[pt] O Monitoramento do Sistema de Isolamento em Máquinas Elétricas de Alta Tensão representa um avanço no que diz respeito ao planejamento operacional de uma indústria. Com posse de dados on-line referentes às condições apresentadas pelos isolamentos, as devidas precauções podem ser tomadas, evitando danos maiores. O trabalho apresentado tem como objetivo principal analisar um sistema de monitoramento desenvolvido pela CEA (Canadian Electrical Association), com suporte técnico da Ontario Hydro. O sistema chamado PDA (Partial Discharge Analyzer) mede, através de acopladores permanentes ou portáteis (capacitores), as Descargas Parciais nos enrolamentos estatóricos de grande máquinas de alta tensão. A quantificação exata das Descargas Parciais são indicadas das reais condições do isolamento. A análise do aparelho foi realizada em conjunção aos dados obtidos, tendo como referência a Companhia Siderúrgica Nacional (CSN). A partir de tais dados, é possível demostrar em que estágio atual de aproveitamento estamos em relação à utilização de tal aparelho e quais são os passos futuros para melhor compreensão das medidas. / [en] The Monitoring of te Isolation System in High Tension Electrical Machines represents na advance in what concerns the operational planning of na industry. Knowing the on- line data referring to the conditions presented by the isolations, the necessary cautions can be taken, avoiding bigger damages. This work has as the main aim to analyze a monitoring system developed by the CEA (Canadian Electrical Association). The system is called PDA ( Partial Discharge Analyzer) and measures, through permanent or portable couplers (capacitors), the Partial Discharges is indicator of the isolation real conditions. The appliance analyses was made with the obtained data, having as reference the CSN. With this data, it is possible to show in what profiting stage of appliance and which are the future steps for a better comprehension of the measures.

[pt] A partir de dezembro de 2019, o mundo tomou conhecimento da existência da Covid-19 (FIOCRUZ, 2020). As peculiaridades da doença, exigiram a adoção de medidas de distanciamento social (OMS, 2020). Na cidade do Rio de Janeiro, a partir de 16 de março de 2020, foi determinado o fechamento de todas as empresas que não prestassem serviços essenciais (ESTADO DO RIO DE JANEIRO, 2020). Nesse contexto, as empresas se viram compelidas a adaptar as rotinas organizacionais para manter suas operações. Emergiu, então, a relevância de investigar como profissionais experienciaram suas rotinas organizacionais durante o período de isolamento social imposto pela pandemia da Covid-19. A partir de uma abordagem Fenomenográfica, foram entrevistados 30 profissionais. Das análises, retornaram três categorias descritivas: i) a preservação das rotinas organizacionais; ii) a (re)organização da dimensão tempo-espaço e iii) a capacidade de inovação. Para relacioná-las, foram identificadas quatro dimensões explicativas: i) o dinamismo nos componentes operativos das rotinas; ii) os aspectos técnicos-comportamentais dos atores envolvidos; iii) os aspectos gerenciais sobre as rotinas e iv percepção de segurança. Os achados sugerem que as concepções dos profissionais evoluíram da operação mecânica da rotina para uma percepção de engajamento coletivo para manutenção da própria empresa; do objetivo de manter os padrões preestabelecidos, para uma percepção de oportunidade para inovação e diferenciação. Além disso, o estudo reforça a indissociável relação entre os aspectos ostensivo e performativos das rotinas e os artefatos. / [en] As of December 2019, the world became aware of the existence of Covid-19 (FIOCRUZ, 2020). The peculiarities of the disease required the adoption of measures of social distancing (WHO, 2020). In the city of Rio de Janeiro, as of March 16, 2020, all companies that did not provide essential services were closed (ESTADO DO RIO DE JANEIRO, 2020). In this context, companies found themselves compelled to adapt organizational routines to maintain their operations. The relevance of investigating how professionals experienced their organizational routines during the period of social isolation imposed by the Covid-19 pandemic emerged. From a Phenomenographic approach, 30 professionals were interviewed. From the analyses, three descriptive categories returned: i) the preservation of organizational routines; ii) the (re)organization of the time-space dimension and iii) the capacity for innovation. To relate them, four explanatory dimensions were identified: i) the dynamism in the operative components of the routines; ii) the technical-behavioral aspects of the actors involved; iii) managerial aspects of routines and iv perception of safety. The findings suggest that the professionals conceptions evolved from the mechanical operation of the routine to a perception of collective engagement to maintain the company itself; from the objective of maintaining pre-established standards, to a perception of opportunity for innovation and differentiation. Furthermore, the study reinforces the inseparable relationship between the ostensive and performative aspects of routines and artifacts.

