Existe pouca informação a respeito do desenvolvimento reprodutivo das serpentes Neotropicais da família Boidae. Este trabalho descreve por meio de avaliações ultrassonográficas os ciclos reprodutivos nas estações do ano (primavera, verão, outono e inverno), de exemplares das seguintes espécies: Eunectes murinus, Boa constrictor constrictor, Corallus hortulanus e Epicrates cenchria pertencentes ao acervo do Museu Biológico do Instituto Butantan. E. murinus e B. c. constrictor apresentaram vitelogênese primária prolongada, com duração de um ano, em todas as estações. A vitelogênese secundária ocorreu na primavera e no verão em E. murinus e B. c. constrictor, em todas as estações em C. hortulanus, e no inverno e primavera em E. cenchria. Houve reabsorção folicular nas quatro espécies. Cópula foi observada no inverno em B. c. constrictor e E. cenchria, e na primavera em C. hortulanus. Eunectes murinus necessita de agregações reprodutivas e E. cenchria, de ritual de combate entre os machos para ovulação e fecundação, e posteriormente gestação. Nascimentos ocorreram no verão, em B. c. constrictor e E. cenchria, e no inverno, em C. hortulanus. Ovos atrésicos foram eliminados no parto em B. c. constrictor e C. hortulanus. Houve reabsorção uterina de ovos inférteis em C. hortulanus. O tamanho da ninhada foi maior em Boa c. constrictor do que em C. hortulanus e E. cenchria. Nos machos, houve aumento de testículo na época de cópula em B. c. constrictor e E. cenchria. A ultrassonografia demonstrou ser uma técnica de diagnóstico segura e não invasiva para estudar os ciclos reprodutivos. / There is little information about to the phases of the reproductive development of Neotropical snakes of Boidae family. This paper describes by sonographic evaluations the reproductive cycles along the seasons (spring, summer, autumn and, winter), of specimens of: Eunectes murinus, Boa constrictor constrictor, Corallus hortulanus and, Epicrates cenchria belonging to the Museu Biologico of the Instituto Butantan. E. murinusand, B. c. constrictor showed prolonged primary vitellogenesis, for one year, in all seasons. The secondary vitellogenesis occurred in the spring and, summer in E. murinus and, B. c. constrictor, in all seasons in C. hortulanus and, in winter and, spring in E. cenchria. In the four species, there were follicular resorptions. Copulation was observed in winter in B. c. constrictor and, E. cenchria and, in spring in C. hortulanus. Eunectes murinus requires breeding aggregations and E. cenchria male-male ritualized combat for ovulation and, fertilization, and, after pregnancy. The births occurred in summer in B. c. constrictor and, E. cenchria, and, in winter in C. hortulanus. Atretic eggs were eliminated in parturition in B. c. constrictor and, C. hortulanus. There was resorption of uterine infertile eggs in C. hortulanus. The litter size was higher in Boa c. constrictor than in C. hortulanus and, E. cenchria. In males, there was an increase of testis during the copulation season in B. c. constrictor and E. cenchria. The ultrasonography proved to be a safe and, non-invasive diagnostic technique for studying the reproductive cycles.

Submitted by Socorro Pontes (socorrop@ufersa.edu.br) on 2017-05-12T15:29:10Z No. of bitstreams: 1 EricaCGP_DISSERT.pdf: 2673309 bytes, checksum: c441c049726d8b3cc5250d4dbb83b8ea (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-12T15:29:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 EricaCGP_DISSERT.pdf: 2673309 bytes, checksum: c441c049726d8b3cc5250d4dbb83b8ea (MD5) Previous issue date: 2017-02-17 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / The objective of the present thesis was to use the manipulation of oocytes enclosed in preantral follicles (MOIFOPA) as a tool for the female gametes rescue and conservation, from wild species agouti (Dasyprocta leporina). The dissertation was divided into two experimental phases. At first, it was performed solid surface vitrification (SSV) using different concentrations of cryoprotectant agents (CPAs) in which the effects of the 3 and 6 M concentrations of dimethylsufoxide (DMSO) and ethylene glycol (EG) were verified, as well as the association of both CPAs in the high concentration (6 M) under morphology, viability and apoptosis cell on the in situ PFs. A total of 865 PFs was analyzed before and after vitrification, it was observed an average of 80.7 ± 5.21% of morphologically normal follicles in the control group and after SSV, indifferent the CPA used, it was possible to preserve until 76.7% ± 5.4 OF PFs. At viability analysis, DMSO 3 M, DMSO 6 M, EG 3, EG 6 M (70.0%, 81.11%, 76.6% and 71.11%, respectively) presented similar values to the control group (79.0%). No apoptotic cells (TUNEL positive) were found before and after vitrification. At second, vitrification was performed using the association of CPAs, followed by xenografting of ovarian tissue in C57Bl/6 SCID Black mice. Through vaginal washing monitoring, was observed that 80% mice of the xeno-fresh group and 42% of the xeno-vitrified group returned to ovarian activity, confirmed by hormonal measures. Microscopically, primordial, primary and transitional follicles were observed in the grafts, and all had normal morphology for the species studied. However, major primordial and primary follicles were observed in transplants. The NORs revealed that after transplantation a significant reduction (1.66 ± 0.25) occurred when compared to the control groups (group fresh control: 7.19 ± 1.23 and xeno-fresh group: 9.10 ± 0.64). Apoptotic cells (TUNEL positive) were found only after transplantation of samples vitrified and the healthy follicles (TUNEL negative) observed in other groups (TUNEL negative). Thus, as the general conclusion, the use of MOIFOPA in agouti allowed the knowledge of aspects related to its reproductive morphology and physiology, enabling the germplasm conservation, with the possibility of germplasm bank formation, as the elucidation of mechanisms related to the PF survive and in vivo development / O objetivo do presente estudo foi utilizar a manipulação de oócitos inclusos em folículos ovarianos pré antrais (MOIFOPA) como ferramenta para o resgate e conservação do uso de gametas femininos de cutias (Dasyprocta leporina). A dissertação foi dividida em duas fases experimentais. Na primeira, foi realizada a vitrificação em superfície sólida (SSV) utilizando diferentes concentrações de agentes crioprotetores (ACPs), na qual foram verificados os efeitos das concentrações de 3 e 6 M de dimetilsufoxido (DMSO) e etilenoglicol (EG), bem como a associação de ambos os ACPs na concentração maior (6 M) sob a morfologia, viabilidade e apoptose celular de folículos ovarianos pré-antrais in situ (FOPAs). Um total de 865 FOPAs foi analisado antes e após a vitrificação. No grupo controle, foi observado 80,7 ± 5,21% de FOPA morfologicamente normais. Após SSV, independentemente do ACP utilizado, foram obtidos até 76,7% ± 5,4 de FOPAS. Na análise de viabilidade, DMSO 3 M, DMSO 6 M, EG 3, EG 6 M (70,0%; 81,11%; 76,6% e 71,11%; respectivamente) apresentaram valores semelhantes de FOPAS viáveis ao grupo controle (79,0%). Na segunda fase, foi realizada a SSV utilizando a associação dos ACPs (DMSO e EG), seguido do xenotransplante de tecido ovariano de cutias em camundongas C57Bl/6 SCID. Através do monitoramento do lavado vaginal, observou-se que 80% das camundongas do grupo controle e 42% do grupo vitrificado retornaram à atividade ovariana, confirmada pela dosagem hormonal. Microscopicamente, folículos primordiais, primários, transição e secundários foram observados nos enxertos, e todos tinham morfologia normal para as espécies estudadas. No entanto, os folículos primordiais e primários foram observados em maior quantidade após transplante. As Regiões organizadoras de nucléolos (NORs) revelaram que após o transplante ocorreu uma redução significativa de NORs no grupo vitrificado-xenotranplantado (1,66 ± 0,25) quando comparados aos grupos controles (grupo controle fresco: 7,19 ± 1,23; grupo controle xenotransplantado: 9,10 ± 0,64). As células apoptóticas (TUNEL positivo) foram encontradas somente após o transplante das amostras vitrificadas e folículos saudáveis foram encontrados nos outros grupos tratado (TUNEL negativo). Assim, como conclusão geral, o uso da MOIFOPA em cutias permitiu o conhecimento de aspectos relacionados a sua morfofisiologia reprodutiva, possibilitando tanto a conservação do material genético, com a possibilidade de formação de bancos de germoplasma; e ainda a elucidação dos mecanismos relacionados à sobrevivência e ao desenvolvimento dos FOPA in vivo / 2017-05-12

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2016-07-13T16:32:44Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2878429 bytes, checksum: f47e247b860f8a5564344ee2ac1a7457 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-13T16:32:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2878429 bytes, checksum: f47e247b860f8a5564344ee2ac1a7457 (MD5) Previous issue date: 2016-02-19 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Avaliou-se o uso de diferentes protocolos de cultivo in vitro de fragmentos ovarianos de cadelas domésticas adultas em anestro, em casuística de programa de controle populacional de animais errantes no município de Viçosa MG. Após a colheita dos ovários, foram obtidos fragmentos da zona parenquimatosa de cada ovário, um dos quais foi incluído fresco como controle, e os demais incubados por 48 horas em atmosfera de 5 % de CO 2 , 95 % de umidade relativa e temperatura de 39 oC, em diferentes tratamentos: T1: cultivados em Meio Essencial Mínimo (MEM); T2: cultivados em MEM associado a Soro de Cadela prenhe (MEM + SCpre) e T3: cultivados em MEM associado a Soro de Cadela no pró-estro (MEM + SCpro). Todos os fragmentos foram fixados por imersão em solução de Karnowisky por até 24 horas e processados segundo rotina para confecção de lâminas histológicas. Estas foram avaliadas quanto ao desenvolvimento folicular, sob microscópio de luz, em aumento de 100 vezes. A análise estatística foi feita pelo teste paramétrico de comparação de médias T Student. Todos fragmentos cultivados apresentaram aumento na proporção de folículos em desenvolvimento, assim conclui-se que o meio de cultivo utilizado associado à técnica de cultivo in situ foi suficiente para promover o desenvolvimento folicular em ovários de cadelas, sendo que a suplementação hormonal com SCpro e SCpre não influenciaram na taxa de desenvolvimento. / This present study evaluated different protocols of in vitro culture from ovarian fragments of domestic female dog (Canis lupus familiaris) in anestrus. For the study, ovaries from female dogs were used, obtained from the neutering of the stray animal population control of the municipal kennel program/ Veterinary