O câncer de mama permanece como o segundo tipo de câncer mais freqüente no mundo e o primeiro entre as mulheres (INCA, 2007). Porém, os mecanismos envolvidos no processo de gênese dos tumores mamários mesmo sendo intensamente estudados nos últimos 30 anos, ainda não são bem definidos. Vários estudos apontam que a susceptibilidade em função da genética é uma causa relevante ao surgimento do tumor, porém não a principal. Outros fatores tais quais o ambiente e dieta tendem a ser mais significantes nesse processo. Para a indução dos tumores em animais, a maioria dos modelos utiliza carcinógenos pertencentes à família dos hidrocarbonetos aromáticos policíclicos, dentre eles o DMBA (7,12-dimetil bezantraceno). O DMBA foi utilizado neste estudo com o objetivo de induzir tumor mamário, estabelecendo-se assim um modelo para estudos futuros, quantificando e classificando as lesões nas diferentes concentrações do carcinógeno, avaliando também a proliferação celular através do método de imunohistoquímica PCNA nos diferentes tumores encontrados. Neste estudo, em todos os grupos houve o desenvolvimento de tumores mamários, sendo estes mais freqüentes nos grupos de 3, 6 e 9 mg. O tipo de tumor mais freqüente foi o Adenocarcinoma A, seguido de Adenoacantoma e Adenocarcinoma Misto em menor freqüência. Sendo assim, concluiu-se através deste trabalho que o DMBA produz um modelo de carcinogênese mamária em camundongos. / The breast cancer remains the second most common cancer type in the world and first among women (INCA, 2008). However, the mechanisms involved in the origin even being intensively studied in the past 30 years, are still not well defined. Several studies suggest that genetic susceptibility is a relevant issue to the tumor development, however others factors can favor tumor growing. Among such factors the environment and diet are considered more significant. For mice tumor induction, most significant carcinogens used belonging to the polycyclic aromatic hydrocarbons family, where DMBA (7,12-dimethyl bezantraceno) take place. The DMBA was used in this study in order to induce mammary tumors, establishing the real conditions for future studies in our mice colony, classifying and quantifying the lesions. Cell proliferation was also evaluated though the immunohistochemistry against PCNA in different tumors classified. In this study, all concentration resulted in breast tumor development, which was more frequently observed in groups of 3, 6 and 9 mg. The most common type tumor regarded was Adenocarcinoma A, followed by Adenoacantoma and Mixed A/B in lower frequency. In conclusion, DMBA was able to produces a model of mammary carcinogenesis in mice.

O câncer de mama permanece como o segundo tipo de câncer mais freqüente no mundo e o primeiro entre as mulheres (INCA, 2007). Porém, os mecanismos envolvidos no processo de gênese dos tumores mamários mesmo sendo intensamente estudados nos últimos 30 anos, ainda não são bem definidos. Vários estudos apontam que a susceptibilidade em função da genética é uma causa relevante ao surgimento do tumor, porém não a principal. Outros fatores tais quais o ambiente e dieta tendem a ser mais significantes nesse processo. Para a indução dos tumores em animais, a maioria dos modelos utiliza carcinógenos pertencentes à família dos hidrocarbonetos aromáticos policíclicos, dentre eles o DMBA (7,12-dimetil bezantraceno). O DMBA foi utilizado neste estudo com o objetivo de induzir tumor mamário, estabelecendo-se assim um modelo para estudos futuros, quantificando e classificando as lesões nas diferentes concentrações do carcinógeno, avaliando também a proliferação celular através do método de imunohistoquímica PCNA nos diferentes tumores encontrados. Neste estudo, em todos os grupos houve o desenvolvimento de tumores mamários, sendo estes mais freqüentes nos grupos de 3, 6 e 9 mg. O tipo de tumor mais freqüente foi o Adenocarcinoma A, seguido de Adenoacantoma e Adenocarcinoma Misto em menor freqüência. Sendo assim, concluiu-se através deste trabalho que o DMBA produz um modelo de carcinogênese mamária em camundongos. / The breast cancer remains the second most common cancer type in the world and first among women (INCA, 2008). However, the mechanisms involved in the origin even being intensively studied in the past 30 years, are still not well defined. Several studies suggest that genetic susceptibility is a relevant issue to the tumor development, however others factors can favor tumor growing. Among such factors the environment and diet are considered more significant. For mice tumor induction, most significant carcinogens used belonging to the polycyclic aromatic hydrocarbons family, where DMBA (7,12-dimethyl bezantraceno) take place. The DMBA was used in this study in order to induce mammary tumors, establishing the real conditions for future studies in our mice colony, classifying and quantifying the lesions. Cell proliferation was also evaluated though the immunohistochemistry against PCNA in different tumors classified. In this study, all concentration resulted in breast tumor development, which was more frequently observed in groups of 3, 6 and 9 mg. The most common type tumor regarded was Adenocarcinoma A, followed by Adenoacantoma and Mixed A/B in lower frequency. In conclusion, DMBA was able to produces a model of mammary carcinogenesis in mice.

