FundaÃÃo de Amparo à Pesquisa do Estado do Cearà / The function of a protein is determined by its structure. As a result, the structural study of potentially active biomolecules can lead to a better understanding of its mechanism of action, as their biological activities. Thus, this study aimed to purify and structurally characterize the lectin from red seaweed Amansia multifida protein fraction which has a potential hypoglycemic. The protein fraction (F 0/70) was subjected to anion- exchange chromatography on a column of DEAE - Sephacel to elution of the first peak (PI). This peak was selected as the hemagglutination activity was obtained then the lectin from A. multifida, verified by SDS - PAGE. For two - dimensional electrophoresis were detected five isoforms. The N-terminal sequence (20 amino acid) showed no sim ilarity to any sequence deposited in databases, suggesting that it does not belong to any group of algae known lectins. The lectin was structurally characterized by spectroscopic techniques of circular dichroism (CD) and fluorescence. The CD analysis showe d that the lectin was composed of 4% α - helix, 43% beta sheet, 21% turn and 32% unordered structure, according to the deconvolution program Contin. It was also verified by CD, the structural stability of the protein against the extremes of pH and different temperatures. When subjected to temperature of 10 - 85 ÂC was found that the protein showed 50% of the denaturation in 40.2ÂC, being completely denatured at 85ÂC. Such a distortion was shown to be irreversible, since after being incubated again under native conditions, the lectin was not able to recover its original structure. Extremes of pH (3.0 and 11) did not alter the secondary structure of the protein. For the fluorescence data read out at 280 and 295 nm, showed the presence of aromatic amino acids that fluoresce, such as tryptophan and tyrosine. Fluorescence spectra measured, even in the face of extremes of pH, showed no major changes that could reflect structural changes in order not to shift the peak of the emission measurements. Biological assays of hypoglycemic activity carried out with the F 0/70, containing the lectin from the algae showed that it was able to significantly reduce the blood glucose level of animals with diabetic state induced by alloxan. / A funÃÃo de uma proteÃna à determinada pela sua estrutura. Em decorrÃncia, o estudo estrutural de biomolÃculas potencialmente ativas pode levar a uma melhor compreensÃo de seu mecanismo de aÃÃo, quanto as suas atividades biolÃgicas. Desse modo, o presente trabalho teve como objetivo purificar e caracterizar estruturalmente a lectina de Amansia multifida, cuja fraÃÃo protÃica, possui um potencial hipoglicemiante. A fraÃÃo rica em proteÃnas (F0/70) l foi submetida a uma cromatografia de troca iÃnica em coluna de DEAE-Sephacel para eluiÃÃo do pico I. Este pico protÃico foi selecionado quanto à atividade hemaglutinante, coletado e empregado para o isolamento da lectina. Como observado por SDS-PAGE, PI apresentou elevado grau de purificaÃÃo pela presenÃa de uma Ãnica banda protÃica (lectina). Por eletroforese bidimensional foram detectadas cinco isoformas. A seqÃÃncia N-terminal obtida (20 aminoÃcidos) nÃo apresentou semelhanÃa com nenhuma outra seqÃÃncia depositada em bancos de dados, sugerindo que ela nÃo pertenÃa a nenhum grupo de lectinas de algas conhecidas. Essa proteÃna foi caracterizada estruturalmente, por tÃcnicas espectrocÃpicas de dicroÃsmo circular (CD) e fluorescÃncia. A anÃlise por CD mostrou que a lectina era constituÃda por 4% de α- hÃlice, 43% de folha beta, 21% de voltas e 32% de estrutura nÃo ordenada, segundo o programa de desconvoluÃÃo Contin. Ainda por CD, a proteÃna foi tambÃm avaliada quanto a estabilidade estrutural frente a extremos de temperatura e pH. Quando submetida a variaÃÃes de temperatura de 10 â 85 ÂC foi verificado que a proteÃna mostrou 50% de desnaturaÃÃo a aproximadamente 40,2 ÂC, mostrando-se completamente desnaturada a 85 ÂC. Tal desnaturaÃÃo mostrou-se irreversÃvel, jà que apÃs ser incubada novamente sob condiÃÃes nativas, a lectina nÃo foi capaz de recuperar sua estrutura original. Extremos de pH (3,0 e 11) nÃo alteraram sua estrutura secundÃria, demonstrando a estabilidade da mesma nesse aspecto. Quanto aos dados de fluorescÃncia, as leituras realizadas a 280 e 295 nm, mostraram a presenÃa de aminoÃcidos aromÃticos que emitem fluorescÃncia, tais como triptofano e tirosina. Espectros de fluorescÃncia frente a extremos de pH, nÃo mostraram grandes alteraÃÃes que pudessem refletir em mudanÃas estruturais, jà que nÃo houve deslocamento do pico mÃximo de emissÃo em nenhuma situaÃÃo testada. Ensaios biolÃgicos de atividade hipoglicemiante realizados com a F 0/70 de A. multifida, mostraram que a mesma foi capaz de reduzir significativamente o nÃvel de glicose sanguÃnea dos animais com estado diabÃtico induzido por aloxano.

