Made available in DSpace on 2016-12-23T14:37:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 412060 bytes, checksum: 4f6e2489a627abd31089b425ac87ef6f (MD5) Previous issue date: 2007-08-24 / The effect of isolates of Beauveria bassiana (Balsamo) Vuillemin.: CCAE-7 and ESALQ 447; Metarhizium anisopliae (Mestchnikoff) Sorokin: PL43 and Boveril Organic® and Metarril Organic® was assessed for the control of Diaphania hyalinata Linnaeus, in 2°, 3°, 4° and 5° larval instar.The experiments were carried out in climatized chamber using temperature of 25 + 1°C, relative humidity of 70%, and photofase of 12 hours, in the laboratory. The experiments were arranged in a completely randomized desing with 5 treataments and 4 repetitions. Patogenicity bioassays in the concentrations of 1x103, 1x104, 1x105, 1x106, 1x107 and 1x108 conidia/ mL + Tween® 80 for the isolate CCAE-7, ESALQ 447 and PL43 and, concentrations of 0.10; 0.15; 0.25; 0.40; 0.63 and 1.00 g/ mL + Tween® 80 for Boveril Organic® and Metarril Organic®. The mortality was assessed every day. The mortality indexes was calculated using the Abbott equation for each treatment. The CCAE-7 was the most efficient isolate for the control of Diaphania hyalinata L., with the highest correct mortality (69,27 %) in the concentration of 1x108 in the 2° larval instar. / Avaliou-se o efeito de dois isolados de Beauveria bassiana (Balsamo) Vuillemin (CCAE-7 e ESALQ 447), o isolado de Metarhizium anisopliae (Mestchnikoff) Sorokin: (PL43) e dois formulados comerciais (Boveril Organic ® e Metarril Organic®) no controle de Diaphania hyalinata (Linnaeus) no 2º, 3º, 4º e 5º ínstares. Os experimentos foram mantidos em condições laboratoriais, em câmara climatizada à temperatura de 25 + 1ºC, umidade relativa de 70 + 10%, e fotofase de 12 horas, conduzidos em delineamentos inteiramente casualizados, com 5 tratamentos e 4 repetições. Foram realizados bioensaios de patogenicidade nas concentrações 1x103; 1x104; 1x105; 1x106; 1x107 e 1x108 conídios/ mL + Tween® 80 para o isolado CCAE-7, ESALQ 447 e PL43 e, nas concentrações 0,10; 0,15; 0,25; 0,40; 0,63; 1,00 g/ mL + Tween® 80 para Boveril Organic® e Metarril Organic®. A mortalidade foi avaliada diariamente, calculando-se os índices de mortalidade corrigida pela fórmula de Abbott para cada tratamento. O isolado CCAE-7 apresentou melhor eficiência no controle, com maior mortalidade corrigida (69,27 %) na concentração 1x108 no 2° ínstar.

A macieira é depreciada por muitos insetos, principalmente pela lagarta-enroladeira-da-macieira Bonagota salubricola (Lepidoptera: Tortricidae). Até o momento seu controle nos pomares comerciais é feito quase exclusivamente com inseticidas químicos. Alternativamente, este trabalho teve por objetivo verificar a mortalidade in vitro de larvas de segundo instar de B. salubricola frente a ação de isolados dos fungos Nomuraea, Beauveria e Metarhizium. Cada grupo foi tratado com suspensões de 2x105 a 2x109 con/mL, exceto para o grupo controle, tratado com solução Tween-80 0,1%. Também avaliou-se a sobrevivência pupal, expressão de proteases e a compatibilidade com inseticidas químicos. Uma das linhagens de Beauveria e as três de Metarhizium foram patogênicas a B. salubricola, sendo que os níveis de virulência aumentaram em função da concentração de conídios. A linhagem E6 de M. anisopliae destacou-se por proporcionar um controle de até 88% com TL50 de 1,66 dias; a maior virulência relacionou-se positivamente com o aumento da produção enzimática, sendo esta linhagem também compatível com tebufenozide. Esses resultados evidenciam o potencial dos fungos entomopatogênicos no controle de B. salubricola, visando sua aplicação principalmente nos pomares MIP. / The apple tree is deprecated by many insects, especially by leaf-roller-apple Bonagota salubricola (Lepidoptera: Tortricidae). Its control in commercial orchards is done almost exclusively with chemical insecticides. Alternatively, this work aimed at the evaluation of the in vitro susceptibility of larvae of the second ínstar of Bonagota salubricola to isolates of Nomuraea, Beauveria and Metarhizium fungus. Each group was treated with suspensions ranged of 2x105 con/mL a 2x109 con/mL, except for the control group, treated with solution Tween-80 0.1%. Also was evaluated the pupal survival, expression of proteases and compatibility with chemical insecticides. One strain of Beauveria and three strain of Metarhizium were pathogenic to B. salubricola, and the levels of virulence increased depending of conidia concentration. The strain E6 of M. anisopliae stood out for marking a control up to 88% with LT50 of 1.66 days, the largest virulence related positively to the increased production enzyme, and this strain was also compatible with tebufenozide. Those results demonstrate the potential of entomopathogenic fungi in control of B. salubricola, principally on the orchards IPM.