Banca Examinadora: Regina Lúcia Mendonça Lopes, Teresa Caldas Camargo, Fernanda Carneiro Mussi, Normélia Maria Freire Diniz, Tânia Maria de Araújo, Dora Sadigursky e Solange Maria dos Anjos Gesteira. / Submitted by Samuel Real Mota (samuel.real@ufba.br) on 2013-08-09T13:19:48Z No. of bitstreams: 1 6ª def. de Tese - Rosana Azevedo - 11-09-09.pdf: 1037942 bytes, checksum: a87519079329ae31dda492fcdc2491a8 (MD5) / Approved for entry into archive by Flávia Ferreira(flaviaccf@yahoo.com.br) on 2013-09-12T16:48:19Z (GMT) No. of bitstreams: 1 6ª def. de Tese - Rosana Azevedo - 11-09-09.pdf: 1037942 bytes, checksum: a87519079329ae31dda492fcdc2491a8 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-09-12T16:48:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 6ª def. de Tese - Rosana Azevedo - 11-09-09.pdf: 1037942 bytes, checksum: a87519079329ae31dda492fcdc2491a8 (MD5) Previous issue date: 2009-09-11 / Em razão de sua elevada incidência, a neoplasia da mama torna-se uma das grandes preocupações epidemiológicas, sobretudo, pelos impactos psicológicos e sociais que acarretam para a saúde da mulher. Estudo qualitativo de abordagem fenomenológica tem como objeto os modos de ser da mulher mastectomizada com reconstrução mamária, objetivando desvelar o sentido que funda o comportamento do ser mulher mastectomizada com reconstrução mamária. A análise interpretativa foi pautada nos pressupostos teóricos filosóficos de Martin Heidegger. A entrevista fenomenológica, aplicada a nove mulheres mastectomizadas com reconstrução mamária, ocorreu no período outubro de 2008 a março de 2009, em uma instituição filantrópica de referência para o tratamento do câncer localizada em Salvador – Bahia. A entrevista foi conduzida pelas seguintes questões norteadoras: Como tem sido o seu dia-a-dia após a retirada da mama? Como foi para a senhora ter a mama reconstruída? O que veio a ser o seu cotidiano após a reconstrução mamária? A partir da compreensão vaga e mediana, presente nos depoimentos das mulheres, foram construídas três unidades de significado: o medo está relacionado ao diagnóstico de câncer, ao tratamento, a mastectomia e a recidiva do câncer de mama; o grupo de apoio terapêutico à mulher mastectomizada mostra-se como um suporte determinante no enfrentamento das dificuldades advindas após o diagnóstico de câncer de mama; a reconstrução mamária se apresenta as mulheres como marco inicial para uma vida nova. Pela interpretação compreensiva heideggeriana, construí as seguintes unidades de significação: o medo, como possibilidade própria da presença, revelou-se ao ser-mulher submetida à reconstrução mamária, a partir da vivência do câncer e suas consequências; o ser-mulher submetida à reconstrução mamária experiencia a autenticidade da presença no ser-com-o-outro nos grupos de apoio; o ser-mulher e o cotidiano frente a mastectomia e a reconstrução mamária: possibilidade e de-cisão. Compreendi que, embora as mulheres na sua cotidianidade não se encontrassem mais em tratamento para o câncer de mama, o comportamento do medo estava velado no ser-mulher como modo de disposição, pois as lembranças remetiam a trajetória do câncer e em todo o tratamento. Em outro movimento interpretativo, o ser-mulher inserida nos grupos de apoio terapêutico experiencia a autenticidade da presença no ser-com-os-outros no cotidiano. Nesta compreensão, a mulher é um ser-com, não sendo possível separar-se daqueles com os quais mantém suas relações no mundo. Compreendi que, a possibilidade da presença de preocuparse com os outros se revelou no momento do cuidado. Destaco esta possibilidade da presença, no momento de assistir o sujeito do cuidado, que nas práticas de saúde atuais vêm sendo fragmentado em decorrência do modelo biomédico, que desconsidera os aspectos subjetivos do adoecer humano. Após a reconstrução mamária, as mulheres foram conduzidas a uma nova situação existencial, se redescobrindo como seres de possibilidades, lançadas em um mundo numa experiência complexa de ex-sistir-com-câncer-de-mama. / Salvador

Made available in DSpace on 2016-08-29T14:10:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_565_.pdf: 513847 bytes, checksum: 5c0c73afd5cdd87b481c5b16c5964275 (MD5) Previous issue date: 2007-08-10 / Historicamente, a população foi mantida distante das discussões em torno das políticas públicas de saúde no Brasil, marcadas por interesses muitas vezes distantes das necessidades da população e por uma relação autoritária, técnica e mercantil entre médico e paciente e entre serviços de saúde e população. Com a Reforma Sanitária e a implementação do SUS, nas décadas de 80 e 90, passa-se a pensar a saúde numa nova ótica, integrando ações curativas e preventivas construídas com a participação popular. Em se tratando do câncer de mama, que é a principal causa de neoplasia e a segunda causa de mortalidade por câncer entre mulheres no Brasil, a participação dos usuários na elaboração e acompanhamento da efetivação destas políticas é essencial. Este estudo objetivou explorar repercussões do câncer de mama na vida das mulheres, as demandas decorrentes e suas relações com as Políticas Públicas de Saúde. Participaram 08 mulheres que tiveram câncer de mama e realizaram o tratamento pelo SUS em Vitória/ES. Todas tiveram o diagnóstico há pelo menos três anos. Este critério deveu-se ao fato de que estas mulheres puderam relatar tanto as experiências atuais, como as vivências e enfrentamentos que passaram no período do diagnóstico, da cirurgia e do tratamento. Considerando a importância do contexto vivenciado pelas mulheres ao longo de toda a vida na