Made available in DSpace on 2016-04-04T18:21:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Giovana Carla Mastromauro.pdf: 2647121 bytes, checksum: c8d495ac9f2223ee6153c80f69d6d3d9 (MD5) Previous issue date: 2008-08-24 / Cette communication fait une analise d?une partie de la ville de S?o Paulo ammenag?e ? la fin du dizneuvi?me si?cle. Au d?bout, em 1880, a ?tte construit a cet endroit L?Hospital de Isolamento, haujourd?hui Hospital Em?lio Ribas, et en suite, en 1887, le nouveau cimmeti?re publique de la ville, le Cemit?rio do Ara??, tout au long de l?avenue Municipal, haujourd?hui Avenida Dr. Arnaldo, devant l?Hospital de Isolamento. Ces batiments ont ?t? construit a cet endroit quand dominait une ideologie du higienisme et du sanitarisme. Toutefois, cette periode est justement laquelle ou la th?orie bacteriologique a mise em cause les th?ories sur le miasme que dominait jusqu?? ce moment et que justifiait l?isolement de ces ?quipements publiques. / O presente estudo analisa uma ?rea da cidade de S?o Paulo ocupada no final do s?culo XIX. Inicialmente, em 1880, ali seria constru?do o Hospital de Isolamento, hoje Hospital Em?lio Ribas, e em seguida, em 1887, o novo cemit?rio p?blico da cidade, o Cemit?rio do Ara??, ao longo da Avenida Municipal, hoje Avenida Dr. Arnaldo, em frente ao Hospital de Isolamento. Estes edif?cios se instalam no local sob a orienta??o ideol?gica do higienismo e da salubridade. Todavia, o per?odo em an?lise ? justamente aquele no qual a teoria bacteriol?gica veio a abalar as teorias miasm?ticas ent?o dominantes, as quais justificavam o isolamento destes equipamentos p?blicos. Procura-se desvendar, neste trabalho, como a no??o de sa?de p?blica e os conceitos de higienismo da ?poca est?o presentes nas justificativas das escolhas de implanta??o destes edif?cios na regi?o.

Submitted by Johnny Rodrigues (johnnyrodrigues@ufcg.edu.br) on 2018-08-28T16:50:59Z No. of bitstreams: 1 WAGNER DE SOUZA PORTO - DISSERTAÇÃO PPGCC 2009..pdf: 3676431 bytes, checksum: 91bede14a64447aa4598ba5c6b3365a4 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-28T16:50:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 WAGNER DE SOUZA PORTO - DISSERTAÇÃO PPGCC 2009..pdf: 3676431 bytes, checksum: 91bede14a64447aa4598ba5c6b3365a4 (MD5) Previous issue date: 2009-09-16 / Este trabalho apresenta o Auto-FDI (Automatic Fault Detection and Isolation), uma ferramenta de detecção e isolamento de falhas em sistemas. A ferramenta usa o conceito de redundância analítica, onde sinais obtidos do sistema (possivelmente com falha) são comparados com sinais esperados, obtidos de um modelo. O isolamento de falhas emprega uma técnica desenvolvida neste trabalho, chamada isolamento automático. A técnica usa uma abordagem baseada em grafos que considera a propagação de falhas e a falta de informação sobre determinados componentes do sistema. Falhas são localizadas de forma mais precisa possível, dado o nível de detalhe do modelo. No escopo deste trabalho foi abordado todo o processo de especificação, projeto, implementação e validação da ferramenta, utilizada como prova de conceito para a técnica desenvolvida. A validação da ferramenta foi feita através da realização de um estudo de caso por potenciais usuários, o que permitiu demonstrar a aplicabilidade da ferramenta e a da técnica desenvolvida. / This work presents Auto-FDI (Automatic Fault Detection and Isolation), a software tool for detection and diagnosis of faults in systems. The tool uses the analytical redundancy concept, where signals from the (possibly faulty) system are compared with expected signals from a model. The fault isolation employs a technique developed on this work, called automatic isolation. This technique uses a graph-based approach which considers the fault propagation and the lack of information about certain components of the system. Faults are pinpointed as accurately as possible given the level of detail in the model. In the scope of this work was addressed the whole process of specification, design, implementation and validation of the tool - used as proof of concept for the developed technique. The validation of the tool was made by conducting a case study for potential users, that has demonstrated the applicability of the tool and the technique developed.