Submitted by NATHALIA APARECIDA DE PAULA CAMAFORTE HENRIQUES null (nah_paula@msn.com) on 2017-04-07T20:03:12Z No. of bitstreams: 1 tese de doutorado FINAL.pdf: 2502031 bytes, checksum: 903c99f0499717023da4a4ac01dd66da (MD5) / Approved for entry into archive by Luiz Galeffi (luizgaleffi@gmail.com) on 2017-04-17T14:26:45Z (GMT) No. of bitstreams: 1 camafortehenriques_nap_dr_bot.pdf: 2502031 bytes, checksum: 903c99f0499717023da4a4ac01dd66da (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-17T14:26:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 camafortehenriques_nap_dr_bot.pdf: 2502031 bytes, checksum: 903c99f0499717023da4a4ac01dd66da (MD5) Previous issue date: 2017-01-26 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O Diabetes mellitus (DM) é conhecido como uma doença metabólica caracterizada pela hiperglicemia de jejum levando a alterações no metabolismo de carboidratos, lipídeos e proteínas. Nos últimos anos houve um aumento de pesquisas envolvendo plantas medicinais no tratamento de muitas doenças, inclusive DM, no entanto, são poucos os dados que elucidam o mecanismo de ação dessas plantas hipoglicemiantes. O objetivo do presente trabalho foi verificar o mecanismo de ação do extrato bruto de B. holophylla em camundongos diabéticos induzidos por estreptozotocina, avaliando expressão gênica e proteica da via de sinalização de insulina em tecidos periféricos como fígado e músculo esquelético, bem como avaliar a atividade inibitória para as enzimas α- amilases e α-glicosidades em testes in vitro e in vivo. O tratamento com o extrato de B. holophylla promoveu a diminuição da expressão gênica e proteica das enzimas G6Pase, PEPCK e Glicogênio Fosforilase e aumento da expressão proteica AMPK em fígado. Em músculo, promoveu o aumento da expressão das proteínas PI3K, AKT e GLUT4 e diminuição da expressão da PTP1B. Além disso, o extrato mostrou potente atividade inibitória para as enzimas α-amilases e α-glicosidases in vitro e in vivo. Portanto, conclui-se que a atividade hipoglicemiante do extrato de B. holophylla foi através da ativação da via da glicogênese e inibição da gliconeogêse e glicogenólise em fígado, ativando as vias dependente e independente de insulina para captação de glicose em músuclo esquelético e inibindo a absorção de glicose no intestino. / Diabetes mellitus (DM) is a metabolic disease characterized by chronic hyperglycemia (equal or higher than 126 mg/dL) resulting in alterations on fatty, protein and carbohydrate metabolism. In the past years many researches of medicinal plants area to treat a great sort of diseases, including DM was done, however, there are few data with the elucidation of mechanism of action of these medicinal plants. The aim of this study was to verify the hypoglycemic mechanism of action of B. holophylla in streptozotocin diabetic mice, evaluating key-proteins and gene expression from insulin pathway in muscle and liver, and the inhibitory effect for the α-amylases and α-glucosidases in vitro and in vivo tests. We also tested the hypoglycemic effect of fractions and the isolated compound by the crude extract of B. holophylla. The treatment with the extract of B. holophylla, the gene and protein expression analysis showed a decrease of G6Pase, PEPCK and increase of AMPK and GSk3β in liver. In muscle, the treatment was able to increase the PI3K, AKT and GLUT4 and decrease of PTP1B protein expression. Beyond this, the extract showed potent inhibitory effect against α-amylases and α-glucosidases in in vitro and in vivo tests. In conclusion, the mechanism of hypoglycemic action of B. holophylla was activating glycogenesis and inhibiting gluconeogenesis and glycogenolisis in liver, activating dependents and independent insulin pathway for glucose intake in muscle and decreasing the glucose absorption in intestine. / FAPESP: 2010/10708-0

Made available in DSpace on 2014-06-12T15:48:27Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo4378_1.pdf: 3567361 bytes, checksum: 02c054bf9cd6c0778221cb74218b3aed (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2004 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Os núcleos imidazolidínicos, tiazolidínicos e acridínicos apresentam uma variedade de atividades biológicas, destacando-se: citotóxica, inibidora de aldose redutase, hipoglicemiante, antiinflamatória, anticonvulsivante, antimicrobiana e antiulcerativa. Buscando-se novos agentes terapêuticos, a síntese de novos derivados acridinoimidazolidínicos e benzilideno-tiazolidínicos se faz necessária com o intuito de potencializar determinada atividade biológica e simultânea redução dos efeitos colaterais indesejáveis. Neste trabalho, desenvolveu-se a síntese