Orientador: José Roberto Bosqueiro / Banca: José Maurício Sforcin / Banca: Silvana Bordin / Resumo: A manutenção da homeostase energética é, sem duvida, o aspecto fisiológico mais importante para a garantia de sobrevivência animal. Doenças crônicas como câncer são capazes de alterar esta homeostase, agravada principalmente pela presença do tumor. O conjunto de sintomas envolvidos neste quadro de desequilíbrio metabólico, comum a diversas doenças, foi agrupado e caracterizado como uma síndrome metabólica denominada caquexia que, entre outros fatores, leva à progressiva perda de peso, perda de tecido muscular e adiposo, e está frequentemente associado a sintomas de anorexia e inflamação sistêmica. Na caquexia induzida por câncer, o desequilíbrio no metabolismo de carboidratos é um sintoma frequente, especialmente alterações no perfil secretório de insulina. Da mesma forma, a presença tumoral gera um estado de inflamação sistêmica que há algum tempo tem sido apontada como principal responsável pela alteração funcional de diversos órgãos, acarretando na progressão da síndrome. No entanto, não há trabalhos na literatura que correlacionem o papel da inflamação sistêmica gerada pelo desenvolvimento tumoral com a alteração no metabolismo de carboidratos, principalmente aquelas relacionadas à secreção de insulina. Em resultados anteriores evidenciamos que camundongos portadores do tumor sólido de Ehrlich (TSE) exibiram drástica diminuição na capacidade secretória de insulina, hipoinsulinemia, maiores sensibilidade a este hormônio e tolerância à glicose. Deste trabalho, inúmeras possibilidades de estudo surgiram, dentre elas a investigação do quadro inflamatório na ilhota como possível causador das alterações na secreção de insulina. Diante da escassez de trabalhos nesta área e diante da importância da adequada secreção de insulina e da homeostase glicêmica na melhora da sobrevida de portadores de doenças malignas, foi proposta do presente estudo avaliar ... / Abstract: The maintenance of energy homeostasis is one of the most crucial physiological tasks to ensure long-term survival in animals. Chronic diseases, as cancer, are capable to lead to homeostasis imbalance mainly by tumor presence and the cluster of symptoms involved in this process was named cachexia. Cancer cachexia is a metabolic syndrome characterized by a marked weight loss, loss of muscle and adipose tissues and is frequently associated with anorexia and systemic inflammation. Alterations in carbohydrate metabolism are frequent in cancer cachexia, especially insulinemic alterations. In the same way, tumor presence promotes severe systemic inflammation in the host, and it was demonstrated that this is responsible for functional alterations in many organs leading to cachexia progression. However, there are no studies that correlate the role of systemic inflammation with the alterations in carbohydrate metabolism, mainly related with alterations in insulin secretion. In previous studies we demonstrated that solid Ehrlich carcinoma-bearing mice (SET) showed drastic decrease in insulin secretion, hipoinsulinemia, increase in insulin sensitivity and glucose tolerance. With these results, numerous opportunities for study appeared, among then the establishment of inflammatory response in islets. Considering the lack of studies in this area and considering the importance of proper insulin secretion and glicemic homeostasis to the survival of cancer patients, we evaluated inflammatory response components in pancreatic islets of solid Ehrlich tumor-bearing mice in order to seek consistent information about possible mechanisms involved in alterations in insulin secretion in SET group. For this, pancreatic islets of control (CTL) and SET bearing mice were analyzed 14 days after tumor inoculation for determination of the expression of the proinflammatory citokynes TNF-α, IL-1β, IFNγ, IFN-α, IL-6 e IL-8, and ... / Mestre

Made available in DSpace on 2013-08-07T18:41:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000431346-Texto+Completo-0.pdf: 1084858 bytes, checksum: bfb1c0acb189347c0999c9608ad1773c (MD5) Previous issue date: 2011 / Introduction: Acetaminophen (APAP) is a potent antipyretic and analgesic agent, with weak anti-inflammatory effects. Despite its efficacy, the use of elevated doses of APAP is associated with severe hepatotoxicity. It has been suggested that treatment with angiotensin-converting enzyme (ACE) inhibitors, such as captopril, might present protective effects in the acute intoxication evoked by APAP, although further studies are still required to prove this hypothesis. In this context, the present study investigated the effects of both prophylactic and therapeutic treatment with the highly potent ACE inhibitor enalapril, on the hepatotoxicity induced by APAP in mice. Methods: Male and Female C57BL/6 mice (6-10 per group, 20-25 g) were used. All the experimental protocols were approved by the Local Ethics Committee (09/00119 - PUCRS). For the prophylactic treatment, animals were pretreated orally with enalapril (30 mg/kg), once a day, during 4 days before APAP administration. On the fifth day, the hepatotoxicity was induced by a single dose of APAP (400 mg/kg, i. p. ). The animals received two additional doses of enalapril 1 h before, and 6 h after APAP administration. Mice were euthanized 24 h after APAP injection. The following parameters were assessed: macroscopic and histological alterations of livers, serum levels of alanine transaminase (ALT) and aspartate