Orientador: Cleslei Fernando Zanelli / Co-orientador: Sandro Roberto Valentini / Banca: Alexandra Ivo de Medeiros / Banca: Valéria Valete / Banca: Rafael Victorio Carvalho Guido / Banca: Érico Tosoni Costa / Resumo: eIF5A é a única proteína conhecida que contém o resíduo do aminoácido incomum hipusina (hidroxiputrescina-lisina). Este resíduo de hipusina é essencial para a função de eIF5A e é formado pela modificação de um resíduo específico de lisina em uma reação póstraducional, dependente da poliamina espermidina. A modificação no resíduo de lisina para a formação da hipusina é chamada de hipusinação, que ocorre em duas etapas: primeiramente, a enzima desoxi-hipusina sintase (DHPS) transfere o radical 4-aminobutil proveniente da espermidina para um resíduo específico de lisina em eIF5A (posição 50 em mamíferos); em seguida, este é hidroxilado pela desoxi-hipusina hidroxilase (DOHH). Muitos autores têm demonstrado que a inibição da hipusinação pelo inibidor de DHPS GC7 ou o silenciamento de eIF5A leva à inibição da proliferação celular em vários tipos de células de mamíferos, incluindo linhagens tumorais, e também induzem um efeito anti-inflamatório, evidenciado em modelo murino de diabetes e sepse. Este trabalho buscou utilizar a linhagem transformada de macrófagos RAW 264.7 para entender melhor os mecanismos pelos quais GC7 possui sua atividade. De forma complementar, foi também testado o efeito de GC7 em macrófagos de cultura primária e também em ratos. Como esperado, demonstramos aqui que GC7 inibe de maneira importante a hipusinação em linhagem RAW 264.7 e que, no entanto, este tratamento com GC7 não compromete a viabilidade celular nem altera significativamente o proteoma de células RAW 264.7. Por outro lado, GC7 inibe a produção e liberação da citocina pró-inflamatória TNF-α sem alterar os níveis de mRNA desta citocina, indicando uma modulação pós-transcricional, mais provavelmente no nível traducional, dada a função de eIF5A no processo de síntese proteica. De forma bastante interessante, este efeito de inibição na liberação de TNF-α... / Abstract: eIF5A is the only known protein containing the unusual amino acid residue hypusine (hydroxiputrescine-lysine). This hypusine residue is essential for eIF5A function and it is formed by modifying a specific lysine residue in a posttranslational reaction dependent on the polyamine spermidine. The modification of the lysine residue for the formation of hypusine is called hypusination, which occurs in two steps: first, the enzyme deoxyhypusine-synthase (DHPS) transfers the 4-aminobutyl moiety from spermidine to a specific lysine residue in eIF5A (position 50 in mammals); then it is hydroxylated by deoxyhypusine-hydroxylase (DOHH). Many authors have demonstrated that inhibition of hypusination by the DHPS inhibitor GC7 or silencing eIF5A leads to inhibition of cell proliferation in several types of mammalian cells, including tumor cell lines, and also induce an anti-inflammatory effect, as evidenced in a murine model of diabetes and sepsis. This study aimed to use the macrophage cell line RAW 264.7 to better understand the mechanisms by which GC7 has its activity. Complementarily, its was also tested the effect of GC7 in primary culture of macrophages and in rats. As expected, we show here that GC7 inhibits hypusination in RAW 264.7 cells and, on the other hand, this treatment with GC7 does not compromise cell viability nor significantly alter the proteome of RAW 264.7 cells. Moreover, GC7 inhibits the production and release of TNF-α without affecting mRNA levels of this cytokine, indicating a posttranscriptional modulation, most probably at the translational level, given the eIF5A function in the process of protein synthesis. Interestingly, this inhibitory effect on TNF-α release was also observed in primary cultures of macrophages and in vivo in rats. It was also examined the GC7 ability to inhibit cell proliferation of RAW 264.7 cells, which occurs prior to the S phase of the cell cycle and does not... / Doutor

A piometra canina é uma infecção bacteriana que acomete o útero de cadelas sexualmente maduras e gera a síndrome clínica conhecida como sepse e síndrome da resposta inflamatória sistêmica. Quando não tratada adequadamente ocorre a progressão da doença para estágios mais graves como a sepse grave e o choque séptico. Embora as alterações ocasionadas pela infecção serem conhecidas, o correto estadiamento da gravidade do quadro ainda é um obstáculo. O processo de inflamação sistêmica é complexo, o fator de necrose tumoral (TNF-α e a interleucina 1β (IL-1&#946) aparecem como mediadores inflamatórios centrais nos casos de sepse. Estudos recentes do DNA de pacientes em choque séptico têm demonstrado a presença de mutações ou polimorfismos que exercem grande influência na produção do TNF-α e da IL-1&#946. Com exceção da avaliação sérica de lactato, a proteína C reativa (CRP) é o biomarcador mais utilizado em testes clínicos para o diagnóstico e