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Metabólitos secundários produzidos por fungos endofíticos isolados de Anthurium alcatrazense e Begonia spp. / Secondary metabolites produced by endophytic fungi isolated from Anthurium alcatrazense and Begonia spp.Diana Fortkamp 02 March 2018 (has links)
Os produtos do metabolismo secundário, também conhecidos por produtos naturais, representam uma fonte inexplorada de compostos com atividade biológica. Os micro-organismos, entre eles os endófitos, são fontes promissoras de obtenção dessas substâncias. Assim sendo, essa pesquisa visou obter compostos de importância biotecnológica produzidos por fungos endofíticos isolados de folhas das plantas Anthurium alcatrazense, Begonia venosa e B. fischeri. Para isso, 5 linhagens de fungos endofíticos isolados dessas plantas (códigos P7BDA1F2, P8BDA1F1, AM29, D28 e D29) foram estudadas. A identificação desses micro-organismos foi realizada por meio de análises morfológicas e moleculares, revelando serem estas linhagens Hymenochaete-like, Trichoderma sp., Neopestalotiopsis sp., Aspergillus sp. e Diaporthe sp., respectivamente. A partir do extrato bruto de Hymenochaete-like (código P7BDA1F2) foram isolados os compostos 5,7-dimetoxiftalida e metil orselinato, os quais foram testados contra Leishmania (L.) infantum e alvo do proteassoma e não apresentaram atividade. A partir do extrato bruto de Trichoderma sp. (código P8BDA1F1) foram isolados os compostos trilongins BI-BIV. Estes apresentaram atividade inibitória ao fitopatógeno C. gloeosporioides, com MIC de 40, 320, 160 e 310 μM, respectivamente. As trilongins BI-BIV foram testadas contra a subunidade ChTL do proteassoma e apresentaram os valores de IC50 de 6,5 ± 2,7; 4,7 ± 1,8; 6,3 ± 2,2; e 2,7 ± 0,5 μM. Os compostos também foram testados ex vivo contra os amastigotas intracelulares de Leishmania (L.) infantum, mas não apresentaram seletividade. A partir do extrato bruto de Neopestalotiopsis sp. (código AM29), foi isolado um composto de massa molecular 366,0570 Da (que pode ser inédito na literatura), o qual apresentou atividade inibitória ao fitopatógeno P. sojae, com MIC de 312 μg mL-1. A partir dos extratos brutos de Aspergillus sp. e Diaporthe sp. foram isolados 9 compostos, cujas frações precursoras apresentaram atividade contra as bactérias formadoras de biofilme S. aureus e P. aeruginosa. Para a identificação desses compostos, análises adicionais precisam ser realizadas. Este é o primeiro relato do isolamento dos compostos 5,7-dimetoxiftalida e metil orselinato do basidiomiceto Hymenochaete-like. Também está sendo relatada pela primeira vez a atividade antifúngica das trilongins a C. gloeosporioides e contra o alvo do proteassoma, assim como o isolamento de um possível novo composto de Neopestalotiopsis sp. e sua atividade contra P. sojae. / Secondary metabolism products, also known as natural products, represent an unexplored source of compounds with biological activity. Microorganisms, including endophytes, are promising sources of these substances. Thus, this research aimed to obtain compounds with biotechnological importance produced by endophytic fungi isolated from leaves of the plants Anthurium alcatrazense, Begonia venosa and B. fischeri. To this end, 5 endophytic fungal strains isolated from these plants (codes P7BDA1F2, P8BDA1F1, AM29, D28 and D29) were studied. The identification of these microorganisms was carried out by morphological and molecular analyzes, revealing that these strains are Hymenochaete-like, Trichoderma sp., Neopestalotiopsis sp., Aspergillus sp. and Diaporthe sp., respectively. From the crude extract of Hymenochaete-like (code P7BDA1F2) the compounds 5,7-dimethoxyphthalide and methyl orselinate were isolated, which were tested against Leishmania (L.) infantum and proteasome target and showed no activity. From the crude extract of Trichoderma sp. (code P8BDA1F1) the trilongins BI-BIV were isolated. These compounds presented inhibitory activity to the plant pathogen C. gloeosporioides, with MIC of 40, 320, 160 and 310 μM, respectively. The trilongins BI-BIV were tested against the ChTL subunit of the proteasome and showed IC50 values of 6.5 ± 2.7, 4.7 ± 1.8, 6.3 ± 2.2, 2.7 ± 0, 5 μM. The compounds were also tested ex vivo against the intracellular amastigotes of Leishmania (L.) infantum, but did not show selectivity. From the crude extract of Neopestalotiopsis sp. (code AM29), a compound with molecular mass 366.0570 Da (which can be unpublished in the literature) was isolated, which presented inhibitory activity to the plant pathogen P. sojae, with MIC of 312 μg mL-1. From the crude extracts of Aspergillus sp. and Diaporthe sp. 9 compounds were isolated, whose precursor fractions showed activity against the biofilm forming bacteria S. aureus and P. aeruginosa. For the identification of these compounds, additional analyzes need to be performed. This is the first report of the isolation of the compounds 5,7-dimethoxyphthalide and methyl orselinate from the basidiomycete Hymenochaete-like. The antifungal activity of trilongins to C. gloeosporioides and against the proteasome target is also being reported for the first time, as well as the isolation of a possible new compound from Neopestalotiopsis sp. and its activity against P. sojae.