transaminase (AST), determination of catalase activity (CAT) and reduced glutathione concentration (GSH), measurement of neutrophil migration (MPO) and TNFα production in liver slices, and immunohistochemistry analisys of caspase-3 liver expression. The effects of enalapril were also assessed on the same parameters of hepatotoxicity in a therapeutic protocol, in which the animals received APAP (400 mg/kg i. p. ), and enalapril (30 mg/kg) was dosed orally 3 h after administration of APAP. 16 Subsequently, mice received three additional doses of enalapril, at intervals of 3 h each. N-acetylcysteine (NAC; 50 mg/kg) was used as a positive control drug, at the same schedules of treatment. Results: The oral administration of enalapril produced a significant reduction of hepatotoxicity induced by APAP, according to the macroscopic evaluation of livers (71 ± 10%).The histological analysis revealed that samples obtained from APAP control animals presented necrosis in three to four layers of hepatocytes, accompanied by layers of centrilobular degeneration, while those pretreated with enalapril showed minimal necrosis, or no changes. The pre-treatment with enalapril also reduced the immunostaining for caspase-3, indicating an interference with liver cells apoptosis. The treatment with enalapril also displayed a marked inhibition of liver CAT and GSH (72 ± 11 % and 90 ± 11 %, respectively). Additionally, the animals pre-treated with enalapril showed a marked reduction of AST and ALT serum levels. The inhibitions observed were 86 ± 14 % and 88 ± 9 %, respectively. Furthermore, treatment with enalapril also caused a reduction of MPO activity (82 ± 13 %), whereas the production of TNF was not significantly affected. A similar reduction of all parameters of hepatotoxicity was observed with the therapeutic regimen of administration. The macroscopic evaluation demonstrated that enalapril was capable of significantly reducing the hepatotoxicity induced by APAP, as observed for the positive control drug NAC (79 ± 12 % and 80 ± 20 %, respectively). Concerning the histological analysis, the therapeutic administration of enalapril displayed comparable effects, as seen for the prophylactic schedule of treatment. The post-treatment with enalapril and NAC also diminished caspase-3 immunopositivity. Liver GSH concentrations were reduced in 86 ± 15 % and 92 ± 22 %, correspondingly, for enalapril and NAC treatments. However, both drugs failed to significantly alter liver CAT activity. The therapeutic regimen also produced a marked decrease of either AST (77 ± 5 % e 76 ± 7 %) or ALT (94 ± 3 % e 99 ± 8 %) levels, for enalapril and NAC, respectively. This scheme of treatment also resulted in a significant reduction of MPO activity, with inhibition percentages of 96 ± 6 % and 98 ± 9 %, for enalapril and NAC, whereas the production of TNFα was not significantly affected. Discussion: The present results indicate that prophylactic administration of enalapril was able to prevent the hepatotoxicity caused by APAP. Moreover, the therapeutic administration of this drug was also able to reverse the liver toxicity caused by APAP. Thus, it is possible to suggest that patients under treatment with this ACE inhibitor are less susceptible to the effects of APAP. Additionally, enalapril might well represent an innovative tool for treating APAP-induced intoxication. / Introdução: O acetaminofeno (APAP) é um potente agente analgésico e antipirético, com fraco efeito anti-inflamatório. Apesar de sua eficácia, a utilização de doses elevadas de APAP está associada à severa hepatotoxicidade. Tem sido sugerido que o tratamento com inibidores da enzima conversora de angiotensina (ECA), como o captopril, poderia apresentar efeitos protetores na intoxicação aguda induzida por APAP, embora não existam evidências suficientes para comprovar este efeito. Neste contexto, o presente estudo investigou os efeitos do tratamento com um potente inibidor da ECA, o enalapril, sobre a hepatotoxicidade induzida por APAP em camundongos.Métodos: Camundongos machos e fêmeos C57BL/6 (6-10 por grupo, 20-25 g) foram utilizados. Todos os protocolos experimentais foram aprovados pelo Comitê de Ética para o Uso de Animais (09/00119 – PUCRS). Para o tratamento profilático, os animais foram pré-tratados oralmente com enalapril (30 mg/kg), uma vez por dia, durante 4 dias antes da administração de APAP. No quinto dia, a hepatotoxicidade foi induzida por uma dose única de APAP (400 mg/kg, i. p. ). Os animais receberam duas doses adicionais de enalapril 1 h antes, e 6 h após a administração de APAP. Os camundongos foram submetidos à eutanásia 24 h após a injeção de APAP. Os parâmetros avaliados foram: alterações macroscópicas e histológicas dos fígados, níveis séricos de alanina transaminase (ALT) e aspartato transaminase (AST), atividade da catalase (CAT) e concentração de glutationa reduzida (GSH), migração de neutrófilos (MPO) e produção de TNFα em fatias de fígado e, expressão de caspase-3, por imunoistoquímica. Os efeitos do enalapril também foram avaliados sobre estes mesmos parâmetros, em um protocolo terapêutico, em que os animais receberam APAP (400 mg/kg, i. p. ) e o enalapril (30mg/kg) foi administrado 3 h após. Posteriormente, os camundongos receberam mais três aplicações de enalapril com intervalos de 3 h cada. A N-acetilcisteína (NAC; 50 mg/kg) foi utilizada como controle positivo, nos mesmos intervalos de tempo. Resultados: A administração profilática oral de enalapril produziu uma redução