de novos derivados acridino-imidazolidínicos e benzilidino-tiazolidínicos, avaliou-se a atividade biológica de um derivado benzilideno-tiazolidínico e procedeu-se um estudo de modelagem molecular para os derivados preparados. O novo derivado acridinoimidazolidínico foi obtido através da oxidação da 9-metil-acridina em acridina-9- carboxaldeído, seguindo-se uma condensação com o cianoacetato de etila para obtenção do composto ciano-acridina-9-il-acrilato de etila, o qual, é condensado com o derivado imidazolidínico apresentando um grupamento benzil em posição 3 e um grupo tioxo na posição 4, obtido pela ação do pentassulfeto de fósforo. Os derivados tiazolidínicos foram obtidos pela condensação com benzaldeídos substituídos. As estruturas químicas foram devidamente comprovadas por espectrometria de massas, infravermelho e ressonância magnética nuclear de hidrogênio. Realizaramse testes para avaliação da atividade hipoglicêmica da 5-(5-bromo-2-metoxibenzilideno)- 3-(4-metil-benzil)-tiazolidina-2,4-diona em camundongos albinos Mus musculus diabéticos induzidos pela aloxana. Finalmente, realizaram-se cálculos de modelagem molecular, usando o método semi-empírico AM1, o qual se apresenta devidamente parametrizado, como menor demanda computacional, para se obter maiores esclarecimentos sobre a estrutura tridimensional dos compostos sintetizados

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / O gÃnero Bauhinia, famÃlia Leguminosae, compreende mais de 300 espÃcies distribuÃdas nas Ãreas tropicais do planeta, onde sÃo utilizadas na medicina popular no tratamento do diabetes. Estudos farmacolÃgicos preliminares [1] indicaram aÃÃo hipoglicemiante de Bauhinia ungulata L., conhecida popularmente como âPata-devacaâ, porÃm nenhum estudo fitoquÃmico havia sido realizado para a espÃcie[2]. Desta forma, o presente estudo se propÃs ao isolamento e determinaÃÃo estrutural dos constituintes volÃteis e nÃo-volÃteis das folhas de Bauhinia ungulata, e a posterior realizaÃÃo de testes farmacolÃgicos com os compostos isolados para a comprovaÃÃo da sua atividade farmacolÃgica. O estudo dos constituintes volÃteis das folhas de Bauhinia ungulata (Figura I) foi realizado atravÃs de um acompanhamento da composiÃÃo quÃmica do Ãleo essencial. Os principais constituintes encontrados no Ãleo de B. ungulata foram: (E)- -Cariofileno (1), -Humuleno (2), Germacreno D (3), Ãxido de Cariofileno (4), - Copaeno (5), Germacreno B (6), -Cadineno (7) e Biciclogermacreno (8). Foram observadas alteraÃÃes no teor do Ãleo das 9:00 para Ãs 12:00 hs com aumento dos constituintes 4 e 8 e reduÃÃo de 2, 3, 5, 6 e 7 alÃm do surgimento de sesquiterpenos oxigenados exclusivamente Ãs 12:00 hs. Para o estudo dos constituintes nÃo-volÃteis (Figura II) foram utilizados os extratos hexÃnico (EHBU) e etanÃlico (EEBU) das folhas de B. ungulata. ApÃs sucessivos tratamentos cromatogrÃficos, o extrato EEBU forneceu 4 metabÃlitos secundÃrios identificados como os flavonÃides 3,5,7-tri-hidroxi-2-(3â,4â-dihidroxifenil)- 4H-cromen-4-ona (Quercetina) (BU-1), Quercetina-3-OarabinofuranosÃdio (BU-2) e Quercetina-3-O--RhamnopiranosÃdio (Quercitrina) (BU-3) alÃm do inositol metoxilado 3-O-metil-quiroinositol (D-pinitol) (BU-4). A partir da fraÃÃo alcaloÃdica do EEBU foram obtidos os alcalÃides -carbolÃnicos harmano (BU-5) e eleagnina (tetrahidroharmano) (BU-6). A identificaÃÃo e quantificaÃÃo dos constituintes quÃmicos volÃteis foram realizadas atravÃs de cromatografia gasosa acoplada a espectrometria de massa (CG/EM). XVII A caracterizaÃÃo estrutural dos compostos nÃo-volÃteis foi realizada atravÃs de tÃcnicas espectroscÃpicas, incluindo RMN-1D (ÂH, ÂÂC, DEPT), RMN-2D (COSY, HMQC, HMBC, NOESY) e espectroscopia de infravermelho (IR). / The Bauhinia genus possess 300 species distributed in tropical area of the planet. Species of this genus have been used in popular medicine on the diabetes treatment. Preliminary pharmacological studies showed hypoglicemic action of Bauhinia ungulata L. [1], popularly known on the northeast of Brazil as âpata-de-vacaâ, however, no phytochemical study has been reported yet [2]. This work reports the isolation and structural charactherization of the volatile and non-volatile constituents from the leaves of Bauhinia ungulata, for the accomplishment of pharmacological tests with the isolated compounds. A circadian study of the chemical composition of the leaves of B. ungulata was carry out with its essential oil. The main constituents were: (E)--caryophyllene (1), - humulene (2), germacrene D (3), cariilene (4), -copaene (5), germacrene B (6), - cadimene (7) e byciclogermacrene (8). Changes were observed at 9:00 to 12:00 a.m. with the increase of