Orientador: Claudio Lucio Rossi / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-21T01:20:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Takahashi_EmiliaEmikoHieda_D.pdf: 2223620 bytes, checksum: 56da014976ab8fdcaa1606ddef7afc11 (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: A toxoplasmose, infecção causada pelo parasita intracelular Toxoplasma gondii, em indivíduos imunocompetentes é, geralmente, assintomática ou se apresenta associada com manifestações clínicas leves e não específicas. O diagnóstico sorológico da toxoplasmose aguda tem, tradicionalmente, sido feito pela detecção de anticorpos específicos da classe IgM e/ou pela demonstração de um aumento significativo dos títulos de anticorpos específicos, usualmente da classe IgG. Entretanto, a presença de altos títulos de anticorpos IgG anti- Toxoplasma gondii em um número significativo de pessoas sadias e a persistência, em alguns casos, dos anticorpos da classe IgM por vários meses, ou mesmo anos, após a infecção com o parasita, tem dificultado a interpretação dos resultados dos testes sorológicos para o diagnóstico da fase aguda da toxoplasmose. O presente estudo foi delineado para avaliar a utilidade da pesquisa dos anticorpos IgA anú-T.gondii para o diagnóstico da toxoplasmose aguda adquirida. Anticorpos IgA anti-T.gondii foram pesquisados, através das técnicas de ELISA direta (ELISA d), ELISA de captura (ELISAc) e Imunocaptura-aglutinação (IC-A), em 54 pacientes com toxoplasmose aguda adquirida, 50 pacientes com infecções heterólogas e em 27 pessoas sadias. As três técnicas apresentaram alta sensibilidade e especificidade para o diagnóstico da toxoplasmose: ELISAd - 98% de sensibilidade e 97% de especificidade; ELISAc-100% de sensibilidade e 99% de especificidade; IC-A-100% de sensibilidade e especificidade. Através de um estudo comparativo, a persistência dos anticorpos IgA, detectados por ELISAd, ELISAc e IC-A, e a dos anticorpos IgM, detectados por imunofluorescência indireta (IFI), ELISAc e por uma técnica de quimioluminescência baseada em princípios imunoenzimáticos (QmL), foram avaliadas utilizando-se amostras sequenciais de soros de 10 pacientes com toxoplasmose, obtidas a diferentes intervalos de tempo após as manifestações clínicas da infecção. Os resultados da pesquisa de IgM confirmaram as observações de outros autores referentes a longa persistência desta classe de anticorpos específicos após a infecção com o parasita. Foi, ainda, observada uma relação direta entre a sensibilidade da técnica utilizada e a persistência dos anticorpos IgM. Do mesmo modo, a análise dos resultados referentes a pesquisa de IgA mostrou que as técnicas de ELISAd e IC-A permaneceram, também, positivas por um longo período de tempo após a infecção, em um número significativo de casos. Com relação a identificação da fase aguda da toxoplasmose adquirida através da pesquisa de anticorpos específicos, levando em consideração a freqüência de detecção dos anticorpos e a persistência dos mesmos no curso da infecção, os melhores resultados foram obtidos com a técnica de ELISAc para IgA, considerando como significativos níveis de anticorpos superiores a 40 unidades arbitrárias por ml de soro (UA/ml). A pesquisa de anticorpos IgA por ELISAc associada a pesquisa de anticorpos IgM através de IFI ou de uma técnica de maior sensibilidade tal como ELISAc ou QmL, poderá contribuir significativamente para o diagnóstico sorológico da toxoplasmose aguda adquirida / Abstract: Toxoplasmosis, an infection caused by the intracellular parasite Toxoplasma gondii, is generally asymptomatic or is associated with mild, nonspecific clinical manifestations in immunocompetent subjects. The detection of Toxoplasma-specific antibodies has been considered the most valuable tool for diagnosing toxoplasmosis. Serological diagnosis of acute toxoplasmosis has traditonally been performed by detecting specific IgM antibodies and/or by demonstrating a significant increase in specific IgG antibody levels. However, the presence of high anti-Toxoplasma IgG antibody titers in a significant number of normal subjects and the persistence, in some persons, of specific IgM antibodies for several months or even years following the acute infection have complicated the interpretation of serological test results when toxoplasmosis is suspected. The present study was designed to evaluate the usefulness of detecting Toxoplasma - specific IgA