Thesis (M.S.)--University of Missouri--Columbia, 1995. / Typescript. Includes bibliographical references (leaves 35-37). Also available on the Internet.

Aspergillus fumigatus é um fungo filamentoso e saprofítico encontrado em todas as regiões do mundo. A principal forma de infecção ocorre através da inalação de conídios do fungo com predominância de infecções no trato respiratório, principalmente em pacientes imunocomprometidos. Foi caracterizada a função mitocondrial de A. fumigatus e sugeriu-se a presença de vias alternativas, dentre elas, a presença da NADH desidrogenase alternativa. A fim de colaborar com estudos para elucidação do papel desta enzima, foi realizada a clonagem dos genes das NADH desidrogenase alternativa interna e externa de A. fumigatus. A análise da seqüência de aminoácidos revelou um perfil de hidropaticidade com a presença de quatro regiões hidrofóbicas, semelhante às outras seqüências já descritas. Além disso, foram identificados dois motivos (GXGXXG) altamente conservados para ligações a nucleotídeos, dentro de um domínio os quais estão relacionados com a estrutura e atividade da enzima. A seqüência de cDNA do gene ndhiAf foi clonada em plasmídeo pYES2 e expressa em S. cerevisiae cepa CEN.PK873-2B; a expressão da NDHIAf foi verificada por técnica de Western-blot. A proteína foi expressa de forma ativa, conferindo à levedura uma respiração e a formação de um potencial de membrana resultantes da oxidação de substratos clássicos do complexo I, sugerindo sua localização na membrana mitocondrial interna. Além disso, as cepas expressando essa proteína foram capazes de crescer em meio contendo apenas lactato como fonte de carbono, uma característica atribuída à presença da NADH desidrogenase alternativa interna (NDHi). Considerando que a atividade das NDHIAf e NDHEAf estão sob controle metabólico, nos avaliamos o efeito de diferentes concentrações de glucose como única fonte de carbono no meio de cultura. Durante a germinação conidial, não foi observada expressão da NDHIAf e NDHEAf na presença de baixas concentrações de glucose. Entretanto, durante a fase de hifas foi observado um aumento na expressão de NDHIAf e NDHEAf. Por outro lado, em alta concentrações de glucose, durante a germinação conidial, foi observado expressão da NDHIAf mas nenhuma expressão da NDHEAf. Na fase de hifas observou-se um aumento da expressão da NDHIAf e uma diminuição da NDHEAf. / Aspergillus fumigatus is a filamentous and saprophytic fungus found in all regions of the world. The main form of infection occurs through inhalation of fungi conidial, with predominance of infections in the respiratory treat, mainly in immunocompromised host. It was characterized the mitochondrial function of A. fumigatus and suggested the presence of alternative pathways, including the alternative NADH dehydrogenase. In order to elucidate its role, genes of the external and internal enzymes were cloned. Analysis of the amino acid sequence and hydropathy plot revealed a profile with four hydrophobic regions, similar to other already described sequences. Moreover, two highly conserved motifs (GXGXXG) for the nucleotides interaction, related with the structure and activity of the enzyme, were identified inside the a domain. The sequence of DNA of the ndhiAf gene was cloned in an expression plasmid pYES2 and expressed in CEN.PK873-2B S. cerevisiae strain; the expression was confirmed by Western-blot analysis. The protein was expressed in an active form, providing to the yeast an oxygen consumption and a potential membrane formation due to oxidation of the complex I substract, suggesting its localization in the inner mitochondrial membrane. Moreover, strains expressing this protein were capable of growing in medium with only lactate as a carbon source, a characteristic associated with the presence of internal alternative NADH dehydrogenase (NDHI). Considering that NDHI and NDHE activities are under metabolic control, we evaluated the effect of different concentrations of glucose as the only carbon source in the medium of culture. During conidia germination, it was not observed neither an expression of NDHI nor NDHE in the presence of low concentrations of glucose. However, in hyphae phase was observed an increase an expression of NDHI and NDHE. On the other hand, in high concentration of glucose, during conidia germination was observed an expression of NDHI and not expression of NDHE. In hyphae phase was observed a decrease an expression of NDHI and an increase of NDHE.

