Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, 2014. / Submitted by Ana Cristina Barbosa da Silva (annabds@hotmail.com) on 2015-01-21T19:44:20Z No. of bitstreams: 1 2014_DeniseCarvalhoMello.pdf: 3318901 bytes, checksum: d5b24e27c85cc59c29695c0b5376c58d (MD5) / Approved for entry into archive by Ruthléa Nascimento(ruthleanascimento@bce.unb.br) on 2015-02-11T18:06:34Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_DeniseCarvalhoMello.pdf: 3318901 bytes, checksum: d5b24e27c85cc59c29695c0b5376c58d (MD5) / Made available in DSpace on 2015-02-11T18:06:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_DeniseCarvalhoMello.pdf: 3318901 bytes, checksum: d5b24e27c85cc59c29695c0b5376c58d (MD5) / A técnica mais utilizada para a análise dos fungicidas ditiocarbamatos envolve a determinação indireta do CS2 liberado após digestão ácida da matriz, e não distingue qual ditiocarbamato está presente na amostra. O objetivo deste estudo foi desenvolver e validar um método analítico para determinação de etilenobisditiocarbamatos (EBDC) e propinebe em alimentos por HPLC-UV. O mancozebe, ditiocarbamato mais utilizado no Brasil, foi utilizado com composto representante dos EBDC. As culturas testadas incluíram o repolho, couve, brócolis e goiaba. O primeiro método avaliado, de cromatografia de par iônico e detecção em 286 nm, não se mostrou satisfatório devido a dificuldades com o extrato e instabilidade do perfil cromatográfico dos analitos. O segundo método avaliado envolveu a decomposição dos ditiocarbamatos, metilação, extração/clean-up por QuEChERS, e cromatografia em fase reversa (detecção em 270 nm). Foram testados oito fases de clean-up e diferentes parâmetros da fase móvel (pH, vazão e gradiente). Os melhores resultados foram encontrados com clean-up com PSA/MgSO4/carvão ativado, fase móvel água:acetonitrila em gradiente e vazão de 1,1 mL/min (t=36 min). O método foi validado com LOQ de 0,2 mg/kg para o mancozebe e o propinebe (0,11 e 0,10 mg CS2/kg, respectivamente). Dezenove amostras de couve, brócolis, repolho, goiaba e caju foram analisadas pelo método HPLC-UV validado e pelo método convencional espectrofotométrico (CS2). Foram obtidos resultados positivos para CS2 para 4 amostras de goiaba, que foram confirmados como EBDC por HPLC-UV. Resultados positivos para CS2 foram obtidos para 10 amostras de brássicas (0,1-0,9 mg/kg), que não se confirmaram no método HPLC-UV, confirmando que estes alimentos fornecem resultados falsopositivos no método CS2. O método validado ainda precisa ser melhorado para eliminar alguns interferentes das amostras que co-eluem com os analitos de interesse. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / The most used method to determine dithiocarbamate fungicides in food involves the quantification of the CS2 generated after acid digestion of the matrix, and do not distinguish among the dithiocarbamates present in the sample. The objective of this study was to develop and validate a method for the direct determination of ethylenebisdithiocarbamates (EBDC) and propineb in food by HPLC-UV. Mancozeb, the most used dithiocarbamate in Brazil, was used as representative of the EBDC group. The matrices tested included cabbage, collard green, broccoli and guava. The first evaluated method, by ion pair chromatography and detection at 286 nm, did not give satisfactory results due to problems with the sample extract and instability of the analytes chromatographic profiles. The second method tested involved the decomposition of the dithiocarbamate, methylation, extraction by QuEChERS and reverse phase chromatography (detection at 270 nm). Eight clean-up phases and different mobile phase conditions (pH, flow and gradient) were tested. The best results were obtained using clean-up with PSA/MgSO4/activate charcoal, water:acetonitrile mobile phase in gradient at 1.1 mL/min (t=36 min). The method was validated at LOQ of 0.2 mg/kg for both mancozeb and propineb (0.11 and 0.10 mg CS2/kg, respectively). Nineteen samples of collard green, broccoli, cabbage, guava and cashew apple were analyzed by the validated HPLC-UV method and by the CS2 spectrophotometric method. Four guava samples gave CS2 positive results, which were confirmed as EBDC by HPLC-UV. Ten brassica samples also gave positive results for CS2 (0.1-0.9 mg/kg), which were not confirmed by HPLC-UV, agreeing with previous studies that show that these vegetable give false positive results for dithiocarbamates as CS2. The validated method still need to be improved to eliminate some matrix compounds that co-elute with the analytes of interest.

Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2017-03-23T14:09:27Z No. of bitstreams: 1 Romulo Diniz Cavalcante.pdf: 683087 bytes, checksum: 8124aad4adf327b8c664300dfebcb472 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-23T14:09:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Romulo Diniz Cavalcante.pdf: 683087 bytes, checksum: 8124aad4adf327b8c664300dfebcb472 (MD5) Previous issue date: 2013-02-25 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Stem rot caused by Lasiodiplodia theobromae is an important postharvest disease of papaya in Brazil. The disease symptoms start on the stem region and then progressing around the fruit. The tissues remain with soaked aspect and with progression of symptoms, lesions become dark brown and depressed. The infected area becomes gradually devoid of parenchymal tissue and fruits lose their consistency and strength. It is recommended that the disease control starts in the field and continue until the commercialization phase since the symptoms are difficult to be perceived until an advanced stage of maturation. The use of Fungicides is one of the main disease management measures. However, there are no data available on the sensitivity of L. theobromae to thiophanate methyl, the most common fungicide used in papaya orchards in Northeastern Brazil. Thus, the EC50 of 109 isolates of the fungus, representing five populations of the pathogen was estimated in vitro for the fungicide. Of the 109 isolates, 20,2% were non-sensitive (NS) to the fungicide with EC50 values greater than 300 mg ml-1, for the remaining 79.8% sensitive (S) isolates the average EC50 was 1.87 μg ml−1. The EC50 values for the NS isolates were significantly (P≤0.05) higher than those for the sensitive isolates. Seven components of fitness were measured for the 10 isolates with lower and high values of EC50. When the fitness components were evaluated, the non-sensitive (NS) isolates showed sporulation capacity significantly lower than the sensitive isolates, indicating a fitness costs. / A podridão peduncular causada por Lasiodiplodia theobromae é uma doença em pós-colheita importante na cultura do mamoeiro no Brasil. Os sintomas da doença iniciam na região do pedúnculo e então progride para todo o fruto. Os tecidos permanecem com aspecto encharcado e com a progressão dos sintomas, as lesões se tornam marrom escura e deprimida. A área infectada torna-se gradualmente desprovida de tecido parenquimatoso e os frutos perdem sua consistência e vigor. É recomendado que o controle da doença seja iniciado no campo e continue até a fase de comercialização, uma vez que os sintomas são difíceis de serem percebidos até um estádio avançado de maturação. O uso de fungicidas é uma das principais medidas de manejo da doença. Todavia, dados sobre a sensibilidade de L. theobromae a tiofanato metílico, fungicida comumente empregado em pomares de mamoeiros no Nordeste brasileiro são inexistentes. Sendo assim, a CE50 de 109 isolados do fungo, representando cinco populações do patógeno foi estimada in vitro para o fungicida. Dos 109 isolados, 20,2% foram não sensíveis (NS) ao fungicida com valores de CE50 superiores a 300 μg ml-1, para 79,8% dos isolados remanescente denominados de sensíveis (S), a média de CE50 foi 1,87 μg ml-1. Os valores da CE50 dos isolados NS foram significativamente (P≤0.05) superiores quando comparados com os isolados S. Sete componentes de adaptabilidade foram mensurados para os 10 isolados com menores e maiores valores de CE50. Quando foram avaliados os componentes de adaptabilidade, os isolados não sensíveis apresentaram capacidade de esporulação significativamente inferior aos isolados sensíveis, indicando um custo de adaptabilidade.

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2018-03-14T13:55:45Z No. of bitstreams: 1 Kaliny Veiga Pessoa da Silva.pdf: 1645641 bytes, checksum: 7d934fe1a156047987054c35f1981b65 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-03-14T13:55:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Kaliny Veiga Pessoa da Silva.pdf: 1645641 bytes, checksum: 7d934fe1a156047987054c35f1981b65 (MD5) Previous issue date: 2016-08-22 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Cotton stands out as a high value textile plant in the world market due to the quality of its fibers and the commercial derivatives that the plant produces. Ramulose is a disease that causes great damage to this crop, caused by the fungus Colletotrichum gossypii South var. cephalosporioides Costa, mainly affects young leaves, the most common symptoms being the darkening and necrosis of leaves and branches, which may compromise the whole development of the plant. Extracts and vegetable oils have been studied as an alternative to control pests and diseases such as ramulose in crops. These have as main constituents the secondary compounds, chemicals known as phytochemicals, terpenoids, alkaloids and glycosides. Among these the geraniol, monoterpene that stands out for its fungicidal property. Kenaf (Hibiscus cannabinus) belongs to the family Malvaceae and is rich in compounds known as polyphenols, alkaloids, tannins and essential oils, also being a promising source of fungicidal oil. This work aimed to analyze the effect of oils and extracts on the development of the fungus C. gossypii, which causes ramulose, by means of two researches: In the first one, we sought to prospect Geraniol synthase, the precursor enzyme of geraniol, in aromatic species, for means of molecular analyzes via PCR and qPCR, besides phytopathological tests, in order to evaluate the geraniol expression and the effectiveness of its extracts and vegetable oils in the prevention and control of ramulose; The second study evaluated the effect of Kenaf oil on the development of fungus C. gossypii under laboratory conditions. In order to carry out the first research eleven aromatic species were evaluated, among them M. pulegium, O. basilicum, O. majorana and R. officinalise, which presented satisfactory levels of expression of this enzyme in the molecular assays, being selected for bioassays in vivo against C. gossypii. O. basilicum, M. pulegium and O. majorana oils, at 2000 ppm concentration, were tested in vivo and their preventive and curative actions compared to commercial fungicide. There was effective control of the oils O. basilicum and M. pulegium under ambient conditions, and M. Polegium was distinguished with D.S.I. around 30%, lower value than that presented by the commercial fungicide (40%). These results indicate that the use of aromatic species can be an effective alternative for the treatment of ramulose, with the advantages of being a low cost method and not presenting risks of environmental contamination. In addition, the genetic characterization of aromatic species is an important source of information to expand the use of natural resources, allowing new materials that hold genes of interest to be found and serve as environmental conservation strategies. In the second study, phytopathological tests were performed on isolate 287 of C. gossypii on the effect of Kenaf oil at concentrations of 25, 50 and 75 μl / 1 ml. It was verified by