Nomuraea rileyi é um entomofungo que infecta principalmente lepidópteros representantes da superfamília Noctuoidea, que inclui pragas-chave de diversas culturas de grande importância econômica. No entanto, a susceptibilidade das espécies a este agente é variável, mesmo entre representantes da mesma família e até de mesmo gênero. Um dos fatores responsáveis por esta susceptibilidade diferenciada pode ser a composição lipídica da cutícula larval. O objetivo deste estudo foi avaliar a estrutura e composição cuticular de larvas de lepidópteros e sua relação com a susceptibilidade a N. rileyi. Foram utilizadas as espécies Anticarsia gemmatalis, Mythimna sequax, Rachiplusia nu e Spodoptera cosmioides e duas linhagens do fungo (CH87551 e UB93150). Larvas de segundo instar foram obtidas a partir da criação massal no Laboratório de Controle de Pragas da Universidade de Caxias do Sul e submetidas a suspensões de 107, 108 e 109 conídios/mL por 24 horas e após, transferidas para recipientes de 200mL contendo dietas artificiais específicas. Os bioensaios foram mantidos em condições controladas e avaliados diariamente por 14 dias. Para análise da composição lipídica cuticular, exúvias oriundas da metamorfose larval-pupal foram submetidas à extração com hexano e posteriormente à diclorometano-metanol. Para obtenção das exúvias de M. sequax, as larvas foram alimentadas com Lolium multiflorum. Os extratos obtidos foram analisados por cromatografia de camada delgada e seus componentes separados por cromatografia em coluna aberta, cujas frações resultantes foram analisadas por cromatografia gasosa acoplada a detector de massas (GCMS). Imagens de microscopia eletrônica de varredura (MEV) foram obtidas de larvas de segundo ínstar de cada espécie, submetidas uma suspensão de 108 conídios/mL e analisadas 24, 48 e 72 horas após a exposição ao patógeno. Os resultados demonstraram que as espécies avaliadas foram diferentemente afetadas por N. rileyi e, mesmo pelas diferentes linhagens avaliadas. A CL50 (log dose) obtida com as linhagens CH e UB foi de 6,73 e 7,97 para A. gemmatalis e 8,26 e 9,16 para R. nu respectivamente. S. cosmioides foi susceptível apenas à linhagem UB, porém a taxa de mortalidade foi de apenas 11,5% na maior concentração e M. sequax não foi susceptível a nenhuma das linhagens avaliadas. A composição lipídica cuticular apresentou diferenças quali-quantitativas entre as larvas. Os principais componentes identificados em A gemmatalis, M. sequax e R nu foram hidrocarbonetos, respondendo por 72,3, 74,5 e 83,6% respectivamente, com menor diversidade de compostos para M. sequax. Ácidos graxos lineares e ramificados (C14 a C20) foram identificados, com diferentes composições em cada uma das espécies. Identificou-se um aldeído e um álcool graxo em A. gemmatalis e outro aldeído graxo em R. nu. Em S. cosmioides, o componente majoritário identificado foi vitamina E, com mais de 70%. Nas imagens de MEV foi possível observar conídios de N. rileyi aderidos à superfície cuticular das quatro espécies avaliadas, especialmente na região abdominal e nos pseudopodes, mesmo depois de 48 horas após contato, sobretudo em S. cosmioides e M. sequax, espécies nas quais muitos dos conídios visualizados apresentaram tubo germinativo crescendo paralelamente à superfície. As espécies que se mostraram mais susceptíveis nestes bioensaios foram as que apresentaram, além de grandes quantidades de alcanos, as maiores diversidades destes compostos. As espécies menos susceptíveis apresentaram pouca quantidade e/ou variedade de alcanos ou ainda algum composto antioxidante, como no caso da vitamina E. Os resultados obtidos sugerem que, além das diferenças na composição lipídica e na estrutura cuticular das larvas, a variabilidade de N. rileyi pode estar relacionada à susceptibilidade diferenciada observada nas espécies, no entanto o potencial de uso deste agente como ferramenta no manejo integrado de pragas é considerável e precisa ser mais bem compreendido e explorado. / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Nomuraea rileyi is an entomofungus that mainly infects lepidopteran representatives of the Noctuoidea superfamily, which includes key-pests of various crops of large economic importance. Nevertheless, the susceptibility of species in relation to this agent is variable, even among representatives of the same family or genus. One of the factors responsible for this differentiated susceptibility might be the lipid composition of the larval cuticle. The aim of this study was to assess the cuticular structure and composition of lepidopteran larvae and their relationship with the susceptibility to N. rileyi fungi. The species Anticarsia gemmatalis, Mythimna sequax, Rachiplusia nu and Spodoptera cosmioides and two strains of the fungus (CH87551 and UB93150) were used. Second instar larvae were obtained from the mass creation of the Pest Control Laboratory at the University of Caxias do Sul and subjected to suspensions of 107, 108 and 109 conidia/mL for 24 hours and subsequently transferred to 200mL containers containing specific artificial diets. The bioassays were maintained in controlled conditions and assessed daily for 14 days. In order to perform an analysis of the cuticular lipid composition, exuviae derived from the larval-pupal metamorphosis were subjected to extraction with hexane and with dichloromethane-methanol afterwards. For obtaining the M. sequax exuviae, the larvae were fed with Lolium multiflorum. The obtained extracts were analyzed by means of slender layer chromatography and their components were separated using open column chromatography components, whose resulting fractions were analyzed through gas chromatography attached to mass detector (GCMS). Images of scanning electron microscopy (SEM) were obtained from second instar larvae of each species, subjected to a suspension of 108 conidia/mL and analyzed 24, 48 and 72 hours after exposure to the pathogen. The results showed that the assessed species were differently affected by N. rileyi fungi or even by different assessed strains. The LC50 (log dose) obtained with the CH and UB strains was 6,73 and 7,97 for A. gemmatalis and 8,26 and 9,16 for R. nu respectively. S. cosmioides was susceptible only to the UB strain, but the mortality was limited to 11.5% in the highest concentration and M. sequax was not susceptible to any of the assessed strains. The cuticular lipid composition showed qualitative and quantitative differences between the larvae. The main components identified in A. gemmatalis, M. sequax and R. nu were hydrocarbons, accounting for 72,3, 74,5 and 83,6% respectively, with lower diversity of compounds for M. sequax. Linear and branched fatty acids (C14 to C20) have been identified, with different compositions in each one of the species. It was found an aldehyde and a fatty alcohol in A. gemmatalis and other fatty aldehyde in R. nu. In S. cosmioides, the major identified component was vitamin E, with more than 70%. In the SEM images, it was possible to observe conidia of N. rileyi attached to the cuticular surface of the four assessed species, especially in the abdominal region and in pseudopods, even after 48 hours of contact, mainly in S. cosmioides and M. sequax, species in which many observed conidia showed germ tube growing in tandem with the surface. The species that were more likely in these bioassays were the ones that presented, in addition to large amounts of alkanes, the greatest diversities of these compounds. The less susceptible species showed little quantity and/or variety of alkanes or even some antioxidant compound, as in the case of the vitamin E. The obtained results suggest that, besides differences in the lipid composition and cuticular structure of the larvae, the variability of N. rileyi might be related to the differentiated susceptibility observed in species, however, the potential usage of this agent as a tool for holding an integrated pest management is sizeable and needs to be better understood and explored.

