grupo Controle – C (nefrectomia direita, infusão de salina e manobras de I/R, n=10), Grupo Dexmedetomidina – D (nefrectomia direita, infusão de dexmedetomidina e manobras de I/R, n=8), Grupo Sham – S (nefrectomia direita e infusão de salina, n=8), Grupo Sham com dexmedetomidina – SD (nefrectomia direita e infusão de dexmedetomidina, n=8). Os animais foram anestesiados com isoflurano. Avaliou-se peso, frequência cardíaca (FC), pressão arterial sistólica (PAS), diastólica (PAD) e média (PAM), temperatura intraoperatória (T) nos momentos M0 (monitorização inicial), M1 (após estabilização), M2 (após isquemia), M3 (após reperfusão); dosagem plasmática de NGAL em M1, M2, M3 e M4 (12 horas após o início do experimento) e dosagem plasmática de IL-1α, IL-1β, IL-6, IL-10 e TNF-α nos momentos M1 e M4. Os rins direito e esquerdo foram analisados histologicamente. Os grupos foram uniformes quanto ao peso. A temperatura do grupo SD em M0 foi inferior a M1 e M2, sem diferenças nos demais grupos. A FC do grupo S foi maior que do grupo D em M2 e M3, sem diferenças nos demais grupos e momentos. A análise da PAS, PAD e PAM mostrou redução nos momentos M2 e M3 nos grupos D e SD. Na análise de NGAL os valores foram estatisticamente superiores em M3 nos grupos C e D em relação a S e SD e M3 foi superior aos valores de M1 em todos os grupos. Na análise de IL-1α, IL-6 e IL-10 os valores em M1 do grupo SD foi superior ao grupo D e não houve diferenças entre os grupos em M4. Não houve... / Acute kidney injury (AKI) is a common phenomenon in perioperative period and critically ill patients admitted to intensive care units. The restoration of blood flow may worsen injury by a mechanism of ischemia and reperfusion (I/R). The aim of this study was to evaluate the role of dexmedetomidine in an experimental model of renal I/R in rats. 34 Winstar rats were selected and randomly divided into 4 different groups. Control group – C (right nephrectomy, saline solution infusion and left renal I/R, n=10), Dexmedetomidine group – D (right nephrectomy, dexmedetomidina infusion and left renal I/R, n=8), Sham group – S (nephrectomy and saline infusion, n=8), Sham with dexmedetomidina – SD (right nephrectomy and dexmedetomidine infusion, n=8). The rats were anesthetized by isoflurane. The following criteria were studied: weight (W), heart rate (HR), systolic blood pressure (SBP), diastolic blood pressure (DBP) and mean arterial pressure (MAP), intraoperative temperature (T) at M0 (initial monitorization), M1 (after initial stabilization), M2 (after ischemia) and M3 moment (after reperfusion); NGAL plasma level at M1, M2, M3 and M4 (12 hours after the procedure) and plasma level of IL-1α, IL-1β, IL-6, IL-10 and TNF-α at M1 and M4 moments. Histological analysis was performed in all kidneys. The groups had not weight differences. SD temperature at M1 was lower than M1 and M2 and there were no differences between other groups and moments. S group HR was higher than D group at M2 and M3 with no differences in other groups and moments. There was a reduction of SBP, DBP and MAP at M2 and M3 in D and SD groups. NGAL analysis showed higher levels at M3 in C and D groups than S and SD and levels at M3 were higher than at M1 in all groups. The levels of IL-1α, IL-6 and IL-10 at M1 in SD group were higher than in group D and there were no differences between groups in M4. There were no differences in plasma levels of IL-1β and at M4, the ...

