A maturação in vitro do oócito é um dos fatores limitantes na produção in vitro de embriões. In vivo, esta maturação é um processo altamente orquestrado no qual a meiose é retomada pela onda de gonadotrofina que antecede a ovulação e que induz à queda dos níveis de AMPc no oócito. No entanto, os oócitos aspirados ao serem retirados dos folículos ovarianos retomam espontaneamente a maturação comprometendo a competência de seu desenvolvimento. O AMPc é sintetizado pela adenilato ciclase (AC) e degradado pelas fosfodiesterases (PDE), existindo algumas relacionadas à degradação do AMPc e outras do GMPc. Sendo assim, a proposição deste trabalho foi averiguar a contribuição de diferentes isoformas de fosfodiesterases na retomada da meiose e nos níveis de GMPc, AMPc e ainda, determinar quando há manutenção de AMPc em níveis elevados observando sua influência na competência oocitária e ativação da MAPK. Para isso, os complexos cumulus-oócito (CCOs) foram maturados in vitro na ausência, presença ou associação de inibidores de PDEs-AMPc e GMPc específicas e FSHr. As amostras foram avaliadas em relação a: 1) taxa de maturação; 2) níveis intracelulares de AMPc e GMPc nos CCOs; 3) taxa de desenvolvimento de blastocistos ; 4) ativação da MAPK em oócitos e células do cumulus. Os resultados obtidos no primeiro experimento indiaram que o inibidor da PDE3 foi o mais eficaz (p<0,05) em atrasar a retomada da meiose, às nove horas de maturação, porém, isolado ou em associação com o inibidor da PDE8, não foi capaz de alterar (p>0,05) os níveis de AMPc. No experimento dois, o inibidor da PDE5 isolado não influenciou a retomada da meiose (p>0,05), porém, quando associado aos inibidores da PDE3 e 8 houve atraso na retomada (p<0,05) e ainda alteraram os níveis de GMPc e AMPc (p<0,05) nas primeiras horas de maturação. O experimento três mostrou a influencia do FSHr durante a MIV, o qual estimulou a retomada da meiose, mas em associação com inibidores da PDE5 e 8 atrasa a retomada (p<0,05). Além disso, o FSHr provoca aumento do nível de AMPc e sua associação com inibidores de PDE5 e PDE8 ocasionou elevação adicional (p<0,05). As condições de cultivo estudadas no experimento quatro mostraram que a maturação induzida (pré-MIV de duas horas com agentes para elevar AMPc seguindo de 22 horas de MIV com FSH associado a inibidores de PDEs) atrasaram a retomada da meiose às nove horas de maturação, mas não afetaram progressão da meiose às 24, 28 e 30 horas. Os tratamentos, porém, não melhoraram a competência oocitária após a fertilização in vitro e ocasionaram pequenas variações na ativação da MAPK em oócitos e células do cumulus. / In vitro maturation of oocytes is a limiting factor in the in vitro production of bovine embryos. In vivo, this maturation is a highly orchestrated process in which meiosis resumption by the gonadotropin surge that precedes ovulation induces the decrease in cAMP levels in the oocyte. However, when oocytes are removed from follicles, they spontaneously resume maturation compromising the competence for its development. cAMP is synthesized by adenylyl cyclase (AC) and degraded by phosphodiesterases (PDE), and there are some PDEs related to degradation of cAMP and/or cGMP. Thus, the purpose of this work was to investigate the contribution of different isoforms of phosphodiesterases in the resumption of meiosis and levels of cAMP and, also, to determine differences in signaling pathways when maintaining high levels of cAMP and its influence on oocyte competence. For this purpose, cumulus-oocyte complexes (COC) were matured in vitro in the presence, absence or combination of inhibitors of cAMP- and cGMP-specific PDEs and FSH. Samples be were evaluated in relation to: 1) maturation rate, 2) intracellular levels of cAMP and cGMP in COCs, 3) rate of blastocyst development and 4) activation of MAPK in oocytes and cumulus cells. The results of the first experiment showed that the PDE3 inhibitor is more effective (p <0.05) in delaying meiosis resumption, at nine hours of maturation, but was not capable of altering cAMP levels (p> 0.05) either alone or in combination with the PDE8 inhibitor. In experiment two, the PDE5 inhibitor alone did not affect the meiosis resumption (p> 0.05), however, when associated with PDE3 and PDE8 inhibitors it delayed their resumption (p <0.05) and also altered cGMP and cAMP levels of (p <0.05) in the early hours of maturation. The third experiments showed the influence of FSHr during IVM, which stimulated the resumption of meiosis, but in combination with PDE5 and PDE8 inhibitors meiosis was delayed (p <0.05). Furthermore, FSHr causes increased levels of cAMP and its association with PDE5 and PDE8 inhibitors caused an additional increase (p <0.05). Culture conditions studied in experiment four showed that induced maturation (pre-IVM for two hours with agents to elevate cAMP followed by 22 hours IVM with FSH associated with PDE inhibitors) delayed the resumption of meiotic maturation at nine hours, but has no effect on meiosis progression at 24, 28 and 30 hours. The treatments, however, did not improve oocyte competence after in vitro fertilization and caused minor variations in the activation of MAPK in oocytes and cumulus cells.