Department - Universidade Federal de Viçosa (UFV). After the ovaries were collected, random fragments of the ovary parenchymal were obtained, one of them were used fresh as control, and the rest were incubated for 48 hours in 5 % of CO2 atmosphere, 95 % of relative humidity and 39 oC temperature, in different treatments: T1 cultivated in Minimum Essential Medium (MEM); T2 cultivated in MEM associated with pregnant dog serum and T3 cultivated in MEM associated with proestrus dog serum. Those ovaries cultivated in treatments T1, T2 and T3, were fixed by Karnowisky immersion for up to 24 hours, and processed following the normal laboratorial procedures for making histological slides. They were then evaluated under light microscope, using the 100X objective lens. The statistical analysis was made by the Student T`s parametric comparison measures test. All fragments of assessed ovaries showed a proportional increase of developing follicles, concluding that the culture medium used, associated to the in situ culture technique, was enough to promote the follicle development in dog’s ovaries, being that the hormonal supplementation with proestrus serum and pregnant serum did not influence the development rate.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:25:26Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-04-24Bitstream added on 2014-06-13T20:33:00Z : No. of bitstreams: 1 castilho_acs_me_botib.pdf: 805313 bytes, checksum: f2f34b307cbf0586a7d2bcfc8d7e9bca (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O desenvolvimento folicular pré-antral é controlado predominantemente por peptídeos intraovarianos, incluindo os FGFs. O FGF-10 participa de interações parácrinas entre células mesenquimais e epiteliais, regulando a proliferação e diferenciação celular e também tem sido detectado em folículos pré-antrais. No entanto, a expressão do FGF- 10 durante o desenvolvimento ovariano fetal e a possível associação com a dinâmica folicular ainda não haviam sido investigados. O objetivo do presente estudo foi investigar o padrão da expressão do FGF-10 durante o desenvolvimento ovariano fetal ao longo da gestação. Trinta fetos bovinos (predominantemente Bos indicus) foram obtidos em matadouro e divididos em seis grupos (n=5) de acordo com a idade gestacional, estimada pelo comprimento entre o topo da cabeça e o início da cauda (grupos: 60, 75, 90, 120, 150 e 210 dias de gestação)... / Preantral follicular development is controlled predominantly by intraovarian peptides including FGFs. FGF-10 participates in paracrine interactions between epithelial and mesenchymal cells, regulating cellular differentiation and proliferation, and has already been detected in preantral follicles. The expression of FGF-10 during fetal ovary development and the possible association with formation of preantral follicles in the fetal ovary has not been investigated. The objective of this study was to investigate the expression pattern of FGF-10 during fetal ovarian development along gestation. Thirty bovine fetuses (predominantly Bos indicus) were obtained at a local abattoir, and divided into six groups (n=5) according to the crown-rump length as an estimative of age (groups: 60, 75, 90, 120, 150 e 210 days of gestation)...(Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:11Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-02-22Bitstream added on 2014-06-13T19:45:12Z : No. of bitstreams: 1 bezerra_mb_dr_jabo.pdf: 930909 bytes, checksum: f1899f875197e48c17afaf824f63cfca (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Objetivou-se testar diferentes protocolos de cultivo in vitro e in vivo de folículos ovarianos pré-antrais de fetos bovinos. Para tanto, um total de 41 ovários de fetos bovinos foram obtidos em matadouro, transportados e utilizados para o cultivo in vitro (n=20) e para o xenotransplante (n=21). Após processados no laboratório em fragmentos entre 0,5 e 1 mm3 foram encaminhados para os cultivos O cultivo in vitro baseou-se em protocolo bem sucedido de cultivo de FOPA em caprinos e testou diferentes fontes de macromoléculas e a utilização do azul de tripan na viabilidade dos tecidos cultivados a uma atmosfera controlada de 5% CO2 em ar, a 38,5°C e nutridos com dMEM (300 mOsm/L, pH 7,2) suplementado com antibióticos, ITS, piruvato de sódio, glutamina, hipoxantina, dAMPc, bFSH e IGF-I. A depender do tratamento, foi adicionado BSA (0,1%) SFB (10%) ou PVA (1%). O cultivo in vivo de FOPA foi executado por xenotransplante sob a cápsula renal num total de 65 camundongas imunodeficientes. Desenvolveu-se uma técnica de biopsia e verificou-se o efeito do tempo de transplante (30, 60 e 30 e 60 dias após o transplante) sobre a percentagem e a viabilidade de FOPA bem como a possível presença de folículos antrais. Num segundo momento, 32 receptoras receberam estímulo hormonal de 10 UI de eCG (n=18) e 10 UI r-hFSH (n=14). Os resultados mostraram que o cultivo com PVA apresentou FOPA normais em percentagem semelhante aos cultivos com BSA e PVA. Quanto ao cultivo por xenotransplante, observou-se o crescimento sucessivo de FOPA até estádios antrais ao longo do tempo de transplante (> 30 dias). O resultado das estimulações exógenas apresentou folículos antrais com oócitos que apresentaram o cumulus expandido em 2/5 (40%) dos oócitos selecionados para MIV de cada um dos tratamentos propostos. Concluindo, FOPA oriundos de fetos bovinos podem ser cultivados