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Ácido salicílico e mancozebe na cultura de feijão: parâmetros fisiológicos e componentes de produção / Salicylic acid and mancozeb in common bean crop: physiological parameters and production componentsPaulo Junior, João 15 January 2018 (has links)
A utilização de fungicidas multissítios, como é o caso do mancozebe (Mz), tem crescido bastante nas últimas safras com o intuito de evitar a resistência de fungos a fungicidas sítio-específico, além de aumentar sua eficiência no controle de doenças. No entanto, além do efeito fungicida, em áreas que receberam a aplicação destes produtos tem sido observados efeitos fisiológicos nas plantas, que vão desde a redução do nível de estresse até o aumento no teor de clorofila, o que repercute na produtividade. Associado a isto, o ácido salicílico também se torna uma estratégia importante, visto que este hormônio promove redução do nível de estresse, além de atuar na indução de resistência contra doenças. No entanto, pouco se sabe sobre os efeitos fisiológicos que este produtos isolados e em associação podem causar na cultura do feijoeiro comum. Portanto, o objetivo do trabalho foi avaliar o efeito da aplicação de Mz e ácido salicílico em características fisiológicas, componentes de produção e produtividade da cultura do feijoeiro comum. O ensaio foi conduzido em área comercial de produção de feijão irrigado em Patos de Minas-MG entre os meses de abril e agosto de 2017. Foi adotado delineamento em blocos casualizados em esquema fatorial 5 x 2 constituído por cinco doses de ácido salicílico (0, 50, 100, 200 e 400 mg ha-1) associados ou não a aplicação de Mz na dose de 400 g ha-1 e cinco repetições. Para cada tratamento, foram realizadas três aplicações, sendo estas aos 22, 37 e 52 dias após a semeadura. Foram realizadas avaliações de massa de matéria seca de vagens, produtividade, atividade da nitrato redutase, urease, enzimas antioxidantes (SOD, POD e CAT), teor de prolina, peróxido de hidrogênio e peroxidação de lipídios. A aplicação de Mz proporcionou o aumento da atividade da SOD, sendo assim também ocorreu o incremento POD e da CAT, consequentemente reduzindo o peróxido de hidrogênio em folhas de feijoeiro, o que manteve baixo os níveis de peroxidação lipídica. Além disso, os níveis de prolina caíram significativamente após a aplicação de Mz. Quando se utilizou o Mz associado com o ácido salicílico, se observou que ocorreu o aumento da atividade da SOD, atingindo o seu pico para a dose de 200 mg ha-1. Além disso o ácido salicílico promoveu o incremento de prolina quando associado ao Mz, em relação ao tratamento com Mz isolado. Nesta situação a prolina foi reponsável pela eliminação de H2O2, mantendo os níveis das enzimas SOD e CAT reduzidos. Com os baixos níveis de peróxido de hidrogênio a peroxidação lipídica reduziu significativamente. As aplicações de Mz refletiram na maior massa seca de vagens e implicando na maior produtividade do feijoeiro, ao passo que o ácido salicílico proporcionou o aumento de produtividade, porém dependente da dose utilizada que apresentou o melhor resultado na dose de 200 mg ha-1. / The use of multisite fungicides, such as mancozeb (Mz), has grown in the last few seasons in order to avoid fungal resistance to specific-site fungicides, in addition to increasing its efficiency in disease control. However, in addition to the fungicidal effect, in areas that have received the application of these products, physiological effects have been observed in the plants, ranging from the reduction of the stress level to the increase in chlorophyll content, which has an impact on productivity. Associated with this, salicylic acid also becomes an important strategy, since this hormone promotes reduction of stress level, besides acting in the induction of resistance against diseases. However, knowledge about physiological effects is well limited on what isolated and associated products can cause on the common bean crop. Therefore, the objective of this work was to evaluate the effect of Mz and salicylic acid applications on physiological characteristics, production components and productivity of the common bean crop. The experiment was carried out in a commercial area of irrigated common bean production in \'Patos de Minas\'-MG between April and August 2017. A randomized complete block design was used in a 5 x 2 factorial scheme consisting of five doses of salicylic acid (0, 50, 100, 200 and 400 mg ha-1) with or without the application of Mz at a dose of 400 g ha-1 and five replications. For each treatment, three applications were performed, being these at 22, 37 and 52 days after sowing. Nitrate reductase activity, urease, antioxidant enzymes (SOD, POD and CAT), proline content, hydrogen peroxide and lipid peroxidation were evaluated. The application of Mz provided the increase of the SOD activity, thus also the POD and CAT increase, consequently reducing the hydrogen peroxide in leaves of common bean, which kept the levels of lipid peroxidation low. In addition, proline levels dropped significantly after application of Mz. When Mz associated with salicylic acid was used, it was observed that the increase in SOD activity occurred, reaching its peak at the 200 mg ha-1 dose. In addition, salicylic acid promoted the increase of proline when associated with Mz, in relation to the treatment with Mz alone. In this situation proline was responsible for the elimination of H2O2, keeping the levels of the SOD and CAT enzymes reduced. With the low levels of hydrogen peroxide the lipid peroxidation reduced significantly. The Mz applications reflected in the higher dry mass of pods and implying a higher yield of common bean, while salicylic acid provided the increase in productivity, however, depending on the dose used, which presented the best result at 200 mg ha-1.
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Sclerotinia sclerotiorum em sementes de soja: sobrevivência, efeito na germinação, tamanho de amostra para análise e eficiência in vitro de fungicidas / Sclerotinia sclerotiorum in soybean seeds: survival, effect on germination, sample size for analysis and in vitro efficiency of fungicidesCamargo, Meyriele Pires de 27 January 2014 (has links)
O fungo Sclerotinia sclerotiorum, agente causal do mofo branco, encontra-se disseminado em todo o país e afeta mais de 400 espécies de plantas, dentre elas a cultura da soja, causando danos consideráveis no rendimento. A transmissão do patógeno ocorre por meio de sementes contendo micélio dormente ou pela presença de escleródios no lote, os quais podem permanecer viáveis por um longo período, dificultando o manejo da doença. Este trabalho teve como objetivos verificar a viabilidade do patógeno em sementes durante o armazenamento e seu efeito sobre o poder germinativo; comparar tamanhos de amostras de sementes visando à detecção do fungo; e avaliar a sensibilidade in vitro de S. sclerotiorum a fungicidas. Para avaliação da sobrevivência do patógeno, sementes de soja foram inoculadas, artificialmente, com três isolados de S. sclerotiorum, e armazenadas em duas condições, câmara fria e seca (20 ºC e 45% UR) e ambiente não controlado, durante oito meses. A cada dois meses foram realizados testes de sanidade pelo meio de cultura ágar-bromofenol (Neon), utilizando-se 4 repetições de 100 sementes, e testes de germinação, com 4 repetições de 50 sementes, pelo método do rolo de papel. No experimento de amostragem foram avaliadas dez amostras de sementes de soja pelo método do meio Neon, comparando-se quatro tamanhos de amostra: 400, 800, 1600 e 2400 sementes. Para avaliação da sensibilidade in vitro de S. sclerotiorum a fungicidas, foram utilizados 13 ingredientes ativos, em 7 doses e 5 repetições. Os valores da concentração inibitória de 50% (CI50) e 100% (CI100) foram estimados com base na percentagem de inibição do crescimento micelial. Além disso, realizaram-se a quantificação e pesagem dos escleródios formados após 15 dias de incubação. A presença do patógeno S. sclerotiorum, afetou negativamente a germinação das sementes, com redução média de 32% em relação à testemunha. Verificou-se diferença entre os isolados com relação à agressividade. O patógeno sobreviveu nas sementes em ambos os ambientes de armazenamento, porém, em ambiente controlado a redução na geminação das sementes foi de 14% e na incidência do fungo de 16%, enquanto que, em laboratório, esta redução foi de 23% na germinação e de 62% na incidência. Não houve diferença estatística com relação à quantidade de sementes amostradas na detecção de S. sclerotiorum, entretanto, constatou-se maior frequência de ocorrência do patógeno à medida que o número de sementes amostrado foi maior. Todos os fungicidas foram capazes de reduzir o crescimento micelial de S. sclerotiorum, bem como a produção de escleródios, sendo que os ingredientes ativos piraclostrobina, carbendazim, tiabendazol e tiofanato metílico, além de apresentarem CI50 inferior a 1 mg L-1, também inibiram totalmente a formação de escleródios em concentrações inferiores a 5 mg L-1. / The fungus Sclerotinia sclerotiorum, the causal agent of white mold is spread throughout the country and affects more than 400 species of plants, including soybean, causing considerable decrease in yield. The pathogen transmission occurs through seeds with dormant mycelium or by the presence of sclerotia in the lot, which can remain viable for a longer period, making hard the disease management. This study aimed to verify the viability of the pathogen in seeds during the storage period and its effect on germinative power; compare sizes of seed samples to determine the presence of the fungus; and to evaluate the in vitro sensibility of S. sclerotiorum to fungicides. To determine the pathogen survival, soybean seeds were inoculated artificially with three isolates of S. sclerotiorum, and stored into two conditions, cold and dry chamber (20 °C and 45% RU) and in uncontrolled environment, for eight months. Every two months health tests were performed by culture media bromophenol agar (Neon), using 4 repetition of 100 seeds, and germination tests, with 4 repetition of 50 seeds, by the method of the paper roll. During the experiment of sampling, ten samples of soybean seeds were evaluated by the method of media Neon, comparing four sample sizes: 400, 800, 1600 and 2400 seeds. To evaluate the in vitro sensibility of S. Sclerotinia to fungicides were used 13 active ingredients, in 7 doses and 5 repetitions. The values of the 50% inhibitory concentration (IC50) and 100% (IC100) were estimated based on the percentage inhibition of the mycelial growth. In addition, it was performed the quantification and weighing of sclerotia formed after 15 days of incubation. The pathogen S. sclerotiorum in soybean seeds affected negatively the germination of seeds, with an average reduction of 32% compared to the control. There was difference between the isolates in relation to aggressiveness. The pathogen survived in seeds in both storage environments, however, under controlled environment, the decrease in the germination of the seeds was 14% and in its incidence was 16%, while in laboratory this reduction was 23% in the germination and 62% in the incidence. There was no statistical difference in the quantity of seeds sampled in the detection of S. sclerotiorum, however, a higher frequency of pathogen occurrence was verified as the number of sampled seeds was enlarged. All fungicides were able to reduce the mycelial growth of S. sclerotiorum and sclerotia production, and the active ingredients pyraclostrobin, carbendazim, thiabendazole and thiophanate methyl, besides having IC50 of less than 1 mg L-1 also completely inhibited the formation of sclerotia in concentrations less than 5 mg L-1.