antibodies for the diagnosis of acute acquired toxoplasmosis. The sensitivities and specificities of the direct ELISA (dELISA), immunocapture ELISA (cELISA) and immunocapture-agglutination assay (IC-A) for detecting Toxoplasma-specific IgA antibodies were determined by analysing the following groups of sera: 54 serum samples from patients with acute acquired toxoplasmosis, 50 serum samples from patients with heterologous infections and 27 serum samples from healthy controls. The performances of the three techniques were excellent and very similar: 98% sensitivity and 97% specificity for the dELISA, 100% sensitivity and 99% specificity for the cELISA and 100% sensitivity and specificity for the IC-A In a comparative study, the persistence of Toxoplasma- specific IgA antibodies, detected by dELISA cELISA and IC-A, and of Toxoplasma-specific IgM antibodies, detected by indirect immunofluorescence (IFI), cELISA and an enzyme-mediated chemiluminescent assay (QmL), were assessed using sequential serum samples obtained from ten patients at various intervals after the beginning of the clinical manifestations of toxoplasmosis Our results from screening for Toxoplasma - specific IgM antibodies confirmed the observations of others regarding the sustained persistence of such antibodies after infection with the parasite. A longer persistence of IgM was observed using the cELISA and QmL in a significant number of cases. The dELISA and IC-A techniques also detected specific IgA antibodies for a long period after the infection with T.gondii. The best results for IgA were obtained with the cELISA for which values>40 AU/ml represented significant antibody levels. We conclude that the screening for IgA antibodies by cELISA coupled with the screening for IgM antibodies by IFI or a technique with a higher sensitivity could significantly improve the serological diagnosis of acute acquired toxoplasmosis / Doutorado / Doutor em Clínica Médica

Orientadores: Jose Dirceu Ribeiro, Silvia de Barros Mazon / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-26T11:06:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lopez_Nilceia_D.pdf: 11027703 bytes, checksum: 3f672c2cde9ec9f235fa433f321dfc5c (MD5) Previous issue date: 2000 / Resumo: Realizou-se um estudo prospectivo clínico-Iaboratorial de 115 lactentes durante o primeiro ano de vida, determinando-se os níveis séricos da 19B total e específica, e a sua relação com o aparecimento de manifestações atópicas. Foi também analisada a influência de fatores genéticos (sexo, raça, história familiar de atopia) e ambientais sobre os níveis séricos da 19B total. As dosagens séricas da 19B total foram realizadas em sangue de cordão, aos 3, 6, 9, e 12 meses, por ensaio imunoenzimático (MEIA - Microparticle Enzyme lmmunoassay). A 19B específica para alérgenos alimentares e inalantes foi quantificada aos 6 e 12 meses, utilizando-se imunoensaio quimioluminescente (CLIA lmmunochemiluminometric assay). Na casuística estudada 60 (52%) lactentes eram do sexo masculino, 67(58%) da raça caucasóide, 46 (41%) negróide, 1 (1%) mongolóide. Durante o seguimento, os lactentes foram classificados em 3 grupos: I) com manifestações de atopia: 33(29%), ll) com manifestações de alergia: 12(10%), Ill) sem manifestações clínicas: 70(61%). Encontrou-se diferença estatística significativa entre os níveis séricos de 19B total de lactentes atópicos (1) e não àtopicos (III) durante todos os períodos estudados (ANOV A p= 0,0004). A sensibilidade (S), especificidade (E) e o valor preditivo positivo (VPP) dos níveis séricos da 19B de cordão umbilical em relação ao aparecimento de atopia, foram 70,97%, 46,2% e 38,6% respectivamente. Aos 12 meses estes valores foram: S=82,14%, E=54,lq% e VPP=45%. Nesta idade, os níveis séricos da 19B total dos lactentes atópicos foram mais elevados em relação ao grupo assintomático, para as variáveis sexo masculino (p=0,015); raça negra (p=O,009); tempo de aleitamento menor que 6 meses (p=0,00l,l) e baixa renda familiar (p= 0,006). Não houve associação entre níveis da 19B e história familiar ositiva de atopia, a qual apresentou S= 65,6%,E=52,8%, VPP=38,8% na predição de atopia. Não houve influência sazonal nos níveis de 19B de cordão umbilical. Aos 12 meses, os níveis séricos da 19B específica para clara de ovo, leite de vaca, D. pteronyssinus, D farinae também foram mais elevados nos lactentes ~om manifestações atópicas em relação ao grupo