tratamento da sepse. Os objetivos principais do estudo foram avaliar a gravidade do caso; as alterações sistêmicas e metabólicas do paciente no período pré-operatório; as concentrações plasmáticas do TNF-α, IL-1β, IL-6 e CRP no momento do diagnóstico; a presença de polimorfismos na região decodificadora do TNF-α e da IL-1&#946. Foram incluídas 9 cadelas sem piometra e 85 com piometra, afecção diagnosticada a partir do histórico e dos sinais clínicos identificados por meio do exame físico e ultrassonografia abdominal; e foram estratificadas para a gravidade do caso em sepse, sepse grave ou choque séptico. As variáveis clinicas e laboratoriais foram coletadas no momento do diagnóstico e confrontadas estatisticamente pelo método de comparações múltiplas. Os resultados mostraram 23 (24,4%) animais em sepse, 60 (63,82%) em sepse grave e dois (2,12%) em choque séptico. As alterações mais significativas foram observadas nos animais com sepse grave e em choque séptico e pode-se destacar a variação no tempo de preenchimento capilar, na pressão arterial, na contagem leucocitária, na albuminemia, na fosfatase alcalina, na creatinina, no pH, na CRP e na IL-6. O exame do gene da IL-1β demonstrou que os animais em sepse com o alelo GG apresentam níveis séricos de IL-1β mais elevados. Foi possível concluir que a estratificação da gravidade do caso para os animais em sepse grave é muito branda e não distingue os animais em estado mais grave dos menos grave dentro do mesmo grupo; que o estadiamento da gravidade poder ser realizado com avaliações corriqueiras e empregadas de forma rotineira no atendimento dos pacientes; que a proteína C reativa e a IL-6 apresentam correlação direta com a gravidade do caso; e que o polimorfismo do gene da IL-1β e o tempo decorrido entre o inicio dos sintomas até que os proprietários procurassem ajuda médica foram os de maior influência sobre a gravidade do caso / Canine pyometra is a bacterial infection that affects the uterus of sexually mature bitches and generates the clinical syndrome known as sepsis and systemic inflammatory response syndrome. When not treated properly the disease progression to more severe stages as severe sepsis and septic shock occurs. Although the changes caused by the infection are known, the correct staging of the severity of the condition is still an obstacle. The process of systemic inflammation is complex, tumor necrosis factor (TNF-α) and interleukin 1β (IL-1β) appear as central inflammatory markers in sepsis. Recent studies of DNA from patients in septic shock have shown the presence of mutations or polymorphisms that exert great influence on the production of TNF-α and IL-1β. Except the assessment of serum lactate, C-reactive protein (CRP) is the most widely used biomarker in clinical trials for the diagnosis and treatment of sepsis. The main objectives of the study were to evaluate the severity of the case, systemics and metabolics changes in the patient preoperatively, plasma concentrations of TNF-α, IL-1β, IL-6 and CRP at the time of diagnosis; the presence of polymorphisms in the decoding region of the TNF-α and IL-1β. In the study was included 9 bitches without pyometra and 85 bitches with pyometra, disease was diagnosed from the history and clinical signs identified through physical examination and abdominal ultrasonography; and were stratified according to the severity of the case in sepsis, severe sepsis or septic shock. The clinical and laboratory variables were collected at diagnosis and compared statistically by the method of multiple comparisons. The results showed 23 (24.4%) animals with sepsis, 60 (63.82%) in two and severe sepsis (2.12%) in septic shock. The most significant changes were observed in animals with severe sepsis and septic shock and can highlight the variation in capillary refill time, blood pressure, leukocyte count, the albumin, alkaline phosphatase, creatinine, pH, CRP and IL-6. Examination of the IL-1β gene showed that animals with sepsis with GG allele have higher levels of seric IL-1β. It was concluded that the stratification of the severity of the case for animals in severe sepsis is very bland and does not distinguish the animals in a more severe state of less severe within the same group; the staging of gravity can be done with ordinary ratings and employed routinely in patient care; the C reactive protein and IL-6 show a direct correlation with the severity of the case; and the polymorphism of the IL-1β and the time elapsed between the onset of symptoms until the owners sought medical help were the most influence on the severity of the case