Objetivos: Leptina e grelina são hormonios relacionados a regulação da ingestão alimentar e consequentemente o controle de peso. Como tem sido descrito até agora, os valores normais desses hormônios estão sujeitos a grande variabilidade. Devido a falta de estudos que contemplem os valores totais de grelina total, grelina acilada, leptina, insulina e glicose em crianças, esse estudo tem o objetivo de avaliar esses hormônios e comparar com as variáveis antropométricas em crianças eutróficas de 4 meses a 10 anos. Pacientes e métodos: É um estudo transversal que avaliou 111 crianças de 4 meses a 10 anos de idade. Foram consideradas eutróficas crianças de até 5 anos com valores de IMC para idade entre -2,0 e +2,0 escores-z, e crianças maiores de 5 anos com valores entre -2,0 e +1,0 escores-z, de acordo com a OMS 2009. Os participantes foram selecionados de uma população saudável com pequeno procedimento cirúrgico ou revisão de saúde programada. As crianças foram categorizadas em três grupos: V 24 meses (n = 10); 25-60 meses (n = 22); > 60 meses (n = 27). As amostras de sangue foram coletadas com um jejum mínimo de 3 horas e máximo de 14 horas. As concentrações de grelina total, grelina acilada e leptina foram dosadas pelo kit commercial ELISA (Linco Research, St Charles-MI, US). A concentração de Insulina foi testada com o kit ELISA (Diagnostics System Laboratories, INC Webster-TX, USA) e a de Glicose com o kit comercial GlicosePAP liquiform® (Labtest Diagnóstica – Lagoa Santa-MG, Brasil). Variáveis que apresentaram distribuição normal foram comparadas com o teste t de Student e analizadas com ANOVA, e as que apresentaram distribuição assimétrica foram comparadas pelo teste de Kruskal-Wallis e analizadas pelo teste de Mann-Whitney. As correlações foram testadas pelos coeficientes de Pearson ou Spearman. O nível de significância utilizado foi 0,05. Resultados: A média de idade foi 60 meses (mín-máx 35-91 meses). A mediana (percentis 25-75) dos valores de grelina acilada, grelina total, grelina desacilada, leptina e insulina foram 1,374 pg/ml (949-1,875); 288 pg/ml (212-450); 1,086 pg/ml (711-1,393); 1,53 ng/ml (1,11-2,77) e 15,5 ^U/ml (12,1-23,5), respectivamente. A média ± DP da glicose foi 88,6 ± 13,1. A média do escore-z do IMC/I encontrada foi -0,16 ± 0,78 para meninos e -0,04 ± 0,83 para meninas. Foi encontrada uma correlação inversa da grelina total, acilada e desacilada com a idade [rs= -0,455 (P < 0,001); rs= -0,313 (P = 0,001); rs= -0,484 (P < 0,001)], respectivamente. Ocorreu uma relação direta da leptina com IMC/I e com a idade [(rs = 0,190 (P = 0,046); rs = 0,429 (P < 0,001)], respectivamente. Conclusões: Os resultados observados nas dosagens e as correlações encontradas de grelina com faixa etária e leptina com sexo feminino e parâmetros antropométricos podem ser úteis para comparação com crianças que são portadoras de alterações de apetite. / Objective: Leptin and ghrelin are hormones related to regulation of food intake and consequently body weight control. Normal values of these hormones are subject to a great variability as has been described so far. Due to the lack of studies regarding plasma levels of total and acylated ghrelin and serum levels of leptin, insulin and glucose in young children, this study aimed to assess these hormones and compare with body mass index (BMI) in healthy well-nourish children aged 4 months -10 years old. Methods: Cross-sectional study evaluated 118 children aged 4-129 months old with BMI-for-age values were within -2.0 and +2.0 SD z-scores for children under 5 years and within -2.0 and +1.0 SD for children over five years, according to WHO 2009. Subjects were enrolled from a population referred to minimal surgeries and routine medical check up. All subjects were categorized into 3 groups: d 24 months (n = 10); 25-60 months (n = 22); > 60 months (n = 27). Blood samples were collected following a minimum of 3-hour and a maximum of 14 hours fasting period. Total and acylated ghrelin and leptin concentrations were assessed by ELISA commercial kit (Linco Research, St Charles-MI, US). Insulin was assessed by ELISA commercial kit (Diagnostics System Laboratories, INC Webster-TX, USA) and glucose by ELISA commercial kit GlicosePAP liquiform® (Labtest Diagnóstica – Lagoa Santa-MG, Brazil). Variables with normal distribution were compared by Student´s t test and analysis of variance (ANOVA). Variables with asymmetric distribution were analyzed by Kruskal-Wallis and Mann-Whitney U tests. Correlation between continuous variables was assessed by Pearson or Spearman correlation coefficient test. The level of significance used was 0.05. Results: Total and acyl ghrelin, leptin and glucose were detected in all samples with a median (P 25-75) concentration in the whole group of 1.374 (949-1.875) pg/mL, 288 (212-450) pg/mL, 1.53 (1.11-2.77) ng/mL and 15.5 (12.1-23.5) ^U/mL, respectively. Glucose media ± SD concentration was 88.6 ± 13.1 mg/dL.Conclusions: Ghrelin showed an inverse correlation between and age and leptin a direct correlation between anthropometric parameters and gender in healthy wellnourished children. Insulin and glucose didn’t correlate with any variable.