regression analysis that there was no reduction in the mycelial growth of C. gossypii in the oil concentrations adopted in this work. The data presented by fungus growth, fungistatic effect and spore production did not reveal a statistical difference between the treatment with oil and control. Based on the composition of kenaf oil, rich in fungicidal ingredients, even this oil lacking control over C. gossypii in the present study, it is believed that in higher concentrations this oil may exert an effect on this pathogen. / O algodoeiro destaca-se como uma planta têxtil de alto valor no mercado mundial devido à qualidade de suas fibras e aos derivados comerciais que a planta produz. A ramulose é uma doença que causa grandes danos a esta cultura, causada pelo fungo Colletotrichum gossypii South var. cephalosporioides Costa, afeta principalmente folhas jovens, sendo os sintomas mais comuns o escurecimento e necrose das folhas e ramos, podendo comprometer todo o desenvolvimento da planta. Extratos e óleos vegetais vêm sendo estudados como alternativa para controle de pragas e doenças como a ramulose em lavouras. Estes têm como principais constituintes os compostos secundários, substâncias químicas conhecidas como fitoquímicos, terpenóides, alcalóides e glicosídeos. Dentre estes o geraniol, monoterpeno que destaca-se por sua propriedade fungicida. Já o Kenaf (Hibiscus cannabinus) pertence à família Malvaceae e é rica em compostos conhecidos como polifenóis, alcalóides, taninos e óleos essenciais, também sendo uma promissora fonte de óleo fungicida. Este trabalho buscou analisar o efeito de óleos e extratos sobre o desenvolvimento do fungo C. gossypii, causador da ramulose, por meio de duas pesquisas: Na primeira, buscou-se prospectar a Geraniol synthase, enzima precursora do geraniol, em espécies aromáticas, por meio de análises moleculares via PCR e qPCR, além de testes fitopatológicos, a fim de avaliar a expressão do geraniol e a eficácia de seus extratos e óleos vegetais na prevenção e no controle da ramulose; Na segunda pesquisa avaliou-se o efeito do óleo de Kenaf sobre o desenvolvimento do fungo C. gossypii em condições de laboratório. Para realização da primeira pesquisa onze espécies aromáticas foram avaliadas, entre elas M. pulegium, O. basilicum, O. majorana e R. officinalise, as quais apresentaram níveis satisfatório de expressão desta enzima nos ensaios moleculares, sendo selecionadas para bioensaios em in vivo contra C. gossypii. Os óleos de O. basilicum, M. pulegium e O. majorana, na concentração de 2000 ppm, foram testados in vivo e suas ações preventivas e curativas comparadas com fungicida comercial. Houve controle efetivo dos óleos O. basilicum e M. pulegium em condições ambiente, sendo que M. Polegium destacou-se com D.S.I. em torno de 30%, valor menor do que o apresentado pelo fungicida comercial (40%). Esses resultados denotam que o uso de espécies aromáticas pode se constituir numa alternativa eficaz para o tratamento da ramulose, com as vantagens de ser um método de baixo custo e de não fornecer riscos de contaminação ambiental. Além disso, a caracterização genética de espécies aromáticas é uma importante fonte de informações para ampliar a utilização dos recursos naturais possibilitando que novos materiais detentores de genes de interesse sejam encontrados e sirvam como estratégias de conservação ambiental. Na segunda pesquisa, testes fitopatológicos foram realizados no isolado 287, de C. gossypii, sobre o efeito do óleo de Kenaf em concentrações de 25, 50 e 75 μl/1ml. Verificou-se por análise de regressão que não houve redução no crescimento micelial de C. gossypii nas concentrações de óleo adotadas neste trabalho. Os dados apresentados pelo crescimento de fungos, efeito fungistático e produção de esporos não revelaram diferença estatística entre o tratamento com óleo e controle. Com base na composição do óleo de kenaf, rica em ingredientes fungicida, mesmo este óleo não apresentando controle sobre C. gossypii no presente estudo, acredita-se que em concentrações mais elevadas este óleo possa exercer efeito sobre este patógeno.

Submitted by MARCIA ROVADOSCHI (marciar@unifra.br) on 2018-08-17T20:06:36Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_DanielaAlvesDeOliveira.pdf: 1704710 bytes, checksum: 2a7d863c9c37b44daa7f6af4648c5cd2 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-17T20:06:36Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_DanielaAlvesDeOliveira.pdf: 1704710 bytes, checksum: 2a7d863c9c37b44daa7f6af4648c5cd2 (MD5) Previous issue date: 2017-09-26 / Viticulture in Brazil has a great economic importance and an extension of approximately 80,000 hectares, generating employment and income for several families, however it is quite prone to infectious processes, which drastically reduces its productivity. Among these agents is Glomerella cingulata, which is controlled by fungicides, such as mancozeb. However, the use of this commercial product is related to contamination of the environment, in addition to a known toxic effect for humans. In this context the use of a naturally occurring substance, such as eugenol, could be a promising alternative. However, eugenol, which has an antimicrobial action, presents high volatilization and low solubility in water, thus impairing its administration and efficacy. One possibility to minimize toxicity of the fungicide, and the instability of eugenol, is nanoencapsulation. Therefore, the aim of this work was to verify the feasibility of co-encapsulation of mancozeb and eugenol in nanoemulsions and to evaluate the potential antifungal activity of nanoemulsions containing these compounds isolated and associated with Glomerella cingulata. Nanoemulsions containing eugenol (NE-E), mancozeb and eugenol (NE-ME), nanoemulsions with mancozeb (NE-M) and white nanoemulsions, without the active ones (NE-B) were prepared by the spontaneous emulsification method. The formulations were characterized according to mean diameter, polydispersity index (PDI), zeta potential, pH, content and morphology. The stability of the formulations for 30 days under different storage conditions and the antifungal activity against G. cingulata were also evaluated. The nanoemulsions had a mean diameter of approximately 200 nm, PDI of approximately 0.170, zeta potential of -11.0 mV, pH close to 5.0 and eugenol content, for NE-E and NE-ME, around 40%. Transmission electron microscopy showed spherical shape. The antifungal activity assay was performed by the macrodilution technique, and the active compounds were analyzed: free eugenol, mancozeb, mancozeb and eugenol and the same nanoencapsulated ones. The NE-M obtained a minimum inhibitory activity of 0.009 μg / mL, a satisfactory result, followed by NE-ME 0.02 μg / mL mancozeb + 2 μg/mL eugenol compared to its free forms. The best condition for storage of the formulations was under refrigeration and antifungal activity was potentiated after nanoencapsulation for all formulations. This study presents an innovative alternative for the treatment of G. cingulata through the use of nanotechnology. / A viticultura no Brasil apresenta uma grande importância