por pelo menos 8 dias em PVA... / This study aimed to evaluate different protocols of in vitro and in vivo preantral follicles (PFs) culture from bovine fetus. Thus, a total of 41 fetal bovine ovaries, from a slaughterhouse, were collected and transported at laboratory for in vitro culture (n=20) and for xenotransplantation (n=21), after processing into small cortical pieces measuring between 0,5 and 1mm3 the slices were cultured. The in vitro culture was based on well successful protocol of preantral follicles in caprine and tested different sources of macromolecules and trypan blue viability of cultured tissues cultured at controlled atmosphere (5%CO2 in air, 39°C). The culture medium used was dMEM (300 mOsm/L, pH 7, 2) supplemented with antibiotics, ITS, sodium pyruvate, glutamine, hypoxanthine, dAMPc, bFSH, and IGF-I. Depending of treatment, was added BSA (0,1%), FCS (10%) or PVA (1%). In vivo culture of preantral follicles was carried out by xenotransplantation under renal capsule of immunodeficient females mice (total of 65) that were submitted to a biopsy technique previously developed for tissue collection and to verify the effectiveness of time of transplantation (30, 60 and 30 and 60 days post surgery) under percentage and viability as well as putative growth of PFs to antral follicles. At second stage, 32 recipient mice were submitted to hormonal stimuli with 10 IU of eCG (n=18) and 10 IU of r-hFSH (n=14). The results showed that PVA culture presented normally PF in similar distribution when compared with BSA and PVA culture. Regarding xenotransplantation, successive growth of PF until antral stages was observed belong time of transplantation. Exogenous stimulation presented oocytes with expanded cumulus in 2/5 (40%) of selected oocytes for IVM from each treatment. Conclusively PFs from fetal bovine ovaries can be cultured at PVA at least 8 days and grows until antral stages after xenotransplantation procedures... (Complete abstract click electronic access below)

Submitted by Alberto Vieira (martins_vieira@ibest.com.br) on 2017-10-18T20:46:52Z No. of bitstreams: 1 200915.pdf: 11289415 bytes, checksum: 61f025a5a08e325aac07f1ad89d7838b (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-18T20:46:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 200915.pdf: 11289415 bytes, checksum: 61f025a5a08e325aac07f1ad89d7838b (MD5) Previous issue date: 1986 / CAPES / FIPEC / Análise do comprimento dos testículos dos triatomíneos, cujos comprimentos (longo, médio e curto) e espessuras (grossa e fina) variam consideravelmente entre os gêneros, e pouco entre as espécies. Foi observado um total de 336 espécimes de Triatominae, sendo a maior parte do material procedente da Criação do Laboratório de Triatominae do Departamento de Entomologia do Instituto Oswaldo Cruz. Devido à dificuldade de obtenção desse material, limitaram–se as observações a apenas duas espécies: R. nasutus – da colônia mantida no Departamento de Biologia da Universidade Federal do Piauí e P. megistus – diretamente do campo, dos Municípios de Bonfim e Papagaios (MG). Os folículos testiculares apresentaram–se, de acordo com os gêneros, da seguinte maneira: Rhodnius spp – dois longos e grossos e cinco curtos e finos; Triatoma spp – dois longos e finos, dois médios e grossos e três curtos e finos e Panstrongylus spp – sete, aproximadamente iguais. No primeiro caso, os três gêneros apresentaram diferença significativa (P > 0,001) nos diferentes tipos de folículos testiculares, exceto em Triatoma spp, nos folículos longos e finos (P < 0, 05). No segundo caso, praticamente todas as comparações apresentaram diferença significativa (P> 0,001), entretanto, em algumas o nível de significância divergiu: P> 0, 005 – R. neglectus X R. ecuadoriensis, nos folículos curtos e finos; P >0,01 – T. sordida X T. pseudomaculata e T. sordida X T. vitticeps, nos folículos médios e grossos, e T. brasiliensis X T. vitticeps, nos folículos curtos e finos; P>0,05 – R. neglectus X R. ecuadoriensis, nos folículos longos e grossos, e R. nasutus X R. ecuadoriensis, nos folículos curtos e finos; P< 0,001 (não significativa) – T. brasiliensis X T. vitticeps, nos folículos médios e grossos. No terceiro caso, a diferença significativa ocorreu apenas em Rhodnius nasutus, nos foliculos longos e grossos (P> 0,001). Os resultados obtidos não demonstraram possibilidades para a utilização desse caráter na Sistemática, contudo foram promissores no que concerne à Filogenia, desde que seja observado um número maior de espécies. / Analysis of the length of testis of triatomines, whose lengths (long, medium and short) and thicknesses (thick and thin) vary considerably between the genera, and little between the species. A total of 336 species of triatomines were observed, since the majority of the material belongs to the Triatominae Laboratory Colony of Entomology Departament of Oswaldo Cruz Institute. Due to the difficulty in obtaining this material, the investigation was limited to only two species: R. nasutus – colony of Biology Department of Federal Piaui University and P. megistus brought from the field, Bonfim and Papagaios Municipal (MG). The testicular follicles present itself, in accordance with the genera, in the following way: Rhodnius spp – two long thick and five short thin; Triatoma spp – two long thin, two medium thick and three short thin; Panstrongylus spp – seven, almost identical. ln