Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2011. / Submitted by Suelen Silva dos Santos (suelenunb@yahoo.com.br) on 2011-06-27T17:46:31Z No. of bitstreams: 1 2011_CristianeSilvaPereira.pdf: 384874 bytes, checksum: b04c93ba83e8f7e684e7720529ecfc8f (MD5) / Approved for entry into archive by Guilherme Lourenço Machado(gui.admin@gmail.com) on 2011-06-29T16:39:32Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_CristianeSilvaPereira.pdf: 384874 bytes, checksum: b04c93ba83e8f7e684e7720529ecfc8f (MD5) / Made available in DSpace on 2011-06-29T16:39:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_CristianeSilvaPereira.pdf: 384874 bytes, checksum: b04c93ba83e8f7e684e7720529ecfc8f (MD5) Previous issue date: 2011-06-27 / A ovinocultura é uma atividade pecuária alternativa que vem despertando enorme interesse em todas as regiões do país, proporcionando grande retorno aos seus investidores. Em Rondônia, o crescimento da exploração de pequenos ruminantes é evidente, sendo o 2º maior rebanho de ovinos da região Norte. Dentre os fatores que interferem no desenvolvimento da ovinocultura, as helmintoses gastrintestinais ocupam lugar de destaque, causando prejuízos econômicos resultantes da baixa produtividade e aumento da taxa de mortalidade. O Haemonchus contortus, nematóide hematófago e considerado o mais patogênico, pode causar morte súbita por gastrite hemorrágica, hipoproteinemia, anemia severa e perda de peso. A hemoncose pode ser agravada por fatores externos como alimentação, resistência individual do hospedeiro e condições ambientais favoráveis ao desenvolvimento do parasito. Em muitos países do mundo, os principais nematóides de ruminantes apresentam resistência aos anti-helmínticos mais comumente encontrados no mercado. O curto intervalo entre os tratamentos, a rápida alternância de diferentes princípios ativos, a introdução de animais infectados no plantel e o uso excessivo e indiscriminado de anti-helmínticos de longa ação, favorecem o desenvolvimento de cepas de parasitos resistentes às essas bases anti-helmínticas. A resistência anti-helmíntica não é descrita no estado de Rondônia, porém, observações de animais doentes e de perdas econômicas sugerem a sua existência. Este trabalho teve por objetivo avaliar a presença da resistência anti-helmíntica a quatro princípios ativos utilizados na ovinocultura: ivermectina, moxidectina, levamisol e closantel. Foram determinadas a porcentagem de redução da contagem de ovos por grama de fezes e a porcentagem da eficácia de cada fármaco testado. Adicionalmente, este estudo dá suporte a novas pesquisas no âmbito da resistência anti-helmíntica e controle da parasitose ovina, estimulando o crescimento da ovinocultura no estado de Rondônia. _________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Sheep husbandry is an alternative livestock activity which is increasingly drawing the attention of investors throughout Brazil. In Rondônia, small ruminants farming popularity is evident – the State has the second largest sheep flock in Brazil´s northern region. However, such husbandry practice has its setbacks. The gastrointestinal helminthiasises put at risk the farming turnovers through productivity drop and mortality rate raise, one of its main agents is the Haemonchus contortus – a haematophagous - which may lead to sudden death caused by hemorrhagic gastritis, hypoproteinemia, severe anemia and weight loss. External factors such as the host diet and its resilience as well as favorable environment conditions to the parasite development may aggravate the hemoncose. In many countries, the main ruminant nematodes are resistant to common anthelmintics. The short interval between treatments, rapid alternation of different active ingredients, introduction of infected animals to the herd as well as the excessive and indiscriminate use of anthelmintics, collaborate to the development of anthelmintic-resistant parasite strains. Such resistance has not been described yet in the State of Rondônia, however, the observation of ill animals and economic losses suggest its existence. This research aims to evaluate the Haemonchus contortus resistance to four widely used anthelmintic: ivermectin, moxidectin, levamisole and closantel. On this study, the percentage of reduction on the egg count per gram of feces and the effectiveness of each tested drug were evaluated. The main results found on this study support subsequent research on anthelmintic resistance and sheep parasites control, therefore increasing the sheep husbandry growth within the state of Rondônia.