econômica e uma extensão de aproximadamente 80.000 hectares, gerando emprego e renda para várias famílias, entretanto é bastante propensa a processos infecciosos, o que diminui drasticamente sua produtividade. Dentre estes agentes está a Glomerella cingulata, cujo controle é realizado por fungicidas, como o mancozebe. Entretanto o uso deste produto comercial está relacionado com contaminação do ambiente, além de conhecido efeito tóxico para os seres humanos. Neste contexto o uso de substância de origem natural, como o eugenol, poderia ser uma alternativa promissora. Entretanto, o eugenol, que possui ação antimicrobiana, apresenta alta volatilização e baixa solubilidade em água, prejudicando assim sua administração e eficácia. Uma possibilidade para minimizar a toxicidade do fungicida, e a instabilidade do eugenol, é a nanoencapsulação. Sendo assim, a proposta deste trabalho foi verificar a viabilidade de co-encapsulação do mancozebe e do eugenol em nanoemulsões e avaliar a potencial atividade antifúngica de nanoemulsões contendo estes compostos isolados e associados frente à Glomerella cingulata. Foram preparadas nanoemulsões contendo eugenol (NE-E), mancozebe e eugenol (NE- ME), nanoemulsões com mancozebe (NE-M) e nanoemulsões brancas, sem os ativos (NE-B) através do método emulsificação espontânea. As formulações, foram caracterizadas de acordo com diâmetro médio, índice de polidispersão (PDI), potencial zeta, pH, teor e morfologia. Também foi avaliada a estabilidade das formulações durante 30 dias em diferentes condições de armazenamento e a atividade antifúngica frente à G. cingulata. As nanoemulsões apresentaram diâmetro médio de aproximadamente 200 nm, PDI de aproximadamente 0,170, potencial zeta de -11,0 mV, pH próximo à 5,0 e teor de eugenol, para NE-E e NE-ME, em torno de 40%. A microscopia eletrônica de transmissão demonstrou formato esférico. O ensaio da atividade antifúngica foi realizado pela técnica de macrodiluição, sendo analisados os ativos: eugenol, mancozebe, mancozebe e eugenol livres e os mesmos nanoencapsulados. A NE-M, obteve uma atividade inibitória mínima de 0,009 μg/mL, resultado satisfatório, seguida da NE-ME 0,02 μg/mL de mancozebe e 2 μg/mL de eugenol, comparada a suas formas livres. A melhor condição para armazenamento das formulações foi sob refrigeração e a atividade antifúngica foi potencializada após nanoencapsulação para todas as formulações. Este estudo apresenta uma alternativa inovadora para o tratamento da G. cingulata através do emprego da nanotecnologia.

Submitted by Cláudia Bueno (claudiamoura18@gmail.com) on 2016-03-28T19:14:35Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Pedro Vitor Schumacher - 2015.pdf: 575346 bytes, checksum: 2fab7b48cdd75f80b00067b7ea63792b (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2016-03-29T15:03:00Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Pedro Vitor Schumacher - 2015.pdf: 575346 bytes, checksum: 2fab7b48cdd75f80b00067b7ea63792b (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-03-29T15:03:00Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Pedro Vitor Schumacher - 2015.pdf: 575346 bytes, checksum: 2fab7b48cdd75f80b00067b7ea63792b (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2015-02-05 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Two experiments were undertaken aiming to evaluate the effects of the pyraclostrobin fungicide applied at different times and combinations on two simple corn hybrids in the first and second harvests at the Cerrado. The first experiment was undertaken during the 2013/14 harvest adopting a randomized block design in a factorial 2 x 9 (hybrid x pyraclostrobin applications), having four replications. The applications were performed in different combinations: presence or absence of pyraclostrobin + thiophanate methyl + fipronil (100g a.i. 100kg seed-1) in seed treatment (V0) combined with pyraclostrobin (150g a.i. ha-1) application before or after topdressing (V4 or V6) combined or not with pyraclostrobin + cyproconazole (137.25g a.i. ha-1) application in pre-bolting (VT) and a control (on which pyraclostrobin wasn’t used). The second experiment was undertaken during the second harvest of the year 2014, adopting a randomized block design in a factorial 2 x 8 (hybrid x pyraclostrobin applications), having four replications. The applications were performed as doses of 0, 150, 300 and 600g i.a. ha-1 in V6, combined or not with the application of pyraclostrobin + cyproconazole as a dose of 137.25g i.a. ha-1 in pre-bolting (VT). An F test was performed over the collected data to analyze the significance and a Tukey test was performed to compare the means, both tests being run at a 5% probability. No effects of the application of pyraclostrobinwere observed in the first experiment, as well as no interactions among the analyzed factors. In the second experiment the application of pyraclostrobin affected the chlorophyll content positively during the reproductive stage and also affected positively the leaf senescence. In spite of the beneficial effects of the usage of pyraclostrobin on some characters there was no production increase in any of the two simple corn hybrids in the first and second harvests at the Cerrado. / Objetivando-se avaliar o efeito do fungicida piraclostrobina aplicado em diferentes épocas e combinações sobre dois híbridos simples de milho cultivados em primeira e segunda safra no Cerrado conduziu-se dois experimentos. O primeiro durante a safra 2013/14 empregando-se o delineamento de blocos ao acaso no esquema fatorial 2 x 9 (híbridos x aplicações de piraclostrobina), com quatro repetições.As aplicações foram realizadas em diferentes combinações: presença ou ausência de piraclostrobina + tiofanato metílico + fipronil (100 g i.a. 100 kg semente-1) no tratamento de sementes (V0), combinado com a aplicação de piraclostrobina (150 g i.a.ha-1) antes ou após a adubação de cobertura (V4 ou V6), combinado ou não com a aplicação de piraclostrobina + ciproconazole (137,25 g i.a.ha-1) em pré-pendoamento (VT) e uma testemunha (sem uso de piraclostrobina). O segundo experimento foi conduzido durante a segunda safra no ano de 2014, empregando-se o delineamento de blocos ao acaso no esquema fatorial 2 x 8 (híbridos x aplicações de piraclostrobina), com quatro repetições. As aplicações foram realizadas nas doses de 0, 150, 300 e 600 g i.a. ha-1 em V6, combinadas ou não com a aplicação de piraclostrobina + ciproconazole na dose 137,25 g i.a. ha-1 em pré-pendoamento (VT).Os dados coletados foram submetidos ao teste F para verificação de significância eas médias comparadas pelo teste de Tukey, ambos a 5% de probabilidade. No primeiro experimento não foi observado efeito das aplicações de piraclostrobina e nem interação entre os fatores analisados. No segundo experimento a aplicação de piraclostrobina afetou o índice de clorofila de forma positiva no estádio reprodutivo e a senescência foliar de forma positiva. Apesar do efeito benéficodo uso de piraclostrobina sobre alguns caracteresnão houve incremento de produtividade de grãos dos dois híbridos simples de milho cultivados em primeira e segunda safra no Cerrado.