Magister Scientiae - MSc / The study introduces and puts forward Sector Policing as a model to expand community Policing and to broaden the scope of crime prevention. It also demonstrates how Sector Policing can be utilised to decentralise policing and deepen community participation. / South Africa

Introdução: A apneia do sono causa hipóxia intermitente (HI), que tem sido implicada na resistência à insulina. A proteína desacopladora 2 (UCP2) no pâncreas é reguladora negativa da secreção de insulina. Objetivos do Estudo: Avaliar se a exposição animal ao modelo de apneia do sono influencia na produção de insulina via expressão do mRNA da UCP2. Desenho e intervenções: Camundongos C57BL machos foram expostos durante 35 dias à hipóxia intermitente (HI; n = 18) ou HI simulada (HIS; n = 18). Durante 8 horas diárias o grupo HI foi submetido a um total de 480 ciclos de 30 segundos de hipóxia progressiva a um nadir da fração inspirada de oxigênio de 8 ± 1%, seguido por 30 segundos de normóxia. Métodos e Resultados: A expressão do mRNA da UCP-2 no pâncreas, avaliada por PCR em tempo real, foi 18% mais baixa no grupo HI do que no grupo HIS (P = 0,14). Imunohistoquímica identificou maior número de células beta no grupo HI do que no HIS (P = 0,14). Os níveis de glicose no soro medidos por métodos colorimétricos enzimáticos foram menores no grupo HI do que no grupo HIS (P = 0,025). Níveis significativamente maiores de insulina no soro, quantificados por ELISA, e níveis significativamente mais baixos de glucagon, quantificados por EIA, foram observados no grupo HI, quando comparado ao grupo HIS. Os cálculos do modelo de avaliação da homeostase (HOMA) para a resistência à insulina sugerem maior sensibilidade em HI do que em camundongos HIS (P = 0,09). A função das células beta, avaliada por HOMA - β foi maior em camundongos HI do que nos HIS (P = 0,014). O peso corporal, ajustado ao consumo alimentar, foi relativamente estável durante o experimento. Não foram encontradas diferenças significativas no perfil lipídico. Conclusões: Estes resultados sugerem que a HI provoca alterações na função pancreática que não podem ser relacionadas com a expressão do mRNA da UCP2. / Background: Sleep apnea causes intermittent hypoxia (IH) that has been implicated in insulin resistance. Pancreatic uncoupling protein-2 (UCP2) is a negative regulator of insulin secretion. Study Objectives: To evaluate whether exposure to an animal model of sleep apnea influences insulin output via UCP2 expression. Design and interventions: Male C57BL mice were exposed during 35 days to intermittent hypoxia (IH; n=18) or to sham IH (SIH; n=18). During 8 hours daily the IH group underwent a total of 480 cycles of 30 seconds of progressive hypoxia to a nadir FIO2 of 8±1% followed by 30 seconds of normoxia. Measurements and Results: The expression of pancreatic UCP-2 mRNA assessed by real-time PCR was 18% lower (P=0.14) in the IH than in the SIH group. Immunohistochemistry identified higher number of beta cells in IH than in SIH group (P=0.14). Glucose levels measured in serum by enzymatic colorimetric methods was lower in IH than in SIH group (P=0.025). Significantly higher serum insulin quantified by ELISA and lower glucagon levels quantified by EIA were seen in the IH group when compared with SIH. Calculations of homeostasis model assessment (HOMA) for insulin resistance suggest higher sensitivity in IH than in SIH mice (P=0.09). HOMA for beta-cell function was higher in IH than in SIH mice (P=0.014). Body weight, adjusted for food intake, was relatively stable during the experiment. No significant differences in lipid profile were encountered. Conclusions: These results suggest that IH causes changes in pancreatic function that may be not related to expression of mRNA UCP2.

