O gênero Erythroxylum P. Browne pertence a família Erythroxylaceae Kunth e é principalmente conhecido devido as espécies E. coca e E. novogranatense, as “plantas da coca”. O gênero é a única fonte natural da cocaína e de outros alcaloides com núcleo ecgonina, principais responsáveis pelos efeitos tóxicos e biológicos originados pelo consumo de suas espécies. A presença da cocaína é amplamente aceita para as plantas de coca, porém a sua biossíntese por outras espécies apresenta divergência, o que pode estar relacionada ao período de coleta. Além destas particularidades fitoquímicas, as espécies do gênero também apresentam importantes atividades como antioxidante e antimicrobiana, além de toxicidade a humanos e a ovinos. O Brasil é o centro da diversidade e do endemismo do gênero e no sul do país, nos estados do Rio Grande do Sul e de Santa Catarina, as carcaterísticas fitoquímicas e potencialidades tóxicas e farmacológicas das espécies apresentam um campo aberto para estudos. Desta forma, foram avaliadas características fitoquímicas e potencialidades tóxicas e farmacológicas de espécies nativas dos estados do Rio Grande do Sul e de Santa Catarina, coletadas em dois períodos climáticos distintos, verão e inverno, além de revisão bibliográfica sobre as espécies produtoras de cocaína e as implicações segundo a legislação brasileira vigente. Foram utilizadas metodologia de planária, disco-difusão em ágar, microdiluição em caldo, medida da extinção da absorção do cátion 2,2-difenil-1-picrilhidrazil e procedimentos preconizados pelas Nações Unidas para a investigação fitoquímica de espécies produtoras de cocaína. Foi verificado que 24 espécies apresentam o aparato enzimático para a produção da cocaína. Embora E. novogranatense origina rendimentos apropriados ao tráfico, segundo a legislação Brasileira vigente, apenas E. coca encontra-se proscrita, o que torna necessário a inclusão de E. novogranatense na lista de plantas proscritas. Para o estudo toxicológico desenvolvido com E. deciduum sobre modelo de planária, foi necessário adaptar a metodologia existente. O extrato da espécie ocasionou aumento significativo da velocidade de locomoção (p= 0.016) e comportamentos estereotipados padronizados de posição tipo C e hipercinesia tipo parafuso, eventos característicos da neurotransmissão dopaminérgica em planárias. Os resultados, além de ampliar as possibilidades do uso destes vermes na busca por extratos ativos, demonstram que E. deciduum biossintetiza metabólitos ativos sobre este neurotransmissor, os quais podem estar relacionados com os efeitos ocasionados pelo consumo da espécie vegetal. A influência do período de coleta sobre as potencialidades farmacológicas e as características fitoquímicas foi investigada e os resultados demonstram esta infuência. Diferentes extratos de E. argentinum e E. deciduum, coletadas durante o verão, apresentaram atividade antimicrobiana superiores a verificada para os extratos obtidos de coletas realizadas no inverno. O extrato etanólico de E. argentinum, coleta verão, pode ser considerado um verdadeiro antimicrobiano, MIC= 0,78mg/ mL, e desta forma torna-se uma fonte promissora para a descoberta de novas moléculas antimicrobianas. Os extratos das espécies E. argentinum e E. deciduum demonstram pertinentes resultados sobre a atividade antioxidante. A influência do período de coleta, verão/ inverno, sobre a atividade foi identificada. A influência do período de coleta sobre as atividades tóxico-farmacológicas é corroborada pelo perfil alcaloídico obtido de noves espécies do gênero, coletadas durante o verão e o inverno, nos estados do Rio Grande do Sul e de Santa Catarina. O perfil alcaloídico das espécies E. amplifolium, E. argentinum, E. cuneifolium, E. cuspidifolium, E. deciduum, E. microphyllum, E. myrsinites, E. pelleterianum e E. vacciniifolium demonstra a presença dos alcaloides: éster de metecgonidina, éster de metilecgonina, cuscohigrina e tropacocaína e dos intermediários da biossíntese: higrina, tropinona e tropanol. A identificação dos metabólitos éster de metilecgonina e éster de metilecgonidina também demonstra que as espécies do gênero Erythroxylum presentes no Sul do Brasil apresentam potencialidade econômicas, pois podem ser empregadas na produção de padrões toxicológicos. Os objetivos propostos foram cumpridos e permitem concluir que espécies do gênero Erythroxylum dos estados do Rio Grande do Sul e de Santa Catarina, Sul do Brasil, demonstram importância tóxica, farmacológica e química, sendo parte destas influenciada pelo período de