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:13Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-08-27Bitstream added on 2014-06-13T18:46:39Z : No. of bitstreams: 1 000735784.pdf: 7287328 bytes, checksum: 5168a4b32b56518412240310e97919f8 (MD5) / A melatonina é um varredor de radicais livres com importantes ações no estudo da isquemia e reperfusão renal. O objetivo deste estudo é avaliar possível proteção renal de altas doses de melatonina em modelo experimental de I/R submetidos à hiperglicemia aguda em ratos anestesiados com isoflurano. Método: utilizou-se 44 ratos Wistar, machos, com peso superior a 300g, distribuídos de modo aleatório em cinco grupos, designados: sham (n=10); melatonina, (n=10, 50 mg.kg- 1);hiperglicemia (n=9, glicose 2,5 g.kg-1); hiperglicemia/melatonina (n=10, glicose 2,5 g.kg-1 + melatonina 50 mg.kg-1); isquemia e reperfusão (n=5,). Todos os grupos receberam indução da anestesia com isoflurano a 4% e a manutenção com isoflurano de 1,5 a 2,0%. A pressão arterial média (PAM) foi medida para controle da anestesia. A injeção intraperitoneal da melatonina (melatonina e hiperglicemia/melatonina) ou glicose (hiperglicemia, hiperglicemia/melatonina) ou solução salina (isquemia e reperfusão) foi feita 40 minutos antes da isquemia renal esquerda. Nos três grupos a isquemia durou 25 minutos. Todos os animais foram submetidos à nefrectomia direita. Os valores plasmáticos da creatinina e glicose foram determinados no início (M1), no (M2) imediatamente após reperfusão e 24 horas após o final do experimento (M3), quando os animais retornaram ao laboratório e foram anestesiados com isoflurano para coleta de amostra sanguínea e nefrectomia esquerda. Para análise histológica foi utilizada uma escala para avaliação da necrose tubular (0 a 5 = lesão máxima). Houve tratamento estatístico para os valores da temperatura dos animais, peso, PAM, da creatinina plasmática, glicemia e das lesões histológicas, sendo as diferenças consideradas significantes quando P < 0,05. A glicemia foi superior no M2 nos grupos que receberam suplementação de glicose, hiperglicemia (356,00 ± 107,83) e hiperglicemia/melatonina... / Melatonin is a free radical scavenger with important actions in the study of renal ischemia and reperfusion (I/R). This study aimed evaluate possible renal protection of high doses of melatonin in an experimental model of I/R, in which rats were submitted to acute hyperglycemia under anesthesia with isoflurane. Method: 44 male Wistar rats, weighing more than 300g, were randomly divided into five groups: sham (n=10); melatonin (n=10, 50 mg.kg-1); hyperglycemia (n=9, glucose 2.5 g.kg-1); hyperglycemia/melatonin (n=10, 2.5 g.kg-1 glucose + melatonin 50 mg.kg-1); ischemia and reperfusion (n=5). In all groups, anesthesia was induced with 4% isoflurane and maintained with 1.5 to 2.0% isoflurane. Mean arterial pressure (MAP) was measured to control anesthesia. Intraperitoneal injection of melatonin (melatonin and hyperglycemia/melatonin), glucose (hyperglycemia, hyperglycemia/melatonin) or saline (ischemia and reperfusion) was performed 40 min before left renal ischemia. In these groups, ischemia lasted 25 min. All the rats were submitted to right nephrectomy. Serum plasma values for creatinine and glucose were determined at baseline (T1), immediately following reperfusion (T2) and 24 h after completion of the experiment (T3), when the rats were returned to the laboratory and anesthetized with isoflurane to collect blood samples and for left nephrectomy. Histological analysis was performed to evaluate tubular necrosis (scale: 0 to 5 = maximal lesion). Statistical analysis was applied to the following values: temperature, weight, MAP, plasma creatinine, glucose and histological lesions. The differences were considered significant when P <0.05. Serum glucose was higher at T2 in the groups supplemented with glucose, hyperglycemia (356.00 ±107.83) and hyperglycemia/melatonin (445.3 ±148.32). Creatinine values were higher at T3 (P=0.0001) for ischemia and reperfusion (3.6 ±0.37), hyperglycemia/melatonin ...