Made available in DSpace on 2014-06-12T15:02:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2011 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Os objetivos do trabalho foram analisar os aspectos morfológicos e moleculares de isolados de Metarhizium anisopliae e identificá-los ao nível de variedade, utilizando iniciadores específicos, selecionar isolados com alta patogenicidade para ninfas de Mahanarva fimbriolata, verificar a persistência no solo do isolado mais eficiente em condições de laboratório e o efeito da introdução deste fungo na estrutura da comunidade fúngica, por meio do perfil de bandas de PCR-DGGE. Foram utilizadas as seguintes metodologias: técnica de cultura sob lamínula, PCR, bioensaios, contagem de colônias em placa e PCR-DGGE. A amplificação com os iniciadores ITSmet/ITS4 confirmou que os isolados são M. anisopliae var. anisopliae. As análises morfológicas e moleculares demonstraram a grande variabilidade intraespecífica entre os 37 isolados estudados e serviram de base para a diferenciação destes isolados que apresentam mesma origem geográfica e o mesmo hospedeiro. Os iniciadores (GACA)4 e (GTG)5 forneceram DNA fingerprints para um maior número de isolados. Baseada na curva de mortalidade confirmada, entre nove isolados, URM5946, URM5951 e URM6033 foram considerados os melhores para serem utilizados em um programa de controle biológico de M. fimbriolata. Entre estes isolados, o URM5951 foi avaliado quanto a sua persistência e efeito na comunidade fúngica após sua aplicação no solo. Este isolado permaneceu viável até 60 dias do experimento e demonstrou não interferir na comunidade fúngica do solo em que foi introduzido. Todas as características estudadas são desejáveis no processo de seleção de isolados de M. anisopliae e os resultados obtidos reforçam a importância da utilização destes fungos como agentes de controle biológico da cigarrinha-da-raiz da cana-de-açúcar, M. fimbriolata

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / This study aimed to evaluate the occurrence and diversity of entomopathogenic fungi at Sergipe state, considering the factors that affect their distribution. The analysis was done using soil samples collected in the three mesoregions of the state in two periods of collection, comprising a wet and a dry season, and in two different habitats (agricultural and natural). Parameters such as pH, organic matter and argil soil were considered in the analyzes. For the soil fungi isolation, two methods were used, the soil solution in culture medium and selective insect bait. In a total of 48 soil samples, 41.7% were positive for the presence of entomopathogenic fungi. The isolates were belonging to the genera Beauveria, Metarhizium and Isaria, from order Hypocreales. It was found that the factors related to soil sampling location (region, period, and habitat) showed no significant difference in their variables for the presence of entomopathogenic fungi, however other soil factors (pH, amount of organic matter and argil) showed significance. The isolates were submitted to genetic variability analysis by RAPD markers, where 15 primers were selected, producing a total of 179 bands (Beauveria) and 131 bands (Metarhizium) and the similarity matrices were made using the Jaccard coefficient, which generated dendrogram by the UPGMA method, for each fungus. There was low genetic similarity among isolates of both genders. In this work, the entomopathogenic fungi isolated can be useful for biological control in agriculture once these isolates show certain persistence in adverse conditions of temperature, humidity and UV radiation. / Esse estudo objetivou avaliar a ocorrência e diversidade de fungos entomopatogênicos em Sergipe, considerando os fatores que afetam a sua distribuição. A análise foi realizada através de amostras de solos obtidas nas três mesorregiões que dividem o estado, em dois períodos de coleta, compreendendo uma estação seca e uma úmida, e em dois diferentes habitats (agrícola e natural). Parâmetros como pH, matéria orgânica e argila do solo foram considerados nas análises. Para o isolamento do fungo do solo foram utilizados dois métodos, solução de solo em meio de cultura seletivo e inseto-isca. Em um total de 48 amostras de solo, 41,7% foram consideradas positivas quanto a presença de fungos entomopatogênicos. Os fungos isolados foram pertencentes aos gêneros Beauveria, Metarhizium e Isaria, da ordem Hypocreales. Verificou-se que os fatores referentes ao local de amostragem do solo (região, período e habitat) não mostraram diferenças significantes quanto as suas variáveis em relação à presença de fungos entomopatogênicos, diferente dos fatores do solo (pH, quantidade de matéria orgânica e argila) que mostraram significância. Os isolados foram submetidos a uma análise da variabilidade genética através da técnica molecular RAPD, foram selecionados 15 primers que produziram um total de 179 bandas (Beauveria) e 131 bandas (Metarhizium) e foram construídas matrizes de similaridade utilizando o coeficiente de Jaccard, que geraram dendrogramas através do método de agrupamento UPGMA, para cada fungo. Observou-se baixa similaridade genética entre os isolados de ambos os gêneros. Nesse trabalho, isolou-se fungos entomopatogênicos que podem ser úteis para o controle biológico na agricultura por tratar-se de isolados que apresentam certa persistência em condições adversas de temperatura, umidade e radiação UV.