The aim of this work was to assess the bioactivity of extracts of the tannin-rich plants Acacia mearnsii, Myracrodruon urundeuva, Caesalpinea bracteosa and Leucaena leucocephala against egg and infective larvae stages of Haemonchus contortus. Two in vitro assays were held: an Egg Hatch Assay (EHA) and a Larval Exsheathment Inhibition Assay (LEIA). The EHA consists of the incubation of previously recovered eggs from infected animal\'s faeces in a solution of plant extract for 24 hours and later differentiation between larvae and nonhatched eggs. The concentrations used were 50.00, 25.00, 12.50, 6.25, 3.12, 1.56, 0.78 and 0.39 mg/mL for A. mearnsii; 1.56, 0.78, 0.39, 0.19, 0.09 and 0.04 mg/mL for M. urundeuva; 6.25, 3.12, 1.56, 0.78, 0.39 and 019 mg/mL for C. bracteosa; and 6.25, 3.12 and 1.56 mg/mL for L. leucocephala. The LEIA consists in the artificial exsheathment of infective larvae, obtained by previous coproculture, after a three hour incubation period with plant extract solution in the concentrations 1,200, 600, 300 and 150 \'mü\'g/mL. The 50 and 99 lethal doses (LD) were calculated for both tests. A dose-dependent effect was found in the two tests, except for L. leucocephala in EHA, where it was not possible to calculate DL50 and DL99 with the chosen doses. The DL50 results for EHA were 0.18, 0.32, and 7.20 mg/mL and for DL99 were 4.31, 5.41, and 187.26 mg/mL, respectively for M. urundeuva, C. bracteosa, and A. mearnsii. For LEIA, the DL50 were 0.40, 0.52, 1.24, and 2.24 mg/mL and for DL99 these were 2.37, 2.28, 19.99 and 2.53 x 103 mg/mL respectively for M. urundeuva, A. mearnsii, L. leucocephala and C. bracteosa. The two highest concentrations of A. mearnsii and the three highest for C. bracteosa were effective (more than 90% of bioactivity); the three highest concentrations of M. urundeuva and the 0.78 mg/mL level of C. bracteosa were moderately effective (between 80 and 90% of bioactivity); the concentrations with low effectiveness (between 60 and 80% of bioactivity) were the 12.50 mg/mL (A. mearnsii), 0.19 mg/mL (M. urundeuva), and 0.39 mg/mL (C. bracteosa); all other concentrations were ineffective (less than 60% of bioactivity). For the LEIA, only the highest dose from A. mearnsii and M. urundeuva were effective; the 600 \'mü\'g/mL were moderately effective and all other doses were ineffective. It should be observed that even if the dose is ineffective against exsheathment, some concentrations were able to significantly delay the process. It was observed that the extracts had bioactivity in vitro within the chosen doses against the hatchability of eggs and exsheathment of larvae of H. contortus, except for L. leucocephala, which was not able to block the hatching of eggs / Objetivou-se com o presente trabalho verificar a bioatividade dos extratos das plantas taniníferas Acacia mearnsii, Myracrodruon urundeuva, Caesalpinea bracteosa e Leucaena leucocephala contra os estágios de ovo e de larva L3 infectante de Haemonchus contortus. Para isso, dois ensaios in vitro foram realizados: o Teste da inibição da eclodibilidade dos ovos (TIEO) e o teste da Inibição do desembainhamento larvar (TIDL). O TIEO consiste na incubação de ovos recém recuperados das fezes de animais infectados em solução liquida de extrato de planta por 24 horas e posterior diferenciação entre larvas e ovos não eclodidos. As concentrações utilizadas para A. mearnsii foram de 50,00, 25,00, 12,50, 6,25, 3,12, 1,56, 0,78 e 0,39 mg/mL; 1,56, 0,78, 0,39, 0,19, 0,09 e 0,04 mg/mL para M. urundeuva; 6,25, 3,12, 1,56, 0,78, 0,39 e 0,19 mg/mL para C. bracteosa; e 6,25, 3,12 e 1,56 mg/mL para L. leucocephala. O TIDL consiste no desembainhamento artificial de larvas infectantes, obtidas através de coprocultura, que passaram por período de incubação de três horas em solução liquida de extratos de plantas nas concentrações 1.200, 600, 300 e 150 \'mü\'g/mL. As doses letais (DL) 50 e 99 foram calculadas para ambos testes. Um efeito dose-dependente foi