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:13Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-07-10Bitstream added on 2014-06-13T20:26:20Z : No. of bitstreams: 1 silva_rc_me_botfmvz.pdf: 997441 bytes, checksum: 50d67e0480990ba5c46186e06fb9f216 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O Toxoplasma gondii é um protozoário parasita de grande importância no contexto de produção animal e saúde pública, envolvendo alterações fetais e abortos na espécie humana e em animais, sendo ainda importante patógeno oportunista em pacientes imunocomprometidos. A técnica de aglutinação direta modificada (MAT) destaca-se por independer da origem dos anticorpos e permitir diferenciar os estágios da infecção toxoplásmica. Assim, padronizou-se a técnica de sedimentação espontânea, verificando-se que com 60 minutos, a parte líquida da suspensão apresentava predominantemente taquizoítos e raras células pequenas. O antígeno inativado pelo metanol (AM) permitiu a exposição de antígenos de fase aguda somente, enquanto que a formalina (AF) expõe tanto os de fase aguda como crônica. Testou-se o antígeno para três grupos experimentais: G1, ratas infectadas com 104 bradizoítos da cepa BTU10, genótipo I, via oral; G2, ratas infectadas com 104 bradizoítos da cepa BTU10, via oral, e imunodeprimidas com corticóide; G3, grupo controle. A comparação das MATs permitiu a diferenciação dos anticorpos IgG de fase aguda, dos de fase crônica. Gradativamente foi obtida a maturação dos anticorpos, sendo observada pela avidez das mesmas no teste de ELISA. Os anticorpos do grupo experimental se comportaram semelhantemente para as provas sorológicas, até a 13ª semana. A reagudização no G2 foi detectada na bioprova da musculatura antes que no cérebro. Com isso, verificou-se que a MAT-AM e a MAT-AF permitem a diferenciação dos estágios agudo e crônico, e ainda a caracterização da reagudização da infecção em pacientes imunocomprometidos. / Toxoplasma gondii is a parasite protozoan with great importance to animal production and public health, involving foetal alterations and abortions in human and animal species, being an important opportunistic pathogen in immunocompromised patients. Modified agglutination test (MAT) has great importance to independ of the origin of antibody, and to allow differentiating the periods of the Toxoplasma infection. Thus, the protocol of spontaneous sedimentation we standardized, verifying that with 60 minutes, the liquid part of the suspension showed predominantly the presence of tachyzoites and rare small cells. The antigen inactivated with methanol (AM) allowed the exposition of antigens of acute phase only, while formalin (AF) as much the acute as chronic phase. Antigen was tested to three experimental groups: G1, rats infected with 104 bradyzoites of BTU10 strain, genotype I, orally; G2, rats infected with 104 bradyzoites of BTU10 strain, orally, and immunodepressed with corticoid; G3, control group. The comparation of MATs allows the differentiation of IgG from acute phase of the ones from chronic phase. A gradual maturation of immunoglobulins was gotten, being observed through the avidity of the same ones, and surveyed for ELISA. The antibodies of the experimental groups showed similar profile for all serological tests, until the 13th week. Reacutization of the infection in G2 was detected earlier in bioassay of musculature than brain. Thus, we verified that MAT-AM and MAT-AF allow the differentiation of the acute and chronic stages, and still the characterization of the reacutization of the infection in immunocompromised patients. / FAPESP: 2003/08063-0

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:39Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-02-27Bitstream added on 2014-06-13T18:47:00Z : No. of bitstreams: 1 sinzato_yk_dr_botfm.pdf: 273220 bytes, checksum: 7f61ff6bd8aff6dcd2d1543cbfa1ca95 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Avaliar os efeitos do diabete moderado nos parâmetros reprodutivos maternos e no desenvolvimento placentário-fetal em ratas Wistar. Metodologia: No dia do nascimento, 147 ratas Wistar foram distribuídas aleatoriamente em dois grupos experimentais: Grupo não-diabético (Controle, n=45) - recebeu o veículo; Grupo diabético (STZ, n=102) - recebeu 100 mg streptozotocin/kg. Na fase adulta, as ratas foram acasaladas e, no dia 0 de prenhez, foram incluídas ratas controle que apresentassem glicemia abaixo de 120 mg/dL e, para o grupo diabete moderado, glicemia entre 120 e 300 mg/dL. Em diferentes momentos da prenhez, glicemia e peso corpóreo foram verificados. No 21º dia de prenhez, as ratas foram anestesiadas para coleta de sangue para dosagem de insulina e, em seguida, foi realizada laparotomia para retirada e pesagem dos fetos e placentas. Os dados maternos e fetais foram analisados por Twoway ANOVA seguida do Teste t. Os recém-nascidos (RN) foram classificados em pequenos, adequados e grandes para idade de prenhez e as comparações entre os grupos foram realizadas segundo o Teste de Qui-quadrado. As ratas STZ apresentaram glicemias maiores nos dias 0 e 14 de prenhez, menor número médio de fetos vivos, implantações e de corpos lúteos, aumento nas taxas de perdas embrionárias pós-implantação, no peso placentário e na proporção de RN pequenos (PIP) e grandes (GIP) para idade de prenhez, redução de RN AIP e inalteração nas concentrações de insulina. Portanto, o diabete de intensidade moderada alterou a glicemia materna no início da prenhez, que deflagrou alterações no organismo materno e/ou no desenvolvimento inicial do embrião, afetando sua implantação e futuro desenvolvimento placentário e fetal. / To evaluate the mild diabetes effects on the maternal reproductive outcome and placental-fetal development in female Wistar rats. Methodology: At the birth day, 147 female rats were randomly distributed in two experimental groups: 1) Non-diabetic Group (Control, n=45) - received the vehicle; 2) Diabetic Group (STZ, n=102) - received 100 mg streptozotocin/kg. At the adult phase, the female rats were mated and, at the day 0 of pregnancy, they were included in the control group when presented glycemia below 120 mg/dL and, in the group STZ when showed glycemia between 120 and 300 mg/dL. In different moments of the pregnancy, glycemia and body weight were verified. At day 21 of pregnancy, the rats were anaesthetized to collect blood samples for insulin determination and, soon afterwards, the laparotomy was carried out to withdraw and weigh the fetuses and placentas. The maternal and fetal dates were analyzed by Two-way ANOVA followed by t Test. The newborns (NB) were classified in small, appropriate and large for gestational age and the comparisons between the groups were accomplished according to Qui-square Test. Rats STZ presented higher glycemia at days 0 and 14 of pregnancy, lower numbers of alive fetuses; implantations and corpora lutea; increased rate of embryonic losses, placental weight and proportion of small NB (SGA) and large (LGA); reduced rate of AGA NB and unaltered insulin concentrations. Therefore, the mild diabetes altered the maternal glycemia in the early pregnancy, which caused changes in the maternal organism and/or in the early development of the embryo, impairing its implantation and future placental and fetal development.