Raramente plantações de eucalipto respondem à adubação nitrogenada. Contudo, por se tratar de povoamentos monoespecíficos, com baixa capacidade de fixação de N, depois de algumas rotações de cultivo a probabilidade de resposta a este nutriente aumenta, devido ao esgotamento das reservas naturais de nitrogênio do solo acumuladas no ecossistema anterior. O presente estudo teve como objetivos avaliar i) o crescimento, o desenvolvimento de raízes finas de Eucalyptus grandis e de Acacia mangium em povoamentos monoespecíficos e mistos; ii) a nodulação da A. mangium nestes povoamentos. As árvores foram plantadas em maio de 2003 no espaçamento 3m x 3m. O delineamento experimental foi o de blocos completamente aleatorizados (4 blocos), sendo avaliados 3 tratamentos: povoamentos monoespecíficos de E. grandis e A. mangium e um povoamento em que essas espécies foram consorciadas (1100 plantas por ha de E. grandis e 550 árvores por ha de A. mangium). Quando consorciada, a A. mangium foi plantada no meio da distância entre as árvores de E. grandis na mesma linha de plantio. Foram amostradas raízes finas vivas (≤3 mm) em 5-16 posições (dependendo do tratamento), de uma árvore de área basal média em doze parcelas (3 tratamentos x 4 blocos), até 1 m de profundidade aos 6 e 12 meses pós-plantio e até 2 m de profundidade aos 18 e 30 meses pós-plantio, por meio de uma sonda de aço com 4,5 cm de diâmetro interno. O E. grandis foi diferente da A. mangium quanto ao desenvolvimento radicular nos diferentes períodos de amostragem, principalmente na camada superficial do solo (0-10 cm). No povoamento misto, aos 30 meses pós-plantio, o E. grandis foi 64% maior em altura do que a A. mangium e 75% maior em área basal, produzindo 94% mais biomassa do que esta leguminosa. A assimetria do crescimento radicular foi elevada entre as espécies, reflexo da grande competição por luz na parte aérea. Não houve clara estratificação de exploração das camadas do solo pelo sistema radicular das espécies. O E. grandis apresentou maior exploração radicular em todas as camadas do solo, fazendo com que o desenvolvimento radicular da A. mangium ficasse restrito a proximidade da árvore. O elevado grau de assimetria no desenvolvimento radicular entre as espécies resultou, aos 30 meses, na camada 0-10 cm, numa diferença de 91% na densidade de raízes finas (drf) entre as espécies. A nodulação foi sensível a competição com o E. grandis, aparentemente, devido à variação de umidade e temperatura sazonal. Aos 18 meses, no povoamento monoespecífico, houve tendência de maior densidade de nódulos na linha de plantio, camada 0-10 cm. Aos 30 meses os nódulos foram encontrados próximos às árvores. No misto, aos 18 e 30 meses ocorreu diminuição da densidade de nódulos na camada 10-30 cm e aumento entre 30 e 50 cm. / Eucalypts plantations rarely answer to the nitrogen fertlization. However, for being of monospecific stands, with low capacity of N fixation, after some cultivation rotations the answer probability to this nutritious one increases, due to the exhaustion of the natural reservations nitrogen of the soil accumulated in previous ecosystem. The present study had as objectives to evaluate i) the growth, the development of Eucalyptus grandis and Acacia mangium fine-root in monospecific and mixed stands; ii) the A. mangium nodulation in these stands. The trees were planted in may of 2003 in the spacing 3m x 3m. The experimental design was it of completely randomized blocks (4 blocks), between assessed 3 treatments: Monospecific stands of E. grandis and A. mangium and a stand in that those species were mixed (1100 plants for ha of E. grandis and 550 trees for ha of A. mangium). When mixed, to A. mangium was planted in the middle of the distance among the trees of E. grandis in the same plantation line. They were sampling live fine-root (≤ 3 mm) in 5-16 positions (depending on the treatment), of a tree of medium basal area in twelve portions (3 treatments x 4 blocks), until 1 m of depth to the 6 and 12 months powder-plantation and until 2 m of depth to the 18 and 30 months powder-plantation, by means of a sledgehammer with 4,5 cm of internal diameter. The E. grandis was different from the A. magium with relationship to the roots development in the different sampling periods, mainly in the superficial layer of the soil (0-10 cm). In the mixed stand, between 29 and 30 months after plantation, E. grandis was 64% larger in height than at A. mangium and 75% larger in basal area, producing 94% more biomass than this leguminous. The asymmetry of the root growth was elevated between the species, reflex of the great competition for light in the aerial part. There was not clear stratification of exploration of the layers of the soil for the roots system of the species. The E. grandis presented larger roots exploration radicular in all the layers of the soil, doing with that the roots development of the A. mangium was restricted in the proximity of the tree. The high asymmetry degree in the roots development between the species, resulted to the 30 months in the layer 0-10 cm, a difference of 91% in the density of fine roots (dfr) between the species. The nodulation was sensitive the competition with the E. grandis , seemingly, due to the humidity variation and seasonal temperature. To the 18 months, in the monospecific stands, there was tendency of larger density of nodules in the plantation line, layer 0-10 cm. To the 30 months the nodules were found close to the trees. In the mixed, to the 18 and 30 months it happened decrease of the density of nodules in the layer 10-30 cm and increase between 30 and 50 cm.