Submitted by Franciele Moreira (francielemoreyra@gmail.com) on 2017-08-24T18:58:04Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Marcos Daniel Filgueiras Gomes - 2017.pdf: 1627510 bytes, checksum: 4f9bbc1cf7e9457ee3eb0b398bfffc42 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Rejected by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com), reason: subtituir PDF on 2017-09-01T17:18:15Z (GMT) / Submitted by Franciele Moreira (francielemoreyra@gmail.com) on 2017-09-05T14:58:59Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Marcos Daniel Filgueiras Gomes - 2017.pdf: 1627510 bytes, checksum: 4f9bbc1cf7e9457ee3eb0b398bfffc42 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Rejected by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com), reason: on 2017-09-05T17:01:40Z (GMT) / Submitted by Franciele Moreira (francielemoreyra@gmail.com) on 2017-09-05T17:03:46Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Marcos Daniel Filgueiras Gomes - 2017.pdf: 1628086 bytes, checksum: 7ab87fcdc18cfc95d88131b8b9272ecc (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2017-09-15T15:11:58Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Marcos Daniel Filgueiras Gomes - 2017.pdf: 1628086 bytes, checksum: 7ab87fcdc18cfc95d88131b8b9272ecc (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-15T15:11:59Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Marcos Daniel Filgueiras Gomes - 2017.pdf: 1628086 bytes, checksum: 7ab87fcdc18cfc95d88131b8b9272ecc (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2017-03-09 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / The current study investigated the virulence of Metarhizium spp., Beauveria bassiana and Isaria javanica against Musca domestica larva; it also compared the virulence of different propagules, and evaluated the efficacy of matrine, a plant alkaloid, and the association of matrine and entomopathogenic fungi against larvae of Musca domestica. In addition, the study reports the conidial viability and radial growth of different fungal isolates in culture medium supplemented or not with matrine. Conidia produced on BDAL medium were suspended in Tween 80 0.01% and adjusted to 1 × 108 conidia / mL, and spread on filter paper for indirect treatment of third-instar larvae of M. domestica. The efficacy of treatment ranged from 77,44% (IP 119) to 87,35% (IP 146) among Metarhizium spp. isolates. The efficacy of treatment ranged from 39,37% (ARSEF 9588) to 70,60% (IP 361) among the isolates of B.bassiana; variations between 26,75% (CG 1316) and 53,28% (CG 1283) was reported in groups treated with isolates of I. javanica. Conidia and blastospores of fungi were produced on Adamek medium, and suspensions were prepared and adjusted to 1 × 108 propagules/mL. Aliquots were used in indirect treatments by spreading the suspension to sterile filter paper or to comminuted ration to evaluate virulence in third or second instar larvae, respectively. Only the treatment with IP 146 blastospores in ration was effective against M. domestica larva. Larvae were immersed on matrine solutions (direct treatment) or exposed to sterile-filter paper treated with matrine (indirect treatment) in different concentrations (1, 5, 10 and 20 mg/mL). Ten larvae were assayed in each treatment and control group. Matrine concentrations higher than 1 mg/mL were effective against M. domestica larva in both treatments. Germination of conidia of Metarhizium spp., B. bassiana and I. javanica isolates was assessed at 24 and 48 honto BDAL medium plus chloramphenicol and benomyl, supplemented or not (control) with matrine. All isolates had germination around 100%, in both incubation times evaluated. In addition, the radial growth of isolates was evaluated on BDAL medium supplemented or not (control) with matrine. The isolates of Metarhizium spp. and B. bassiana, with the exception of CG 138, had a reduced radial growth on medium containing matrine. Isolates of I. javanica did not reduce their growth when exposed to matrine. The association of entomopathogenic fungi [IP 119 (Metarhizium anisopliae s.s.), CG 307 (Beauveria bassiana) or CG 1285 (Isaria javanica)] with matrine (1; 0,5; 0,1; 0,05; 0,01 mg/mL), was investigated against larva of M. domestica in indirect tests on sterile filter paper. The association of fungal conidia and matrine was more efficient against M. domestica larva than conidia, and the association was more efficient than matrine alone. All experiments were incubated at 27 ± 1 oC and RH ≥ 80%. In conclusion, Metarhizium sp. is indicated as a promising microbial agent to control larva of M. domestica; also, IP 146 blastospores applied to ration were effective in the control of second instar larvae. In addition, the alkaloid matrine was effective to control M. domestica larva; it did not affect the viability of the conidia of the fungi investigated in this study, but it slowed down the growth of most of the Metarhizium and Beauveria isolates tested. Radial growth of isolates of Isaria sp. was not affected by supplementation of medium with matrine. No increased efficiency against M. domestica larva was detected when fungi was associated with matrine. / O presente estudo investigou a virulência de Metarhizium spp., Beauveria bassiana e Isaria javanica contra larvas de Musca domestica; comparou também a virulência de diferentes propágulos fúngicos, e avaliou a eficácia de matrine, um alcaloide vegetal, e sua associação com fungos entomopatogênicos contra larvas de M. domestica. Além disso, o estudo relata a viabilidade conidial e o crescimento radial de diferentes isolados fúngicos em meio de cultura suplementado ou não com matrine. Nesse sentido, conídios produzidos em meio BDAL foram suspensos em Tween 80 a 0,01% e ajustados a 1 × 108 conídios/mL e espalhados em papel filtro para o tratamento indireto de larvas de terceiro ínstar de M. domestica. A eficácia do tratamento dos isolados de Metarhizium spp. variou entre 77,44% (IP 119) e 87,35% (IP 146). A eficácia do tratamento variou de 39,37%(ARSEF 9588) e 70,60% (IP 361) entre os isolados de B.bassiana, e variações entre 26,75% (CG 1316) e 53,28% (CG 1283) foram observadas em grupos tratados com isolados de I. javanica. Conídios e blastosporos de IP 146 (Metarhizium robertsii) e IP 361(Beauveria bassiana) foram produzidos em meio Ádamek, em seguida foram preparadas suspensões e estas ajustadas para 1 × 108 propágulos/mL. Tratamentos indiretos foram conduzidos espalhando-se a suspensão em papel filtro estéril ou em rações para avaliar a virulência em larvas de terceiro ou segundo ínstar de M. domestica, respectivamente. Apenas o tratamento