Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario / Ratones de la cepa ACA fueron experimentalmente infectados con 2.000 trypomastigotes sanguíneos de la cepa Tulahuén o de la cepa Munantá de Trypanosoma cruzi para evaluar prepatencia, niveles de parasitemia, mortalidad acumulada y establecer su eventual correlación con el número de peudoquistes y la magnitud del daño inflamatorio, en el tejido cardiaco de los ratones así infectados. Mientras los ratones infectados con la cepa Tulahuén mostraron una prepatencia sanguínea de cinco días, con un nivel máximo de parasitemia de sólo 14,8 x 105 ± 2,21 x 105 parásitos/mL alcanzado a los 11 días y 100% de mortalidad acumulada a los 21 días post infección, los ratones infectados con la cepa Munantá mostraron una prepatencia de siete días, un nivel máximo de parasitemia de 41,57 x 105 ± 2,61 x 105 parásitos/mL (p < 0,001), alcanzado a los 17 días y 75% de sobrevida más allá de los seis meses de infección (p < 0,0002). El número de pseudoquistes y la magnitud del daño tisular observado en los ratones infectados con la cepa Munantá no fueron diferentes de lo obtenido en los ratones infectados con la cepa Tulahuén durante los primeros 15 días de infección. Sin embargo mientras en los ratones infectados con la cepa Tulahuén se observó un aumento significativo en el número de pseudoquistes (p < 0,01) y en la magnitud del infiltrado inflamatorio mononuclear y del daño tisular (p < 0,05) a los 19 días de infección, los ratones infectados con la cepa Munantá, mostraron no sólo una disminución en el número de peseudoquistes y de células inflamatorias mononucleares, sino también una lenta reparación del daño tisular

Memoria para optar al Titulo Profesional de Médico Veterinario / Se estudió la plasticidad fenotípica inducida ambientalmente en la capacidad funcional aeróbica en el roedor de desarrollo tardío Phyllotis darwini. Se investigaron las tasas metabólicas basales y máximas (la medición del consumo de oxígeno de un animal es una expresión del metabolismo aeróbico de éste) en animales aclimatados a alta temperatura (bajo requerimiento energético de termorregulación: 30°C) y a baja temperatura (alto requerimiento: 15°C), en diferentes etapas del desarrollo. Se encontraron temperaturas corporales más altas y mayores velocidades de desarrollo en las capacidades termorregulatorias en crías nacidas de madres aclimatadas al frío. Esta diferencia podría ser explicada por efectos maternos sobre la camada, como por ejemplo, altos niveles de catecolaminas y tiroxina, o mayores cantidades de grasa parda como consecuencia de la aclimatación al frío. La exposición de las madres y la mantención del frío en las crías durante el desarrollo temprano serían responsables del alto metabolismo y mayor capacidad termorregulatoria de las crías

Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario / Trypanosoma cruzi, agente etiológico de la enfermedad de Chagas o tripanosomiasis americana, es un parásito intracelular obligatorio que causa una infección crónica debilitante en humanos. En el presente trabajo, en un modelo experimental, se infectaron tres grupos de ratones machos de las cepas A.Sw, Balb/c y CF1, de 10 semanas de edad, con 2.000 tripomastigotes sanguíneos del clon Dm28c de T. cruzi. Se evaluó la evolución de la infección en términos de prepatencia, valores de parasitemia, mortalidad y un estudio histopatológico. Los resultados obtenidos indicarían la existencia de un componente genético en la evolución de la infección con T.cruzi, ya que la mortalidad alcanzada por el grupo de ratones de la cepa Balb/c fue un 100%, sin embargo sólo fue de un 10% en el caso de la cepa A.Sw y 0% de mortalidad para la cepa CF1. Respecto a los promedios alcanzados en las parasitemias en el día de su máximo nivel para cada grupo, se observó que el mayor valor fue evidenciado por los animales Balb/c con 2x106 parásitos/mL, un valor de 1,1x106 parásitos/mL para CF1 y el menor valor de 6,2x105 observado en los ratones A.Sw. A nivel histopatológico, según los cortes realizados, sólo se encontraron seudoquistes al día 14 p.i. en corazón en las tres cepas y en el caso de la cepa Balb/c en tejido muscular. La mayor cantidad de parásitos intracelulares, inflamación y daño se observó en las muestras de los animales Balb/c