elaboração da experiência do câncer de mama, utilizou-se a técnica de História Oral na coleta de dados. Dessa forma, ao se trabalhar com as narrativas das mulheres sobre suas histórias de vida, foi enfocada, dentro de cada história, a vivência da mastectomia. A análise dos dados foi feita utilizando a Análise de Conteúdo. Foi possível observar que as mulheres possuíam, antes do diagnóstico, uma representação do câncer como morte inevitável e imediata. O momento do diagnóstico foi marcado por muito sofrimento, e as dificuldades em conseguir uma vaga para consulta e cirurgia aumentaram ainda mais a angústia. Após a cirurgia, as restrições das atividades cotidianas e o desejo de reconstrução da mama são questões que afligiram as participantes. Ainda assim, relataram uma luta constante em busca de qualidade de vida, considerando-se vencedoras. Percebe-se que as Políticas de Saúde contemplam na legislação as mulheres com câncer de mama, entretanto, isto não se efetiva totalmente na prática. Apesar do investimento em campanhas preventivas, as mulheres ficam meses aguardando por uma consulta após detectarem um nódulo. Além disso, a reconstrução mamária, direito garantido pelo SUS, não está sendo realizada no Espírito Santo, pois os profissionais alegam que o valor recebido pelo procedimento não é o suficiente. Tais resultados apontam a necessidade da mobilização social buscando garantir que os direitos assegurados pela lei sejam cumpridos.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade UnB Gama, Programa de Pós-Graduação em Engenharia Biomédica, 2017. / Submitted by Raquel Almeida (raquel.df13@gmail.com) on 2017-11-16T16:57:50Z No. of bitstreams: 1 2017_FernandaCardosoLemos.pdf: 3984347 bytes, checksum: 7468cb916dc16e5ff95b4389d6bd98ba (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2017-12-01T21:45:25Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_FernandaCardosoLemos.pdf: 3984347 bytes, checksum: 7468cb916dc16e5ff95b4389d6bd98ba (MD5) / Made available in DSpace on 2017-12-01T21:45:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_FernandaCardosoLemos.pdf: 3984347 bytes, checksum: 7468cb916dc16e5ff95b4389d6bd98ba (MD5) Previous issue date: 2017-12-01 / O avanço tecnológico tem propiciado novas técnicas de avaliação da neoplasia mamária com ações preventivas, sendo assim, a Tomossíntese Mamária Digital (TMD) representa um novo procedimento de diagnóstico para o rastreamento do câncer de mama, especialmente no estágio inicial da doença. Dessa maneira, são imprescindíveis novos estudos científicos mais específicos e abrangentes em torno desta nova técnica. Esta pesquisa foi desenvolvida por meio de uma Revisão Sistemática (RS), onde realizou a análise crítica da literatura a fim de indicar a efetividade e a aplicabilidade do método de TMD para o rastreamento da neoplasia mamária em relação à Mamografia Digital (MD). Os resultados encontrados foram analisados e baseados em sete artigos científicos com alto fator de impacto. Estes artigos foram analisados seguindo os critérios da escala PEDro, e a qualidade da pesquisa foi validada de acordo com a escala AMSTAR. A RS foi realizada de forma randomizada e retrospectiva, em que o primeiro grupo foi composto por três artigos que considerou a TMD mais eficiente na precisão do diagnóstico que a MD, ou seja, 43%.O segundo grupo, composto também por três artigos, apresentou a precisão e a acurácia da TMD superior em relação a MD, ou seja, 43%.O terceiro grupo não obteve resultado estatístico necessário para se chegar a um valor de precisão, tornando seus dados inconclusivos com 14% do índice estatístico.Assim, pode observar que grande parte da coleta dos dados por meio da RS demonstrou que a eficiência da aplicação da TMD,concomitante ou não à MD, apresentou resultados positivos para os achados mamários, enquanto uma pequena parcela não obteve dados necessários, devido alguns percalços que dificultaram a análise de informações. / Technological advances have provided new techniques for the evaluation of breast cancer with preventive actions, in which Digital Breast Tomosynthesis (DBT) represents a new diagnostic procedure for screening, especially, at the initial stage. In this way, more specific and comprehensive scientific studies are needed around this new technique. This research was developed through a Systematic Review (SR) in which a critical analysis of the literature was performed in order to indicate the effectiveness and applicability of the DBT method for the screening of breast cancer in relation to Digital Mammography (DM). The results were analysed based on seven scientific articles with high impact factor. These articles were analysed according to the criteria of the PEDro scale and the research quality was validated according to the AMSTAR scale. The SR was performed randomly and retrospectively, in which the first group consisted of three articles that considered the DBT more efficient in the diagnostic accuracy than the DM that was 43%. The second group, also composed by three articles, presented the precision and accuracy of the DBT higher in relation to DM that was 43%. The third group did not obtain statistical results needed to achieve a desirable precision value, in which its data was inconclusive with 14% of the statistical index. Thus, it can be observed that a large part of the data collection through SR has shown that the application of DBT, concomitant or not to DM, presented positive results for the breast findings, whereas a small portion did not obtain necessary data due to some mishaps that hampered the information analysis.