encontrado para os dois testes, exceto para a L. leucocephala no TIEO, onde não foi possível calcular o valor da DL50 e DL99 para o respectivo teste nas doses escolhidas. Os resultados da DL50 para TIEO foram de 0,18, 0,32 e 7,20 mg/mL e da DL99 foram de 4,31, 5,41 e 187,26 mg/mL respectivamente para M. urundeuva, C. bracteosa e A. mearnsii. Para o TIDL, a DL50 foi de 0,40, 0,52, 1,24 e 2,24 mg/mL e da DL99 foi de 2,37, 2,28, 19,99 e 2,53 x 103 mg/mL respectivamente para M. urundeuva, A. mearnsii, L. leucocephala e C. bracteosa. Para o TIEO, as duas maiores concentrações de A. mearnsii e as três maiores de C. bracteosa foram efetivas (mais de 90% de bioatividade); as três maiores concentrações de M. urundeuva e a 0,78 mg/mL de C. bracteosa foram moderadamente efetivas (entre 80 e 90% de bioatividade); as concentrações de pouca efetividade (entre 60 e 80% de bioatividade) foram a 12,50 mg/mL (A. mearnsii), 0,19 mg/mL (M. urundeuva), e 0,39 mg/mL (C. bracteosa); as demais concentrações foram consideradas ineficientes (menos de 60% de bioatividade). Para o TIDL, apenas a maior concentração de A. mearnsii e M. urundeuva foram efetivas; a concentração de 600 \'mü\'g/mL de M. urundeuva foi moderadamente efetiva; todas as outras concentrações foram ineficientes. Entretanto, deve-se observar que apesar de ineficientes em bloquear o desembainhamento, algumas concentrações atrasaram significativamente o desembainhamento das larvas, sendo esse um resultado de interesse. Assim, foi observado que os extratos, excetuando o extrato de L. leucocephala quanto a eclodibilidade, possuem bioatividade in vitro nas doses utilizadas contra a eclosão dos ovos e contra o desembainhamento das larvas de H. contortus

Submitted by Jean Medeiros (jeanletras@uepb.edu.br) on 2018-06-19T14:21:45Z No. of bitstreams: 1 PDF - Allana Brunna Sucupira Duarte.pdf: 18551366 bytes, checksum: 4964f2ac412172ef2e8ca648e00e4758 (MD5) / Approved for entry into archive by Secta BC (secta.csu.bc@uepb.edu.br) on 2018-07-03T17:48:01Z (GMT) No. of bitstreams: 1 PDF - Allana Brunna Sucupira Duarte.pdf: 18551366 bytes, checksum: 4964f2ac412172ef2e8ca648e00e4758 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-03T17:48:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PDF - Allana Brunna Sucupira Duarte.pdf: 18551366 bytes, checksum: 4964f2ac412172ef2e8ca648e00e4758 (MD5) Previous issue date: 2017-02-21 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Intestinal parasites caused by helminths are among the most frequent public health problems and affect mainly children. Conventional treatment of such diseases is carried out with antiparasitics having various adverse effects and are available in the dosage forms of tablets, syrups and suspensions which have disadvantages in pediatric use such as inability to swallow and unpleasant taste. Among the various forms of treatment, phytotherapy has been highlighted by the use of medicinal plants as an excellent alternative for the treatment of helminthes. In this way, this study proposed to obtain a formulation in the form of suppository containing nebulized extract of the tuber Operculina macrocarpa. Eighty-one extracts were produced using different extraction techniques, hydroalcoholic concentrations and quantities of plant material, following a Factorial Planning 3^3 , in order to determine the best yield extract. All extracts were characterized for their composition of polyphenols, condensed tannins and flavonoids. The extract with the highest amount of phytochemicals was selected for the other studies and development of the formulation, since there was no statistical difference in relation to yield. Thus, the extract produced by maceration was selected using 10 g of vegetal material dissolved in 100 mL of 50% (v/v) ethanol/water solution. The extract did not present cytotoxicity in erythrocytes. The anti-helminth activity test performed in goats showed that 14 days after treatment administration there was a reduction