O manejo nutricional de plantios de Eucalyptus é comprovadamente importante para o aumento da produtividade e da sustentabilidade da produção madeireira. Uma das principais formas de manejo nutricional da floresta é a fertilização mineral, que demanda grandes investimentos e necessita de um planejamento adequado. O conhecimento do valor e da escala da resposta à fertilização é essencial para estudos de investimento em práticas silviculturais. O método denominado de parcelas gêmeas possibilita a determinação da resposta à fertilização numa escala regional, em um curto período de tempo. O delineamento consiste na instalação e avaliação de blocos experimentais distribuídos em diversos locais. Estes blocos são constituídos por uma parcela testemunha, que normalmente são parcelas permanentes de inventário e uma parcela fertilizada, que recebe um regime intensivo de fertilização. O método das parcelas gêmeas foi utilizado neste estudo para determinar a resposta à fertilização de plantios clonais de eucalipto, e as relações desta resposta com variáveis edafoclimáticas e silviculturais. Um total de 131 blocos de parcelas gêmeas foi instalado em uma área de 34.540 hectares de plantios clonais de Eucalyptus urophylla, no estado de São Paulo, nos municípios de Mogi Guaçu, Brotas e São Simão. Os tratamentos foram avaliados por dois períodos consecutivos de 12 meses, totalizando 24 meses de avaliação. As parcelas fertilizadas apresentaram um crescimento médio 15% superior à média das parcelas testemunha. O incremento corrente anual médio das parcelas fertilizadas, foi de 31,6 Mg ha-1 ano-1 (64,2 m3 ha-1 ano-1), enquanto que nas parcelas testemunhas foi de 27,6 Mg ha-1 ano-1 (56,1 m3 ha-1 ano-1). A diferença destes incrementos revelou uma resposta à fertilização média de 4,0 Mg ha-1 ano-1 (8,1 m3 ha-1 ano-1). Plantios em solos com maior teor de areia e menores teores de nutrientes foram os que apresentaram as maiores médias de resposta à fertilização, de 8,5 Mg ha-1 ano-1 (16,9 m3 ha-1 ano-1). Os clones responderam de forma semelhante à fertilização e a resposta dos plantios mais velhos foi significativamente maior do que de plantios mais novos (1,7 Mg ha-1 ano-1 para cada ano de idade adicional). A resposta à fertilização correlacionou-se negativamente com o índice de sítio (base 7 anos), teores de argila e silte e com a maioria das variáveis químicas do solo. As variáveis químicas relacionadas às bases do solo, como soma de bases, saturação de bases, Ca, Mg e K, foram as que mais se correlacionaram com a resposta à fertilização. A resposta à fertilização correlacionou-se positivamente com a idade, teor de areia no solo e com a deficiência hídrica. Foi possível desenvolver modelos de predição da resposta à fertilização em função de variáveis químicas e físicas do solo e variáveis silviculturais. A técnica permitiu discriminar a necessidade, ou não, de fertilização por níveis categóricos distintos, como região, fazenda, solo e talhão, baseando-se, este último, no índice de sítio. Nas condições do estudo, concluiu-se que a resposta à fertilização foi maior em solos menos férteis, não diferiu entre clones e foi maior quanto maior a idade do plantio. / Nutrition management in Eucalyptus plantations is a key issue to increase productivity and sustainability of wood production. Mineral fertilization is the main procedure for managing forest nutrition, and it demands large amounts of investments and adequate planning. The understanding of the value and extension of the fertilization response is essential to the evaluation of investments in nutrition of commercial plantations. The twin plots design enables the determination of the fertilization response in a short period of time, in a landscape scale. This method entails the establishment of many pairs of plots, with one control and one treatment plot at each location. The control plot is the normal permanent plot of the inventory network, which measures the real productivity of the forest under the traditional company management. The nearby twinplot is under intensive management (high fertilization, weed and pest controls) in order to remove, or minimize, the constraints to forest productivity. A total of 131 blocks of twin plots were established in an area of 34,540 hectares of clonal plantations of Eucalyptus urophylla, located in the state of Sao Paulo, Brazil. All plots were re-measured in two consecutive periods of 12 months, for 24 months. Fertilized plots increased growth by 15% over control plots. The mean annual biomass increment of fertilized plots was 31,6 Mg ha-1 yr-1 (64,2 m3 ha-1 ano-1), while control plots was 27,6 Mg ha-1 yr-1 (56,1 m3 ha-1 ano-1). The difference between these increments showed a mean fertilization response of 4,0 Mg ha-1 yr-1 (8,1 m3 ha-1 ano-1). Twin plots located on sandier and less fertile soils averaged higher fertilization response by 8,5 Mg ha-1 yr-1 (16,9 m3 ha-1 ano-1). Clones responded similarly to fertilization, and older stands showed higher responses than younger stands (1,7 Mg ha-1 ano-1 for each additional year). Fertilization response correlated negatively with site index (base age 7), soil clay and silt content, and with most of the chemical soil attributes. Highest correlations to response were found in soil base nutrients (sum of bases, base saturation, Ca, Mg and K), age and site index. Fertilization response correlated positively with stand age, soil sand content and water deficit. Models for the prediction of fertilization response were developed based on stand, soil chemical and physical variables. The twin-plots method allowed the discrimination of the need for fertilization in different levels, like region, farm, soil and stand (based on the site index). Conclusions in this study were that fertilization response was higher in less fertile soils, was similar between clones and is higher in older than in younger plantations.