Submitted by Aline Aparecida Silva Stella null (alineasstella@hotmail.com) on 2017-06-20T12:30:27Z No. of bitstreams: 1 DEFESA Aline Stella.pdf: 1152999 bytes, checksum: c574962c67c5ff1a6f1d0fe076226c04 (MD5) / Approved for entry into archive by Luiz Galeffi (luizgaleffi@gmail.com) on 2017-06-21T13:44:37Z (GMT) No. of bitstreams: 1 stella_aas_me_jabo.pdf: 1152999 bytes, checksum: c574962c67c5ff1a6f1d0fe076226c04 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-21T13:44:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 stella_aas_me_jabo.pdf: 1152999 bytes, checksum: c574962c67c5ff1a6f1d0fe076226c04 (MD5) Previous issue date: 2017-05-23 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A mastite é a principal doença que acomete os rebanhos leiteiros e promove grandes perdas na produção devido a alterações na composição do leite e prejuízos na saúde do animal, aumentando assim os custos de produção. Caracteriza-se pela resposta inflamatória da glândula mamária a agentes infecciosos, alterando sua fisiologia e metabolismo. Estudo de expressão gênica vem sendo empregado em vários organismos com a finalidade de identificar genes relacionados com características economicamente importantes como resistência a doenças. Com o objetivo de compreender melhor os mecanismos de resposta imune envolvidos no fenótipo de resistência/susceptibilidade à mastite, foi realizada a quantificação da expressão relativa dos genes do Fator Estimulador de Colônias de Granulócitos 3 (CSF3) e Lactoperoxidase (LPO), em leite de búfalas mestiças saudáveis e com mastite, por meio da técnica de PCR quantitativa em tempo real (qRT-PCR). Para isso, foi realizada a extração de RNA total, com Trizol, de células somáticas do leite de doze animais diagnosticados com mastite e de doze animais livres da infecção. Foram realizadas análises de qualidade e quantificação do RNA total e das contaminações por DNA genômico para garantir a integridade das amostras. A quantificação da expressão gênica foi realizada por meio do método do Delta Delta Ct. Os genes GAPH, HPRT1, EEF1A1 e RPLP0, foram selecionados na literatura, e testados como genes de referência. As análises referentes às quantificações foram realizadas com os valores de Ct obtidos para cada gene. O gene CSF3 foi significativamente mais expresso em animais com mastite em comparação com animais sem mastite (P<0,001) e 5,14 vezes mais expresso na amostra alvo do que na amostra de referência. O CSF3 é uma citocina naturalmente produzidas e secretadas por uma grande variedade de células pertencentes ou não ao sistema imune. Desempenham importante papel na defesa do hospedeiro, já que regulam parte da atividade das células que participam da imunidade inata e específica, o que demonstra importância no seu uso no diagnóstico e prognóstico das mastites. O gene LPO expressa uma proteína sintetizada na glândula mamária por íons tiocianato (SCN-), originados por metabolismo hepático e peróxido de hidrogênio (H2O2), derivado da atividade dos leucócitos e outras células, para gerar produtos reativos com intensa atividade antimicrobiana. Esse foi 2,41 vezes mais expresso em animais com mastite em relação a animais sem mastite (p-valor = 0,097), não havendo diferença significativa, porém a mastite é uma doença multifatorial e afetada por muitos genes, sendo necessário mais estudos com animais em diferentes fases de infecção e incluindo outros genes para compreender o mecanismo de resposta imune relacionado a mastite.

A lacuna existente na compreensão das repercussões do câncer de mama feminino para casais que vivenciaram esse processo motivou a realização deste estudo, que objetivou compreender os sentidos para o câncer de mama feminino entre casais que permaneceram unidos na vivência dessa enfermidade, por meio do referencial teórico do construcionismo social. Os dados foram coletados numa amostra de sete casais entrevistados separadamente, em entrevistas semi-estruturadas com a utilização do diário de campo. A partir disso, foram identificadas três grandes temáticas referentes aos sentidos do câncer e da conjugalidade. Os sentidos do câncer foram agrupados no item vivência da doença, que contém os temas: confirmação da doença e fase do tratamento, esta subdividida nos seguintes sub-temas: a) ficando mais em casa; b) conversando omitindo a doença; c) transportando as esposas; d) cuidado fornecido por outras mulheres; e) realização do serviço doméstico: terceirizado; f) sexualidade: afastamento. E os sentidos da conjugalidade foram agrupados na temática ser marido e ser esposa. Essas temáticas emergiram dos discursos dos entrevistados ancorados na história do câncer e na moral do modelo de conjugalidade tradicional. O câncer foi associado a uma doença com sentidos de provação e morte, que despertou nos participantes sentimentos de revolta e ansiedade e a relação com Deus. Além disso, o compromisso assumido no casamento e a não revelação dos sentimentos mais íntimos experimentados por eles em relação ao câncer de mama, possibilitou a manutenção do laço conjugal em meio à experiência dolorosa da doença. Diante disso, sugere-se a relevância da assistência interdisciplinar com o intuito de desconstruir a negatividade associada ao câncer, bem como a reflexão sobre a relevância do discurso religioso como ferramenta do cuidado assistencial a essa população. / The existent gap in the comprehension of repercussions of the feminine breast cancer for couples that lived this process motivated the accomplishment of this study, which aimed to understand the meanings for the feminine breast cancer among couples that stayed united in living of this illness, through the social construction theory. The data were collected in a sample of seven couples interviewed separately, in semi-structured interviews with the use of field notes. From this, were identified three thematic related to the meanings of cancer and related to couples\' life. The meanings of cancer were gathered in disease living item that has these themes: disease confirmation and phase of treatment. The phase of treatment was subdivided in the following sub-themes: a) staying more at home; b) talking omitting the disease; c) transporting the wives; d) care supplied by other women; e) accomplishment of the domestic service: servant; f) sexuality: stand back. And the meanings of couples\' life were gathered at the thematic to be husband and to be wife. These thematic emerged of the interviewees\' speeches anchored in the history of cancer and in the moral of traditional couples\' life model. The cancer was associated it a disease with meanings of probation and death, that emerged in the participants feelings of revolt and anxiety in relation with God. Besides, the commitment assumed in the marriage and the non revelation of the most intimate feelings experienced by them in relation to breast cancer, it made possible the maintenance of the matrimonial bow amid the painful experience of the disease. Before this, it is suggested the importance of interdisciplinary assistance with the intention to construct different meanings than negativity of cancer, as well as the reflection of the importance of the religious discourse as a tool in the care of this population.

Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2016-03-31T15:35:54Z No. of bitstreams: 1 eduardoferreiradeoliveira.pdf: 786209 bytes, checksum: 0c39ed35a120253c3f4e0eab5dc08de5 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2016-04-24T02:59:11Z (GMT) No. of bitstreams: 1 eduardoferreiradeoliveira.pdf: 786209 bytes, checksum: 0c39ed35a120253c3f4e0eab5dc08de5 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-24T02:59:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 eduardoferreiradeoliveira.pdf: 786209 bytes, checksum: 0c39ed35a120253c3f4e0eab5dc08de5 (MD5) Previous issue date: 2013-07-05 / A mastite continua a ser um grande desafio para cadeia do leite e causa grandes prejuízos como a perda de produção, o descarte precoce de animais, os custos de tratamento e interferência na qualidade do leite. Os patógenos contagiosos são causadores de grande parte deste problema, com isso, os índices de mastite subclínica aumentam, levando consequentemente, ao aumento da contagem de células somáticas (CCS). Os principais patógenos contagiosos são Staphylococcus aureus e Streptococcus agalactiae. A CCS é utilizada em todo mundo como um indicador para avaliar e monitorar a saúde da glândula mamária e auxilia em programas de controle e prevenção de mastite. O conhecimento gerado a partir de estudos epidemiológicos específicos, sobre o padrão de infecção, prevalência de patógenos contagiosos da mastite em rebanhos bovinos leiteiros, distribuição temporal e espacial de agentes contagiosos da mastite e análise econômica de medidas sanitárias em nível de rebanho e região podem ser utilizados no aprimoramento dos programas de controle e prevenção da mastite. A epidemiologia espacial auxilia o entendimento da distribuição geográfica de dados ocorridos no tempo e espaço, e permite analisar de maneira abrangente a dinâmica de uma doença, indicando formas de atuações frente ao problema em nível de região. O objetivo deste estudo foi avaliar a relação entre análise espacial da contagem de células somáticas e prevalência de patógenos contagiosos da mastite entre os rebanhos bovinos leiteiros. Em uma população de 112 rebanhos, foram coletadas amostras para isolamento de S. aureus e S. agalactiae e para realização de CCS. A dependência espacial para CCS foi avaliada por meio de semivariogramas e, quando identificada dependência espacial, por meio do método de Krigagem foi criado o mapa de isolinhas para a CCS. Rebanhos com isolamento de S. aureus e S. agalactiae tiveram 9,3 vezes mais chances de apresentar valores superiores a 400.000 células/mL. Foi observada alta prevalência (89,0 a 100,0%) e distribuição homogênea entre as regiões para o S. aureus, no entanto não foi observada distribuição homogênea para S. agalactiae, cuja prevalência variou de média a alta (16 a 93%) entre as regiões estudadas. Foi observada dependência espacial moderada (GD=37,6; r2=0,31) para a CCS entre os rebanhos. Foi observada associação entre a prevalência de S. agalactiae e a CCS de acordo com as regiões avaliadas em função dos resultados da análise espacial. Rebanhos na área de CCS têm até 5,5 vezes mais chances de terem S. agalactiae isolado nas amostras de leite de tanque. A análise espacial da CCS de rebanhos pode ser uma ferramenta para auxiliar os envolvidos na tomada de decisão em nível de região no que se refere a adoção de medidas de controle e prevenção da mastite. / Mastitis continues to be a major challenge for the milk chain and cause great losses as loss of production, the early disposal of animals, treatment costs and interference in the quality of the milk. The contagious pathogens are causing much of the problem, with this, the contents of subclinical mastitis increases, therefore leading to increased somatic cell count (SCC). The main contagious pathogens are Staphylococcus aureus and Streptococcus agalactiae. The SCC is used throughout the world as an indicator to evaluate and monitor the health of the mammary glands and assists control programs and prevention of mastitis. The knowledge generated from specific epidemiological studies, on the pattern of infection, prevalence of contagious pathogens of mastitis in dairy cattle herds, temporal and spatial distribution of contagious mastitis agents and economic analysis of sanitary and herd-level region can be used in the improvement of control and prevention of mastitis. Spatial epidemiology helps the understanding of the geographical distribution of data occurring in time and space, and allows comprehensively examine the dynamics of disease, indicating forms of the actuations problem region level. The objective of this study was to evaluate the relationship between spatial analysis of somatic cell counts and prevalence of contagious mastitis pathogens between dairy cattle herds. In a population of 112 herds, samples were collected for isolation of S. aureus and S. agalactiae and for SCC. Spatial dependence for SCC was evaluated by means of semivariograms and, when identified spatial dependency, using the Kriging method was created the map of isolines for SCC. Herds with isolation of S. aureus and S. agalactiae