coleta, verão/ inverno. / “Chemical and Biological Study of Erythroxylum P. Browne Species Collected in Southern Brazil”. Erythroxylum P. Browne genus belongs to the Erythroxylaceae Kunth family and is mainly known due to E. coca and E. novogranatense species, the "coca plants". The genus is the only natural source of cocaine and other alkaloids with ecgonine nucleus, mainly responsible for the toxic and biological effects caused by the consumption of their species. The presence of cocaine is widely accepted for coca plants, but its biosynthesis by other species shows divergence, which may be related to the collect period. Besides these phytochemical peculiarities, the species of the genus also present important activities such as antioxidant and antimicrobial, besides toxicity to humans and sheep. Brazil is the center of diversity and endemism of the genus and in the south of the country, in the states of Rio Grande do Sul and Santa Catarina, the phytochemical characteristics, toxic and pharmacological potentials of the species present an open field for studies. Thus, phytochemical characteristics, toxic and pharmacological potentials of native species of the states of Rio Grande do Sul and Santa Catarina were assessed, collected in two distinct climatic periods, summer and winter, as well as a bibliographical review on cocaine producing species and implications under current Brazilian law. Some methodologies were used such as planaria, disc-diffusion in agar, microdilution in broth, extinction measurement of the absorption of cation 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl and procedures recommended by the United Nations for the phytochemical investigation of cocaine producing species. It was verified that twenty-four species present the enzymatic apparatus for the production of cocaine. Although E. novogranatense originate income appropriate to traffic according to current Brazilian legislation, only E. coca is outlawed, which makes it necessary to include E. novogranatense in the list of proscribed plants. For the toxicological study developed with E. deciduum on planaria model, it was necessary to adapt the existing methodology. The extract of the species caused a significant increase in locomotion velocity (p= 0.016) and standardized stereotyped behaviors of type C position and screw- type hyperkinesia, characteristic events of dopaminergic neurotransmission in planarians. The results, besides expanding the possibilities of the use of these worms in search for active extracts, demonstrate that E. deciduum biosynthesizes active metabolites on this neurotransmitter, which may be related to the effects caused by the consumption of the plant species. The influence of the collect period on pharmacological potentials and phytochemical characteristics was investigated and the results demonstrate this influence. Different extracts of E. argentinum and E. deciduum collected during summer showed higher antimicrobial activity than the extracts obtained from winter collect. The ethanolic extract of E. argentinum, summer collect, may be considered a true antimicrobial, MIC= 0.78mg/ mL, on Staphylococcus aureus, and in this way it becomes a promising source for the discovery of new antimicrobial molecules. The extracts of E. argentinum and E. deciduum species demonstrate relevant results on antioxidant activity. The influence of the collecting period, summer/ winter, on the activity was verified. The influence of collect period on toxic- pharmacological activities is corroborated by the alkaloid profile obtained from nine species of the genus, collected during summer and winter in the states of Rio Grande do Sul and Santa Catarina. The alkaloid profile of E. amplifolium, E. argentinum, E. cuneifolium, E. cuspidifolium, E. deciduum, E. microphyllum, E. myrsinites, E. pelleterianum and E. vacciniifolium species shows the presence of alkaloids: ecgonidine methyl ester, ecgonine methyl ester, cuscohygrine and tropacocaine and the biosynthesis intermediates: hygrine, tropinone and tropanol. The identification of the ecgonine methyl ester and ecgonidine methyl ester also shows that Erythroxylum genus species present in southern Brazil have economic potential because they can be used in the production of toxicological standards. The aims were met and allow the conclusion that Erythroxylum genus of Rio Grande do Sul and Santa Catarina states, south of Brazil, show toxic, pharmacological and chemical importance, part of these being influenced by the collect period, summer/ winter.