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AlteraÃÃes hematolÃgicas e funcionais causadas por venenos de subespÃcies brasileiras de Crotalus durissus e suas fraÃÃes isoladas / HematolÃgicas and functional alterations caused by venom of Brazilian subspecies of Crotalus durissus and its isolated fractionsIÃda Pereira de Souza 27 November 2006 (has links)
FundaÃÃo de Amparo à Pesquisa do Estado do Cearà / Os acidentes ofÃdicos de serpentes representam um sÃrio problema de SaÃde PÃblica nos paÃses tropicais, tanto pela freqÃÃncia com que ocorrem e/ou pela morbi-mortalidade que ocasionam. As serpentes do gÃnero Crotalus estÃo representadas no Brasil pela espÃcie Crotalus durissus, a qual se divide em seis subespÃcies. Nosso trabalho teve como objetivo avaliar os efeitos dos venenos das serpentes Crotalus durissus cascavella originadas do estado do Cearà (Cdcc) e MaranhÃo (Cdcm); Crotalus durissus collilineatus (Cdcol); Crotalus durissus ruruima (Cdru) e suas fraÃÃes, Crotoxina (CTXru) e Fosfolipase A2 (PLA2ru), nos processos biolÃgicos de espraiamento celular, fagocitose, atividade fungicida e alteraÃÃes hematolÃgicas. Camundongos Swiss, machos, foram inoculados por via intraperitonial com os venenos descritos acima, nas doses de 120, 50, 27, 20 (venenos) e 10Âg/Kg (fraÃÃes), respectivamente. Duas horas apÃs inoculaÃÃo foram coletadas amostras de sangue do plexo orbital e o exsudato peritonial. A anÃlise estatÃstica utilizada foi o teste t de Student com significÃncia de 95%. Os animais tratados foram comparados com o grupo controle (inoculados com salina 0,9%). Cdcm e a CTXru causaram as maiores alteraÃÃes no eritrograma. 37,5% dos eritrÃcitos apresentaram morfologia macrocÃtica e microcÃtica; 25,5% hipocrÃmia; 25% com anisocitose e presenÃa de policromasia. Foram observados 16,8% de corpÃsculos de Howell Jolly. A contagem global de leucÃcitos foi reduzida significantemente apÃs administraÃÃo do Cdcc (82,9%), Cdcm (70,1%) e Cdru (83,8%). A celularidade foi alterada depois da inoculaÃÃo de Cdcc, Cdru e CTXru, em todos os tipos de cÃlulas. A contagem global de cÃlulas do peritÃnio aumentou apÃs inoculaÃÃo de Cdcc, Cdcol, Cdru e a CTXru. Em adiÃÃo, o macrÃfago foi à cÃlula predominante na contagem diferencial de cÃlulas peritoniais, contudo, somente a Cdcol apresentou significÃncia estatÃstica para macrÃfago (62,3%). Foi encontrada reduÃÃo significativa do espraiamento celular depois da administraÃÃo de todos os venenos variando de 52,7 a 65,7%. A fagocitose foi estatisticamente reduzida pela Cdcc nos perÃodos de 30, 60, 90 e 120 minutos. Cdru reduziu a fagocitose apenas em 30, 60 e 120 minutos, Cdcm em 30 e 90 minutos e CTXru nos tempos de 60 e 120 minutos. A Cdcol, e a CTXru mostraram significÃncia na atividade fungicida contra C. albicans nos perÃodos de 30, 60, 90 e 120 minutos, mas a Cdcc mostrou resultado similar em 60, 90 e 120 minutos. Conclui-se que o veneno interfere diferentemente na resposta hematolÃgica e funcional. Em adiÃÃo pode-se postular que os macrÃfagos foram responsÃveis por estas alteraÃÃes. Estudos futuros deverÃo ser realizados na perspectiva da identificaÃÃo de provÃvel aÃÃo fungicida de venenos ofÃdicos e suas fraÃÃes / Venomous snake accidents represent a serious public health problem in tropical countries, as much as for their frequency of occurrence and/or morbidity and mortality that they caused. In Brazil, the genus Crotalus comprise only one species, termed Crotalus durissus, which is divided into six subspecies. The aim of our study was to evaluate the effects promoted by venoms of Crotalus durissus cascavella, originated from the States of Cearà (Cdcc) and MaranhÃo (Cdcm); C. durissus collilineatus (Cdcol); C. durissus ruruima (Cdru) and its isolated components, such as crotoxin (CTXru) and phospholipase A2 (PLA2ru), in the biological processes of cellular spreading, phagocytosis, hematological alterations and antifungal activity. Male Swiss mice were inoculated intraperitoneally with the venom doses of 120, 50, 27, 20, 10 and 10 Âg/Kg, respectively to the snakes described above. After two hours of inoculation blood samples and exudate were collected from orbital plex and peritoneum, respectively. Statistical evaluation was performed using Student-T test with significance level set at 95%. We compared the treated animals with a control group, where animals were inoculated with saline 0.9%. Cdcm and CTXru caused the most severe alterations in the erythrogram. We noticed that 37.5% of the erythrocytes showed macrocytic and microcytic morphology; 25.5% were hipocromic; 25% showed anisocytosis and the presence of polycromasia. We also found Howell Jolly bodies in 16.8% of the examined erythocytes. The total counting of leukocytes was reduced statistically after administration of Cdcc (82.9%), Cdcm (70.1%) and Cdru (83.8%). Cellularity was altered after the inoculation of Cdcc, Cdru and CTXru for all evaluated cells. We noticed a statistic increase of peritoneum total cells caused by Cdcc, Cdcol, Cdru and CTXru. In addition, macrophage was the most predominant cell after peritoneum differential cell counting. However, only Cdcol showed a statistic increase of macrophages (62.3%). We found significant reduction of cellular spreading after administration of all venoms ranging from 52.7 to 65.7%. Phagocytosis was statistically reduced by Cdcc in the periods of 30, 60, 90 and 120 minutes. However, Cdru reduced phagocytosis only at 30, 60 and 90 minutes, Cdcm decreased phagocytosis at 30 and 90 minutes and CTXru in the periods of 60 and 120 minutes. Cdcol and CTXru showed significant fungicide activity against C. albicans in the periods of 30, 60, 90 and 120 minutes, but Cdcc showed similar results at 60, 90 and 120 minutes. We conclude that distinct venoms interfered differently in the intensity of each functional and hematological response. In addition, we postulate that macrophages maybe partially responsible for these alterations. Further studies should be evaluated for the use of venoms as fungicides
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Indução de resistência em milho safrinha por acibenzolar-s-metil e mananoligossacarídeo fosforilado / Resistance induction in off-season maize by acibenzolar-s-methyl and phosphorylated mannanoligosaccharideFontoura, Darci da 16 August 2013 (has links)
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Previous issue date: 2013-08-16 / In recent years farmers have gradually increased the use of chemical pesticides to mitigate the losses from diseases in corn. An alternative to reduce the use of such products may be the application of resistance inducer, taking advantage of latent genetic resistance, causing less negative impact on the environment and human health. Although, there may be an energetic expense with this induction which could hold up this form of control. With the objective of verifying the resistance induction in off-season (safrinha) corn by acibenzolar-S-methyl (ASM) and phosphorylated mannanoligosaccharide (MOS), experiments were conducted with four corn hybrids (30F90H, 30K64H, 30K73H and P4042H) in two consecutive years (2011 and 2012) in off-season environment in the municipality of Toledo - PR. In addition to the resistance inducers, a fungicide (azoxystrobin + ciproconazole) was applied, as well as water as a check. A randomized block design, with a triple factorial scheme, plus an additional treatment and three replications was used. The factors were: (A) hybrid in four levels (B) product in three levels and, (C) dose in three levels. The additional treatment was carried out with water spray, representing the level zero of the dose factor. The application of the products happened in phenological stages V8 and VT. There was observed an incidence of diverse plant pathogens in the two consecutive years, on the same hybrids, in