O objetivo geral dessa tese foi compreender melhor o funcionamento das raízes finas (diâmetro <2 mm) de Eucalyptus. Mais especificamente, nosso trabalho teve como objetivo obter informações sobre as mudanças no padrão de absorção de nutriente pelas raízes finas em função da fertilização e profundidade do solo. Foi também, avaliar a dinâmica de crescimento das raízes finas em plantações mistas com uma espécie fixadora de nitrôgenio para testar a hípotese do gradiente de estresse. O capítulo 1 teve como objetivo estudar o efeito da fertilização mineral na especialização funcional das raízes finas de Eucalyptus grandis jovens em camadas profundas do solo (Itatinga-SP). Foram injetados macadores de NO3-15N, Rb+ (K+) e Sr2+ (Ca2+) simultaneamente em uma solução a 10, 50, 150 e 300 cm de profundidade. A determinação das concentrações foliares de Rb+, Sr2+ e a porcentagem de átomos de 15N permitiu estimar o potencial de absorção relativo (PAR) e o PAR específico, definido como PARE, obtido pela razão entre o PAR e a unidade de densidade do comprimento de raízes finas por camada de solo correspondente. O PAR de NO3-15N diminuiu rapidamente com a profundidade e os valores mais altos do PARE de NO3-15N foram encontrados a uma profundidade de 50 cm. O PARE de Rb+ e Sr2+ foi maior a 300 cm de profundidade em relação à camada superficial do solo, com um aumento do diâmetro da raiz e uma diminuição da densidade do tecido radicular com a profundidade. O PARE de Rb+ e Sr2+ a 300 cm de profundidade foi, em média, 88% maior para árvores fertilizadas quando comparado com as árvores não fertilizadas. Os resultados sugerem que a especialização funcional das raízes finas para a absorção de nutrientes é uma característica estável do eucalipto e que pode ser reforçada pela aplicação de fertilizantes. O capítulo 2 focou nos processos ecológicos entre Acacia mangium e Eucalyptus em um gradiente de estresse nutricional. Raízes finas foram amostradas aos 16 e 34 meses após o plantio em blocos casualisados com dois tratamentos: uma mistura com 50% de cada espécie (50A:50E) com e sem fertilização. Durante este período, dois tubos de minirhizotron, perto de eucalipto e acacia, em cada tratamento e bloco, foram utilizados para monitorar o crescimento e o tempo de vida das raízes finas. Aos 16 e 34 meses após o plantio, a DRF de Eucalyptus foi maior em relação à Acacia e maior em F+ do que em F- na camada superior do solo. Este resultado mostrou que, provavelmente, há uma maior competição das raízes de eucalipto nas raízes de acacia em F+ do que em F-. Na camada superficial, a DRF de Eucalyptus em F- foi maior aos 34 meses e perto de árvores de Acacia comparado aos eucaliptos, o que seria consistente com uma maior facilitação de N da Acacia para os Eucalyptus em ambiente com maior deficiência de N (hipótese de gradiente de estresse). A mesma concentração de N nas folhas de Eucalyptus em F + e F- também está de acordo com essa hipótese. A produção de raízes finas de eucalipto entre as duas datas de amostragem foi maior em F- que em F+ em paralelo ao aumento de DRF de eucaliptos perto das acacias. Não foi possível estimar o tempo de vida da raiz, pois não houve mortalidade radicular durante o período de estudo para ambas as espécies. Futuros estudos poderiam ser realizados para uma melhor compreensão dos mecanismos de captação de nutrientes pelas árvores visando um manejo mais sustentável das plantações florestais. / The main objective of this thesis was to better understand the functioning of Eucalyptus fine roots (diameter < 2 mm). More specifically, our work aimed at getting insights into the changes in fines roots nutrient uptake changes depending on soil depth and fertilization. Root growth dynamics was also evaluated in mixed plantations with a nitrogen fixing species to test the stress gradient hypothesis. The first chapter aimed at studying the effect of fertilization on the functional specialization of young Eucalyptus fine roots in deep soil layers (Itatinga-SP). We injected NO3-15N, Rb+ (K+) and Sr2+ (Ca2+) tracers simultaneously in a solution at 10, 50, 150 and 300 cm in depth. Determination of foliar Rb+, Sr2+ concentrations and 15N atom % made it possible to estimate the relative uptake potential (RUP), and the Specific RUP, defined as SRUP, per unit of fine root length density in the corresponding soil layer. The RUPs of NO3-15N decreased sharply with depth and the highest values of the SRUPs of NO3-15N were found at a depth of 50 cm. The SRUP of Rb+ and Sr2+ were higher at 300 cm in depth than in the topsoil with an increase in root diameter and a decrease in root tissue density with depth. The SRUP of Rb+ and Sr2+ at a depth of 300 cm was on average 88% higher for fertilized trees than for unfertilized trees. The results suggest that functional specialization of fine roots for nutrient uptake is a stable characteristic of Eucalyptus that can be enhanced by fertilization application. Chapter 2 focused on the ecological processes between Acacia mangium and Eucalyptus under a gradient of nutrient stress. Fine roots were sampled at 16 and 34 months after planting in a randomized block design with two treatments: a mixture with 50% of each species (50A:50E), with and without fertilization. For each treatment, soil samples were collected in 3 blocks at 0-15; 15-30; 30-50 and 50-100 cm at various distances of Eucalyptus and Acacia trees. During this period, two tubes of minirhizotron near eucalypt and Acacia trees in each treatment and block were used to monitoring fine roots growth and turnover. At 16 and 34 months after planting, fine root mass density (RMD) of Eucalyptus was 30% higher than of Acacia and higher in F+ than in F- in the top soil layer (0-15 cm). This result likely showed higher competition of eucalypt roots on Acacia roots in F+ than in F-. In the superficial layer, RMD of Eucalyptus in F- were higher at 34 months near Acacia trees than Eucalyptus trees, that would be consistent with greater N facilitation of Acacia on Eucalyptus in higher N-deficient environment (stress gradient hypothesis). The same N concentration in Eucalyptus leaves in both F+ and F- was also consistent with this hypothesis. Production of Eucalyptus fine roots between the two sampling dates was higher in F- than in F+ in parallel to the increase of RMD of Eucalyptus near Acacia trees. It was not possible to estimate root life span as no root mortality occurred during the study period for both species. Furthers studies should be conducted to better understand the mechanisms of tree nutrient uptake promoting a better sustainable management of forest plantations.