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / Sementes de Platypodium elegans Vogel, pertencente à FamÃlia Fabaceae, subfamÃlia Papilionoideae, Tribo Dalbergiae possui uma lectina Manose/Glicose ligante. Na purificaÃÃo da lectina em estudo, o extrato total de sementes de P. elegans preparado em NaCl 0,15M teve sua fraÃÃo hemaglutinante isolada por cromatografia de afinidade em quitina, trocas iÃnica em DEAE-Sephacel e em HiTrap SP, essa Ãltima acoplada a HPLC. As fraÃÃes ativas para atividade hemaglutinante obtidas sequencialmente nesses procedimentos foram avaliados quanto à sua atividade especÃfica e homogeneidade em SDS-PAGE. A lectina em seu Ãltimo passo de purificaÃÃo apresentou massa molecular aparente de 55 kDa. A fraÃÃo prÃ-purificada ativa obtida em DEAE-Sephacel foi caracterizada quanto ao seu potencial termiticida e fungicida. A atividade termiticida contra operÃrios e soldados de Nasutitermes corniger, induzindo 100% de mortalidade em ambas as classes, foram melhor visualizadas com as concentraÃÃes 1,0 e 0,8mg/mL, entre 8 e 9 dias para operÃrios e 7 e 8 dias para soldados, onde ainda nÃo se havia registrado menos que 50% de mortalidade no controle negativo. A fraÃÃo testada nÃo apresentou efeito repelente. Em relaÃÃo à atividade fungicida, 20 ug da fraÃÃo chegou a inibir consideravelmente Fusarium lateritium (33%), F. oxysporum (19,4%) e F. solani (14,3%). F. decemcellulare teve uma inibiÃÃo de 4,8% e F. moniliforme, 3,3%. Essas duas atividades reforÃam a participaÃÃo dessa lectina na defesa vegetal, fazendo-a uma potente ferramenta biotecnolÃgica a ser mais profundamente investigada e estudada em relaÃÃo a seu papel na defesa vegetal e na potencial utilizaÃÃo na resistÃncia de madeiras susceptÃveis a cupins. / Seeds of Platypodium elegans Vogel, belonging to the Fabaceae family, Papilionoideae sub-family, Dalbergiae Tribe, posses a specific mannose/glucose lectin. In the purification of the lectin in study, the total extract of seeds of P. elegans prepared in NaCl 0,15M had its active fraction isolated for affinity chromatography in chitin and exchange ionic chromatography in DEAE-Sephacel and HiTrap SP, this last one connected to the HPLC.The active fractions for hemmagutinant activity gotten in these procedures had been sequentially about its specific activity and homogeneity in SDS-PAGE. The lectin in the last step of purification presented apparent molecular mass of 55 kDa. The active fraction from DEAE-Sephacel was characterized about its termiticidal and fungicidal potential. The termiticidal activity against laborers and soldiers of Nasutitermes corniger, inducing 100% of mortality in both the classrooms, was better visualized with the concentrations of 1,0 and 0,8mg/mL, between 8 and 9 days for laborers and 7 and 8 days for soldiers, where it had not been registered mortality less than 50% in the negative control. The tested fraction did not present repellent effect. In relation to the fungicidal activity, 20 ug of the fraction arrived to inhibit considerably Fusarium lateritium (33%), F. oxysporum (19.4%) and F. solani (14.3%). F. decemcellulare had a inhibition of 4,8% and F. moniliforme, 3.3%. These two activities strengthen the participation of this lectin in the vegetal defense, making it a powerful biotechnological tool to be more deeply investigated and studied about its paper in the vegetal defense and the potential use in the resistance of susceptible wood to termites.