Submitted by Anderson Silva (avargas@icict.fiocruz.br) on 2012-07-18T19:14:53Z No. of bitstreams: 1 paloma_m_mendonca_ioc_bp_0035_2010.pdf: 5136216 bytes, checksum: 96c991db74df0f84ca5c4542f83fd6f4 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-07-18T19:14:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 paloma_m_mendonca_ioc_bp_0035_2010.pdf: 5136216 bytes, checksum: 96c991db74df0f84ca5c4542f83fd6f4 (MD5) Previous issue date: 2010 / CNPq E FAPERJ / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil. / Os dípteros muscóides são insetos com notável importância econômica e na entomologia médica e veterinária devido às diversas formas como eles podem estar relacionados ao homem, seja vetorando patógenos, causando miíases ou participando da degradação da matéria orgânica. A entomologia forense é uma ciência que estuda o papel dos insetos na decomposição de cadáveres e uma das principais aplicações destes nesta área é a estimativa do intervalo pós-morte, baseada no período mínimo de atividade dos insetos no corpo. No caso dos dípteros muscóides, que são os primeiros a chegar e podem ovipor logo após encontrar o cadáver, o conhecimento morfológico das fases imaturas desses insetos será mais uma ferramenta que auxiliará peritos e pesquisadores, pois em alguns casos, ovos e larvas são as únicas evidências presentes. A microscopia eletrônica de varredura é um instrumento que permite uma visualização mais detalhada dos caracteres morfológicos. Algumas espécies de muscóides destacam-se devido a sua preferência alimentar, pois buscam a matéria orgânica em decomposição para se alimentar, dentre elas podemos destacar os califorídeos Chrysomy albiceps, Chrysomya putoria e Chrysomya megacephala. Este trabalho teve como objetivo a identificação de ovos, larvas de primeiro, segundo e terceiro instar e pupários destas espécies de dípteros de grande importância forense e disseminadores de patógenos, através da utilização de microscopia eletrônica de varredura. Foram analisados 30 exemplares de cada estágio correspondente a cada espécie, provenientes de colônias de laboratório, estabelecidas a partir de adultos capturados no campus da Fundação Oswaldo Cruz, RJ. Ovos e larvas foram transferidos para placas de Petri contendo hidróxido de sódio e lavados com H 2O destilada. Depois foram fixados com solução de glutaraldeído em tampão cacodilato de sódio e pós-fixados em tetróxido de ósmio, desidratados em séries crescentes de acetona e submetidos ao método de secagem pelo ponto crítico usando CO2 em aparelho de Balzers, montados em suportes metálicos e cobertos por ouro, para permitir a visualização ao microscópio eletrônico de varredura. Pupas com 48 a 72 horas de formação foram lavadas, congeladas e depois montadas em suportes metálicos e cobertas por ouro para observação. Neste trabalho foi observado que a linha mediana termina arredondada na porção anterior dos ovos de C. putoria, enquanto nas outras duas espécies esta termina bifurcada. As ornamentações da micrópila são do tipo projeções nos ovos de C. megacephala e C. albiceps e do tipo depressões em C. putoria. O corpo da larva em todos os instares é muito semelhante entre as três espécies analisadas. No entanto, somente C. albiceps apresentou o tegumento recoberto por tubérculos organizados em fileiras ao longo do corpo da larva. No ápice dos tubérculos são encontrados espinhos que são característicos dessa espécie. Os pupários são formados a partir do endurecimento da cutícula da larva de terceiro instar, sendo assim, apresentaram estruturas muito semelhantes ao instar anterior. Este estudo permitiu destacar diversas características que podem ser utilizadas para identificar as espécies de importância sanitária e forense, além de fornecer subsídios para a elaboração de uma chave dicotômica específica para estes imaturos. / Muscoids diptera are insects with considerable economic importance and also in medical and veterinary entomology because of the way that they are related to man, as vectors of pathogens, causing myiasis or participating in organic matter degradation. Forensic entomology is a discipline that studies the role of insects in corpse’s decomposition and one of the most commom applications is to estimate postmortem interval by determining a minimum period of insect activity on a decomposing body. Flies are the first visitors to a dead body and are able to oviposit on carrion within a few hours after death. And the morphologic knowledge from imatures can be used as a tool in crime scene investigations because, sometimes, only eggs and larvae can be found in corpses. Scanning electron microscopy gives detailed information about morphologic characters. Some species of diptera are important because their larvae grow up at organic matter, such the blowflies Chrysomya albiceps, Chrysomya putoria and Chrysomya megacephala. The aim of this study was identify eggs, larvae of first, second and third instar and puparium of these species of flies of forensic importance and pathogens vectors, by using scanning electron microscopy. All the imatures examined in this study were obtained from culture set up from wild flies trapped at Fundação Oswaldo Cruz campus, Rio de Janeiro, RJ. Thirty samples from each species were observed. Eggs and larvae were transferred to a Petri dish with sodium hydroxid and then washed with destilated water. After it, imatures were fixed in glutaraldehyde in sodium cacodylate and postfixed in osmium tetroxide. They were dehydrated in a series of acetone for critical point drying, using CO 2 in Balzers apparatus. Specimens were adhered in metalic support and gold-coated for SEM examination. Pupae within 48 to 72 hours-age were washed, frozen and adhered in metalic support and gold- coated for SEM examination. Median area ends rounded anteriorly in C. putoria, whereas ended bifurcate in others species. Micropyle showed projections at C. megecephala and C. albiceps, but at C. putoria, micropyle was adorned by depressions. Larvae bodies were very similar among all the species analyzed. However, only C. albiceps body tegument was composed by tubercles organized in lines along larval body. At the apex of these tubercles some spines are only seen at this blowfly specie. The pupae are formed from the hardening of the cuticle of third instar larvae, thus, had structures very similar to the previous instar. This study helped to highlight many features that could be used to identify the species of sanitary and forensic importance, and provides subsidies for the development of a key to these specific immature.