Orientador: Norma Sueli Pinheiro Módolo / Banca: Leandro Gobbo Brz / Banca: Guilherme Antônio Moreira de Barros / Banca: Leopoldo Muniz da Silva / Banca: José Fernando Amaral Meletti / Resumo: A lesão renal aguda isquêmica é fenômeno comum no período perioperatório e em doentes críticos internados em unidades de terapia intensiva. O restabelecimento do fluxo sanguíneo pode piorar a lesão pelo mecanismo de isquemia e reperfusão (I/R). O objetivo do estudo foi avaliar o efeito do uso da dexmedetomidina no rim de ratos, em modelo experimental de I/R. Foram selecionados 34 ratos Wistar e alocados em quatro grupos aleatórios. Grupo Controle - C (nefrectomia direita, infusão de salina e manobras de I/R, n=10), Grupo Dexmedetomidina - D (nefrectomia direita, infusão de dexmedetomidina e manobras de I/R, n=8), Grupo Sham - S (nefrectomia direita e infusão de salina, n=8), Grupo Sham com dexmedetomidina - SD (nefrectomia direita e infusão de dexmedetomidina, n=8). Os animais foram anestesiados com isoflurano. Avaliou-se peso, frequência cardíaca (FC), pressão arterial sistólica (PAS), diastólica (PAD) e média (PAM), temperatura intraoperatória (T) nos momentos M0 (monitorização inicial), M1 (após estabilização), M2 (após isquemia), M3 (após reperfusão); dosagem plasmática de NGAL em M1, M2, M3 e M4 (12 horas após o início do experimento) e dosagem plasmática de IL-1α, IL-1β, IL-6, IL-10 e TNF-α nos momentos M1 e M4. Os rins direito e esquerdo foram analisados histologicamente. Os grupos foram uniformes quanto ao peso. A temperatura do grupo SD em M0 foi inferior a M1 e M2, sem diferenças nos demais grupos. A FC do grupo S foi maior que do grupo D em M2 e M3, sem diferenças nos demais grupos e momentos. A análise da PAS, PAD e PAM mostrou redução nos momentos M2 e M3 nos grupos D e SD. Na análise de NGAL os valores foram estatisticamente superiores em M3 nos grupos C e D em relação a S e SD e M3 foi superior aos valores de M1 em todos os grupos. Na análise de IL-1α, IL-6 e IL-10 os valores em M1 do grupo SD foi superior ao grupo D e não houve diferenças entre os grupos em M4. Não houve ... / Abstract: Acute kidney injury (AKI) is a common phenomenon in perioperative period and critically ill patients admitted to intensive care units. The restoration of blood flow may worsen injury by a mechanism of ischemia and reperfusion (I/R). The aim of this study was to evaluate the role of dexmedetomidine in an experimental model of renal I/R in rats. 34 Winstar rats were selected and randomly divided into 4 different groups. Control group - C (right nephrectomy, saline solution infusion and left renal I/R, n=10), Dexmedetomidine group - D (right nephrectomy, dexmedetomidina infusion and left renal I/R, n=8), Sham group - S (nephrectomy and saline infusion, n=8), Sham with dexmedetomidina - SD (right nephrectomy and dexmedetomidine infusion, n=8). The rats were anesthetized by isoflurane. The following criteria were studied: weight (W), heart rate (HR), systolic blood pressure (SBP), diastolic blood pressure (DBP) and mean arterial pressure (MAP), intraoperative temperature (T) at M0 (initial monitorization), M1 (after initial stabilization), M2 (after ischemia) and M3 moment (after reperfusion); NGAL plasma level at M1, M2, M3 and M4 (12 hours after the procedure) and plasma level of IL-1α, IL-1β, IL-6, IL-10 and TNF-α at M1 and M4 moments. Histological analysis was performed in all kidneys. The groups had not weight differences. SD temperature at M1 was lower than M1 and M2 and there were no differences between other groups and moments. S group HR was higher than D group at M2 and M3 with no differences in other groups and moments. There was a reduction of SBP, DBP and MAP at M2 and M3 in D and SD groups. NGAL analysis showed higher levels at M3 in C and D groups than S and SD and levels at M3 were higher than at M1 in all groups. The levels of IL-1α, IL-6 and IL-10 at M1 in SD group were higher than in group D and there were no differences between groups in M4. There were no differences in plasma levels of IL-1β and at M4, the ... / Doutor