A asma é uma doença inflamatória crônica com alta prevalência e caracterizada por hiperresponsividade da via aérea, inflamação, e remodelamento brônquico, e é responsável por considerável morbimortalidade em todo mundo. Os tratamentos disponíveis para a asma podem apresentar diferentes respostas e vários efeitos colaterais. Por isso, o desenvolvimento de novas drogas para o tratamento da asma é muito importante. A Uncaria guianensis (Aubl.) J. F. Gmel. (\"unha de gato\", Rubiaceae) (UG), é uma planta encontrada principalmente na Amazônia e na América Central, e apresenta atividade anti-inflamatória e antioxidante. Até o momento, não há relato de estudos da U. guianensis no tratamento da asma. O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos da administração de dois extratos das folhas da U. guianensis no tratamento da asma em um modelo animal, e os mecanismos envolvidos. Camundongons Balb/c foram sensibilizados duas vezes com ovalbumina (OVA) por via interperitoneal (ip) com uma semana de intervalo entre as sensibilizações, após uma semana, os camundongos foram desafiados com OVA via intranasal por três dias consecutivos e tratados com os extratos aquoso ou hidroetanólico da U. guianensis (100 mg/kg) via intraperitoneal por três dias consecutivos, durante os desafios com OVA. Os camundongos controles receberam solução salina nos mesmos dias. Após a sensibilização e desafios, os animais foram ventilados e medidas in vivo da hiper-responsividade brônquica foram realizadas com a administração de aerossois com concentrações crescentes de metacolina. Após, o lavado broncoalveolar (LBA) foi coletado para contagem de células totais e diferenciais. Sangue foi colhido para dosagem de IgE específica para OVA e os pulmões foram retirados para quantificação de citocinas inflamatórias no homogenato, além de determinação da capacidade antioxidante total e análise histológica. A administração do extrato hidroetanólico diminuiu significativamente o número de células totais e diferenciais no LBA e a hiper-responsividade brônquica, quando comparados ao grupo que não recebeu o tratamento. O extrato aquoso não foi capaz de diminuir a contagem de células totais e diferenciais e mostrou uma pequena diminuição na hiper-reatividade brônquica. Tanto o extrato aquoso quanto o hidroetanólico diminuíram as concentrações de interleucina (IL)-13 no homogenato pulmonar, mas não foram capazes de diminuir os níveis de IgE no soro, o número de células inflamatórias no tecido pulmonar, nem foram capazes de aumentar a capacidade antioxidante total. Com isso, concluímos que a administração dos dois extratos (aquoso e hidroetanólico) das folhas da espécie U. guianensis foi efetiva no tratamento da asma em um modelo animal, tanto em termos de mecânica pulmonar quanto em marcadores inflamatórios, com superioridade terapêutica do extrato hidroetanólico. / Asthma is a highly prevalent chronic inflammatory disease characterized by airway hyperresponsiveness, inflammation, and remodeling, with considerable morbidity and mortality worldwide. Available asthma treatments can elicit different responses and numerous side effects. Therefore, the development of new drugs for asthma treatment is highly desirable. Uncaria guianensis (Aubl.) J. F. Gmel. (\"cat\'s claw\", Rubiaceae) (UG), a plant found mainly in the Amazon and the Central America, has anti-inflammatory and antioxidant activities. To date, there is no study of U. guianensis in the treatment of asthma The aim of the study was to evaluate the effects of the administration of two extracts from leaves of U. guianensis in the treatment of asthma in an animal model and the mechanisms involved. Balb/c mice were sensitized twice with ovalbumin (OVA) intraperitoneally (ip) one week apart. After one week, mice were challenged with intranasal OVA for three consecutive days and treated with either aqueous or hydroethanolic extract of U. guianensis (100 mg/kg) ip for three consecutive days, during OVA challenges. Control mice received saline solution on the same days. After sensitization and challenge, the animals were ventilated and in vivo measurement of bronchial hyperresponsiveness was performed with increasing concentrations of aerosolized methacholine. After, bronchoalveolar lavage (BAL) was collected for total and differential cell count. The blood was collected to measure OVA specific IgE, and the lungs were removed for measurement of cytokine levels and total antioxidant capacity in the pulmonary homogenate, and for histological analysis. The hidroethanolic extract administration significantly reduced total and differential cells number and bronchial hyperresponsiveness, compared to the group that received no treatment. The aqueous extract did not decrease the total and differential cell count and showed a small decrease in bronchial hyperresponsiveness. Both extracts decreased interleukin (IL)-13 levels in the pulmonary homogenate, but did not decrease serum IgE levels nor the number of inflammatory cells in lung tissue, nor were they able to increase total antioxidant capacity. We concluded that the administration of two extracts (aqueous and hydroethanolic) from leaves of U. guianensis was effective in the treatment of asthma in animal models, both in pulmonary mechanics and in inflammatory markers, with therapeutic superiority of the hydroethanolic extract.