contents of the constituents 4 and 8, and reduction of contents of compounds 2, 3, 5, 6, 7, besides of appearance of oxygenated terpenes only at 12:00 a.m. The phytochemical study of the non-volatile constituents was accomplished by the investigation of the hexane (EHBU) and ethanol (EEBU) extracts. From the EHBU traicontanol was obtained in high contents. Sucessive chromatographies from the EEBU yielded 4 metabolites charactherized as the flavonoids quercetine, quercetine-3- O-arabinofuranoside and quercitrine, besides the methoxy inositol 3-O-metil- D-pinitol. The alkaloid fraction yielded the -carbolines harmane e eleagnine. XIX The identification of the volatile compounds was done by GLC/MS. Structure charactherization of the non-volatile was made by spectroscopic methods such as IR and two and one dimensional ÂH and ÂÂC NMR (COSY, HMQC, HMBC),

La presente publicación pretende resumir el conocimiento científico químico-biológico sobre el Smallanthus sonchifolius (Poepp.) H. Rob. Se incluye una descripción de los componentes químicos reportados a la fecha en las revistas científicas; entre ellos, los ol igofructanos, así como los compuestos de naturaleza fenólica y terpénica. Además, se presenta una discusión de las actividades biológicas encontradas para extractos de hojas y raíces del yacón. / This review article covers the present knowledge on the chemistry and biological activities of Smallanthus sonchifolius (Poepp.) H. Rob. A description of the chemical compounds reported in the scientific literature (i.e. oligofructans, phenolic compounds and terpenes) is included. The biological activities of the crude extracts of leaves and roots from yacón are discussed.

CUNHA, Arcelina Pacheco. Caracterização e modificação química da Galactomanana de Caesalpinia Ferrea Mart Ex Tul.Var Ferrea: estudo do potencial antiviral, hipoglicemiante e cicatrizante. 2015. 88 f. Tese (Doutorado em Química)-Universidade Federal do Ceará, 2015. / Submitted by Aline Mendes (alinemendes.ufc@gmail.com) on 2016-12-20T19:51:14Z No. of bitstreams: 1 2015_tese_apcunha.pdf: 2614453 bytes, checksum: f0c152c111e433ce87017667416ab588 (MD5) / Approved for entry into archive by Jairo Viana (jairo@ufc.br) on 2016-12-27T15:47:07Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_tese_apcunha.pdf: 2614453 bytes, checksum: f0c152c111e433ce87017667416ab588 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-12-27T15:47:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_tese_apcunha.pdf: 2614453 bytes, checksum: f0c152c111e433ce87017667416ab588 (MD5) Previous issue date: 2015 / This study aims to develop polymeric compositions that can be applied to produce antiviral, hypoglycemic and as an aid in the healing of skin lesions. Therefore, the galactomannan from Caesalpinia ferrea seeds were purified, and subsequently modified by a chemical sulfation reaction. Then, purified sulphated galactomannan (JSGp and JSGs) were characterized by the following techniques: Infrared Transform Infrared spectroscopy (FTIR); Thermal Analysis (TG and DSC); Dispersive Energy X Ray (EDX); Scanning Electron Microscopy (SEM); Surface tension; Atomic Force Microscopy (AFM); Zeta potential; Gel Permeation Chromatography (GPC) and studies in rheology, among others. The toxicity of the galactomannans was evaluated for possible pharmacological applications. The following toxicity tests have been applied: assessment of toxicity through bioassays against nauplios Artemia sp; bioassays in vivo using Swiss mice; assessment of toxicity compared to the human neutrophils, as measured by lactate dehydrogenase (LDH) activity. According to the analyzes performed in this study, the purified galactomannan presented a hypoglycemic effect and a promising adjuvant in the healing of skin lesions. The galactomannan modified by sulfating presented antiviral properties against Herpes (HSV1) and polio (PV1) viruses. / O presente trabalho teve como objetivo desenvolver composições poliméricas que possam ser aplicadas como: antiviral, hipoglicemiante e como coadjuvante na cicatrização de lesões dérmicas. Para isso foi realizado uma purificação e modificação de galactomanana de Caesalpinia ferrea Mart ex Tul.Var Ferrea para avaliar o potencial de bioatividade desse polímero purificado e modificado por sulfatação. Após o procedimento de purificação e modificação química, a galactomanana de jucá foi caracterizada por Espectroscopia na Região do Infravermelho (FTIR), Análise Térmica (TGA e DSC), Energia Dispersiva de Raio-X (EDX) e Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV), Tensão Superficial, Microscopia de Força Atômica (AFM), Potencial Zeta, Cromatografia de Permeação em Gel (GPC), estudos em reologia, avaliação da toxicidade das galactomananas (nativa, purificada e sulfatada) através dos bioensaios contra náuplios Artemia sp; bioensaios in vivo, utilizando camundongos da raça swiss e avaliação da toxicidade frente aos neutrófilos humanos, mensurada através da atividade da enzima lactato desidrogenase (LDH). Pelas análises realizadas nesse trabalho, o polissacarídeo, do tipo galactomanana, purificado e modificado por sulfatação, apresentou respostas bioativas, como antiviral, contra vírus da Herpes (HSV1) e poliomielite (PV1), hipoglicemiante e promissor coadjuvante na cicatrização de lesões dérmicas.