Orientador: Pedro Thadeu Galvão Vianna / Banca: Norma Sueli Pinherio Módolo / Banca: Elenice Deffune / Banca: Eneida Maria Vieira / Banca: João Abrão / Resumo: A melatonina é um varredor de radicais livres com importantes ações no estudo da isquemia e reperfusão renal. O objetivo deste estudo é avaliar possível proteção renal de altas doses de melatonina em modelo experimental de I/R submetidos à hiperglicemia aguda em ratos anestesiados com isoflurano. Método: utilizou-se 44 ratos Wistar, machos, com peso superior a 300g, distribuídos de modo aleatório em cinco grupos, designados: sham (n=10); melatonina, (n=10, 50 mg.kg- 1);hiperglicemia (n=9, glicose 2,5 g.kg-1); hiperglicemia/melatonina (n=10, glicose 2,5 g.kg-1 + melatonina 50 mg.kg-1); isquemia e reperfusão (n=5,). Todos os grupos receberam indução da anestesia com isoflurano a 4% e a manutenção com isoflurano de 1,5 a 2,0%. A pressão arterial média (PAM) foi medida para controle da anestesia. A injeção intraperitoneal da melatonina (melatonina e hiperglicemia/melatonina) ou glicose (hiperglicemia, hiperglicemia/melatonina) ou solução salina (isquemia e reperfusão) foi feita 40 minutos antes da isquemia renal esquerda. Nos três grupos a isquemia durou 25 minutos. Todos os animais foram submetidos à nefrectomia direita. Os valores plasmáticos da creatinina e glicose foram determinados no início (M1), no (M2) imediatamente após reperfusão e 24 horas após o final do experimento (M3), quando os animais retornaram ao laboratório e foram anestesiados com isoflurano para coleta de amostra sanguínea e nefrectomia esquerda. Para análise histológica foi utilizada uma escala para avaliação da necrose tubular (0 a 5 = lesão máxima). Houve tratamento estatístico para os valores da temperatura dos animais, peso, PAM, da creatinina plasmática, glicemia e das lesões histológicas, sendo as diferenças consideradas significantes quando P < 0,05. A glicemia foi superior no M2 nos grupos que receberam suplementação de glicose, hiperglicemia (356,00 ± 107,83) e hiperglicemia/melatonina ... / Abstract: Melatonin is a free radical scavenger with important actions in the study of renal ischemia and reperfusion (I/R). This study aimed evaluate possible renal protection of high doses of melatonin in an experimental model of I/R, in which rats were submitted to acute hyperglycemia under anesthesia with isoflurane. Method: 44 male Wistar rats, weighing more than 300g, were randomly divided into five groups: sham (n=10); melatonin (n=10, 50 mg.kg-1); hyperglycemia (n=9, glucose 2.5 g.kg-1); hyperglycemia/melatonin (n=10, 2.5 g.kg-1 glucose + melatonin 50 mg.kg-1); ischemia and reperfusion (n=5). In all groups, anesthesia was induced with 4% isoflurane and maintained with 1.5 to 2.0% isoflurane. Mean arterial pressure (MAP) was measured to control anesthesia. Intraperitoneal injection of melatonin (melatonin and hyperglycemia/melatonin), glucose (hyperglycemia, hyperglycemia/melatonin) or saline (ischemia and reperfusion) was performed 40 min before left renal ischemia. In these groups, ischemia lasted 25 min. All the rats were submitted to right nephrectomy. Serum plasma values for creatinine and glucose were determined at baseline (T1), immediately following reperfusion (T2) and 24 h after completion of the experiment (T3), when the rats were returned to the laboratory and anesthetized with isoflurane to collect blood samples and for left nephrectomy. Histological analysis was performed to evaluate tubular necrosis (scale: 0 to 5 = maximal lesion). Statistical analysis was applied to the following values: temperature, weight, MAP, plasma creatinine, glucose and histological lesions. The differences were considered significant when P <0.05. Serum glucose was higher at T2 in the groups supplemented with glucose, hyperglycemia (356.00 ±107.83) and hyperglycemia/melatonin (445.3 ±148.32). Creatinine values were higher at T3 (P=0.0001) for ischemia and reperfusion (3.6 ±0.37), hyperglycemia/melatonin ... / Doutor