Orientador: Flávio Ruas de Moraes / Coorientador: Marco Antonio de Andrade Belo / Banca: Rogério Salvador / Banca: Maurício Laterça Martins / Resumo: Este ensaio teve por objetivos avaliar o efeito da administração parenteral de dexametasona e fosfato de levamisol sobre a cinética de acúmulo de macrófagos e formação de gigantócitos em lamínulas de vidro, implantadas no tecido subcutâneo de pacus (Piaractus mesopotamicus), na tentativa de simular um estímulo estressante com imunossupressão e a possibilidade de compensa-la usando um imuoestimulante. Foram utilizados 147 peixes juvenis, distribuídos aleatoriamente em vinte e uma caixas de água plásticas de 250 L, contendo sete animais cada, constituindo os tratamentos: NV = não tratado; CL = controle; L 25 = levamisol (25 mg/kg), L 50 = levamisol (50 mg/kg) , D2 = dexametasona (2 mg/kg), D2+L25 = dexametasona (2 mg/kg + levamisol 25 mg/kg), D2+L50 = dexametasona (2 mg/kg + levamisol 50 mg/kg). Os pacus foram anestesiados em solução alcoólica de benzocaína (1:10000 v/v) e submetidos ao implante de lamínulas de vidro esterilizadas no tecido subcutâneo, quando administrou-se, por via intra-muscular, os fármacos de acordo com cada tratamento. Decorridos dois, sete e 15 dias pós-implante (DPI) os peixes foram novamente anestesiados para coleta de sangue e eutanasiados (solução alcoólica de benzocaína, 1:500 v/v) para a retirada das lamínulas. O sangue destinou-se aos exames hematológicos e as lamínulas à avaliação da cinética do acúmulo de macrófagos e formação de gigantócitos. Os resultados foram analisados pelo teste de Tukey, a 5% de probabilidade e demonstraram que ao longo do período experimental observou-se redução do número de eritrócitos e taxa de hemoglobina associadas ao aumento do volume corpuscular médio, quadro que sugere ligeira anemia macrocítica. Na avaliação da cinética de acúmulo celular sobre a lamínula, as maiores contagens de macrófagos isolados ocorreram sete dias após... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The aim of this study was to investigate the effect of parenteral administration of dexamethasone and levamisole phosphate on the kinetics of accumulation of macrophages and formation of giant cells in glass cover slips implanted in subcutaneous tissue of pacu (Piaractus mesopotamicus) to simulate a stressful stimulus with immunosuppression and the possibility to compensate for it using an immunostimulant. We used 147 juvenile fish, randomly divided in twenty-one plastic water tanks of 250 L, containing seven animals each: NV = not treated, and CL = control, L25 = levamisole (25 mg / kg), L 50 = levamisole (50 mg / kg), D2 = dexamethasone (2 mg / kg), D2 + L25 = dexamethasone (2 mg / kg + levamisole 25 mg / kg), D2 + L50 = dexamethasone (2 mg / kg + levamisole 50 mg / kg). Fish were anesthetized with an alcoholic solution of benzocaine (1:10,000 v / v), implanted with sterile glass cover slips at subcutaneous tissue and were administered intra-muscular drugs, according of each treatment. After two, seven and 15 days post-implantation (DPI) fish were anesthetized for blood collection and euthanized (alcoholic solution of benzocaine, 1:500 v / v) to remove the glass cover slips. The blood was used for hematological tests and the glass cover slips to assess the kinetics of accumulation of macrophages and formation of giant cells. Statistical analyses were performed using 5% Tukey test and was observed reduction in the number of erythrocytes and hemoglobin associated with increase of mean corpuscular volume, suggesting slight macrocytic anemia. Kinetic evaluation of cell accumulation on glass cover slip, the highest number of isolated macrophages occurred at seven days after implantation in all groups, associated with increased formation of policariontes cells regardless of the number of cores. The dexamethasone... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Marco Antonio de Andrade Belo / Banca: Claudinei da Cruz / Banca: Eduardo Makoto Onaka / Resumo: Na avaliação da participação da insulina e dos efeitos da dexametasona sobre a resposta de tilápias do Nilo, Oreochromis niloticus, durante aerocistite induzida por Aeromonas hydrophila, foram utilizadas 189 tilápias com peso médio 532g (± 74g), constituindo nove tratamentos: Não tratado e Não inoculado (controle); Não tratado e inoculado; Tratado com insulina (INS) e inoculado; Tratado com INS + Aloxano (ALOX) e inoculado; Tratado com insulina (INS)+ dexametasona (DEXA) e inoculado; Tratado com ALOX e inoculado; Tratado com ALOX + DEXA e inoculado; Tratado DEXA e inoculado; Tratados com INS + ALOX + DEXA e