Introdução: O uso de adoçantes não calóricos (ANC) pode interferir na regulação do apetite, promovendo maior ingestão alimentar, maior ganho de peso (GP) e maior adiposidade. Em estudos anteriores, do nosso grupo, os resultados mostraram que os animais que consumiram iogurte com sacarina e aspartame tiveram um maior ganho de peso comparado ao grupo que usou sacarose. Porém, como o consumo calórico total foi semelhante entre os grupos, o aumento de peso não pôde ser explicado pelo aumento de ingestão calórica. Concluímos, então, que o aumento de peso poderia estar associado à redução do gasto energético induzido pelo adoçante artificial. Estudos anteriores já sugeriram que a sacarina poderia induzir um aumento de peso, porém nenhum estudo até o momento avaliou o consumo de oxigênio basal dos animais. Nesse sentido, é possível que a sacarina possa estar determinando a redução do gasto energético e possivelmente contribuindo para um aumento na glicemia. Desse modo, o presente estudo contempla analisar o efeito da sacarina no consumo basal de oxigênio. Materiais e Métodos: Foi realizado um experimento controlado com 37 ratos Wistar machos adultos pesando entre 180 e 220 g, que foram divididos aleatoriamente em três grupos de acordo com o tipo de exposição tanto para adoçante não calórico (sacarina-SAC), adoçante calórico (sacarose-SUC) ou controle (CONT). Os suplementos foram oferecidos diariamente durante um período de 12 semanas. O ganho de peso, ingestão calórica e controle hídrico foram determinados semanalmente, o consumo basal de oxigênio determinado em repouso (VO2) e RER foram medidos no início do estudo, 5 e 12 semanas, e o teste de tolerância à glicose oral foi determinada nas semanas 6 e 12. Resultados: O uso de sacarina promoveu maior ganho de peso que a sacarose (p=0,031). A ingestão calórica total (kcal/g) diferiu entre os grupos (p=0,029). Os animais que consumiram sacarina ingeriram mais ração. Os grupos apresentaram diferenças quanto à ingestão hídrica, sendo o grupo sacarina com o maior consumo (ml/g) (p=0,018). Entretanto, o consumo de oxigênio e o quociente respiratório não foram significativos. Conclusão: O ganho de peso cumulativo nos animais que consumiram sacarina não pode ser atribuído a uma redução no dispêndio de energia, medida pelo consumo de oxigênio, mas sim pelo aumento da ingestão alimentar e hídrica. / Introduction: The use of non-caloric sweeteners (ANC) can interfere with the regulation of appetite, promoting greater food intake, greater weight gain (WG) and increased adiposity. In previous data, the results showed that the animals that consumed yogurt saccharin and aspartame had a greater increase in weight compared to the group using sucrose. However, as the total calorie intake was similar between the groups, the weight increase could not be explained by the increase in caloric intake. We concluded that weight gain may be associated with decreased energy expenditure induced by artificial sweetener. Previous studies have suggested that saccharin could induce weight gain, but no study to date has evaluated the consumption of oxygen basal animals. In this sense, it is possible that saccharin may be determining reduction in energy expenditure and possibly contributing to an increase in blood glucose. Thus, this study include saccharin analyze the effect on basal oxygen consumption. Materials and Methods: We conducted a controlled experiment with 37 adult male Wistar rats weighing 180-220 g were randomly divided into three groups according to the type of exposure for both non-caloric sweetener (sugar-SAC), calorie sweetener (sucrose-SUC) or control (CONT). The supplements were given daily over a period of 12 weeks. Weight gain, food intake and water control were determined weekly, basal oxygen consumption determined at rest (VO2) and RER were measured at baseline, 5 and 12 weeks and tolerance test oral glucose was determined at week 6 and 12. Results: The use of saccharin promoted greater weight gain than sucrose (p =0.031). The total caloric intake (kcal/g) differ between the groups (p = 0.029), the animals that consumed saccharin ate more food. The groups differed in water intake, and the sugar group with the highest consumption (ml/g) (p = 0.018). However, the oxygen consumption and the respiratory exchange ratio were not significant. Conclusion: The cumulative weight gain in the animals fed saccharin can not be attributed to a reduction in energy expenditure, measured by oxygen consumption, but can be explained by increased food and water intake.