Orientador: Alexandrina Sartori / Banca: Maria Terezinha Serrão Peraçoli / Banca: Virmondes Rodrigues / Resumo: A necessidade de uma vacina mais segura e eficaz para a profilaxia da tuberculose (TB) e consenso na comunidade cientifica. A vacina genica contendo o gene da proteina de choque termico de 65 KDa (hsp65) do Mycobacterium leprae, e denominada pVAXhsp65, vem sendo investigada no Brasil. Esta vacina induz imunidade protetora contra a TB experimental em camundongos e cobaias. Como o gene desta vacina codifica uma proteina altamente conservada, existe a preocupacao de que a mesma induza autoimunidade. O objetivo deste trabalho foi, portanto, investigar se esta vacina modula o desenvolvimento da encefalite autoimune experimental (EAE), que e um modelo para estudo de Esclerose Multipla. Esta investigacao foi feita em tres etapas: padronizacao da EAE em ratos Lewis, caracterizacao da resposta imune induzida pela vacina pVAXhsp65 nestes animais e, finalmente, avaliacao do efeito desta vacina nas caracteristicas clinicas e imunologicas da EAE induzida nestes animais. Ratos Lewis femeas imunizados no coxim plantar com 50 Êg de mielina, associada ao Adjuvante Completo de Freund, desenvolveram doenca tipica, caracterizada por perda acentuada de peso, escore clinico elevado e alta producao de IFN-Á e TNF-¿. A imunizacao dos animais com 3 doses de pVAXhsp65 por via intramuscular nao desencadeou resposta imune humoral, entretanto, induziu resposta imune celular, caracterizada pela producao de IFN-Á por celulas esplenicas. Animais previamente vacinados desenvolveram EAE com caracteristicas clinicas e imunologicas similares as observadas em animais nao vacinados. Portanto, este trabalho permitiu padronizar de forma satisfatoria a EAE em ratos Lewis o que permitira a utilizacao deste modelo em futuras investigacoes. Alem disso, constatamos que a imunizacao destes animais com DNAhsp65 nao alterou o desenvolvimento tipico da EAE, ou seja, esta doenca nao se manifestou de forma mais grave ou branda. / Abstract: The development of an effective tuberculosis (TB) vaccine is an urgent priority. A genetic vaccine containing the heat shock protein (hsp65) gene from Mycobacterium leprae (pVAXhsp65) showed prophylactic and therapeutic activity in experimental TB. As anti-hsp65 immune response is present in both, multiple sclerosis and experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE), it is important to evaluate if pVAXhsp65 immunization affects EAE development. To test this possibility we first optimized EAE development in female Lewis rats. The best procedure included immunization in the footpad with 50 ìg of myelin associated with Complete Freund Adjuvant. This triggered a typical disease, characterized by significant weight loss, high clinical scores and elevated IFN-ã and TNF-á production. Immunization with pVAXhsp65 induced immune response characterized by absence of anti-hsp65 antibodies but significant IFN-ã production by splenic cells stimulated with recombinant rhsp65. Animals previously immunized with pVAXhsp65 developed an EAE with weight loss, clinical score and immune response very similar to non-immunized rats. This investigation allowed the optimization of a very promising model of multiple sclerosis that will benefit other research projects in our laboratory. In addition, these results showed that immunization of Lewis rats with pVAXhsp65 did not exacerbate or delay EAE development. / Mestre

Orientador: Cláudio Antônio Rabello Coelho / Banca: Cilmery S. Kurokwa / Banca: Rosangela Maria Barone / Banca: Ana Paula R. Battochio / Banca: Maria Ângela / Resumo: A colestase crônica por ligadura e ressecção do ducto biliar em ratos jovens é freqüentemente utilizada como modelo experimental de atresia biliar. Na colestase ocorre má absorção de vitamina E com resultante estresse oxidativo. Objetivos: Sendo a vitamina E-TPGS hidromiscível, e portanto absorvível mesmo na colestase, testamos os seus efeitos sobre as conseqüências nutricionais, sobre as alterações do metabolismo lipídico e sobre a lesão hepática da colestase obstrutiva crônica no modelo experimental acima. Métodos: Quarenta ratos machos da raça Wister com 21 dias de vida (P21) foram divididos em 4 grupos de 10 animais e submetidos a um dos seguintes tratamentos: 1) LA-ligadura e ressecção do ducto biliar comum e administração diária de água, por gavagem, num volume de 0,02ml por grama de peso do animal; 2) LELigadura e ressecção do ducto biliar comum e administração diária, por gavagem, de 25UI/kg num volume de 0,02ml de vitamina E-TPGS por grama de peso do animal de uma solução a 20% de vitamina E-TPGS; 3) SA-operação simulada e administração diária de água, por gavagem, num volume de 0,02ml por grama de peso do animal; 4) SE-operação simulada e administração diária, por gavagem, de 25Ul/kg num volume de 0,02ml de vitamina E-TPGS por grama de peso do animal de uma solução a 20% de vitamina E-TPGS. Durante o experimento