in the mean number of eggs per gram of faeces (OPG) of 79,40% compared to day zero. Thermal data demonstrated that the pharmaceutical excipients cocoa butter, EDTA and the mixture of methylparaben and propylparaben did not present incompatibility with the O.macrocarpa nebulizer extract and its binary mixtures, and these were therefore selected for the manipulation of suppositories. Therefore, the proposed anti-helminthic pediatric formulation was successfully obtained and had adequate organoleptic characteristics, average weight and disintegration time. / As parasitoses intestinais causadas por helmintos estão entre os mais frequentes agravos de saúde pública e afetam principalmente as crianças. O tratamento convencional dessas doenças é realizado com antiparasitários que apresentam diversos efeitos adversos e estão disponíveis nas formas farmacêuticas de comprimidos, xaropes e suspensões, as quais apresentam desvantagens no uso pediátrico como a incapacidade de deglutição e sabor desagradável. Dentre as diversas formas de tratamento a fitoterapia tem se destacado pela utilização de plantas medicinais como uma excelente alternativa para o tratamento de helmintoses. Desta forma, esse estudo se propôs a obter uma formulação na forma de supositório contendo extrato nebulizado do tubérculo Operculina macrocarpa. Oitenta e um extratos foram produzidos utilizando-se diferentes técnicas de extração, concentrações hidroalcoólicas e quantidades de material vegetal, seguindo um Planejamento Fatorial 3^3 , de modo a se determinar o extrato de melhor rendimento. Todos os extratos foram caracterizados quanto à sua composição de polifenois, taninos condensados e flavonoides. O extrato com maior quantidade de fitoconstituintes foi selecionado para os demais estudos e desenvolvimento da formulação, uma vez que não houve diferença estatística em relação ao rendimento. Assim, foi selecionado o extrato produzido por maceração, utilizando 10 g de material vegetal dissolvido em 100 mL de solução de etanol/água a 50% (v/v). O extrato não apresentou citotoxicidade em eritrócitos. O teste de atividade anti-helmíntica realizado em caprinos demonstrou que 14 dias após a administração do tratamento houve uma redução na média do número de ovos por gramas de fezes (OPG) de 79,40% comparado ao dia zero. Os dados térmicos demonstraram que os excipientes farmacêuticos manteiga de cacau, o EDTA e a mistura de metilparabeno e propilparabeno não apresentaram incompatibilidade com o extrato nebulizador de O.macrocarpa e suas mistura binárias, sendo estes, portanto, selecionados para a manipulação dos supositórios. Sendo assim, a formulação pediátrica anti-helmíntica proposta foi obtida com êxito e apresentou características organolépticas, peso médio e tempo de desintegração adequados.

The aim of this work was to assess the bioactivity of extracts of the tannin-rich plants Acacia mearnsii, Myracrodruon urundeuva, Caesalpinea bracteosa and Leucaena leucocephala against egg and infective larvae stages of Haemonchus contortus. Two in vitro assays were held: an Egg Hatch Assay (EHA) and a Larval Exsheathment Inhibition Assay (LEIA). The EHA consists of the incubation of previously recovered eggs from infected animal\'s faeces in a solution of plant extract for 24 hours and later differentiation between larvae and nonhatched eggs. The concentrations used were 50.00, 25.00, 12.50, 6.25, 3.12, 1.56, 0.78 and 0.39 mg/mL for A. mearnsii; 1.56, 0.78, 0.39, 0.19, 0.09 and 0.04 mg/mL for M. urundeuva; 6.25, 3.12, 1.56, 0.78, 0.39 and 019 mg/mL for C. bracteosa; and 6.25, 3.12 and 1.56 mg/mL for L. leucocephala. The LEIA consists in the artificial exsheathment of infective larvae, obtained by previous coproculture, after a three hour incubation period with plant extract solution in the concentrations 1,200, 600, 300 and 150 \'mü\'g/mL. The 50 and 99 lethal doses (LD) were calculated for both tests. A dose-dependent effect was found in the two tests, except