significativa da hepatotoxicidade induzida por APAP, de acordo com a avaliação macroscópica dos fígados (71 ± 10 %).A avaliação histológica revelou que as amostras obtidas de animais controle APAP apresentaram necrose em três a quatro camadas de hepatócitos, acompanhada por camadas de degeneração centrolobular, enquanto que os animais pré-tratados com enalapril mostraram mínima necrose ou nenhuma mudança. Ademais, o pré-tratamento com enalapril reduziu visivelmente a expressão de caspase-3, indicando interferência com apoptose de células hepáticas. O enalapril também produziu uma inibição acentuada das enzimas CAT e GSH no fígado (72 ± 11 % e 90 ± 11 %, respectivamente). Além disso, os animais pré-tratados com enalapril apresentaram uma redução acentuada dos níveis séricos AST e ALT. As inibições observadas foram 86 ± 14 % e, 88 ± 9 %, respectivamente. Ademais, o tratamento com enalapril também causou uma redução da atividade da MPO (82 ± 13 %), embora não tenha alterado a produção de TNF. Uma redução similar de todos os parâmetros de hepatoxicidade também foi observada com o esquema terapêutico de administração do enalapril. De acordo com a avaliação macroscópica, o enalapril reduziu significativamente a hepatoxicidade causada por APAP, de forma semelhante ao controle positivo, NAC (79 ± 12 % e 80 ± 20 %, respectivamente). Em relação à avaliação histológica, os resultados foram similares ao tratamento profilático. O pós-tratamento com enalapril ou NAC também reduziu a expressão de caspase-3. Para a GSH hepática, foram observadas inibições de 86 ± 15 % e 92 ± 22 %, respectivamente, para os tratamentos com enalapril e NAC. No 13 entanto, para a enzima CAT, não houve alteração significativa com ambos os tratamentos. O esquema terapêutico também produziu uma redução marcante dos níveis séricos de AST (77 ± 5 % e 76 ± 7 %) e ALT (94 ± 3 % e 99 ± 8 %), para enalapril e NAC, respectivamente.A administração terapêutica de enalapril ou NAC também causou uma redução significativa da atividade de MPO, com percentagens de inibição de 96 ± 6 % e, 98 ± 9 %, respectivamente, embora não tenha alterado a produção de TNFα.Discussão: Os resultados do presente estudo indicam que a administração profilática de enalapril foi capaz de prevenir a hepatoxicidade causada por APAP. Além disto, a utilização de um esquema terapêutico com este inibidor também foi capaz de prevenir a toxicidade hepática causada por APAP, em níveis comparáveis aos observados com o fármaco de referência NAC. Assim, é possível sugerir que pacientes sob tratamento com este inibidor são menos suscetíveis aos efeitos do APAP.

Made available in DSpace on 2013-08-07T18:42:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000449080-Texto+Completo-0.pdf: 1184660 bytes, checksum: f918d3fc3af9f13cf34642a6c280de6f (MD5) Previous issue date: 2013 / The rheumatoid arthritis (RA) is an autoimmune disease, besides the physical damage, the RA has been associated with premature aging of the immune system (immunosenescence) and age-related morbidities, including a decline in cognitive functioning. Factors such as chronic inflammation and the use of glucocorticoids (GCs) for a long time, both related to RA, are potential mechanisms involved in cognitive dysfunction in the general population. Experimental studies have shown the beneficial contribution of immune cells on the central nervous system (CNS). Moreover, disorders, such as mild cognitive impairment and Alzheimer’s disease, exhibit alterations in peripheral lymphocytes subtypes. Based on this, here we explore the relationship between cognitive function, disease activity score (DAS-28) and lymphocytes subsets in RA. Thirty patients with RA and 19 healthy controls, which did not differ significantly in sex, age and schooling were recruited in this study. Cognitive function (MMSE, logic and working memory), stress and depression were assessment through interviews where specific clinical questionnaires were applied. Lymphocytes were isolated from mononuclear cells of peripheral blood (PBMCs) and immuphenotyped by flow cytometry to investigate the following lymphocytes subsets: B cells, activated T cells, naïve/memory T cells, regulatory FoxP3+ T cells, IL-17+ cells, natural killer (NK) cells, and senescence-associated CD28- T cells. RA patients had a lower cognitive performance on the MMSE, logical and working memory compared to healthy controls. Though, all individuals in both groups had a score higher than the cutoff point established by the MMSE. The time use of GC and the C-reactive protein (CRP) levels did not correlated with cognitive assessment. Patients had an increased proportions of regulatory T cells, naïve CD4+ T cells and senesce-associated T cells (CD28-), but lowered percentages of B and memory CD8+ T cells compared to healthy controls. Early activated T cells (CD3+CD69+) and CD8+CD28- T cells were found negatively associated with cognition. Concluding, patients with RA have a lower cognitive performance compared to healthy controls. GC and CRP were not correlated with memory; however expansions of activated and senescence-associated T cells were correlated with poor memory performance. / A artrite reumatoide (AR) é uma doença autoimune, que além da presença de danos físicos, tem sido associada com o envelhecimento prematuro do sistema imune (imunossenescência) e morbidades relacionadas à idade, incluindo declínio no funcionamento cognitivo. Fatores como a inflamação crônica e o uso de glicocorticoides (GCs), ambos relacionados a