foi determinado o ganho de peso, a quantidade de ração ingerida, o aproveitamento nutricional (P21 a P49) e balanço nitrogenado (P42 aoP49). No P48, foram submetidos ao teste do tempo de sono após pentobarbital. No P49, foram sacrificados e colhido sangue e órgãos para seguintes determinações: peso fresco, conteúdo de água e gordura da carcaça, fígado e baço, concentrações séricas de colesterol-T, triacilglicerol, LOL-colesterol, VLDL-colesterol, HDL-colesterol, albumina, globulinas totais, vitamina A e E, atividade sérica das aminotransferases (ALT e AST). / Abstract: Chronic cholestasis by bile duct ligature and resection in young rats is a commonly used experimental model of biliary atresia. Vitamin E absorption is poor in cholestasis causing oxidative stress. Objectives: As Vitamin E-TPGS dissolves in water, and is therefore absorbable even in cholestasis, we tested its effects on nutritional outcome, Iipid metabolism alterations, and hepatic lesion from chronic obstructive cholestasis in the above mode!. Methods: Forty 21-day-old male Wistar rats (P21) were divided into four groups of 10 and submitted to the following treatments: 1) LA - ligature and common bile duct resection with daily administration of water by gavage (0.02ml/g animal weight); 2) LE- ligature and common bile duct resection with daily administration of 251U/Kg Vitamin E-TPGS in water by gavage (0.02mLlg wt of 20% Vitamin E-TPGS solution); 3) SA - sham operation and daily administration of water by gavage (0.02ml/g wt); and 4) SE - sham operation and daily administration of 251U/Kg Vitamin E-TPGS in water by gavage (0.02ml/g wt of 20% Vitamin E-TPGS solution). During the experiment we measured weight gain, ingested food, diet utilization (P21 to P49), and nitrogen balance (P42 to P49). On P48, pentobarbital sleeping time was measured. On P49, eutanasia was carried out and blood and organs were collected to determine: body,liver, and spleen fresh weight, and water and fat content, serum levels of total cholesterol, triacylg Iycerols, LDL-cholesterol, VLDL -cholesterol, HOL-cholesterol, albumin, total globulins, Vitamin A & E, and ALT & AST activity. Also liver histological sections were analyzed for fibrosis intensity, duct proliferation, necrosis, steatosis, hydropic degeneration, inflammation, and mitosis frequency. The effects of cholestasis, Vitamin E-TPGS, and their interactions were tested by ANOVA with two factors, and multiple paired comparisons... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Sheila Canavese Rahal / Banca: Rogério Saad Hossne / Banca: Márcia Rita Fernandes Machado / Resumo: Embora a esofagectomia com substituição gástrica total ou por gastrotubo seja procedimento comum em pacientes humanos, há poucos relatos de sua utilização em casos clínicos na medicina veterinária, especialmente quando envolve grandes extensões que incluam o esôfago torácico. O presente trabalho avaliou, em cadáveres de cães, uma técnica para remoção do esôfago torácico sem toracotomia e dois métodos de substituição do esôfago torácico, visando o tratamento de afecções pertinentes a essa espécie. Foram utilizados 27 cadáveres de cães que vieram a óbito por causas não relacionadas ao experimento. Estes foram aleatoriamente divididos em três grupos de nove animais, em que se estudou: G1 - esofagectomia torácica total pelo método de invaginação retrógrada; G2 - esofagectomia torácica total com substituição esofágica pelo estômago inteiro; G3 - esofagectomia torácica total com substituição esofágica por um gastrotubo confeccionado de acordo com a técnica de Büchler de gastroplastia por rotação do fundo. Também foi realizada, nos grupos 2 e 3, uma piloroplastia pela técnica de Heineke-Mikulicz. Após a ressecção esofágica no grupo 1, a integridade da rota intratorácica foi avaliada por endoscopia e solução de azul de metileno a 1%. A ruptura da pleura visceral ocorreu em todos os animais, especialmente no terço caudal. Entretanto, a rota transtorácica mediastinal permitiu a elevação de ambos os substitutos esofágicos (G2 e G3) para a realização da anastomose com a extremidade caudal do esôfago cervical. A substituição por estômago inteiro apresentou menor tensão na anastomose, maior facilidade e rapidez comparada à técnica de gastroplastia por rotação do fundo. Os resultados em cadáveres suportam a realização