Submitted by Fabiana Gonçalves Pinto (benf@ndc.uff.br) on 2017-02-22T18:44:53Z No. of bitstreams: 1 Willian Alves dos Santos.pdf: 2856868 bytes, checksum: 09e364c04de604bece868531688a5915 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-22T18:44:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Willian Alves dos Santos.pdf: 2856868 bytes, checksum: 09e364c04de604bece868531688a5915 (MD5) Previous issue date: 2016 / Mestrado Acadêmico em Ciências do Cuidado em Saúde / A ferida neoplásica acomete cerca de 5% a 10% dos pacientes com câncer em cuidados paliativos. O foco central do cuidado dessas feridas é o controle dos sintomas, em que o odor está presente em 10,4% e o exsudato em 14,6% dos casos, sendo responsáveis pelo impacto no aspecto psicossocial do paciente. O estudo teve como objetivo de avaliar as associações entre odor, exsudato e isolamento social em pacientes com feridas neoplásicas. Trata-se de uma pesquisa quantitativa do tipo transversal prospectivo realizado com os pacientes com feridas neoplásicas no Ambulatório de cuidados paliativos do Núcleo de Atenção Oncológica do Hospital Universitário Antônio Pedro, aprovada pelo Comitê de Ética do HUAP c/nº: 183.757. A coleta de dados foi realizada durante a consulta de enfermagem pela da aplicação das escalas de odor, exsudação (Push) e escala de Likert de três dimensões para avaliação dos aspectos sociais do paciente, bem como dados contidos em prontuário para caracterização da clientela. Para a análise estatística aplicou-se o teste de normalidade Shapiro wilk, verificando que a amostra não é paramétrica (p valor ≤ 0,05) para as variáveis: tamanho da lesão, ferida total, odor total e exsudato total (escala likert) e paramétrica (p valor > 0,05) para a variável idade. Os dados foram apresentados em forma de mediana e intervalo interquartil (x ̃± Q3-Q1) para análises das variáveis não paramétricas; média e desvio padrão (x̅ ±D.P) para variável paramétrica. Realizou-se o teste de Kruskal Wallis para verificação de associação multivariada entre os dados clínicos e da escala e o teste de Spearman para verificar se o grau do odor, quantidade de exsudato, tamanho e localização da lesão apresentam correlação com a interferência da socialização do paciente. A confiabilidade da ISPOE foi medida pelo coeficiente Alfa de Cronbach. Constatou-se, então a correlação entre o grau de odor e as perguntas 1 e 5 da escala da dimensão odor. Assim, o odor interfere no constrangimento (p; 0,0053) e frequentar locais públicos (p; 0,0495). A quantidade de exsudato apresentou correlação com a primeira questão da escala da dimensão exsudato, interferindo no constrangimento (p; 0,0453). A variável tipo de ferida apresentou correlação com as questões 3 e 5, logo, interferindo na relação com a família e em frequentar locais públicos, fatores esses que favorecem o isolamento social em pacientes com feridas neoplásicas As variáveis: tamanho da lesão e local da lesão não apresentaram correlação significativa com as questões da escala na dimensão ferida. As três dimensões da escala apresentaram consistência interna satisfatória com alfa: 0,82 (dimensão ferida); 0,94 (dimensão exsudato) e 0,88 (dimensão odor). Com isso, o odor e o exsudato interferem negativamente fatores sociais e psicológicos que podem favorecer, diretamente, o isolamento social. Além do conhecimento sobre as particularidades dessas lesões e dos produtos adequados ao cuidados, é fulcral que o profissional de enfermagem conheça os principais queixas relacionadas à lesão e o impacto que causam ao cotidiano do paciente. Conhecer esse conflito social e psicológico fará toda a diferença no cuidado de enfermagem, pois, dessa forma, poderá atuar de maneira assertiva e holística no cuidado no cotidiano do paciente, enxergando-o para além dos sintomas: seus anseios psicológicos e sociais. A constatação da associação entre as variáveis poderá auxiliar a avaliação dos aspectos que podem interferir na qualidade de vida e no cuidado prestado aos pacientes com feridas neoplásicas. / Neoplastic wound affects about 5% to 10% of cancer patients in palliative care. The central focus of the care of these wounds is to control the symptoms, where the odor is present in 10.4% and exudate in 14.6% of cases, being responsible for the impact on the psychosocial aspect of the patient. The study aimed to evaluate the association between odor, exudate and social isolation in patients with neoplastic wounds. This is a quantitative study of the kind prospective cross-sectional with patients with neoplastic wounds in outpatient palliative care in Oncology Attention Core of University Hospital Antonio Pedro, approved by HUAP Ethics Committee c / No: 183757. Data collection was performed during the nursing consultation by the application of odor scales, exudation (Push) and Likert scale of three dimensions to assess the social aspects of the patient, as well as data contained in records for population. The statistical analysis was applied to the normality test Shapiro Wilk, verifying that the sample is not parametric (p value ≤ 0.05) for the variables: size of the lesion, the total wound, the total odor and overall exudate (Likert scale) and parametric (p value> 0.05) for the age variable. Data were presented as median and interquartile range ((x) ± Q3-Q1) for analysis of nonparametric variables; mean and standard deviation (x ̅ ± S.P) for parametric variable. He held the Kruskal Wallis test for multivariate association check between clinical data and scale and the Spearman test to see if the odor degree, amount of exudate, size and location of the lesion correlate with the interference of socialization patient. The reliability of ISPOE was measured by Cronbach alpha coefficient. It was found, then the correlation between the degree of odor and the questions 1 to 5 scale of the odor scale. Thus, the odor interferes with the constraint (p, 0.0053) and attend public places (p; 0.0495). The amount of exudate correlated with the first issue of exudate size scale, interfering with embarrassment (p; 0.0453). The variable type of injury correlated with the issues 3:05, so interfering with the relationship with the family and attend public places, factors that favor social isolation in patients with neoplastic Variables wounds: lesion size and location of injury no significant correlation with the range of issues in the wound size. The three dimensions of the scale showed satisfactory internal consistency with alpha: 0.82 (wound size); 0.94 (exudate dimension) and 0.88 (size odor). Thus, the odor and exudate negatively affect social and psychological factors that may contribute, directly, social isolation. In addition to the knowledge about the characteristics of these injuries and products suitable for care, it is crucial that nursing professionals know the main complaints related to the injury and the impact they cause to the daily life of the patient. Knowing that social and psychological conflict will make all the difference in nursing care, because thus may act assertively and holistic care in the patient's daily life, seeing it beyond the symptoms: their psychological and social aspirations. The finding of association between variables may assist the evaluation of aspects that can interfere with quality of life and care provided to patients with neoplastic wounds.

Resumo: O Brasil é o país com o maior rebanho de búfalo de rio, Bubalus bubalis, no continente americano e também o maior produtor deste animal fora do continente asiático. A produção de leite e derivados vem aumentando devido à potencialidade dessa espécie em produzir leite com baixos custos e elevado rendimento industrial. Apesar das características economicamente importantes inerentes ao búfalo, as pesquisas científicas são limitadas em muitos países onde o búfalo é economicamente importante e como conseqüência a pesquisa genômica encontrase defasada quando comparado com outras espécies de interesse econômico. Marcadores moleculares são essenciais para avaliar informações qualitativas e quantitativas da diversidade molecular com o objetivo de aperfeiçoar a utilização e conservação da variabilidade genética e o relacionamento entre vários rebanhos. Microssatélites diferem dos outros tipos de seqüências de DNA por seu extenso polimorfismo dentro e entre populações, sendo considerados excelentes tipos de marcadores moleculares. O presente estudo teve como objetivos construir bibliotecas genômicas parciais enriquecidas com microssatélites, isolar e caracterizar os microssatélites obtidos, além de determinar as condições de amplificação por PCR para alguns dos locos isolados da biblioteca. Foram desenvolvidas 6 bibliotecas genômicas parciais - (CA)15 , (CT)15 , (AGG)8 , (GATA)8 , (GAAA)8, (AAAAC)8. O processo de clonagem gerou um total de 1.824 clones recombinantes, sendo que 954 foram seqüenciados para identificação de microssatélites. Cento e treze microssatélites foram encontrados. Desses, foram identificados 96 com unidade de repetição dinucleotídica (84,95%), 10 repetições trinucleotídicas (8,85%), 6 repetições tetranucleotídicas (5,3%) e 1 repetição pentanucleotídica (0,89%). As seqüências de microssatélites... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Brazil is the largest river buffalo (Bubalus bubalis) breeding center outside the Asian continent, the origin of the domestic buffalo. All buffalo breeds have a strong milk/meat attributes. Their extensive use in agriculture world wide, and especially in developing countries, begs for genetic resources to evaluate and improve traits important to local and regional economies. Among the different types of DNA markers, microsatellites are useful for studying genetic variability within and between populations due its high heterozygosity. The goal of this study was to construct partial genomic libraries enriched with repeated sequences to isolate and characterize microsatellites for river buffalo. The cloning process generated a total of 1824 recombinant clones, from which 954 were sequenced for the microsatellites search. One hundred and thirteen new microsatellites were isolated, containing the following type of repeats: dinucleotide repeats (96 sequences - 84.95%), trinucleotide repeats (10 sequences - 8.85%), tetranucleotide repeats (6 sequences - 5.3%) and pentanucleotide repeats (1 sequence - 0.89%). The new microsatellites were structurally categorized into 3 categories: pure repeats (90 sequences - 79.64%), pure interrupted (21 sequences - 18.59%) and compound interrupted repeats (2 sequence - 1.77%). PCR primer pairs were designed for ten microsatellites, from which four had the PCR conditions optimized. The microsatellites isolated in this study will be used to evaluate the genetic variability of Brazilian populations of river buffalo and to the gene mapping program established for this specie. / Orientador: Maria Elisabete Jorge Amaral / Coorientador: Artur Luiz da Costa da Silva / Banca: Vera Fernanda Martins Hossepian de Lima / Banca: Sandra Regina de Carvalho Marchesin / Mestre