the first case, the three– genera show significant difference (P> 0,001) in the differents type of testicular follicles, except Triatoma spp, to the long and thin follicles (P> 0,05). In the second case, all the comparisons shown a significant difference (P >0,01), meanwhile, in the other, the significance level diverged: P> 0,005 – R. neglectus X R. ecuadoriensis, in short and thin follicles; P> 0,01 – T. sordida X T. pseudomaculata and T. sordida X T. vitticeps, in medium and thick follicles and T. brasiliensis X T. vitticeps, in short and thin follicles; P>0,05 – R. neglectus X R. Ecuadoriensis, in long and thick follicles, R. nasutus X R. ecuadoriensis in short and thin follicles; P<0,001 (not significative) T. brasiliensis X T. vitticeps, in medium and thick follicles. ln the third case, the significant difference took place only in Rhodnius nasutus, in long and thick follicles (P>0,001) These results didn ' t demonstrate possibilities to use this character in Systematics, although they were promising to Phylogeny studies, since a great number of species shall be observed.

Made available in DSpace on 2014-07-29T15:29:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Eduardo Camelo.pdf: 5882040 bytes, checksum: ca0ec607eeffcfa39c85964f5b3ad2ee (MD5) Previous issue date: 2011-12-06 / OBJECTIVES: To establish the correlation between the curves of the AFC and serum basal FSH as well as to construct a nomogram correlating age with different values of antral follicles counts percentiles in infertile patients. METHODS: A cross-sectional study of patients treated at Fêmina Reprodução Humana was made from March 2010 to October 2011. The patients were submitted to transvaginal ultrasonography and basal FSH dosage from days 2 to 4 of their menstrual period. The patients included were the ones who were 21 to 45 years old, with regular menses, two healthy ovaries, without any evidence of endocrinopathies and that signed the consent. Patients excluded: smokers, with galactosemia or ovarian cysts, with antecedents of hepatopathies, ovarian surgeries or treated with chemotherapy or radiotherapy. Pearson s correlations coefficient was used to analyze the parametric data and Spearman`s test to the non parametric data. To evaluate the evolution of the AFC in relation to age of patients the percentiles 5th, 25th, 50th, 75th and 95th were used. A linear regression was made to understand the effect of age on the AFC. RESULTS: One hundred and seventy-two patients were included in the trial with a mean age of 32.7 years old. There was a weak correlation between the dose of basal FSH and the AFC (r = - 0,269). The age-related normogram for the 5rd, 25th, 50th, 75th and 95th percentile of antral follicle count revealed that changes were best fitted by a linear function. The percentiles that showed the highest correlations were 25 (r = - 0,960; p < 0,001), 50 (r = - 0,948; p < 0,001) and 75 (r = - 0,917; p < 0,001). All were statistically significant. CONCLUSIONS: The correlation between serum levels of FSH and AFC was negative and weak. A nomogram was constructed correlating age with different values of the percentiles of the antral follicle count in infertile women without endocrinopathies. There was a linear, strong and negative correlation in all percentiles. / OBJETIVOS: Estabelecer a correlação entre as curvas da CFA e da dosagem sérica do FSH basal. Construir um nomograma correlacionando a idade com diferentes valores dos percentis da contagem dos folículos antrais em mulheres inférteis. MÉTODO: Estudo transversal de todas as pacientes atendidas no Centro de Reprodução Humana Fêmina no período 01/03/2010 a 01/10/2011. As pacientes foram submetidas à ultrassonografia transvaginal e a dosagem do FSH basal do 2º ao 4º dia do ciclo menstrual. Foram incluídas as pacientes de 21 a 45 anos, com ciclos regulares, dois ovários íntegros, sem evidência de endocrinopatias e que assinaram o consentimento. Foram excluídas as tabagistas, portadoras de galactosemia, cistos ovarianos, com antecedente de hepatopatia, cirurgia ginecológico-ovariana, tratamento com quimioterapia ou radioterapia. Os testes utilizados foram os coeficientes de correlação de Pearson, para dados paramétricos, e de Spearman para dados não paramétricos. Para verificar a evolução da CFA em relação à idade dos pacientes foram utilizados os percentis 5, 25, 50, 75 e 95. Foi feito uma regressão linear que possibilitasse perceber o efeito da idade sobre a CFA. Foi utilizado como nível de significância o valor de 5% (p<0,05). RESULTADOS: Cento e setenta e duas pacientes foram incluídas no estudo, a idade média foi de 32,7 anos. A correlação entre a dosagem sérica do FSH basal e a CFA foi negativa e fraca (r = - 0,269). O nomograma correlacionando a idade com os percentis 5, 25, 50, 75 e 95 da contagem dos folículos antrais foi melhor ajustado por uma função linear. Os percentis que apresentaram as correlações mais altas foram o 25 (r = - 0,960; p < 0,001), 50 (r = - 0,948; p < 0,001) e 75 (r = - 0,917; p < 0,001). Todas as correlações foram estatisticamente significantes. CONCLUSÃO: A correlação entre a dosagem sérica do FSH basal e a CFA foi negativa e fraca. Construiu-se um nomograma correlacionando a idade com diferentes valores dos percentis da contagem dos folículos antrais em mulheres inférteis sem endocrinopatias. Houve uma correlação linear, negativa e forte em todos os percentis.