Submitted by Marlene Santos (marlene.bc.ufg@gmail.com) on 2016-08-23T18:48:47Z No. of bitstreams: 2 Dissertaçao - Ana Claudia Alves D’Abadia - 2014.pdf: 1613481 bytes, checksum: 210b61d96b0368d1f2b68b61da6bfc10 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2016-08-24T14:01:04Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertaçao - Ana Claudia Alves D’Abadia - 2014.pdf: 1613481 bytes, checksum: 210b61d96b0368d1f2b68b61da6bfc10 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-24T14:01:04Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertaçao - Ana Claudia Alves D’Abadia - 2014.pdf: 1613481 bytes, checksum: 210b61d96b0368d1f2b68b61da6bfc10 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2014-09-30 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Brazil is the largest producer of beans. Several factors may limit the productivity of bean such as disease, however proper management coupled with the use of agricultural inputs can provide increased productivity. So the objective was to assess the present work rates and timing of application of plant growth promoter Booster® three bean cultivars and fungicides and their application timing on the effect of pyraclostrobin to cultivate pearl beans. The experiments were conducted in a factorial arrangement with three factors, for which nitrate reductase activity, chlorophyll index, height of insertion of first pod and plant disease severity, number of pods per plant and seeds per pod were evaluated, thousand grain weight and yield. Pearl cultivar showed higher productivity than cultivar splendor. The dose of 0.15 L ha-1 reduced the index Chlorophyll Falker and plant height cherry cultivar. The plant growth promoter used in V4 resulted in increased activity of the enzyme nitrate reductase, but without increases in productivity. Regarding the effect of the application of pyraclostrobin Comet® before topdressing increased the activity of nitrate reductase, plant height, number of seeds per pod and grain yield of pearl beans. / O Brasil é o maior produtor mundial de feijão. Diversos fatores podem limitar a produtividade do feijoeiro, como as doenças, no entanto o manejo adequado aliado ao uso de insumos agrícolas pode propiciar aumento de produtividade. Assim objetivou-se com o presente trabalho avaliar doses e épocas de aplicação do bioestimulante Booster® em três cultivares de feijoeiro e fungicidas e sua época de aplicação quanto ao efeito da piraclostrobina para a cultivar de feijoeiro pérola. Os experimentos foram instalados em arranjo fatorial com três fatores, para os quais foram avaliadas atividade da redutase do nitrato, índice de clorofila, altura de inserção de primeira vagem e de plantas, severidade de doenças, número de vagens por planta e de grãos por vagens, massa de mil grãos e produtividade. A cultivar pérola apresentou maior produtividade que a cultivar esplendor. A dose de 0,15 L ha-1 reduziu o Índice de Clorofila Falker e altura de plantas da cultivar pitanga. O bioestimulante aplicado em V4 resultou em maior atividade da enzima redutase do nitrato, no entanto, sem incrementos na produtividade. Quanto ao efeito da piraclostrobina a aplicação de Comet® antes da adubação de cobertura incrementou a atividade da redutase do nitrato, na altura de plantas, no número de grãos por vagem e na produtividade de grãos de feijoeiro pérola.

O fungo Sclerotinia sclerotiorum, agente causal do mofo branco, encontra-se disseminado em todo o país e afeta mais de 400 espécies de plantas, dentre elas a cultura da soja, causando danos consideráveis no rendimento. A transmissão do patógeno ocorre por meio de sementes contendo micélio dormente ou pela presença de escleródios no lote, os quais podem permanecer viáveis por um longo período, dificultando o manejo da doença. Este trabalho teve como objetivos verificar a viabilidade do patógeno em sementes durante o armazenamento e seu efeito sobre o poder germinativo; comparar tamanhos de amostras de sementes visando à detecção do fungo; e avaliar a sensibilidade in vitro de S. sclerotiorum a fungicidas. Para avaliação da sobrevivência do patógeno, sementes de soja foram inoculadas, artificialmente, com três isolados de S. sclerotiorum, e armazenadas em duas condições, câmara fria e seca (20 ºC e 45% UR) e ambiente não controlado, durante oito meses. A cada dois meses foram realizados testes de sanidade pelo meio de cultura ágar-bromofenol (Neon), utilizando-se 4 repetições de 100 sementes, e testes de germinação, com 4 repetições de 50 sementes, pelo método do rolo de papel. No experimento de amostragem foram avaliadas dez amostras de sementes de soja pelo método do meio Neon, comparando-se quatro tamanhos de amostra: 400, 800, 1600 e 2400 sementes. Para avaliação da sensibilidade in vitro de S. sclerotiorum a fungicidas, foram utilizados 13 ingredientes ativos, em 7 doses e 5 repetições. Os valores da concentração inibitória de 50% (CI50) e 100% (CI100) foram estimados com base na percentagem de inibição do crescimento micelial. Além disso, realizaram-se a quantificação e pesagem dos escleródios formados após 15 dias de incubação. A presença do patógeno S. sclerotiorum, afetou negativamente a germinação das sementes, com redução média de 32% em relação à testemunha. Verificou-se diferença entre os isolados com relação à agressividade. O patógeno sobreviveu nas sementes em ambos os ambientes de armazenamento, porém, em ambiente controlado a redução na geminação das sementes foi de 14% e na incidência do fungo de 16%, enquanto que, em laboratório, esta redução foi de 23% na germinação e de 62% na incidência. Não houve diferença estatística com relação à quantidade de sementes amostradas na detecção de S. sclerotiorum, entretanto, constatou-se maior frequência de ocorrência do patógeno à medida que o número de sementes amostrado foi maior. Todos os fungicidas foram capazes de reduzir o crescimento micelial de S. sclerotiorum, bem como a produção de escleródios, sendo que os ingredientes ativos piraclostrobina, carbendazim, tiabendazol e tiofanato metílico, além de apresentarem CI50 inferior a 1 mg L-1, também inibiram totalmente a formação de escleródios em concentrações inferiores a 5 mg L-1. / The fungus Sclerotinia sclerotiorum, the causal agent of white mold is spread throughout the country and affects more than 400 species of plants, including soybean, causing considerable decrease in yield. The pathogen transmission occurs through seeds with dormant mycelium or by the presence of sclerotia in the lot, which can remain viable for a longer period, making hard the disease management. This study aimed to verify the viability of the pathogen in seeds during the storage period and its effect on germinative power; compare sizes of seed samples to determine the presence of the fungus; and to evaluate the in vitro sensibility of S. sclerotiorum to fungicides. To determine the pathogen survival, soybean seeds were inoculated artificially with three isolates of S. sclerotiorum, and stored into two conditions, cold and dry chamber (20 °C and 45% RU) and in uncontrolled environment, for eight months. Every two months health tests were performed by culture media bromophenol agar (Neon), using 4 repetition of 100 seeds, and germination tests, with 4 repetition of 50 seeds, by the method of the paper roll. During the experiment of sampling, ten samples of soybean seeds were evaluated by the method of media Neon, comparing four sample sizes: 400, 800, 1600 and 2400 seeds. To evaluate the in vitro sensibility of S. Sclerotinia to fungicides were used 13 active ingredients, in 7 doses and 5 repetitions. The values of the 50% inhibitory concentration (IC50) and 100% (IC100) were estimated based on the percentage inhibition of the mycelial growth. In addition, it was performed the quantification and weighing of sclerotia formed after 15 days of incubation. The pathogen S. sclerotiorum in soybean seeds affected negatively the germination of seeds, with an average reduction of 32% compared to the control. There was difference between the isolates in relation to aggressiveness. The pathogen survived in seeds in both storage environments, however, under controlled environment, the decrease in the germination of the seeds was 14% and in its incidence was 16%, while in laboratory this reduction was 23% in the germination and 62% in the incidence. There was no statistical difference in the quantity of seeds sampled in the detection of S. sclerotiorum, however, a higher frequency of pathogen occurrence was verified as the number of sampled seeds was enlarged. All fungicides were able to reduce the mycelial growth of S. sclerotiorum and sclerotia production, and the active ingredients pyraclostrobin, carbendazim, thiabendazole and thiophanate methyl, besides having IC50 of less than 1 mg L-1 also completely inhibited the formation of sclerotia in concentrations less than 5 mg L-1.