assintomático. O estudo permitiu construir uma curva dos níveis séricos de 19B em lactentes saudáveis. Os resultados obtidos demonstram que a resposta imune para atopia é precocemente influenciada por fatores ambientais, e que aos 12 meses os níveis séricos de 19B foram relevantes na predição de atopia / Abstract: The purpose of our study was to carry out a prospective follow-up of 115 newborns at term regarding clinical manifestations for atopy during the fIrst year of life. Their 19B levels in cord blood samples, at 3,6,9 and 12 months of age were measured and the influence of race, sex, breast-feeding, maternal smoking, family income, month of birth, family history and personal manifestations of atopic disease were evaluated. Total serum immunoglobulin E was quantifIed by microparticle enzyme immunoassay (MEIA). At 6 and 12 months the specifIc 19B levels to cow' s milk, white egg, house dust and mite were measured by immunochemiluminometric assay (CLIA). The study group consisted of 60 (52%) male neonates, 67 (58%) Caucasians and 46 (41%) Blacks and 1(1%) Japanese. In the clinical follow up, 32 (28.1%) infants developed obvious atopic disease: 29 infants presented recurrent wheezing, 2 had cow milk allergy and 1 had atopic dermatitis. Probable atopic disease developed in 12 (10.5%) infants, whereas 70 (61.4%) infants showed no manifestations. Cord blood 19B levels in infants with obvious atopic disease was higher when compared to those without atopic disease (p=0.024), with 70.97% of sensitivity and 46.2% of specifIcity. IgE levels were also signifIcant1y different up to 12 months in these groups (p=0.0001), when the sensitivity was 82.1% and the specifIcity 54.1%. At 12 months, the IgE levels were higher in infants with obvious atopy than non atopic disease in relation to male sex (p=0.015), black race (p=0.009), breast feeding for less than six months (p=0.011) and when the family income was less than three times the minimum wage (about US $ 300) (p=0.006). There was no association between 19B levels and family history of atopy. The sensitivity, specificity and predictive positive value of the family history ~as 65.6%, 52.8% and 38.8% respectively. At 12 months, the specifIc 19E levels to cow' s milk, white egg, mite were higher in infants with obvious atopy th&! non atopic disease. This study presented an 19B levels curve of normal children. We concluded that immune Response for atopy was in a large degree influenced l>y environmental factors and serum 19B at 12 months was a good marker for identifying infants with risk of atopic disease in early life / Doutorado / Doutor em Pediatria

Made available in DSpace on 2016-08-30T10:50:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_3006_2006_CLÁUDIA REPOSSI_DISSERTACAO.pdf: 1097719 bytes, checksum: 1a11f8231ff800ab87cc855e899b5259 (MD5) Previous issue date: 2008-11-07 / Este estudo avalia os efeitos da intervenção-relaxamento no sistema imunológico de mulheres com diagnóstico de câncer de mama, atendidas no Hospital Santa Rita de Cássia, localizado no município de Vitória, Espírito Santo. A amostra foi composta de 40 mulheres (20 do grupo controle e 20 do grupo experimental). Como parâmetro imunológico foi utilizado o nível de Imunoglobulina A salivar (IgAs). O objetivo do estudo foi examinar a relação entre a IgAs e a utilização da técnica de relaxamento no grupo experimental comparadas com o grupo controle. Busca também examinar as relações dos níveis de IgAs com as variáveis idade, estadiamento do câncer, tabagismo, etilismo, traço e estado de ansiedade, padrão de comportamento para estresse e padrão de comportamento para coping. Para coleta dos dados utilizou-se entrevista com registro em formulário, Inventário de Traço-Estado de Ansiedade (IDATE) e o Instrumento Padrão de Comportamento para Estresse e Padrão de Comportamento para Coping (SCOPE-STRESS/SCOPE-COP). Foi utilizado a técnica de imunoturbidimetria para dosagem dos níveis de IgAs, que foram coletadas no momento do diagnóstico e uma semana depois. Para análise dos dados utilizou-se o SPSS-versão 13.0 (2004). Conclui-se que não houve relação significativa entre os níveis de IgAs dos grupo controle e experimental realizando uma única vez o relaxamento supervisionado. Também não houve relação significativa entre os níveis de IgAs com as variáveis de controle. Houve relação significativa dos sinais vitais quando utilizado a técnica de relaxamento.