Memoria para optar al Titulo Profesional de Médico Veterinario / Se inocularon 18 ratones de la cepa Balb/c con 2000 tripomastigotes del clon Dm28c de Trypanosoma cruzi, los cuales se sacrificaron a los 7, 21 y 60 días post infección, para posteriormente estudiar cerebro, corazón, hígado, riñón, intestino y músculo esquelético a través de la técnica de reacción en cadena de la polimerasa (PCR), lo que permitió detectar el DNA de T. cruzi y por otro lado se realizó un estudio histopatológico para determinar la presencia de lesiones tisulares y pseudoquistes de T. cruzi en los tejidos antes mencionados. Los resultados mostraron que los niveles de parasitemias fueron bajos durante el transcurso de la infección. Se determinó que durante la fase aguda lo más relevante fueron los procesos inflamatorios, los que no se relacionaron a la presencia de nidos de amastigotes, a diferencia de la fase crónica inicial, donde la gran presencia de pseudoquistes fue lo primordial en el estudio histopatológico, para luego desaparecer en la mayoría de los órganos durante la fase crónica propiamente tal. Respecto al daño tisular encontrado, se observó que el órgano más afectado desde el inicio de la infección fue hígado, lo cual podría estar presuntamente relacionado con la muerte de los ratones durante la fase crónica inicial. Si bien durante la fase crónica fue posible encontrar daño tisular en diferentes grados, no se pudo determinar la presencia de pseudoquistes en la mayoría de los tejidos, a diferencia de la PCR que demostró la presencia de T. cruzi en todos los órganos estudiados, mostrando con esto el alto nivel de sensibilidad de la técnica

Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario / La cipermetrina es un insecticida de la familia de los piretroides muy utilizado en agricultura por su capacidad letal. Sin embargo, su uso inadecuado puede provocar intoxicaciones en humanos y animales con importantes daños neurológicos. El objetivo de este trabajo es conocer los efectos de una dosis subletal única intraperitoneal de cipermetrina sobre la histología de cerebelo en ratones CF-1, utilizando inmunohistoquímica para cuantificar proliferación (ki-67) y apoptosis celulares (Apaf-1), y hematoxilina-eosina para analizar la morfología tisular. Se utilizaron 33 ratones distribuídos en tres grupos: control (n= 3), control vehículo (n= 15) y experimental con cipermetrina (n= 15), sacrificándose 3 animales por grupo los días 1- 8,6- 17,2- 25,8 y 34,4. El análisis estadístico se hizo con Mann Withney Test. Los resultados indicaron que en los días 17,2 y 25,8 ocurre una disminución del número de células de Purkinje estadísticamente significativa, y aparentemente no relacionada con los procesos de apoptosis y proliferación celulares / Financiamiento parcial: Proyecto Fondecyt 1101046-2010-2012

Memoria para optar al Titulo Profesional de Médico Veterinario / La tripanosomiasis americana (o enfermedad de Chagas) es una enfermedad parasitaria endémica en Latinoamérica. Cerca de 8 millones de personas estarían infectadas con el agente etiológico, Trypanosoma cruzi. En el presente trabajo experimental, se evaluaron dos grupos de ratones hembra, de las cepas A.Sw y CF1, infectados experimentalmente con el clon Dm28c de T. cruzi. Los resultados obtenidos demostraron que los ratones de la cepa A.Sw se comportaron como más resistentes que los de la cepa CF1, con mortalidades de 20% y 100%, respectivamente. Sin embargo, los animales A.Sw alcanzaron un mayor nivel de parasitemia. Al aplicar la técnica de reacción en cadena de la polimerasa (PCR) en varios tejidos, se observó que todos fueron positivos a la presencia de T. cruzi. Todas las muestras de tejido de los animales CF1 se mantuvieron positivas, mientras que algunas muestras de los ratones de la cepa A.Sw fueron negativas. El único tejido que permaneció positivo durante todo el estudio fue el cardiaco. Los resultados obtenidos implicarían que aplicación de la técnica de PCR en tejidos permite evidenciar la persistencia del parásito en animales supervivientes aún cuando la parasitemia es negativa

Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario / El receptor NMDA puede ser funcionalmente modulado por ligandos que actúan en diversos sitios del receptor. En el presente estudio se investigó la acción antinociceptiva de fármacos que actúan en distintos sitios de modulación del receptor: (±) CPP (bloqueador competitivo del sitio de glutamato), ketamina (bloqueador no competitivo del receptor), así como de combinaciones equianalgésicas de (±) CPP y ketamina, administrados por vía intratecal. Se utilizaron ratas Sprague-Dawley macho a las que se les indujo monoartritis mediante la administración intra-articular de adyuvante de Freund completo. La nocicepción fue evaluada electrofisiológicamente bajo anestesia, mediante el test de reflejo nociceptivo C y el wind-up espinal. Los resultados mostraron que en las ratas monoartríticas los fármacos y sus combinaciones indujeron efectos antinociceptivo dosis-dependiente de magnitud variable: (±) CPP fue más potente que ketamina; la combinación (±) CPP/ketamina mostró solo un efecto aditivo. Se concluye que la utilización de antagonistas competitivos y no competitivos del receptor NMDA o de sus combinaciones frente a dolor artrítico es actualmente no viable, porque aquellos fármacos más activos presentan efectos colaterales psicodislépticos a las dosis que producirían un efecto antinociceptivo substancial. La combinación de estos fármacos, por vía intratecal y en animales anestesiados, no representa una alternativa superior a los fármacos individuales / Proyecto FONDECYT 1040873

Memoria para optar al Titulo Profesional de Médico Veterinario / Existen evidencias que el propanolol inhibe la potenciación sináptica de largo plazo en rebanadas de hipocampo, sugiriendo que este compuesto deprime la transducción de señales dependiente de la activación del receptor -adrenérgico. En la corteza occipital, se ha descrito también el fenómeno de la potenciación sináptica de largo plazo, caracterizado por un aumento progresivo en la actividad de las neuronas piramidales, el cual puede ser evocado por estimulación de alta frecuencia de la fibra neuronal. la potenciación sináptica occipital, al igual que en el hipocampo, depende principalmente de receptores NMDA, pero además se ha visto una importante acción de los receptores -adrenérgicos. Se estudió el efecto de la administración intraperitoneal de propanolol en la potenciación de largo plazo occipital de la rata. Ratas albinas de la cepa Sprague-Dawley de 150-300 g. fueron anestesiadas con uretano (1.5 g/Kg de peso vivo). La estimulación consistió en pulsos simples de onda cuadrada de 100 s de duración, 0.2 Hz y de intensidad creciente (entre 50 y 200 A), con el objeto de determinar la máxima amplitud asintótica de las respuestas evocadas contralaterales. La potenciación de largo plazo se indujo aplicando un tren tetanizante de ondas rectangulares monofásicas de 500 ms de duración, 312 Hz, y una intensidad 50% mayor que la necesaria para obtener respuestas basales. Los resultados muestran que propanolol (1, 25; 2,5 y 5,0 mg/kg i.p.), indujo una inhibición dosis-dependiente de la potenciación sináptica de largo plazo. Esta observación indica que propanolol es capaz de interferir a nivel cortical con el componente noradrenérgico mediado por receptores beta en la potenciación de largo plazo. Dado que la potenciación sináptica es el principal fenómeno que sustenta los mecanismos centrales involucrados en el desarrollo de la memoria y el aprendizaje, el presente estudio puede contribuir a futuras aplicaciones clínicas, en situaciones de estrés crónico y/o malnutrición perinatal donde ocurren cambios en la disponibilidad de noradrenalina central y/o en la densidad de sus receptores, en donde la activación de los receptores -adrenérgicos podría ser insuficiente comprometiendo procesos de memoria y aprendizaje. En este sentido, tal vez parte de los esfuerzos terapéuticos futuros para el tratamiento de estos desórdenes deberían estar dirigidos hacia la corrección farmacológica de los niveles endógenos de noradrenalina central con el objeto de paliar los déficits de aprendizaje y memoria que acompañan a estos cuadros crónicos

Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario / El objetivo del presente estudio fue evaluar el impacto de la adición en la dieta de perros, del extracto de Quillaja saponaria (QS), sola y/o asociada con Yucca schidigera (YS), sobre la consistencia fecal, evaluada cualitativamente mediante el “Score” fecal y la emisión de gases, generadores del mal olor fecal, como: amoníaco (NH3), ácido sulfhídrico (H2S) y tetrahidrotiofeno (THT). Se utilizaron 22 perros, ubicados en caniles individuales y alimentados por 7 días con una dieta Control, (sin extractos), que luego se distribuyeron en 3 grupos. Los cuales fueron alimentados por 25 días con una dieta Control, dieta QS (que poseía extracto de QS) y dieta QS + YS (que poseía extracto de QS con YS), respectivamente. Durante el ensayo, los animales alimentados con las dietas experimentales, se recolectaron las heces producidas, en 5 días diferentes y se evaluó la consistencia fecal, mediante el uso del “Score” fecal, que clasifica las heces de duras a blandas con puntajes de 0 a 5. Posteriormente se determinó las concentraciones de H2S, THT y NH3, durante un período de 8 hrs., con mediciones cada una hora; las lecturas de los compuestos se determinaron cada 10 segundos por 3 minutos en cada hora. La dieta QS + YS generó una disminución (P ≤ 0,05) del “Score” fecal pero este se mantuvo cercano a 4, que es considerado como aceptable, y el factor individual del perro resultó ser una variable más significativa (P ≤ 0,001), que la dieta (P = 0,027). Todas las variables consideradas en el modelo estadístico, en la determinación de gases, fueron altamente significativas (P ≤ 0,001), es decir el efecto del perro, la dieta y el tiempo de medición. Las dietas con agentes desodorizantes generaron una disminución (P ≤ 0,05) de la producción de H2S, THT y NH3, con respecto a la dieta Control, pero la dieta QS + YS generó una mayor disminución (P ≤ 0,05) en la producción de THT con respecto a la dieta QS, sin haber diferencias en los otros gases. / Desert King Chile

Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario / La Diabetes Mellitus (DM) es una de las enfermedades crónicas no transmisibles más frecuentes del ser humano a todas las edades y se considera un problema de salud pública por su elevada morbilidad y mortalidad. El principal objetivo del tratamiento de pacientes con Diabetes Mellitus tipo 1 (DM1) es la normalización de los niveles de glucosa sanguínea. El transplante de islotes de Langerhans, como tratamiento experimental, es una técnica mínimamente invasiva con escasa morbilidad y nula mortalidad. Actualmente es posible afirmar que los islotes pancreáticos transplantados pueden por sí mismos tanto restablecer el control metabólico perdido como prevenir las complicaciones derivadas de la hiperglicemia mantenida. La mayor dificultad en este tratamiento es la incapacidad de obtener suficientes islotes viables desde un páncreas donado para revertir la DM1 en el receptor. El aislamiento de islotes es un proceso largo, complejo y costoso y depende fuertemente de la experiencia del grupo de trabajo. Durante este proceso muchos islotes se ven afectados por estrés oxidativo y posterior apoptosis. Más investigación en esta área es requerida. En este trabajo se aplicaron dos métodos estandar para el aislamiento de islotes pancreáticos de rata, microdisección y aislamiento enzimático, en un nuevo modelo animal: el cobayo (Cavia porcellus), que comparte con el ser humano la inhabilidad de sintetizar la vitamina C, molécula conocida por sus importantes propiedades antioxidantes. Además, se evaluó la funcionalidad de los islotes recién aislados, utilizando la prueba de secreción y contenido total de insulina. Se concluyó que el aislamiento de islotes de Langerhans por microdisección es un método posible de aplicar en el modelo animal de cobayo con propósitos de investigación, debido al limitado número de islotes que se pueden obtener manualmente. Entrega islotes de buena calidad y con un funcionamiento adecuado. La digestión enzimática, por su parte, es una metodología que requiere más estudio para lograr una aplicación sistemática y exitosa en el cobayo, dada la dificultad técnica para la obtención de islotes viables, aunque potencialmente esta última metodología entregaría una mayor cantidad de islotes