de estudos clínicos para validação da técnica. / Abstract: Use of whole stomach or gastric tubes as substitutes for the esophagus are common procedures in human patients, but there are few clinical reports of their use in small animals, especially involving large extension of the intrathoracic esophagus. The present study evaluated in dogs, ex vivo, one technique to remove the thoracic esophagus without thoracotomy and two methods of thoracic esophageal replacement aiming for the treatment of diseases associated with this specie. Twenty-seven dogs which died or were euthanatized for reasons unrelated to this study were used. The dogs were randomly divided into three groups of nine animals each to evaluate: G1 - total thoracic esophagectomy by everting stripping method; G2 - total thoracic esophagectomy and esophageal substitution using whole stomach; G3 - total thoracic esophagectomy and esophageal substitution using fundus rotation gastroplasty according to the method of Büchler. Heineke-Mikulicz pyloroplasty was performed in both G2 and G3. After esophageal resection in G1, the integrity of the intrathoracic route was evaluated by endoscopy and test with 1% methylene blue solution. Visceral pleura rupture was observed in all animals, especially in the caudal third portion. However, this mediastinal intrathoracic route allowed that both substitutes for esophagus (G2 and G3) could be brought up to be anastomosed to the cut end of the cervical esophagus. Thoracic esophageal substitution using whole stomach showed less anastomotic tension and was less technically demanding than fundus rotation gastroplasty method. The results ex vivo support future studies to validate the techniques in clinical cases. / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:19Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2002Bitstream added on 2014-06-13T19:35:15Z : No. of bitstreams: 1 eduardo_lhpr_me_botfm.pdf: 344254 bytes, checksum: e4b1f0a9ea2897a0ef33afa14dec935c (MD5) / Na colestase crônica experimental obstrutiva em ratos, ocorre diminuição progressiva do parênquima hepático e, consequentemente, prejuízo das funções hepáticas. A absorção da vitamina lipossolúvel A, depende da presença de ácidos biliares na luz intestinal e, assim, está prejudicada na colestase. A deficiência de vitamina A prejudica as defesas antioxidantes, facilitando as lesões hepáticas intermediadas por radicais livres. Além disso, a lesão do parênquima hepático prejudica a síntese de proteínas ligadoras de retinol (R.B.P.), sua liberação para o sangue e, em consequência, a liberação de V.A. das reservas hepáticas. Nosso objetivo foi testar se a administração de vitamina A hidromiscível interfere com os efeitos da colestase sobre a estrutura e a função do fígado. Para tanto, estudamos 1) níveis séricos da V.A.; 2) mortalidade espontânea num período de 49 dias de colestase; 3) mortalidade após administração de 0,5mg de pentobarbital/g de peso do animal por via intra-peritoneal no 48o dia de colestase; 4) intensidade da fibrose e inflamação hepáticas além da proliferação ductal em 134 ratos machos da raça Wistar desmamados aos 21 dias... / In experimental chronic obstructive cholestasis there is a progressive atrophy of the hepatic parenchima and, therefore, an impairment in hepatic function. Cholestasis is frequently associated with deficiency of the fat-soluble-vitamins A,D,E,K because the intraluminal solubilization and absorption of ingested lipids requires an adequate bile flow. The hepatic dammage secondary to biliary obstruction impairs the hepatic sinthesis and delivery of retinol binding protein (RBP). In consequence, there is an impairment in the delivery of V.A. from the hepatic stores and its supply to the target tissues. Its deficiency diminishes the antioxidative potential enhancing liver dammage mediated by oxygen free radicals. Our aim was to analyse the effects of two factors: 1) cholestasis and 2) the administration of an hidromiscible V.A. and their interaction using male 21 days old Wistar rats submited to double ligature and ressection of the common bile duct or sham-operated as regards 1) the serum levels of V.A., 2) espontaneous mortality; 3) mortality after pentobarbital; 3) intensity of hepatic fibrosis, inflamation and ductal proliferation... (Complete abstract click electronic address below)