had 9.3 times more chances to present values above 400,000 cells/mL. High prevalence was observed (89.0 to 100.0%) and homogeneous distribution among the regions for S. aureus, however homogeneous distribution was not observed for S. agalactiae, whose prevalence ranged from medium to high (16 to 93%) among the regions studied. Moderate spatial dependence (GD = 37.6; r2= 0.31) was observed for SCC between herds. Association between the prevalence of S. agalactiae and SCC was observed in accordance with regions evaluated in accordance with the results of spatial analysis. Herds in the area of SCC have up to 5.5 times more likely to have isolated S. agalactiae of tank milk samples. The spatial analysis of the SCC of herds can be a tool to assist those involved in decision-making at the level of the region as regards the adoption of control measures and prevention of mastitis.

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2017-01-17T17:57:50Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 926248 bytes, checksum: 689f34fba92e568be53e3f913e0cee98 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-17T17:57:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 926248 bytes, checksum: 689f34fba92e568be53e3f913e0cee98 (MD5) Previous issue date: 2016-07-28 / Este trabalho foi desenvolvido com o objetivo de estudar o efeito dos níveis de desempenho durante a recria de animais cruzados Holandês: Gir (H:G) sobre o desenvolvimento da glândula mamária; validar a técnica de ultrassom como ferramenta de monitoramento instantâneo e não-invasivo dos tecidos que compões o parênquima mamário; descrever o procedimento cirúrgico indicado para obtenção de amostras do tecido parenquimal da glândula mamária de novilhas em crescimento. O trabalho foi conduzido no Departamento de Zootecnia da Universidade Federal de Viçosa, Viçosa-MG. Dezoito novilhas mestiças (H: G) com peso inicial médio (102,2 ± 3,4kg) e idade entre 3 e 4 meses foram avaliadas ao longo de 84 dias. As novilhas foram, igualmente, distribuídas (n = 6) entre os tratamentos alto ganho (AG; 1,0 kg/dia), baixo ganho (BG; 0,5 kg/dia) e mantença (MA). A diferença de ganho de peso entre os tratamentos foi alcançada através da quantidade de alimento ofertada de uma mesma dieta a base de silagem de milho, farelo de soja, farelo de soja By pass e minerais com relação volumoso: concentrado de 60:40. O escore de condição corporal (ECC), a amostragem do volumoso e das sobras foram realizadas semanalmente. O peso das novilhas e as avaliação ultrassonográficas da glândula mamária foram realizadas em intervalos de 14 dias. As medidas corporais, as coletas de sangue e o ultrassom na carcaça foram realizadas em intervalos de 28 dias. Paralelamente, foi realizado uma biópsia na glândula mamária de 3 novilhas de cada tratamento no início e meio do experimento para se obter amostras representativas do tecido parenquimal. Ao final do experimento todas as novilhas foram abatidas e em sequência análises bioquímicas, histológicas e de expressão gênica foram realizadas na glândula mamária de cada animal. O consumo de matéria seca e demais nutrientes foi maior para os animais do AG em relação ao BG e este, por sua vez, maior do que MA, confirmando assim a efetividade dos tratamentos propostos. O ganho de peso apresentou comportamento semelhante ao consumo, sendo 0,90 kg/dia para AG, 0,50 kg/dia para BG e 0,10 kg/dia para MA. Novilhas do tratamento AG apresentaram maior ECC, espessura de gordura subcutânea (EGS) e área de olho de lombo (AOL) em avaliações ultrassonográficas da carcaça quando comparado aos demais tratamentos. Nas avaliações ultrassonográficas da glândula mamária houve maior concentração de pixels no parênquima mamário do AG em relação ao BG e MA, os quais não diferiram entre si. Novilhas do tratamento AG apresentaram maior peso de gordura extra-parenquimal e maior concentração de extrato etéreo no parênquima em relação ao tratamento BG e MA. Estes resultados indicam, conjuntamente, uma maior concentração de tecido adiposo no parênquima de animais sob elevado ganho de peso. Com relação às avalições histológicas foi observado maior porcentagem de área ocupada por tecido epitelial no parênquima mamário das novilhas do tratamento BG em relação ao AG e MA. Não foi observado diferença na expressão gênica do IGF-1 entre os tratamentos AG e BG, porém houve maior expressão do TGFR βI no tratamento AG. Dessa forma, conclui-se que novilhas alimentadas para elevado ganho de peso, mesmo com adequado nível de proteína na dieta, acumularam mais gordura na glândula mamária e apresentaram maior expressão de genes que reduzem o crescimento epitelial. No segundo trabalho foi realizado uma análise de regressão da concentração de pixels da região parenquimal da glândula mamária (efeito fixo) em função das medidas de porcentagem de extrato etéreo no parênquima (PAR), porcentagem de proteína no PAR, área ocupada pelo tecido epitelial no PAR, número de adipócitos no PAR, peso da gordura extra-parenquimal e peso do parênquima (efeito aleatório) para estudar a relação entre as variáveis. Em seguida foi realizado uma análise de