the same location and under the same manageable conditions, probably due to diverse climatic conditions from one year to another, although hypersensitive response occurred in both years under MOS treatment. In the 2011 off-season, there was an incidence of Exserohilum turcicum, a necrotrophic pathogen, and no damaged kernels were found, while in the 2012 off-season, there was an incidence of Puccinia polysora, a biotrophic pathogen, plus significant percentage of damaged kernels. None of the applied products affected the traits plant height, ear placement, content of foliar nitrogen and percentage of damaged kernels. There was significant effect of resistance inducers on the hypersensitivity response and root lodging, without reducing the productivity compared to the water treatment. MOS increased hypersensitivity response severity and ASM reduced root lodging. The fungicide treatment (azoxystrobin + ciproconazole) showed better control of foliar diseases (P. polysora and E. turcicum) and higher yield in both years, and in 2011 it reduced stalk lodging and increased the mass of thousand kernels / Nos últimos anos os produtores tem aumentado gradativamente o uso de defensivos químicos para amenizar os prejuízos com doenças da cultura do milho. Uma alternativa visando diminuir o uso de tais produtos poderá ser a aplicação de indutores de resistência, tirando proveito da resistência genética latente, gerando menor impacto negativo sobre o meio ambiente e a saúde humana. Entretanto, poderá haver elevado dispêndio de energia nessa indução que torne inviável essa forma de controle. Objetivando verificar a indução de resistência em milho safrinha pelos indutores acibenzolar-S-metil (ASM) e mananoligossacarídeo fosforilado (MOS), foram conduzidos experimentos com quatro híbridos de milho (30F90H, 30K64H, 30K73H e P4042H), em dois anos consecutivos (2011 e 2012), na safrinha no município de Toledo PR. Além dos indutores de resistência, realizou-se também tratamento com fungicida (azoxistrobina + ciproconazol), além de água como testemunha. Foi utilizado delineamento experimental de blocos casualizados com esquema fatorial triplo e tratamento adicional, em três repetições. Os fatores testados foram: (A) híbrido em quatro níveis, (B) produto em três níveis e, (C) dose em três níveis. O tratamento adicional foi realizado com pulverização de água, representando o nível zero do fator dose. As aplicações dos produtos aconteceram nos estádios fenológicos V8 e VT. Observou-se incidência de patógenos distintos nos dois anos consecutivos sobre os mesmos híbridos, no mesmo local e nas mesmas condições de manejo, provavelmente em função da condição climática distinta de um ano para o outro, embora a resposta de hipersensibilidade tenha acontecido em ambos os anos no tratamento com MOS. Na safrinha de 2011 houve incidência de Exserohilum turcicum, um patógeno necrotrófico, e não foram encontrados grãos ardidos, enquanto que na safrinha de 2012 houve incidência de Puccinia polysora, um patógeno biotrófico, além de significativo percentual de grãos ardidos. Nenhum dos produtos aplicados influenciou as características altura de planta, altura de inserção de espiga, teor de nitrogênio foliar e percentual de grãos ardidos. Houve efeito dos indutores de resistência quanto à resposta de hipersensibilidade e acamamento em função da raiz, sem redução da produtividade em relação ao tratamento com água. MOS aumentou a severidade da resposta de hipersensibilidade e acibenzolar-S-metil reduziu o acamamento em função da raiz. O tratamento com fungicida (azoxistrobina + ciproconazol) apresentou o melhor controle das doenças foliares (P. polysora e E. turcicum) e a maior produtividade em ambos os anos, sendo que em 2011 ainda reduziu o acamamento de colmo e aumentou a massa de mil grãos
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Effects of fungicide and host resistance on the epidemiology of wheat blast and on plant physiology and changes in the source-sink relationship on wheat during the infection process of Pyricularia oryzae / Efeito de fungicida e resistência de hospedeiro na epidemiologia da brusone do trigo e fisiologia da planta e alterações na relação fonte-dreno em trigo durante o processo de infecção de Pyricularia oryzaeRios, Jonas Alberto 17 February 2016 (has links)
Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2017-06-29T18:34:52Z
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Previous issue date: 2016-02-17 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Dois experimentos (Exp. 1 e Exp. 2) foram conduzidos em condições de campo para determinar o desenvolvimento da brusone em espigas, bem como a performance fisiológica e produtiva das cultivares BR-18 (moderadamente resistente) e Guamirim (suscetível) inoculadas com Pyricularia oryzae e tratadas (+F) ou não (‒F) com o fungicida epoxiconazole (13,3%) + pyraclostrobina (5%). Relativo a Guamirim ‒F, BR-18 ‒F (efeito da resistência) resultou em redução de 44 e 64% na incidência final e severidade final, respectivamente, no Exp. 1, e 3 e 49%, respectivamente, no Exp. 2. Para a Guamirim +F (efeito do fungicida) houve redução de 65 e 77% na incidência final e severidade final, respectivamente, no Exp. 1, e 64 e 95%, respectivamente, no Exp. 2. Similarmente, houve redução maior que 75 % na taxa temporal de progresso no tratamento combinando a aplicação do fungicida e resistência de hospedeiro. Resultados obtidos na análise de regressão indicaram que a severidade encontrada nas espigas e folhas durante o período de 10-14 dias após a antese (daa) proporcionou uma maior perda de produtividade comparado a severidade encontrada aos 18-22 daa, e que a severidade da brusone nas espigas possui maior efeito negativo comparado a severidade encontrada nas folhas. Relativo a Guamirim ‒F, houve aumento de 0.3 e 16 % na produtividade dos grãos para BR-18 ‒F, 20 a 61% para Guamirim +F e 26 e 83% para BR-18 +F nos Exp. 1 e Exp. 2, respectivamente. Os tratamentos envolvendo aplicação do fungicida e cultivar resistente manteve a integridade das folhas (baseado em HAD, HLAI, HAA e HRI) e performance fotossintética (baseado em Fv/Fm, Fm, Y(II), e Y(NPQ)) das espigas e folhas em relação ao tratamento cultivar Guamirim ‒F. Em conclusão, os resultados do presente estudo sugerem que a integração do tratamento com fungicida e resistência de cultivar como prática de manejo para o controle da brusone em espigas. Adicionalmente, dois experimentos foram conduzidos em condições de casa de vegetação para avaliar as alterações associadas com a produção e particionamento de fotoassimilados entre a espiga e a folha bandeira em plantas de trigo infectadas com P. oryzae. Ambos experimentos foram inoculados aos 10 e 20 daa com suspensão de esporos de P. oryzae. Os resultados demonstraram uma redução dos parâmetros de fluorescência da clorofila a (Fm, Fv/Fm YII and Y(NO)) em folhas bandeiras e espigas infectadas associada a menor concentração de clorofila a + b, carotenoides e redução da capacidade de fixação do CO2 pela RuBisCO em folhas bandeiras infectadas. Em folhas bandeiras e grãos obtidos de espigas infectadas, houve redução na concentração de açúcares solúveis com um aumento da razão da concentração de hexoses sobre sacarose em folhas bandeiras. Em folhas bandeiras, houve menor atividade da sacarose fosfato sintase (SPS) e menor expressão do gene sacarose sintase associadas ao aumento da expressão e atividade das invertases. Estas alterações relacionadas a síntese e degradação da sacarose sugerem uma condição dreno dos tecidos foliares infectados. No estágio final de infecção ocorreu uma redução da concentração de amido nos grãos e aumento da sua concentração em folhas bandeiras. Adicionalmente, houve redução na atividade e expressão da ADP-glicose pirofosforilase associada com a menor expressão dos genes