Objetivos: Leptina e grelina são hormonios relacionados a regulação da ingestão alimentar e consequentemente o controle de peso. Como tem sido descrito até agora, os valores normais desses hormônios estão sujeitos a grande variabilidade. Devido a falta de estudos que contemplem os valores totais de grelina total, grelina acilada, leptina, insulina e glicose em crianças, esse estudo tem o objetivo de avaliar esses hormônios e comparar com as variáveis antropométricas em crianças eutróficas de 4 meses a 10 anos. Pacientes e métodos: É um estudo transversal que avaliou 111 crianças de 4 meses a 10 anos de idade. Foram consideradas eutróficas crianças de até 5 anos com valores de IMC para idade entre -2,0 e +2,0 escores-z, e crianças maiores de 5 anos com valores entre -2,0 e +1,0 escores-z, de acordo com a OMS 2009. Os participantes foram selecionados de uma população saudável com pequeno procedimento cirúrgico ou revisão de saúde programada. As crianças foram categorizadas em três grupos: V 24 meses (n = 10); 25-60 meses (n = 22); > 60 meses (n = 27). As amostras de sangue foram coletadas com um jejum mínimo de 3 horas e máximo de 14 horas. As concentrações de grelina total, grelina acilada e leptina foram dosadas pelo kit commercial ELISA (Linco Research, St Charles-MI, US). A concentração de Insulina foi testada com o kit ELISA (Diagnostics System Laboratories, INC Webster-TX, USA) e a de Glicose com o kit comercial GlicosePAP liquiform® (Labtest Diagnóstica – Lagoa Santa-MG, Brasil). Variáveis que apresentaram distribuição normal foram comparadas com o teste t de Student e analizadas com ANOVA, e as que apresentaram distribuição assimétrica foram comparadas pelo teste de Kruskal-Wallis e analizadas pelo teste de Mann-Whitney. As correlações foram testadas pelos coeficientes de Pearson ou Spearman. O nível de significância utilizado foi 0,05. Resultados: A média de idade foi 60 meses (mín-máx 35-91 meses). A mediana (percentis 25-75) dos valores de grelina acilada, grelina total, grelina desacilada, leptina e insulina foram 1,374 pg/ml (949-1,875); 288 pg/ml (212-450); 1,086 pg/ml (711-1,393); 1,53 ng/ml (1,11-2,77) e 15,5 ^U/ml (12,1-23,5), respectivamente. A média ± DP da glicose foi 88,6 ± 13,1. A média do escore-z do IMC/I encontrada foi -0,16 ± 0,78 para meninos e -0,04 ± 0,83 para meninas. Foi encontrada uma correlação inversa da grelina total, acilada e desacilada com a idade [rs= -0,455 (P < 0,001); rs= -0,313 (P = 0,001); rs= -0,484 (P < 0,001)], respectivamente. Ocorreu uma relação direta da leptina com IMC/I e com a idade [(rs = 0,190 (P = 0,046); rs = 0,429 (P < 0,001)], respectivamente. Conclusões: Os resultados observados nas dosagens e as correlações encontradas de grelina com faixa etária e leptina com sexo feminino e parâmetros antropométricos podem ser úteis para comparação com crianças que são portadoras de alterações de apetite. / Objective: Leptin and ghrelin are hormones related to regulation of food intake and consequently body weight control. Normal values of these hormones are subject to a great variability as has been described so far. Due to the lack of studies regarding plasma levels of total and acylated ghrelin and serum levels of leptin, insulin and glucose in young children, this study aimed to assess these hormones and compare with body mass index (BMI) in healthy well-nourish children aged 4 months -10 years old. Methods: Cross-sectional study evaluated 118 children aged 4-129 months old with BMI-for-age values were within -2.0 and +2.0 SD z-scores for children under 5 years and within -2.0 and +1.0 SD for children over five years, according to WHO 2009. Subjects were enrolled from a population referred to minimal surgeries and routine medical check up. All subjects were categorized into 3 groups: d 24 months (n = 10); 25-60 months (n = 22); > 60 months (n = 27). Blood samples were collected following a minimum of 3-hour and a maximum of 14 hours fasting period. Total and acylated ghrelin and leptin concentrations were assessed by ELISA commercial kit (Linco Research, St Charles-MI, US). Insulin was assessed by ELISA commercial kit (Diagnostics System Laboratories, INC Webster-TX, USA) and glucose by ELISA commercial kit GlicosePAP liquiform® (Labtest Diagnóstica – Lagoa Santa-MG, Brazil). Variables with normal distribution were