sensitividade para determinar a acurácia e precisão das equações encontradas. Dentre as variáveis testadas apenas peso de PAR não foi correlacionado com os valores de pixels na região parenquimal. Para as variáveis com correlação significativa foi observado alta acurácia e de média a alta precisão. Imagens de ultrassom permitiram identificar diferentes padrões de crescimento do tecido parenquimal mamário influenciadas pelo nível de desempenho das novilhas. Por fim, foi feito uma descrição dos procedimentos empregados para obtenção de amostras do tecido parenquimal mamário de novilhas em crescimento. Após a amostragem do tecido PAR procedeu-se a extração do RNA e DNA de cada amostra. A integridade das amostras foi comprovada pela relação de absorção entre oRNA (260 nm) e de proteínas (280 nm) acima de 1,80, indicado a qualidade do RNA obtido. / This work was designed to study the effect of performance levels during rearing on the mammary gland development of Holstein: Gyr (H: G) crossbred heifers; validate the ultrasound technique as a feasible tool to monitor instantaneously and non-invasive the parenchymal composition of mammary gland; describe surgical procedure for obtaining the parenchymal tissue samples from mammary glands of growing heifers.The work was performed in the Animal Science Department of Universidade Federal de Viçosa, Viçosa- MG. Eighteen crossbred heifers (H:G) with initial weight (102.2 ± 3,4kg) and aged between 3 and 4 months were evaluated over 84 days. Heifers were equally distributed (n = 6) between the high-gain treatments (HG, 1.0 kg / day), low gain (LG, 0.5 kg / day) and maintenance (MA).The difference in weight gain between treatments was achieved by the amount of feed offered using a single diet based on corn silage, soybean meal, soybean meal and minerals By Pass with roughage: concentrate ratio of 60:40.The body condition score (BCS), sampling of silage and leftovers were taken weekly. The heifer’s weight and ultrasonographic evaluation of the mammary gland were performed in 14 days intervals. The biometric measurements, blood samples and ultrasound on carcass were performed in 28 days intervals.In parallel, a biopsy was performed in mammary glands of heifers (3/treatment) at the beginning and middle of the experiment to obtain representative samples from the parenchymal tissue. At the end of the trial, all heifers were slaughtered and following biochemical, histological and gene expression analysis were performed in the mammary gland of each animal.The dry matter intake and other nutrients was higher for HG heifers when compared with LG and this, in turn, higher than MA, confirming the effectiveness of proposed treatments. Weight gain behaved similarly to intake, being highest gain for HG heifers (0.90 kg/d), 0.50 kg/d for BG and 0.10 kg/day MA.HG heifers showed higher BCS, subcutaneous fat thickness (SFT) and ribeye area (REA) in carcass evaluation when compared to other treatments. In ultrasonographic evaluation of the mammary gland there was a higher pixels concentration in HG mammary parenchyma than BG and MA, which did not differ from each other. HG heifers showed higher extra-parenchymal fat weight and higher concentration of ether extract in the parenchyma than BG and MA heifers. These results indicate, together, a higher concentration of fat in the parenchyma of animals under high weight gain. Regarding to histological evaluations in mammary parenchyma was observed higher percentage of area occupied by epithelial tissue in LG treatment than HG and MA. There was no difference in gene expression of IGF-1 between HG and LG treatments, but there was a greater expression of TGFR βI in HG.Thus, we concluded that heifers fed to show high weight gain, even with adequate level of protein in diet, accumulated more fat in mammary gland and had greater expression of genes that reduce epithelial growth.In the second study was conducted a regression analysis of pixels concentration in mammary parenchyma (fixed effect) in function of ether extract percentage in parenchyma (PAR), protein percentage in PAR, area occupied by epithelial tissue in PAR, number of adipocytes in the PAR, weight of extra-parenchymal fat and weight of parenchyma (random effect) to study the relationship between variables.At sequence, a sensitivity analysis was performed to determine the accuracy and precision of the equations found. Among the variables tested only PAR weight was not correlated with the pixel values in the parenchymal region. Between variables with significant correlation was observed high accuracy and from middle to high precision. Ultrasound images allowed identifying different growth patterns of mammary parenchymal tissue influenced by the level of performance of the heifers.Finally, it was described the procedures used to obtain samples of mammary parenchymal tissue in growing heifers. After sampling was carried out the RNA and DNA extraction from each PAR.Relation between RNA absorption (260 nm) and protein absorption (280 nm) analyzed the integrity of samples. The ratio greater than 1.80 indicated the quality of the RNA obtained.