inoculado. Após, seis, 24 e 48 horas após inóculo (HPI), as tilápias foram submetidas à anestesia profunda para colheita de sangue para determinação do hemograma completo e bioquímico sérico, assim como, obtenção de exsudato. Da mesma forma, foram realizados estudos dos índices somáticos hepáticos, esplênicos e renais, além do histopatológico destes mesmos órgãos. Contudo, as avaliações na aerocistite infecciosa revelaram o predomínio de neutrófilos no local inflamado, sendo esta alteração mais significativa 24 HPI, apresentando um padrão de inflamação aguda fibrinossupurativa na histopatologia. A neutrofilia apresentou correspondência com as alterações renais na porção cranial, sendo este resultado fortemente influenciado pela tratamento com insulina. O tratamento com dexametasona suprimiu a resposta imune inata das tilápias, resultando em linfopenia e monocitopenia, seguida pela ausência de macrófagos no exsudato durante a evolução da reação inflamatória infecciosa. Hiperglicemia e hipercolesterolemia em tilápias tratadas com dexametasona confirmaram o efeito glicocorticoide sobre o metabolismo intermediário dos peixes. A administração de aloxano resultou em alterações clínico-patológicos no globo ocular, tecido hepático e tecido ... / Abstract: For assessing the contribution of insulin and the dexamethasone effects on the response of Nile tilapia, Oreochromis niloticus, during Aeromonas hydrophila induced aerocistite, were used 189 tilapia mean weight 532g (± 74g) distributed in nine treatments: Untreated and not inoculated (control); Untreated and inoculated; Treated with insulin (INS) and inoculated; Treated with INS + alloxan (ALOX) and inoculated; Treated with insulin (INS) + dexamethasone (DEXA) and inoculated; Inoculated and treated with ALOX; Treated with ALOX + DEXA and inoculated; DEXA Treated and inoculated; Treated with INS + ALOX + DEXA and inoculated. After six, 24 and 48 hours post inoculation (HPI), tilapia were subjected to deep anesthesia for blood samples collection to determinate of complete blood count and serum biochemistry, as well as for obtaining exudate. Studies of liver, spleen and kidney somatic index were performed, and histopathology study was realized with the same organs. However, the infectious aerocistite revealed a predominance of neutrophils in the inflamed site, which was most significant at 24 HPI, with a pattern of fibrinossuppurative exudate, showing correspondence with renal changes in the cranial portion, principally in fish treated with insulin. The immunosuppressive effect of dexamethasone resulted in lymphopenia and monocytopenia, followed by the absence of macrophages in the exudate during the evolution of infectious inflammatory reaction. Hyperglycemia and hypercholesterolemia in dexamethasone treated tilapia confirmed the glucocorticoid effect on the intermediary metabolism. The administration of alloxan resulted in clinical and pathological changes in eyeball, liver tissue, skeletal muscle tissue, accompanied by increase in the amounts of glucose, triglycerides, cholesterol and serum alkaline phosphatase. The histopathology of cutaneous tissue and skeletal muscle in ... / Mestre

Orientador: Marco Antonio de Andrade Belo / Banca: Claudinei da Cruz / Banca: Eduardo Makoto Onaka / Resumo: Este estudo objetivou avaliar a participação hepática e efeito glicocorticoide sobre a resposta inflamatória em tilápias do Nilo desafiadas com Aeromonas hydrophila, submetidas ou não a hepatotoxicidade induzida pelo CCl4. Para a realização desta investigação, 130 tilápias do Nilo (Oreochromis niloticus), com peso médio de 150g, oriundos da mesma desova, foram distribuídas aleatoriamente em 13 tanques com capacidade de 2500L de água cada, constituindo quatro tratamentos: NN = sem CCl4 e sem glicocorticoide; CN = com CCl4 e sem glicocorticoide; NG = sem CCl4 e com glicocorticoide; CG = com CCl4 e com glicocorticoide. Um 13° tanque foi composto de peixes não submetidos a nenhum tipo de manipulação para constituir os valores de referência para o estudo (PF). Para todos os grupos foram amostrados 10 animais. A administração do CCl4 foi realizada na cavidade celomática em dose única de 0,5 mL.Kg-1 de p.v. nos grupos CN e CG, enquanto a dexametasona foi administrada via IM na região dorso-lateral esquerda na concentração de 0,2% na dose de 2mg Kg-1 de p.v. nos tratamentos NG e CG. Ambas as administrações foram realizadas no momento de inoculação da cepa de A. hidrophila. Em 6, 24 e 48 HPI (horas pós inoculação), foram colhidos: o exsudato inflamatório para quantificação e avaliação das células inflamatórias; amostras de sangue para avaliação