for L. leucocephala in EHA, where it was not possible to calculate DL50 and DL99 with the chosen doses. The DL50 results for EHA were 0.18, 0.32, and 7.20 mg/mL and for DL99 were 4.31, 5.41, and 187.26 mg/mL, respectively for M. urundeuva, C. bracteosa, and A. mearnsii. For LEIA, the DL50 were 0.40, 0.52, 1.24, and 2.24 mg/mL and for DL99 these were 2.37, 2.28, 19.99 and 2.53 x 103 mg/mL respectively for M. urundeuva, A. mearnsii, L. leucocephala and C. bracteosa. The two highest concentrations of A. mearnsii and the three highest for C. bracteosa were effective (more than 90% of bioactivity); the three highest concentrations of M. urundeuva and the 0.78 mg/mL level of C. bracteosa were moderately effective (between 80 and 90% of bioactivity); the concentrations with low effectiveness (between 60 and 80% of bioactivity) were the 12.50 mg/mL (A. mearnsii), 0.19 mg/mL (M. urundeuva), and 0.39 mg/mL (C. bracteosa); all other concentrations were ineffective (less than 60% of bioactivity). For the LEIA, only the highest dose from A. mearnsii and M. urundeuva were effective; the 600 \'mü\'g/mL were moderately effective and all other doses were ineffective. It should be observed that even if the dose is ineffective against exsheathment, some concentrations were able to significantly delay the process. It was observed that the extracts had bioactivity in vitro within the chosen doses against the hatchability of eggs and exsheathment of larvae of H. contortus, except for L. leucocephala, which was not able to block the hatching of eggs / Objetivou-se com o presente trabalho verificar a bioatividade dos extratos das plantas taniníferas Acacia mearnsii, Myracrodruon urundeuva, Caesalpinea bracteosa e Leucaena leucocephala contra os estágios de ovo e de larva L3 infectante de Haemonchus contortus. Para isso, dois ensaios in vitro foram realizados: o Teste da inibição da eclodibilidade dos ovos (TIEO) e o teste da Inibição do desembainhamento larvar (TIDL). O TIEO consiste na incubação de ovos recém recuperados das fezes de animais infectados em solução liquida de extrato de planta por 24 horas e posterior diferenciação entre larvas e ovos não eclodidos. As concentrações utilizadas para A. mearnsii foram de 50,00, 25,00, 12,50, 6,25, 3,12, 1,56, 0,78 e 0,39 mg/mL; 1,56, 0,78, 0,39, 0,19, 0,09 e 0,04 mg/mL para M. urundeuva; 6,25, 3,12, 1,56, 0,78, 0,39 e 0,19 mg/mL para C. bracteosa; e 6,25, 3,12 e 1,56 mg/mL para L. leucocephala. O TIDL consiste no desembainhamento artificial de larvas infectantes, obtidas através de coprocultura, que passaram por período de incubação de três horas em solução liquida de extratos de plantas nas concentrações 1.200, 600, 300 e 150 \'mü\'g/mL. As doses letais (DL) 50 e 99 foram calculadas para ambos testes. Um efeito dose-dependente foi encontrado para os dois testes, exceto para a L. leucocephala no TIEO, onde não foi possível calcular o valor da DL50 e DL99 para o respectivo teste nas doses escolhidas. Os resultados da DL50 para TIEO foram de 0,18, 0,32 e 7,20 mg/mL e da DL99 foram de 4,31, 5,41 e 187,26 mg/mL respectivamente para M. urundeuva, C. bracteosa e A. mearnsii. Para o TIDL, a DL50 foi de 0,40, 0,52, 1,24 e 2,24 mg/mL e da DL99 foi de 2,37, 2,28, 19,99 e 2,53 x 103 mg/mL respectivamente para M. urundeuva, A. mearnsii, L. leucocephala e C. bracteosa. Para o TIEO, as duas maiores concentrações de A. mearnsii e as três maiores de C. bracteosa foram efetivas (mais de 90% de bioatividade); as três maiores concentrações de M. urundeuva e a 0,78 mg/mL de C. bracteosa foram moderadamente efetivas (entre 80 e 90% de bioatividade); as concentrações de pouca efetividade (entre 60 e 80% de bioatividade) foram a 12,50 mg/mL (A. mearnsii), 0,19 mg/mL (M. urundeuva), e 0,39 mg/mL (C. bracteosa); as demais concentrações foram consideradas ineficientes (menos de 60% de bioatividade). Para o TIDL, apenas a maior concentração de A. mearnsii e M. urundeuva foram efetivas; a concentração de 600 \'mü\'g/mL de M. urundeuva foi moderadamente efetiva; todas as outras concentrações foram ineficientes. Entretanto, deve-se observar que apesar de ineficientes em bloquear o desembainhamento, algumas concentrações atrasaram significativamente o desembainhamento das larvas, sendo esse um resultado de interesse. Assim, foi observado que os extratos, excetuando o extrato de L. leucocephala quanto a eclodibilidade, possuem bioatividade in vitro nas doses utilizadas contra a eclosão dos ovos e contra o desembainhamento das larvas de H. contortus