Orientador: Antonio Olavo Cardoso Jorge / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-22T05:18:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ito_CristianeYumiKoga_D.pdf: 3417745 bytes, checksum: 6a4a0cac3afe3b23a6d8bf982b3e331f (MD5) Previous issue date: 1997 / Resumo: Existem vários estudos sobre 19A secretora anti-Streptococcus mutans, porém ainda. não existem evidências conclusivas da sua participação efetiva no controle da cárie. Muitos também são os trabalhos com relação à imunologia das infecções causadas pelas espécies do gênero Candída. O objetivo do presente trabalho foi correlacionar a presença de estreptococos do grupo mutans e de Candída com níveis de 19A na saliva de indivíduos de faixas etárias e condições bucais diferentes. Foram estudados 320 indivíduos divididos em 7 grupos: I - adulto jovem com cárie; II- adulto, jovem livre de cárie; II- crianças com cárie; IV- crianças livres de cárie; Vadultos com cárie; VI- adultos com candidose e VII- crianças com cárie ativa. Os indivíduos foram examinados quanto ao Índice CPOD, Índice de higiene bucal simplificado (IHBS) e fluxo salivar. Foram realizadas contagem total de microrganismos aer6bios e facultativos, contagem de estreptococos do grupo mutans e Candida na saliva. A quantificação dos níveis de 19A anti-Streptococcus mutans e anti-Candida na saliva foi realizada utilizando-se a técnica ELISA. Não houve cOlTelação estatística na população dos níveis de 1gA anti-S. mutans com as contagens de estreptococos do grupo mutans na saliva. Correlação estatística na população foi observada entre os títulos de anticorpos anti-Candida e as contagens de leveduras no grupo adultos com candidose (VI). Nos demais grupos não foi observada correlação / Abstract: Several studies have been done about 19A against Streptococcus mutans but there are no conclusive evidences about the effective participation in caries control. There are also many studies about the immunity involved with infections caused by Candida species. The aim of this work was to cOITelate the presence of mutans streptococci and Candida with levels of 19A in saliva of individuals with diferent age and oral conditions. Three-hundred-twenty individuals were divided in 7, groups: 1- young adult with caries; II-caries free young adult ; III- children with caries; IV- caries free children ; V- adults with caries; VI- adults with candidosis and VII- children with active caries. AlI the individuaIs were examined for DMFT, oral hygiene index-simplified and salivary flow. Total counts of microrganisms, mutans streptococci and Candida counts were also done. The quantification of 19A levels against Streptococcus mutans and Candida was done through ELISA technique. There was no statistical cOITelation for the population between the levels of 19A against S. mutans and counts of these microrganisms in saliva. Statistical cOITelation for the population was observed between titres of antibodies against Candida and counts of yeasts in candidosis group (VI). No cOITelation was found for the other groups / Doutorado / Biologia e Patologia Buco-Dental / Doutor em Ciências

Made available in DSpace on 2014-06-12T18:29:57Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo3542_1.pdf: 940761 bytes, checksum: abdc92152828f5a9e10a4614677d900d (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2009 / Avaliou-se a dinâmica da produção da IgA secretora (IgAs) anti- Toxoplasma gondii na lágrima em pacientes portadores de uveíte posterior ativa presumivelmente por T.gondii. Dezesseis pacientes foram divididos em dois grupos relacionados ao início da sintomatologia: grupos 1 (dia 0) e 2 (dia 30). A lágrima foi coletada com intervalo de 15 dias e por último 30 dias até o final do primeiro trimestre. A dosagem da imunoglobulina G (IgG) e IgM séricas anti-T.gondii foi pelo método de imunofluorescência e a da IgAs pelo Elisa. Todos os pacientes tiveram IgG sérica positiva e IgM sérica negativa. A IgAs na lágrima foi positiva em todos os pacientes, apresentando comportamento diferente em cada paciente. Não foi visto diferença estatisticamente significante entre os intervalos estudados. Houve reatividade também nos olhos sadios semelhante aos doentes. Conclui-se que a dinâmica da IgAs anti-T.gondii na lágrima ocorre de forma variável para cada indivíduo