Mycoplasma pulmonis e Mycoplasma arthritidis são espécies frequentemente isoladas de animais de laboratório (ratos), causando prejuízos e alteração em resultados de pesquisa que utilizam tais animais. O Mycoplasma pulmonis coloniza principalmente o trato respiratório, nasofaringe e ouvido médio de murinos e causa micoplasmose respiratória murina (MRM). A principal via de transmissão é horizontal, o que facilita a disseminação deste agente para os demais ambientes do biotério e também para seus funcionários. O Mycoplasma arthritidis pode ser isolado da orofaringe destes animais, mas sua ocorrência natural é rara. Os micoplasmas geralmente são espécie-específicos embora algumas espécies possam ser encontradas em diferentes hospedeiros. O objetivo deste trabalho foi o isolamento Mycoplasma pulmonis e Mycoplasma arthritidis em ratos de laboratório e a detecção destas espécies por meio da PCR em ratos e funcionários de diferentes biotérios. Foram positivas para Mycoplasma pulmonis 144 (60%) amostras de lavado traqueal de ratos na cultura e 155 (64,58%) pela PCR espécie especifica. Mycoplasma arthritidis não foi isolado e detectado em nenhuma amostra analisada. M. pulmonis foi detectado em quatro (10%) amostras de funcionários que não mantinham contato direto com os ratos, sendo uma do biotério 1 e três do biotério 4. Dos bioteristas que mantinham contato direto, 24 (77,4%) foram negativos nas duas coletas, 4 (12,9%) foram positivos após o manejo dos animais, 2 (6,5%) foram positivos em ambas as coletas e 1 (3,2%) foi positivo somente antes da higienização das caixas. Estes resultados mostram que pessoas que trabalham em biotérios estão expostas a tal agente podendo servir como veículo de transmissão / Mycoplasma pulmonis and Mycoplasma arthritidis are species usually isolated from laboratory rats, causing losses and modifying results of research that use such animals. Mycoplasma pulmonis inhabit primary the respiratory tract, nasopharynx, and middle ear of murines causing the murine respiratory mycoplasmosis (MRM). In general, aerosols perform the transmission, which allows the spreading of this agent to all facilities departments and to technicians. Mycoplasma arthritidis can be recovered from the oropharynx of these animals, but its occurrence is rare. Mycoplasmas usually exhibit a rather strict host and tissue specificity, probably reflecting their nutritionally exacting nature and obligate parasitic mode of life. However, there are numerous examples of the presence of mycoplasmas in hosts and tissue different from their normal habitats. The aim of this study was to recovery Mycoplasma pulmonis and Mycoplasma arthritidis from laboratory rats and detection of these species by PCR in rats and technicians from distinct facilities. 144 (60%) samples of tracheal washed of rats were positives in culture to Mycoplasma pulmonis and 155 (64,58%) by specific PCR. Mycoplasma arthritidis was nor isolated, neither detected in any samples. M. pulmonis was detected in four (10%) of the samples collected from the technicians who did not maintain direct contact with rats, being one sample from facility 1 and three samples from facility 3. Regarding to technicians who keep direct contact, 24 (77,4%) were negatives on the two collects, 4 (12,9%) were positives after manipulating animals, 2 (6,5%) were positives in both collects, before and after treatment of animals and 1 (3,2%) was positive before cleaning the boxes. These results showed that people who work in facilities are exposed to this agent and can become a revervoirs of infection

O tratamento de indivíduos que apresentam leishmaniose, seja ela cutânea ou visceral, é usualmente problemático, uma vez que os medicamentos utilizados na prática clínica são altamente tóxicos, requerem administração parenteral e nem sempre promovem a cura dos pacientes. Torna-se clara, portanto, a necessidade de se pesquisar novos fármacos com potencial leishmanicida. O objetivo da presente Tese de Doutorado foi caracterizar a atividade do tamoxifeno, composto utilizado no tratamento do câncer de mama há décadas, contra diferentes espécies de Leishmania in vitro e in vivo, além de identificar seu possível mecanismo de ação. As concentrações inibitórias de tamoxifeno para 50% de culturas de parasitas tanto de cepas de laboratório como de isolados recentes de pacientes variaram de 5 a 20 mM. Além disso, nossos resultados mostraram que a aplicação intraperitoneal de 20 mg/kg/dia de citrato de tamoxifeno por duas semanas levou à redução significativa no tamanho das lesões e das úlceras na base da cauda de camundongos BALB/c infectados com L. (L.) amazonensis, bem como à diminuição da carga parasitária. Diferentes modelos de infecção animal comprovaram ainda a eficácia de tamoxifeno contra L. (L.) chagasi e L (V.) braziliensis. Apesar da atividade deste