compared by Student´s t test and analysis of variance (ANOVA). Variables with asymmetric distribution were analyzed by Kruskal-Wallis and Mann-Whitney U tests. Correlation between continuous variables was assessed by Pearson or Spearman correlation coefficient test. The level of significance used was 0.05. Results: Total and acyl ghrelin, leptin and glucose were detected in all samples with a median (P 25-75) concentration in the whole group of 1.374 (949-1.875) pg/mL, 288 (212-450) pg/mL, 1.53 (1.11-2.77) ng/mL and 15.5 (12.1-23.5) ^U/mL, respectively. Glucose media ± SD concentration was 88.6 ± 13.1 mg/dL.Conclusions: Ghrelin showed an inverse correlation between and age and leptin a direct correlation between anthropometric parameters and gender in healthy wellnourished children. Insulin and glucose didn’t correlate with any variable.

Introdução: A apneia do sono causa hipóxia intermitente (HI), que tem sido implicada na resistência à insulina. A proteína desacopladora 2 (UCP2) no pâncreas é reguladora negativa da secreção de insulina. Objetivos do Estudo: Avaliar se a exposição animal ao modelo de apneia do sono influencia na produção de insulina via expressão do mRNA da UCP2. Desenho e intervenções: Camundongos C57BL machos foram expostos durante 35 dias à hipóxia intermitente (HI; n = 18) ou HI simulada (HIS; n = 18). Durante 8 horas diárias o grupo HI foi submetido a um total de 480 ciclos de 30 segundos de hipóxia progressiva a um nadir da fração inspirada de oxigênio de 8 ± 1%, seguido por 30 segundos de normóxia. Métodos e Resultados: A expressão do mRNA da UCP-2 no pâncreas, avaliada por PCR em tempo real, foi 18% mais baixa no grupo HI do que no grupo HIS (P = 0,14). Imunohistoquímica identificou maior número de células beta no grupo HI do que no HIS (P = 0,14). Os níveis de glicose no soro medidos por métodos colorimétricos enzimáticos foram menores no grupo HI do que no grupo HIS (P = 0,025). Níveis significativamente maiores de insulina no soro, quantificados por ELISA, e níveis significativamente mais baixos de glucagon, quantificados por EIA, foram observados no grupo HI, quando comparado ao grupo HIS. Os cálculos do modelo de avaliação da homeostase (HOMA) para a resistência à insulina sugerem maior sensibilidade em HI do que em camundongos HIS (P = 0,09). A função das células beta, avaliada por HOMA - β foi maior em camundongos HI do que nos HIS (P = 0,014). O peso corporal, ajustado ao consumo alimentar, foi relativamente estável durante o experimento. Não foram encontradas diferenças significativas no perfil lipídico. Conclusões: Estes resultados sugerem que a HI provoca alterações na função pancreática que não podem ser relacionadas com a expressão do mRNA da UCP2. / Background: Sleep apnea causes intermittent hypoxia (IH) that has been implicated in insulin resistance. Pancreatic uncoupling protein-2 (UCP2) is a negative regulator of insulin secretion. Study Objectives: To evaluate whether exposure to an animal model of sleep apnea influences insulin output via UCP2 expression. Design and interventions: Male C57BL mice were exposed during 35 days to intermittent hypoxia (IH; n=18) or to sham IH (SIH; n=18). During 8 hours daily the IH group underwent a total of 480 cycles of 30 seconds of progressive hypoxia to a nadir FIO2 of 8±1% followed by 30 seconds of normoxia. Measurements and Results: The expression of pancreatic UCP-2 mRNA assessed by real-time PCR was 18% lower (P=0.14) in the IH than in the SIH group. Immunohistochemistry identified higher number of beta cells in IH than in SIH group (P=0.14). Glucose levels measured in serum by enzymatic colorimetric methods was lower in IH than in SIH group (P=0.025). Significantly higher serum insulin quantified by ELISA and lower glucagon levels quantified by EIA were seen in the IH group when compared with SIH. Calculations of homeostasis model assessment (HOMA) for insulin resistance suggest higher sensitivity in IH than in SIH mice (P=0.09). HOMA for beta-cell function was higher in IH than in SIH mice (P=0.014). Body weight, adjusted for food intake, was relatively stable during the experiment. No significant differences in lipid profile were encountered. Conclusions: These results suggest that IH causes changes in pancreatic function that may be not related to expression of mRNA UCP2.