MESQUITA, Jacilane Ximenes. Caracterização estrutural e atividade hipoglicemiante da lectina da alga marinha vermelha Amansia multifida C. lamourox. xix, 67 f. : Dissertação (Mestrado em Bioquímica) - Universidade Federal do Ceará, Fortaleza-CE, 2010. / Submitted by Eric Santiago (erichhcl@gmail.com) on 2016-05-25T12:27:50Z No. of bitstreams: 1 2010_dis_jxmesquita.pdf: 1104327 bytes, checksum: 6b0273ab7ad80cb17cdd35f88dbb776b (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa (jairo@ufc.br) on 2016-07-05T19:53:34Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2010_dis_jxmesquita.pdf: 1104327 bytes, checksum: 6b0273ab7ad80cb17cdd35f88dbb776b (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-05T19:53:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2010_dis_jxmesquita.pdf: 1104327 bytes, checksum: 6b0273ab7ad80cb17cdd35f88dbb776b (MD5) Previous issue date: 2010 / The function of a protein is determined by its structure. As a result, the structural study of potentially active biomolecules can lead to a better understanding of its mechanism of action, as their biological activities. Thus, this study aimed to purify and structurally characterize the lectin from red seaweed Amansia multifida protein fraction which has a potential hypoglycemic. The protein fraction (F 0/70) was subjected to anion- exchange chromatography on a column of DEAE - Sephacel to elution of the first peak (PI). This peak was selected as the hemagglutination activity was obtained then the lectin from A. multifida, verified by SDS - PAGE. For two - dimensional electrophoresis were detected five isoforms. The N-terminal sequence (20 amino acid) showed no sim ilarity to any sequence deposited in databases, suggesting that it does not belong to any group of algae known lectins. The lectin was structurally characterized by spectroscopic techniques of circular dichroism (CD) and fluorescence. The CD analysis showe d that the lectin was composed of 4% α - helix, 43% beta sheet, 21% turn and 32% unordered structure, according to the deconvolution program Contin. It was also verified by CD, the structural stability of the protein against the extremes of pH and different temperatures. When subjected to temperature of 10 - 85 °C was found that the protein showed 50% of the denaturation in 40.2ºC, being completely denatured at 85°C. Such a distortion was shown to be irreversible, since after being incubated again under native conditions, the lectin was not able to recover its original structure. Extremes of pH (3.0 and 11) did not alter the secondary structure of the protein. For the fluorescence data read out at 280 and 295 nm, showed the presence of aromatic amino acids that fluoresce, such as tryptophan and tyrosine. Fluorescence spectra measured, even in the face of extremes of pH, showed no major changes that could reflect structural changes in order not to shift the peak of the emission measurements. Biological assays of hypoglycemic activity carried out with the F 0/70, containing the lectin from the algae showed that it was able to significantly reduce the blood glucose level of animals with diabetic state induced by alloxan. / A função de uma proteína é determinada pela sua estrutura. Em decorrência, o estudo estrutural de biomoléculas potencialmente ativas pode levar a uma melhor compreensão de seu mecanismo de ação, quanto as suas atividades biológicas. Desse modo, o presente trabalho teve como objetivo purificar e caracterizar estruturalmente a lectina de Amansia multifida, cuja fração protéica, possui um potencial hipoglicemiante. A fração rica em proteínas (F0/70) l foi submetida a uma cromatografia de troca iônica em coluna de DEAE-Sephacel para eluição do pico I. Este pico protéico foi selecionado quanto à atividade hemaglutinante, coletado e empregado para o isolamento da lectina. Como observado por SDS-PAGE, PI apresentou elevado grau de purificação pela presença de uma única banda protéica (lectina). Por eletroforese bidimensional foram detectadas cinco isoformas. A seqüência N-terminal obtida (20 