fármaco estar diretamente relacionada à inibição da ligação de estrógeno ao seu receptor, ele exibe efeitos moduladores da atividade de proteínas sinalizadoras em concentrações próximas às efetivas contra Leishmania. Primeiramente verificamos que tamoxifeno foi capaz de induzir rapidamente a alcalinização de vacúolos de macrófagos peritoniais contendo amastigotas de L. (L.) amazonensis, sendo este um efeito observado em períodos curtos e longos de incubação com a droga. Esta alcalinização parece não estar diretamente relacionada à morte dos parasitas pela alteração imediata das condições ideais do meio necessário à sobrevivência das formas amastigotas, mas sim ligada ao aumento do efeito leishmanicida de tamoxifeno, uma vez que este composto apresentou-se mais ativo na faixa de pH neutro a moderadamente alcalino. Outro alvo investigado foi a biossíntese de isoprenóides de promastigotas. Células tratadas com tamoxifeno apresentaram redução global na biossíntese de farnesol, geraniol, dolicol, ergosterol e ubiquinona após marcação metabólica com [14C]-leucina, indicando que tamoxifeno não interfere especificamente na síntese de cada um destes produtos. Iniciamos também a investigação dos efeitos do tamoxifeno no metabolismo de ceramidas em Leishmania adotando a estratégia de marcação metabólica de promastigotas com C6-NBD-ceramida. Verificamos que promastigotas de Leishmania são capazes de incorporar eficientemente ceramida conjugada ao fluoróforo NBD. Em nossos ensaios, a incubação de promastigotas tanto com os inibidores clássicos da via de biossíntese de esfingolipídios como com tamoxifeno resultou na alteração do perfil de incorporação dos precursores utilizados. O tratamento com tamoxifeno aumentou a biossíntese de glucosilceramida acetilada, elevou os níveis de ceramida acilada e diminuiu a biossíntese de fosfoesfingolipídios de promastigotas de L. (L.) amazonensis. Finalmente, nossos dados mostraram ainda que tamoxifeno permeabiliza a membrana plasmática de promastigotas de L. (L.) amazonensis e, a partir de estudos por microscopia eletrônica de transmissão, verificamos que este fármaco alterou a estrutura mitocondrial dos parasitas e provocou intensa vacuolização do citoplasma. Os resultados apresentados neste trabalho configuram o primeiro relato da atividade de tamoxifeno contra Leishmania e justificam a realização de futuros testes deste fármaco como uma alternativa na quimioterapia da leishmaniose. / The treatment of cutaneous and visceral leishmaniasis is challenging, since the drugs used are frequently ineffective, very toxic and require parenteral administration. Therefore, the discovery of new drugs with leishmanicidal activity is in pressing need. The objective of this thesis was to characterize the activity of tamoxifen, a drug used in the treatment of breast cancer for decades, against Leishmania spp. in vitro and in vivo, and to identify its possible mechanism of action. The inhibitory concentrations of tamoxifen for 50% of parasite cultures, from reference strains and recent isolates from patients, ranged from 5 to 20 mM. Moreover, we showed that the intraperitoneal administration of 20 mg/kg/day tamoxifen citrate for two weeks led to significant reductions in the lesion and ulcer sizes and parasite burden in L. (L.) amazonensis-infected BALB/c mice. Additionally, the administration of tamoxifen in two other models of animal infection proved its effectiveness against L. (L.) chagasi and L (V.) braziliensis. In an attempt to characterize tamoxifens mechanism of action against Leishmania, we found that this drug was able to induce a rapid alkalinization of macrophage vacuoles containing L. (L.) amazonensis amastigotes. This phenomenon does not appear to be related to the death of the parasites, but rather is linked to an increased antileishmanial effect of tamoxifen. Another target investigated was the interference of tamoxifen in the biosynthesis of isoprenoids. Treated cells showed an overall reduction in the biosynthesis of farnesol, geraniol, dolichol, ergosterol and ubiquinone after metabolic labeling with [14C]-leucine, indicating that tamoxifen does not interfere specifically in the synthesis of those products. We have also studied the effects of tamoxifen on Leishmania ceramide metabolism. The strategy adopted was the metabolic labeling of promastigotes with C6-NBD-ceramide. Our results showed that Leishmania is able to incorporate NBD-ceramide. The incubation of promastigotes with classical inhibitors of sphingolipid biosynthesis as well as with tamoxifen resulted in striking modifications in the pattern of sphingolipid biosynthesis. L. (L.) amazonensis promastigotes treated with tamoxifen showed increased biosynthesis of acetylated glucosylceramide and acyl-ceramide and decreased synthesis of phosphosphingolipids. Finally, our data showed that tamoxifen induced the permeabilization of the promastigote plasma membrane and, based on studies using transmission electron microscopy, we found that this drug altered the mitochondrial structure and caused intense cytoplasmic vacuolization. The results presented here comprise the first report of the activity of tamoxifen against Leishmania and offer support for future trials to evaluate tamoxifen as an alternative for leishmaniasis chemotherapy.