Introdução: O uso de adoçantes não calóricos (ANC) pode interferir na regulação do apetite, promovendo maior ingestão alimentar, maior ganho de peso (GP) e maior adiposidade. Em estudos anteriores, do nosso grupo, os resultados mostraram que os animais que consumiram iogurte com sacarina e aspartame tiveram um maior ganho de peso comparado ao grupo que usou sacarose. Porém, como o consumo calórico total foi semelhante entre os grupos, o aumento de peso não pôde ser explicado pelo aumento de ingestão calórica. Concluímos, então, que o aumento de peso poderia estar associado à redução do gasto energético induzido pelo adoçante artificial. Estudos anteriores já sugeriram que a sacarina poderia induzir um aumento de peso, porém nenhum estudo até o momento avaliou o consumo de oxigênio basal dos animais. Nesse sentido, é possível que a sacarina possa estar determinando a redução do gasto energético e possivelmente contribuindo para um aumento na glicemia. Desse modo, o presente estudo contempla analisar o efeito da sacarina no consumo basal de oxigênio. Materiais e Métodos: Foi realizado um experimento controlado com 37 ratos Wistar machos adultos pesando entre 180 e 220 g, que foram divididos aleatoriamente em três grupos de acordo com o tipo de exposição tanto para adoçante não calórico (sacarina-SAC), adoçante calórico (sacarose-SUC) ou controle (CONT). Os suplementos foram oferecidos diariamente durante um período de 12 semanas. O ganho de peso, ingestão calórica e controle hídrico foram determinados semanalmente, o consumo basal de oxigênio determinado em repouso (VO2) e RER foram medidos no início do estudo, 5 e 12 semanas, e o teste de tolerância à glicose oral foi determinada nas semanas 6 e 12. Resultados: O uso de sacarina promoveu maior ganho de peso que a sacarose (p=0,031). A ingestão calórica total (kcal/g) diferiu entre os grupos (p=0,029). Os animais que consumiram sacarina ingeriram mais ração. Os grupos apresentaram diferenças quanto à ingestão hídrica, sendo o grupo sacarina com o maior consumo (ml/g) (p=0,018). Entretanto, o consumo de oxigênio e o quociente respiratório não foram significativos. Conclusão: O ganho de peso cumulativo nos animais que consumiram sacarina não pode ser atribuído a uma redução no dispêndio de energia, medida pelo consumo de oxigênio, mas sim pelo aumento da ingestão alimentar e hídrica. / Introduction: The use of non-caloric sweeteners (ANC) can interfere with the regulation of appetite, promoting greater food intake, greater weight gain (WG) and increased adiposity. In previous data, the results showed that the animals that consumed yogurt saccharin and aspartame had a greater increase in weight compared to the group using sucrose. However, as the total calorie intake was similar between the groups, the weight increase could not be explained by the increase in caloric intake. We concluded that weight gain may be associated with decreased energy expenditure induced by artificial sweetener. Previous studies have suggested that saccharin could induce weight gain, but no study to date has evaluated the consumption of oxygen basal animals. In this sense, it is possible that saccharin may be determining reduction in energy expenditure and possibly contributing to an increase in blood glucose. Thus, this study include saccharin analyze the effect on basal oxygen consumption. Materials and Methods: We conducted a controlled experiment with 37 adult male Wistar rats weighing 180-220 g were randomly divided into three groups according to the type of exposure for both non-caloric sweetener (sugar-SAC), calorie sweetener (sucrose-SUC) or control (CONT). The supplements were given daily over a period of 12 weeks. Weight gain, food intake and water control were determined weekly, basal oxygen consumption determined at rest (VO2) and RER were measured at baseline, 5 and 12 weeks and tolerance test oral glucose was determined at week 6 and 12. Results: The use of saccharin promoted greater weight gain than sucrose (p =0.031). The total caloric intake (kcal/g) differ between the groups (p = 0.029), the animals that consumed saccharin ate more food. The groups differed in water intake, and the sugar group with the highest consumption (ml/g) (p = 0.018). However, the oxygen consumption and the respiratory exchange ratio were not significant. Conclusion: The cumulative weight gain in the animals fed saccharin can not be attributed to a reduction in energy expenditure, measured by oxygen consumption, but can be explained by increased food and water intake.