aminoácidos) não apresentou semelhança com nenhuma outra seqüência depositada em bancos de dados, sugerindo que ela não pertença a nenhum grupo de lectinas de algas conhecidas. Essa proteína foi caracterizada estruturalmente, por técnicas espectrocópicas de dicroísmo circular (CD) e fluorescência. A análise por CD mostrou que a lectina era constituída por 4% de α- hélice, 43% de folha beta, 21% de voltas e 32% de estrutura não ordenada, segundo o programa de desconvolução Contin. Ainda por CD, a proteína foi também avaliada quanto a estabilidade estrutural frente a extremos de temperatura e pH. Quando submetida a variações de temperatura de 10 – 85 ºC foi verificado que a proteína mostrou 50% de desnaturação a aproximadamente 40,2 ºC, mostrando-se completamente desnaturada a 85 ºC. Tal desnaturação mostrou-se irreversível, já que após ser incubada novamente sob condições nativas, a lectina não foi capaz de recuperar sua estrutura original. Extremos de pH (3,0 e 11) não alteraram sua estrutura secundária, demonstrando a estabilidade da mesma nesse aspecto. Quanto aos dados de fluorescência, as leituras realizadas a 280 e 295 nm, mostraram a presença de aminoácidos aromáticos que emitem fluorescência, tais como triptofano e tirosina. Espectros de fluorescência frente a extremos de pH, não mostraram grandes alterações que pudessem refletir em mudanças estruturais, já que não houve deslocamento do pico máximo de emissão em nenhuma situação testada. Ensaios biológicos de atividade hipoglicemiante realizados com a F 0/70 de A. multifida, mostraram que a mesma foi capaz de reduzir significativamente o nível de glicose sanguínea dos animais com estado diabético induzido por aloxano.

Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2018-05-10T14:46:25Z No. of bitstreams: 3 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) Dissertação Parcial (Cap. 3 e 4)_Adriana Lopes.pdf: 10160791 bytes, checksum: fcc358b54975ae883dc9c27425c24503 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2018-05-10T14:47:03Z (GMT) No. of bitstreams: 3 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) Dissertação Parcial (Cap. 3 e 4)_Adriana Lopes.pdf: 10160791 bytes, checksum: fcc358b54975ae883dc9c27425c24503 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-05-10T14:47:03Z (GMT). No. of bitstreams: 3 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) Dissertação Parcial (Cap. 3 e 4)_Adriana Lopes.pdf: 10160791 bytes, checksum: fcc358b54975ae883dc9c27425c24503 (MD5) Previous issue date: 2015-10-29 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Myrtaceae constitutes one of the largest and most important Angiosperm families of the Brazil flora and is concentrated in a single tribe: Myrteae (three sub-tribes: Myrciinae, Eugeniinae, and Myrtinae). Species of this family have been distributed in almost all brazilian biomes. The Myrcia spp. constitutes one of the largest genus belonging to Myrtaceae in number species and chemical and biological studies. These chemical studies of Myrcia spp. have revealed the presence of terpenes, phenolics, and flavonoids, which are responsible for several chemical and biological activities. This dissertation describe the chemical study of Myrcia bracteata, M. citrifolia, and M. fenestrata collected in the Reserva Florestal Adopho Ducke, Manaus (AM), as well as evaluates the antioxidant and hypoglycemic potentials of the extracts, fractions, and isolated compounds. The HPLC fractionation of the stems and leaves ethyl acetate extract from Myrcia bracteata had resulted in the isolation of four glycosylated flavonoids. These were characterized, particularly by NMR and MS, as two dihydroflavones (naringenin-7-O-glucoside and eriodictyol-7-O-glucoside), one dihydroflavonol (astilbin) and one flavanol (quercitrin). The ANOVA of the results sequestering ability of free radical DPPH• has revealed that the non-aqueous extracts of three species of Myrcia (except the leaves aqueous extract of M. fenestrata) have the lowest values of CS50 (between 37-51%). Among these extracts, the leaves and stems ethanol extracts of M. bracteata have shown signs of the flavonoid hydrogens type in the 1H NMR spectra. The sequential aqueous extract of M. bracteata and naringenin-7-O-glucoside have exhibit inhibitory effects of a-glucosidase enzyme activity by Saccharomyces cerevisiae of 20.60 ± 0.08 and 23.27 ± 1.86%, respectively. The leaves aqueous direct extract from Myrcia fenestrata was the only sample that showed inhibitory response against the a-glucosidase enzyme of the intestine of rats, whose value is 55 ± 3%. Therefore, the species M. bracteata shows a source of the antioxidant and hypoglycemic