A própolis é uma substância resinosa coletada pelas abelhas de diversas partes das plantas, à qual têm sido atribuídas propriedades antimicrobiana, antioxidante, antinflamatória, antiviral, entre outras. Sua composição química depende de vários fatores, como a localização geográfica. Um novo tipo de própolis brasileira, denominada de própolis vermelha, por sua coloração intensa característica, foi identificada e coletada em região de mangue do Estado de Alagoas. O objetivo deste trabalho foi fracionar e isolar compostos com atividade antibacteriana dessa nova variedade de própolis. O extrato etanólico da própolis vermelha foi fracionado pela técnica de extração líquido-líquido, originando as frações hexânica (fr-Hex) e clorofórmica (fr-Clo). A fr-Clo apresentou alta atividade antibacteriana pelos testes de Concentração Inibitória Mínima (CIM) e Concentração Bactericida Mínima (CBM), contra as bactérias Staphylococcus aureus, Streptococcus mutans e Actinomyces naeslundii. Dessa forma, a fr-Clo foi refracionada por coluna seca gerando sete sub-frações. Após a avaliação da atividade antibacteriana das sub-frações pelas técnicas de CIM e CBM, a sub-fração 3, a mais bioativa, foi purificada em coluna de Sephadex LH-20. Dessa purificação foram obtidas três sub-frações bioativas, as quais foram submetidas ao isolamento dos compostos pela técnica de Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE) preparativa. Dois compostos foram isolados e denominados de composto 1 e composto 2. O composto 2 foi o mais potente para as atividades inibitória e bactericida e sua CIM para os três tipos de bactéria testados variou entre 15,6 e 31,2 µg/mL, enquanto para o composto 1, este parâmetro variou de 31,2 a 62,5 µg/mL. As CBM do composto 1 e do composto 2 variaram entre 125 e 250 µg/mL e entre 31,2 e 62,5 µg/mL, respectivamente. Por meio da técnica Ressonância Magnética Nuclear (RMN) foi possível identificar o composto 1 como pertencente à classe das isoflavanas e o composto 2 como uma chalcona (isoliquiritigenina). A forte atividade antibacteriana apresentada pelos compostos isolados da própolis vermelha torna este produto uma importante fonte de compostos antibacterianos naturais. / Propolis is a resinous material, collected by honeybees from several parts of plants, known for its antimicrobial, antioxidant, anti-inflammatory, antiviral properties, among others. Its composition varies according to several factors, such as the geographical location. A novel type of Brazilian propolis, named red propolis due to its intense characteristic color, was collected in a mangrove area in the State of Alagoas. This research aimed to fractionate and isolate the compounds in this new type of propolis that present antibacterial activity. The ethanolic extract of red propolis (EEP) was fractionated using the liquid-liquid extraction technique, yielding the hexanic (Hex-fr) and the chloroformic fractions (Chlo-fr). Chlo-fr showed high antibacterial activity determined by the minimal inhibitory concentration (MIC) and minimum bactericidal concentration (MBC) tests against Staphylococcus aureus Streptococcus mutans, and Actinomyces naeslundii. Thus, Chlo-fr was refractionated by Dry-Column Chromatography, yielding seven subfractions. After submitted to MIC and MBC techniques to assess their antibacterial activity, and subfraction 3, the most bioactive of them, was purified in Sephadex LH-20 column. After this purification, three bioactive subfractions were obtained, submitted to isolation of compounds using preparative High Performance Liquid Chromatography (HPLC). Two compounds were isolated and named compound 1 and compound 2. Compound 2 presented the highest inhibitory and bactericidal activities and its MIC for the three types of bacteria tested ranged from 15.6 to 31.2 µg/mL, whereas for compound 1, this parameter ranged from 31.2 to 62.5 µg/mL. MBC of compound 1 and compound 2 ranged from 125 to 250 µg/mL and from 31.2 to 62.5 µg/mL, respectively. Through Nuclear Magnetic Resonance tecnique (NMR), it was possible to identify the compound 1 as belonging to class of isoflavans and the compound 2 as a chalcone (isoliquiritigenin). Due to the strong antibacterial activity presented by the compounds isolated from red propolis, it can be concluded that this product is an important source of natural antibacterial compounds.