O controle da podridão parda do pessegueiro (Monilinia fructicola) é realizado essencialmente por aplicações preventivas de fungicidas, em sua maioria sistêmicos com modo de ação específico. O uso contínuo desses fungicidas pode levar à seleção de indivíduos resistentes ao ingrediente ativo e, consequentemente, à perda da eficiência do controle nos pomares. A evolução da população de isolados resistentes ao longo do tempo, na ausência do fungicida, pode ser prevista com estudos de habilidade competitiva entre isolados resistentes e sensíveis. Portanto, a quantificação da adaptabilidade (fitness) e da estabilidade, necessárias para caracterizar os isolados encontrados em campo, auxiliarão nas estratégias antirresistência. Embora a importância da determinação da adaptabilidade de isolados resistentes seja reconhecida, há poucos métodos descritos para a análise da habilidade competitiva. Assim, esse trabalho verificou a adaptabilidade, a estabilidade e a habilidade competitiva de isolados de M. fructicola com diferentes níveis de sensibilidade à azoxistrobina em experimentos in vitro e em frutos de pêssegos (in natura e enlatado) utilizando metodologias de avaliação diversas. A caracterização dos isolados foi realizada in vitro, in vivo e molecularmente. Foram avaliados o diâmetro da colônia e a esporulação in vitro; o período de incubação e de latência, a incidência e a severidade da doença e a esporulação in vivo dos isolados separadamente. Os dados de esporulação in vitro foram submetidos ao teste de Kruskal-Wallis e os dados de crescimento micelial ao teste de Tukey com 5% de probabilidade. Para a análise dos dados in vivo, utilizou-se a análise multivariada. Dez transferências em meio de cultura sem fungicida foram realizadas para o estudo da estabilidade de dois isolados resistentes (SP08435 e SP09839) e um sensível (PR09638). A esporulação, a porcentagem de germinação de conídios e o diâmetro da colônia dos isolados em meio de cultura com fungicida foram avaliados em quatro transferências (inicial, terceira, sexta e última transferência). A habilidade competitiva foi verificada pela evolução da porcentagem de indivíduos resistentes no tempo entre um isolado resistente (SP09839) e um sensível à azoxistrobina (PR09638). Modelos lineares ou modelos lineares generalizados (GLM) foram utilizados para descrever o progresso da proporção do isolado resistente ao longo do tempo. Os isolados resistentes exibiram esporulação in vitro e taxa de crescimento micelial semelhantes aos sensíveis, além de apresentarem-se no mesmo grupo de similaridade que os isolados sensíveis. Nenhuma mutação no cyt b foi associada à resistência de M. fructicola à azoxistrobina (G143A, G137R, e F129L) e em todos os isolados foi observado o íntron antes do códon 143. Mesmo após 10 transferências em meio de cultura sem fungicida, os isolados resistentes à azoxistrobina não reduziram sua sensibilidade nem sua capacidade de esporulação e crescimento fora do pêssego. Independentemente da metodologia utilizada para avaliar a habilidade competitiva, a resistência à azoxistrobina não correspondeu a um custo adaptativo para M. fructicola, pois a proporção do isolado resistente manteve-se inalterada ao longo das transferências. O uso de pêssego enlatado é recomendado na substituição de frutos in natura para experimentos de habilidade competitiva. / Control of brown rot in peaches (caused by Monilinia fructicola) is mainly by preventive applications of fungicides, mostly single-target site. Repeated use of these fungicides can, however, select for resistant pathogen populations, which may result in failure of disease control. The evolution of resistant isolates in a population over time can be predicted with competitive ability assays between sensitive and resistant isolates. Therefore, studies quantifying pathogen fitness and stability are necessary to characterize field isolates and improve anti-resistant strategies. However, there are limited reports concerning the methodology used in competitive ability assays. This study determined the fitness of M. fructicola isolates with different levels of sensitivity to azoxystrobin in trials in vitro and in vivo (in natura and canned peaches) with different monocyclic components. Isolates characterization were carried out in vitro, in vivo and molecularly. Mycelial growth rate and sporulation were estimated in vitro, and disease incidence, severity, lesion sporulation, incubation and latent period were evaluated in peach fruit for sensitive and resistant isolates. Sporulation in vitro data were analyzed by Kruskal-Wallis test and mycelial growth rate with the Tukey test at 5% probability. For the in vivo experiments, multivariate analysis were carried out. Ten consecutive transfers on non-amended media were conducted to determine the stability of isolates (two resistant and one sensitive). Sporulation, percent spore germination and colony diameter on azoxystrobin amended media were also evaluated four times (the first, the third, the sixth and the last transfer). Competitive ability was investigated by testing the percentage increase of resistant individuals five generations after inoculation with a mix of azoxystrobin sensitive and resistant isolates. The competitive ability of sensitive and resistant isolates were compared with different variables as colony-forming unit and spore germination. Linear or generalized linear models (GLM) were adjusted to compare the progress of resistant isolates over time. All resistant isolates had in vitro sporulation and mycelial growth rate similar to sensitive isolates. All isolates sequenced presented an intron close to codon 143 and did not have any of the point mutations commonly associated with resistance to QoI fungicides (G143A, G137R, and F129L). After 10 transfers in PDA, colony diameter of resistant isolates was not reduced in azoxystrobin-amended media with 1 μg.ml-1 nor was their sporulation in vitro For all parameters used to measure competitive ability, no fitness cost was associated to M. fructicola isolates resistant to azoxystrobin. Canned peach is a viable option for studies aiming to determine fitness cost of resistant isolates.