β- e α-amilase em folhas bandeiras e espigas. Em conclusão, os efeitos negativos da brusone na qualidade e produtividade dos grãos em trigo podem ser associados com alterações na produção e particionamento de carboidratos durante o processo de formação dos grãos. / Two field experiments (Exp. 1 and Exp. 2) were carried out to evaluate the spike blast development as well as the physiological performance and grain yield of wheat cultivars BR-18 (partially resistant) and Guamirim (susceptible) inoculated with Pyricularia oryzae and treated or untreated with the fungicide 13.3% epoxiconazole + 5% pyraclostrobin. Relative to Guamirim-untreated, BR-18-untreated (resistance alone) led to 44 and 64% control of final incidence and severity, respectively, in Exp. 1, and 3 and 49% control, respectively, in Exp. 2. Guamirim-treated (fungicide alone) led to 65% control of incidence and 77% control of severity in Exp. 1, and 64% control of incidence and 95% control of severity in Exp. 2. Similarly, there was reduction higher than 75 % in the temporal rate of spike blast progress when host resistance and fungicide were combined. Results from regression analyses indicated that spike and leaf blast severity at 10-14 days after anthesis resulted in greater yield losses (highest negative slope) than severity at 18 to 22 days after anthesis, and that spike blast severity had a greater negative effect on yield than leaf blast severity. Relative to Guamirim-untreated, there was a 0.3 and 16% increase in mean yield for BR-18-untreated (resistance alone), 20 and 61% increase for Guamirim treated (fungicide alone), and 26 and 83% for BR-18 treated (moderate resistance + fungicide) in Exp. 1 and 2, respectively. By virtue of their effects on blast severity, fungicide application and cultivar resistant resulted in higher measures of leaf health (mean HAD, HLAI, HAA and HRI) and photosynthetic performance (based on F v /F m , F m , Y(II), and Y(NPQ)) of both spikes and leaves than the untreated susceptible reference treatment. Results from this study suggesting that the integration of these strategies may be the best approach for managing spike blast and useful for future efforts to develop crop loss models and management guidelines for wheat blast. Additionally, two experiments were carried out in greenhouse conditions to assess the changes associated with photoassimilates production and their partitioning in source-sink relationship on flag leaves and spikes of wheat plants infected with Pyricularia oryzae. Flag leaves and spikes were inoculated at 10 days after anthesis (daa) (Exp. 1) and at 20 daa (Exp. 2) with a conidial suspension of P. oryzae. There was an impairment on chlorophyll a fluorescence parameters (analyzed by F m , F v /F m YII and Y(NO)) on the infected flag leaves and spikes coupled with reduced concentrations of chlorophyll a + b and carotenoids as well as lower capacity of CO 2 fixation by RuBisCO in the infected flag leaves. In these leaves and grains obtained from the infected spikes, there were lower concentration of soluble sugars and an increase on the hexoses to sucrose ratio on the flag leaves. In the infected flag leaves, there was a lower sucrose phosphate synthase (SPS) activity and lower expression of sucrose synthase (Susy) gene coupled with higher expression and activity of acid invertases. These alterations, associated with synthase and degradation of sucrose, suggestss a status sink in the infected flag leaves. At advanced stages of fungal infection, the concentration of starch was reduced on grains whereas on the infected flag leaves its concentration was kept elevated. There were reduction on the activity of ADP-glucose pyrophosphorylase and on the expression of ADP-glucose pyrophosphorylase genes and down regulation of β- and α-amylase expression at late stages of fungal infection on flag leaves and spikes. In conclusion, the greatest effect of blast on both grains quality and yield can be associated with alterations in the production and partitioning of carbohydrates during the grain filling process.
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Photosynthetic performance in soybean leaves caused by Epoxiconazole + Pyraclostrobin and Acibenzolar-S-Methyl and Phakopsora pachyrhizi infection / Photosynthetic performance in soybean leaves caused by Epoxiconazole + Pyraclostrobin and Acibenzolar-S-Methyl and Phakopsora pachyrhizi infectionBarros, Aline Vieira de 16 February 2016 (has links)
Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2018-01-22T17:24:08Z
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Previous issue date: 2016-02-16 / A ferrugem asiática da soja (FAS), causada pelo fungo Phakopsora pachyrhizi, é uma das doenças foliares mais importantes que afetam a produção de soja em todo o mundo. Este estudo teve como objetivo investigar o desempenho fotossintético (trocas gasosas, imagens da fluorescência da clorofila (Chl) a e concentração de pigmentos fotossintéticos) de plantas de soja pulverizadas com Acibenzolar-S-Metil (ASM) e com o fungicida Epoxiconazol + Piraclostrobina (Epo + Pyr) e inoculadas com P. pachyrhizi. Os sintomas da FAS progrediram muito mais rapidamente nas folhas das plantas do tratamento controle (inoculadas com água) em comparação com os tratamentos ASM e Epo + Pyr. Em geral, os valores para os parâmetros de trocas gasosas taxa líquida de assimilação de carbono, condutância estomática, concentração interna de CO 2 e taxa de transpiração aumentaram para as plantas infectadas pulverizadas com ASM ou Epo + Pyr em relação às plantas do tratamento controle. Os valores para os parâmetros de fluorescência inicial, fluorescência máxima, eficiência quântica máxima do fotossistema II, rendimento quântico efetivo do fotossistema II Y (II) e rendimento quântico de dissipação de energia regulado Y (NPQ) foram mantidos sempre superiores para os tratamentos ASM e Epo + Pyr em comparação ao tratamento controle nos estágios mais avançados da infecção pelo fungo. Em contraste, os valores para o parâmetro de rendimento quântico de dissipação de energia não regulado (Y(NO) reduziu significativamente para os tratamentos ASM e Epo + Pyr. As curvas para Y(II) diminuíram enquanto que as curvas para Y(NPQ) e Y(NO) aumentaram para as plantas dos tratamentos controle, ASM e Epo + Pyr em função da densidade de fluxo de fótons fotossintéticos. As concentrações de clorofilas e de carotenóides aumentaram significativamente para as plantas infectadas dos tratamentos ASM e Epo + Pyr em comparação com as plantas do tratamento de controle. Em conclusão, os resultados do presente estudo demonstram que a aplicação de ASM ou Pyr + Epo em pantas de soja, mas especialmente do fungicida, contribuíram para reduzir os efeitos negativos causados pela infecção por P. pachyrhizi e permitiu a manutenção do desempenho fotossintético das plantas infectadas. / Asian soybean rust (ASR), caused by Phakopsora pachyrhizi, is one of the most important foliar diseases affecting soybean production worldwide. This study aimed to investigate the photosynthetic performance (leaf gas exchange, chlorophyll (Chl) a fluorescence images and photosynthetic pigment pools) of soybean plants sprayed with Acibenzolar-S-Methyl (ASM) and with the fungicide Epoxiconazole + Pyraclostrobin (Epo + Pyr) and further inoculated with P. pachyrhizi. The ASR symptoms progressed much faster on the leaves of plants from the control treatment (water spray) in comparison to the ASM and Epo +Pyr treatments. In general, the values for the leaf gas exchange parameters net carbon assimilation rate, stomatal conductance to water vapor, internal CO 2 concentration and transpiration rate increased for the infected plants sprayed with ASM or Epo +Pyr in comparison to plants from the control treatment. The values for the parameters initial fluorescence, maximal