Submitted by Renorbio (renorbioba@ufba.br) on 2018-04-26T15:58:23Z No. of bitstreams: 1 TESE DE DOUTORADO_GLÁUCIO BARROS SALDANHA.pdf: 4782886 bytes, checksum: 5487ab253c7be5687d66ef5f9581108e (MD5) / Approved for entry into archive by Delba Rosa (delba@ufba.br) on 2018-05-04T14:06:18Z (GMT) No. of bitstreams: 1 TESE DE DOUTORADO_GLÁUCIO BARROS SALDANHA.pdf: 4782886 bytes, checksum: 5487ab253c7be5687d66ef5f9581108e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-05-04T14:06:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TESE DE DOUTORADO_GLÁUCIO BARROS SALDANHA.pdf: 4782886 bytes, checksum: 5487ab253c7be5687d66ef5f9581108e (MD5) / Os neoflavonoides compreendem compostos que possuem um esqueleto básico de carbono (C6-C3-C6) e que podem ser sintetizados ou ser encontrado naturalmente em plantas superiores como das famílias Clusiaceae, Leguminosae, Rubiaceae e Rutaceae. Os neoflavonoides têm atraído grande interesse devido às suas propriedades farmacológicas e bioquímicas apresentadas em estudos in vitro e in vivo. Em relação às doenças tropicais negligenciadas (DTNs), os neoflavonoides demonstraram ser promissoras moléculas bioativas no tratamento da leishimaniose, tripanossomose americana e malária. Sendo assim, estudos adicionais são necessários para dar uma maior ênfase a sua ação farmacológica em outras doenças negligenciadas como a causada por vermes do gênero Schistosoma. Neste contexto farmacológico, o objetivo do presente trabalho foi avaliar o potencial quimioterapêutico do composto 7-acetoxi-4-aril-3,4-di-hidrocumarina, classificado como neoflavonoide, em um modelo experimental contra o Schistosoma mansoni. Além do estudo do potencial antiprotozoário, estudos não clínicos de segurança farmacológica foram realizados pela avaliação da toxicidade em dose única (14 dias) e em doses repetidas (28 dias) em camundongos Swiss fêmeas. O perfil de toxicidade aguda (300 e 2000 mg/kg) e em doses repetidas (250, 500 e 1000 mg/kg) foram realizados em camundongos Swiss fêmeas de acordo com a diretriz 423 e 407 da Organização para a Cooperação e Desenvolvimento Econômico (OECD), respectivamente, pelos parâmetros relacionados às alterações do peso corporal, consumo de alimento e água, parâmetros hematológicos e bioquímicos. Na avaliação farmacológica do 7-acetoxi-4-aril-3,4-di-hidrocumarina (6,25, 12,5, 25, 50 e 100 μg/mL) contra o S. mansoni, os parâmetros analisados foram a taxa de mortalidade, redução na atividade motora, número de ovos e alterações tegumentares. De acordo com experimentos realizados, foi demonstrado que o 7-acetoxi-4-aril-3,4-di-hidrocumarina a partir da concentração de 12.5 μg/mL induziu a mortalidade dos vermes S. mansoni, redução na atividade motora, mudanças na morfologia tegumentar e inibição na produção de ovos pela separação de todos os casais de vermes adultos tratados. A capacidade do 7-acetoxi-4-aril-3,4- di-hidrocumarina de manter os vermes adultos machos e fêmeas separados demonstra ser a principal justificativa para elevada redução na oviposição de S. mansoni. Além da atividade quimioterapêutico, os resultados da toxicidade aguda e em doses repetidas de 7-acetoxi-4-aril- 3,4-di-hidrocumarina demonstraram ausência de sinais clínicos adversos (contorções abdominais, reflexo de endireitamento, irritabilidade, piloereção), mortalidade, alterações significativas no peso corporal e dos órgãos internos, consumo de alimento e água. Os parâmetros hematológicos (eritrócitos, plaquetas e leucócitos) e bioquímicos (glicose, ureia, creatinina, ácido úrico, alanina aminotrasaminase, aspartato aminotrasaminase, colesterol, triglicerídeos) também não apresentaram alterações significativas quando comparado com os grupos controles dos estudos de toxicidade em dose única (aguda) e em doses repetidas. Em conclusão, os resultados do presente estudo demonstraram atividade anti-helmíntica do 7- acetoxi-4-aril-3,4-di-hidrocumarina e fornecem uma importante compreensão do perfil de toxicidade deste neoflavonoide, no qual pode ser considerado como sendo um composto com toxicidade superior a 2000 mg/kg em camundongos Swiss fêmeas. / The neoflavonoid group comprise compounds that have a basic carbon skeleton (C6-C3-C6) and that can be synthesized or be naturally found in families of higher plants such as the Clusiaceae, Leguminosae, Rubiaceae and Rutaceae families. Neoflavonoids have attracted great interest because of their pharmacological and biochemical properties presented in the in vitro and in vivo studies. In relation to neglected tropical diseases (NTDs), the neoflavonoids have been shown to be promising bioactive molecules in the treatment of leishmaniasis, American trypanosomiasis and malaria. Thus, additional studies are needed to give greater emphasis to their pharmacological action in other neglected diseases such as that caused by worms of Schistosoma genus. In this pharmacological context, the objective of the present study was to evaluate the chemotherapeutic potential of the 7-acetoxy-4-aryl-3,4- dihydrocoumarin, classified as neoflavonoid, using an experimental model against Schistosoma mansoni. In addition to study the antiprotozoal potential, non-clinical pharmacological safety studies were performed by evaluating single dose (14 days) and repeated doses (28 days) toxicity in female Swiss mice. The acute toxicity profile (300 and 2000 mg/kg) and repeated doses (250, 500 and 1000 mg / kg) were performed in female Swiss mice according to guidelines 423 and 407 of the Organisation for Economic Cooperation and Development (OECD), respectively, by the parameters related to changes in body weight, food and water consumption, as well as hematological and biochemical parameters. In the pharmacological evaluation of 7-acetoxy-4-aryl-3,4-dihydrocoumarin (6.25, 12.5, 25, 50 and 100 μg/ml) against S. mansoni, the parameters analyzed were the mortality rate, reduction in motor activity, number of eggs and tegumentary changes. According to experiments performed, it was demonstrated that the 7-acetoxy-4-aryl-3,4- dihydrocoumarin from the concentration of 12.5 μg/mL induced the mortality of S. mansoni worms, the reduction in motor activity and, changes in tegumentary morphology and inhibition in egg production by separation of all couples of adult worms treated. The capacity of 7-acetoxy-4-aryl-3,4-dihydrocoumarin to maintain separate male and female adult worms is shown to be the main justification for high reduction in S. mansoni oviposition. In addition to chemotherapeutic activity, the results of acute toxicity and repeated doses of 7-acetoxy-4- aryl-3,4-dihydrocoumarin demonstrated no clinical adverse symptoms (abdominal contortions, righting reflex, irritability, piloerection), mortality, significant changes in body weight and internal organs, food and water consumption. The hematological parameters (analysis of erythrocyte, platelets and leukocytes) and biochemical parameters (glucose, urea, creatinine, uric acid, aspartate aminotransferase, alanine aminotransferase, cholesterol, and triglycerides) also showed no significant changes when compared to the control groups. In conclusion, the results of the present study demonstrated in vitro anthelmintic activity of 7- acetoxy-4-aryl-3,4-dihydrocoumarin and provide an important understanding of the toxicity profile of this neoflavonoid, in which it can be considered as a compound with toxicity greater than 2000 mg/kg in female Swiss mice.