com blastosporos IP 146 em ração foi eficaz contra larva de M. domestica. Larvas de M. domestica também foram imersas em soluções contendo matrine (tratamento direto) ou expostas a papel filtro estéril tratado com matrine (tratamento indireto) em diferentes concentrações (1, 5, 10 e 20 mg / mL); dez larvas foram utilizadas em cada tratamento e grupo de controle. Para ambos tratamentos concentrações de matrine superiores a 1 mg/mL foram eficazes contra larvas de M. domestica. A germinação de conídios dos isolados de Metarhizium spp., B. bassiana e I. javanica foi avaliada em 24 e 48 horas sobre meio BDAL acrescido de cloranfenicol e benomil, e suplementado ou não (controle) com matrine (2%). Todos os isolados tiveram germinação em torno de 100%, em ambos os tempos de incubação avaliados. O crescimento radial de isolados também foi avaliado em meio BDAL suplementado ou não (controle) com matrine. Nesse estudo, os isolados de Metarhizium spp. e B. bassiana, com exceção de CG 138, tiveram crescimento radial reduzido em meio contendo matrine. Os isolados de I. javanica, no entanto, não reduziram seu crescimento quando expostos à matrine em meio de cultura. Foi investigada a associação de fungos entomopatogênicos [IP 119 (Metarhizium anisopliae s.s.), CG 307 (Beauveria bassiana) ou CG 1285 (Isaria javanica)] com matrine (1; 0,5; 0,1; 0,05; 0,01 mg/mL) contra larvas de M. domestica. Em testes indiretos em papel filtro estéril, a associação de conídios fúngicos e matrine foi mais eficaz contra larva de M. domestica do que conídios apenas, e a associação foi mais eficiente do que matrine sozinho. Todos os experimentos foram incubados a 27 ± 1 oC e UR ≥ 80%. Concluindo, Metarhizium sp. é indicado como um agente microbiano promissor para controlar larvas de M. domestica; também, blastosporos do isolado IP 146 aplicados à ração foram eficazes no controle de larvas de segundo instar. Além disso, o alcaloide matrine foi eficaz para controlar larvas de M. domestica; não afetou a viabilidade dos conídios dos fungos investigados neste estudo, mas retardou o crescimento da maioria dos isolados de Metarhizium e Beauveria testados. O crescimento radial de isolados de Isaria sp. não foi afetado pela suplementação de meio com matrine. Não houve aumento da eficácia contra larva de M. domestica quando fungos foram associados ao matrine.

Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2016-08-22T14:05:55Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Juscelino Rodrigues Filho- 2014.pdf: 2193889 bytes, checksum: 72728e54cda6c10730d70bfd23c4ff88 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2016-08-22T14:08:08Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Juscelino Rodrigues Filho- 2014.pdf: 2193889 bytes, checksum: 72728e54cda6c10730d70bfd23c4ff88 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-22T14:08:08Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Juscelino Rodrigues Filho- 2014.pdf: 2193889 bytes, checksum: 72728e54cda6c10730d70bfd23c4ff88 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2014-02-21 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / The dengue fever, transmitted by the mosquito Aedes aegypti, is of one of the most important vector-borne diseases in the world. Since there is no vaccine, the main way to control this disease is by combating the vector, which is mainly made with chemicals. However, with the emergence of resistant mosquito populations the interest in integrated control increased. Biopesticides based on entomopathogenic fungi are good alternatives to incorporate this policy to combat. Formulations protect fungal propagules against abiotic factors and are specific to the target vector. Culicinomyces clavisporus possesses specificity to dipteran larvae and their hosts infected orally get. Therefore, formulation of this fungus should contain palatable adjuvants, thus ensuring the ingestion by the larvae. This study evaluated the activity of conidia of C. clavisporus on larvae of A. aegypti, the preparation and evaluation of cellulose pellets formulated with or without adjuvant (10 or 20% soy flour) and / or conidia of C. clavisporus, and the viability of conidia exposed to different temperatures. The pellets without conidia were evaluated for stability in water and the ability to promote the development of larvae, while pellets with conidia were evaluated regarding their larvicidal activity. The results showed that concentrations ≥ 105 conidia / ml were sufficient to kill all of the larvae. Pellets containing 10% soybean flour seem to be ideal for fungal formulation and application, they disintegrate in water and do not promote a rapid development of larvae. However, pellets formulated with conidia had no larvicidal effect, which can be explained by a possible inviability of conidia by heat during the drying process / A Febre Dengue, transmitida pelo mosquito Aedes aegypti, é uma das doenças de transmissão vetorial mais importantes no mundo. Por não existir vacinas, a principal forma de controle desta doença é através do combate do vetor, que é feita principalmente com produtos químicos. Entretanto, com o aparecimento de populações de mosquitos resistentes, aumentou o interesse pelo combate integrado. Bioinseticidas à base de fungos entomopatogênicos são boas alternativas para integrar esta política de combate. Formulados fûngicos protegem os propágulos de fatores abióticos e são específicos ao vetor alvo. Culicinomyces clavisporus possui especificidade para larvas de dípteros e infecta o hospedeiro por via oral. Portanto, formulados deste fungo devem conter aditivos palatáveis, garantindo assim a ingestão pela larva. O presente trabalho avaliou a atividade de conídios de C. clavisporus em larvas de A. aegypti, a preparação e estabilidade de pellets de celulose, formulado ou não com aditivo (10 ou 20% de farinha de soja) e/ou conídios de C. clavisporus, e a viabilidade de conídios expostos a diferentes temperaturas. Os pellets sem conídios foram avaliados quanto à estabilidade em água e a capacidade de promover o desenvolvimento de larvas, já pellets com conídios foram avaliados quanto a sua atividade larvicida. Os resultados obtidos mostraram que concentrações ≥ 105 conídios/ml são suficientes para matar todas as larvas. Pellets contendo 10% de farinha de soja parecem ser ideais para formulação fúngica e aplicação, já que se desintegram em água e não promovem o desenvolvimento rápido das larvas. Porém, pellets formulados com conídios apresentaram baixo efeito larvicida, o que pode ser explicado devido uma possível inviabilização dos conídios por calor durante o processo de secagem.