A utilização de fungicidas multissítios, como é o caso do mancozebe (Mz), tem crescido bastante nas últimas safras com o intuito de evitar a resistência de fungos a fungicidas sítio-específico, além de aumentar sua eficiência no controle de doenças. No entanto, além do efeito fungicida, em áreas que receberam a aplicação destes produtos tem sido observados efeitos fisiológicos nas plantas, que vão desde a redução do nível de estresse até o aumento no teor de clorofila, o que repercute na produtividade. Associado a isto, o ácido salicílico também se torna uma estratégia importante, visto que este hormônio promove redução do nível de estresse, além de atuar na indução de resistência contra doenças. No entanto, pouco se sabe sobre os efeitos fisiológicos que este produtos isolados e em associação podem causar na cultura do feijoeiro comum. Portanto, o objetivo do trabalho foi avaliar o efeito da aplicação de Mz e ácido salicílico em características fisiológicas, componentes de produção e produtividade da cultura do feijoeiro comum. O ensaio foi conduzido em área comercial de produção de feijão irrigado em Patos de Minas-MG entre os meses de abril e agosto de 2017. Foi adotado delineamento em blocos casualizados em esquema fatorial 5 x 2 constituído por cinco doses de ácido salicílico (0, 50, 100, 200 e 400 mg ha-1) associados ou não a aplicação de Mz na dose de 400 g ha-1 e cinco repetições. Para cada tratamento, foram realizadas três aplicações, sendo estas aos 22, 37 e 52 dias após a semeadura. Foram realizadas avaliações de massa de matéria seca de vagens, produtividade, atividade da nitrato redutase, urease, enzimas antioxidantes (SOD, POD e CAT), teor de prolina, peróxido de hidrogênio e peroxidação de lipídios. A aplicação de Mz proporcionou o aumento da atividade da SOD, sendo assim também ocorreu o incremento POD e da CAT, consequentemente reduzindo o peróxido de hidrogênio em folhas de feijoeiro, o que manteve baixo os níveis de peroxidação lipídica. Além disso, os níveis de prolina caíram significativamente após a aplicação de Mz. Quando se utilizou o Mz associado com o ácido salicílico, se observou que ocorreu o aumento da atividade da SOD, atingindo o seu pico para a dose de 200 mg ha-1. Além disso o ácido salicílico promoveu o incremento de prolina quando associado ao Mz, em relação ao tratamento com Mz isolado. Nesta situação a prolina foi reponsável pela eliminação de H2O2, mantendo os níveis das enzimas SOD e CAT reduzidos. Com os baixos níveis de peróxido de hidrogênio a peroxidação lipídica reduziu significativamente. As aplicações de Mz refletiram na maior massa seca de vagens e implicando na maior produtividade do feijoeiro, ao passo que o ácido salicílico proporcionou o aumento de produtividade, porém dependente da dose utilizada que apresentou o melhor resultado na dose de 200 mg ha-1. / The use of multisite fungicides, such as mancozeb (Mz), has grown in the last few seasons in order to avoid fungal resistance to specific-site fungicides, in addition to increasing its efficiency in disease control. However, in addition to the fungicidal effect, in areas that have received the application of these products, physiological effects have been observed in the plants, ranging from the reduction of the stress level to the increase in chlorophyll content, which has an impact on productivity. Associated with this, salicylic acid also becomes an important strategy, since this hormone promotes reduction of stress level, besides acting in the induction of resistance against diseases. However, knowledge about physiological effects is well limited on what isolated and associated products can cause on the common bean crop. Therefore, the objective of this work was to evaluate the effect of Mz and salicylic acid applications on physiological characteristics, production components and productivity of the common bean crop. The experiment was carried out in a commercial area of irrigated common bean production in \'Patos de Minas\'-MG between April and August 2017. A randomized complete block design was used in a 5 x 2 factorial scheme consisting of five doses of salicylic acid (0, 50, 100, 200 and 400 mg ha-1) with or without the application of Mz at a dose of 400 g ha-1 and five replications. For each treatment, three applications were performed, being these at 22, 37 and 52 days after sowing. Nitrate reductase activity, urease, antioxidant enzymes (SOD, POD and CAT), proline content, hydrogen peroxide and lipid peroxidation were evaluated. The application of Mz provided the increase of the SOD activity, thus also the POD and CAT increase, consequently reducing the hydrogen peroxide in leaves of common bean, which kept the levels of lipid peroxidation low. In addition, proline levels dropped significantly after application of Mz. When Mz associated with salicylic acid was used, it was observed that the increase in SOD activity occurred, reaching its peak at the 200 mg ha-1 dose. In addition, salicylic acid promoted the increase of proline when associated with Mz, in relation to the treatment with Mz alone. In this situation proline was responsible for the elimination of H2O2, keeping the levels of the SOD and CAT enzymes reduced. With the low levels of hydrogen peroxide the lipid peroxidation reduced significantly. The Mz applications reflected in the higher dry mass of pods and implying a higher yield of common bean, while salicylic acid provided the increase in productivity, however, depending on the dose used, which presented the best result at 200 mg ha-1.