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As parasitoses intestinais também representam um importante problema médico-sanitário, tendo em vista o grande número de pessoas acometidas e as inúmeras alterações orgânicas que podem provocar no hospedeiro. Essas infecções helmínticas induzem preferencialmente uma resposta Th2 com a produção de IL-4, IL-5 e IL-13. Este trabalho avaliou a regulação da resposta imune no pulmão de camundongos co-infectados ou não por S. venezuelensis (SV) e/ou Mycobacterium bovis-BCG (MB), em dois pontos das duas infecções, denominados como ponto 1 (4° e 7° dia pós-imunização [dpi]) e ponto 2 (7° e 10° dpi) por MB e SV, respectivamente. Os animais foram infectados com 700 larvas de SV pela via subcutânea e, após 3 dias, com 1x106 UFC de MB cepa selvagem pela via intravenosa. Realizou-se a quantificação do número de ovos e vermes, a dosagem de citocinas (IFN-γ, IL-4 e IL-10) e quimiocinas (CCL2 e CCL5), o envolvimento de MPO e EPO, a detecção da infecção pelo MB por PCR, a avaliação histopatológica e a expressão de moléculas coestimulat órias/imunomodulatórias (CD80, CD86, CD28, CTLA-4 e CD25) em células ou tecidos do pulmão dos animais infectados e/ou co-infectados. Os resultados mostraram que a presença do MB favoreceu para o aumento do número de ovos e vermes do SV observados nos animais nos dias 4° e 7° (ponto 1) e 7° e 10° (ponto 2) após a infecção por MB e SV, respectivamente, nos animais co-infectados (COIN). A reação de PCR foi efetiva em detectar a presença do MB no pulmão dos animais. Foi observado um aumento de IFN-γ e uma diminuição de IL-4 e EPO no pulmão dos animais do grupo COIN, além de aumento na expressão da molécula co-estimulatória CD80 no ponto 1 e uma diminuição no ponto 2. Houve uma alta produção de IL-10 no pulmão dos animais dos grupos MB e COIN, sendo que a histopatologia neste sítio mostrou formação de granulomas com grande influxo de neutrófilos, macrófagos e células epitelóides na periferia nos pulmões dos animais do grupo MB e um granuloma bem mais avançado, com centro necrótico nos animais do grupo COIN. Baseado nesses resultados, conclui-se que o MB modula a infecção pelo SV, fazendo com que os animais fiquem mais suscetíveis à infecção helmíntica. Por outro lado, o SV modula a infecção pelo MB, fazendo com haja uma modificação na formação de granuloma no pulmão dos animais do grupo COIN no ponto 1 da infecção pelo MB, que poderia ser justificada pela diminuição de IL-4 nos animais do grupo COIN. / A rising number of people have been contracting tuberculosis around the world even though a multitude of reports involving a modulation of the immune response to Mycobacterium have been published. The response to Mycobacterium is mainly mediated by Th1 lymphocytes through IFN-gamma production. Parasitic diseases account for a large proportion of human morbidity and mortality, considering the number of people affected by them and several pathologies associated to parasitic infection. Helminthic infections drive towards Th2 response which leads to IL-4, IL5 and IL-13 production. The present study evaluated the immune response of coinfected animals or not with Strongyloides venezuelensis (SV) and Mycobacterium bovis-BCG (MB) on pulmonary cells collected from BALB/c mice at time points 1 (4th and 7th days post-immunization [dpi] by MB and SV, respectively) and 2 (7th and 10th dpi by MB and SV, respectively). Animals were infected with 700 SV larvae subcutaneously, and 3 days after, 1x106 CFU of wild MB strain intravenously. The number of worms and eggs was counted as well as cytokine (IFN-gamma, IL-4 and IL-10) and chemokine (CCL2 and CCL5) assessments, and the MPO and EPO levels determination on pulmonary tissue from infected and/or coinfected animals. In addition, PCR for MB detection, the histopathology and the expression of costimulatory molecules such as CD80, CD86, CD28, CTLA-4 and CD25 on pulmonary tissue were also assessed. The results pointed that MB led to increase SV parasite burden in coinfected mice (COIN) at both time points analyzed. The PCR technique detected effectively MB. Moreover, elevated IFN-gamma and reduced IL-4 and EPO levels were detected on pulmonary tissue in the COIN group. In regard to CD80 molecule, there was an increased expression at time point 1 and diminished expression at time point 2. Also, higher amounts of IL-10 were found on pulmonary tissue in MB and COIN groups. The histopathological analysis revealed pulmonary granulomas with a number of neutrophils, macrophages and epithelial cells-like in the MB group as well as granulomas in an advanced stage with caseous necrosis in the COIN group. Based on these findings, it may be concluded that MB modulated the immune response to SV, leading coinfected animals to be more susceptible to helminthic infection. On the other hand, SV modulated the MB infection by modifying the characteristics of the pulmonary granulomas in the COIN group at time point 1 probably due the reduced IL-4 production in this group.