Gunnera é um gênero de angiosperma pertencente à família Gunneraceae. O gênero possui aproximadamente 45 espécies, dentre essas G. perpensa L. tem sido utilizada na África, apresentando efeitos relacionados ao ciclo reprodutivo, provavelmente devido ao (Z)-venusol. Decocções dessa planta são utilizadas no tratamento de doenças infecciosas devido à atividade antibacteriana e à antifúngica. O gênero Gunnera é capaz de formar uma complexa associação com a cianobactéria Nostoc puctiforme L. ocorrendo a formação da neurotoxina -Nmetilamino- L-alanina (BMAA) a qual é associada ao aparecimento de um complexo de esclerose/Parkinson/demência. No Rio Grande do Sul, encontra-se a espécie G. manicata L., da qual não constam, na literatura científica, estudos fitoquímicos, farmacológicos e toxicológicos, apesar de ser apreciada ornamentalmente. Tendo em vista esses dados, o presente projeto avaliou o perfil tóxico-farmacológico e fitoquímico de G. manicata. Para os ensaios de toxicidade oral aguda e uterotrófico foi utilizado extrato aquoso de raízes e para as atividades antimicrobiana (disco difusão) e antioxidante (reação com 2,2 difenil-1-picril-hidrazil - DPPH•), bem como para o perfil fitoquímico, foram utilizados extratos metanólicos e aquosos de raízes e folhas. Não foram observados sinais de toxicidade oral aguda, nem atividade sob o sistema reprodutor de ratas. O potencial antimicrobiano resultou em atividade frente à Bacillus subtilis, Staphylococus aureus, Streptococcus pyogenes e Candida albicans. A capacidade antioxidante apresentou boa a moderada atividade. Na análise fitoquímica por cromatografia gasosa acoplada a detector de massa (CGEM) e cromatografia líquida associada à espectrometria de massas em tandem (CLEM/ EM) não foram detectados BMAA nem (Z)-venusol. Entretanto, foram identificados ácido gálico e hiperosídeo. Os extratos avaliados demonstraram alto teor de compostos fenólicos totais, apesar da baixa concentração de flavonóides totais. Sendo assim, os resultados obtidos neste trabalho geram perspectivas para novos estudos, tendo em vista à ausência de sinais de toxicidade, o potencial biológico apresentado, a falta de informações sobre G. manicata na literatura científica e a prospecção de espécies bioativas. / The genus Gunnera is a flowering plant belonging to the Gunneraceae family. The genus has about 45 species, among these G. Perpensa which has been used in Africa. It has effects related to the reproductive cycle, probably due to the (Z)- venusol. Decoctions of this plant are used in the treatment of infectious diseases due to antibacterial and antifungal activities. The genus Gunnera forms a complex association with the cyanobacterium Nostoc puctiforme L. resulting in the formation of the neurotoxin -N-methylamino-L-alanine (BMAA), which is associated with the development of a complex sclerosis / Parkinson / dementia. In Southern Brazil is found the specie Gunnera manicata L. on which scientific data about phytochemical, pharmacological and toxicological studies are lacking, despite of being assessed as ornamental plant. So, were investigated the toxico-pharmacological and phytochemical profile of G. manicata. In the oral acute toxicity and in the uterotrophic assays aqueous roots extracts were used. To antimicrobial and antioxidant (2,2- diphenyl-1-picryhydrazyl – DPPH - radical test) activities as well as phytochemical profile, methanol and aqueous extracts of roots and leaves were used. Was not observed neither sings of oral acute toxicity nor activity on the female reproductive system of rats. The antimicrobial potential showed activity against Bacillus subtilis, Staphylococus aureus, Streptococcus pyogenes and Candida albicans. Antioxidant capacity presented good to moderate activity. The phytochemical profile analysis was performed by gas chromatography coupled with mass spectrometer (GC-MS) and liquid chromatography coupled with tandem mass spectrometer (LC-MS/MS). BMAA and (Z)-venusol were not found and the samples presented gallic acid and hyperoside. The evaluated extracts showed a high content of total phenolic compounds despite of the low contends of total flavonoids. So, the results obtained in this work open prospects for new studies in view of the absence of signs of toxicity, the biological potential presented, the lack of information about G. manicata the scientific literature and the search for bioactive species.