Submitted by Marlene Santos (marlene.bc.ufg@gmail.com) on 2016-09-08T21:26:44Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Alaine Maria Lopes Catão - 2016.pdf: 2134676 bytes, checksum: 31502806b93036ec71bac8d07c2048f9 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2016-09-09T15:22:06Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Alaine Maria Lopes Catão - 2016.pdf: 2134676 bytes, checksum: 31502806b93036ec71bac8d07c2048f9 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-09T15:22:06Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Alaine Maria Lopes Catão - 2016.pdf: 2134676 bytes, checksum: 31502806b93036ec71bac8d07c2048f9 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2016-02-26 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Metarhizium anisopliae has a worldwide repertation in microbial control due to its entomopathogenic characteristics, infecting a wide range of insects. High relative humidity is a key factor in the development of mycoses during extra-cuticular phases. In adverse conditions, M. anisopliae can produce resistance structures formed by hyphal aggregates. Upon high humidity these aggregates are capable of producing new conidia that can cause infection in the target host. However, the fungus not always finds suitable conditions of humidity to develop itself. To overcome constraints related to suboptimal humidities, formulations play a pivotal role, and formulated products containing additives, such as humectants, have a great potential to accomplish this goal. The objective of this study was to develop a pelletized formulation of hyphal aggregates of M. anisopliae IP 46 with or without addition of a humectant, and further evaluate the effect of relative humidity on conidia production of M. anisopliae in laboratory conditions. A screening with glycerin, propylene glycol and PEG 400 was performed to find out which humectant was best for water absorption. Hyphal aggregates were produced in specific semi-synthetic liquid medium. The biomass was filtered and pellets prepared with microcrystalline cellulose or vermiculite amended with or without glycerine. The relative humidity was assessed under controlled humidity gradient generated by aqueous solutions of NaCl. The water absorption rate with the glycerin appeared to be greater when compared to propylene glycol and PEG 400. Among the additives tested with glycerin, microcrystalline cellulose absorbed greater water content than the vermiculite, since the former has humectant properties increasing water absorption. The largest number of conidia, both for pellets with vermiculite and cellulose, was produced at 100% RH and the lowest production was achieved at 93 % RH. At humidities < 93% there was no conidia production up to 20 days, indicating a strong humidity effect in the fungal sporulation. An accumulation of water could be seen on pellets with 40% glycerin at humidity ≥ 91% and at 93% RH on pellets with glycerin 10%. This high water content could have been prevented the fungal growth. In pellets with addition of 10% glycerin, only pellets exposed to 91% RH produced conidia, both for cellulose pellets, and for vermiculite pellets. / Metarhizium anisopliae chama atenção no controle microbiano devido às suas características entomopatogênicas, infectando uma ampla gama de insetos. Umidade relativa alta é um fator chave no desenvolvimento da micose durante as fases extra-cuticulares. Em condições adversas, M. anisopliae consegue produzir estruturas de resistência, denominadas agregados de hifas. Em umidade alta, esses agregados são capazes de produzir novos conídios que, por sua vez, podem causar infecção no hospedeiro alvo. Entretanto, nem sempre o fungo encontra circunstâncias ideais de umidade para se desenvolver. Para contornar problemas relacionados a umidades suboptimais, o desenvolvimento de formulações é de suma importância, e produtos formulados contendo aditivos, tais como umectantes, apresentam grande potencial. O objetivo deste trabalho foi desenvolver uma formulação peletizada de agregados de hifas de M. anisopliae IP 46 com adição ou não de umectante, e avaliar o efeito que a umidade relativa exerce sobre a produção de conídios de M. anisopliae em condições de laboratório. Uma triagem com glicerina, propilenoglicol e PEG 400 foi realizada para saber qual melhor umectante em relação à absorção de água. Agregados de hifas foram produzidos em meio líquido. A biomassa foi filtrada e péletes foram preparados com celulose microcristalina ou vermiculita com ou sem glicerina. A umidade relativa foi avaliada através de gradiente de umidade controlada com soluções aquosas de NaCl. A absorção de água com a glicerina foi maior quando comparada com propilenoglicol e PEG 400. Entre os aditivos testados com glicerina, celulose microcristalina absorveu mais água do que o aditivo vermiculita, visto que a celulose tem propriedades umectantes aumentando a absorção de água. O maior número de conídios, tanto para péletes com vermiculita, como para celulose foi produzido a 100% UR e a menor produção foi com 93% UR. Em umidades < 93% não houve produção de conídios até 20 dias, evidenciando o forte efeito da umidade na produção de conídios. Um acúmulo de água pôde ser observado em péletes com 40% de glicerina em umidade ≥ 91% e com 93% UR nos péletes com glicerina 10%. Essa concentração pode ter sido alta e impediu o crescimento do fungo. Nos péletes com adição de glicerina 10 %, apenas péletes expostos a 91% UR que produziram conídios, tanto para péletes de celulose, como para péletes de vermiculita.