A integridade da cromatina espermática é fundamental para a transmissão das informações genéticas paternas, sendo que alterações de DNA podem levar a falhas no processo reprodutivo. Danos na cromatina espermática podem ocorrer por diversos motivos, sendo que os mais importantes são a apoptose, a deficiência de protamina e os danos causados pelas espécies reativas de oxigênio (EROs). Os danos de DNA espermático não impedem que o espermatozóide fecunde o oócito, entretanto podem causar perda embrionária por apoptose. A importância da integridade da cromatina espermática no desenvolvimento embrionário já foi descrita em humanos, sendo que pode ser atribuída como uma das causas de infertilidade masculina, quando está alterada. Contudo, as informações sobre a influência da integridade do DNA espermático no processo de fecundação e do desenvolvimento embrionário na espécie bovina são muito escassas. Devido à falta de informação sobre a relação da fragmentação de DNA e conseqüente alteração nos índices de desenvolvimento embrionário nessa espécie, este trabalho teve como objetivo avaliar o índice de fragmentação de DNA espermático em uma população de touros e verificar a influência dos possíveis danos de DNA espermático na produção in vitro (PIV) de embriões. Para isto, o sêmen congelado de 221 touros foi avaliado pelo ensaio de estrutura de cromatina espermática (SCSA). Após o ensaio, os animais foram divididos em seis grupos experimentais de acordo com o índice de fragmentação de DNA apresentado, sendo sete animais de cada grupo, escolhidos aleatoriamente para as avaliações espermáticas: motilidade, fragmentação de DNA espermático pelos ensaios SCSA e Cometa Alcalino e estresse oxidativo pelo ensaio de substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS). Posteriormente foi realizada a PIV de embriões, sendo avaliados os índices de clivagem e de blastocisto e realizado o ensaio de TUNEL para a avaliação da apoptose dos blastocistos produzidos. Em relação à motilidade espermática, o grupo 1 apresentou menor motilidade em relação ao grupo 4 (p<0,05). Não foi verificada diferença significativa da motilidade entre os outros grupos experimentais. O ensaio SCSA revelou que o grupo 1 apresentou menor susceptibilidade à fragmentação de DNA espermático quando comparado com o grupo 5 (p< 0,05). O grupo 2 apresentou susceptibilidade à fragmentação de DNA espermático inferior, quando comparado aos grupos 3, 4, 5 e 6 (p<0,05). Em relação ao ensaio Cometa Alcalino, a avaliação do estresse oxidativo e a PIV de embriões, não houve diferença significativa entre os grupos experimentais. Além disso, foi observada correlação negativa entre a intensidade média do Cometa e o índice de blastocisto produzido in vitro. O índice de blastocisto também apresentou correlação negativa com a intensidade média da cabeça do Cometa e ao ensaio TBARS. O ensaio TBARS apresentou correlação negativa com o índice de clivagem dos embriões PIV. Por outro lado, o ensaio TBARS apresentou correlação positiva com os ensaios SCSA e TUNEL. Considerando as condições experimentais, a fragmentação de DNA espermático não influenciou a PIV de embriões bovinos. / Sperm chromatin integrity is essential for the transmission of paternal genetic information. Changes in sperm DNA can lead to failures in the reproductive process. Loss of chromatin integrity may occur for several reasons, and the most important are apoptosis, protamine deficiency and damages caused by reactive oxygen species (ROS). The sperm DNA damage does not prevent the sperm to fertilize the oocyte, however it can cause embryonic loss by apoptosis. The importance of sperm chromatin integrity in embryonic development has been described in humans, and can be considered a cause of male infertility when it is disrupted. However, information on the influence of sperm DNA integrity in the process of fertilization and embryonic development in cattle are very scarce. Due to the lack of information on the relationship between DNA fragmentation and its consequence on embryonic development rates in this species, this study aimed to evaluate the sperm DNA fragmentation rate in a population of bulls and the influence of possible sperm DNA damage on in vitro production (IVP). For this, frozen semen from 221 bulls was evaluated by sperm chromatin structure assay (SCSA). After that, animals were divided into six groups, according to the DNA fragmentation rate observed. Then seven animals from each group were randomly chosen for sperm evaluation: motility, sperm DNA fragmentation by the SCSA and Alkaline Comet assay and oxidative stress by tiobarbituric acid reactive substances (TBARS). After sperm evaluations embryo IVP was performed. Cleavage and blastocyst rates were assessed and the obtained blastocysts were submitted to TUNEL assay for apoptosis evaluation. Regarding sperm motility, group 1 had lower motility compared to group 4 (p <0.05). There was no significant difference in motility between the other experimental groups. The SCSA revealed that group 1 showed lower susceptibility to sperm DNA fragmentation when compared to group 5 (p <0.05). Group 2 was less susceptible to sperm DNA fragmentation, when compared to groups 3, 4, 5 and 6 (p <0.05). For the alkaline comet assay, the assessment of oxidative stress and embryo IVP, no significant difference was shown between en experimental groups. Moreover, there was a negative correlation between the comet mean intensity and the blastocyst rate. The blastocyst rate also negatively correlated to the comet head mean intensity and TBARS. The TBARS was negatively correlated to cleavage rate. In addition, TBARS correlated positively to TUNEL assay and SCSA. Considering the experimental conditions, the sperm DNA fragmentation did not influence the IVP of bovine embryos.