Gunnera é um gênero de angiosperma pertencente à família Gunneraceae. O gênero possui aproximadamente 45 espécies, dentre essas G. perpensa L. tem sido utilizada na África, apresentando efeitos relacionados ao ciclo reprodutivo, provavelmente devido ao (Z)-venusol. Decocções dessa planta são utilizadas no tratamento de doenças infecciosas devido à atividade antibacteriana e à antifúngica. O gênero Gunnera é capaz de formar uma complexa associação com a cianobactéria Nostoc puctiforme L. ocorrendo a formação da neurotoxina -Nmetilamino- L-alanina (BMAA) a qual é associada ao aparecimento de um complexo de esclerose/Parkinson/demência. No Rio Grande do Sul, encontra-se a espécie G. manicata L., da qual não constam, na literatura científica, estudos fitoquímicos, farmacológicos e toxicológicos, apesar de ser apreciada ornamentalmente. Tendo em vista esses dados, o presente projeto avaliou o perfil tóxico-farmacológico e fitoquímico de G. manicata. Para os ensaios de toxicidade oral aguda e uterotrófico foi utilizado extrato aquoso de raízes e para as atividades antimicrobiana (disco difusão) e antioxidante (reação com 2,2 difenil-1-picril-hidrazil - DPPH•), bem como para o perfil fitoquímico, foram utilizados extratos metanólicos e aquosos de raízes e folhas. Não foram observados sinais de toxicidade oral aguda, nem atividade sob o sistema reprodutor de ratas. O potencial antimicrobiano resultou em atividade frente à Bacillus subtilis, Staphylococus aureus, Streptococcus pyogenes e Candida albicans. A capacidade antioxidante apresentou boa a moderada atividade. Na análise fitoquímica por cromatografia gasosa acoplada a detector de massa (CGEM) e cromatografia líquida associada à espectrometria de massas em tandem (CLEM/ EM) não foram detectados BMAA nem (Z)-venusol. Entretanto, foram identificados ácido gálico e hiperosídeo. Os extratos avaliados demonstraram alto teor de compostos fenólicos totais, apesar da baixa concentração de flavonóides totais. Sendo assim, os resultados obtidos neste trabalho geram perspectivas para novos estudos, tendo em vista à ausência de sinais de toxicidade, o potencial biológico apresentado, a falta de informações sobre G. manicata na literatura científica e a prospecção de espécies bioativas. / The genus Gunnera is a flowering plant belonging to the Gunneraceae family. The genus has about 45 species, among these G. Perpensa which has been used in Africa. It has effects related to the reproductive cycle, probably due to the (Z)- venusol. Decoctions of this plant are used in the treatment of infectious diseases due to antibacterial and antifungal activities. The genus Gunnera forms a complex association with the cyanobacterium Nostoc puctiforme L. resulting in the formation of the neurotoxin -N-methylamino-L-alanine (BMAA), which is associated with the development of a complex sclerosis / Parkinson / dementia. In Southern Brazil is found the specie Gunnera manicata L. on which scientific data about phytochemical, pharmacological and toxicological studies are lacking, despite of being assessed as ornamental plant. So, were investigated the toxico-pharmacological and phytochemical profile of G. manicata. In the oral acute toxicity and in the uterotrophic assays aqueous roots extracts were used. To antimicrobial and antioxidant (2,2- diphenyl-1-picryhydrazyl – DPPH - radical test) activities as well as phytochemical profile, methanol and aqueous extracts of roots and leaves were used. Was not observed neither sings of oral acute toxicity nor activity on the female reproductive system of rats. The antimicrobial potential showed activity against Bacillus subtilis, Staphylococus aureus, Streptococcus pyogenes and Candida albicans. Antioxidant capacity presented good to moderate activity. The phytochemical profile analysis was performed by gas chromatography coupled with mass spectrometer (GC-MS) and liquid chromatography coupled with tandem mass spectrometer (LC-MS/MS). BMAA and (Z)-venusol were not found and the samples presented gallic acid and hyperoside. The evaluated extracts showed a high content of total phenolic compounds despite of the low contends of total flavonoids. So, the results obtained in this work open prospects for new studies in view of the absence of signs of toxicity, the biological potential presented, the lack of information about G. manicata the scientific literature and the search for bioactive species.