Submitted by Marlene Santos (marlene.bc.ufg@gmail.com) on 2016-09-09T13:55:37Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Flávia Regina Santos da Paixão - 2016.pdf: 2930650 bytes, checksum: 6e200c8af02d2dc239dc8ba36d5d8806 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2016-09-09T15:25:47Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Flávia Regina Santos da Paixão - 2016.pdf: 2930650 bytes, checksum: 6e200c8af02d2dc239dc8ba36d5d8806 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-09T15:25:47Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Flávia Regina Santos da Paixão - 2016.pdf: 2930650 bytes, checksum: 6e200c8af02d2dc239dc8ba36d5d8806 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2016-04-08 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Rhipicephalus microplus engorged females lay their eggs in shaded and humid areas on the soil; these areas seems favorable for entomopathogenic fungi development, where they could be applied for tick control. This study produced pellets based on microesclerotia (ME) of Metarhizium spp. (CG 47, CG 632, IP 46, IP 119, ARSEF 1883 and ARSEF 2575) and assessed their virulence toward R. microplus engorged females under laboratory conditions. Microsclerotia produced in specific liquid medium were processed for pelletization. Conidial production and viability of conidia from each formulated Metarhizium spp. was evaluated by distributing 0,003 g pellets 2% water-agar medium, and incubating them at 27 °C or 32 °C for 15 days. The results showed that the conidial production among isolates was similar at 27 °C or 32 °C, and the viability of the conidia was superior than 90% for conidia produced. Two bioassays were conducted for screening the virulence of isolates against R. microplus: the first one tested 0,007 g of pellets of each Metarhizium spp. isolate; the second one tested different concentrations of IP 119 pellets (0,002, to 0,006 g). Pellets were sprinkled on the surface of 5 g sterile oxisol in Petri dishes, moistened with 2 ml sterile-distilled water. Ten replicates were prepared for each fungal isolate. The plates with pellets were incubated for 15 days at 27 °C and RH > 90% to induce conidial production; plates from control groups did not receive pellets. A female was placed in each plate and monitored daily for 15 days for fungal conidiogenesis on ticks. At day 15, the egg mass was removed from each plate and transferred to a glass vial and incubated at 27 ± 1ºC to quantify the number of hatching larvae hatched. In both bioassays the fungal treatment reduced the oviposition period of females, as well as the number of hatching larvae. A bioassay was conducted with IP 47 and IP 119 at two different temperatures: 27 °C or 32 °C. CG 47 pellets incubated at 27 °C incited conidiogenesis on R. microplus females by day 5, whereas IP 119 iniciated conidiogenesis by day 9. Trials conducted at 32 C revealed conidiogenesis on R. microplus females between day 5 and 6 for both fungi. The number of larvae from females exposed to pellets of CG 47 and IP 119 was reduced.. Tests with pellets of ME produced with the different inert materials showed that pellets with vermiculite presented higher conidial production compared with the pellets prepared with cellulose. Therefore, these results together indicate that the pelletized formulation of ME of Metarhizium spp. was effective in controlling R. microplus under laboratory conditions by reducing the number of offspring. This formulation is a potential mycoacaricide, since the temperature and humidity conditions required for production of infective conidia are conducive to those required by this tick to lay eggsand hatching larva in the environment. / Fêmeas ingurgitadas de Rhipicephalus microplus procuram áreas sombreadas e úmidas no solo para realizar oviposição. Estes locais apresentam um microclima favorável para viabilizar o controle deste artrópode com fungos entomopatogênicos. O objetivo deste estudo foi produzir péletes à base de microescleródios (ME) de Metarhizium spp. (CG 47, CG 632, IP 46, IP 119, ARSEF 1883 e ARSEF 2575) e avaliar sua virulência sobre fêmeas ingurgitadas de R. microplus em condições de laboratório. Os péletes foram obtidos a partir de microescleródios produzidos em meio líquido específico e processados para peletização. A produção de conídios e a viabilidade de cada formulado de Metarhizium spp. foram observadas distribuindo-se 0, 03g de péletes em meio ágar-água 2%, e incubando-os a 27 ºC ou 32 ºC por 15 dias, resultados mostram que a produção de conídios pelo péletes dos isolados foi similar para a temperatura de 27 ºC, sendo a viabilidade dos conídios esporulados superior a 90% em e 32 ºC. Dois bioensaios para triagem da virulência dos isolados contra R. microplus foram conduzidos: o primeiro com 0,007 g de péletes de cada um dos isolados de Metarhizium spp. estudados; e o segundo com quantidades diferentes de péletes (0.002 a0,006 g) do isolado IP 119. Péletes foram distribuídos sobre a superfície de 5 g de latossolo vermelho estéril, em Placas de Petri, umedecido com 2 mL de água destilada estéril. Foram preparadas dez réplicas para cada isolado fúngico. As placas foram incubadas por 15 dias a 27°C e UR&gt; 90% para induzir a produção de conídios a partir dos grânulos. Placas do grupo controle não foram acrescidas de péletes. Após este período, foi adicionada uma fêmea em cada placa e avaliou- se diretamente o início da conidiogênese sobre os carrapatos por 15 dias, e após este período a massa de ovos foi retirada das placas e acondicionada individualmente em tubos de vidro para posterior quantificação das larvas eclodidas. Em ambos os bioensaios, os tratamentos fungicos reduziram o período de oviposição das fêmeas, assim comoo número de larvas eclodidas. Resultado semelhante observado paradiferentes concentrações de péletes do isolado IP 119. Bioensaio similar à metodologia descrita foi conduzido somente com IP 119 e CG 47 em duas temperatura:s 27 ºC ou 32 ºC. Os resultados mostraram que a 27 ºC péletes formulados com ME de CG 47 iniciaram a conidiogênese em fêmeas de R. microplus em tempo médio de 5 dias, e IP 119 em 9 dias. Já os ensaios conduzidos a 32 ºC mostraram que a conidiogênese sobre as fêmeas de R. microplus iniciaram entre o 5° e 6° dia. Para ambos isolados o número médio de larvas eclodidas reduziram.(X 2 = 43.53; df = 2; P &lt;0.001). Péletes de ME com inerte vermiculita apresentaram maior produção de conídios do que o formulado contendo celulose (P = 0,01). Os resultados do presente estudo indicam que a formulação peletizada de ME de Metarhizium spp. foi eficaz no controle de R. microplus em condições de laboratório por reduzir o número de progênies. Esta formulação merece atenção para desenvolver potencial carrapaticida biológico, visto que as condições de temperatura e umidade requeridas para produção de conídios infectivos são similares às requeridas por este carrapato para produção de ovos e eclosão das larvas no ambiente.