Made available in DSpace on 2015-12-06T23:06:10Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2005 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A pandemia de HIV / Aids tem sido um dos maiores desafios de Saúde publica dos ultimos 25 anos, dada a complexidade de seu agente etiologico e a rapidez com que produz novos casos. A variabilidade genetica do HIV e um dos topicos mais relevantes desta infeccao e esta variabilidade genetica resulta de limitacoes de fidelidade intrinsecas ao mecanismo de replicacao viral, acentuados pela alta taxa de replicacao na geracao e eliminacao de particulas virais durante o tempo da infeccao. A transcricao reversa do genoma viral representa uma etapa critica do ciclo biologico do HIV -I e que pode softer a influencia de varios fatores, como por exemplo a oferta de nucleotideos ou o estado de ativacao celular. Este deficit de oferta de nucleotideos no momento da transcricao reversa pode gerar genomas altamente mutados nos quais, a informacao viral se perde como no caso da hipermutacao. Neste estudo propomos estudar in vitro os mecanismos que podem contribuir pela diversidade genetica do HIV nos momentos iniciais da infeccao em celulas mononucleares de sangue periferico (PBMCs) de individuos saudaveis. Para tanto, ofertamos tres diferentes condicoes de infeccao e cultura para o HIV. Na primeira, infectamos PBMe's em repouso e mantivemos em cultura por 48h; na segunda as PBMCs foram infectadas e ativadas simultaneamente e mantida em cultura por 48h; na terceira condicao, as PBMCs foram ativadas 72h antes da infeccao, apos, infectadas e mantidas em cultura por 48h. Utilizando a tecnica do EndPoint PCR, DNA provirais oriundos de cada condicao de cultura foram obtidos e 46 clones deste DNA produzidos. Em seguida, parte do gene pol contendo 1047 bp de todos os clones foi sequenciado e analisado. Nossos resultados mostraram uma alta taxa de substituicoes de nucleotideos ao longo das sequencias analisadas em todas as condicoes de cultura e a existencia de regioes comuns entre estas sequencias, em todas as condicoes, em que ocorrem substituicoes, destacando as regioes entre 200 a 300 pb, 400 a 500 pb, 600 a 690 pb, 800 a 900 pb. Nestas regioes o processo mutacional e intenso, os eventos mutacionais que mais ocorrem sao os de transicao e as substituicoes nucleotidicas mais fteqUentes sao as de G para A. Ha clones hipermutados nas tres condicoes e a taxa mutacional encontrada esta em um intervalo de I,OxlO-3 a 2,lxlO-2, valores muito acima do que os encontrados normalmente. Nossos resultados sugerem uma nova visao dos momentos iniciais da infeccao pelo HIV -I. Estudos complementares poderao nos ajudar a entender de forma coesa os momentos iniciais da infeccao pelo HIV -I que, sem duvida representa um evento crucial na evolucao da doenca / HIV/Aids have been one of the major challenges for public health in the last 25 years. The genetic variability of the HIV-1 is one of the most relevant features in the study of HIV-1 infections. The genetic variability is the result of error accumulation during reverse transcription and the high turnover rate of the viral popuulation. Reverse transcription represents a critical stage of the biological cycle of HIV-1, and can suffer the influence of some factors as for example the level of nucleotides or the state of cellular activation. This deficit in nucleotides at the moment of the transcription can generate highly mutates genomes in which, the viral information may be lost as in the case of the hipermutation. In this study we addressed in vitro, the mechanisms that can be responsible for the genetic diversity of the HIV-1 at the initial periods of the infection in mononuclear cells of peripheral blood (PBMC's) of healthy individuals. We offered three different conditions of infection. In the first, we infected resting PBMC's and we kept in culture for 48h; in the second PBMC's were infected and activated simultaneously and kept in culture for 