fluorescence, maximal photosystem II quantum efficiency, effective photosystem II quantum yield (Y(II)) and quantum yield of regulated energy dissipation (Y(NPQ)) were consistently higher for the ASM and Epo +Pyr treatments in comparison to the control treatment at advanced stages of fungal infection. By contrast, the values for the parameter quantum yield of non-regulated energy dissipation (Y(NO) were significantly lower for the ASM and Epo +Pyr treatments. The curves for Y(II) decreased while the curves for Y(NPQ) and Y(NO) increased for plants from the control, ASM and Epo +Pyr treatments as a function of the photosynthetic photon flux density. The concentrations of total Chl and carotenoids significantly increased for the infected plants from the ASM and Epo +Pyr treatments in comparison to plants from the control treatment. In conclusion, the results of the present study demonstrat that the spray of either soybean plants with Epo + Pyr or ASM, but especially the former, contributed to reduce the negative effects caused by P. pachyrhizi infection and allowed a good photosynthetic performance of the infected plants. / Dissertação liberada do sigilo em 17/01/2018 pelo Orientador Prof. Fabrício de Ávila Rodrigues. Autorização anexada ao Termo.
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Produção em vaso e pós-colheita de hastes de pimentas ornamentais (Capsicum spp) / Potted production and postharvest of ornamental peppers stems (Capsicum spp.)França, Christiane de Fátima Martins 16 July 2015 (has links)
Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2015-12-04T16:39:26Z
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Previous issue date: 2015-07-16 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O cultivo de pimenteiras como planta ornamental de vaso e corte tem se expandido consideravelmente no Brasil e no mundo. Foi realizado um experimento durante a produção de pimentas ornamentais envasadas com o objetivo de avaliar o efeito do paclobutrazol no crescimento e qualidade ornamental de duas variedades comerciais de pimentas (Iracema Biquinho Vermelha e Bode Amarela), e em dois acessos do banco de germoplasma da Universidade Federal da Paraíba (2334PB e 2345PB). Outros cinco experimentos pós-colheita utilizando pimenteiras ornamentais de corte foram realizados. Quatro deles utilizando as cultivares ‘Rio Light Orange’ e ‘Cappa Rond Red’: 1- estágio de desenvolvimento e procedimentos na colheita, 2- duração e procedimentos do armazenamento a frio, 3-sensibilidade ao etileno e compostos anti- etileno, 4-tratamentos de desfolhação. O quinto experimento foi conduzido utilizando 10 cultivares de pimenteiras ornamentais, ‘Tall Round Yellow’, ‘Stromboli’, ‘Rooster’, ‘Rio Yellow’, ‘Rio Light Orange’, ‘On Top Round Orange’, ‘On Top Round Black’, ‘Cappa Round Red’, ‘Back Pearl’ e a cultivar 441525 da Universidade de Cornell, visando obter respostas pós-colheita a preservativos florais de hidratação e manutenção. No experimento de produção das pimenteiras envasadas, a utilização da concentração de 20 mg L-1 de paclobutrazol na variedade comercial Bode Amarela, e nas plantas do acesso 2345PB resultaram em plantas com altura adequada a finalidade de ornamentação, sem alterar as características dos frutos e sem apresentar sintomas de fitotoxidade. Nos experimentos pós-colheita, a vida de vaso de hastes da cultivar ‘Rio Light Orange’ foi prolongada quando colhidas com frutos parcialmente maduros. O estágio de desenvolvimento do fruto na colheita não afetou a vida de vaso da cultivar ‘Cappa Round Red’. Nas duas cultivares, quando colhidas e mantidas em água, as hastes mostraram menor incidência de murcha da folhagem. O armazenamento a frio, em água, foi tolerado por até uma semana pela cultivar ‘Rio Light Orange’ e por até duas semanas pela cultivar ‘Cappa Round Red’. Essas cultivares não responderam ao etileno exógeno na concentração de 1.0 μL L-1 for 16h, e agentes anti-etileno tiveram mínimo efeito nas características pós-colheita. Os tratamentos de desfolhação aplicados nesse estudo não mostraram clara resposta, portanto, não é possível fazer nenhuma recomendação quanto a remover com sucesso a folhagem de pimentas ornamentais sem reduzir a vida de vaso. Uso de solução de manutenção, independentemente do uso prévio de solução de hidratação, prolongou a vida de vaso das pimentas ornamentais ‘Black Pearl’, ‘Rooster’ e ‘Stromboli’. Em geral, o uso de solução de hidratação ou reduziu ou não teve efeito na vida de vaso e portanto, não deve ser usado. Além disso, uso de solução de manutenção manteve a folhagem túrgida por mais tempo. A vida de vaso das pimentas ornamentais ‘Rio Light Orange’ e ‘Cappa Round Red’ pode ser prolongada seguindo apropriados procedimentos de manuseio pós-colheita. O uso de solução de manutenção pode ser benéfico para à vida de vaso e a qualidade da folhagem de várias cultivares de pimentas testadas nesse estudo. / The peppers growth as a pot ornamental plant has been expanded considerably in Brazil and in the world. An experiment was conducted during the production of potted ornamental peppers in order to evaluate the effect of paclobutrazol in the growth and ornamental quality of two commercial varieties of peppers (Iracema Biquinho Vermelha and Bode Amarela), and in two accesses of the germoplasm bank of Federal University of Paraíba (2334PB and 2345PB). Other five postharvest experiments using cut ornamental peppers were conducted. Four of them using the cultivars ‘Rio Light Orange’ and ‘Cappa Round Red’: 1-harvest stage and procedures, 2-cold storage and duration, ethylene sensitivity and anti-ethylene compounds, 4-defoliation treatments. The fifth experiment was conducted using 10 varieties of ornamental pepper, ‘Tall Round Yellow’, ‘Stromboli’, ‘Rooster’, ‘Rio Yellow’, ‘Rio Light Orange’, ‘On Top Round Orange’, ‘On Top Round Black’, ‘Cappa Round Red’, ‘Back Pearl’ and the cultivar 441525 from Cornell University to identify postharvest responses to commercial hydrator and holding floral preservatives. In the ornamental pepper production, the use of paclobutrazol 20 ppm concentration in the commercial variety Bode Amarela and in the access 2345PB resulted in plants with suitable height for the purpose of ornamentation without changing the characteristics of fruits and without phytotoxicity symptoms. In the postharvest experiments, vase life of ‘Rio Light Orange’ stems was extended when harvested with fruits partially mature. The stage of development of the fruits at harvest did not affect the vase life of the cultivar 'Cappa Round Red'. In both cultivars, when harvested and kept in water, stems showed less incidence of wilted foliage. Cold storage, in water, was tolerated for up to one week for the cultivar ‘Rio Light Orange’ and for up to two weeks for the cultivar ‘Cappa Round Red’. These cultivars did not respond to exogenous ethylene at a concentration of 1.0 uL L-1 for 16h and anti-ethylene agents had minimal effect on postharvest characteristics. Defoliation treatments applied in this study did not show a clear response and therefore it is not possible make any recommendations on how to successfully remove the foliage of ornamental peppers without reducing vase life. The use of a holding solution, regardless of prior use of a hydrator solution increased vase life of ‘Black Pearl’, ‘Rooster’ and ‘Stromboli’ ornamental peppers. In general, use of a commercial hydrator either reduced or had no effect on vase life and thus, should not be used. Moreover, use of a holding solution kept the foliage turgid longer. Vase life of ‘Rio Light Orange’ and ‘Cappa Round Red’ ornamental peppers can be extended following proper postharvest handling procedures and the use of a holding solution can be beneficial on vase life and in the foliage quality of many cultivars of peppers tested in this study.