AR, são potenciais mecanismos envolvidos com a disfunção cognitiva na população geral. Estudos experimentais tem revelado a contribuição benéfica das células imunológicas sobre o sistema nervoso central (SNC). Além disto, patologias como o dano cognitivo leve e doença de Alzheimer apresentam alterações nos subtipos linfocitários periféricos. Com base nisto, neste trabalho nos exploramos as relações entre função cognitiva, score de atividade da doença (DAS-28), e subtipos linfocitários na AR. Trinta pacientes com AR e dezenove controles saudáveis, que não diferiram significativamente em relação a sexo, idade e escolaridade, foram recrutados neste estudo. A função cognitiva (mini-exame do estado mental - MMSE, memória lógica e memória de trabalho), estresse e depressão foram avaliados através de entrevistas onde foram aplicados questionários clínicos específicos. Os linfócitos foram isolados das células mononucleares do sangue periférico (PBMCs), e imunofenotipados por citometria de fluxo para investigar a presença dos seguintes subgrupos: células B, células T ativadas, células T naive/memória, células T regulatória (reg) CD4+FoxP3+, células IL-17+, células natural killer (NK), e células T CD28- associadas a senescência. Os pacientes com AR tiveram um desempenho cognitivo inferior no MMSE, memória lógica e memória de trabalho se comparado a controles saudáveis. Embora todos os indivíduos, de ambos os grupos, tiveram uma pontuação superior à estabelecida pelo cutoff do MMSE. O tempo de uso de GCs e os níveis de proteína C - reativa (PCR) não se correlacionaram com avaliação cognitiva. Os pacientes tem aumento nas proporções de células Treg, células T CD4+ naive e células T associadas a senescência (CD28), mas baixas porcentagens de células B e células T CD8+ de memória do que controles saudáveis. Células T recém ativadas e células T CD8+CD28- foram negativamente associadas com a cognição. Concluindo, pacientes com AR tem um desempenho cognitivo inferior se comparado a controles saudáveis. GCs e PCR não se correlacionaram com memória, no entanto, expansão da população de células T ativadas e células T associadas à senescência foram correlacionadas com performance de memória.

Made available in DSpace on 2013-08-07T18:42:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000449724-Texto+Completo-0.pdf: 6148140 bytes, checksum: 12da4cf8a6d912387d56ee8f32c58f7b (MD5) Previous issue date: 2013 / The irritant contact dermatitis (ICD) is a non-allergic inflammatory reaction of the skin that occurs independently of the T cells participation. ICD is caused by exposure to low molecular weight chemicals and it is initiated by damage or activation of epidermal cells which trigger the activation of the innate immune system. The purine nucleotide adenosine triphosphate (ATP) is the universal energy molecule and appears as is an important extracellular messenger. In healthy tissues, ATP is almost exclusively localized intracellularly, whereas in pathological conditions as inflammation, the tissue injury leads to the release of large amounts of ATP to the extracellular medium. In the extracellular medium, ATP can be hydrolyzed by nucleotidases to their breakdown products ADP and AMP. These nucleotidases control the availability of nucleotides for purinergic receptors. Currently, experimental observations indicate that extracellular ATP acting via purinergic receptors plays a relevant role on skin inflammation. Several models in vitro and in vivo had been used to study the mechanisms of ICD. However, this pathology is still poor understood. This study aimed to evaluate the involvement of the purinergic receptor P2X7 in ICD using in vivo and in vitro approaches. The croton oil (CrO) is a chemical irritant that has been shown to exert its effects independent of inflammatory T cells, therefore we used the mice model of irritant contact dermatitis induced by CrO to investigate the involvement of P2X7 receptor in the immunes mechanisms of ICD. We use several pharmacological approaches, in vitro and in vivo tests and mice with gene deletion to P2X7 receptor and showed evidences that the P2X7 receptor activation by ATP in macrophages and dendritic cells (DCs) is connected with neutrophil recruitment induced by CrO. Furthermore, we demonstrated that CrO decreased the hydrolysis of ATP and ADP in the serum of mice and caused necrosis of keratinocytes in culture, both effects related to activation of P2X7. Taken together, the data obtained in this study suggested that CrO exerts its toxic effects by promoting keratinocytes necrosis and decreasing the activity of ectonucleotidades leading to an increase of ATP extracellular levels. Then, extracellular ATP promotes the P2X7 receptor activation in DCs and macrophages causing the release of IL-1β, which is partially responsible for the neutrophils recruitment observed in irritant contact dermatitis induced by croton oil. Noteworthy, the treatment with the selective P2X7 receptor antagonist A438079 decreased the edema and others proinflammatory effects induced by croton oil, pointing the P2X7 receptor as an important pharmacological target for the treatment of ICD. / A dermatite de contato irritante (ICD, irritant contact dermatitis) é uma reação inflamatória local não alérgica da pele que ocorre independentemente da participação de células T. É ocasionada pela exposição a substâncias químicas de baixo peso molecular e acredita-se que seja iniciada por dano ou ativação de células epidermais que desencadeiam a