Submitted by Rosangela Silva (rosangela.silva3@unioeste.br) on 2018-06-26T13:59:01Z No. of bitstreams: 2 Lucas_Silveira.pdf: 916507 bytes, checksum: 4f0f4aa41ac181adefa73656e34ad78e (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-06-26T13:59:01Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Lucas_Silveira.pdf: 916507 bytes, checksum: 4f0f4aa41ac181adefa73656e34ad78e (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2018-02-23 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The beneficial effects to the soil, when using cover crops, are numerous, such as nutrient cycling, nitrogen fixation, pest and disease cycle breakdown, soil structuring and dry matter addition. This makes the subsequent crop better able to express its productive potential. The macronutrient nitrogen is a key element for any plant, especially in the early stages of crop development. The objective of the present work was to evaluate the effect of forage pea (Pisum sativum L.) and black oats (Avena strigosa) and nitrogen rates on soybean yield. Two soil physical properties were evaluated: soil density, total porosity, microporosity and macroporosity, and in the soybean crop were evaluated the production components: height, mass of one hundred grains and grain yield of the soil. soybean (Glycine max). The experiments were conducted in the experimental area of the Agronomic Institute of Paraná - IAPAR, regional pole of Santa Tereza do Oeste. The soil of the region is classified as a Typical Dystrophic Red Latosol. The experimental design was a randomized complete block design with five replications. The plots consisted of winter cover crops, forage peas and black oats, and the subplots of nitrogen doses: 0, 25, 50, 75 and 100 kg ha-1 applied in a hedge without incorporation using the urea, at 20 days after emergence, when the plants were in stage V3. The area of each experimental unit consisted of nine soybean lines per 5.1 m length, spacing 0.45 m between them. The data were submitted to analysis of variance, in which, for the quantitative factors, the regression analysis was performed and, for the qualitative characteristics, the Tukey test (p <0.05) was performed. By the addition of mineral nitrogen in the soil, it was observed that there was no gain of production in the soybean crop, with this it can be said that in well structured Latosols and with high fertility, only the nitrogen present in the organic matter of the soil is sufficient for supply the demand for this element by the soybean crop. / Os efeitos benéficos ao solo, quando se utiliza plantas de cobertura, são inúmeros, como ciclagem de nutrientes, fixação de nitrogênio, quebra do ciclo de pragas e doenças, estruturação do solo e adição de matéria seca. Isso faz com que a cultura subsequente tenha melhores condições para expressar seu potencial produtivo. O macronutriente nitrogênio é um elemento fundamental para qualquer vegetal, especialmente nas fases iniciais de desenvolvimento das culturas. Com isso o objetivo do presente trabalho foi avaliar o efeito das espécies de cobertura ervilha forrageira (Pisum sativum L.) e aveia preta (Avena strigosa) e doses de nitrogênio no rendimento de grãos da soja. Foram realizados dois experimentos , nos mesmos foram avaliados os atributos físicos do solo: densidade do solo, porosidade total, micropososidade e macroporosidade e, na cultura da soja foram avaliados os componentes de produção: altura, massa de cem grãos e o rendimento de grãos da cultura da soja (Glycine max). Os experimentos foram conduzidos na área experimental do Instituto Agronômico do Paraná - IAPAR, polo regional de Santa Tereza do Oeste. O solo da região é classificado como Latossolo Vermelho Distróferrico típico. O delineamento experimental empregado foi o de blocos ao acaso, em esquema de parcelas subdividas, com cinco repetições. As parcelas foram constituídas pelas plantas de cobertura de inverno, ervilha forrageira e aveia preta e as sub-parcelas de doses de nitrogênio: 0, 25, 50, 75 e 100 kg ha-1 aplicadas em cobertura a lanço, sem a incorporação, utilizando a ureia, aos 20 dias após a emergência, quando as plantas estavam em estágio V3. A área de cada unidade experimental constou de nove linhas de soja por 5,1 m de comprimento, com espaçamento de 0,45 m entre elas. Os dados obtidos foram submetidos a análise de variância, em que, para os fatores de natureza quantitativa, realizou-se a análise de regressão e, para as características de caráter qualitativo, foi realizado o teste de Tukey (p < 0,05). Através da adição mineral do nitrogênio no solo, observou-se que não houve ganho de produção na cultura da soja, com isso pode se dizer que em Latossolos bem estruturados e com alta fertilidade, apenas o nitrogênio presente na matéria orgânica do solo é suficiente para suprir a demanda deste elemento pela cultura da soja.

Made available in DSpace on 2017-07-10T17:48:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Jaqueline_Rocha_Wobeto.pdf: 1558245 bytes, checksum: b2858def704d3e14d14769f18823fe67 (MD5) Previous issue date: 2014-12-10 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The present work with aimed evaluate the chemical composition and population of microorganisms in swine wastewater (ARS) in the affluent, effluent storage pond, soil, leaf litter and plant. On a producing property hay and haylage, grass Tifton 85 fertilized with swine wastewater. The chemical composition of swine wastewater is distinct in the influent, effluent storage pond, shoot and leaf litter, and in November compared to June. The application of swine wastewater interfere in soil chemical properties, except the CTC which was higher at a depth of 0-20 cm, as well as high in micronutrients Cu, Zn and Mn in soil and shoot forage, especially in November. Despite the diversity of the microbial composition of swine wastewater use does not compromise the health quality of forage. The cutting height of Tifton 85 hay to 4 cm has a higher population of bacteria compared to cutting height to 8 cm, especially at 60, 90 days after storage, except Bacillus which was higher at 0, 30 and 60 days. The most frequent fungal genus in Tifton hay production area 85 fertilized with swine wastewater is Penicillium. After 90 days of storage, the population of yeasts and fungi are reduced / O presente trabalho teve como objetivos avaliar a composição química e população de micro-organismos na água residuária da suinocultura (ARS) no afluente, efluente, lagoa de armazenamento, solo, serrapilheira e planta. Também avaliou-se o perfil microbiológico e composição química do feno de capim-tifton 85 sob duas alturas de corte do nível do solo, 4cm e 8 cm, durante 120 dias de armazenamento em galpão fechado, em uma propriedade produtora de feno e pré-secado, em área adubada com água residuária da suinocultura. A composição química da água residuária da suinocultura