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Síntese de cinamatos contendo o núcleo isobenzofuranona e prospecção de bioatividades / Sythesis of cinnamates containing isobebzofuranone nucleous and prospection of bioactivitiesTomaz, Deborah Campos 24 February 2015 (has links)
Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2016-05-19T15:48:54Z
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Previous issue date: 2015-02-24 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O ácido cinâmico (e seus derivados) e as isobenzofuran-1(3H)-onas (fitalidas) constituem classes de compostos que apresentam diversas bioatividades de interesse farmacológico e agroquímico, dentre elas fungicida e citotóxica. Assim, o presente trabalho traçou como objetivos sintetizar uma série de cinamatos contendo o núcleo isobenzofuranona e avaliar suas atividades citotóxica e fungicida. Os compostos sintetizados apresentam a estrutura geral mostrada a seguir. Para a preparação dos cinamatos, inicialmente utilizou-se o processo de orto-alquilação do ácido 3-metoxibenzoico para a síntese do composto 6- metoxiisonbenzofuran-1(3H)-ona. Esta isobenzofuranona, por sua vez, foi submetida a um processo de desmetilação para produzir o derivado hidroxilado 6-hidroxiisobenzofuran-1(3H)-ona. Knoevenagel, foram preparados os Utilizando ácidos a reação de 4-fluorocinâmico, 4- metoxicinâmico, 3,4,5-trimetoxicinâmico, 4-nitrocinâmico, 4-bromocinâmico e 4-clorocinâmico, todos apresentando estereoquímica E, confirmado pela espectroscopia de RMN de hidrogênio, com relação à dupla ligação. Os ácidos foram obtidos com rendimentos variando entre 71% e 95% e as reações foram realizados empregando tanto aquecimento convencional quanto irradiação de micro-ondas. Os cinamatos contendo o núcleo isobenzofuranona foram preparados via reação de Steglich entre os derivados do âcido cinâmico e a 6-hidroxiisobenzofuran-1(3H)-ona. As reações foram realizadas empregando irradiação de micro-ondas e seis cinamatos inéditos foram obtidos com rendimentos variando de 54% a 76%. Os ensaios de avaliação de citotoxicidade contra a linhagem de célula tumoral promielocítica HL-60 revelaram que os ácidos 4-fluorocinâmico, 3,4,5-trimetoxicinâmico, 4-nitrocinâmico, 4-bromocinâmico e 4-clorocinâmico não foram capazes de inibir a viabilidade celular. Devido à baixa solubilidade em DMSO 0,4%, não foi possível avaliar o efeito citotóxico do (E)-3-(4- metoxifenil) acrilato de 3-oxo-1,3-diidroisobenzofuran-5-ila. Com respeito aos demais cinamatos, os compostos acrilato de (E)-3-(3,4,5-trimetoxifenil) acrilato de 3-oxo-1,3-diidroisobenzofuran-5-ila e acrilato de (E)-3-(4- nitrofenil) acrilato de 3-oxo-1,3-diidroisobenzofuran-5-ila foram capazes de inibir a viabilidade celular da linhagem HL-60 apresentando valores de IC 50 respectivamente iguais a 77,35 mol L -1 e 41,67 mol L -1 . Os demais cinamatos sintetizados não apresentaram atividade significativa contra a linhagem celular investigada. Os derivados do ácido cinâmico e os cinamatos foram também avaliados com relação ao halo de inibição do isolado do fungo Phytophthora palmivora. Os resultados obtidos mostraram porcentagens de inibição do crescimento da espécie fúngica variando entre 1,7% e 28,4%. O composto mais ativo contra a espécie fungica correspondeu ao ácido 4-flurocinâmico. / Cinnamic acid (and its derivatives) and isobenzofuran-1 (3H)- ones (phtalides) are a group of structurally diverse compounds presenting various bioactivites including fungicide and citoxicity. The objectives of the present investigation were to synthetize and evaluate the cytotoxic and fungicide activities of a series of cinnamates presenting the general structure shown below. The synthesis of the cinnamates was initiated by preparation of 6-methoxy isobenzofuran-1-(3H)-one. It was accomplished via ortho alkylation reaction of commercially available 3-methoxybenzoic acid. Then, the demethylation of 6-methoxy isobenzofuran-1-(3H)-one afforded the hidroxylated derivative 6- hydroxy isobenzofuran-1-(3H)-one. By using Knoevenagel condensation, 4- fluorocinnamic acid, 4-methoxycinnamic acid, 3,4,5-methoxycinnamic acid, 4- bromocinnamic acid and 4-chlorocinnamic acid were prepared. The compounds presented E stereochemistry for the double bound as confirmed by hydrogen NMR spectroscopy. The carboxylic acids were carried out using conventional heating as well as microwave irradiation. The preparation of the cinnamates was possible via Steglich reaction between 6-hydroxy isobenzofuran-1-(3H)-one and the prepared cinnamic acid derivatives. The carboxylic acids were obtained with yields ranging from 71% to 95%. The reactions were carried out using convencional heating as well as microwave irradiation and the new esters were obtained wit 54% to 76% yield. The cytotoxic assays conducted with HL-60 cancer cell line revealed that the cinnamic acid derivatives were not capable of inhibiting cell viability. Due to its low solubity in DMSO 0,4%, it was not possible to acess the cytotoxicity (E)-3-oxo-1,3-dihydroisobenzofuran-5-yl Concerning the cinnamates, the 3-(4-methoxyphenyl)acrylate. compounds (E)-3-oxo-1,3- dihydroisobenzofuran-5-yl 3-(3,4,5-trimethoxyphenyl)acrylate and (E)-3-oxo- 1,3-dihydroisobenzofuran-5-yl 3-(4-nitrophenyl)acrylate did inhibit cell viability presenting IC 50 values equal to 77,35 μmol L -1 and 41,67 μmol L -1 repectivaly. The antifungal activity was evaluated against Phytophtora palmivora by halo inhibition assay. The inhibition halo sizes were obtained using radial diffusion and dilution tests. It was found percentages of inhibition ranging from 1,7% to 28,4%. The most pronounced fungicide activity was associated with 4- fluorocinnamic acid. / Arquivo em PDF não confere com versão impressa, e-mail enviado para o departamento e demais interessados em 10/05/2016. Porém autora enviou mesmo arquivo.