Orientadores: João Ernesto de Carvalho, Mary Ann Foglio / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-17T20:05:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Gaspi_FernandaOliveiradeGaspari_D.pdf: 71779654 bytes, checksum: cfa74eb88bc93a25160ab6df284bff34 (MD5) Previous issue date: 2011 / Resumo: O conhecimento sobre as plantas, a descoberta de suas propriedades curativas têm sempre acompanhado a evolução do homem através dos tempos. A família Orchidaceae é a maior entre as angiospermas, são mais de 25 mil espécies já descritas. Entre elas está a Oncidium flexuosum Sims., uma importante espécie brasileira conhecida popularmente como bailarina e que possui grande valor ornamental. Porém, esta é a primeira pesquisa sobre as suas propriedades medicinais. Os objetivos deste trabalho foram avaliar as atividades antioxidante in vitro e in vivo, cicatrizante e antiulcerogênica dos extratos e das frações obtidas a partir das folhas de O. flexuosum e realizar as análises fitoquímicas e histoquímica preliminares. Para isto, foram utilizadas as análises da capacidade sequestradora do radical livre difenilhidrazil (DPPH), da atividade antiulcerogênica induzida por etanol, do reparo tecidual associado ou não a microcorrente, além das reações de caracterização e cromatografia de camada delgada. Também foram realizados testes histopatológicos para avaliar possíveis danos oxidativos. O extrato hidroalcoólico de O. flexuosum (EH) possui as atividades antioxidante in vitro diante do radical livre DPPH e in vivo, cicatrizante associado à microcorrente, estimulante da proliferação de fibroblastos in vitro e colágeno in vivo, e atividade antiulcerogênica. A fração terpeno (FrT) inibi o processo oxidativo causado pelo substâncias reativas do ácido tiobarbitúrico (TBARS). O extrato bruto enzimático (EBZ) e a FrT estimulam a proliferação de fibroblastos, porém com menor potência do que o EH. As análises fitoquímicas e histoquímica revelaram que as folhas de O. flexuosum possuem, entre os seus constituintes, as substâncias fenólicas, tais como flavonoides e taninos, e também cumarinas, triterpenos e esteróides. O EH não induziu danos renais nos animais, mas tem potencial hepatotóxico dose-tempo-dependente, causando inflamação e degeneração tecidual. Conclui-se que o EH possui atividade antioxidante, cicatrizante e antiulcerogênica, provavelmente devido à presença das substâncias fenólicas / Abstract: The knowledge about plants, the discovery of their healing properties has always followed the evolution of man through the ages. The Orchidaceae family is the largest among the angiosperms, they are more than 25,000 described species, among them is the Oncidium flexuosum Sims., an important Brazilian species popularly known as dancer and which has great ornamental value. However, this is the first survey of its medicinal properties. The objectives of this work were to investigate the antioxidant activity in vitro and in vivo, wound healing and antiulcerogenic activities of the extracts and fractions obtained from the leaves of Oncidium flexuosum and perform the preliminary phytochemical and histochemistry analysis. For this, analysis of free radical scavenging capacity with difenilhidrazil (DPPH) test, antiulcer activity induced by ethanol, tissue repair associated or not with microcurrent were made, other than the characterization reactions and thin layer chromatography. Histopathological tests were also performed to evaluate possible oxidative damage. The extract of Oncidium flexuosum (EH) has in vitro antioxidant activity against free radical DPPH and in vivo, cicatrizant associated with microcurrent, stimulating fibroblasts proliferation in vitro and collagen in vivo. The terpene fraction (FrT) inhibit the oxidative process caused by the thiobarbituric acid reactive substances (TBARS). The enzimatic crude extract (EBZ) and FrT stimulate proliferation of fibroblasts, but with less efficiency than the EH. The phytochemical and histochemistry analysis revealed that the leaves of Oncidium flexuosum plant species have among its constituents, the phenolic substances such as flavonoids and tannins, and also the coumarins, triterpenes and steroids. The EH was not induce kidney damage in animals, but has hepatotoxic potential dose-time-dependent, causing inflammation and tissue degeneration. It was concluded that the EH has antioxidant, cicatrizant and antiulcerogenic activities probably due to the presence of phenolic substances / Doutorado / Ciencias Basicas / Doutor em Clínica Médica