Submitted by Socorro Pontes (socorrop@ufersa.edu.br) on 2017-03-30T14:58:19Z No. of bitstreams: 1 LuãBM_DISSERT.pdf: 1732522 bytes, checksum: 8ab1e4a3686c8d21f9bc08fcc449f393 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-30T14:58:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 LuãBM_DISSERT.pdf: 1732522 bytes, checksum: 8ab1e4a3686c8d21f9bc08fcc449f393 (MD5) Previous issue date: 2017-02-16 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Leptin, a cytokine produced by adipose cells, is the target of the scientific community for believing that it has an impact on the reproduction of the animals promoting puberty, folliculogenesis and oogenesis, estrous cycle and aiding in fertilization. The understanding of the mechanisms controlling the reproductive activity of Spix's Yellow-toothed Cavy (Galea spixii) plays a relevant role in the preservation of the species. Thus, the present work proposed to analyze the immunolocalization of leptin receptors (Ob-R) in the ovary of cavies. Ovaries from 20 adult, non-pregnant, healthy females were collected. The samples were fixed in 4% phosphate buffered paraformaldehyde, embedded in paraffin and sectioned for immunohistochemistry. The sections were photomicrographs and intensity of the reaction was measured. Strong immunoreaction was observed in oocyte and theca cells, moderate in ovarian stromal cells and large luteal cells and weak stained in granulosa, endothelial, perivascular and small luteal cells. When compared to receptor expression along follicular development it was observed that the oocyte and the theca cells remained with expression at the same intensity. However, the granulosa cells presented strong stained in the preantral stages, whereas in the antral follicles it presented low intensity. We conclude that in the ovaries of Galea spixii there is the presence of Ob-R in the main structures of the ovary sugesting that this hormone plays a fundamental role in the reproduction of this species / A leptina, uma citocina produzida pelas células adiposas, possui ação na reprodução dos animais promovendo a puberdade, foliculogênese e oogênese, ciclo estral e auxiliando na fecundação. A compreensão dos mecanismos que controlam a atividade reprodutiva de preás (Galea spixii) possui papel relevante para a preservação da espécie. Desta forma, o presente trabalho propôs analisar a imunolocalização dos receptores de leptina (Ob-R) no ovário de preás. Coletaram-se os ovários de 20 fêmeas adultas, não prenhes e saudáveis. As amostras foram fixadas em paraformaldeído a 4% em tampão fosfato, incluídas em parafina e seccionadas para a realização de imunohistoquímica. As secções foram fotomicrografadas e avaliadas quanto à intensidade da reação. Observou-se forte imunorreação no oócito e nas células da teca, moderada nas células do estroma ovariano e nas células luteínicas grandes e fracamente coradas nas células da granulosa, endoteliais, perivasculares e células luteínicas pequenas. Quando comparado a expressão de receptores ao longo do desenvolvimento folicular foi observado que o oócito e as células da teca se mantiveram com expressão na mesma intensidade. Entretanto, as células da granulosa apresentaram forte marcação nos estádios pré-antrais enquanto que nos folículos antrais apresentou fraca intensidade. Concluímos que em ovários de Galea spixii existe a presença de Ob-R nas principais estruturas do ovário sugerindo que este hormônio desempenhe papel fundamental na reprodução desta espécie / 2017-03-30

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:46:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1801039 bytes, checksum: 20f5b40d56b71da169bd9632bf56a82a (MD5) Previous issue date: 2010-02-22 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / This experiment has been developed in order to verify the thyroxine effect in the presence or absence of follicle stimulating hormone (FSH) on survival and growth of sheep preantral follicles. Fragments of ovarian tissue were grown for 1 or 7 days in a situation with a minimum essential (&#945;-MEM +) alone or containing thyroxine (10, 20, 50 µg/mL) in the presence or absence of rFSH (50 ng/mL). The ovarian tissue non-grown (fresh control) and grown in different treatments were processed for analysis using the classical histology technique. When the days of culture were compared to the non-cultivated control, on the first day was found that the treatment with &#945;-MEM+, FSH, T20 and T50 showed follicular survival percentages similar to control. When the treatments have been compared between each other within the growing season was identified that only on the 7th day, the treatment containing T50 presents a percentage of normal follicles significantly superior to the treatment with T10F. Related to the follicular diameter, the follicle in culture has not grown, since all treatments have had a similar behavior when controlling non-grown and &#945;- MEM+, except the T10 treatment. When comparing the treatments within each growing season, it has been observed that on the first day, treatments T50, T10F and T50F have showed a follicular diameter greater when compared to T10 treatment. Similar to what happenedto follicular growth, oocitário growth has not grown either. For oocitário diameter, on the first day, there was a reduction for T10 and T20F treatments when compared to non-grown. On the 7th day of grown, FSH, T10F and T50F treatments have reduced oocitário diameter, with a progression of culture from the first day to the 7th one and even when compared to control non-grown and &#945;-MEM+. It was concluded that high T4 concentrations (50 g / ml) have provided promising about the survival and follicular development in vitro. The association of T4 with FSH, have not presented positive results in the survival and follicular development in vitro. Although it is known the thyroxine action on ovarian physiology, there is a need to verify its importance for the in vitro development of preantral sheep follicles. / O presente experimento foi desenvolvido a fim de se verificar o efeito da tiroxina na presença ou ausência do hormônio folículo estimulante (FSH) sobre a sobrevivência e o crescimento de folículos pré-antrais de ovinos. Fragmentos de tecido ovariano foram cultivados por 1 e 7 dias em meio essencial mínimo (&#945;-MEM+) suplementado ou não com diferentes concentrações de tiroxina (10, 20, 50 µg/mL) na presença ou ausência de rFSH (50 ng/mL). O tecido ovariano não-cultivado (controle fresco) e os fragmentos cultivados no dia 1 e 7 nos diferentes tratamentos foram processados e analisados utilizando a técnica de histologia clássica. Quando os dias de cultivo foram comparados ao controle não-cultivado, somente no dia 1 foi verificado que os tratamentos contendo &#945;- MEM+, FSH, T20 e T50 mostraram percentuais de sobrevivência folicular semelhantes ao controle. Quando os tratamentos foram comparados entre si dentro de cada período de cultivo, foi observado que apenas no dia 7, o tratamento contendo T50 apresentou um percentual de folículos normais superior ao tratamento T10F. Com relação ao diâmetro folicular, não houve crescimento dos folículos em cultivo, uma vez que todos os tratamentos comportaram-se de maneira semelhante ao controle não-cultivado e ao &#945;- MEM+, exceto o tratamento T10. Ao se comparar os tratamentos, dentro de cada período de cultivo, foi observado que no dia 1 os tratamentos T50, T10F e T50F apresentaram diâmetro folicular superior quando comparados ao tratamento T10. Semelhante ao crescimento folicular também não houve crescimento oocitário. Para o diâmetro oocitário, no dia 1, foi verificada uma redução para os tratamentos T10 e T20F quando comparados ao não cultivado. Já no dia 7 de cultivo os tratamentos FSH, T10F e T50F reduziram o diâmetro oocitário, com a progressão do cultivo do dia 1 para o dia 7 e ainda quando comparados ao controle não-cultivado e ao &#945;-MEM+. Concluiu-se que altas concentrações de T4 (50 &#956;g/ml) proporcionaram resultados promissores no que diz respeito à sobrevivência e desenvolvimento folicular in vitro. Quanto a associação da T4 com o FSH não demonstrou resultados positivos na sobrevivência e no desenvolvimento folicular in vitro. Embora seja conhecida a atuação da tiroxina na fisiologia ovariana são necessárias mais pesquisas que verifiquem sua importância para o desenvolvimento in vitro de folículos pré-antrais ovinos.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:55:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1494903 bytes, checksum: 868284081df988ac35cef0a3dbbd85c9 (MD5) Previous issue date: 2012-07-25 / The present study aimed to evaluate the cooling effects and association of penetrant, non-penetrant cryoprotectors and ascorbic acid on the quality of vitrified bovine preantral follicles (FOPAs). Two experiments were conducted. In experiment I, the morphology of FOPAs after cooling followed by vitrification was studied. Ovaries were collected (n=10) from five crossbred heifers aged of 14 to 16 months. At the laboratory 22 ovarian fragments were taken from the cortical region and distributed as followed: two fragments for fresh control (zero hour) submitted to histological analysis and 20 fragments cooled at 4 ºC for four and 24 hours in TCM-199+HEPES+Antibiotics medium. From the 20 fragments cooled, four were fixed as control 4 and 24 hours (two piece each) and the remaining 16 fragments were distributed in four vitrification treatments for each cooling time, respectively: Treatments V4a and V24a: TCM-199 + dimethyl sulfoxide (DMSO) 1.5M + Ethylene glycol (EG) 1.5M; Treatments V4b and V24b: TCM-199 + DMSO 1.5M + EG 1.5M + sucrose (SUC) 0.5M; Treatments V4c and V24c: TCM-199 + DMSO 1.5M + EG 1.5M + Ascorbic Acid (AA) 0.1 mM/L and treatments V4d and V24d: TCM-199 + DMSO 1.5M + EG 1.5M + SUC 0.5M + AA 