Submitted by Jaqueline Silva (jtas29@gmail.com) on 2016-09-12T19:59:58Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Andreisa Prieb - 2015.pdf: 1433488 bytes, checksum: 0b16c552ef408a220fc72781528cf757 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Jaqueline Silva (jtas29@gmail.com) on 2016-09-12T20:00:10Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Andreisa Prieb - 2015.pdf: 1433488 bytes, checksum: 0b16c552ef408a220fc72781528cf757 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-12T20:00:10Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Andreisa Prieb - 2015.pdf: 1433488 bytes, checksum: 0b16c552ef408a220fc72781528cf757 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2015-07-10 / Rhipicephalus microplus is one of the main parasites found in Brazilian cattle herds; it is vector of pathogens causing severe economic losses. Currently, the control of R. microplus is conducted almost exclusively by the use of chemical products applied to parasitized hosts; however, the continued use of these products may lead ticks to resistance, and human health to damage. New methods for tick control that causes low damage to humans and to the environment are required; therefore, the use of entomopathogenic fungi has been investigated for biological control purposes, and the fungus Metarhizium has shown efficacy against R. microplus. The current study investigated the the efficacy of M. anisopliae and M. robertsii to control the non-parasitic phase of R. microplus. Bioassays were conducted in Petri dishes containing 5 g of sterile soil and 0.003 g of granules of formulated fungi spread evenly over the soil surface. One engorged female was placed in each plate for evaluation of their biology. The mean number of hatched larvae obtained from groups of females treated with granules of the isolate CG 632 was 604, while 385 larvae were obtained from the groups treated with granules of CG 168, and 87 from groups treated with CG 47; in the control groups, 2,896 larvae hatched. The mean oviposition period of females treated with granules of CG 168 or CG 632 was, respectively, 2.8 and 0.9 days, while in the control groups the mean oviposition period was 14.2 days. The statistical analysis revealed that both the oviposition period of engorged females and the number of hatched larvae showed significance at 1% of probability (P<0.01). The current study revelaed that the fungal isolates tested, M. anisopliae and M. robertsii, formulated in granules were able to reduce progeny of R. microplus under controlled conditions, suggesting their potential to control the non-parasitic phase of the R. microplus tick. / Rhipicephalus microplus é um dos principais parasitos presentes no rebanho bovino brasileiro; é transmissor de agentes patogênicos causadores de doenças como anaplasmose e babesiose, e causador de sérios prejuízos financeiros. Atualmente, o controle de R. microplus é realizado quase que exclusivamente por produtos químicos empregados na fase parasitária; no entanto, a sua utilização contínua pode causar resistência desses parasitos e danos à saúde humana. Desse modo, é necessário descobrir novos meios capazes de realizar o controle dos carrapatos sem causar danos ao ser humano e ao ambiente. A utilização de fungos entomopatogênicos vem sendo estudada para fins de controle biológico e os fungos do gênero Metarhizium vêm mostrando eficácia contra R. microplus. O presente estudo teve o objetivo de investigar o controle da fase não parasitária de R. microplus com os fungos entomopatogênicos: M. anisopliae (CG 47 e CG 168 ) e M. robertsii (CG632). Ensaios foram conduzidos utilizando-se placas de Petri com 5 g de latossolo vermelho estéril e 0,003 g de grânulos fúngicos dos respectivos isolados espalhados de forma homogênea sobre a superfície do solo. Uma fêmea ingurgitada foi colocada em cada placa (10 Placas para cada isolado e 10 placas para o controle de cada isolado) para avaliação de seus parâmetros biológicos. O período de postura das fêmeas tratadas com os isolados CG 168 e CG 47 foi 2,8 e 0,9 dias, enquanto no grupo controle o período de postura foi 14,2 dias. O número médio de larvas recuperadas foi 604 nos grupos tratados com grânulos formulados com o isolado CG 632, enquanto 385 larvas foram recuperadas nos grupos tratados com CG 168, e 87 nos grupos tratados com CG 47; no grupo controle foi observada eclosão média de 2.896 larvas. Houve diferença significativa entre o número médio de larvas eclodidas e o período médio de postura das fêmeas submetidas aos diferentes tratamentos. A análise estatística revelou que tanto o período médio de postura das fêmeas quanto o número de larvas eclodidas, apresentou significância ao nível 1% de probabilidade (P<0,01). O presente estudo permitiu concluir que os isolados testados de M. anisopliae e M. robertsii, formulados em grânulos, foram capazes de reduzir a progênie de R. microplus em condições controladas, sugerindo assim seu potencial para controle da fase não parasitária desse carrapato.