é distinta no afluente, efluente, lagoa de armazenamento, parte aérea e serrapilheira, bem como nos meses de novembro em relação a junho. A aplicação da água residuária da suinocultura na interfere nos atributos químicos do solo, exceto a CTC que foi maior na profundidade de 0-20 cm, bem como em elevação nos teores de micronutrientes Cu, Zn e Mn no solo e na parte aérea da forrageira, especialmente no mês de novembro. Apesar da diversidade da composição microbiológica da água residuária da suinocultura seu uso não compromete a qualidade sanitária da forragem. A altura de corte do feno de capim-tifton 85 a 4 cm apresenta maior população de bactérias comparado a altura de corte a 8 cm, notadamente aos 60, 90 dias após o armazenamento, exceto a Bacillus que foi maior nos tempos 0, 30 e 60 dias. O gênero de fungo de maior ocorrência numa área de produção de feno de capim-tifton 85 adubada com água residuária da suinocultura é o gênero Penicillium. Após 90 dias de armazenamento as populações de leveduras e de fungos diminuem

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O girassol (Helianthus annuus L.) por apresentar características agronômicas importantes, como elevado teor de óleo de ótima qualidade, baixa exigência hídrica e ter a possibilidade de ser cultivado em diferentes épocas do ano, pode tornar-se uma importante opção de cultivo. A cultura ainda é considerada como secundária nos sistemas produtivos brasileiros e faltam pesquisas, principalmente sobre o manejo da fertilidade. Neste sentido, dois experimentos foram conduzidos no Centro de Ciências Agrárias da Universidade Federal de Roraima, localizado no município de Boa Vista RR, nos anos de 2007 e 2008. O delineamento utilizado foi o de blocos casualizados em esquema fatorial, com quatro repetições. Objetivou-se no primeiro experimento avaliar os componentes de produção de três cultivares de girassol (Agrobel 960, Agrobel 962 e Embrapa 122/V2000), submetidas a quatro formas de aplicação do nitrogênio. Objetivou-se, no segundo experimento, estudar os componentes de produção de três cultivares de girassol submetidas a diferentes doses de cobertura de potássio. Os tratamentos consistiram da combinação de três variedades (Agrobel 960, Agrobel 967 e Embrapa 122/V2000) e cinco doses de cobertura de potássio (0; 30; 60; 90 e 120 kg ha-1) / Sunflower (Helianthus annuus L.), due it presents important agronomical characteristics such as high oil content, low water requirement and due the possibility of being cultivated in different times of the year, can become an important crop option for the production. The culture is still regarded as secondary in by brazilian productives system and it lacks more research, mainly on fertility management. To this end, two experiments were conducted in the Center of Agricultural Sciences of Universidade Federal de Roraima, located in Boa Vista RR in 2007 and 2008. The approach used in the work was the delineation of randomized blocks in factorial scheme with four replicates. The first experiment aimed at evaluating the production components of three cultivars of sunflower (Agrobel 960, Agrobel 962 and Embrapa 122/V2000), submitted to four forms of nitrogen application. The aim of the second experiment was to study production components of three cultivars of sunflower submitted to different rates of potassium side dressing. The treatments consisted of a combination of three varieties (Agrobel 960, Agrobel 967 and Embrapa 122/V2000) and five doses of potassium sidedressing (0; 30; 60; 90 and 120 kg ha-1)

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Dois experimentos foram realizados com o abacaxizeiro. Um experimento, em fase de aclimatização, avaliou o desempenho de cultivares de abacaxizeiro e o efeito de substratos com diferentes proporções e fontes de material orgânico em sua composição. O outro experimento, em fase de campo, estudou o efeito da adubação potássica e lâminas de irrigação sobre o crescimento vegetativo e nutrição mineral do abacaxizeiro Vitória&#8223;, em diferentes épocas de amostragem. Na produção de mudas, avaliou-se o desempenho vegetativo de cultivares de abacaxizeiro e a eficiência de substratos de natureza orgânica, aos 210 dias de aclimatização. O delineamento experimental foi em blocos inteiramente casualizados, disposto em esquema fatorial 3×5, sendo três cultivares de abacaxizeiro (Pérola, Vitória e Imperial) e cinco substratos [ORG: Organoamazon, composto orgânico comercial; SP: Substrato Padrão, composto por solo + areia, na proporção 1:1 (v/v); SP+E+C: composto por SP + esterco de carneiro + casca de arroz carbonizada (2:1:1 v/v); SP+E: composto por SP + E (3:1 v/v); SP+C: composto por SP + C (3:1v/v)]. Baseado na produção de massa seca das plantas e considerando o substrato de melhor desempenho, houve superioridade da cultivar Pérola em relação a Vitória&#8223;e ambas foram superiores a Imperial&#8223;. O ORG proporcionou a parte aérea das plantas, incrementos superiores a 260% e incrementos superiores a 115% para densidade de raízes, em relação ao grupo de substratos com solo. No experimento de campo, o delineamento experimental foi em blocos inteiramente casualizados, arranjados em parcelas sub-subdivididas. As parcelas corresponderam às doses de potássio (0, 10, 20 e 30 g de K2O planta-1), as subparcelas corresponderam às lâminas de irrigação (L1 = 134,9; L2 = 267,5; L3 = 446,8; L4 = 558,3; e L5 = 655,2 mm), enaquanto as sub-subparcelas foram compostas pelos períodos de amostragem (120, 195, 270 e 345 dias após o plantio DAP). Os efeitos das doses de K2O (K) e das lâminas de irrigação (L) independeram entre si, mas dependeram das épocas de amostragem (E) para as variáveis: número de folhas (NF), o diâmetro do caule (DC), a altura de planta (AP) e a massa seca de raízes (MSR). Já, em relação à área foliar (AF) e massa fresca (MF) e seca (MS) das folhas houve interação significativa entre K×L×E. Baseado no desenvolvimento vegetativo das plantas, a área foliar (11.133 cm2) e a massa fresca (1.450 g planta-1) e seca das folhas (180 g planta-1), recomenda-se para o cultivo do abacaxizeiro Vitória&#8223; em Latossolo Amarelo nas savanas, dose de 16,9 g planta-1 de K2O e 8 suplementação hídrica de 558,7 mm, via irrigação por aspersão convencional. Os teores foliares de K e P não sofreram alterações com as doses de K2O, mas houve redução significativa na lâmina de irrigação correspondente a 134,9 mm. Os teores foliares de N responderam a aplicação de K2O no solo, de forma quadrática, aos 120 DAP, mas apresentaram redução linear a partir de 270 DAP. A irrigação L5 reduziu os teores foliares de N. Os teores foliares de Ca e Mg foram reduzidos significativamente com as doses de K2O, aos 345 DAP. As extrações de nutrientes pela planta foram afetadas pela interação K×L×E, acompanhando o aporte de biomassa da parte aérea e a idade fisiológica da planta.