flavonoids, among which three were not yet described on genus and family. Therefore, this work has contributed to the knowledge of the Chemistry of Natural Products from plants of the Amazônia bioma. / Myrtaceae constitui-se uma das maiores e mais importantes famílias de Angiospermas da flora brasileira. Representantes desta família estão distribuídos nos diferentes biomas brasileiros. Myrcia constitui-se um dos maiores gêneros pertencentes à família Myrtaceae em numero de espécies e estudos químicos e biológicos. Estudos químicos de Myrcia spp. revelaram a presença de substâncias do tipo terpênica, fenólica e flavonoídica, as quais são responsáveis por diversas atividades químicas e biológicas. Este trabalho objetivou descrever o estudo químico de M. bracteata, M. citrifolia e M. fenestrata coletadas na Reserva Florestal Adolpho Ducke em Manaus (AM), bem como avaliar os potenciais antioxidante e hipoglicemiante dos extratos, frações e substâncias isoladas. Os fracionamentos por CLAE do extrato em acetato de etila dos caules e das folhas de M. bracteata resultaram no isolamento de quatro flavonoides glicosilados. Esses foram caracterizados, principalmente, por RMN e EM, como sendo duas dihidroflavonas (naringenina-7-O-b-glicosídeo e eriodictiol-7-O-b- glicosídeo), um dihidroflavonol (astilbina) e um flavonol (quercitrina). As Análises de Variância dos resultados de capacidade sequestrante do radical livre DPPH• revelaram que os extratos não aquosos das três espécies de Myrcia apresentaram os menores valores de CS50% (entre 37-51 %). Dentre esses extratos, os etanólicos de folhas e de caules de M. bracteata apresentaram sinais nos espectros de RMN de 1H característicos de substâncias flavonoídicas. O extrato aquoso sequencial das folhas de M. bracteata (MBFpba) e a naringenina-7-O-b- glicosídeo apresentaram efeitos inibitórios da atividade enzimática da a-glicosidase de Saccharomyces cerevisiae em 20,60±0,08 e 23,27±1,86 %, respectivamente. O extrato aquoso direto das folhas de M. fenestrata (MFFa) apresentou resposta inibitória frente à enzima a- glicosidase de intestino de ratos, cujo valor é 55±3%. Portanto, a espécie M. bracteata evidenciou ser uma fonte de flavonoides com atividades antioxidante e hipoglicemiante, dos quais três ainda não foram descritos no gênero e na família. Portanto, este trabalho contribui com o conhecimento da química de produtos naturais de matrizes vegetais da Amazônia.

Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2017-04-04T11:43:58Z No. of bitstreams: 1 daniellemariadeoliveiraaragao.pdf: 2211938 bytes, checksum: f8c23516b09f7a351827796c4800d319 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2017-04-04T11:50:39Z (GMT) No. of bitstreams: 1 daniellemariadeoliveiraaragao.pdf: 2211938 bytes, checksum: f8c23516b09f7a351827796c4800d319 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-04T11:50:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 daniellemariadeoliveiraaragao.pdf: 2211938 bytes, checksum: f8c23516b09f7a351827796c4800d319 (MD5) Previous issue date: 2009-03-27 / Diabetes mellitus é uma síndrome que afeta mais de 180 milhões de pessoas no mundo e é provável que esse número chegue a mais que o dobro desse valor em 2030. A principal característica clínica do diabetes é a hiperglicemia. Vários trabalhos mostram que a hiperglicemia é crítica para o desenvolvimento de complicações nos diabéticos e que estes efeitos são associados ao estresse oxidativo. Neste contexto, o presente estudo investigou o efeito hipoglicemiante do extrato metanólico das folhas de C. pachystachya (400 mg/ml) em ratos normais e diabéticos induzidos com aloxano durante um período de 42 dias. O extrato apresentou uma acentuada redução dos níveis de glicemia de ratos diabéticos após 12 horas de sua administração. Este efeito não foi observado para ratos normais. Parâmetros bioquímicos foram determinados após 42 dias do tratamento e não foram observadas alterações significativas. Também foi realizado o estudo histológico do fígado e rim e não houve alterações nestes órgãos. Esse extrato apresentou igualmente relevante atividade antioxidante (DPPH e redução do poder). A triagem fitoquímica preliminar revelou a presença de fenóis, flavonóides, cumarinas, taninos, esteróides, antraquinonas e alcalóides. Ácido clorogênico também foi identificado no extrato. As conclusões revelam que C. pachystachya possui uma potente atividade antioxidante e hipoglicemiantes. Não foram observados efeitos adversos durante o período estudado indicando que a espécie vegetal é promissora para o tratamento da diabetes. / Diabetes mellitus is a syndrome that affects more than 180 million of people around the world and the