ativação do sistema imune inato. O nucleotídeo ATP é uma molécula energética que desempenha importantes funções como mensageiro extracelular. Em tecidos saudáveis, o ATP está localizado quase exclusivamente no meio intracelular, entretanto quando ocorre injúria tecidual, grandes quantidades de ATP são liberadas para o meio extracelular. No meio extracelular, o ATP pode ser hidrolisado por nucleotidases gerando ADP e AMP. As nucleotidases controlam a disponibilidade do ATP para os receptores purinérgicos. Muitas observações experimentais têm indicado que o ATP atuando via receptores purinérgicos desempenha um papel preponderante em processos inflamatórios na pele. Vários modelos in vitro e in vivo têm sido utilizados para o estudo da ICD, entretanto a fisiopatologia da doença ainda é pouco conhecida. Este estudo teve como objetivo avaliar o envolvimento do receptor purinérgico P2X7 (P2X7R) na ICD utilizando abordagens in vivo e in vitro.O óleo de cróton (CrO) é um irritante químico que tem mostrado exercer seus efeitos inflamatórios independente de células T, portanto nós utilizamos o modelo de dermatite de contato irritante induzida por CrO em camundongos para investigar o envolvimento do receptor P2X7 nos mecanismos imunopatológicos da ICD. Através da utilização de diversas abordagens farmacológicas in vitro e in vivo e do uso de camundongos com deleção gênica para o receptor P2X7, nós primeiramente mostramos evidências de que a ativação do P2X7R por ATP em macrófagos e células dendríticas (DCs) está relacionada com o recrutamento de neutrófilos induzido por CrO. Além disso, foi demonstrado que o CrO decresce a hidrólise de ATP e ADP no soro de camundongos e provoca a necrose de queratinócitos em cultura, ambos os efeitos foram relacionados com a ativação do receptor P2X7. Portanto, a partir dos dados obtidos neste estudo, nós sugerimos que o óleo de croton exerce seus efeitos tóxicos promovendo a morte celular de queratinócitos, diminuindo a atividade de ectonucleotidades e aumentando os níveis extracelulares de ATP. O ATP extracelular, via ativação de P2X7R em DCs e macrófagos, provoca a liberação de IL-1β que é parcialmente responsável pelo recrutamento de neutrófilos observado na dermatite de contato irritante induzida por óleo de cróton. Digno de nota, o tratamento com o antagonista seletivo do receptor P2X7, A438079, diminuiu o edema e outros efeitos pró-inflamatórios induzidos pelo óleo de cróton, apontando o receptor P2X7 como um alvo farmacológico importante para o desenvolvimento de novas terapias para o tratamento da ICD.

Submitted by Thiago Alves de Souza null (thiagobasouza@hotmail.com) on 2017-12-01T02:38:57Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_Thiago_Alves_de_Souza.pdf: 1361479 bytes, checksum: 607ce9719a0123dea1f4b2761a5e36e2 (MD5) / Submitted by Thiago Alves de Souza null (thiagobasouza@hotmail.com) on 2017-12-04T14:43:23Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_Thiago_Alves_de_Souza.pdf: 1361479 bytes, checksum: 607ce9719a0123dea1f4b2761a5e36e2 (MD5) / Submitted by Thiago Alves de Souza null (thiagobasouza@hotmail.com) on 2017-12-05T14:11:15Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_Thiago_Alves_de_Souza.pdf: 1361479 bytes, checksum: 607ce9719a0123dea1f4b2761a5e36e2 (MD5) / Submitted by Thiago Alves de Souza null (thiagobasouza@hotmail.com) on 2017-12-11T18:47:11Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_Thiago_Alves_de_Souza.pdf: 1361479 bytes, checksum: 607ce9719a0123dea1f4b2761a5e36e2 (MD5) / Approved for entry into archive by Alexandra Maria Donadon Lusser Segali null (alexmar@fcav.unesp.br) on 2017-12-13T12:06:42Z (GMT) No. of bitstreams: 1 souza_ta_me_jabo.pdf.pdf: 1361479 bytes, checksum: 607ce9719a0123dea1f4b2761a5e36e2 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-12-13T12:06:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 souza_ta_me_jabo.pdf.pdf: 1361479 bytes, checksum: 607ce9719a0123dea1f4b2761a5e36e2 (MD5) Previous issue date: 2017-10-20 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / As neoplasias mamárias constituem os tumores com maior incidência em cadelas. Dentre os fatores que contribuem para o desenvolvimento desta e de outras neoplasias, o microambiente tumoral inflamatório desempenha um papel crucial. Vários estudos relataram papéis importantes para linfócitos, macrófagos, plasmócitos, neutrófilos, eosinófilos e mastócitos neste contexto. No presente estudo, o objetivo foi avaliar a densidade de células inflamatórias e área de fibrose tumoral e sua relação com tumores mamários caninos com diferentes características histológicas e clínicas (tumor misto benigno, carcinoma em tumor misto, carcinoma sólido e carcinoma tubular). A análise de células inflamatórias e área de fibrose tumoral foram realizadas por meio de técnicas histoquímicas, enquanto a identificação de linfócitos Tregs foram realizadas por imuno-histoquímica. A análise estatística das densidades de células inflamatórias e áreas fibrose tumoral e sua relação com os tipos histológicos revelou diferença significativa para as plasmócitos (p = 0,035), neutrófilos (p = 0,0113), macrófagos (p = 0,0047) e fibrose tumoral (p = 0,05). Os dados encontrados sugerem associações entre alto número de neutrófilos e neoplasias mamárias agressivas, entre altas densidades de plasmócitos, macrófagos e células CD8+ e entre menor densidade de células CD4+ e neoplasias menos agressivas. Maiores áreas de fibrose tumoral mostraram relação com neoplasias mamárias caninas mais