Introdução: A apneia do sono causa hipóxia intermitente (HI), que tem sido implicada na resistência à insulina. A proteína desacopladora 2 (UCP2) no pâncreas é reguladora negativa da secreção de insulina. Objetivos do Estudo: Avaliar se a exposição animal ao modelo de apneia do sono influencia na produção de insulina via expressão do mRNA da UCP2. Desenho e intervenções: Camundongos C57BL machos foram expostos durante 35 dias à hipóxia intermitente (HI; n = 18) ou HI simulada (HIS; n = 18). Durante 8 horas diárias o grupo HI foi submetido a um total de 480 ciclos de 30 segundos de hipóxia progressiva a um nadir da fração inspirada de oxigênio de 8 ± 1%, seguido por 30 segundos de normóxia. Métodos e Resultados: A expressão do mRNA da UCP-2 no pâncreas, avaliada por PCR em tempo real, foi 18% mais baixa no grupo HI do que no grupo HIS (P = 0,14). Imunohistoquímica identificou maior número de células beta no grupo HI do que no HIS (P = 0,14). Os níveis de glicose no soro medidos por métodos colorimétricos enzimáticos foram menores no grupo HI do que no grupo HIS (P = 0,025). Níveis significativamente maiores de insulina no soro, quantificados por ELISA, e níveis significativamente mais baixos de glucagon, quantificados por EIA, foram observados no grupo HI, quando comparado ao grupo HIS. Os cálculos do modelo de avaliação da homeostase (HOMA) para a resistência à insulina sugerem maior sensibilidade em HI do que em camundongos HIS (P = 0,09). A função das células beta, avaliada por HOMA - β foi maior em camundongos HI do que nos HIS (P = 0,014). O peso corporal, ajustado ao consumo alimentar, foi relativamente estável durante o experimento. Não foram encontradas diferenças significativas no perfil lipídico. Conclusões: Estes resultados sugerem que a HI provoca alterações na função pancreática que não podem ser relacionadas com a expressão do mRNA da UCP2. / Background: Sleep apnea causes intermittent hypoxia (IH) that has been implicated in insulin resistance. Pancreatic uncoupling protein-2 (UCP2) is a negative regulator of insulin secretion. Study Objectives: To evaluate whether exposure to an animal model of sleep apnea influences insulin output via UCP2 expression. Design and interventions: Male C57BL mice were exposed during 35 days to intermittent hypoxia (IH; n=18) or to sham IH (SIH; n=18). During 8 hours daily the IH group underwent a total of 480 cycles of 30 seconds of progressive hypoxia to a nadir FIO2 of 8±1% followed by 30 seconds of normoxia. Measurements and Results: The expression of pancreatic UCP-2 mRNA assessed by real-time PCR was 18% lower (P=0.14) in the IH than in the SIH group. Immunohistochemistry identified higher number of beta cells in IH than in SIH group (P=0.14). Glucose levels measured in serum by enzymatic colorimetric methods was lower in IH than in SIH group (P=0.025). Significantly higher serum insulin quantified by ELISA and lower glucagon levels quantified by EIA were seen in the IH group when compared with SIH. Calculations of homeostasis model assessment (HOMA) for insulin resistance suggest higher sensitivity in IH than in SIH mice (P=0.09). HOMA for beta-cell function was higher in IH than in SIH mice (P=0.014). Body weight, adjusted for food intake, was relatively stable during the experiment. No significant differences in lipid profile were encountered. Conclusions: These results suggest that IH causes changes in pancreatic function that may be not related to expression of mRNA UCP2.