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Ozônio como agente fungicida e de degradação de micotoxinas em híbridos de milho / Ozone as a fungicidal agent and degradation of mycotoxins in corn hybridsRibeiro, Daniel Francis 08 April 2016 (has links)
Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2016-08-15T18:21:12Z
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Previous issue date: 2016-04-08 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O milho é um dos cereais mais vulneráveis ao ataque de fungos, principalmente por espécies dos gêneros Fusarium, Aspergillus e Penicillium, além da contaminação por metabólitos secundários tóxicos produzidos por fungos (micotoxinas), sendo alguns desses compostos carcinogênicos a humanos e animais. Uma estratégia potencial para o controle de fungos e detoxificação de grãos nas unidades armazenadoras consiste no uso do ozônio. Características como alta reatividade, penetrabilidade e decomposição espontânea em um produto não tóxico (O 2 ) fazem do ozônio um desinfetante viável para garantir a segurança microbiológica dos produtos alimentícios. O gás age diretamente na superfície dos microrganismos e destrói sua parede celular. Objetivou-se com este trabalho avaliar a eficiência do gás ozônio na desinfecção de grãos de milho contaminados com fungos Aspergillus flavus, Fusarium verticillioides e Penicillium spp. e na degradação das fumonisinas B 1 e B 2 , além do efeito do processo nas características físico-químicas dos grãos. Foram utilizados grãos de milho dos híbridos 30F53H e AS1581 PRO, com teor de água de 12,8 e 13,5% em base úmida (b.u.), respectivamente, contaminados naturalmente com Aspergillus flavus, Fusarium verticillioides e Penicillium spp. Os grãos foram acondicionados em câmara de PVC (32 x 20 cm) composta por três compartimentos, cada um com capacidade para 800 g de grãos, e com conexões para injeção e exaustão do gás. A concentração utilizada de ozônio aplicada foi de 13,5 mg L -1 com fluxo de 1,0 L min -1 , em cinco períodos de exposição (12, 24, 36, 48 e 60 h). No controle, os grãos de milho foram submetidos ao tratamento com ar atmosférico, nas mesmas condições que o tratamento com ozônio. O índice de ocorrência de fungos foi avaliado pelo método de papel de filtro (“blotter test”). Para avaliar a capacidade detoxificante do gás ozônio, quantificou-se o teor de fumonisinas B 1 e B 2 nas amostras de grãos de milho, submetidas ou não ao processo de ozonização. A avaliação físico-química dos grãos foi realizada antes e depois de cada tratamento. Foram analisados os teores de água, lipídios, proteínas e cinzas. Para o híbrido 30F53H, o tempo de saturação calculado foi 41,74 min e a concentração residual do gás ozônio 8,72 mg L -1 . Dos resultados obtidos conclui-se que para o tempo de exposição de 60 h, os índices de ocorrência de A. flavus, Penicillium spp. e F. verticillioides para o híbrido AS1581 PRO reduziram o equivalente a 93,8; 99,7 e 99,3%, em relação ao controle. Para o híbrido 30F53H, os índices de ocorrência dos fungos A. flavus, Penicillium spp. e F. verticillioides apresentaram redução superior a 96% no tempo de exposição de 60 h. A concentração de 13,5 mg L -1 e 24 h de exposição ao ozônio reduziu o teor de fumonisinas B 1 e B 2 em 78,8 e 86,98%, respectivamente, para o híbrido 30F53H e para o híbrido AS1581 PRO a redução foi de 88,5% no teor de fumonisina B 1 e mais de 82% o teor de fumonisina B2. O teor de água, proteínas, lipídios e cinzas não foram alterados pela exposição dos híbridos ao gás ozônio na concentração de 13,5 mg L -1 , exceto para o híbrido AS1581 PRO nos tempos de exposição ao ozônio superiores a 48 h. O ozônio reduziu o teor de água dos grãos de milho do híbrido AS1581 PRO nos tempos de 48 e 60 h. Já para o híbrido 30F53H não foi observada diferença significativa nos teores de água, lipídios, proteína e cinzas entre o controle e o tratamento com ozônio. Portanto, nas condições adotadas, os resultados indicam que o ozônio se mostrou eficiente fungicida e detoxificante de grãos de milho sem alterar a qualidade físico-quimica dos mesmos. / Maize is one of the most vulnerable to fungal attack cereal, mostly species of Fusarium, Aspergillus and Penicillium besides the contamination by toxic secondary metabolites produced by fungi (mycotoxins), some of these compounds are carcinogenic to humans and animals. The ozone is a strategy for controlling fungi and detoxification of grain in warehousing units. Features such as high reactivity, penetrability and spontaneous decomposition in a non-toxic product (O 2 ) became ozone a viable disinfectant to ensure the microbiological safety of food products. The gas acts directly on the surface of microorganisms and destroys their cell wall. The objective of this study was to evaluate the ozone gas efficiency in the disinfection of corn kernels contaminated with Aspergillus flavus, Fusarium verticillioides and Penicillium spp. and the degradation of fumonisins B 1 and B 2 , and the effect of the process on the physicochemical characteristics of the grains. Hybrids maize 30F53H and AS1581 PRO were utilized in the experiment, with 12.8 and 13.5% moisture content on a wet basis, respectively, naturally contaminated with Aspergillus flavus, Fusarium verticillioides and Penicillium spp. The grains were packed in PVC chamber (32 x 20 cm) consisting of three compartments, each with a capacity of 800 g, with connections for gas injection and exhaust. The applied ozone concentration used was 13.5 mg L -1 with a flow of 1.0 L min -1 for five exposure times (12, 24, 36, 48 and 60 h). In control, maize grains were subjected to treatment with atmospheric air, the same conditions as treatment with ozone. The rate of occurrence of fungi was evaluated by blotter test. The fumonisin B 1 and B 2 content in samples of maize, whether or not subject to the ozonation process, was quantified to evaluate detoxication capacity of ozone gas. The physicochemical evaluation of grains was performed before and after each treatment. Water, lipids, proteins and ash levels were evaluated. For the hybrid 30F53H the calculated saturation time was 41.74 min and residual ozone gas concentration of 8.72 mg L -1 . From the results obtained it was concluded that for the 60 h exposure time, the occurrence rates of A. flavus, Penicillium spp. and F. verticillioides for hybrid AS1581 PRO reduced equivalent to 93.8, 99.7 and 99.3%, compared to the control. For hybrid 30F53H, the occurrence rates of fungi A. flavus, Penicillium spp. and F. verticillioides experiencing decreases greater than 96% in 60 h exposure time. The concentration of 13.5 mg L -1 and 24 h exposure to ozone reduced 78.8 e 86.98% fumonisin B 1 and B 2 content for the hybrid 30F53H. The reduction of fumonisin B 1 and B 2 content in the hybrid AS1581 PRO was 88.5% and more than 82%, respectively. Ozone reduced the water content of corn kernels hybrid AS1581 PRO in times 48 and 60 h. As for the hybrid 30F53H was no significant difference in water content, lipid, protein and ash between the control and treatment with ozone. Therefore, the adopted conditions, the results indicate that ozone was efficient fungicide and detoxication corn grain without changing the physical-chemical quality.
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