hematológica e bioquimica; feito avaliação somática e histologica do fígado e baço. Como resultado destacamos transtorno hepático gerado pelo CCl4. Este acarretou diversas alterações no mecanismo da resposta inflamatória em tilápias do Nilo como diminuição da síntese de proteínas e formação de degeneração gordurosa hepática, bem com alteração do metabolismo energético apresentando muitas vezes efeito sinérgico quando associado ao efeito imunossupressor da dexametasona, sugerindo a ocorrência de ... / Abstract: This study evaluated the hepatic participation and the glucocorticoid effect on the inflammatory response in Nile tilapia challenged with Aeromonas hydrophila , submitted or not to by CCl4. Conducting this research, 130 Nile tilapia (Oreochromis niloticus ) hepatotoxicity with average weight 150g, from the same spawning , were randomly distributed into 13 tanks with a capacity of 2500L of water each , in four treatments: NN = no CCl4 and without glucocorticoids, CN = with CCl4 and without glucocorticoids , NG = no CCl4 and glucocorticoid, CG = with CCl4 and glucocorticoids. A 13 ° tank was composed of fish not subjected to any manipulation to provide reference values for the study (PF). For all groups 10 animals were sampled. The administration of CCl4 was performed on coelomic cavity in a single dose of 0.5 mL. kg -1 and the CG CN groups, while dexamethasone was administered intramuscularly in the left dorso lateral region in the concentration of 0.2% at a dose of 2mg Kg-1 bw in NG and CG treatments. Both administrations were performed at the time of inoculation strain of A. hidrophila. In 6, 24 and 48 HPI (hours post inoculation) were harvested: the inflammatory exudate for quantification and evaluation of inflammatory cells, blood samples for hematological and biochemical evaluation; made somatic and histological assessment of the liver and spleen was made. As a result include liver disorder generated by CCl4. This led to several harmful changes in the mechanism of the inflammatory response in Nile tilapia as decreased protein synthesis and the formation of fatty liver degeneration, and with altered energy metabolism often presenting synergistic effect when combined with the immunosuppressive effect of dexamethasone, suggesting the occurrence of decreased production of coagulation factors, chemical mediators of inflammation and inhibition of cell membrane receptors / Mestre

Orientador: Eloi Dezan Junior / Banca: Francine Benetti / Banca: Renato de Toledo Leonardi / Resumo: Além da atividade antimicrobiana e biocompatibilidade de um curativo de demora, é oportuno que ele tenha também a capacidade de estimular a biomineralização e reparo dos tecidos periapicais. O objetivo deste estudo foi avaliar a resposta inflamatória, a capacidade de induzir biomineralização e reparo tecidual em tecido subcutâneo de ratos, causada pelas pastas de iodofórmio e hidróxido de cálcio. Foram utilizados 18 ratos Wistar albinos (n=6), que receberam implantes subcutâneos de tubos de polietileno com os seguintes materiais: hidróxido de cálcio + propilenoglicol (1:1) [Ca(OH)2+P], hidróxido de cálcio + propilenoglicol + iodofórmio (2:1:1) [Ca(OH)2+P+Iodo], iodofórmio + Carbowax (5:1) [Iodo+Carbow] and Carbowax [Carbow]. Tubos vazios extras foram utilizados como grupo controle. Após 7, 15 e 30 dias, os implantes foram removidos conjuntamente com tecido circundante. Foram utilizadas as colorações de hematoxilina-eosina (HE), Von Kossa (VK), técnica de luz polarizada (LP) e Picrosirius red (PSR). Para HE foram utilizados os scores de 0, poucas células inflamatórias; 1, menos de 25 células inflamatórias - reação leve; 2, entre 25 e 125 células inflamatórias - reação moderada; e 3, 125 ou mais células inflamatórias - reação severa (400x). A cápsula fibrosa foi considerada fina quando menor que 150 μm e espessa quando maior que 150 μm. A capacidade de mineralização foi analisada como positivo ou negativo com VK e como presente ou ausente sob LP. Para PSR as fibras imaturas apa... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The antimicrobial activity and biocompatibility of a root canal dressing are important requirement, but it is also interesting that it has the ability of stimulate biomineralization and repair of the periapical tissues. The objective of this study was to evaluate the inflammatory response, biomineralization and tissue repair induction in subcutaneous tissue of rats caused by iodoform and calcium hydroxide. Eighteen Wistar rats (n=6) received subcutaneous implants with iodoform and calcium hydroxide pastes. Extra empty tubes were used as control group. After 7, 15 and 30 days, the implants were removed with surrounding tissue. Kruskal-Wallis test was used with a significance level of 5%. At 7 days, all groups excluding carbowax, showed moderate inflammatory reaction and thick fibrous capsule. At 15 days, all groups excluding control decrease their fibrous capsule thickness. At 30 days all groups presented mild reaction and fine fibrous capsule. Only the groups containing calcium hydroxide presented mineralized tissue in all periods analyzed. At 7 days all groups showed a higher proportion of immature fibers. At 15 days, only [Ca(OH)2 + P] and [Carbow] groups increased their proportion of mature / immature fibers. At 30 days, the [Ca(OH)2 + P] group was the only that presented prevalence of mature collagen fibers, with significant difference (p <0.05). The null hypothesis was partially rejected. All groups showed biocompatibility. Only the groups containing Ca(OH)2 induced the ... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Eloi Dezan Junior / Banca: Luciano Tavares Angelo Cintra / Banca: Maria Angélica Marciano da Silva / Banca: Juliane Maria Guerreiro Tanomaru / Banca: Francine Benetti / Resumo: Introdução: O tratamento endodôntico visa manter ou restabelecer a saúde do periodonto através do preparo biomecânico, utilizando instrumentos de níquel- titânio automatizados e associados com insertos ultrassônicos para potencializar a ação dos irrigantes. Os materiais empregados na endodontia que permanecerão em contato com tecidos devem apresentar biocompatibilidade e preferencialmente ser biomineralizador, a fim de selar comunicações (fisiológicas/iatrogênicas), isolando o sistema de canais radiculares. Objetivos: 1- Avaliar a resistência à fadiga cíclica das limas reciprocantes Genius e EdgeFile X1 Small, comparados à lima WaveOne Gold Primary; 2- Avaliar a capacidade de limpeza de um inserto ultrassônico de níquel titânio em ativação da irrigação de forma contínua e passiva; 3- Avaliar a biocompatiblidade e biomineralização do cimento reparador MTA Flow. Material e Métodos: Para avaliar a resistência à fadiga cíclica dos sistemas Genius, EdgeFile e WaveOne Gold, 80 instrumentos foram utilizados (n=20), divididos em 4 grupos experimentais: Genius 25.04, Genius 30.04; EdgeFile X1 Small e Wave One Gold Primary, acionados em um canal artificial de aço inoxidável com ângulo de curvatura de 60º e raio de curvatura de 5 mm. O tempo decorrido da ativação do motor foi gravado em um cronômetro digital e parado assim que a fratura foi detectada. O número de ciclos até a falha (NCF) e o tempo para fratura (TF) foram calculados e os comprime... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Introduction: The endodontic treatment aims to maintain or restore periodontal health through biomechanical instrumentation with nickel-titanium automatized instruments, associated with an ultrasonic tip to activate the irrigant, enhancing cleanness. Materials used in endodontics that will remain in contact with tissues, should demonstrate properties as biocompatibility and biomineralization ability, in order to seal communications (physiological/iatrogenic) isolating the root canal system. Objectives: 1- Evaluate the cyclic fatigue resistance of reciprocating Genius and EdgeFile X1 Small instruments compared to Waveone Gold Primary instruments; 2- Evaluate the cleaning effectiveness of a nickel-titanium ultrasonic tip in continuous and passive irrigant activation; 3-Evaluate the biocompatibility and biomineralization of MTA Flow repair cement. Materials and Methods: To evaluate the cyclic fatigue resistance of Genius, EdgeFile and WaveOne Gold, 80 instruments were used (n = 20), divided into 4 experimental groups: Genius 25.04, Genius 30.04; EdgeFile X1 Small and Wave One Gold Primary, reciprocating in a stainless steel artificial canal with a 60° angle of curvature and 5mm radius of curvature. The elapsed time of the motor activation was recorded in a digital timer and stopped as soon as the fracture was detected. The number of cycles to fracture (NCF) and time to fracture (TF) were calculated and the fractured segments lengths measured. To evaluate the ultrasonic tip clean... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Made available in DSpace on 2014-08-13T14:50:45Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-06-21Bitstream added on 2014-08-13T18:00:45Z : No. of bitstreams: 1 000754075.pdf: 1053902 bytes, checksum: bc9c8bcad96f2ac9a99f7275a15b0258 (MD5) / O vírus da peritonite infecciosa felina (FIPV) causa uma doença fatal, sistêmica e imunomediada. O FIPV contem mutações do coronavírus entérico felino (FECoV) e o diagnóstico antemortem da PIF é desafiador pois a maioria dos gatos são positivos para FCoV nos testes sorológicos e de amplificação de DNA. A diferenciação entre a infecção pelo FIPV e pelo FECoV é difícil, sendo conclusivo post-mortem pelo exame histopatológico. A RT-PCR para detecção do RNAm de coronavírus felino em sangue periférico é um teste diagnóstico que evidencia a infecção e replicação do vírus. Entretanto, esses ensaios não conseguem distinguir entre cepas produtoras de PIF e do FECoV. Na patogenia da infecção, as células imunes infectadas induzem uma produção exacerbada de citocinas. Assim, nosso objetivo foi o de verificar se gatos com PIF expressam RNAM codificante de citocinas de forma alterada quando comparadas com animais saudáveis. Para tanto, amostras de sangue de 44 gatos provenientes de gatis de SP e RJ foram coletadas em 4 momentos, num intervalo de 4 meses. A partir do RNA total extraído, foi realizada a RT-qPCR para RNAm codificante de citocinas felinas (IL-1, IL-2, IL-6, IL-10, IL-12, TNF-α, IFN-γ) normalizadas pelo GAPDH. Observou-se que, para as citocinas IL-1, IL-2, IL-6 e IL-10, foram obtidos resultados elevados na maioria dos animais. Entretanto, IL-12, TNF-α e IFN-γ estavam aumentadas em apenas alguns grupos, que pode estar associado à infecção por FIPV. Os animais que apresentaram valores elevados para essas citocinas, tinham sinais clínicos compatíveis com a doença e contato com animais que desenvolveram a PIF / The feline infectious peritonitis virus (FIPV) causes a fatal disease, and systemic immune mediated. The FIPV contains mutations of feline enteric coronavirus (FECoV) and antemortem diagnosis of FIP is challenging because most cats are positive for FCoV in serological and DNA amplification. The differentiation between infection the FIPV and FECoV is hard being conclusive post-mortem by histopathological examination. RT-PCR for detection of feline coronavirus mRNA in peripheral blood is a diagnostic test which shows the infection and replication of the virus. However, these tests can’t distinguish between strains producing FIP and FECoV. In the pathogenesis of infection, the infected cells induce an immune exacerbated production of cytokines. Thus, our goal was to determine whether cats with FIP express mRNA encoding cytokines altered form compared to healthy animals. Therefore, blood samples from 44 cats from catteries of SP and RJ were collected at 4 times within 4 months. From the total RNA, we performed RT-qPCR mRNA coding for feline cytokine (IL-1, IL-2, IL-6, IL-10, IL-12, TNF-α, IFN-γ) normalized by GAPDH. It was observed that, for the cytokines IL-1, IL-2, IL-6 and IL-10 high scores were obtained in most animals. However, IL-12, TNF-α and IFN-γ were increased only in some groups, which may be associated with FIPV infection. The animals with high values for these cytokines had clinical signs consistent with the disease and contact with animals that developed FIP

Made available in DSpace on 2014-08-13T14:50:46Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-03-01Bitstream added on 2014-08-13T18:00:38Z : No. of bitstreams: 1 000756932.pdf: 2220257 bytes, checksum: 71686b549cbb892ac84fae4fd5db5bf3 (MD5) / As células inflamatórias estão presentes no câncer de mama e podem promover o desenvolvimento do tumor assim como estimular imunidade anti-tumoral. A Nacetilglucosaminidase (NAG) é utilizada para detectar o acúmulo/ativação de macrófagos teciduais. A mieloperoxidase (MPO) é considerada marcador de acúmulo/ativação de neutrófilos. O Fator de Crescimento Endotelial Vascular (VEGF) é potente citocina pró-angiogênica. O objetivo deste estudo foi medir a resposta inflamatória sistêmica, medindo os níveis séricos de MPO, NAG, e VEGF em mulheres diagnosticadas com câncer de mama e associar esta resposta ao infiltrado inflamatório peritumoral e a fatores prognósticos. As amostras de soro obtidas de mulheres sem evidências de doenças (n=31) e com câncer de mama (n=68) foram analisadas por meio de ensaio enzimático para obter-se a atividade de MPO, NAG, e VEGF. Os níveis séricos de NAG e VEGF foram maiores em voluntários saudáveis (p<0,0001) e os níveis séricos de MPO foram maiores em pacientes com câncer de mama (p=0,002). Os níveis séricos de NAG apresentaram correlação positiva com os níveis séricos de MPO e VEGF (p<0,0001 e p=0,0012, respectivamente), assim como os níveis de MPO e VEGF (p=0,0018). O infiltrado inflamatório não foi associado aos níveis séricos dos marcadores inflamatórios, e níveis mais elevados de MPO foram associados à negatividade para invasão linfovascular (p=0,0175)