Made available in DSpace on 2016-08-17T17:11:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao-AntonioLimaSilva.pdf: 452701 bytes, checksum: f2dacdc2f75e386db4ff4fff5998894e (MD5) Previous issue date: 2016-04-06 / The objective of this study was to evaluate the production potential of the morphogenetic and structural characteristics of grass Andropogon subjected to heights of cuts and increasing levels of nitrogen. The total area used in the experiment was 480 m2 and divided into plots with 9 m² dimensions. The experimental design was completely randomized in a factorial arrangement of 6 x 2 (six doses of nitrogen and two heights of cuts), with twelve treatments and four replicates per treatment, totaling 48 experimental units. The six treatments were combinations nitrogen levels: 0, 100, 200, 300, 400 and 500 kg / ha and two cutting heights 15 and 30 cm. The sections were due to the light interception (LI), where the plots of IL reached 95%. The total forage production (PTF) was influenced (P <0.05) by time interaction and nitrogen levels during the rainy and dry season, the two heights measured cuts, nitrogen doses (200 and 300 kg), provided greater PTF and living tillers (PV). The dose of 200 kg of N showed higher yield sheets (PF) in two heights cuts evaluated with 18,195 kg / h (15 cm) and 17.300kg / ha (30 cm) respectively. The relationship thatched leaf (F / C) was negatively affected by the increase of N, in two heights cuts and periods. The higher N rates showed higher stem productions (PC), dead tillers (PM) and dead material (MM). There was no significant difference (P> 0.05) in plant height at the cut (H) cutting height of 30 cm, since the height of 15 cm in not including nitrogen treatments had lower value in both evaluation periods . There was no effect (P> 0.05) of the waste time on morphogenetic characteristics. In many plants died dry period, thus no growth flux during this period. The N influenced (P <0.05) Phyllochron, leaves the life duration (DVF) and final length of leaf blade (CF). The variables, number of live leaves per tiller (NFV) and number of live tillers (NPV) did not differ (P> 0.05) and the heights of N cuts and doses evaluated. In this sense the grass Andropogon should be managed under lower light interception 95%, and in the heights of 15 cm residue and nitrogen fertilization of 200 kg N / ha, thus expressing its best productive, morphogenetic and structural characteristics. / Objetivou-se com o presente trabalho avaliar o potencial de produção, as características morfogênicas e estruturais do capim-Andropógon submetido a alturas de cortes e doses crescentes de nitrogênio. A área total utilizada no experimento foi 480 m2, sendo dividida em parcelas com dimensões de 9 m². O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, com arranjo fatorial 6 x 2 (seis doses de nitrogênio e duas alturas de cortes), com doze tratamentos e quatro repetições por tratamento, totalizando 48 unidades experimentais. Os tratamentos foram combinações de seis doses de nitrogênio: 0, 100, 200, 300, 400 e 500 kg/ha e duas alturas de corte: 15 e 30 cm. Os cortes foram em função da interceptação luminosa (IL), quando as parcelas atingiram 95% de IL. A produção total de forragem (PTF) foi influenciada (P<0,05) pela interação altura e doses de nitrogênio durante o período chuvoso e seco, nas duas alturas de cortes avaliadas, as doses de nitrogênio (200 e 300 kg), proporcionaram maior PTF e perfilhos vivos (PV). A dose de 200 Kg de N apresentou maior produção de folhas (PF) nas duas alturas de cortes avaliadas com 18.195 kg/ha (15 cm) e 17.300kg/ha (30 cm) respectivamente. A relação folha colmo (F/C) foi afetada negativamente pelo aumento de N, nas duas alturas de cortes e nos períodos avaliados. As doses de N mais elevadas apresentaram maiores produções de colmo (PC), perfilhos mortos (PM) e material morto (MM). Não houve diferença significativa (P>0,05) na altura das plantas no momento do corte (H) para altura de corte de 30 cm, já a altura de 15 cm nos tratamentos sem inclusão de nitrogênio apresentaram menor valor nos dois períodos de avaliação. Não houve efeito (P>0,05) da altura de resíduo sobre as características morfogênicas. No período seco muitas plantas morreram, dessa forma, não houve fluxo de crescimento neste período. As doses de N influenciaram (P<0,05) o filocrono, duração de vida das folhas (DVF) e comprimento final da lâmina foliar (CF). As variáveis, número de folhas vivas por perfilho (NFV) e número de perfilhos vivos (NPV), não diferiram (P>0,05) nas doses de N avaliadas. Nesse sentido o capim-Andropogon deve ser manejado sob interceptação luminosa menor que 95%, e nas alturas de 15 cm de resíduo e com adubação nitrogenada de 200 Kg N/ha, expressando desta forma suas melhores características produtivas, morfogênicas e estruturais.