A sinalização da matriz extracelular (MEC) é essencial para a determinação do destino e comportamento de células epiteliais da glândula mamária. Entretanto, pouco é conhecido sobre os mecanismos moleculares envolvidos nesse processo. A via Hippo, uma cascata de sinalização que participa da regulação de diversos comportamentos celulares, incluindo o tamanho de órgãos, parece ser uma importante candidata a mediadora sinalização da MEC. Resultados preliminares do laboratório indicam que a arquitetura tecidual e a membrana basal, componente da MEC de epitélios e outros tecidos, influenciam a localização, concentração e atividade de YAP, uma proteína efetora da via Hippo, em células epiteliais mamárias. Neste contexto, o objetivo deste trabalho foi identificar as proteínas que interagem com Yap (ortólogo de YAP em camundongo) nas células epiteliais da glândula mamária em resposta à membrana basal. Foram utilizadas células EpH4, uma linhagem mamária não-tumoral murina, como modelo de diferenciação funcional e formação de ácinos em um ensaio de cultura tridimensional (3D). O tratamento de estruturas multicelulares 3D pré-formadas em placas nãoadesiva com uma matriz rica em laminina (lrECM) alterou a localização e o padrão subcelular de Yap, assim como a expressão gênica de membros da via Hippo e dos alvos de Yap, mas não alterou a expressão das proteínas da via em nível de proteína. O ensaio de co-imunoprecipitação (CoIP) seguida de análise por espectrometria de massas identificou um conjunto diferencial de proteínas que interagem com Yap na fração citoplasmática de células EpH4 cultivadas na ausência ou na presença de lrECM em um modelo de ECM-overlay. Uma análise realizada junto à database KEGG Pathways revelou que os possíveis interagentes Yap nas células cultivadas não-tratadas com lrECM participam de processos relacionados à proteólise mediada por ubiquitina, enquanto nas células expostas à lrECM os possíveis interagentes estão associados a processos metabólicos e são especialmente proteínas-chave do metabolismo de lipídios. A busca na plataforma de redes de interação STRING não identificou trabalhos que destaquem a interação de Yap com estas proteínas. A plataforma Vizit indica a participação de Yap em processos relacionados à síntese e atividade de lipídios e hormônios, o que reforça as evidências de que está pode ser uma nova função de Yap ainda não explorada em detalhes. A fim de se obter resultados complementares à CoIP, padronizamos o ensaio de identificação por biotinilação dependente de proximidade (BioID) em células embrionárias de rim humano da linhagem 293FT. As proteínas isoladas por pulldown foram identificadas por espectrometria de massas e uma análise junto à database Gene Ontology indicou que os possíveis interagentes de Yap nestas células são em sua maioria proteínas relacionadas à via Hippo, o que reforça a robustez do ensaio. Nós pretendemos transpor este sistema para as células EpH4. A expectativa é que, em conjunto, estes resultados nos orientem em projetos futuros para compreender os mecanismos de sinalização da MEC na morfogênese e diferenciação da glândula mamária. / Extracellular matrix (ECM)-signaling is crucial for determination of epithelial cell fate and behavior in the mammary gland. However, little is known about the molecular mechanisms involved in these processes. The Hippo pathway, a signaling cascade involved in the regulation of several cellular processes, including organ size, seems to be an important candidate as a mediator of this signaling. Our preliminary results indicate that the tissue architecture and the basement membrane, an ECM component of epithelia and other tissues, influence the location, level and activity of YAP, an effector of the Hippo pathway. In this context, the goal of this work was to identify the proteins that interact with Yap (ortholog of YAP in mouse) in mammary epithelial cells in response to the basement membrane. We used EpH4 cells, a nontumoral murine mammary cell, in a functional differentiation and acini-forming in tridimensional (3D) culture assay. Treatment of 3D multicellular structures pre-formed on nonadhesive plates with a laminin-rich extracellular matrix (lrECM) altered the subcellular localization and pattern of Yap, as well as gene expression of Hippo pathway proteins and Yap targets, but did not altered the expression of the pathway members at the protein level. Coimmunoprecipitation (CoIP) followed by mass spectrometry analysis identified a differential set of proteins interacting with Yap in cytoplasmic fractions of EpH4 cells in the absence or presence of lrECM in an ECM-overlay culture model. An analysis performed with the KEGG Pathways database revealed that putative Yap interactors in non-treated cells participate in processes related to ubiquitin-mediated proteolysis, whereas in cells exposed to lrECM Yap interactors are associated to metabolic processes and are mainly key-proteins of metabolism of lipids and carbohydrates. A search in interaction networks platform STRING did not identify previous works that showing the interaction of Yap with these proteins. Vizit platform indicated the participation of Yap in processes related to the synthesis and activity of lipids and hormones, which reinforces the evidences that Yap can play a novel poorly explored role. To obtain complementary results to CoIP, we devised the proximity-dependent biotinylation identification (BioID) assay on embryonic renal cells of 293FT cell line. Pulldown-isolated proteins were identified by mass spectrometry and an analysis performed with Gene Ontology database revealed that putative Yap interactors are Hippo pathway-related proteins, which reinforces the robustness of the assay. We intend to transpose this system to the EpH4 cells. We expect that, together, these results will guide us in future projects to understand the signaling mechanisms of ECM in mammary gland morphogenesis and differentiation.