agressivas. / Mammary neoplasias constitute the tumors with higher incidence in bitches. Among the factors that contribute for the development of this and other neoplasias, the inflammatory tumor microenvironment plays a crucial role. Several studies reported important roles for lymphocytes, macrophages, plasma cells, neutrophils, eosinophils and mast cells in this context. In the present study, the goal was to evaluate density of inflammatory cells and area of tumor fibrosis and their relation with canine mammary tumors with different histologic and clinical presentation (benign mixed tumor, carcinoma in mixed tumor, solid carcinoma and tubular carcinoma) Counting and staining of inflammatory cells and tumor fibrosis were performed through histochemistry, while counting and staining of Tregs were performed through immunohistochemistry. Statistical analysis of the densities of inflammatory cells and tumor fibrosis related to histologic types revealed significant difference for plasma cells (p=0,035), neutrophils (p=0,0113), macrophages (p=0,0047), and tumor fibrosis (p=0,05). The found data suggest associations between high number of neutrophils and agressive mammary neoplasias, between high densities of plasma cells, macrophages and CD8+ cells and between low density of CD4+ cells and less aggressive neoplasias. Higher areas of tumor fibrosis showed relation with more aggressive canine mammary neoplasias.

Made available in DSpace on 2015-04-09T12:28:07Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-03-17Bitstream added on 2015-04-09T12:47:13Z : No. of bitstreams: 1 000814302.pdf: 1407031 bytes, checksum: 9de8d1bc0d71b1356605f4186396018e (MD5) / A relação entre a ocorrência de cólica e a manifestação da laminite tem sido estudada por inúmeros pesquisadores. Alguns trabalhos com indução experimental de laminite demonstram a participação da resposta inflamatória na origem da afecção. Devido a isso, buscou-se entender a resposta inflamatória de equinos tanto em nível sistêmico, como local, no intestino e no tecido dérmico/epidérmico podal, assim como determinar possíveis alterações clínicas e laboratoriais após obstrução intraluminal do cólon menor. Para isso, foram utilizados oito equinos adultos, hígidos, com idade entre oito e 14 anos. Estes foram submetidos a celiotomia associada a dilatação intraluminal do cólon menor, simulando o abdômen agudo por enterólito. Biópsias de casco e cólon menor foram efetuadas neste momento e, também, foram colhidas amostras de sangue e líquido peritoneal. Após quatro horas de obstrução intraluminal, o balão foi desinflado e realizou-se novas biópsias de casco e cólon menor e colheu-se novamente amostras de sangue e líquido peritoneal. Durante o pós-cirúrgico, os animais foram monitorados por meio de exames físicos em intervalos de 12 horas. Após 72 horas da desobstrução foram efetuadas as últimas coletas de casco, cólon, sangue e líquido peritoneal. As amostras de sangue e líquido peritoneal foram utilizadas para avaliação hematológicas e para a determinação da expressão gênica das IL-1β, IL-6, IL-8, IL-10 e TNF-α por meio da PCR em tempo real e para quantificar as IL-1β, IL-6 e TNF-α por ELISA sanduiche. Os tecidos obtidos nas biópsias foram processados para avaliação histológica e determinação das IL-1β, IL-6, IL-8, IL-10 e TNF-α pela técnica da PCR em tempo real. Os valores obtidos nas avaliações hematológicas diferiram (p<0,05) dos valores basais, principalmente após quatro horas de obstrução (M4) e após 12 horas de pós-cirúrgico (M12). As citocinas avaliadas por ... / Numerous researchers have studied the relationship between colic and laminitis manifestation. Some studies with experimentally induced laminitis demonstrated involvement of the inflammatory response in the development of the disease. Therefore, the aim of this study was to investigate systemic and local inflammatory response, in intestines and hoof dermal and epidermal tissues, as well as to determine clinical and laboratory changes after intraluminal obstruction in small colon. For this purpose, eight healthy adult horses were submitted to a celiotomy to induce intraluminal distension of the small colon simulating acute abdomen by enterolith. Hoof and small colon biopsies were made at this time, and samples of blood and peritoneal fluid were collected. After four hours of intraluminal obstruction, the ball was deflated and new biopsies of hoof and small colon collected and blood and peritoneal fluid sampled. During the postoperative, animals were monitored by physical examinations every 12 hours. After 72 hours of ball removal, the last biopsies of hoof, colon, blood and peritoneal fluid were collected. The samples of blood and peritoneal fluid were used for hematological evaluation, for determining gene expression of IL- 1β, IL-6, IL-8, IL-10 and TNF-α by real-time PCR and to quantify IL-1β , IL- 6 and TNF-α by sandwich ELISA. Tissues obtained from biopsies were processed for histological evaluation and determination of IL-1β, IL-6, IL-8, IL- 10 and TNF-α by real time PCR. The values obtained in hematological evaluation differ (p<0.05) from baseline, especially four hours after obstruction (M4) and after 12 hours of postoperative (M12). Cytokines concentrations in peritoneal fluid increased in M4, returned to baseline within M72 and remained unchanged in serum samples. Regarding gene expression in blood, there was no significant difference. In peritoneal fluid, all cytokines differed from baseline. Concerning the colon, the ...