48h; in the third condition, PBMC's were activated 72h before infection and kept in culture for 48h. Using molecular biology techniques, the deriving provirus DNA of each culture condition were isolated, and PCR clones of this DNA were obtained. All clones were sequenced and the pol gene was analyzed. Our results demonstrated an elevated number of nucleotide substitutions in the clones analyzed in all three culture conditions. A pattern in variation was observed in the sequences. We identify a common distribution of substitutions in all analyzed sequences in different culture conditions. Our results suggest a new vision of the initial periods of HIV-1 infection. Complementary studies will be necessary to allow a better understanding of the initial periods of HIV-1 infection which represents a crucial event related to disease progression. / FAPESP: 02/11425-8 / FAPESP: 03/05183-4 / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:11Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-02-18Bitstream added on 2014-06-13T21:02:22Z : No. of bitstreams: 1 garcia_fai_dr_jabo.pdf: 798787 bytes, checksum: cc4872fa6b42f7f6ec29fb841ea304bd (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O presente estudo teve como objetivos comparar a resposta da imunoglobulina G e de suas subclasses nos seguintes grupos de animais; cães hígidos (n=45), animais sintomáticos naturalmente infectados por Leishmania sp. (n=45), animais assintomáticos naturalmente infectados por Leishmania sp. (n=45), cães portadores de leishmaniose visceral submetidos à tratamento (n=27) e animais hígidos submetidos à vacinação contra a doença (n=37). Inicialmente foram avaliadas IgG1 e IgG2 utilizando anticorpos policlonais e posteriormente as quatro subclasses de IgG (IgG1, IgG2, IgG3 e IgG4) com anticorpos monoclonais na tentativa de identificar um perfil de resposta para cada grupo de cães. As determinações sorológicas foram realizadas por meio da técnica de ELISA. A avaliação das subclasses de IgG com anticorpos policlonais não permitiu diferenciar os grupos de cães estudados. Por outro lado, com os anticorpos monoclonais observou-se que o grupo sintomático apresentou estimulação de todas as subclasses de IgG enquanto nos animais assintomáticos apenas a fração IgG1 foi estimulada. Nos cães submetidos a tratamento todas as frações encontravam-se elevadas e nos vacinados ocorreu estimulação de IgG1, IgG3 e IgG4. Desta forma, a avaliação das quatro subclasses permitiu a diferenciação entre animais portadores de leishmaniose visceral com e sem quadro clínico; entre cães vacinados e cães assintomáticos acometidos pela doença; e entre cães com leishmaniose visceral submetidos a tratamento e cães infectados assintomáticos. / The present study aimed to compare immunoglobulin G subclasses in the following groups of animals: healthy dogs (n=45); symptomatic Leishmania sp. naturally infected dogs (n=45); asymptomatic Leishmania sp. naturally infected dogs (n=45); dogs with visceral leishmaniasis submitted to treatment (n=27) and healthy dogs vaccinated for visceral leishmaniasis (n=37). First of all IgG1 and IgG2 were evaluated using polyclonals antibodies, and later the four subclasses of IgG (IgG1, IgG2, IgG3 and IgG4) were evaluated with monoclonals antibodies, in order to identify a profile of reply for each group of dogs. Serological tests were carried out using enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). The evaluation of the subclasses with polyclonals antibodies did not allow to differentiate the groups of studied dogs. On the other hand, with monoclonals antibodies it was possible to verify that symptomatic dogs presented stimulation of all subclasses of IgG, while in asymptomatic animals only IgG1 was stimulated. In dogs submitted to treatment all fractions increased, and in vaccinated ones occurred stimulation of IgG1, IgG3 and IgG4. In such a way, the evaluation of the four subclasses allowed the differentiation between symptomatic and asymptomatic infected dogs; between vaccinated dogs and asymptomatic infected dogs; and between infected dogs submitted to treatment and asymptomatic infected dogs.