number is likely to more than double by 2030. The prime clinical characteristic of diabetes is the hyperglycemia. Several works show that hyperglycemia is critical on diabetic complication development and that these effects are associated to oxidative stress. In this regard, this study investigate the hypoglycemic effect of the methanolic extract of leaves of C. pachystachya (400 mg/ml) in normal, glucose loading and alloxan-induced diabetic rats during a period of 42 days. The extract presented a pronounced decrease on the blood glucose levels of diabetic rats in 12 hours after extract administration. This effect was not observed for normal rats. Biochemical parameters were determined after 42 days treatment and no significant changes were observed. The histological study of the liver and kidney was also performed and no alterations were observed in these organs. This extract also presented relevant antioxidant activity (DPPH and reduction power). A preliminary phytochemical screening revealed the presence of phenols, flavonoids, coumarins, tannins, steroids, anthraquinones and alkaloids. Chlorogenic acid was also identified in the extract. The findings show that C. pachystachya possesses a powerful hypoglycemic and antioxidant activity. No adverse effects were observed during the studied period indicating that is promising plant species for handling of diabetes.

CHAPTER II: Introduction and Objectives: Metformin can act in muscle inhibiting the complex I of the electron transport chain and activating a signaling cascade for glut-4 translocation to the membrane cell. Our hypothesis is that this inhibition can decrease mitochondrial reactive oxigen species (ROS), minimizing cell damage caused by oxidative stress. Thus, the aim of this study was to evaluate the activity and expression of oxidative stress enzymes, total antioxidant status and lipid peroxidation in gastrocnemius muscle of rat with induced diabetic Mellitus and treated with metformin. Materials and Methods: The DM was induced in Wistar rats divided into four groups: untreated, treated with insulin, insulin plus metformin, and metformin. A non-diabetic group was used as control. The gastrocnemius muscle was collected and homogenized to evaluate the following parameters: superoxide dismutase (SOD) and catalase (activity and immunoblotting), glutathione peroxidase, glutathione reductase and glucose-6-phosphate dehydrogenase (activity), reduced glutathione, lipid peroxidation and total antioxidant capacity were measured. Results and conclusions: he group treated with metformin showed prevention in increased activity and expression of SOD and catalase, and kept the total antioxidant capacity and G6PDH activity when compared to the untreated group. These results seem to be related to lower lipid peroxidation. Therefore, this study suggest that metformin may is involved in the regulation of the oxidative stress in muscle cells decreasing lipid peroxidation which could improve glucose uptake. / CAPÍTULO II: Introdução e Objetivos: A metformina pode atuar no músculo inibindo o complexo I da cadeia de transporte de elétrons, ativando uma cascata de sinalização para translocação de GLUT-4 para membrana. Nossa hipótese é que esta inibição pode diminuir a produção de espécies reativas de oxigênio mitocondrial (ROS), minimizando os danos celulares causados pelo estresse oxidativo. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar a atividade e expressão de enzimas do estresse oxidativo, capacidade antioxidante total e peroxidação lipídica no músculo gastrocnêmio de ratos com diabetes mellitus induzida e tratados com insulina e/ou metformina. Materiais e Métodos: O DM foi induzido em ratos Wistar divididos em quatro grupos: não tratados, tratados com insulina, insulina e metformina, e metformina. O músculo gastrocnêmio foi coletado e homogeneizado para avaliar os seguintes parâmetros: superóxido dismutase (SOD) e catalase (atividade e expressão), glutationa-peroxidase, glutationa redutase e glicose-6-fosfato desidrogenase (atividade), glutationa reduzida, peroxidação lipídica e capacidade antioxidante. Resultados e conclusões: Os grupos tratados com metformina mostraram prevenção no aumento da atividade e expressão de SOD e catalase, bem como mantiveram a capacidade antioxidante total e atividade de G6PDH, quando comparado com o grupo não tratado. Esses resultados parecem estar relacionados com uma menor peroxidação lipídica. Portanto, este estudo sugere que a metformina pode está envolvida na regulação do estresse oxidativo nas células musculares diminuindo a peroxidação lipídica que poderia melhorar a captação de glicose. / Mestre em Genética e Bioquímica