Orientador: Luiz Claudio Di Stasi / Resumo: A Doença Inflamatória Intestinal (DII) é uma doença com etiologia desconhecida e sem terapêutica curativa disponível, englobando, fundamentalmente, duas doenças distintas: a Doença de Crohn (DC) e a Retocolite Ulcerativa (RCU), ambas caracterizadas por uma inflamação crônica do intestino, com períodos de exacerbação seguidos de intervalos prolongados com remissão dos sintomas, cujo tratamento com os fármacos disponíveis apresentam sérios efeitos colaterais. Portanto, o desenvolvimento de novas estratégias de tratamento que combinem eficácia e segurança é uma importante meta na terapia da DII. Produtos de origem natural, especialmente oriundos de fontes vegetais com propriedades de modificar a microbiota intestinal têm sido amplamente estudados como agentes preventivos e/ou curativo destas doenças, visto que a manipulação da microbiota intestinal tem se mostrado como uma estratégia importante na manutenção da homeostase colônica. Neste contexto, muitos frutos de origem tropical, com ampla utilização pela população e ricos em fibras e/ou componentes que ativos como antioxidantes e/ou anti-inflamatórios podem representar uma nova estratégia complementar para a prevenção ou cura da DII. Dentre eles se destacam os frutos das espécies Theobroma grandiflorum (cupuaçu) e Musa spp AAA (banana nanica), ricos em fibras alimentares e compostos fenólicos, os quais são potencialmente benéficos no tratamento e prevenção da DII. O objetivo do presente trabalho foi avaliar os efeitos de uma d... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Doutor

Orientador: Clélia Akiko Hiruma-Lima / Resumo: A dor é um dos principais indicadores de enfermidade. Ela é uma sensação desagradável, complexa e extremamente subjetiva, relacionada a algum estímulo lesivo ou potencialmente lesivo ao organismo. Quando esses estímulos danificam tecidos do organismo a resposta inflamatória é iniciada. Essa resposta é necessária para a resolução de diversos danos e essencial para a defesa do organismo. A inflamação é uma resposta vascular realizada por mediadores inflamatórios. Se houver falha neste processo pode haver a perda da função tecidual. A abordagem mais comum para reduzir a dor e a inflamação é através do uso de medicamentos anti-inflamatórios não esteroidais (AINEs). Entretanto, o uso destes fármacos sem as devidas orientações, ou por longos períodos, pode levar ao aparecimento de sérias reações adversas como as úlceras pépticas. Uma alternativa para o tratamento da dor e inflamação é o uso de espécies vegetais com propriedades medicinais. Nesse contexto, a espécie Arrabidaea brachypoda é uma espécie medicinal comumente utilizada nas regiões sudeste e nordeste brasileira para o tratamento de cálculo renal e dores nas articulações. Considerando a utilização popular da planta, o objetivo do projeto foi avaliar a ação antinociceptiva e anti-inflamatória do extrato diclorometano das raízes de A. brachypoda (DEAB) em modelos experimentais in vivo e seus mecanimos de ação. Neste trabalho avaliamos a toxicidade aguda do DEAB e também o efeito desse extrato sobre a performance motora dos a... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Mestre

Orientador: Jayme Netto Júnior / Banca: Luiz Carlos Marques Vanderlei / Banca: Fabio do Nascimento Bastos / Resumo: Introdução: Pesquisas no âmbito de saúde recomendam a prática regular de exercício físico para o tratamento e prevenção de doenças crônico-degenerativas, com destaque para Síndrome Metabólica (Smet), um conjunto de fatores de risco para doenças cardiovasculares e diabetes mellitus tipo II. Objetivos: Investigar, por meio de ensaio clínico, os efeitos de 16 semanas de uma nova abordagem de treinamento aeróbio intervalado (TAI) sobre biomarcadores sanguíneos e qualidade de vida em sujeitos com Smet; bem como, por meio de revisão sistemática e meta-análise, comparar os efeitos do treinamento aeróbio versus treinamento resistido sobre concentrações séricas de proteína C reativa (PCR), fator de necrose tumoral alfa e interleucina-6 em população cardiometabólica. Métodos: Com relação ao ensaio clínico, 36 participantes diagnosticados com Smet foram alocados em grupo TAI (n=19) e grupo controle (n=17). O treinamento foi realizado três vezes por semana, durante 16 semanas, em três diferentes intensidades de trabalho: 5 semanas de intensidade leve, 4 semanas de intensidade moderada, e 4 semanas de alta intensidade. Qualidade de vida e um conjunto de biomarcadores sanguíneos foram avaliados pré e pós intervenção. Com relação à revisão sistemática, estudos foram selecionados após busca eletrônica em três bases de dados (PubMed/MEDLINE, EMBASE e Cochrane Central Register of Controlled Trials - CENTRAL) desde a data mais antiga de publicação até o dia 7 de julho de 2016. Apenas ensaios cl... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Introduction: Researches in the health context recommend regular exercise training for the treatment and prevention of chronic diseases, especially Metabolic Syndrome (MetS), a cluster of risk factors for cardiovascular diseases and type II diabetes. Objectives: To investigate, through a clinical trial, the effects of 16 weeks of a new approach of aerobic interval training (AIT) on blood biomarkers and quality of life in subjects with MetS; as well as, through a systematic review and meta-analysis, to compare the effects of aerobic training versus resistance training on serum concentrations of C-reactive protein (CRP), tumor necrosis factor alpha and interleukin-6 in cardiometabolic population. Methods: Regarding the clinical trial, 36 participants diagnosed with MetS were allocated to the AIT group (n = 19) and the control group (n = 17). The exercise training was performed three times per week for 16 weeks, at three different workloads: 5 weeks on light intensity, four weeks on moderate intensity, and four weeks on high intensities. Quality of life and a set of blood biomarkers were measured before and after intervention. Regarding the systematic review, studies were selected after electronic search in three databases (PubMed / MEDLINE, EMBASE and Cochrane Central Register of Controlled Trials - CENTRAL) from the earliest date of publication until July 7, 2016. Only randomized controlled trials comparing aerobic versus resistance training on serum concentrations of CRP wer... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Gisele Fabrino Machado / Banca: Valéria Marçal Felix de Lima / Banca: Flávia Lombardi Lopes / Banca: Paulo Ricardo Dell'Amerina Rocha / Banca: Monica Regina Vendrame Amarante / Resumo: A leishmaniose visceral (LV) é uma doença parasitária que apresenta distribuição mundial e que pode afetar homens e animais, sendo que o cão é considerado o principal hospedeiro da doença. Cães infectados pelo parasito Leishmania podem apresentar-se assintomáticos ou com desordens generalizadas, incluindo alterações neurológicas. Existem alguns relatos do acometimento do encéfalo durante a infecção, mas a neuropatogenia da doença não foi completamente elucidada. Há evidências do comprometimento das barreiras encefálicas e da presença do DNA do parasito no encéfalo. Os receptores tipo Toll (TLRs) são sensores do sistema imune inato capazes de detectar padrões moleculares associados aos patógenos (PAMPs), desencadeando uma resposta inflamatórias com produção de diversos mediadores inflamatórios, incluindo citocinas. Desta forma, o objetivo deste estudo foi avaliar o perfil de expressão gênica dos Tolls 1-10, assim como a produção de citocinas pró-inflamatórias TNF-α, IFN-γ, IL-1β e IL-6 no encéfalo e no baço de cães com leishmaniose visceral. No baço houve aumento de expressão gênica de TLR-5 e TLR-9, enquanto no encéfalo houve aumento de TLR-4 em uma pequena população de cães infectados. Em relação às citocinas, todas as citocinas foram detectadas nos dois tecidos avaliados, com excessão de IL-6. Nos cães infectados, TNF-α e IL-1β estavam presentes em maiores concentrações no encéfalo e no baço, respectivamente. Este estudo fornece suporte para explicar o envolvimento de TLRs ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract:Visceral leishmaniasis (VL) is a parasitic disease that presents world distribution, affecting humans and animals. Dogs are considered the main hosts of the disease. Infected dogs with the Leishmania parasite can be asymptomatic or present generalized disorders, including neurological alterations. There are some reports of brain commitment during infection. Nevertheless, neuropathogenesis of VL is not completely elucidated. There are evidences of brain barriers breakdown and of the presence of Leishmania DNA in the brain. Toll-like receptors (TLRs) are innate immune sensors capable of detecting pathogen-associated molecular patterns (PAMPs), trigger an inflammatory response with production of several inflammatory mediators, including cytokines. Therefore, the aim of this study was to evaluate gene expression profile of TLRs1-10, along with the production of proinflammatory cytokines in both brain and spleen in dogs with VL. In spleen there was an upregulation of TLR-5 and TLR-9 while in the brain there was up-regulation of TLR- 4 in a few number of infected animals. Regarding cytokines, all cytokines were detected in both tissues, except IL-6. In the infected dogs, TNF-α and IL-1β were present at higher concentrations in the brain and spleen, respectively. This study provides support to explain the involvement of TLRs in VL and our data confirm the brain as an affected organ in this disease / Doutor