0.1mM/L. After being vitrified, fragments were stored in liquid nitrogen for three days. Fragments were then heated in solution of decreasing SUC and fixed for histology. In experiment II, the viability of FOPAs after cooling followed by vitrification by Trypan Blue staining (AT) was studied. Bovine ovaries (n = 10) were collected, fragmented and distributed as described in the first experiment, subsequently submitted to mechanical follicular isolation for analysis of viability. The morphology variable was evaluated by SNK test and viability was analyzed by Chi-square Test at 5% probability or the Fisher Exact Test when the number of repetitions was less than 30 follicles. There was no difference in percentage of morphologically normal follicles between fresh control group and control group cooled for 4 h (99.3% and 96.0% respectively; P>0.05), nevertheless, there was reduction of FOPAs morphological integrity of control cooled for 24 h (86%; P<0.05). After vitrification, there was reduction (P<0.05) of normal morphology in all treatments when compared with cooled control groups. On the other hand, the viability analysis showed that V4c treatment were not significantly different when compared with control 24h treatment and, together V24c treatment, showed higher capacity of morphological preservation of FOPAs than other treatments (P<0.05), indicating that AA can reduce the toxic and osmotic damages caused by cryopreservation procedure. In conclusion, FOPAs included in the ovarian bovine tissue conserve the morphology efficiently when cooled to 4 °C for 4 hours in TCM-199 + HEPES + Antibiotics and, the association of permeable cryoprotectants DMSO and EG with the antioxidant AA improves survival rates and maintain the morphologic integrity during the vitrification. / O presente trabalho teve por objetivo avaliar o efeito do resfriamento e da associação de crioprotetores penetrantes e não penetrante acrescido de ácido ascórbico na qualidade de folículos pré-antrais (FOPAs) bovinos vitrificados. Para isso, foram realizados dois experimentos. No experimento I, foi estudada a morfologia dos FOPAs após resfriamento seguido de vitrificação. Ovários (n=10) foram coletados de cinco novilhas mestiças de 14 a 16 meses de idade. No laboratório, 22 fragmentos ovarianos foram retirados da região cortical, os quais foram distribuídos: dois para controle fresco (zero hora), sendo imediatamente fixados para análise histológica, e 20 fragmentos resfriados à 4 ºC por quatro e 24 horas em meio TCM-199+HEPES e antibióticos. Dos 20 fragmentos resfriados, quatro foram fixados como controle 4 e 24 horas (dois fragmentos cada) e os 16 restantes foram distribuídos em quatro tratamentos de vitrificação para cada tempo de resfriamento, respectivamente: Tratamentos V4a e V24a: TCM-199 + Etilenoglicol (EG) 1,5M + Dimetilsulfoxido (DMSO) 1,5M; Tratamentos V4b e V24b: TCM-199 + DMSO 1,5M + EG 1,5M + sacarose (SAC) 0,5M; Tratamentos V4c e V24c: TCM-199 + DMSO 1,5M + EG 1,5M + Ácido Ascórbico (AA) 0,1 mM/L e tratamentos V4d e V24d: TCM-199 + DMSO 1,5M + EG 1,5M + SAC 0,5M + AA 0,1mM/L. Após a vitrificação, os fragmentos permaneceram armazenados em Nitrogênio Líquido por três dias, e posteriormente aquecidos em soluções decrescentes de SAC e fixados para histologia clássica. No experimento II, foi estudada a viabilidade dos FOPAs após resfriamento seguido de vitrificação pela coloração Azul de Trypan (AT). Ovários bovinos (n=10) foram coletados, fragmentados e distribuídos nos quatros tratamentos conforme descrito no experimento I, os quais foram posteriormente submetidos ao isolamento folicular mecânico para análise da viabilidade. A variável morfologia foi avaliada pelo Teste SNK e a viabilidade foi analisada pelo teste Qui-quadrado com nível de significância de 5%, ou pelo Teste Exato de Fisher quando o número de repetições foi menor que 30 folículos. Não houve diferença na percentagem de folículos morfologicamente normais entre o grupo controle fresco e o grupo controle 4 h (99,3% e 96,0% respectivamente; P>0,05). Entretanto, houve redução da integridade morfológica dos FOPAs após 24 h de resfriamento (controle 24 h: 86%; P<0,05). Após a vitrificação, houve uma redução da integridade morfológica e viabilidade folicular em todos os tratamentos em relação aos controles resfriados (P<0,05). No entanto, o tratamento V4c manteve a viabilidade folicular semelhante ao controle 24 h (P > 0.05). Este mesmo tratamento (V4c) mostrou maior capacidade de preservação em relação aos demais tratamentos de vitrificação (P<0,05). Em conclusão, FOPAs inclusos no tecido ovariano bovino conservam a morfologia eficientemente quando são resfriados a 4 ºC por até quatro horas em meio TCM-199+HEPES+Antibióticos. Além disso, a associação dos agentes crioprotetores penetrantes DMSO / EG, com o agente antioxidante AA melhora as taxas de sobrevivência e mantêm a integridade morfológica durante a vitrificação.