Made available in DSpace on 2014-07-29T15:16:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 pabline marinho 1.pdf: 394787 bytes, checksum: 1f2c3791104aa80d0a7f1fcfead4fa07 (MD5) Previous issue date: 2008-02-23 / Solanum paniculatum L., popularly known as jurubeba, is a widespread plant species used in Brazilian folk medicine as a tonic, antifever agent, colagogue, bitter, and eupeptic to treat liver and gastric dysfunctions. The chemical composition of Solanum paniculatum has long been studied and many substances have been isolated from the entire plant, including alkaloids, resins, glucids and saponins. The aim of this study was to evaluate the mutagenic, antimutagenic and cytotoxic effects of jurubeba s ethanolic leaf and fruits extracts using micronucleus test in mice bone marrow. The experimental procedure was performed according Schimid (1975). Swiss mice were orally treated with three different concentrations (100, 200 or 300 mg/kg) of leaf or fruit extracts of S. paniculatum. To evaluate the antimutagenic activity were used the same doses of the extract simultaneously with a single dose of Mitomicin C (4mg/kg) i.p. Cytotoxicity was evaluated by the polychromatic and normochromatic erythrocytes ratio. Our results have indicated that the ethanolic leaf extract of S. paniculatum did not exhibit mutagenic effect in mice, but it showed antimutagenic effects in this extract towards MMC. The cytotoxicity was strongly demonstrated specially for higher doses. Meanwhile, the ethanolic fruit extract of S. paniculatum was mutagenic only in dose of 200 mg/Kg at time of 48 hours. It was showed the cytotoxic activity for higher doses. However, no antimutagenic effect was evidenced by fruit extract. / Solanum paniculatum L., vulgarmente conhecida como jurubeba, ocorre em toda a América tropical, especialmente no Cerrado. A ela são atribuídas propriedades medicinais, sendo popularmente utilizada no tratamento da icterícia, da hepatite crônica, de febres intermitentes, ressaca, indigestão e como cicatrizante, além de usos culinários. A análise fitoquímica dessa espécie detectou substâncias como: alcalóides, glicoalcalóides, saponinas e resinas. Devido à grande utilização da planta Solanum paniculatum pela população como recurso terapêutico e alimentício, o presente estudo teve como objetivo avaliar a atividade mutagênica, antimutagênica e citotóxica do extrato etanólico das folhas e frutos de S. paniculatum utilizando o Teste do Micronúcleo em medula óssea de camundongos. O procedimento experimental foi realizado de acordo com Schimid (1975). Os animais foram tratados via gavage em três diferentes concentrações (100, 200 ou 300 mg/kg) do extrato etanólico das folhas ou dos frutos de Solanum paniculatum. As mesmas dosagens juntamente com uma dose única de Mitomicina C (4 mg/Kg) i.p. foram administradas na avaliação da antimutagenicidade. Genotoxicidade e antigenotoxicidade foram avaliadas pela freqüência de eritrócitos policromáticos micronucleados, enquanto a citotoxicidade foi avaliada pela relação entre eritrócitos policromáticos e normocromáticos. Os resultados mostraram que o extrato etanólico das folhas de S. paniculatum não demonstrou ação mutagênica, no entanto, em doses mais elevadas o extrato exibiu a atividade citotóxica e antimutagênica. Quanto ao extrato etanólico dos frutos, este demonstrou atividade mutagênica na dose de 200 mg/Kg em 48 horas de administração, foi mostrada ação citotóxica em doses mais elevadas e não foi observada ação moduladora de mutagenicidade induzida por mitomicina C.