Orientador: Humberto Rangel e Ivan Mota / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-21T00:12:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Vaz_EdaMiranda_D.pdf: 912737 bytes, checksum: bcd4be7db5a7c972b422b14c5c81b07f (MD5) Previous issue date: 1975 / Resumo: No presente trabalho estudamos a produção de anticorpos da classe IgE em camundongos isogênicos de diferentes linhagens. A cinética da produção do anticorpo IgE após imunização com doses altas e baixas do antígeno foi estudada e comparada com a produção dos anticorpos da subolasse IgG1. As possíveis causas para a transitoriedade do anticorpo IgE no soro após imunização com dose alta de antígeno e a persistência do mesmo após imunização com dose baixa de antígeno foram abordadas, Para isto estudou-se em várias linhagens de camundongos o efeito de doses elevadas de antígeno não agregado, aplicadas antes e após a dose imunizante, sobre a produção do IgG1 e do IgE. Além disto, estudou-se, também, o possível efeito da retroação exercido pelo anticorpo IgG1 sobre o IgE, Observando-se o efeito da transferência do soro homólogo contendo elevado teor de IgG1 sobre a produção de IgE em camundongos produzindo ativamente IgE. Nossas experiências permitem sugerir que as células envolvidas na produção do anticorpo IgE possivelmente se tornam mais facilmente tolerantes do que as células precursoras do IgG1 e, além disto, que parece existir também um mecanismo de retroação exercido pelo anticorpo IgG1 sobre o anticorpo IgE. Entretanto, mais experiências se fazem necessárias para uma conclusão final para este assunto / Abstract: Not informed / Doutorado / Doutor em Ciências

Orientador : Sonia Maria Alves Bueno / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Quimica / Made available in DSpace on 2018-08-03T02:17:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Machado_RomiLamb_M.pdf: 3093253 bytes, checksum: 4f20326cbb9b0af4dab6d00f6bd2178e (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: A contaminação por endotoxinas (ET) em produtos para injeção parenteral é um problema para a indústria farmacéutica devido à dificuldade de remoção destas moléculas e sua alta toxicidade. Diversas técnicas têm sido estudadas visando a despirogenação (remoção de ET) de soluções protéicas, dentre as quais a cromatografia em membranas apresenta-se como promissora. Neste trabalho, membranas porosas de quito sana reticuladas com epic1oridrina foram obtidas com boa característica de vazão, visando a despirogenação de soluções tampão, de soro fisiológico e de soluções de IgG. Experimentos de filtração com solução de IgG humana diluída em tampão foram realizados para verificar a existência de adsorção da IgG na membrana, sendo que as soluções tamponantes que favoreceram uma menor adsorção foram fosfato de sódio pH 8,0 e Tris-HCl pH 7,0 (0,49 mg/cm3 e 0,73 mg/cm3, respectivamente). Os resultados dos experimentos de adsorção com soluções tampão contaminadas artificialmente com ET revelaram que a solução tamponante Tris-HCl pH 7,0 favorecia uma maior adsorção de ET na membrana de quito sana, obtendo valores de concentração no filtrado de 0,58 EU/mL e 8,36 EU/mL para alimentações, respectivamente, de 18,63 EU/mL e 541,40 EU/mL. Testou-se a influência da presença de sal no meio através da remoção de ET de soro fisiológico contaminado artificialmente, resultando em uma adsorção, das ET alimentadas à membrana, de 50,68% em baixa concentração de ET (42,49 EU/mL) e de 92,23% em alta concentração (889,61 EU/mL). A presença de IgG (1 mg/roL) em solução tampão Trís-HCl pH 7,0 reduziu a adsorção das endotoxinas permitindo obter filtrados com concentração de 4,05 e 71,15 EU/mL de uma alimentação de 116,43 e 796,93 EU/mL, respectivamente, e recuperação protéica, na ordem, de 100 e 96,37%. Em face destes dados, percebe-se que a membrana de quito sana tem potencial para o uso como matriz de adsorção visando a remoção de ET de soluções, embora na presença de proteína, no processo proposto, não se tenha alcançado valores que permitam uma injeção parenteral / Abstract: Endotoxin (ET) contamination in intravascular injection products is a problem for the pharmaceutical industry due to the difficulty of its removal and elevated toxicity. Many techniques have been studied aiming the depyrogenation (ET removal) of protein solutions, among them the membrane chromatography seems to be a promising one. In this work, cross-linked macroporous chitosan membranes were obtained having a good flow dynamics, focusing the depyrogenation of buffering solutions, physiologic serum and human IgG solutions. Filtration experiments with human IgG diluted in buffering solution were conducted to verify the IgG adsorption on the membrane. The buffering solutions that resulted a lower IgG adsorption were sodium phosphate pH 8.0 and Tris-HCl pH 7.0 (0.49 mg/cm3 and 0.73 mg/cm3 , respectively). The adsorption experiments results using buffer solutions artificially contaminated with ET showed that the Tris-HCl pH 7.0 buffering solution favoured a higher ET adsorption on the chitosan membrane being the filtrated concentrations 0.58 EU/mL and 8.36 EU/mL to the feed flow of 18.63 EU/mL and 541.4 EU/mL, respectively. The influence of salt presence in the solution was tested for the ET removal of artificially contaminated physiologic serum resulting in a 50.68% adsorption at a low ET concentration (42.49 EU/mL) and 92.23% at a high ET concentration (889.61 EU/mL). The IgG presence (1 mg/mL) in Tris-HCl pH 7.0 buffer reduced the ET adsorption so that a filtrated concentration of 4.05 and 71.15 EU/mL were obtained from a 116.43 and 796.93 EU/mL feed, respectively, and a protein recovery of 100% and 96.37%. These results showed that chitosan membrane has a potential to be used as an adsorption matrix for ET removal in solutions, eventhought safety concentration values that allows a parenteral injection have not been achieved in samples containing proteins / Mestrado / Desenvolvimento de Processos Biotecnologicos / Mestre em Engenharia Química

Orientador: Iracema de Mattos Paranhos Calderon / Coorientador: Adenilda Cristina Honório França / Banca: Yuri Karen Sinzato / Banca: Debora Cristina Damasceno Meirelles dos Santos / Banca: Mahmi Fujimori / Banca: Mara Sandra Hoshida / Resumo: Durante a gravidez, a hiperglicemia materna altera a expressão e a transferência de células imunorregulatórias e de imunoglobulinas e o perfil de citocinas na interface materno-fetal. Avaliar, em gestações complicadas por hiperglicemia, a expressão de células NK e o perfil de citocinas no sangue, materno e do cordão umbilical, e na placenta (artigo 1); quantificar a produção de anticorpos e a passagem de IgG total, e respectivas subclasses, via receptor FcRn (artigo 2). MÉTODO - Foram avaliadas 120 gestantes, distribuídas nos grupos: não-diabético (ND; N = 30), hiperglicemia gestacional leve (HGL; N = 30), diabetes mellitus gestacional (DMG; N = 30) e diabetes mellitus tipo 2 (DM2; N = 30). Técnicas de citometria de fluxo foram utilizadas para análise de células e citocinas e, de ELISA, para avaliação das concentrações de IgG total e subclasses. A transferência placentária de anticorpos totais, e respectivas subclasses, foi definida pela relação [(concentrações no sangue de cordão umbilical/sangue materno) x 100]. Na análise estatística foram realizadas análises de variância (ANOVA), seguida pelo teste de Tukey, e de correlação de Pearson, com p < 0,05. No sangue materno dos grupos hiperglicêmicos, as células NK CD16+CD56- aumentaram, enquanto que CD16+CD56+ foi menor no grupo DMG. No sangue do cordão do grupo DM2 mostrou uma maior proporção de células CD16+CD56- e CD16-CD56+. As camadas extravilosas da placenta dos grupos DMG e DM2 most... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: - During pregnancy, the immune response associated with diabetes alters the expression and the transfer of immune cells, including regulatory, immunoglobulins and the profile of cytokines in the maternal-fetal interface. To evaluate the expression of NK cells, and the profile of cytokines in maternal blood, umbilical cord and placenta, quantify the production of antibodies, as well as, the passage of IgG and subclasses, via receptors FcRn in pregnancies complicated by diabetes or hyperglycemia.Wereessed 120 pregnant women, distributed as non-diabetic (ND; n=30), Mild Gestational Hyperglycemia (MGH; n=30), Gestational Diabetes Mellitus (GDM; n=30) and type 2 Diabetes Mellitus (DM2; N=30). The cells and cytokines were evaluated by flow cytometry. The concentrations of total IgG and subclasses were analyzed by ELISA. Placental transfer of the total and subclasses antibodies were defined in each assay by the ratio [(cord concentrations/maternal concentrations) x 100]. In the statistical analysis we used analysis of variance (ANOVA), followed by Tukey test, and Pearson's linear correlation, with p < 0.05. RESULTS - In the maternal blood from the hyperglycemic groups, the CD16+CD56− NK cells increased, whereas that of CD16+CD56+ decreased in GDM group. Cord blood from DM2 showed a higher proportion of CD16+CD56− and CD16−CD56+. The placental extravillous layer of GDM and DM2 showed an increase of CD16+CD56− cells and, irrespective of region, the proportion of CD16−CD56+ cells was higher in MGH and GDM and lower in DM2. IL-2 was lower in maternal blood and IFN-���� higher in maternal and cord blood from the GDM group. IL-17 was higher in maternal and cord blood from the DM-2 group. The placental extravillous layer of the MGH showed high levels of IL-4, IL-6, IL-10, IL- 17, and IFN-���� and low levels of IL-1���� and IL-8, whereas the placental villous layer... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor